医院凝血酶原时间(PT)测定凝固法操作规程

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PT标准操作流程

凝血酶原分析标准操作流程目录1 目的2 测试原理3 产品信息4 试剂保存和稳定性5 预防和警告6 样本收集和准备7 检测需要但试剂盒中未提供的耗材8 定标9 质量控制10 操作流程11 结果12 结果解释13 参考范围14 治疗范围15 性能特征16 参考文献1 目的此程序提供在ACL™ 8000，ACL™ 9000（软件版本2.0 - 2.6）上，执行凝血酶原时间（PT）测试的指导。

该测试用于外源性凝血途径的评估和口服抗凝剂治疗（OAT）的监测。

2 测试原理过量的组织促凝血酶原激酶和钙离子（PT试剂）加入病人血浆中，激活外源凝血途径，导致纤维蛋白原转化为纤维蛋白，形成固体胶状物，仪器检测凝固形成所需要的时间。

3 产品信息下列任何产品均可用于该测试程序：8 mL，P/N ；和HemosIL RecombiPlasTin，20 1) HemosIL™ RecombiPlasTin,，mL，P/N ，包含冻干的试剂和液体的稀释剂。

2) HemosIL PT-Fibrinogen HS，8 mL，P/N ，包含冻干的试剂。

请参考试剂包装说明书以获得更多信息。

4 试剂保存和稳定性未开封的试剂和定标血浆可于2-8 o C稳定至试剂瓶上标注的有效期。

为了最佳试剂保存，建议不使用时，将试剂和定标血浆从仪器系统取出，使用原瓶，保存于2-8 o C。

复溶后稳定性HemosIL RecombiPlasTin: 2-8°C稳定10天，15-25°C原瓶稳定5 天，或者15°C环境下，在ACL 8000-10000仪器上，使用含特氟纶包被的搅拌磁珠持续搅拌下稳定10天。

HemosIL PT-Fibrinogen HS: 2-8˚C原瓶稳定3天，或者 15˚C 持续搅拌在ACL 8000-10000仪器上稳定8小时。

5 预防和警告吞入有害 (R22)。

1避免与皮肤和眼睛接触(S 24/25)。

PT_APTT_TT

2．凝血酶时间延长也可见于肝素增多或类肝素抗凝物质增多。 3．凝血酶时间缩短极为罕见，主要见于某些异常蛋白血症或巨球蛋白血症时，此外，较多的是技术原因，如标本在4℃环境中放置过久，组织液混入血浆等。
【评价】 1．用凝血酶时间检测了解纤维蛋白原含量和凝血作用有时也会出现误差。如低Fg可造成凝血酶时间延长，过高 Fg因抑制纤维蛋白单体交联也会造成类似结果；异常纤维蛋白原血症时，既可能延长，也可能缩短。
系统有无异常的最常用的筛检试验。血凝仪测定APTT，其测定速度和结果的准确性、灵敏度均高于试管法，并易于标准化。
血浆凝血酶时间 (TT)
【原理】受检血浆中加入“标准化”的凝血酶溶液后，血浆凝固所需要的时间为凝血酶时间(thrombintime，TT)。 TT主要用于检测血浆纤维蛋白原的减少或抗凝物质的增多。
【操作】试管法 1．硅化试管或塑料管中加入 109mmol／L枸橼酸钠溶液0.2ml，静脉采血1.8ml加入上管中，充分混匀， 3000rpm离心10min，分离血浆。 2．将氯化钙凝血活酶溶液、健康人混合冻干血浆和待测血浆，置37℃水浴中预温5min。
3．取试管1支，加入健康人混合冻干血浆0.1ml，37℃水浴预温30s，再加入预温的25mmol／L氯化钙凝血活酶溶液0.2ml，混匀，开动秒表计时。
【评价】试管法为测定血浆凝血酶原时间的手工方法之一，其准确度比仪器法差，但多次重复测定也可得到较准确的结果。仪器法测定由半自动或全自动血凝仪完成，全自动血凝仪的准确性和精密度高。不同仪器及试剂测定同一血浆，其PT也有一定差异，但 INR应一致。
活化部分凝血活酶时间测定(APTT )
2．过多的FDP造成的凝固时间延长，可用鱼精蛋白来纠正；类肝素增多，则可用爬虫酶时间测定在正常范围来证实。

