水体中_三氮_测定

具操作简便、灵 敏等特点； 水中钙、镁和铁 等金属离子、硫 化物、醛和酮类、 颜色以及混浊等 均干扰测定，需 作相应的预处理。
具灵敏、稳定等优点

干扰情况和消除方法同纳氏试剂 比色法。
水样采集在聚乙烯瓶内，并应尽 快分析，必要时可加硫酸将水样 酸化至PH<2于2~5℃下存放。 酸化样品应注意防止吸收空气中 的氨而遭致污染。
2．按水样存储时间的要求，采样时要加入相应的保 存剂；
3．采样前，容器应先用混合均匀的水样洗涤2~3次， 然后正式取样； 4．在较浅的小河和靠近岸边的水样采集时，要注意 避免搅动沉积物而使水样受污染。此时采样应从睛 游向上游方向采样； 5．采集表层水样时，应注意不能混入漂浮于水面上 的物质。
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（五）水样的保存
在波长420nm处，用光程20mm比色皿，以水为参比，测
量吸光度。 由测得的吸光度，减去零浓度空白管的吸光度后，得到校 正吸光度，绘制氨氮含量(mg)对校正吸光度的校准曲线。
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2．水样的测定 (1)分取适量经絮凝沉淀预处理后的水样(使氨氮含量不超过 0.1mg)，加入50ml比色管中，稀释至标线，加1.0ml酒石 酸钾钠溶液。
在2h以内，于波长540nm处，用光程长10mm的比色皿，以
水为参比，测量吸光度。从测得的吸光度，减去零浓度空白 管的吸光度后，获得校正吸光度，绘制以氮含量(μg)对校正 吸光度的校准曲线。
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2．水样的测定 当水样pH≥11时，可加入1滴酚酞指示液， 边搅拌边逐滴加入(1+9)磷酸溶液，至红色刚消失。 水样如有颜色和悬浮物，可向每100ml水中加入2ml氢氧化铝 悬浮液，搅拌，静置，过滤，弃去25ml初滤液。
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（一）原理 碘化汞和碘化钾的碱性溶液与氨反应生成 淡红棕色胶态化合物，此颜色在较宽的波长范 围内具有强烈吸收。通常测量用波长在 410~425nm范围。 （二）仪器 1．分光光度计 2．PH计
（三）试剂：配制试剂用水均应为无氨水。
（四）步骤
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1．校准曲线的绘制 吸取0、0.50、1.00、3.00、5.00、7.00和10.0ml铵标 准使用液于50ml比色管中，加水至标线，加1.0ml酒石酸钾 钠溶液，混匀。加1.5ml纳氏试剂，混匀。放置10min后，
(三)试剂
实验用水应为无硝酸盐水。
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(四)步骤
1．校准曲线的绘制 于一组50ml比色管中，用分度吸管加入硝酸盐氮标准使 用液，加水至约40ml，加3ml氨水使呈碱性，稀释至标线， 混匀。在波长410nm处，按下表选比色皿，以水为参比， 测量吸光度。由测得的吸光度值减去零管的吸光度值，分 别绘制不同比色皿光程长的吸光度对硝酸盐氮含量(mg)的
分取经预处理的水样于50ml比色管中(如含量较高，则分取
适量，用水稀释至标线)，加1.0ml显色剂，然后按校准曲线 绘制的相同步骤操作，测量吸光度。经空白校正后，从校准 曲线上查得亚硝酸盐氮量。 3．空白试验 用实验用水代替水样，按相同步骤进行全程测
定。
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(七) 计算 C=M/V 式中：M-由水样测得的校正吸光度，从校准曲线查得亚 硝酸盐氮的 含量(μg)； V--水样的体积(ml)。
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(三)适用范围
本法适用于饮用水、地面水、地下水、生活污水和工
业废水中亚硝酸盐的测定。最低检出浓度为0.003mg/L； 测定上限为0.20mg/L亚硝酸盐氮。 (四)仪器 分光光度计 (五)试剂 实验用水均为不含亚硝酸盐的水。
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(六) 步骤 1．校准曲线的绘制 在一组6支50ml比色管中，分别加入0、 1.00、3.00、5.00、7.00和10.00亚硝酸盐标准使用液，用水 稀释至标线。加入1.0ml显色剂，密塞，混匀。静置20min后，
源自文库
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(九) 注意事项 1．如水样经预处理后，还有颜色时，则分取两份体积相同 的经预处理的水样，一份加1.0ml显色剂，另一份改加 1ml(1+9)磷酸溶液。由加显色剂的水样测得的吸光度，减 去空白试验测得的吸光度，再减去改加磷酸溶液的水样所
测得的吸光度后，获得校正吸光度，以进行色度校正。
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2．显色试剂除以混合液加入外，亦可分别配制和依次加 入，具体方法如下： 对氨基苯磺酰胺溶液：称取5g对氨基苯磺酰胺，溶于50ml 浓盐酸和约350ml水的混合液中，稀释至500ml。此溶液 稳定。N-(1-萘基)-乙二胺二盐酸盐溶液：称取500mg N(1-萘基)-乙二胺二盐酸盐溶于500ml水中，贮于棕色瓶中， 置冰箱中保存。当色泽明显加深时，应重新配制，如有沉 淀，则过滤。于50ml水样(或标准管)中，加入1.0ml对氨基 苯磺酰胺溶液，混匀。放置2~8min，加1.0mlN-(1-萘基)乙二胺二盐酸盐溶液，混匀。放置10min后，在543nm波 长，测量吸光度。

