湿热灭菌原理和常用灭菌设备-
消毒与灭菌常用方法及设备
消毒与灭菌常用方法及设备（一）干热灭菌【原理】高温对细菌有明显的致死作用，主要机理是凝固菌体蛋白质，也可能与细菌DNA单螺旋断裂、细菌膜功能受损及菌体内电解质浓缩有关。
干烤箱为常用的干热灭菌器，其杀菌作用是通过脱水干燥和大分子变性完成的。
【构造】干烤箱是中间夹着石棉的双层金属制成的方形或长方形箱，箱底装有热源，箱内有数层金属架，并附有温度计和自动温度调节器等装置。
把待灭菌的物件均匀地放入恒温干燥箱，加热至160℃～170℃维持2小时即可达灭菌目的。
【使用方法及注意事项】1.将包扎好的待灭物品（培养皿、吸管器等）放于箱内，注意不要摆得太挤，以免妨碍气流流通。
2.关门，插上电源插头（常为220伏），拨动开关，旋动恒温调节器，至红灯亮。
3.待温度上升160℃～170℃时，借恒温调节器的自动控制，保持此温度2小时。
4.灭菌后停止加热，待温度下降至40℃以下方可开门取物，在这之前切勿自行打开箱门，否则其内物品(如玻璃器皿等)会因温度骤然下降而爆裂。
【应用】干热灭菌主要用于要求干燥的、耐高温的物品灭菌，如玻璃器材、瓷器、凡士林、液体石蜡、药粉等的灭菌。
一般不耐高温的、含有水份的物质，不能用这种方法灭菌。
（二）湿热灭菌【原理】高温对细菌有明显的致死作用，主要机理是凝固菌体蛋白质，也可能与细菌DNA单螺旋断裂、细菌膜功能受损及菌体内电解质浓缩有关。
湿热灭菌所需温度较低，时间较短(表3-2)。
特别是高压蒸气灭菌，因增加压力而提高温度，灭菌效果最佳。
其主要优点是：①温度较高，灭菌所需时间较短；②蒸气穿透力强；③蒸气冷凝时释放汽化热，能迅速提高物品的温度；④物品不过分潮湿。
表3-2 热力消毒灭菌法比较方法温度(℃) 时间(min)灭菌器适用物品焚烧＞500 瞬时废弃物品、动物尸体灭菌干烤160～170 120 干热灭菌器（干烤箱）玻璃器材、瓷器等灭菌巴氏消毒法61.1～62.871.73015-30s牛奶、酒类等消毒煮沸消毒法100 5 食具、刀剪、注射器等消毒流通蒸气消100 15～30 Arnold流通蒸气灭食具等消毒毒法菌器间歇灭菌法100 30 流通蒸气灭菌器(重复3次)不耐高温的含糖、牛奶等培养基高压蒸气灭菌法121 15～30高压蒸气灭菌器耐高温、高压及不怕潮湿的物品高压蒸气灭菌器是目前应用最广泛、灭菌效果最好的灭菌器具，其种类有手提式、直立式、横卧式等。
湿热灭菌验证与干热灭菌验证的比较
湿热灭菌验证与干热灭菌验证的对比1、概念：（1）湿热灭菌验证:主要是对产品、灭菌设备和装载方式的验证。
验证活动包括：对照灭菌设备设计的灭菌参数来校核灭菌器的性能、建立某产品灭菌程序及装载方式的有效性和重现性、估计灭菌过程中产品可能发生的变化。
（湿热灭菌（118-134℃）——蒸汽、过热水）（2）干热灭菌验证：主要用于内包装用的玻璃容器或金属制品的灭菌和去热源，所使用的灭菌程序应通过验证试验。
(干热灭菌（160-320 ℃）——热空气)2、验证目的：（1）湿热：通过一系列验证试验提供足够的数据和文件依据，从而找到最有效最合理的灭菌参数，并把已经验证过的饱和蒸汽灭菌设备和灭菌工艺参数应用到产品生产的除菌过程中去，以证明用于药品生产过程中的每一台饱和蒸汽灭菌设备过程和灭菌效果具有可靠性和重现性。
主要适用于能耐受高温、高压饱和蒸汽的产品。
（2）干热：间歇式或隧道式热空气灭菌常用来处理可耐受较高温度而不适宜用湿热灭菌法的物品，如玻璃瓶、粉末、油类、玻璃器皿、不锈钢设备等。
3、灭菌原理：（1）湿热灭菌—导致细胞内关键性蛋白质和酶发生热变性或凝固，湿度对该破坏性过程起促进作用。
（2）干热灭菌—使微生物氧化而不是蛋白质变性。
4、灭菌工艺：（1）湿热：采用附加排气系统的饱和蒸汽灭菌工艺、采用附加真空系统的饱和蒸汽灭菌工艺、采用附加空气加压系统的饱和蒸汽灭菌工艺。
（2）干热：1）残存几率法：该法以灭菌为目的。
通常适用于热不稳定性物质。
灭菌程序应保证在灭菌后物品的微生物残存几率为10-6，即在一百万个已灭菌单元中，染菌单元的数目不得超过 1 个。
2）过度杀灭法：该法也以灭菌为目的。
通常适用于耐热性能较好的物质。
灭菌程序应保证在灭菌后物品的微生物的残存几率小于10 -6， “ 过度杀灭 ” 的灭菌程序所获得干热灭菌值F H 可使耐干热灭菌生物指示剂的总量下降 12 个对数单位。
3）无菌无热原法：该法的目的是达到无菌和无热原。
湿热灭菌原理和常用灭菌设备-.