血浆凝血酶原时间测定(PT)的标准操作程序

血浆凝血酶原时间测定（PT）的标准操作程序【目的】保证PT检测结果的准确性。

【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报请专业组长及科主任签字后生效。

【方法原理】在37℃条件下,将待测血浆加入过量的含钙组织凝血活酶，使凝血酶原转变凝血酶，后者使纤维蛋白元转变纤维蛋白，测定血浆凝固所需的时间以即为待测凝血酶原时间（PT），本试验不仅反映凝血酶原水平，也是反映因子Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ和纤维蛋白原在血浆中的水平，所以是外源性凝血系统的筛选试验。

本实验室采用凝固法。

【标本采集】按凝血象标本采集和处理的标准操作程序所采集的枸椽酸钠抗凝血液标本。

应注意禁止血带时间越短越好,最长不宜超过3分钟,否则易引起某些凝血因子及纤溶活性的变化。

【试剂】ThromborelS试剂：德国西门子公司生产每瓶凝血酶原冻干试剂中加入4ml 无菌蒸馏水。

未开封ThromborelS试剂2-8℃储存，有效期24个月。

复溶试剂稳定性：37℃（已开瓶） 8小时;15-25℃（已开瓶）2天;2-8℃(未开瓶) 5天。

【操作步骤】1、按说明书复溶所需试剂、质控血浆，放置室温30分钟。

2、开机：打开主机和显示器开关，待仪器正常启动，登录报告软件。

3、按sysmex CA500血凝仪使用、维护保养的标准操作程序放置试剂。

4、先进行质控样本的检测，结果直接传入LIS系统质控软件。

待质控结果全部在控后方可进行患者标本测定。

5、按sysmex CA500血凝仪使用、维护保养的标准操作程序放置患者标本，开始测定，检测结果传输至软件后，核对患者信息，审核结果、打印报告。

【参考区间】1、PT 9.8-12.1秒,待测者的测定值较正常对照延长超过3秒以上才有临床意义。

2、国际标准化比值INR 0.818-1.50。

【临床意义】1、PT延长或INR增加见于先天性凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ缺乏症和低（无）纤维蛋白原血症；获得性见于DIC、原发性纤溶症、维生素K缺乏症、血循环在有抗凝物质存在如口服抗凝剂、肝素和FDP。

凝血酶原时间(PT)

凝血酶原时间(PT)测定方法操作规程一.【产品名称】凝血酶原时间（PT）检测试剂盒（凝固法）二.【预期用途】用于体外人血浆中凝血酶原时间测定,用于辅助诊断。

三.【临床意义】PT测定是外源性凝血系统较理想和常用的筛选试验。

也可作为外源性途径及共同途径凝血因子的定量试验，同时，也可用于口服抗凝剂治疗的监控。

PT延长：见于先天性凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ缺乏症，低（无）纤维蛋白原血症，DIC，原发性纤溶症，VitK缺乏，肝病，口服抗凝剂、肝素和FDP等。

PT缩短：见于先天性凝血因子Ⅴ增多，口服避孕药，高凝状态，血栓性疾病等。

四.【检验原理】待测血浆加入过量的含钙组织凝血活酶，重新钙化的血浆在组织因子存在时激活因子X成为Xa，后者使凝血酶原转变为凝血酶，凝血酶使纤维蛋白原转变为不溶性纤维蛋白，测定凝固所需的时间，即为待测血浆凝血酶原时间。

五.【主要组成成分】1.PT试剂：10瓶（内含组织因子、缓冲液、稳定剂、防腐剂）2. PT缓冲液：1瓶（内含缓冲液、稳定剂、防腐剂）3.说明书：1份注：不同批号试剂盒中各组份不可互换。

六.【储存条件及有效期】未开启试剂于2℃～8℃保存可稳定至标签所示失效日期；试剂复溶后于+2℃～+8℃可保存7天。

试剂保存应防止冷冻。

七.【适用仪器】血凝分析仪。

八.【样本要求】1. 静脉采血，置于含有1/10体积0.109mol/L枸橼酸酸钠抗凝液（1份抗凝液+9份全血）的塑料管或硅化玻璃管中，轻轻颠倒混匀，3000rpm（或2500g）离心15分钟，收集上层液（血浆，黄色）。

2.采血必须使用一次性塑料注射器或硅化玻璃注射器，贮血必须使用塑料试管或硅化玻璃管。

不宜使用普通玻璃器，避免凝血因子活化。

3.采血时止血带不可束缚过紧，而且不应超过5分钟，否则导致凝血及纤溶因子活化。

4.不宜使用EDTA●Na2、肝素、草酸盐作为抗凝剂。

5.红细胞比容超过55%或小于20%时，应调整抗凝剂用量。

抗凝剂体积（ml）=0.00185x血液体积（ml）x（100 - 比容）。

凝血酶原时间PT测定作业指导书

凝血酶原时间PT测定作业指导书
1. 实验原理：
在待检血浆中加入过量的组织凝血活酶和Ca离子，与FⅦa形成复合物，触发外源性凝血系统，使凝血酶原转变为凝血酶，凝血酶使纤维蛋白原变为纤维蛋白。

