核酸检测模式下的血液筛查.pdf
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郊外较远的采血点，配备水平离心机，实 验室人员对采血人员进行培训后，由采血 人员进行离心处理。
样本质量的保证
样品离心：采用大容量低温离心机，在 2-8℃条件3000g、离心２０分钟。
样品的开盖：离心后，样品放４℃冰箱 静置后。实验前在生物安全柜中进行开 盖。
混样至拆分检测其间,将样品放４℃冰 箱临时保存。
室内质控样本检测流程优化
原则:混样核酸检测系统不能采用单样本
检测模式，应与常规样本等同对待。在此 原则下,尽量节约试剂成本。
本实验室做法：室内质控样本与5个已知 NAT阴性样本混样检测，如整批混样均阴 性，则质控样本不进行拆分检测，如检 测样本有混样反应性，则质控样本与拆 分样本同时单样本拆分检测。
核酸检测实验室防污染的管理
防污染措施的执行到位及常规化 实验室污染的日常监控
• 外加阴性质控品、空白管 • 检测阳性率 • 有效拆分率（拆分阳性数占总混样阳
性数的比率）:混样CT≤36时的阳性拆 分率为95%以上 • 鉴别实验阳性率
室间质评样本检测流程优化
质控样本检测流程
原则:混样核酸检测系统不能采用单样本 检测模式，应与常规样本等同对待。
样本质量的保证
结果分析 与报告
样本采集：用
EDTA加分离胶的
采血管5ml
样本处理：4小
时内离心，然
后2-8°C保存
检测：在28°C保存不超 过48小时
样本运输：冷藏运 输
样本接收 然后28°C保存
样本质量的保证
首先制定了样品采集手册，并对采血人员 进行全员培训。强调了样品采集顺序及采 集后的充分混匀，必须颠倒混匀５次以上。
标本，拆分检测６５次,拆分率3.6‰。 １８３１份单采血小板标本，拆分检测３次,
拆分率1.6‰ ； ３15份单试剂有反应性的待复试标本，拆分检
测0次； 数据证实，采用的NAT检测工作模式合理可行。
检测流程的整合与优化
常规模式：运行至今，工作较顺畅
上午对前1天的全血标本进行2遍酶免检测。 下午将上午待复试的全血标本（单试剂有反应
核酸检测实验室防污染的管理
单向工作流向制度 严格执行实验室分区制度 仪器和材料的专用制度 安全的操作行为 实验室的清洁 建议制定一个《核酸检测实验室
的设置与管理》程序文件
核酸检测实验室防污染的管理
实验室污染的控制
实验室的“通风” 0.5%次氯酸钠溶液的使用 紫外照射 用70%无水乙醇溶液
常规血清学检测与NAT检测结果报告的融合
核酸检测模式下的血液筛查 及实验室管理
——江苏省血液中心 黄成垠
实验室质量管理应关注的几个方面
注重质量策划:围绕“质量原则”来进行，特 别是新技术(项目)的开展，更需要精心的质量 策划。
注重整体优化：接口管理，尽量减少接口。 强调预防为主：从管理“结果”向管理“因素”
转移。 强化过程概念：重视过程管理。 强调持续的质量改进：质量分析例会，内审，
单酶免试剂反应性样品核酸检测与血清学平 行检测模式。
检测流程的整合与优化
血液应急的核酸检测流程 常规血清学（酶免）和核酸平行检测
两者均阴性者马上进行血液放行 待查标本随后再进行相应处理。
检测流程的整合与优化
检测流程合理性的验证
２０１０年６月９日—１０月２０日统计 １８１１８份血清学检测（酶免和ALT）合格
本实验室的做法（供参考）
采用罗氏COBASs201和科华2套检测系统 实验室设置：
检测流程的整合与优化
单采血小板样品的核酸检测流程
调研分析：近3年单采血小板标本的 HBsAg、HCV抗体、HIV抗体3项检 测的总阳性淘汰率：双酶免试剂反应 性比例为0.7/10000、酶免单试剂反 应性比例为1.2/10000。
性）、酶免检测合格标本、当天采集的单采血 小板样品、手工血小板样品、应急Rh阴性血样 品同时进行混样核酸检测，在核酸提取及扩增 检测的空闲期，再进行酶免待复试标本及血小 板标本的酶免检测。
在此模式下，全血标本在采集36小时内能完成 检测，单采血小板样品、手工血小板样品、应 急Rh阴性血样品能在采集当天完成检测。
混样核酸检测与血清学（酶免）平行 检测模式。
检测流程的整合与优化
全血样本的核酸检测流程
调研分析： 10064样本NAT检测:EIA、NAT均阴性
9970例，均有反应性29例；EIA阴性、 NAT反应性10例； NAT阴性、 EIA单试 剂反应性41例；双试剂反应性15例。
单酶免试剂有反应性样品中没有发现NAT 阳性。表明单酶免试剂反应性、NAT阳性 标本的比例小于１／万。