Boiling point Gauge pressure o Bar(g) C 17.5 24.1 29.0 32.9 99.6 102.3 104.8 107.1 109.3 111.4 113.3 115.2 116.9 118.6 120.2 121.8 123.3 124.7 1.4 1.5 1.6 1.7 1.8 1.9 2.0 2.1 2.2 2.3 2.4 2.5 2.6 2.7 2.8 2.9 3.0 3.2
– PDA_TR-1-Technical_Report_No.1.pdf
湿热灭菌基础
• 影响芽孢耐热性的因素
– 物理/化学条件 – 湿度 – 能量转移
»传导 »对流 »辐射
湿热灭菌基础
－微生物杀灭的数学模式
• 实验表明，在恒定的灭菌条件下，微生物（只 指芽孢）的死亡遵循一级动力学规则。 • 芽孢的杀灭率（体现为残存曲线）是耐热性的 函数，与芽孢的数量无关。 • 采用内生芽孢（生物指示剂BI）的悬浮液或放 在载体形式的芽孢进行灭菌试验的结果表明， 在湿热灭菌中，半对数规则适用于芽孢的灭活 过程。
湿热灭菌原理和 常用灭菌设备介绍
内容
• • • • • • 范围 湿热灭菌基础 灭菌法选择的基本原则 灭菌方法的开发及选定 记录仪表 几种常用的湿热灭菌设备介绍
范围
• 蒸汽-湿热灭菌具备无残留，不污染环境 ，不破坏产品表面，易于控制和重现性 好等优点，被广泛应用于注射剂的除菌 过程之中。 • GMP的产生和发展（包括理论和实践） 都与药物制剂的灭菌过程有关。对无菌 产品的制造厂而言，没有什么比灭菌更 为重要
» 已灌装入最终容器（如小瓶、软包装、玻瓶或安瓿）的产品（溶 液、混悬剂或乳剂） » 已检验或加工后剩下的可能含有致病菌的废液。 » 灭菌-方法-设备-确认-练习.doc
湿热灭菌(1)
表1
温度 T/℃ 121 120 119 118 117 116 115 114 113 112 111 110 109
灭菌率L 1.00 0.794 0.631 0.501 98 0.316 0.251 0.199 0.158 0.126
0.1001 0.0791 0.0631
灭菌时间F/ 分 1.00
F0值即标准灭菌时间，系灭菌过程赋予待灭菌物品在121℃下的等效灭菌 时间，即T＝121℃、Z＝10℃ 时的F值。121℃为标准状态，F0值即为标准灭菌时间，以分(钟)表示
5. 灭菌率L L值系指在某温度下灭菌1分钟
所相应的标准灭菌时间(分钟)， 即F和F的比值(L＝F/F)。当Z＝ 10℃时，不同温度下的L值是不 同的(见表1)。不同Z值下的灭菌 率均可查得。
1.259 1.585 1.995 2.513 3.162 3.984 5.012 6.329 7.943 0.000 2.600 5.873
2湿热灭菌设备
❖ 1）高压蒸汽灭菌器
❖ 是应用最早、最普遍的一种灭菌设备。常用 的有手提式、卧式、立式热压灭菌器。
❖ 以蒸汽为灭菌介质，用一定压力的饱和蒸汽， 直接通入灭菌柜中，对待灭菌品进行加热， 冷凝后的饱和水及过剩的蒸汽由柜体底部排 出。
❖ 用于输液瓶、口服液的灭菌，操作简单方便
❖ (1)灭菌原理 ❖ 高压蒸汽灭菌是在密闭的高压蒸汽灭菌器(锅)中进行的。其原理是：
将待灭菌的物体放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内。把锅内的水加 热煮沸，并把其中原有的冷空气彻底驱尽后将锅密闭。再继续加热就会 使锅内的蒸汽压逐渐上升，从而温度也随之上升到100℃以上。为达到 良好的灭菌效果，一般要求温度应达到121℃(压力为0.1MPa)，时间维 持15-30min。也可采用在较低的温度(115℃，即0.075MPa)下维持 35min的方法。此法适合于一切微生物学实验室、医疗保健机构或发酵 工厂中对培养基及多种器材、物品的灭菌。蒸汽压力与温度的关系如表 2-2所示。 ❖ 在使用高压蒸汽灭菌器进行灭菌时，蒸汽灭菌器内冷空气的排除是否完 全极为重要，因为空气的膨胀压大于水蒸汽的膨胀压；所以当水蒸汽中 含有空气时，压力表所表示的压力是水蒸气压力和部分空气压力的总和， 不是水蒸气的实际压力．它所相当的温度与高压灭菌周内的温度是不一 致的。这是因为在同一压力下的实际温度，含空气的蒸汽低于饱和蒸汽。 见表2-3所示。
医疗器械常用灭菌方法、环氧乙烷、辐射、湿热灭菌工作原理
环氧乙烷（以下简称E。）是一种最简单的环醛，低温时为无色易流动液体，沸点，在该温度以上为无色气体 。E。液体在室温下易挥发，有醍味。E。杀灭微生物是由于它能与微生物的蛋白质、DNA和RNA发生强烈的非特异 性烷基化作用，可以与蛋白质上的游离竣基（-C。H）、氨基（-NH2）、硫氢基（-SH）和羟基（-。H）发生烷基 化作用，造成蛋白质失去反应基团，阻碍了微生物蛋白质的正常化学反应和新陈代谢，导致微生物死亡。EC）也可 以抑制生物酶的活性。
菌方法，适用于药品、容器、培养基、无菌衣、胶塞以及其他遇高温和潮湿性能稳定的物品。湿热灭菌条件通 常采用温度-时间参数或者结合F。值（F。值为标准灭菌时间，系灭菌过程赋予被灭菌物品121℃下的等效灭菌时间 ）综合考虑。
二、干热灭菌法
本法系指将物品置于干热灭菌柜、隧道灭菌器等设备中，利用干热空气达到杀灭微生物或消除热原物质的方法 。适用于耐高温但不宜用湿热灭菌法灭菌的物品灭菌，如玻璃器具、金属制容器、纤维制品、陶瓷制品、固体试药 、液状石蜡等。干热灭菌条件通常采用温度-时间参数或
五、过ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ除菌法
本法系指采用物理截留去除气体或液体中微生物的方法，常用于气体、热不稳定溶液的除菌。应根据待过滤介 质属性及工艺目的选择合适的过滤器，除菌级过滤器的滤膜孔径通常选用0∙22μm（或更小孔径或相同过滤效力）。
过滤器的孔径定义来自过滤器对微生物的截留能力，而非平均孔径的分布系数。选择过滤器材质时，应充分考 察其与待过滤介质的兼容性。
对于预期仅接触完好皮肤的手术单，E。的最大允许限量为10μg∕Cm2的可耐受接触限量，ECH为5mg∕cm2,或手 术单应显示出如IS。10993-10中规定的极轻微刺激反应。