所测血浆凝固时间，即凝血酶原时间。

凝块形成的时间与血浆中的外源性凝血因子含量呈负相关。

2. 标本采集：
2.1 早晨空腹采血(空腹12小时左右)，静脉采血。

2.2
3.8％(w/v)枸椽酸钠0.2ml+静脉血1.8ml,混匀。

3. 标本存放：将混合了抗凝剂的全血以3000r/min×10min离心，室温放置不超过2小时，2～8℃保存不超过4小时，长时间保存需在冰冻条件下，（-70℃不超过6个月），只能冻融1次，在37℃迅速解冻，以减低凝血因子的消耗，解冻后立即测试。

4. 标本运输：低温条件下运输。

5. 标本拒收的标准：抗凝剂不符合，采血量不准确，凝固，溶血，脂血标本不能作测定。

6. 实验材料：
北京世帝科学仪器公司凝血酶原时间测定试剂盒，主要成分为兔脑粉、氯化钙和少量稳定剂。

7. 仪器设备：
7.1 仪器名称：M200全自动凝血因子分析仪。

凝血四项标准操作程序

凝血四项标准操作程序（SOP）实验室名称项目编号制定日期安徽济民肿瘤凝血四项标准2014 年月日医院临检室操作程序（SOP）【测试项目】PT 凝血酶原时间APTT 活化部分凝血活酶时间FIB 纤维蛋白原TT凝血酶时间【该 SOP变动程序】本标准操作程序的改动，可由任一使用本 SOP 的工作人员提出，并报述人员批准签字：专业主管、科主任。

【适用范围】本产品适用于检测凝血因子。

【操作步骤】1、使用 1：9 枸橼酸钠抗凝管采血2ML ，离心速度为3000 转/分， 10分钟取用上层血浆。

2、用加珠器在每个样品杯中放一粒钢珠，把样本杯置于预温槽内。

3、进入主菜单，用光标键移动光标，选择“测试”，按键“确认” ，进入实验菜单。

4、将试剂放于相应位置，预温孔或室温孔。

5、将标本加入样品杯（PT50ul ，APTT50ul,FIB20ul 血浆加 180ulFIB 稀释液再取 100ul，TT100ul ）按预温槽相应的ABCD 键，计时启动。

6、当达到预温时间时，发出嘟嘟声通知操作者，将样品杯从预温槽中移至测试槽中，加入试剂（ PT100ul， APTT50ul 氯化钙， FIB100ul ，TT100ul ）进行测试。

7、使用联动加样器时，加试剂的同时，仪器自动启动计时器开始计时。

8、实验完成，记下各结果。

【维护与保养】1，维护和保养方法1.1 保持清洁，特别是测试孔内的清洁尤为重要，严禁有异物进入。

防止受潮，腐蚀，远离强电磁场干扰源。

应使用干燥的软布进行仪器表面的清洁，不得使用强酸或强碱消毒剂擦拭仪器表面。

1.2 仪器应放置在平稳的工作台面上，不得摇晃与振荡。

避免阳光直晒，远离强热物体。

1.3电源电压：220V,频率：50HZ，如当地电压不稳定，应使用稳压电源。

输入功率：不大于100VA(W),不与大功率电器共线并用。

1.4 熔断器的更换：当用户更换熔断器内的保险管时，应先关闭本系统，拔下电源线，并严格按熔断器座旁标记的规格型号进行更换（熔断器规格：2A/250V/20mm）1.5仪器内△!标记警告用户：仪器装有加热装置，保持设定的恒温+-0.2 ℃，请不要在通电情况下触及。