当PH值偏高时，游离氨的比例较高。反之，则铵 盐的比例为高；


检测水中氨氮方法通常有：
纳氏试剂比色法 气相分子吸收法 苯酚-次氯酸盐(水杨酸-次氯酸盐)比色法 电极法 其中为国家或行业标准方法（或与标准方法等效） 的有纳氏试剂比色法和苯酚-次氯酸盐比色法

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纳氏试剂比色法

苯酚-次氯酸盐比色法
紫外法和电极法常作为筛选法。水样采集后应及时进行测
定。必要时，应加硫酸使pH <2，保存在4℃以下，在24h 内进行测定。
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(一) 原理
硝酸盐在无水情况下与酚二磺酸反应，生成硝基二
磺酸酚，在碱性溶液中生成黄色化合物，进行定量测定。
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(二)仪器 1．分光光度计； 2．瓷蒸发皿 75～100ml。
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(一)原理 在磷酸介质中，pH值为1.8±0.3时，亚硝酸盐与对氨基苯
磺酰胺反应，生成重氮盐，再与N-(1-萘基)-乙二胺偶联生
成红色染料。在540nm波长处有最大吸收。
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(二)干扰及消除 氯胺、氯、硫代硫酸盐、聚磷酸钠和高铁离子有明显干扰。 水样呈碱性(pH≥11)时，可加酚酞溶液为指示剂，滴加磷酸溶 液至红色消失。水样有颜色或悬浮物，可加氢氧化铝悬浮液 并过滤。
3．综合样品
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二、水样采集
(二)水样的采集量 测定项目不同对水样量有不同的要求。应该 适当增加20%~30%的过量，作为实际采样量。
测定氨氮的水样用量为400ml； 亚硝酸盐为50ml； 硝酸盐为100ml。

(三) 采集水样时现场测定项目及水文参数的测量
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（四）采样水样的注意事项
1．做好采集记录；
其中为国家或行业标准方法（或与标准方法等效）的是采用
重氮-偶联反应，使生成红紫色染料。
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该方法灵敏、选择性强。所用重氮和偶联试剂种类 较多，最常用的，前者为对氨基苯磺酰胺和对氨基苯 磺酸，后者为N-(1萘基)-乙二胺和α-萘胺。亚硝酸盐在 水中可受微生物等作用而很不稳定，在采集后应尽快 进行分析，必要时以冷藏抑制微生物的影响。
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水中硝酸盐氮的测定（酚二磺酸光度法）
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水中硝酸盐是在有氧环境下，各种形态的含氮化合物中 最稳定的氮化合物，亦是含氮有机物经无机作用最终阶段的
分解产物。亚硝酸盐可经氧化而生成硝酸盐，硝酸盐在无氧
环境中，亦可受微生物的作用而还原为亚硝酸盐。
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水中硝酸盐的测定方法颇多，常用的有酚二磺酸光度
法、镉柱还原法、戴氏合金还原法，离子色谱法、紫外法 和电极法等。其中为国家或行业标准方法（或与标准方法 等效）的是酚二磺酸光度法。酚二磺酸法测量范围较宽， 显色稳定。镉柱还原法适用于测定水中低含量的硝酸盐。 戴氏合金还原法对严重污染并带深色的水样最为适用。离 子色谱法需有专用仪器，但可同时和其他阴离子联合测定。
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（六 ）注意事项 1．纳氏试剂中碘化汞与碘化钾的比例，对显色反应的灵 敏度有较大影响。静置后生成的沉淀应除去。
2．滤纸中常含痕量铵盐，使用时注意用无氨水洗涤，所
用玻璃器皿应避免实验室空气中氨的沾污。
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水中亚硝酸盐氮的测定(N-(1-萘基)-乙二胺光度法)
亚硝酸盐氮(NO2--N)是氮循环的中间产物，不稳定。根据 水环境条件，可被氧化硝酸盐，也可被还原成氨；在pH值较 低的酸性条件下，有利于亚硝胺类的形成。水中亚硝酸盐测 定方法通常有离子色谱法、气相分子吸收法和重氮-偶联反应，
水体中“三氮”测定
南华大学公共卫生学院
水样采集的目的和意义
目的：