此外，还应关注《医疗器械生物学评价第7部分:环氧乙烷灭菌残留量》(GB/T16886.7)对早产儿、新生儿、婴儿 、儿童和成人等不同人群的E。和ECH允许限量规定，并按要求执行。
湿热灭菌
湿热灭菌湿热灭菌法比干热灭菌法更有效。
湿热灭菌是利用热蒸汽灭菌。
在相同温度下，湿热的效力比干热灭菌好的原因是：①热蒸汽对细胞成分的破坏作用更强。
水分子的存在有助于破坏维持蛋白质三维结构的氢键和其他相互作用弱键，更易使蛋白质变性。
蛋白质含水量与其凝固温度成反比(表2-1)；②热蒸汽比热空气穿透力强，能更加有效地杀灭微生物：③蒸汽存在潜热．当气体转变为液体时可放出大量热量，故可迅速提高灭菌物体的温度。
多数细菌和真菌的营养细胞在60℃左右处理15min后即可杀死，酵母菌和真菌的胞子要耐热些，要用80℃以上的温度处理才能杀死，而细菌的芽胞更耐热，一般要在120℃下处理15min才能杀死。
湿热灭菌常用的方法有常压蒸汽灭菌和高压蒸汽灭菌。
表2-1蛋白质含水量与其凝固温度的关系蛋白质含水量/% 蛋白质凝固点/℃50 5625 74-8018 80-906 145(一)常压蒸汽灭菌(1)常压蒸汽灭菌是湿热灭菌的方法之一，在不能密闭的容器里产生蒸汽进行灭菌。
在不具备高压蒸汽灭菌的情况下，常压蒸汽灭菌是一种常用的灭菌方法。
此外，不宜用高压蒸煮的物质如糖液、牛奶、明胶等，可采用常压蒸汽灭菌。
这种灭菌方法所用的灭菌器有阿诺氏(Aruokd)灭菌器或特制的蒸锅，也可用普通的蒸笼。
由于常压蒸汽的温度不超过100℃，压力为常压，大多数微生物的营养细胞能被杀死，但芽胞细菌却不能在短时间内死亡，因此必须采取间歇灭菌或持续灭菌的方法，以杀死芽胞细菌，达到完全灭菌。
1)巴氏消毒法是用于牛奶、啤酒、果酒和酱油等不能进行高温灭菌的液体的一种消毒方法，其主要目的是杀死其中的无芽胞病原菌(如牛奶中的结核分枝杆菌或沙门氏菌)，而又不影响其特有风味。
巴氏消毒法是一种低温消毒法，具体的处理温度和时间各有不同，一般在60-85℃下处理15-30min。
具体的方法可分两类，第一类是较老式的，称为低温维持法，例如在63℃下保持30min可进行牛奶消毒；另一类是较新式的，称为高温快速法，用于牛奶消毒时只要在85℃下保持5min即可。
常用6种灭菌方法有哪些
常用6种灭菌方法有哪些
常用的6种灭菌方法包括高温湿热灭菌、高温干热灭菌、滤过灭菌、辐射灭菌、化学灭菌和电离辐射灭菌。
1. 高温湿热灭菌：高温湿热灭菌是通过暴露于高温和蒸汽环境中来杀灭微生物。
常用的方法包括蒸汽压力灭菌器和自动气候控制灭菌器。
该方法适用于不耐高温的物品，如塑料制品。
2. 高温干热灭菌：高温干热灭菌是通过将物品暴露于高温干热环境中来杀灭微生物。
常用的方法包括热空气灭菌箱和烘烤灭菌器。
该方法适用于不适宜接触水的物品，如金属器械。
3. 滤过灭菌：滤过灭菌是通过使用微孔滤膜来过滤掉微生物。
常用的滤膜包括微孔滤纸、膜滤器和深过滤器。
该方法适用于液体或气体的灭菌。
4. 辐射灭菌：辐射灭菌是通过使用电离辐射来杀灭微生物。
常用的辐射源包括紫外线灯、X射线机和γ射线机。
该方法适用于灭菌液体、固体和气体。
5. 化学灭菌：化学灭菌是通过使用化学药剂来杀灭微生物。
常用的化学灭菌剂包括过氧化氢、氯化酚和乙醚。
该方法适用于灭菌表面、器具和厕所等。
6. 电离辐射灭菌：电离辐射灭菌是通过使用高能电子或电离辐射来杀灭微生物。
常用的辐射源包括电子束辐射机和离子束辐射机。
该方法适用于灭菌医疗用品和食品等。
需要注意的是，不同的灭菌方法适用于不同的情况和物品。
在选择灭菌方法时，应根据需要考虑灭菌的效果、时间、成本和对物品的适应性。
此外，灭菌过程中应严格按照操作规程进行，以确保灭菌的有效性和安全性。
灭菌方法的分类
灭菌方法的分类1. 引言灭菌是指将目标杀灭全部微生物的过程，它是实验室、医疗场所以及食品加工等领域中常用的防治微生物污染的方法。
灭菌方法可根据不同的原理和操作方式进行分类。
本文将对灭菌方法的分类进行详细介绍，并对每种方法的原理、应用及优缺点进行分析。
2. 热灭菌方法2.1 干热烘箱灭菌法原理：干热烘箱利用高温将微生物的核酸、蛋白质等生物大分子破坏，达到灭菌的目的。
应用：干热烘箱灭菌适用于需要高温长时间作用的场合，如玻璃器皿、金属器具、废弃物等的灭菌。
优缺点：干热烘箱灭菌法操作简单，成本低廉，能够灭活各种类型的微生物，但周期较长，且对某些药物和具有高蛋白质含量的物品可能产生氧化反应，导致失活。
2.2 湿热灭菌法原理：湿热灭菌法通过蒸汽的高温和湿度，与细菌细胞壁中的多糖结合，并导致其变性失活，从而达到杀灭微生物的目的。
应用：湿热灭菌法常用于灭菌培养基、注射器、手术器械等需要高温湿热条件的物品的灭菌。
优缺点：湿热灭菌法可以迅速灭活细菌、真菌和病毒等微生物，操作简单，适用于多种物品的灭菌，但不适用于热敏感物品。
3. 化学灭菌方法3.1 气体灭菌法原理：气体灭菌法通过使用具有较强杀菌作用的气体，如乙烯氧化物、氧化氢等，将微生物的核酸、蛋白质等生物大分子破坏，达到灭菌的目的。
应用：气体灭菌法适用于灭活细菌、真菌和病毒等微生物的场合，如试剂、医疗器械等的灭菌。
优缺点：气体灭菌法能够灭活热敏感的物品，灭菌效果较好，但操作复杂，且对环境、人体有一定的危害。
3.2 化学药剂灭菌法原理：化学药剂灭菌法通过使用具有杀灭微生物能力的化学药剂，如过氧化氢、氯化汞等，破坏微生物的细胞膜、蛋白质和核酸等结构，达到灭菌的目的。
应用：化学药剂灭菌法适用于无法使用其他灭菌方法的情况下，如灭菌高敏感性物品、空气和表面的灭菌等。
优缺点：化学药剂灭菌法适用范围广，杀灭效果好，但操作需要严格控制药剂浓度和接触时间，且消毒剂有可能对环境、人体产生危害。
湿热灭菌实验报告
实验名称：湿热灭菌法在医疗器械消毒中的应用实验日期：2023年10月25日实验目的：1. 掌握湿热灭菌的基本原理和方法。
2. 了解湿热灭菌在医疗器械消毒中的应用及其效果。
3. 评估湿热灭菌对医疗器械安全性的影响。
实验材料：1. 实验室高压湿热灭菌锅2. 医疗器械（如手术刀、注射器、镊子等）3. 温度计4. 压力表5. 记录本6. 消毒剂实验方法：1. 准备阶段：- 将医疗器械清洗干净，并用消毒剂进行初步消毒。
- 将灭菌锅内的水位调整至适当高度，确保蒸汽能够充分接触器械。
- 打开灭菌锅的排气口，将锅内空气排净。
2. 灭菌阶段：- 将初步消毒的医疗器械放入灭菌锅内，注意避免重叠，确保蒸汽能够均匀分布。