浆凝血酶原时间测定( PT,一期法)标准操作程序SOP文件

[试剂和仪器]
1，试剂：
（1）.组织凝血活酶浸出液：常用人或兔脑粉浸出液。
（2）.0.025mol/L氯化钙溶液。
2，仪器：
（1），秒表，塑料试管，塑料注射器。
（2），全自动血凝分析仪。
[标本采集与处理]
用血凝试验专用1：9枸橼酸钠抗凝真空采血管抽取静脉血，轻摇抗凝。3000r/m离心10min，获乏血小板血浆。
[质量控制品]
STA血凝质控物两种。
[操作步骤]
（一），手工操作：
1.在试管内加入109mmol/L枸橼酸钠溶液0.2ml，然后加入待检者(或正常对照) 1.8ml，混匀,高速离心,分离血浆。
2.取小试管1支，加入待测血浆和组织凝血活酶浸出液各0.1ml，37℃预温，再加入0.025mol/L氯化钙溶液0.1ml(氯化钙液也应预温在37℃水浴中),立即开启秒表,不断轻轻倾斜试管,记录至液体停止流动所需要的时间。重复以上操作2--3次,取平均值,即为凝血酶原时间。
INR=PTR PTR:凝血酶原时间比值。
备注：PT.APTT的仪器测定操作方法根据仪器.试剂说明书的要求进行。
[临床意义]
延长:见于先天性Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ缺乏症和低（无）纤维蛋白原血症；获得肝脏疾病、DIC、原发性纤溶症、维生素K缺乏症等，是监测口服抗凝治疗，性见于作为口服抗凝药的可靠指标。
缩短:见于先天性因子Ⅴ增多症、长期口服避孕药，血栓前状态和血栓性疾病等。
2，参加室间质评工作，以使结果与全国水平一致。
3，每批试剂使用前必须应用标准品Байду номын сангаас质量控制品进行试剂评价。
4，为保证标本质量，统一使用一次性真空采血管采血。
[结果计算]
由于不同来源.不同制备方法的组织凝血活酶对结果影响很大,造成结果可比性很差,特别影响判断治疗效果。WHO提出以人脑凝血活酶67/40批号作为标准品,并以国际敏感度指数(international sensitivity index ,ISI )表示各种制剂与67/40之间相互关系。67/40为原始参考品,定ISI为1.0。因此各种制剂必须标以ISI值。国外现在采取国际标准化(凝血酶原时间)比值(international normalized ratio ,INR)统一判断治疗效果,以INR控制在2--4时为抗凝治疗适当范围。为此必须通过该组织凝血活酶的ISI,经下列公式计算:

凝血酶原(PT)SOP文件

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ZYYY/LJxm--b10--20XXsop文件附录bb10：血浆凝血酶原时间（pT）测定第一页页首内容：血浆凝血酶原时间（pT）测定（凝固法)科左中旗中医医院检验科操作规程文件号：ZYYY/LJxm--b10--20XX第4版共6页20XX年9月13日起实施。

〔该sop变动程序〕本操作程序的改变可由使用sop文件工作人员提出，人，科主任批准签字。

本规程每2年复审一次复审日期:年月日复审人：规程编写者：李凤兰审批者：李凤兰批准日期：20XX年9月13日医务科保管者：包金泉检验科保管者：李凤兰临检实验室保管者：于庆芝并报告专业负责ZYYY/LJxm--b10--20XXsop文件b10.1:测定原理:待测血浆加入过量的钙组织凝血活酶，重新钙化的血浆在组织因子存在时激活因子x成为xa，后者是凝血酶原转变为凝血酶，凝血酶使纤维蛋白原转变为不溶性纤维蛋白，测定凝固所需的时间，即为待测血浆凝血酶原时间。

b10.2:标本采集与处理：b10.2.1:受检者准备：空腹静脉取血b10.2.2：受检者体位：坐位、静脉取血、使用止血带时间不超过1分钟。

b10.2.3:标本种类:采用血浆检测，用枸橼酸钠抗凝。

b10.2.4:使用器材：取血器材包括注射器、针头与试管，必须干燥、清洁，要使用一次性塑料注射器与塑料试管，使用真空采血管后应及时去除真空。

b10.2.5:离心条件与测定时间：必须以3000rpm的离心速度离心15分钟，血浆分离后应在2小时内完成测定。

b10.2.6：抗凝剂：必须用109mmol/L(32g/L)枸橼酸钠抗凝，抗凝液应防止霉变。

血浆凝血酶原时间(PT)测定

血浆凝血酶原时间（PT）测定【实验原理】在受检血浆中加入过量的组织凝血活酶和适量的钙离子后，测其凝固时间为PT。

是反映血浆中凝血酶原、因子V、Ⅶ、X及纤维蛋白原的试验，也是外源性凝血系统常用的筛选试验之一。

【试剂】1．兔脑粉浸出液取150mg干燥兔脑粉，置于试管中，加生理盐水2.5ml，放入37℃水浴，充分搅拌10min，并置其水浴中备用。

2．0.025mol/L CaCl2溶液。

【操作方法】1．在试管中加入109mmol/L枸橼酸钠或0.1mol/L草酸钠溶液0.2ml，然后加受检血1.8ml混匀，低速离心，分离血浆。

2．取小试管1支，加入血浆和兔脑粉浸出液各0.1ml，37℃预温，再加入0.1mlCaCl2溶液37℃预温，立即开动秒表，不断倾斜试管，至液体流动停止所需时间，即为凝血酶原时间。

