生菜中色素提取分离和含量测定
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实验原理
绿叶中的叶绿体含有叶绿素,叶绿素 可以溶于有机溶剂乙醇,丙酮等,所以 可将色素提取出来,纸层析法是分离色 素最简单的方法,他的原理是利用混合 色素各个物理,化学性质的差别,以不 同的程度分布于固定相和流动相中。由 于他们的移动速度不同,从而达到移动 的目的。
实验步骤
1.称取2g的新鲜生菜绿叶,剪碎,放在研钵中,加5ml乙醇, 加入少许的石英砂一起研磨成浆,用尼龙布过滤后,该滤液即为 叶绿素提取液。 2.取一块预先干燥处理过的定性滤纸,将它剪成长约10cm,宽约1cm 的滤纸条。将滤纸条的一段剪去两角,在此端距顶端1cm处用铅笔 画一条 细线,线要直,要匀,要细。 3.画滤液细线 用毛细管取少量滤液,沿铅笔线均匀画细线。滤液干 后,重复划线一两次。 4.分离光和色素,向烧杯中倒入3ml层析液,将滤纸条尖端朝下,斜 靠内壁,插入层析液,盖上表面皿 5.仅过几分钟后,观察色素带的情况,最上层的是胡萝卜素,其次 是叶黄素,再次是叶绿素a,最后是叶绿素b
2.将冷却后的生菜叶放在研钵中捣碎,加入等体积的 95%的乙醇,搅拌浸取30min ,过滤,滤渣按照上法 再用95%的乙醇浸取3 次,合并4次的浸提液,加入 等体积 的石油醚,萃取10min,静置,充分分层,分出 醚相,下层醇相再用石油醚照上层萃取2次,合并3次 石油醚萃取液,依次用60%,70%,80%的乙醇醇各 洗涤一次最后用离子水洗涤三次。 3.水浴加热石油醚,使石油醚挥发,得到叶绿素固体 4.叶绿素质量=装有叶绿素固体的烧杯的质量-空烧杯 的质量
实验分析及结果
绿叶质量:5g 叶绿素干物质的质量:0.985g
叶绿素的得率:0.985/5=0.197=19.7% 同比其他方法,这种叶绿素含量测 定方ห้องสมุดไป่ตู้比较方便、准确、速度快、可以 用来成为食用色素
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2013年6月3日
注意事项
1.画铅笔线时,线要细 直 匀 2.分离光合色素时,滤液细线不要浸入液面以下, 接触到层析液,这是 因为色素极易溶解在层析液中,导致色带不清晰, 影响实验效果。 3.分离光合色素时,要加盖,减少有机溶剂的挥发。 4.丙酮有毒性,在使用时,要远离。
叶绿素含量的测定实验步骤 1.取5g干净的生菜叶,沸水2min,捞出来,冷却。
生菜中色素
的提取分离与含量测定
组 长: 李 强 组 员:党明亮 闫莉斐
目
录
实验目的 实验器材 实验原理 实验步骤 注意事项 实验分析及结果
实验目的
1.学会叶绿素的提取分离和含量的测定 2.了解叶绿素的性质
实验器材
实验材料及仪器药品 1.层析液配方:石油醚20ml +丙酮2ml +苯1ml 2.天平 研钵 烧杯 量筒 滤纸 表面皿 剪刀 95%乙醇 漏斗 滴管 尼龙布 毛细管