- 关闭排气口，打开蒸汽阀门，使灭菌锅内的压力逐渐上升。
- 当压力达到121.3℃时，维持15-20分钟，确保所有微生物被杀灭。
- 灭菌结束后，关闭蒸汽阀门，使压力逐渐下降至常压。
3. 验证阶段：- 取出部分灭菌后的医疗器械，进行无菌检测，确保其无菌状态。
- 对剩余的医疗器械进行外观检查，观察是否有损坏或变形。
实验结果：1. 灭菌效果：- 通过无菌检测，证实所有医疗器械均达到无菌状态，符合灭菌要求。
- 外观检查显示，器械在灭菌过程中未出现损坏或变形。
2. 影响因素：- 灭菌效果受温度、压力、灭菌时间等因素影响。
在本实验中，通过控制灭菌锅内的压力和温度，确保了灭菌效果。
- 医疗器械的材质、形状和数量也会影响灭菌效果。
在实验过程中，注意将器械均匀分布，避免重叠，以确保蒸汽能够充分接触。
实验结论：1. 湿热灭菌法是一种高效、可靠的医疗器械消毒方法，适用于各种类型医疗器械的消毒。
2. 通过控制灭菌过程中的温度、压力和时间等因素，可以确保灭菌效果，降低医疗器械的污染风险。
3. 本实验验证了湿热灭菌法在医疗器械消毒中的应用效果，为实际生产中的应用提供了参考。
实验建议：1. 在实际操作过程中，应根据医疗器械的材质和形状选择合适的灭菌方法。
湿热灭菌柜操作规程
湿热灭菌柜常识湿热灭菌柜工作原理:湿热灭菌柜采用矩形箱式双层结构，夹层为工业蒸汽通道，主要作用为保证灭菌物品的干燥；内室为灭菌室，待灭菌物品被内室通入的纯蒸汽进行灭菌。
工作过程如下：先将待灭菌物品放入内室，夹层通入蒸汽进行预热，然后进行真空脉动（3-4次），经真空脉动后，内室的空气已基本抽除，在接下来的灭菌过程中，纯蒸汽更加容易穿透待灭菌物品，灭菌温度也更加均匀，灭菌计时时间到，再次启动真空泵对内室的湿热饱和蒸汽进行抽除，连同夹层蒸汽的加热共同对内室的物品进行干燥。
干燥时间到，外界空气经0.2μm过滤器对内室进行常压化，内室常压后待温度下降开门取物。
1、常水阀2、Y型过滤器3、电磁阀4、截止阀5、抽空气动电磁阀6、纯蒸汽调节阀7、蒸汽调节阀8、纯蒸汽排放阀9、蒸汽气动电磁阀10、纯蒸汽气动电磁阀11、蒸汽排放阀12、纯蒸汽排放阀13、单向阀14、单向阀15、内室进气阀湿热灭菌柜原理图操作步骤：1、确保进口蒸汽压力>2bar、纯蒸汽压力>1.5bar。
2、打开纯蒸汽直通（12）、夹层蒸汽直通（11）排放凝结水至排放口排气为止，保持阀门在开状态。
3、打开柜门，将衣物按要求放入内室，然后旋紧柜门，4、开压缩空气阀、夹层蒸汽（9）、内室纯蒸汽阀（10），打开电源，此时程序灯闪烁，夹层蒸汽进入夹层，保持该状态20分钟为内室预热。
5、同时按下启动和复位按钮（此时阀8打开）1分钟排放纯蒸汽进口凝结水。
6、设置灭菌参数：灭菌温度（≥121℃）、灭菌时间（≥30分钟）脉动次数（≥4次）、干燥时间（39分钟）。
7、开常水阀门（1），按下启动按钮，程序自动执行。
8、程序结束，内室常压（此时阀15开，平衡内室负压），结束灯亮，开对侧门取出衣物。
注意事项：1）电源开，两侧门已旋紧后程序灯不闪：门上侧行程开关未压紧，调整。
2）夹层压力过低：检查夹层压力总压，如正常检查夹层柜上部进口Y形过滤器。
3）内室温度升不上来：查看纯蒸汽进口压力，如正常检查柜下侧的纯蒸汽疏水器及配套凝水排放管路，如无异常检测温度探头是否灵敏。
高压蒸汽灭菌使用方法和原理
高压蒸汽灭菌湿热灭菌常用的方法有常压蒸汽灭菌和高压蒸汽灭菌。
高压蒸汽灭菌的原理是在密闭容器里蒸汽不能扩散到外面去，而聚集在容器中，随着蒸汽的增加，压力升高，温度也相应增加，易使蛋白质变性。
多数细菌和真菌的营养细胞在60℃左右处理15min后即可杀死，酵母菌和真菌的胞子要耐热些，要用80℃以上的温度处理才能杀死，而细菌的芽胞更耐热，一般要在120℃下处理15min才能杀死。
为达到良好的灭菌效果，一般要求温度应达到121℃(压力为0.1MPa)，时间维持15-30min。
也可采用在较低的温度(115℃，即0.075MPa)下维持35min的方法。
高压蒸汽灭菌器的基本构造如下：1) 内外锅外锅或称“套层”，供贮存蒸汽用，连有用电加热的蒸汽发生器，并有水位玻管以标志盛水量。
内锅也叫灭菌室，是放置灭菌物的空间。
可配制铁蓖架以分放灭菌物。
目前大多数灭菌器内外锅是一体的。
3)压力表内外锅各装一只，老式的压力表上标明三种单位：公斤压力单位(kg/cm2)，英制压力单位(1b/in2)和温度单位(℃)，便于灭菌时参照。
现在的压力表用MPa表示。
4)温度计可分为两种，一种是直接插入式的水银温度计，装在密闭的铜管内，焊插在内锅中．另一种是感应式仪表温度计，其感应部分安装在内锅的排气管内，仪表安装于锅外顶部．便于观察。
5)排气阀一般外锅、内锅各一个，用于排除空气。
新型的灭菌器多在排气阀外装有汽液分离器(或称疏水阀)．内有由膨胀盒控制的活塞。
利用空气、冷凝水与蒸汽之间的温差控制开关，在灭菌过程中，可不断地自动排出空气和冷凝水。
6)安全阀或称保险阀．利用可调弹簧控制活塞，超过额定压力即自动放气减压。
通常调在额定压力之下，略高于使用压力。
安全阀只供超压时安全报警之用，不可在保温时用作自动减压装置。
7)加热源除直接引入锅炉蒸汽灭菌外，都具有加热装置。
近年来的产品以电热为主，即底部装有调控电热管，使用比较方便。
有些产品无电热装置，则附有打气煤油炉等。
湿热灭菌方法及适用范围
湿热灭菌方法及适用范围湿热灭菌是一种灭菌方法，广泛应用于各种药物，医疗器械，医疗器具，营养食品，婴儿用品等产品的灭菌处理。
它具有成本低，效率高的特点，在医药洁净工程及其他领域的消毒领域被广泛使用。
湿热灭菌是利用湿热的条件来抑制或消除病原微生物的一种方法，它的原理是高温下的湿热环境能使细菌的蛋白质及其他内部结构快速失活，从而杀死病菌。
湿热灭菌通常可以分为两种形式：一种是高温（110～150℃）低湿（50-90%），另一种是低温（50-70℃）高湿（80-98%）。
高温低湿湿热灭菌法相对简单，通常是将灭菌物充分淋湿后放入已热到110～150℃的灭菌室内，测量时间为1～2小时，但这种方法的风险性较高，容易破坏物品，所以一般用于消毒易碎物品或可抗热性较弱的物品。
低温高湿湿热灭菌法适用范围更广，常用于坚硬物品，无机物和有机绝缘物，如药品，容器，医用无菌器具，易碎器具，防护用品，安全用品，计算机，仪器仪表，通讯设备，植物和动物蛋类等。