重复操作2～3次，取平均值，并作正常对照。

【参考区间】12～14s（一期法）【质量控制】1．抽血要顺利，抗凝要充分，否则PT延长。

2．采血后宜在1小时内完成，置冰箱保存不能超过4h。

3．试验温度要恒定于37℃±1℃，否则影响结果。

【临床意义】凝血酶原时间延长（超过正常对照3s以上）见于：1．先天性凝血因子异常，如Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ因子之一或两种以上异常时。

但单一凝血因子异常时，其活性要减少到一定水平，PT才延长。

如因子I要<1000mg/L，Ⅶ<5%，Ⅱ、Ⅶ、Ⅹ要<10%。

2．后天性凝血因子异常，如严重肝病、维生素K缺乏（慢性胃肠疾患、阻塞性黄疸）、纤溶亢进、DIC后期、血液中抗凝物质增多及使用抗凝药物，如双香豆素类等。

凝血酶原时间缩短见于DIC早期及血栓性疾病，如心肌梗塞、脑血栓形成、急性血栓性静脉炎等。

PT测定通常用于以下三种情况：（1）出血性疾病的病情观察和出血及手术时应补何种凝血因子的检查；（2）用于检查肝合成维生素K依赖因子（因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅹ）是否减少，是维生素K缺乏、肝脏病的一项检查指标；（3）用于缺血性心脏病（如心肌梗塞）和人工瓣膜使用者，在应用双香豆素等口服抗凝剂进行抗凝治疗时的监控项目。

PT

修改纪录：1目的本操作书的制定的目的是，为操作者进行凝血酶原时间测定提供正确的操作方法。

2适用范围适用于凝血酶原时间测定3定义凝血酶原时间（Prothrombin time，PT）是一个基础的凝血筛选试验，常用来评价先天的和/或后天获得的外源性凝血途径(因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ)。

4测定原理和临床意义4.1测定原理在待检血浆中加入过量的第Ⅲ因子和适量Ca2+,使凝血酶原转变为凝血酶，后者使纤维蛋白原转变为纤维蛋白。

采用凝固法，通过电磁感应,感测介质黏度变化，从而测定血浆凝固时间，与正常人凝血酶原时间比较，综合反映外源性凝血系统中因子（Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ）的水平。

方法为自动血凝分析仪（STA Analyzers）Clauss凝固法。

该试验对外源性凝血因子敏感：----因子II （凝血酶原）----因子V （易变因子）----因子VII （稳定因子）--因子X （Stuart 因子。

4.2临床意义为外源性凝血途径检查的筛选试验，是综合反映凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ、Ⅰ含量及活性的指标。

监测抗凝剂治疗。

延长：Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ因子先天性缺乏和低（无）纤维蛋白原血症；DIC的低凝期及继发性纤溶亢进期；原发性纤溶症；维生素K缺乏症；肝脏疾病（肝硬化、肝炎、黄疸）；循环血液中有抗凝物质；纤维蛋白降解产物（FDP）增多；口服香豆素类抗凝药；肠道重吸收紊乱；新生儿出血性剂病等。

缩短：血栓前状态或血栓性疾病、DIC早期、口服避孕药等。

PT被广泛用于监测抗凝治疗(warfarin)，因为它的灵敏度可反映依靠维生素K的因子II,VII 和X的浓度变化，所以此试验所得的结果对确定治疗药物浓度是特异的。

众所周知，血浆PT的值由于凝血活酶试剂本身及所测量的仪器的不同而不同。

WHO采用的一种标准品是“抗凝治疗强度凝血活酶国际参考标准系统”，在这个系统中，PT比值被转换成国际标准化比值（INR），病人的PT和标准PT比值符合INR与ISI（国际敏感度指数）换算公式：INR=（病人PT / 平均正常PT）ISI凝血活酶ISI 值通过使用国际参考品凝血活酶（IRP），由正常血浆和香豆素治疗病人血浆的凝血活酶来决定，PT值的获得可通过作log--log 图，并回归画出直线，该直线的斜率描绘的即是凝血活酶ISI 值。

凝血酶原时间(PT)测定标准操作规程

凝血酶原时间（PT）测定标准操作规程1.检验原理：待测血浆加入过量组织凝血活酶和 2aC，启动外源凝血途径，最终使纤维蛋白原转变为纤维蛋白，在光学浊度法仪器上，测定血浆凝固所需的时间，即为待检血浆的PT。

