医院凝血酶原时间(PT)测定凝固法操作规程

XXXX医院

凝血酶原时间(PT)测定凝固法操作规程

一、检验目的

二、工作原理

三、方法学溯源

四、试剂准备

五、标本采集及处理

六、室内质控

七、参考范围

八、危急值处理

九、报告审核制度

十、临床意义

一、检验目的：

血浆凝血酶原时间（PT）。

二、工作原理：

被测血浆加入带不锈钢球的检测杯内温育后，加入激活试剂血浆开始凝固，被测血浆粘度不断增加，不锈钢球在检测杯底沿弯曲的轨道运动逐渐减慢，并且振幅减小，此振幅的变化由数学算法通过计算得到凝固时间。

三、方法学溯源：

凝血酶原时间（PT）测定是Quick于1935年创立的。在受检血浆中加入过量的组织凝血活酶（人脑、兔脑、胎盘及肺组织等制品的浸出液）和钙离子，使凝血酶原变为凝血酶，后者使纤维蛋白原转变为纤维蛋白。观察血浆凝固所需要的时间即凝血酶原时间。其凝固时间取决于凝血因

子Ⅱ、Ⅶ、Ⅴ、Ⅹ、Ⅰ的水平。该试验是反映外源凝血系统最常用的筛选试验。线性范围：10-100%

四、试剂准备：

成分：兔脑来源凝血活酶、含钙溶液

贮存：冷藏2-8℃

按照试剂瓶标签上标明的量，用试剂2复溶半小时，使用前预温到室温（20－25℃）。

五、标本采集及处理：

1、采血步骤

（1）登记：登记的内容包括病人的姓名、病历号、采血时间、登记编号、送检部门等。

（2）识别病人：问清病人并识别病人是至关重要的。了解近期用药情况和特殊生理状况,并记录。例如阿斯匹林、潘生丁等药物能抑制血小板聚集；口服避孕药会使血小板粘附、聚集功能、纤维蛋白原及多种凝血因子活性明显增高；当剧烈运动或输注肾上腺素时Ⅶ因子活性会快速上升。应注明。

（3）病人的体位：坐位采血；卧位采血；采血时病人的口中不准含食物、口香糖或口表等，以防意外。

（4）选择适当的静脉，最宜采血的肘窝静脉，也可在腕，手，踝静脉采血。

2、注意事项:

（1）病人宜处于休息状态，并且在早餐前采血（乳糜血影响检测结

果）。

（2）针头不应小于21GAVGE。国际推荐用21G1.5或20G1.5号针头，确保针头与空针联接牢固，以免产生泡沬。如果采血时产生泡沫，可能导致纤维蛋白原和Ⅷ因子变性。

（3）抽血时要“一针见血”，如抽血过慢或不太顺利，将会影响检测结果。

（4）取样完毕，立即与抗凝剂充分混合，混合抗凝标本时需轻微的但彻底的混匀，因为纤维蛋白在剧烈振荡混匀时可能变性,一般轻轻的翻转5至10次，要避免用力振摇，以免标本溶血影响结果。

（5）采血的注射器应是硅化玻璃或塑料注射器，并要求收集管刻度精确，所有试管应与参比管一一比较，弃去所有不符合要求的试管。

（6）不可在输液侧手臂采血，更不宜在输液针头内抽血。采血前也不要拍打静脉。

3、抗凝剂的选择:

血液与抗凝剂的比例为9：1，并且应根据HCT调整抗凝剂比率；为了保证比例准确，推荐使用真空采血管含抗凝剂浓度为109MMOL/L的枸椽酸钠。

4、标本的送检:

（1）标本采取前先将标本编号贴在采血管上，采血后应进行核对。

（2）标本应带盖存放；存贮时间为2－8℃＜4小时；－20℃＜2周；－80℃＜6个月；因此取血后应及时送至实验室，以免检测结果受影响。

5、标本处理

(1) 检验人员收到标本后应首先逐个检查其是否符合检验要求。如果不符合检验要求的标本需通知临床重新采血。

(2) 包括抽血量不标准（过多或过少）、目测发现采血管中存在小血丝或小血块，如果排除病人体内自身溶血的情况，人为造成的溶血标本以及重度乳糜血的标本等。

(3) 核对化验单申请检验项目，编号登记。

(4) 标本应在采集后离心，离心力1500G，15分钟，4小时内检测。

六、室内质控：

1、质控检测完成后，到主菜单，进入质控画面查看质控结果。

2、质控结果判定：

采用L-J质控图

在±2SD内：合格。

2SD—3SD：找原因。

>±3SD ：失控，实验报告不能发出并启动室内质控失控程序(操作参照失控处理程序)。

要求室内质控的RCV：PT<5%，INR<7%，APTT<5%，Fbg<7%

七、参考范围：

凝血酶原时间PT-SEC：10－14.5 秒

国际标准化比率PT-INR：0.8-1.2

凝血酶原时间活动度 PT-%：80-120

八、危急值处理：

凡是PT>20S，且无使用抗凝药者。启动危急报告程序，记录电话报