组织培养期末复习题

复习题

一、名词解释：

1、植物组织培养：在无菌条件下利用人工培养基对植物的组织、器官、细胞以及原生质体进行培养，使之产生再生的完整植株或其它具有经济价值的生物制品的技术。

2、外植体：由活植物体上切取下来用以培养的那部分组织、器官等。

3形态建成：外植体在适宜的培养条件下经脱分化、再分化或直接发育成各种形态完整的植物体的过程。

4、器官发生：离体培养的组织、细胞在诱导条件下经分裂和增殖再分化形成根和芽等器官的过程。

5、体细胞胚胎发生：指由培养细胞诱导分化出的胚芽、胚根、胚轴的胚状结构，进而长成完整植株。

6、人工种子：指通过植物组织培养的方法获得的具有正常发育能力的材料，外面还被有特定物质，在适宜条件下可以发芽成苗的植物幼体。

7、植物细胞培养：是指在离体条件下对植物单个细胞或小的细胞团进行培养使其增殖的技术。

8、最低有效密度：在悬浮细胞培养中，使悬浮培养细胞能够增殖的最少接种量称为最低有效密度或者临界的起始密度。

9、有丝分裂指数：在一个细胞群体中，处于有丝分裂的细胞占总细胞的百分数称为有丝分裂指数，指数越高，分裂进行的速度越快。

10、细胞同步化：是指同一悬浮培养体系的所有细胞都同时通过细胞周期的某一特定时期。

11、细胞看护培养：用一块愈伤组织或植物离体组织看护单细胞使其生长增殖的一种单细胞培养方法。

12、微室培养：人工制造一个小室，将单细胞培养在小室中的少量培养基上，使其分裂增殖形成细胞团的方法，称微室培养。

13、花药培养：把发育到一定阶段的花药接种在人工培养基上,使其发育和分化成为植株的过程。

14、花粉培养：是从花药中分离出花粉粒,使之成为分散的或游离的状态,通过培

养使花粉粒脱分化,进而发育成完整植株的过程.

15、胚胎培养：是指使胚或具胚器官在离体无菌条件下发育成幼苗的技术。

16、胚培养：在无菌条件下将胚从胚珠或种子中分离出来，置于培养基上进行离体培养的方法。

17、体细胞杂交：是指两个离体细胞通过一定诱导技术使质膜接触而融合在一起随后导致两个细胞核物质融合的技术

二、填空题、选择题

1、根据外植体种类的不同可将植物组织培养分为器官培养、组织培养、细胞培养、原生质体培养等。

2、被誉为植物组织培养的奠基人是：Gautheret，White，Nobecourt

3、根据对培养基组成物质的化学成分是否完全了解来区分，可以将培养基分为天然培养基、合成培养基和半合成培养基。根据培养基的物理状态来区分，可以将培养基分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基。

4、大量元素有氮、磷、钾、钙、镁、硫等6种。微量元素有：铁、锰、锌、硼、铜、钼等6种。大量元素和微量元素的分类是依据植物对元素需求浓度来划分的，需求浓度大于0.5mmol/L的称为大量元素，小于0.5mmol/L的则为微量元素。

5、在植物组织培养中常用的生长素有：IAA（吲哚乙酸）、NAA（萘乙酸）、2，4-D （二氯苯氧乙酸）、2，4，5-T（二氯苯氧乙酸）和IBA（吲哚丁酸）。其中只有IAA是天然植物激素，其他几种都是人工合成的生长调节物质。

6、细胞分裂素均为腺嘌呤的衍生物，在组织培养中常用的细胞分裂素有KT（激动素）、6-BA（6-苄基嘌呤）、ZT（玉米素）和2iP（异戊烯腺嘌呤）。其中ZT和2iP为天然的植物激素。