湿热灭菌法的具体实施过程一般是先将灭菌物放入低温的水室，再将水温提高至50-70℃，并将湿度调整至80-98%，然后在此温湿条件下灭菌，一般灭菌时间较长，通常达到6～12个小时。
此外，采用湿热灭菌法灭菌时，推荐使用净水或淡水，而不宜使用一般的市政用水，否则很容易产生细菌或生物。
此外，在灭菌过程中，务必尽量确保灭菌室内空气流通良好，以避免灭菌物产生污染。
总之，湿热灭菌法是一种实用的灭菌方法，其适用的范围广泛，效率高，成本低，但同时也要注意使用前的相关准备及灭菌过程中的操作技巧，以确保灭菌效果达到预期。
本文旨在介绍湿热灭菌方法及其适用范围，讨论了其原理及实行过程，并对其特点及常用注意事项进行了介绍。
希望本文能够为大家对湿热灭菌方法提供有价值的参考信息。
湿热灭菌柜相关验证及日常管理
湿热灭菌是灭菌方法中比较常见和通用的一种灭菌方法，其中常用的湿热灭菌设备就是脉动真空灭菌器。
脉动真空灭菌器其灭菌原理是通过真空泵借助水的流动抽出灭菌柜室内冷空气，使其处于负压状态，然后输入饱和纯蒸气，如此反复，在高温和高压力的作用下使微生物蛋白质变性凝固而灭活达到灭菌要求。
灭菌后，抽真空使灭菌物品迅速干燥。
具有方便、省时、省力、总灭菌时间短、灭菌彻底可靠、物品干燥等特点。
湿热灭菌柜相关法规1、无菌药品附录第六十三条任何灭菌工艺在投入使用前，必须采用物理检测手段和生物指示剂，验证其对产品或物品的适用性及所有部位达到了灭菌效果。
2、无菌药品附录第六十四条应当定期对灭菌工艺的有效性进行再验证（每年至少一次）。
设备重大变更后，须进行再验证。
应当保存再验证记录。
3、无菌药品附录第六十五条应当通过验证确认灭菌设备腔室内待灭菌产品和物品的装载方式。
4、无菌药品附录第六十七条应当按照供应商的要求保存和使用生物指示剂，并通过阳性对照试验确认其质量。
使用生物指示剂时，应当采取严格管理措施，防止由此所致的微生物污染。
《中国药典(20版)》第四部1421：灭菌法灭菌工艺的验证是无菌保证的必要条件。
灭菌工艺经验证后，方可交付正式使用。
验证内容包括：⑴撰写验证方案及制定评估标准。
⑵确认设备的设计与选型。
⑶确认灭菌设备资料齐全、安装正确，并能正常运行。
⑷确认灭菌设备、关键控制和记录系统能在规定的参数范围内正常运行。
(5)采用被灭菌物品或模拟物品按预定灭菌程序进行重复试验，确认各关键工艺参数符合预定标准，确定经灭菌物品的无菌保证水平符合规定。
(6)汇总并完善各种文件和记录，撰写验证报告。
灭菌工艺的日常监控：同时应持续评估灭菌工艺的有效性及被灭菌物品的安全性和稳定性，并建立相应的变更和偏差控制程序，确保灭菌工艺持续处于受控状态。
灭菌工艺应定期进行再验证。
当灭菌设备或程序发生变更(包括灭菌物品装载方式和数量的改变)时，应进行重新验证。
细胞工程实验室常用的灭菌方法和原理
细胞工程实验室常用的灭菌方法和原理细胞工程实验室常用的灭菌方法有湿热灭菌、干热灭菌、紫外线灭菌、过滤除菌等。
以下是这些方法的原理和特点：
1. 湿热灭菌：是利用高温高压的水蒸气进行灭菌。
该方法能够有效地杀灭细菌、真菌和病毒等微生物，常用于培养基、实验器具等的灭菌。
其原理是在高温高压下，水蒸气的穿透力增强，能够使微生物的蛋白质变性，从而达到灭菌的效果。
2. 干热灭菌：是利用高温干燥空气进行灭菌的方法。
常用于玻璃器皿、金属器械等的灭菌。
其原理是在高温下，微生物的蛋白质和核酸会发生变性，从而失去生物活性。
3. 紫外线灭菌：是利用紫外线的杀菌作用进行灭菌的方法。
常用于实验室空气、操作台等的灭菌。
其原理是紫外线能够穿透微生物的细胞膜，使其DNA 发生损伤，从而阻止微生物的繁殖。
4. 过滤除菌：是利用过滤器过滤掉空气或液体中的微生物。
常用于不能耐受高温灭菌的液体或气体的灭菌。
其原理是过滤器能够阻止微生物通过，从而达到除菌的效果。
这些灭菌方法各有优缺点，在细胞工程实验室中，需要根据不同
的物品和实验要求选择合适的灭菌方法。
同时，为了确保灭菌效果，需要严格按照操作规程进行灭菌操作，并对灭菌效果进行检测和验证。
湿热灭菌_精品文档
湿热灭菌湿热灭菌是一种常用的灭菌方法，广泛应用于医疗、实验室以及食品行业等领域。
本文将介绍湿热灭菌的原理、设备、操作步骤以及其在不同领域的应用。
一、湿热灭菌的原理湿热灭菌是利用高温和湿度来杀灭细菌、病毒以及其他微生物的一种方法。
高温能够破坏微生物的核酸和蛋白质，从而使其失去生活能力。
湿热灭菌常使用的温度范围为121-134℃，并且往往配合高压以提高温度的效果。
湿热灭菌的目标是彻底灭除所有微生物，以确保被处理物品的无菌状态。
二、湿热灭菌的设备湿热灭菌通常采用高压灭菌器，也被称为压力蒸汽灭菌器。
高压灭菌器由蒸汽产生器、蒸汽室、温度传感器和压力控制系统等组成。
蒸汽产生器负责产生高压蒸汽，蒸汽室则是容纳待处理物品的空间。
温度传感器用于监测蒸汽室内的温度，压力控制系统负责控制蒸汽产生器的工作和蒸汽室的压力。
三、湿热灭菌的操作步骤1. 准备工作：确认待处理物品是否适合湿热灭菌。
将物品放入合适的容器中，并确保容器的密封性。
2. 设定参数：根据待处理物品的特性和灭菌要求，设定合适的温度和时间参数。
一般情况下，121℃的温度在15-20分钟内可以实现灭菌效果。
3. 充水并预热：将适量的清水倒入高压灭菌器中，然后预热至设定的温度。
这个过程通常需要一段时间，取决于设备的性能和温度的设定值。
4. 加压和灭菌：当设备预热完成后，将压力控制系统设定为预定的压力。
然后，将待处理物品放入蒸汽室，并关闭蒸汽室的门。
待压力达到设定值后，启动计时器开始灭菌过程。
5. 冷却和释压：在灭菌时间结束后，关闭蒸汽供应，并打开蒸汽室的排气阀释放压力。
在压力释放完全后，打开蒸汽室的门，待灭菌物品冷却至室温后，取出处理。
四、湿热灭菌的应用湿热灭菌广泛应用于医疗、实验室以及食品行业等领域。
在医疗领域，湿热灭菌被用于灭菌医疗器械和器皿，如手术器械、注射器、针头等。
通过湿热灭菌可以确保这些器械和器皿的无菌状态，以减少感染的风险。
在实验室中，湿热灭菌被用于灭菌培养皿、试管、平板和培养液等实验材料。
生物工程设备知识点
第二章物料输送过程与设备1.离心泵：①原理：驱动机通过泵轴带动叶轮旋转产生离心力，在离心力的作用下液体沿叶片流道被甩向叶轮出口，液体经蜗壳收集送入排出管。