2.试剂主要组成成分R1:PT试剂：兔凝血活酶、氯化钙R2：PT复溶液：缓冲液3.样本要求3.1.采集静脉血，立即按9份血：1份抗凝剂比例与0.109mol/L枸橼酸钠充分混合均匀。

室温3000rpm离心12分钟，上层淡黄色液体为待检的乏血小板血浆。

3.2血浆室温放置，宜在2小时内检测。

3.3血浆若不能及时检测，用塑料吸管分离，-20℃可保存2周。

测定前37℃快速融化，轻微混匀后立即检测。

4.检验方法：全自动血凝分析仪测定（详见雷杜RAC-1830标准操作规程）5.参考区间：PT:11—15秒。

INR:0.8-1.56.检验结果的解释报告PT秒数（S）和INR，检验结果与各实验室的参考值范围相关。

7.检验方法的局限性7.1凝血过程包括从因子激活到纤维蛋白形成的一系列反应。

因此，检验结果可能受到治疗药物（干扰物）、检验操作、检验系统等因素的影响，应考虑这些因素。

7.2试剂被污染，或者样品杯、吸管等被凝血试剂污染，会导致凝血异常，需严格控制。

7.3仅以时间形势报告PT会因ISI值不同造成结果不可比。

8产品性能指标8.1重复性：用质控血浆重复测试所得结果的变异系数（CV）应不超过5.0%。

8.2瓶间差：用质控血浆测试，瓶间差应不超过6.0%。

9临床意义PT延长：见于先天性凝血因子II V VII X缺乏症，低（无）纤维蛋白原血症，DIC，原发性纤溶症，VitK缺乏，肝病，口服抗凝剂，肝素和FDP等。

PT缩短：见于先天性凝血因子V增多，口服避孕药，高凝状态，血栓性疾病等。

血浆凝血酶原时间测定(PT)标准操作规程

血浆凝血酶原时间测定（PT）标准操作规程一、项目名称：血浆凝血酶原时间测定（prothrombin time ，PT）二、检验方法名称：凝聚法三、方法学原理：在确定量的血浆样本经过肯定时间的加温后，加入试剂。

加入试剂后，采纳波长为660nm的光照耀样本。

凝血过程（纤维蛋白原转化为纤维蛋白）中血的浑浊度可以通过测量散射光光强度的转变来测定。

从散射光光强度的测定，可以做出凝血曲线，通过Percentage Detection Method法求得凝血时间。

四、方法学溯源：凝血酶原时间（PT）测定是Quick于1935年创立的。

在受检血浆中加入过量的组织凝血活酶（人脑、兔脑、胎盘及肺组织等制品的浸出液）和钙离子，使凝血酶原变为凝血酶，后者使纤维蛋白原转变为纤维蛋白。

观看血浆凝固所需要的时间即凝血酶原时间。

其凝固时间取决于凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅴ、Ⅹ、Ⅰ的水平。

该试验是反映外源凝血系统最常用的筛选试验。

五、仪器：（一）型号：Sysmex CA1500自动血液凝血分析仪（二）分析和计算参数：1．处理量：约120个测试/小时2．所需样本量：50l3．检验时间：在最长检验时间之内测出结果，典型最长检验时间：100秒4．重复性：CV2%5．计算参数：凝血酶原活动度（PT%）凝血酶原比值（PT R）国际标准化比值（INR）六、试剂及配套品：（一）试剂：1. 凝血活酶含钙试剂（Thromborel S）（1）商标：德灵（DADE BEHRING）（2）包装规格：Pack for 104ml（3）代码：No.OUHP 29 , or（4）参数：ISI（国际敏感度指数）=0.97（5）成分：1）Thromborel S Reagent :a. 冻干人胎盘促凝血酶原激酶（lyophilized human placental thromboplastin）b. 氯化钙 (calcium chloride)c. 稳定剂 (stabilizers)2) 防腐剂（Preservatives）:a.庆大霉素（Gentamicin）(0.1g/L)b. 5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮和2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮（5-chloro-2-methyl-4-isothiazol-3-one and 2-methyl-4-isothiazol-3-one）（最大量 20mg/L）2．佛罗那巴比妥缓冲液（Dade Owren'S Veronal Buffer）（1）商标：德灵（DADE BEHRING）（2）包装规格：Pack for 1010ml（3）代码：B4234-25（4）成分：1）2.8410M的巴比妥钠 (sodium barbital)2）1.2510M的氯化钠 (sodium chloride)3) PH 7.350.13. 清洗液（Cleaning）2%次氯酸钠溶液（自配）（二）配套品：1.标准血浆（Standard Human Plasma）(1) 商标：德灵（DADE BEHRING）(2) 代码：No. ORKL2.校准质控血浆（Ci-Trol）(1) 商标：德灵（DADE BEHRING）(2) 代码：Level 1, B4244-10Level 2, B4244-20Level 3, B4244-303.质控血浆（Control Plasma）(1) 商标：太平洋（Pacific Hemostasis）(2) 代码及规格：Level 1 (Normal), 100595 101mlLevel 2 (Abnormal), 100596 101mlLevel 3 (Abnormal), 100597 101ml七、操作步骤：（一）开机：开机前，先打开连机的打印机。

