理化因素对微生物的影响ppt课件
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对微生物的影响因素ppt课件
高 压 蒸 气 灭 菌 锅
•注意事项： •排净冷空气； •灭菌终了，缓慢降压； •灭菌结束，趁热取出物品。
高温对培养基的影响及其防止措施
高温对培养基的不利影响：
▲会产生混浊或形成不溶性沉淀
▲营养成分被破坏（ PO4-3存在，葡萄糖生成酮糖， 菌不利用）； ▲褐变—梅拉特反应（在一定的温度下，氨基化合物 与糖类发生了反应）；
专性好氧菌—绝大多数真菌及多数细菌
必须在有分子氧的条件下才能生长，有完整的呼吸 链，以分子氧作为最终氢受体，细胞含有超氧化物歧化 酶(superoxide dismultase, SOD)和过氧化氢酶。绿脓杆 菌、白喉棒杆菌等。
微好氧菌
只能较低的氧分压下才能正常生长，通过呼吸 链并以氧为最终氢受体而产能。霍乱弧菌等。
各种抗微生物化学制剂杀菌能力的比较标准：
在临床上最早使用的消毒剂----石炭酸
石炭酸系数 在一定时间内，被试药剂能杀死全部供试 菌的最高稀释度与达到同效的石炭酸的最 高稀释度之比。一般规定处理时间为 10分钟，而供试菌定为Salmonella typhi （伤寒沙门氏菌）。
（二）、化学治疗剂
1、抗代谢类药物（生长因子类似物）:
3 过滤除菌法 采用滤孔比细菌还小的筛子或滤膜 作成各种过滤器，当空气或液体流 经筛子或滤膜时，微生物不能通过 滤孔而被阻留在一侧，从而达到灭 菌的目的。
（二）辐射
紫外线灭菌
使用紫外灯照射，若以面积计算，一般30 W的紫外
灯可用于15 平方米的房间消毒，照射时间为20—
30分钟，有效照射距离为1米左右。
•超过最低生长温度时，微生物不 生长，温度过低，甚至会死亡。
•超过最高生长温度时，微生物不 生长，温度过高，甚至会死亡。
实验十四物理和化学因素对微生物的影响PPT课件
1好氧菌；2 厌氧菌；3 兼性厌氧/耐氧菌；4 微好氧菌 4
2、紫外线对微生物的影响
5
基本原理
❖ 常用化学消毒剂主要有重金属及其盐类、酚、 醇、醛等有机化合物以及碘、表面活性剂、有 机染料等。它们的杀菌或抑菌机制主要是使菌 体蛋白质变性，或者与酶的-SH结合而使酶失 去活性。
本实验是观察常用的化学消毒剂在一定浓 度下对微生物的抑菌或杀菌作用，从而了解它 们的抑菌或杀菌性能。
6、观察
记录微生物生长情况并取出测定抑菌圈
观察并记录培养基平板上的四连
大小，比较几种化学药剂的杀菌力强弱。
球菌生长情况。
13
5、培养 置37℃温箱中培养24小时。
6、观察 观察并记录培养基平板上的表皮葡萄球菌生长情况。
9
每毫升菌 同 液一 中稀 3 次 总释 重 活浓 复 菌度 的 数 稀 菌 释 5 落 倍 平 数 均数
实验步骤
1、倒平板 将牛肉膏蛋白胨培养基制成平板。
2、接种 用无菌移液管取0.2ml表皮葡萄球菌菌液于平板上，并用涂布 棒涂布均匀。
10
11
实验报告
请比较不同化学药剂对表皮葡萄球菌的致死能力，并 将结果填入下表。
表1 不同化学药物对表皮葡萄球菌的致死能力
药剂
抑菌圈直径(mm)
2.5%碘酒
0.05%龙胆紫
0.5% 84消毒液
0.25%新洁尔灭
12
1、倒平板
1、倒平板
将牛肉膏蛋白胨培养基制成平板。 将牛肉膏蛋白胨培养基制成平板。
6
化学药剂对微生物的影响
7
实验器材
❖ 活材料：表皮葡萄球菌悬液； ❖ 化学药剂：①2.5Байду номын сангаас碘酒， ②0.05%龙胆紫，
2、紫外线对微生物的影响
5
基本原理
❖ 常用化学消毒剂主要有重金属及其盐类、酚、 醇、醛等有机化合物以及碘、表面活性剂、有 机染料等。它们的杀菌或抑菌机制主要是使菌 体蛋白质变性，或者与酶的-SH结合而使酶失 去活性。