液体从叶轮获得能量，使压力能和速度能均增加，并依靠此能量将液体送到工作地点。
同时，叶轮入口中心形成低压，在吸液罐和叶轮中心处的液体之间产生了压差。
洗液罐中的液体在这个压差的作用下不断吸入管路及泵的吸入室，进入叶轮中心。
2.气蚀：离心泵工作时，叶轮中心处产生真空形成低压而将液体吸上，在真空区发生大量汽化气泡。
含气泡的液体挤入高压区急剧凝聚破裂产生局部真空。
周围的液体以极高的速度流向气泡中心，产生巨大的冲击力。
把泵内气泡的形成和破裂而使叶轮材料受到破坏的过程，叫做气蚀。
气缚：离心泵启动时，如泵内有空气，由于空气密度很小产生离心力。
因而液体中心产生低压不足以吸入液体，这样虽然启动离心泵也不能完成输送任务的现象。
3.往复泵：①原理：活塞自左向右移动时泵缸内形成负压，液体吸入电动往复泵阀进入缸内。
当活塞自右向左移动时，缸内液体受挤压，压力增大。
由排出阀排出。
活塞往复一次则各吸入和排出一次液体，这成为一个工作循环。
②结构：泵缸、活塞、活塞杆、吸入阀、排出阀4.漩涡轮：①特点：流量小。
压强大。
②原理：叶轮旋转时，液体进入流道，受旋转叶轮的离心力作用，被甩向四周环形流道并转动，叶轮内侧液体受离心力的作用大，而在流道内受到离心力作用小，由于所受离心力大小不同，因而引起液体作纵向漩涡运动。
5.螺纹杆泵：①特点：流量稳定、压强高、作为连消塔进料泵。
②原理：利用螺杆的回转来吸排液体。
6.压缩比：P出口/P进口（绝对压强）7.涡轮式空压机：①犹如一台多级串联的离心泵压缩机。
②特点：动气量大、出口压强大③③型号：DA型和SA型“D”---单吸“S”---双吸“A”—涡轮压气机8.往复式空压机：①缺点：气量不稳、空气中夹带油。
②原理：气罐并联。
吸入阀和排气阀具有止逆作用，使缸内气体数量保持一定，活塞移动使气体的压力升高，当达到稍大于出口管的气体压力时，缸内气体便开始顶开排气阀的弹簧进入出口管，不断排出。
滤器湿热灭菌方法
滤器湿热灭菌方法全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：滤器湿热灭菌方法是一种常用的灭菌技术，通常用于医疗器械、药品及食品生产中。
它通过利用高温高湿条件，在一定时间内有效地杀灭细菌、真菌和病毒，从而确保产品的安全性和质量。
本文将介绍滤器湿热灭菌的原理、方法及应用。
一、滤器湿热灭菌的原理滤器湿热灭菌是一种物理灭菌方法，其基本原理是利用高温高湿的环境将目标物体中的微生物有效地杀灭。
一般情况下，灭菌温度在121℃左右，湿度在15%-95%之间。
高温可以破坏微生物的细胞膜和DNA，从而达到灭菌的目的；高湿则有助于热能传递，提高灭菌效果。
1. 蒸汽灭菌法蒸汽灭菌法是最常用的滤器湿热灭菌方法，通常使用压力蒸汽灭菌器。
在灭菌前，需要将目标物体放置在器皿中，然后用蒸汽加热至121℃左右，保持15-30分钟，最后冷却后取出。
这种方法适用于较小的器皿、包装物及一次性使用的产品。
干热灭菌法是在无水的条件下使用高温进行灭菌，常用的温度为160℃，时间为2小时。
这种方法适用于对潮湿敏感的产品，如一些药品及绷带等。
过滤灭菌法是将待灭菌的液体或气体通过滤器进行过滤，去除其中的微生物，再将滤液用高温高湿处理灭菌。
这种方法适用于一些液态产品，如生物制剂、药物等。
4. 微波辐射法微波辐射法是利用微波能量对目标物体进行加热，从而达到杀灭微生物的目的。
这种方法操作简便，速度快，适用于一些不宜使用传统方法的产品。
5. 紫外线灭菌法紫外线灭菌法是利用紫外线的杀菌作用对空气、水和表面进行灭菌。
这种方法对微生物有较高杀灭率，但对其穿透力有一定限制，适用于一些表面的灭菌处理。
滤器湿热灭菌方法广泛应用于医疗器械、药品及食品生产中，主要包括以下几个方面：1. 医疗器械灭菌。
医疗器械对微生物的灭菌要求较高，通常采用蒸汽灭菌法，确保产品的无菌性。
2. 药品生产。
药品生产中需对原料、包装物及成品进行灭菌处理，以确保产品的质量和安全性。
3. 食品加工。
食品加工中对一些易被污染的原料及包装物也需进行灭菌处理，以防止食品污染。
湿热灭菌原理
湿热灭菌原理湿热灭菌技术（Wet-HeatSterilization）是一种灭菌技术，其特点是利用湿热来杀灭病原物质。
湿热灭菌技术主要应用于医疗器械和实验室试剂的灭菌，其中也包括一些特殊用途的样品，例如有机药物、葡萄糖类、乳品、血液和细胞等。
湿热灭菌技术的有效性取决于温度和湿度的结合，即热量和水分的结合。
湿热可以提供更好的灭菌效果，并且比干热法更加有效的灭菌细菌。
湿热灭菌技术有两大类：1.再性灭菌（Reversible Sterilization）：这种方法通常指的是多次再生利用，即可以多次使用同一批样品进行灭菌；2. 不可再性灭菌（Irreversible Sterilization）：这种方法指的是一次性使用，灭菌效果永久有效。
湿热灭菌的基本原理是：在一个适宜的温度和湿度下，湿热可以使工作环境中的水分和热量同时作用于病原体表面，从而达到有效杀灭菌。
研究表明，湿热灭菌可以在常温（18℃～25℃）、常湿（相对湿度80%～90%）、以及高温高湿（110℃，100%湿度）等条件下实现灭菌。
湿热灭菌技术的工作原理是：当温度升高时，热量作用于病原体表面，很快就会使细菌失活；当湿度升高时，水分会使病原体的表面湿润，使病原体的保护膜变得脆弱，从而导致细菌的死亡。
由于湿热灭菌技术可以有效地杀灭病毒、细菌和真菌等，因此在医疗器械和实验室试剂的灭菌方面大受欢迎。
湿热灭菌技术的优点是操作简单、安全有效，而且可以高效去除菌体的活力，也可以有效地消除微生物的毒性。
然而，湿热灭菌技术也有其局限性，它不具有对病毒的杀灭能力，所以在灭菌病毒的时候，还需要配合使用其他的技术手段，例如冷冻、紫外灯照射等来实现有效的灭菌。
湿热灭菌技术是一种简单安全有效的灭菌手段，尤其是在灭菌非病毒性微生物的情况下，湿热灭菌有着较大的优势。
湿热灭菌技术是目前灭菌行业中常见的一种技术手段，由于其有效性和安全性，已经广泛地应用于医疗器械和实验室中。
综上所述，湿热灭菌技术是一种安全有效的灭菌技术，可以有效的杀灭病毒、细菌和真菌，也可以对一些特殊用途的样品进行灭菌，这种技术应用于医疗器械和实验室中，可以达到有效的杀灭病原体的目的，保证灭菌的安全性和有效性。