pt凝血功能方法

pt凝血功能方法
PT（Prothrombin Time）是一种测量凝血功能的常规方法之一，用于评估血液中凝血因子的活性。

下面是PT凝血功能检测的一般步骤：
一、采集血样：通过抽取一小管静脉血样进行分析。

通常，使用抗凝剂涂层的管子来防止血液在采集后凝结。

二、制备血浆：血液通常需要离心分离，以获取血浆。

血浆是没有细胞的液体部分，其中包含凝血因子。

三、添加试剂：向血浆中添加一种叫做磷脂和血管内皮组织素（Tissue Factor）的试剂。

这会启动凝血过程。

四、计时：开始计时，测量从添加试剂开始到形成血块的时间。

通常以秒或几秒为单位。

五、记录结果：记录PT的结果。

结果通常以秒或INR（International Normalized Ratio）的形式呈现。

INR是一种标准化的测量方式，可以消除实验室之间的差异。

六、解释结果：根据结果，医生可以评估凝血因子的活性，从而判断患者的凝血功能状态。

凝血酶原时间(PT)测定

８５调整。
３方法与原理
３．１方法凝固法（散射比浊法）。
３．２原理标本中加入试剂后，起程完成时的散射光强度定为１００％，凝血时间定义为ｌ在凝血过程实时曲线（凝血时间一散射光强度）上，５０％的散射光强度所对应的时间。
世界最新医学信息文摘２０１３年第１３卷第１６期
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２３７
医学检验・
凝血酶原时间（ＰＴ）测定
孙照杰，毛齐学，李翠翠，张静，刘文秀，张宏宇
（齐齐哈尔市中医医院，黑龙江齐齐哈尔１６１０００）
摘要：目的探讨凝血酶原时间（ＰＴ）测定。方法采用凝固法（散射比浊法）进行凝血酶原时间（ＰＴ）测定。结论标本中加入试剂后，起始的散射光强度定为０，凝血过程完成时的散射光强度定为１００％，凝血时间定义为：在凝血过程实时曲线（凝血时间．散射光强度）上，５０％的散射光强度所对应的时间。关键词：凝血酶原时间；凝血分析仪；测定中图分类号：Ｒ４４６文献标识码：ＢＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７１－３１４１．２０１３．１６．１７９
２标本要求
２．１空腹取静脉血２．７ｍｌ，０．１０９ｍｏｌ／Ｌ枸橼酸钠抗凝，抗凝剂与全血比例１：９。２．２血浆标本４ ℃冰箱可保存不超过４小时口］。避免标本在采集和处理过程中发生溶血。２．３血细胞比容（ＨＣＴ）＞５５％时，抗凝剂与血液的比例须按公式：抗凝剂（ｍ１）＝（１００％一ＨＣＴ） ×血液（ｍ１） ×０．００１