本实验是观察常用的化学消毒剂在一定浓 度下对微生物的抑菌或杀菌作用，从而了解它 们的抑菌或杀菌性能。
6、观察
记录微生物生长情况并取出测定抑菌圈
观察并记录培养基平板上的四连
大小，比较几种化学药剂的杀菌力强弱。
球菌生长情况。
13
5、培养 置37℃温箱中培养24小时。
6、观察 观察并记录培养基平板上的表皮葡萄球菌生长情况。
9
每毫升菌 同 液一 中稀 3 次 总释 重 活浓 复 菌度 的 数 稀 菌 释 5 落 倍 平 数 均数
实验步骤
1、倒平板 将牛肉膏蛋白胨培养基制成平板。
2、接种 用无菌移液管取0.2ml表皮葡萄球菌菌液于平板上，并用涂布 棒涂布均匀。
10
11
实验报告
请比较不同化学药剂对表皮葡萄球菌的致死能力，并 将结果填入下表。
表1 不同化学药物对表皮葡萄球菌的致死能力
药剂
抑菌圈直径(mm)
2.5%碘酒
0.05%龙胆紫
0.5% 84消毒液
0.25%新洁尔灭
12
1、倒平板
1、倒平板
将牛肉膏蛋白胨培养基制成平板。 将牛肉膏蛋白胨培养基制成平板。
6
化学药剂对微生物的影响
7
实验器材
❖ 活材料：表皮葡萄球菌悬液； ❖ 化学药剂：①2.5Байду номын сангаас碘酒， ②0.05%龙胆紫，
第四节 理化因素对细菌的影响 动物微生物及免疫技术课件
这种方法常用于体积较小而且耐煮的 物品如衣物，金属、玻璃等器具的消毒。
高压蒸汽灭菌
是一种最有效的灭菌方法。在103.4kPa （1.05kg/cm２）蒸汽压下，温度达到121.3℃, 维持１５～２０min，可杀死包括芽孢在内的所 有微生物。高压蒸汽灭菌器就是根据这一原理 制成，常用语一般培训基、生理盐水、手术敷 料等耐高温，耐湿物品的灭菌。
在20000～200000Hz的声波，对细胞有破坏作用， 能使大多数细胞裂解死亡。目前主要用于裂解细胞， 提取细胞组分，研究其抗原、酶类、细胞壁的化学 性质以及从组织内提取病毒等。
2、微 波：微波是一种波长短而频率较高的电
磁波。微波对微生物的杀菌作用，主要是由于微 生物在微波电磁场作用下，吸收微波的能量而产 生热效应所致。这种灭菌法，所需时间短、加热 均匀是其显著的优点。
第二节 化学因素对微生物的影响
一、 化学消毒剂
用于杀灭或清除外环境中病原 微生物或其他有害微生物的化学药 物，称为化学消毒剂。
二、化学消毒剂的作用机理
（一）使病原体蛋白变性、发生沉淀
大部分消毒防腐药都是通过这个原理而起作用，其作用特点 是无选择性，属于原浆毒，可杀菌又可破坏宿主组织，如酚类、 醇类、醛类 等，此类药仅适用于环境消毒。
四、辐射
1、电离辐射
包括高速电子、X射线和 γ 射线
杀菌机理：产生游离基，破坏DNA。
应用范围：一次性医用塑料制品的消毒、食品的
消毒不破坏其营养成分
2、非电离辐射
（1）可见光线 长时间作用也能妨碍微生物的新陈代 谢与繁殖，
（2）阳光 直射日光有强烈的杀菌作用，是天然的杀 菌因素。
（3）紫外线 干扰DNA的复制与转录
干热灭菌
高温灭菌
高压蒸汽灭菌
是一种最有效的灭菌方法。在103.4kPa （1.05kg/cm２）蒸汽压下，温度达到121.3℃, 维持１５～２０min，可杀死包括芽孢在内的所 有微生物。高压蒸汽灭菌器就是根据这一原理 制成，常用语一般培训基、生理盐水、手术敷 料等耐高温，耐湿物品的灭菌。
在20000～200000Hz的声波，对细胞有破坏作用， 能使大多数细胞裂解死亡。目前主要用于裂解细胞， 提取细胞组分，研究其抗原、酶类、细胞壁的化学 性质以及从组织内提取病毒等。
2、微 波：微波是一种波长短而频率较高的电
磁波。微波对微生物的杀菌作用，主要是由于微 生物在微波电磁场作用下，吸收微波的能量而产 生热效应所致。这种灭菌法，所需时间短、加热 均匀是其显著的优点。
第二节 化学因素对微生物的影响
一、 化学消毒剂
用于杀灭或清除外环境中病原 微生物或其他有害微生物的化学药 物，称为化学消毒剂。