湿热灭菌的原理以及影响因素
湿热灭菌的原理以及影响因素湿热灭菌的原理：是使微生物的蛋白质及核酸变形导致其死亡。
这种变形首先是分子中的氢键分裂，当氢键断裂时，蛋白质及核酸内部结构被破坏，进而丢失了原有功能。
湿热灭菌法是在饱和蒸汽或沸水或流通蒸汽中进行灭菌的方法。
以高温高压水蒸气为介质，由于蒸汽潜热大，穿透力强，简单使蛋白质变性或凝固，最终导致微生物的死亡，所以灭菌效率比干热灭菌法高。
湿热灭菌是应用最广泛的一种灭菌方法，它具有灭菌牢靠，操作便利，易于掌握和经济等优点，是药物制剂生产过程中最常用的灭菌方法。
湿热灭菌法可分为：煮沸灭菌法、巴氏消毒法、高压蒸汽灭菌法、流通蒸汽灭菌法、和间歇蒸汽灭菌法影响因素主要有：1）细菌的种类与数量：不同细菌的不同发育阶段对热的反抗力有所不同。
细菌数越少，灭菌时间越短。
2）蒸汽的性质：蒸汽有饱和蒸汽，湿饱和蒸汽和过热蒸汽。
饱和蒸汽热含量较高，热穿透力较大，因此灭菌效力高。
湿饱和蒸汽带有水分，热含量较低，穿透力差，灭菌效力较低。
过热蒸汽温度高于饱和蒸汽，但穿透力差，灭菌效率低。
流通蒸气灭菌法：是指在常压条件下，采纳100摄氏度流通蒸气加热杀灭微生物的方法，灭菌时间通常为30-60分钟。
该法适用于消毒以及不耐高热制剂的灭菌，但不能保证杀灭全部芽孢，是非牢靠的灭菌方法。
间歇蒸汽灭菌法：利用反复多次的流通蒸汽加热，杀灭全部微生物，包括芽胞。
方法同流通蒸汽灭菌法，但要重复3次以上，每次间歇是将要灭菌的物体放到37℃孵箱过夜，目的是使芽胞发育成繁殖体。
若被灭菌物不耐100℃高温，可将温度降至75℃～80℃，加热延长为30～60分钟，并增加次数。
适用于不耐高热的含糖或牛奶的培育基。
高压蒸汽灭菌法：103.4千帕蒸汽压温度达121.3℃，维持15-20分钟。
湿热灭菌法湿热法可在较低的温度下达到与干热法相同的灭菌效果，由于：①湿热中蛋白汲取水份，更易凝固变性；②水分子的穿透力比空气大，更易匀称传递热能；③蒸汽有潜热存在，每1克水由气态变成液态可释放出529卡热能，可快速提高物体的温度。
滤器湿热灭菌方法-概述说明以及解释
滤器湿热灭菌方法-概述说明以及解释1.引言1.1 概述滤器湿热灭菌方法是一种常见的灭菌技术，通常用于消除滤器中可能存在的微生物污染，确保产品的纯净度和安全性。
这种方法利用高温高压的条件，通过热的作用杀死滤器中的微生物。
在工业领域和实验室中，滤器湿热灭菌方法被广泛应用，具有操作简单、效果明显等优点。
本文将深入探讨滤器湿热灭菌方法的原理、实施步骤以及其优势和应用领域，旨在帮助读者更全面地了解这一重要的灭菌技术。
1.2 文章结构本文将从三个主要方面展开对滤器湿热灭菌方法的介绍和分析。
首先，我们将在第二部分中详细讨论滤器湿热灭菌方法的原理，包括其工作过程和原理机制。
接着，在第三部分中，我们将介绍实施滤器湿热灭菌的具体步骤，以帮助读者更好地理解如何在实际操作中进行这一技术。
最后，在第四部分中，我们将探讨滤器湿热灭菌方法的优势和应用领域，以揭示其在不同领域中的重要性和价值。
通过这样的结构安排，我们希望读者能够全面地了解滤器湿热灭菌方法，并从中获得启发和收获。
1.3 目的目的部分旨在探讨滤器湿热灭菌方法在现代医疗、食品加工和生物制药等领域中的重要性和应用，通过详细介绍该方法的原理、步骤以及优势，为读者提供对该技术的全面了解，以便更好地应用于实际工作中。
同时，本部分还旨在激发读者对滤器湿热灭菌技术的兴趣，引导他们深入研究和探索该领域的进一步发展，为推动相关领域的科学技术进步做出贡献。
2.正文2.1 滤器湿热灭菌方法的原理滤器湿热灭菌是一种常用的灭菌方法，其原理是利用高温高压的环境，将微生物的蛋白质和核酸等生物大分子破坏，从而达到灭菌的目的。
在滤器湿热灭菌过程中，一般会使用蒸汽或热水进行灭菌，以确保达到足够高的温度和压力。
当滤器置于高温高压条件下时，微生物的细胞壁会受到影响，导致细胞结构的破坏。
同时，高温环境也会使微生物的蛋白质和核酸变性，失去功能，从而无法生存和繁殖。
这样，就可以有效地将微生物灭活，达到消毒的效果。
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Z VALUE Z值
• • • • •
嗜热芽胞杆菌在不同溶液中的Z值 溶液 Z值（℃） 5％葡萄糖水溶液 10.3 注射用水 8.4 5％葡萄糖乳酸液 11.3 PH＝7磷酸盐缓冲液 7.6
•
• 平均
9.4
灭菌方法的开发和选定
• 过度杀灭法。
– – – – – 假设： N0＝106 D121＝1分钟 Z＝10℃ 将数据代入公式，得L=1，再按计算，达到微生物 残存概率为一百万分之一所需的物理及生物杀灭力 如下：
– PDA_TR-1-Technical_Report_No.1.pdf
湿热灭菌基础
• 影响芽孢耐热性的因素
– 物理/化学条件 – 湿度 – 能量转移
»传导 »对流 »辐射
湿热灭菌基础
－微生物杀灭的数学模式
• 实验表明，在恒定的灭菌条件下，微生物（只 指芽孢）的死亡遵循一级动力学规则。 • 芽孢的杀灭率（体现为残存曲线）是耐热性的 函数，与芽孢的数量无关。 • 采用内生芽孢（生物指示剂BI）的悬浮液或放 在载体形式的芽孢进行灭菌试验的结果表明， 在湿热灭菌中，半对数规则适用于芽孢的灭活 过程。
灭菌方法的开发和选定
• 装载类型的界定
– 考虑到装载的特性及特定装载的方式。例如，多孔/固体物品 通常包括但不局限于以下物品：
» 过滤器（薄膜式过滤器、筒式过滤器、预过滤器等） » 胶塞和其它聚合物密封件 » 管道和软管 » 工作服、口罩 » 清洁用具 » 设备更换部件，如药液灌装
– 液体装载通常包括但不局限于以下物品：
• 对密封容器中的液体而言
– 冷凝水质量 (根据风险分析确定)
不凝气体 测试点
灭菌工艺 (灭菌柜的SIP)
干度和过热 测试点
蒸汽温度 参考点
不凝性气体
• 造成不凝性气体的原因：
– 蒸汽发生器的供水温度低(建议 > 80℃) – 在蒸汽分配系统中滞留空气 (不良的系统设计，疏水器出故障) – 蒸汽启动程序不当 (没有将分配管路中的空气吹除掉)
灭菌剂量
(时间)
我们想提高灭菌的“概率”
继续灭菌 以提高无 菌保证的 水平
10-2 10-3 10-4 10-5 10-6
提高无菌信心的安全限度
无菌保证的水平要优于百万分之一!