血液凝血酶原时间(PT)作业指导书

血液凝血酶原时间（PT）作业指导书1.目的：建立血液凝血酶原时间（PT）检测标准操作规程，确保检测结果的准确。

2.范围：适用于检验科临检实验室。

3.规程：3.1 标本的采集与准备：3.1.1患者应停用影响凝血试验的药物至少一周。

3.1.2凝血试验的抗凝剂为0.109M枸橼酸钠,与血液的容积比为1:9。

3.1.3止血带使用时间要短。

3.1.4要使用高质量真空带盖采血管或硅化管或塑料管。

3.1.5采血必须顺利,避免溶血。

3.1.6凝血检测用的血标本应单独采集、立即分离血将,按规定的离心力除去血小板。

3.2 标本的储存：3.2.1有效时间为4℃24小时,20℃6小时,≥30℃4小时。

3.2.2从标本的采集到完成检测通常不宜超过2小时。

3.3 标本拒收标准：3.3.1血量与抗凝剂比例不符。

3.3.2放置太久的标本。

3.3.3混有肝素等污染物的标本。

3.3.4创伤性或留置导管的血标本以及凝血的标本不适宜。

3.3.5标本没有标签或没有姓名、病区、床号。

4 仪器：CA500全自动凝血仪。

5 原理：散射光凝固法检测原理——血浆样本经过一定时间的温育后，加入反应试剂，仪器采用波长为660nm的光照射反应物，通过测量散射光光强度的改变来测定凝血过程（纤维蛋白原转化为纤维蛋白）中的浊度变化，从散射光光强度的测定可得凝集曲线，再通过百分比原理方法求得凝血时间。

6 试剂：6.1组成：CA500公司专用配套试剂。

6.2储存：2～8℃保存。

7 标本检测：7.1. 开机：开打印机电源→开CA500仪器右侧电源→开机后机器进行自检、预热，当屏幕上显示“Ready”时可以进行试验.7.2.每日针冲洗：在主屏幕上选“Rinse Probe”，然后按下“Execute”进行针冲洗.7.3.准备试剂：按照仪器试剂位置设定，把每项的试剂准备好，放在相应的位置.7.4.准备反应杯：将杯架上每个位置排好反应杯.7.5.准备标本：将室内质控和离心好的样本放在相应的样本架上（一个架子可放10个样本），准备好放在进样器上.7.6.输入试验项目：按下主菜单上的“Work List”键，在试验项目键点击APTT，使APTT 项目下显示“—”变为“○”，按“↑或↓”将需要测试标本如上操作选择.7.7.输入样本号：按下“ID No.Entry”，按顺序输入样本的序号或病人的病历号.7.8.开始检测：待一切准备工作就绪，按下屏幕右上角“START”键，仪器开始检测.7.9.查看结果：返回主屏幕，检测的项目如果由“◎”变为“●”表明此试验已经完成，然后按下“Stored Date”（储存结果）键，屏幕会换到结果显示界面，按下边第一个菜单“G raph”，查看凝集曲线、吸光度、结果等，检查是否有Error错误信息，有错误报警的标本需考虑重测.7.10.关机前冲洗针：关机前需要洗针，按下“Rinse Probe”，然后按下“Execute”.7.11.关机：回到主屏幕下，切断仪器电源，关闭打印机。

凝血XL1000常规分析操作规程

凝血xl1000常规分析操作规程A3.2检测原理xl1000自动凝血分析仪，采用凝固法原理测定凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶时间（TT）、纤维蛋白原A3.3 检测项目xl1000自动凝血分析仪提供的检测项目分别为：凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间、纤维蛋白原A3.4 标本的采集及处理A3.4.1 静脉血采集除非是卧床病人，一般在采血时取坐位，体位影响水分在血管内外的分布，因此影响血红素、白细胞计数、红细胞计数、红细胞比积等的试验分析。

一般从肘静脉取血，婴幼儿可从颈静脉、股静脉取血。

使用止血带时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带，当需要重新使用止血带时应选用另一上臂。

A3.4.2 采血注意事项（1）穿刺要一针见血，避免淤血、气泡、溶血和组织液污染。

（2）如果使用真空采样管，以第二或第三管样品为佳。

（3）如果从导管取样，则需要用生理盐水冲洗管道，前面5 ml血不能使用。

（4）采血后立即与抗凝剂充分混合，尽快送到实验室。

（5）采血量必须准确，如果不足计划量的90％，则不能使用。

（6）不能在静脉穿刺部位或附近部位采样。

A3.4.3 标本处理（1）使用109 mmol/L枸橼酸钠溶液作为抗凝剂。

（2）血样与抗凝剂的比例为9:1，如果血球压积＜20％或＞55％，则需要调整这个比例，方法是0.00185×血液毫升数×（100－压积）=抗凝剂毫升数。

（3）血浆分离（如果不能立即测试，应尽快分离血浆）。

（4）采样后60分钟内进行离心，速度为3000 r/min，时间10～15分钟。

（5）盛血浆容器应加塞，防止pH改变。

（6）血浆存放时间不宜太久（8）与样品接触的所有器材（注射器，样品管，检测杯等）必须采用塑料或硅化玻璃材料。

（9）全部器材均不得含有去污剂或清洗剂。

A3.5.1凝血酶原时间（Prothrombin Time,PT）试剂配量：PT干粉试剂每瓶加复融液2ml，盖好盖子，轻轻旋转大约15秒，确定完全复溶。