二、化学消毒剂的作用机理
（一）使病原体蛋白变性、发生沉淀
大部分消毒防腐药都是通过这个原理而起作用，其作用特点 是无选择性，属于原浆毒，可杀菌又可破坏宿主组织，如酚类、 醇类、醛类 等，此类药仅适用于环境消毒。
四、辐射
1、电离辐射
包括高速电子、X射线和 γ 射线
杀菌机理：产生游离基，破坏DNA。
应用范围：一次性医用塑料制品的消毒、食品的
消毒不破坏其营养成分
2、非电离辐射
（1）可见光线 长时间作用也能妨碍微生物的新陈代 谢与繁殖，
（2）阳光 直射日光有强烈的杀菌作用，是天然的杀 菌因素。
（3）紫外线 干扰DNA的复制与转录
干热灭菌
高温灭菌
实验理化因素对细菌影响50页PPT
实验理化因素对细菌பைடு நூலகம் 响
6、纪律是自由的第一条件。——黑格 尔 7、纪律是集体的面貌，集体的声音， 集体的 动作， 集体的 表情， 集体的 信念。 ——马 卡连柯
8、我们现在必须完全保持党的纪律， 否则一 切都会 陷入污 泥中。 ——马 克思 9、学校没有纪律便如磨坊没有水。— —夸美 纽斯
10、一个人应该：活泼而守纪律，天 真而不 幼稚， 勇敢而 鲁莽， 倔强而 有原则 ，热情 而不冲 动，乐 观而不 盲目。 ——马 克思
谢谢！
61、奢侈是舒适的，否则就不是奢侈 。——CocoCha nel 62、少而好学，如日出之阳；壮而好学 ，如日 中之光 ；志而 好学， 如炳烛 之光。 ——刘 向 63、三军可夺帅也，匹夫不可夺志也。 ——孔 丘 64、人生就是学校。在那里，与其说好 的教师 是幸福 ，不如 说好的 教师是 不幸。 ——海 贝尔 65、接受挑战，就可以享受胜利的喜悦 。——杰纳勒 尔·乔治·S·巴顿
6、纪律是自由的第一条件。——黑格 尔 7、纪律是集体的面貌，集体的声音， 集体的 动作， 集体的 表情， 集体的 信念。 ——马 卡连柯
8、我们现在必须完全保持党的纪律， 否则一 切都会 陷入污 泥中。 ——马 克思 9、学校没有纪律便如磨坊没有水。— —夸美 纽斯
10、一个人应该：活泼而守纪律，天 真而不 幼稚， 勇敢而 鲁莽， 倔强而 有原则 ，热情 而不冲 动，乐 观而不 盲目。 ——马 克思
谢谢！
61、奢侈是舒适的，否则就不是奢侈 。——CocoCha nel 62、少而好学，如日出之阳；壮而好学 ，如日 中之光 ；志而 好学， 如炳烛 之光。 ——刘 向 63、三军可夺帅也，匹夫不可夺志也。 ——孔 丘 64、人生就是学校。在那里，与其说好 的教师 是幸福 ，不如 说好的 教师是 不幸。 ——海 贝尔 65、接受挑战，就可以享受胜利的喜悦 。——杰纳勒 尔·乔治·S·巴顿
实验八化学因素对微生物的影响幻灯片
四、操作步骤
1．滤纸片法测定化学消毒剂的杀菌作用
(1)将已灭菌并冷却至50℃左右的牛肉 膏蛋白胨琼脂培养基倒入无菌平皿中，水 平放置待凝固。
(2)用无菌吸管吸取0.2ml培养18小时的 金黄色葡萄球菌菌液参加到上述平板中， 用无菌三角涂棒涂布均匀。
(3)将已涂布好的平板底皿划分成4～6 等份，每一等份内标明一种消毒剂的名称 。
2．石炭酸系数的测定
〔1〕将5％〔1：20〕的石炭酸液按表 Ⅸ-1配成不同浓度，每管5ml。
〔2〕将待测药物〔来苏尔〕先配成1： 20的原液，再按表Ⅸ-2配成不同浓度，每 管 5ml。
〔3〕取肉膏蛋白胨液体培养基30管，1～15管标明 石炭酸的5种浓度，每种浓度3管，每3管分5、 10、15分钟处理，16～理。
〔4〕在上述不同浓度的石炭酸和来苏尔溶液中，各 接入0．5ml大肠杆菌液，摇匀。注意每管自接种 时起在5、10、15分钟，用同一接种环从各管内 取一环接入上述已标记的液体培养基试管中。
〔5〕置37℃温室中培养 48小时，观察并 记录生长情况。生长者溶液混浊，以“+ 〞表示；不生长者溶液澄清，以“-〞表 示。