7、培养基的名称，多数以发明人的名字来命名。

8、植物的再分化有器官发生和胚胎发生两种类型。

9、愈伤组织形成过程可划分为诱导期、分裂期、形成期三个时期

10、器官发生有直接发生和间接发生两种发生方式。

11、根据在培养中所取的外植体的部位不同，植物胚胎培养包括胚培养、胚乳培养、胚珠培养、子房培养。

12、根据融合时细胞的完整程度，原生质体融合可分为两大类：对称融合和非对

称融合。

三、简答题1、简述植物组织培养的整个过程。

（1）完整植株→（2）器官消毒→（3）外植体→（4）诱导愈伤组织或直接分不定芽→（5）继代增殖→（6）生根成苗→（7）练苗→（8）移栽

2、母液的配制应注意哪些事项？

①药品称量应准确，尤其微量元素化合物应精确到0.0001克，大量元素可精确到0.01克。

②配制母液的浓度适当，一是浓度大长时间保存后易沉淀，二是浓度小，用量少，在配制培养基时易影响精确度。

③母液贮藏不宜过长，一般几个月左右，要定期检查，如出现浑浊、沉淀及霉菌等现象，就不能使用。

④母液应放在2－4℃的冰箱中保存。

3、量取母液时应注意哪些问题？

①在使用提前配制的母液时，应在量取各种母液之前，轻轻摇动盛放母液的瓶子，如果发现瓶中有沉淀、悬浮物或被微生物污染，应立即淘汰这种母液，重新进行配制；

②用量筒或移液管量取培养基母液之前，必须用所量取的母液将量筒或移液管润洗2次；

③量取母液时，最好将各种母液按将要量取的顺序写在纸上，量取1种，划掉1种，以免出错。

4、简述愈伤组织形成的条件

①外植体需脱离母本；②合适的培养条件；③外植体的类型；④外植体内源激素水平

5、优良的愈伤组织应具备哪些特性？

①旺盛的自我增殖能力，以便用这些愈伤组织建立大规模的愈伤组织无性系。

②高度的胚性或再分化能力，以便从这些愈伤组织得到再生植物。

③容易散碎，以便用这些愈伤组织建立优良的悬浮系，并且在需要时能从中分离出全能性的原生质体。

④经过长期继代保存而不丧失胚性，方便对它们进行各种遗传操作。

6、简述器官发生途径产生再生植株的三种基本方式。

（1）先形成芽，再在芽伸长后，在其茎的基部长出根而形成小植株，多数植物属这种情况；

（2）先产生根，再从根的基部分化出芽而形成小植株。这种情况较难诱导芽的形成，尤其对于单子叶植物；

（3）先在愈伤组织的邻近不同部位分别形成芽和根，然后两者结合起来形成一株小植株。

7、简述人工种子制作程序

①高质量体细胞胚胎发生系统的建立

②体细胞胚胎发生的同步化控制

③人造种皮及人造胚乳研制与包埋

④人工种子的转换

8、简述醋酸酯荧光素（FDA）染色法测定活细胞的原理

FDA本身无荧光，无极性，可自由通过原生质体膜进入细胞内部，进入后由于受到活细胞内脂酶分解，而产生有荧光的极性物质荧光素，不能自由出入原生质体膜，在荧光显微镜下观察到的荧光是有活力的，反之无活力。

9、简述悬浮培养细胞悬浮培养细胞

①滞后期（延迟期）：细胞很少分裂，其长短与接种量小和继代时原种细胞所处的生长期有关；

②对数生长期：细胞分裂活跃，细胞数目增加，增长速率保持不变；

③直线生长期：细胞生长和发育最明显的时期；

④缓慢期：生长逐渐缓慢,培养液消耗将尽，有毒代谢物质增多，氧气减少

⑤静止期：生长几乎处于停止状态，细胞数目增加极少，甚至开始死亡。

9、简述影响花药培养的因素

①基因型

②发育时期

③植株的生理状态

④预处理

⑤培养基和培养条件