为了分析水样的物理和化学组成的浓度水平， 以显示水体的质量，从而确定其对某种用途的 适宜性；
同时：便于有关部门对水质进行评价、控制、 以及对污染源进行鉴别、管理及采取有效处理 措施。 因此，水样采集是水质分析工作的第一步骤。
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"三氮"
测定“三氮”水样的冷藏保存方法：

水样在4℃左右保存，最好放在暗处或冰
箱中，抑制微生物的活动，减缓物理作用
和化学作用的速度。

这种保存方法对以后的分析测定没有影响
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（六）水样的管理和运送
为了使水样不受污染、损坏和丢失，必须
在采样后做好管理和运送工作。
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水中氨氮的测定（纳氏试剂光度法）
氨氮(NH3-N)以游离氨（NH３）或铵盐(NH４+)形式 存在于水中，两者的组成比取决于水的PH值；
校准曲线。校准系列中所用标准使用液体积
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标准溶液体积（ml） 硝酸盐氮含量（mg） 比色皿光程长 （mm） 0 0 10或30 0.10 0.001 30 0.30 0.003 30 0.50 0.005 30 0.70 0.007 30 1.00 0.010 10或30 3.00 0.030 10 5.00 0.050 10 7.00 0.070 10 10.0 0.10 10
盐氮量。
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测定：
取50.0ml经预处理的水样于蒸发皿中，用PH试纸检查，必要时用 0.5mol/L硫酸或0.1mol/L氢氧化钠溶液调节至微碱性(PH8)，置水浴上蒸发 至干，加1.0ml酚二磺酸，用玻璃棒研磨，使试剂与蒸发皿内残渣充分接触， 放置片刻，再研磨一次，放置10min，加水约10ml.
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2．水样的测定 水样浑浊带色时，可取100ml水样于具塞
量筒中，加入2ml氢氧化铝悬浮液，密闭震摇，静置数分钟
后，过滤，弃去20ml初滤液。氯离子的去除：取100ml水 样移入具塞量筒中，根据已测定的氯离子含量，加入相当 量的硫酸银溶液，充分混合。在暗处放置0.5h，使氯化银 沉淀凝聚，然后用慢速滤纸过滤，弃去20ml初滤液。
(2)分取适量经蒸馏预处理后的馏出液，加入50ml比色管中，
加一定量1mol/L氢氧化钠溶液以中和硼酸，稀释至标线。 加1.5ml纳氏试剂，混匀。放置10min后，同校准曲线步骤 测量吸光度。 3．空白试验 以无氨水代替水样，作全程序空白测定。
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（五）计算 C=M/ V 由水样测得的吸光度减去空白试验的吸光度， 从校准曲线上查得氨氮含量(mg)。 式中：m-由校准曲线查得的氨氮含量(mg) V-水样体积(ml)。

是指水中的氨氮、亚硝酸盐氮、硝酸盐氮。
当天然水被人畜粪便污染后：


在水体微生物的作用下，逐渐生成氮
在有氧的条件下，水体的氨类在微生物作 用下，形成亚硝酸盐

而硝酸盐氮是含氮有机物氧化分解的最终 产物
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"三氮"

当水中氨氮含量增高时，提示可能存在人畜 粪便的污染，且污染时间不长。
如亚硝酸盐含量高时，说明水中的有机物无 机化尚未完成，污染危害仍然存在。 如硝酸盐检出高，而氨氮，亚硝酸盐氮的浓 度不高时，表明生活性污染已久，自净过程 已完成，卫生学危害较小。


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"三氮"
因此，根据水体中氨氮、亚硝酸盐氮、
硝酸盐氮含量的变化规律进行综合分析，可 掌握有机污染的自净过程，判断水质的安全 程度。
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一、采样准备工作
(一) (二) 采样容器的准备 采样容器的洗涤
(三)
(四)
采样工作的准备
水上交通工具的准备
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二、水样采集
(一) 样品的类型： 1．瞬时样品 2．混合样品
注：(1) 如不能获得澄清滤液，可将已加硫酸银溶液的试样，
在近80摄氏度的水浴中加热，并用力振摇，使沉淀充分凝 聚，冷却后再进行过滤。
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(2) 如同时需去除带色物质，则可再加入硫酸银溶液并混匀
后，再加入2ml氢氧化铝悬浮液，充分震摇，放置片刻待沉
淀后，过滤。亚硝酸盐的干扰：当亚硝酸盐氮的含量超过 0.2mg/L时，可取100ml水样，加1ml0.5mol/L硫酸，混匀后， 滴加高锰酸钾溶液至淡红色保持15min不褪为止，使亚硝酸 盐氧化为硝酸盐，最后从硝酸盐氮测定结果中减去亚硝酸