(4)用无菌镊子将已灭菌的小圆形滤纸片〔 D5mm〕分别浸入装有各种消毒溶液的试管中 浸湿。注意取出滤纸片时保证过滤纸片所含消 毒剂溶液量根本一致，并在试管内壁沥去多余 药液。无菌操作将滤纸片贴在平板相应区域， 平板中间贴上浸有无菌生理盐水的滤纸片作为 对照。
(5)将上述贴好滤纸片的含菌平皿，倒置于37℃ 温室中培养24小时后，取出测定抑菌圈大小， 并说明其杀菌强弱。
(2)石炭酸系数 的测定和计 算
来苏尔对大 肠杆菌的石 炭酸系数是 多少？
六、思考题
化学药剂对微生物所形成的抑菌圈未长菌 局部是否说明微生物细胞已被杀死？
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四、操作步骤
（一）紫外线对微生物的影响
将牛肉膏蛋白胨琼脂培养基按无菌操作 制成平板，用无菌移液管吸取0.1 mL大肠菌 液涂布于平板上（用无菌三角玻棒）。
在无菌室中，将无菌圆形牛皮纸片放置 于平板，在距离紫外灯的30 cm处照射20 min， 去牛皮纸加皿盖（如图）。于37 ℃温
箱中倒置培养24 h后记录结果。
• 氧对微生物的影响
（二）思考题
1. 含化学消毒剂的滤纸片周围形成的抑 （杀）菌圈表明该区域培养基中的原有细 菌被杀死或被抑制而不能进行生长，你如 何用实验证明抑（杀）菌圈的形成是由于 化学消毒剂的抑菌作用还是杀菌作用？
2. 某公司推出一种新型饮料，被声称是 100%纯天然产品，不含防腐剂，利用你所 掌握的微生物学知识，试设计一个简单实 验来初步判断此饮料是否含防腐剂。
4. 加药剂：用无菌镊子将浸过药液滤 纸片分别平铺于含菌平板上，注意纸片放 好后不要移动，并在平皿背面做好标记。
5. 培养：将平皿置于37 ℃下培养24 h 观察结果。
化学药剂对微生物的影响试验示意图
五、实验报告
（一）实验结果 1. 将紫外线对微生物的影响试验结果绘 图表示。 2. 氧对微生物的影响的测定结果记录 于表中。 3. 比较化学药剂对微生物的影响试验 结果透明圈的大小。
六. 注意事项
1. 制备平板培养基厚度要均匀，指示 菌涂布要均匀，使细菌分散、均匀；
2. 纸片形状、大小要一致，不能在培 养基表面拖动；
3. 药剂标记要准确，避免混乱。
1. 制平板：取无菌平皿，将已 溶化并冷却至45℃左右的牛肉膏蛋白 胨琼脂培养基按无菌操作法倒入平皿 中， 使之冷凝成平板。
2. 制备菌悬液：取无菌水，用 接种环取菌种1～2环接入无菌水中，充 分摇的菌 悬液0.1 ml接种于平板上，用无菌玻璃刮铲 涂匀。
理化因素对微 生物的影响
一.实验目的
掌握物理、化学因素抑制或杀死微生 物的作用及其试验方法。
二、实验原理
采用强烈的理化因素使任何物体内外 所有的微生物永远丧失其生长繁殖能力的 措施称为灭菌。用较温和的物理或化学方 法杀死物体上绝大多数微生物的方法称为 消毒。
微生物广泛存在于周围环境中，消毒 灭菌主要是通过理化因素使微生物的主要 代谢发生障碍，或菌体蛋白质变性凝固， 或破坏其遗传物质，导致微生物死亡。
（二）氧对微生物的影响
1. 取4支牛肉膏蛋白胨培养基试管于水 浴中加热融化。
2. 待培养基冷至45℃左右，按无菌操作
分别接种大肠杆菌、枯草杆菌、丙酮丁醇 梭菌各一环，对照管不接种，搓动混匀。
3. 将试管直立于28℃培养， 48 h后开始
连续观察几天，直至结果清晰，记录结果。
（三）化学药剂对微生物的影响
三、主要器材
1. 活材料：培养24 h的大肠杆菌或葡萄球 菌、沙门氏菌及枯草杆菌、丙酮丁醇梭菌斜面菌 种。
2. 培养基和试剂：牛肉膏蛋白胨琼脂培养 基、无菌水、药敏片（1g/L HgCl2，0.2mg/L链 霉素， 0.2mg/L青霉素，50g/L石炭酸，或其它 种类消毒剂、抗生素）。
3. 器材：无菌培养皿、无菌三角玻棒、无 菌圆形黑纸片、无菌吸管、镊子、恒温培养箱、 玻璃刮铲、高压灭菌器。