第九章核酸类药物的分析

/掌握:核酸的结构和分类；D票畛类药物和嚅喘类药物鉴别.检查.含量测定的原理

/熟悉:核酸的理化性质；反义寡核苜酸药物鉴别.

检查.含量测定的原理

/结构和分类 /理化性质

什么是核酸?

> 1869年核酸最早分离自外科绷带脓细胞的细胞核,

当时发现这种物质含磷量之高超过当时发现的任何

一种有机物,并且含有很强的酸性,故得名核酸。

> 1909年其组成被研究清楚,1944年生物功能初步澄清,在X射线衍射技术支持下1953年结构澄清。

>核酸是脱氧核糖核酸（DNA）与核糖核酸（RNA ）

的通称。

一、结构和分类

O

□

水

解

代表戊糖，对DNA而言为脱氧核糖,

对RNA

代表碱基

代表磷酸基

核昔酸

'■Pento

se

核昔酸

N

H 0-

（对DNA为H）

OH 0H

51 HOCH2

0 /

HC4* HC- I OH

核糖(in RNA)

O

—

CH

-CH I OH

戊糖

5*

HOCH 2

2 '—脱氧核糖

HC4*

HC?

O

—

CH

「

C ；H I H

(in DNA)

核昔NIi z

HO OH

廉暉哙擅普曲昔）

NH2

0护、忡/

Of! H 脱辄核甘（脱氧胞

甘〕

DNA & RNA

Strand continues DNA

H

5

H

NH

CT

P»0|

continue ：

Strand con tinues.

Strand

continues

PS=O|

Strand .continues

\ Thymine Adenine

OH?

湖 Cytosine Guanine

、N

谢 Thymine Adenine

1 OK

"

厂

fk R.

Cytosine Guanine

3*

、

RNA

Uracil (U)

尿喘旋u N

—

o H

H

C

H

%

N

I

H N

H

嚓吟环

NH2

N3 4 5CH I

C^1 更H

I / 1

胞喘旋C

Cytosine (C) I

NH2I

a、” 弭CH |

F I

H腺嚓吟A Adenine (A)

/

NH

Thymine (T) 胸腺碇T

N 1 6 5C

C

d

H

N

/

H

鸟嚓吟G

腺嚓吟(A) 鸟嚓吟(G) 胞I 密唳(C) 胸腺嗜唳(T) 腺嚓吟(A) 鸟嚓吟(G) 胞喀唳(C) 尿嗜唳(U)

磷酸

类别 基本单位

DNA

RNA

核昔酸

脱氧核糖核昔酸 腺瞟吟脱氧核昔酸

鸟嚓吟脱氧核昔酸 胞喀睫脱氧核昔酸 胸腺嗪陀脱氧核昔酸

核糖核昔酸 腺瞟吟核昔酸 鸟嚓吟核昔酸

五碳糖

脱氧核糖

核糖

碱基

稀有碱基

•卩票吟——次黄卩票吟、1 ■甲基次黄卩票吟、

N\ N?-二甲基鸟瞟吟。

•卩密喘——5■甲基胞卩密喘、5■瓮甲基胞卩密喘、二氢尿卩密噪、4■铳尿卩密噪

•都是基本碱基的化学修饰型。

二、理化性质

>（一）两性性质:磷酸基；碱基（通常：酸性）pH影响碱基间氢键稳定:DNA pH4.0^11.0 ）水解性:微溶于水,不溶于_般的有机溶剂）UV :

Amax=260nm 蛋白质280nrri

A260/A280 ^fiDNA > 1.8

纯RNA应达到2.0

混有杂蛋白比值降低

腺嚓岭

消

光

系

数

220 240 260 280 300 320nm

波长

各种緘基在pH 7的紫外吸收光谱

/!■•变性：在某些理化因素影响下,DNA 双螺旋区 的氢键断裂和碱基堆积力破坏,有规律的双螺旋

结构变成单链无规律的"线团” ■但不发生共价 键的断裂,这过程称之。 /变性原因：高温（_般＞ 75°C）、强氧化剂、强 酸.碱.尿素等；

螺旋二级结构的破坏，生物活性的丧失） "特征性

Tm …DNA 的变性温度82~95°C

（四）变性和复性

/机理:双链间氢键断开,成为两条单链（DNA ：

0.70-

0.65-

0.60-

0.55-

0^0-

76 80 84 | 88 92 96

lOOP

Tm

图3-13 DNA解链曲线