标本的采集: 采用质量可靠的无DNA酶、 无RNA酶、带分离胶、EDTA-K2抗凝的无菌 真空采血管( BD PPT血浆制备管）。
样本质量的保证
为保证标本采集后能在4小时左右离心
对市内采血点采集的标本由专人用低温运 输箱冷链运送，每3个小时运送一次，集中 运送到实验室后，由实验室人员立即离心 处理。
实验室质量管理体系的整合
12个质量管理体系文件——
《核酸检测实验室的设置和管理》 《核酸检测实验室人员岗位职责》 《核酸实验室标本管理程序》 《安全与卫生、职业暴露的预防与控制程序》 《核酸实验室的消毒、清洁及废弃物处理程序》 《核酸实验室试剂、耗材管理程序》 《仪器与设备使用、维护和校准程序》 《检测结果分析、报告签发、记录及信息上报》 《核酸检测阳性标本的追踪和处理》 《 核酸检测实验室室内质量控制程序》 《核酸实验室室间质量考评程序》 《献血者核酸检测结果的解释程序》
所能采用的２种模式
质控样本与待检样本混样检测：混样无反应 性报阴性；有反应性进行拆分检测。
质控样本与NAT阴性样本混样检测：混样无 反应性报告阴性；反应性只对质控样本进行 单样本检测。
室间质评样本检测流程优化
２种检测模式的比较
质评样本与已知NAT阴性样本混样 检测的工作模式，即符合质评样本 按常规样本对待的原则，并且节约 试剂成本，不影响血液放行速度。
2个SOP文件——
《COBASs201核酸检测系统操作规程》 《 科华核酸检测系统操作规程》
实验室质量管理体系的整合
实验室质量管理体系整合一体
针对核酸检测实验室只保留:
• 核酸检测实验室的设置和管理 • COBASs201核酸检测系统操作规程 • 科华核酸检测系统操作规程
实验室管理信息系统的整合一体
外审，管理评审。 强调全员参与：注重对人的管理，因人设岗。
实验室质量管理—质量策划
依据:
国家相关的规范与标准 血站核酸检测实验室质量保证指南 血站质量管理规范 血站实验室质量管理规范 血站实验室的质量原则：安全，准确，
及时，有效和保护献血者隐私。 结合本实验室的具体情况
血站核酸检测的质量策划
实验室的设置及管理(安全性) 检测系统的调研及确定(准确性) 检测流程的优化(及时性)
RH阴性及血小板样品的检测 血液库存量不足下的核酸检测
质量控制(有效性)
样本质量的保证？ 实验室污染的控制？ 室内质控怎么做？ 室间质评样本怎么做？
Hale Waihona Puke Baidu算机信息管理系统(献血者隐私保护)
实验室的设置及管理
样本质量的保证
样品离心：采用大容量低温离心机，在 2-8℃条件3000g、离心２０分钟。
样品的开盖：离心后，样品放４℃冰箱 静置后。实验前在生物安全柜中进行开 盖。
混样至拆分检测其间,将样品放４℃冰 箱临时保存。
室内质控样本检测流程优化
原则:混样核酸检测系统不能采用单样本
检测模式，应与常规样本等同对待。在此 原则下,尽量节约试剂成本。
本实验室做法：室内质控样本与5个已知 NAT阴性样本混样检测，如整批混样均阴 性，则质控样本不进行拆分检测，如检 测样本有混样反应性，则质控样本与拆 分样本同时单样本拆分检测。
核酸检测实验室防污染的管理
防污染措施的执行到位及常规化 实验室污染的日常监控
• 外加阴性质控品、空白管 • 检测阳性率 • 有效拆分率（拆分阳性数占总混样阳
性数的比率）:混样CT≤36时的阳性拆 分率为95%以上 • 鉴别实验阳性率
室间质评样本检测流程优化
质控样本检测流程
原则:混样核酸检测系统不能采用单样本 检测模式，应与常规样本等同对待。
样本质量的保证
结果分析 与报告
样本采集：用
EDTA加分离胶的
采血管5ml
样本处理：4小
时内离心，然
后2-8°C保存
检测：在28°C保存不超 过48小时
样本运输：冷藏运 输
样本接收 然后28°C保存
样本质量的保证
首先制定了样品采集手册，并对采血人员 进行全员培训。强调了样品采集顺序及采 集后的充分混匀，必须颠倒混匀５次以上。
标本，拆分检测６５次,拆分率3.6‰。 １８３１份单采血小板标本，拆分检测３次,
拆分率1.6‰ ； ３15份单试剂有反应性的待复试标本，拆分检
测0次； 数据证实，采用的NAT检测工作模式合理可行。
检测流程的整合与优化
常规模式：运行至今，工作较顺畅
上午对前1天的全血标本进行2遍酶免检测。 下午将上午待复试的全血标本（单试剂有反应
核酸检测实验室防污染的管理
单向工作流向制度 严格执行实验室分区制度 仪器和材料的专用制度 安全的操作行为 实验室的清洁 建议制定一个《核酸检测实验室
的设置与管理》程序文件
核酸检测实验室防污染的管理
实验室污染的控制