杀灭微生物
106 105
微生物数 以恒定的 速率下降 (D value)
104 103 102 101 100 10-1
我们可以检验微生物数的下降情况
» 已灌装入最终容器（如小瓶、软包装、玻瓶或安瓿）的产品（溶 液、混悬剂或乳剂） » 已检验或加工后剩下的可能含有致病菌的废液。 » 灭菌-方法-设备-确认-练习.doc
嗜热芽胞杆菌
115
注射用水
2.1
D 值的测试
• 低热力程序 或单独测试D值 • 欧洲药典要求
– ―确认BI‘s在121℃ (+/- 1℃) 灭菌仍有存活孢子‖ – 用至少106 及D为1.5计算存活时间，得到： 存活时间 (Log No -2) × D 值 存活时间 4 x 1.5分 = 6 分钟
对微生物数的说明
• BI 的每单元的最低数量
– USP > 104 – EP > 5 × 105 – ISO 11138 > 1 × 105
• 通常 > 106 以获得6个对数下降单位的证 据
D 值标准
• D 值及第一单元 (BI) 的数量
– USP > 104 D121 = 1.5 至 3分 钟 – EP > 5 × 105 D121 > 1.5 – ISO 11138 > 1 × 105 D121 > 1.5
Z VALUE Z值
• Z值是指使某一种微生物的D值下降一个对数单位时， 灭菌温度应升高的度数。 10
Log of D Value 1 D值的Log数
Z Value = 10 oC Z 值 = 10 oC
0.1 131.1 121.1 Temperature oC 温度 111.1
Z值对于比较不同灭菌过程温度的标准灭菌时间F0值计算是必须的
冷凝水的管理
• 冷凝水是以下任何一个地方都需要加以管理的 问题
– – – – 蒸汽发生器 蒸汽分配系统 灭菌柜管路 灭菌柜腔室
• 冷凝水始终不断地产生
冷凝水的管理
蒸汽流动的方向应有斜坡
冷凝水跟着蒸汽流动
冷凝水的管理
冷凝水比蒸汽重， 它会向下流动
湿热灭菌基础
• 湿热灭菌的机理
– 细胞繁殖的最终停止 – 蛋白质变性 – 湿热灭菌工艺验证指南-08-12-08.doc
10 3 10 2 10 1 10 0 10 -1 10 -2
杀灭的 %
残存概率区
10 -3 10 -4 10 -5 10 -6
T度下的等效灭菌时间（FT,z 值）
湿热灭菌基础
－微生物杀灭的数学模式
• 残存曲线的半对数模式必须满足二个先 决条件：
– 挑战菌应是均一的（没有其它杂类芽孢） – 挑战菌的灭菌条件相同，或能折算成相同的 灭菌条件，例如，折算标准灭菌时间
为什么我们的产品需要无菌？
我们讲无菌，涵意是什么?
• 在生产过程中要做到没有活的微生物是 不可能的，因为有：
– 人员；
– 原辅料 / 包装材料； – 接触产品设备的表面； – 用于清洗/淋洗的液体； – 环境
物料
人员
设备的表面
清洗液
接种的纸质载体
革兰氏阴性菌
革兰氏阳性菌
细菌内毒素
在革兰氏阴性菌的 细胞壁中脂多糖
Boiling point Gauge pressure o Bar(g) C 17.5 24.1 29.0 32.9 99.6 102.3 104.8 107.1 109.3 111.4 113.3 115.2 116.9 118.6 120.2 121.8 123.3 124.7 1.4 1.5 1.6 1.7 1.8 1.9 2.0 2.1 2.2 2.3 2.4 2.5 2.6 2.7 2.8 2.9 3.0 3.2
灭菌剂量
(时间)
继续灭菌 以提高无 菌保证的 水平
10-2 10-3 10-4 10-5 10-6
我们可计算可信度增加 的程度/无菌保证水平
无菌保证水平 达到 > 10-6
过程控制示意
全过程强化环境控制
SIP 原料的 质量检验
对接触产品表 面消毒并控制 生物负荷 设备消毒 灌封操作。 最终密封 容器 在密封的 容器中最 终灭菌
压力沸点表
0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 1.0 1.1 1.2 1.3
蒸汽的质量
• 对灭菌柜及SIP而言
– – – – – Dryness/干度 潜热的量 Superheat/过热 超过的温度℃ NCG/不凝气体 不凝气体的 % Condensate Quality 冷凝水质量 GB 18278-2000 医疗保健产品灭菌确认和常规控 制要求工业湿热灭菌.pdf A5.2.2.1 – HTM2010\HTM2010-3[1].pdf 9.0 – 湿热灭菌工艺验证指南-08-12-08.doc 附录
蒸汽干度
• 蒸汽干度是蒸汽中潜热的量度
• 最理想是100%潜热，有最大的能量来加热装 载 • 限度标准
– 一般多孔性装载：>0.90 (>90%)
– 金属装载：>0.95 (>95%)
蒸汽的特性温度来自蒸汽干度过热100oC
潜热
显热
0o C
热 (能量) 干度为 0.9 = 90% 的潜热 干度为 1.0 = 100% 的潜热
» 物理杀灭力FPHY为12分钟， » 生物杀灭力 FBIO ＝D121×（LogN0－Log NF）＝12分钟
灭菌方法的开发和选定
• 残存概率法
– – – – – – 假设产品的生物负荷测试中： N0＝102 D121＝1分钟 Z＝10℃ 经灭菌后，微生物残存概率NF小于10-6 利用上面的数值，可以计算出微生物残存概率小于 10-6所需的FPHY和FBIO如下： – F0＝FPHY＝FBIO＝D121×（LogN0－Log NF）＝8 分钟
湿热灭菌基础
－微生物杀灭的数学模式
• 残存曲线 可用如下 的一级方 程式来描 述： – Log NF = Log No F(T,z)/ DT
NF 挑战微生物灭菌F分钟后的残存数
No
灭菌前微生物的数量
微生物在T℃和Z值下的耐热参数。注意 ，DT中的温度T需和FT中的温度相一致。 在温度T℃和温度系数Z值条件下，经计 算获得的湿热灭菌程序的杀灭力，以T℃ 下的时间（分钟）表示
D VALUE D值
• 在基础温度下减少一个Log菌数所需的时间。就是在一定温度下 ，将微生物杀灭90％（即下降一个对数单位）所需的时间。
6 5 4 3 2 1 0 -1 -2 -3 -4 -5 -6
Log # of Survivors 残存物Log数
D value = 1 D值 = 1
Thermal death curve 热杀死曲线
• 通常
– 数量 – D121 > 1 × 106 > 1.5 分钟
无菌保证水平
106 105
可测试部分
活微生物以 恒定速度 /D下降数
104 103 102 101 100 10-1 10-2
灭菌时间 计算部分
继续灭菌 以提高无 菌保证水平
10-3 10-4 10-5
10-6
无菌保证水平 达到10-6
内包装料 的质量检验
内包材料清洗、 消毒去热原 隧道灭菌器
最终灭菌
热原控制一直到最后一步
湿热灭菌基础