实验室的“通风” 0.5%次氯酸钠溶液的使用 紫外照射 用70%无水乙醇溶液
常规血清学检测与NAT检测结果报告的融合
核酸检测模式下的血液筛查 及实验室管理
——江苏省血液中心 黄成垠
实验室质量管理应关注的几个方面
注重质量策划:围绕“质量原则”来进行，特 别是新技术(项目)的开展，更需要精心的质量 策划。
注重整体优化：接口管理，尽量减少接口。 强调预防为主：从管理“结果”向管理“因素”
转移。 强化过程概念：重视过程管理。 强调持续的质量改进：质量分析例会，内审，
单酶免试剂反应性样品核酸检测与血清学平 行检测模式。
检测流程的整合与优化
血液应急的核酸检测流程 常规血清学（酶免）和核酸平行检测
两者均阴性者马上进行血液放行 待查标本随后再进行相应处理。
检测流程的整合与优化
检测流程合理性的验证
２０１０年６月９日—１０月２０日统计 １８１１８份血清学检测（酶免和ALT）合格
本实验室的做法（供参考）
采用罗氏COBASs201和科华2套检测系统 实验室设置：
检测流程的整合与优化
单采血小板样品的核酸检测流程
调研分析：近3年单采血小板标本的 HBsAg、HCV抗体、HIV抗体3项检 测的总阳性淘汰率：双酶免试剂反应 性比例为0.7/10000、酶免单试剂反 应性比例为1.2/10000。
性）、酶免检测合格标本、当天采集的单采血 小板样品、手工血小板样品、应急Rh阴性血样 品同时进行混样核酸检测，在核酸提取及扩增 检测的空闲期，再进行酶免待复试标本及血小 板标本的酶免检测。
在此模式下，全血标本在采集36小时内能完成 检测，单采血小板样品、手工血小板样品、应 急Rh阴性血样品能在采集当天完成检测。
混样核酸检测与血清学（酶免）平行 检测模式。
检测流程的整合与优化
全血样本的核酸检测流程
调研分析： 10064样本NAT检测:EIA、NAT均阴性
9970例，均有反应性29例；EIA阴性、 NAT反应性10例； NAT阴性、 EIA单试 剂反应性41例；双试剂反应性15例。
单酶免试剂有反应性样品中没有发现NAT 阳性。表明单酶免试剂反应性、NAT阳性 标本的比例小于１／万。
标本的采集: 采用质量可靠的无DNA酶、 无RNA酶、带分离胶、EDTA-K2抗凝的无菌 真空采血管( BD PPT血浆制备管）。
样本质量的保证
为保证标本采集后能在4小时左右离心
对市内采血点采集的标本由专人用低温运 输箱冷链运送，每3个小时运送一次，集中 运送到实验室后，由实验室人员立即离心 处理。
实验室质量管理体系的整合
12个质量管理体系文件——
《核酸检测实验室的设置和管理》 《核酸检测实验室人员岗位职责》 《核酸实验室标本管理程序》 《安全与卫生、职业暴露的预防与控制程序》 《核酸实验室的消毒、清洁及废弃物处理程序》 《核酸实验室试剂、耗材管理程序》 《仪器与设备使用、维护和校准程序》 《检测结果分析、报告签发、记录及信息上报》 《核酸检测阳性标本的追踪和处理》 《 核酸检测实验室室内质量控制程序》 《核酸实验室室间质量考评程序》 《献血者核酸检测结果的解释程序》
所能采用的２种模式
质控样本与待检样本混样检测：混样无反应 性报阴性；有反应性进行拆分检测。
质控样本与NAT阴性样本混样检测：混样无 反应性报告阴性；反应性只对质控样本进行 单样本检测。
室间质评样本检测流程优化
２种检测模式的比较
质评样本与已知NAT阴性样本混样 检测的工作模式，即符合质评样本 按常规样本对待的原则，并且节约 试剂成本，不影响血液放行速度。
2个SOP文件——
《COBASs201核酸检测系统操作规程》 《 科华核酸检测系统操作规程》
实验室质量管理体系的整合
实验室质量管理体系整合一体
针对核酸检测实验室只保留:
• 核酸检测实验室的设置和管理 • COBASs201核酸检测系统操作规程 • 科华核酸检测系统操作规程
实验室管理信息系统的整合一体
外审，管理评审。 强调全员参与：注重对人的管理，因人设岗。
实验室质量管理—质量策划
依据:
国家相关的规范与标准 血站核酸检测实验室质量保证指南 血站质量管理规范 血站实验室质量管理规范 血站实验室的质量原则：安全，准确，
及时，有效和保护献血者隐私。 结合本实验室的具体情况
血站核酸检测的质量策划
实验室的设置及管理(安全性) 检测系统的调研及确定(准确性) 检测流程的优化(及时性)
RH阴性及血小板样品的检测 血液库存量不足下的核酸检测
质量控制(有效性)
样本质量的保证？ 实验室污染的控制？ 室内质控怎么做？ 室间质评样本怎么做？
Hale Waihona Puke Baidu算机信息管理系统(献血者隐私保护)
实验室的设置及管理