核酸检测模式下的血液筛查.pdf
核酸扩增技术在血液筛查中的应用研究
核酸扩增技术在血液筛查中的应用研究摘要：目的探究采用核酸扩增技术进行血液筛查的应用价值。
方法选取2013年6月—2014年4月在我献血站进行无偿献血者的血液标本32202例，且按筛选方法分为实验组和对照组。
实验组采用双试剂酶联免疫吸附试验（ELISA）对血液进行筛查，对照组采用核酸扩增技术（NAT）对血液进行筛查。
将两组标本的筛查结果进行统计学比较。
结果实验组32202例中检出HBV DNA阳性286例，其阳性检出率为1.77%，对照组32202例中检出HBV DNA阳性346例，其阳性检出率为2.15%。
结论 NAT对HBV DNA的阳性检出率明显高于ELISA，不仅避免了血液筛查中漏检情况的出现，很大程度上降低了输血传播疾病的风险，而且保证了临床上的输血安全，值得在临床上推广应用。
关键词：核酸扩增技术；血液筛查；窗口期；输血安全随着社会经济的快速发展，因输血引起的相关传染病的预防和控制已经引起了全社会的高度关注，而预防和控制输血相关传染病的源头就是要对献血者的血液标本进行严格的筛查。
双试剂酶联免疫吸附试验，临床上简称ELISA，是在免疫酶技术基础上发展而来的一种免疫测定技术，其过程包括抗原（抗体）吸附在固相载体上为包被，加待测抗体（抗原），再加相应酶标记抗体（抗原），生成抗原（抗体）--待测抗体（抗原）--酶标记抗体（抗原）的复合物，再与该酶的底物反应生成有色产物，最终借助分光光度计的光吸收计算抗体（抗原）的量。
待测抗体（抗原）的定量与有色产物的生成量成正比[1]。
核酸扩增技术，临床上简称NAT，包括聚合酶链反应技术、荧光定量PCR技术和其他核酸扩增技术（核酸序列依赖性扩增、连接酶链反应和分枝DNA信号放大系统），其中最主要且最常用的是聚合酶链反应技术，其基本原理类似于DNA的体内复制，首先将待扩增的DNA模板加热至变性解链，随之将反应混合物冷却至一定的温度，且这一温度可将引物与它的靶序列发生退火，之后再将温度升高使退火引物在DNA聚合酶的作用下延伸，这个过程就是PCR的一个循环，也就是说这种循环在适合的条件下是不断重复的[2]。
ELISA检测方法与核酸检测在献血者血液筛查中的相关性研究
ELISA检测方法与核酸检测在献血者血液筛查中的相关性研究摘要：目的分析血液筛查中ELISA检测方法与核酸检测的相关性，研究ELISA检测联合核酸检测的必要性。
方法以2016年03月-2017年03月内我站获取的8000份无偿献血者血样为研究对象，分别利用ELISA检测、核酸检测对血液进行筛查，比较两种检测结果的差异性。
结果经ELISA检测，8000份血样中有120例血样呈阳性，占总血样数的1.5%，其中ELISA检测的HIV阳性率为0.13%；经核酸检测，8000份血样中有8例血样呈阳性，占总血样数的0.1%，且两组比较差异无统计学意义（P>0.05）；ELISA检测阴性中有2例于核酸检测下呈阳性，有8例阳性于核酸检测下呈阴性，充分说明ELISA检测存在漏检问题，且为0.13%。
结论在血液检测方面，ELISA检测方法与核酸检测都能够发挥出良好的检测效果，但是与核酸检测相比，ELISA检测存在一定的漏检率，因而在落实血液筛查时，应使用ELISA检测联合核酸检测，以降低漏检率，提高血液安全性。
关键词：ELISA检测；核酸检测；血液筛查；漏检率ELISA检测是一种具备快速、廉价、灵敏特性的血清学诊断方法，在乙型病毒性肝炎检测方面应用广泛[1]。
核酸检测是近年来兴起的一种能够针对乙肝病毒展开的新型检测手段，因为更直接，检测效果更具可靠性[2]。
为了分析血液筛查中ELISA检测方法与核酸检测的相关性，研究ELISA检测联合核酸检测的必要性，本实验以我站获取的8000份无偿献血者血样为研究对象进行实验，现将实验结果报道如下：1 资料与方法1.1 一般资料本试验的研究对象是2016年03月-2017年03月内我中心获取的8000份无偿献血者血样，包含初次献血者3793人、多次献血者（两次及两次以上者）4207人，献血者中男性4597例，女性3403例，献血者年龄19.5-51.0岁，平均（38.5±2.8）岁。
献血人员血液筛查中核酸检测技术的应用
ＤＮ Ａ阳性患者有０ 例 。１ １ 份 为ＮＡ Ｔ 阳性且Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ阴性标本 ， 选取２ ０ １ ４ 年１ ２ 月￣２ ０ １ ６ 年１ １ 月本血站献血者的血液标本 诺华 鉴别试剂 鉴别率为５ ５ ％左右 ，所 以仅有６ 份标 本具备鉴 １ ０ ０ ０ 例作为研究对象。 别结果 。
【 中图分类号 】Ｒ ４ ４ ６ ． ６
【 文献标识码 】Ｂ
【 文章 编号 】 Ｉ Ｓ Ｓ Ｎ ． ２ ０ ９ ５ ． ８ ２ ４ ２ ． ２ ０ １ ７ ． １ ５ ． ２ ８ ５ １ ． ０ ２
对 献 血 人 员 进 行血 液 筛 查 ， 主 要为 了保 证 血 制 品 安 个 星 期 开 展 一 次 鉴 别 试 验 。 全 、 确保 血 液 安 全 。检 测 常用 的方 法 是 酶联 免 疫 吸 附法 （ Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ），其检 测得 到的结 果为抗 原抗 体 ，不过 因为感 染有 较长 的窗 口期 、病毒会 发生变 异 ，可能存 在隐 匿性感 染 ，所 以 临床 输 血 的 安 全 仍 无 法 足 够 保 证 ＿ 】 】 。本 研 究 主 要 分析核酸检测技术应用于献血人 员血液筛查 中的效 果。
阴性有 ｌ １ 份 。鉴别检验 联检初 筛阳性标本ＨＢ Ｖ － Ｄ ＮＡ阳性 ２ 例 ，ＨＩ ｖ ． １ Ｒ ＮＡ阳性 １ 例 ，ＨＣ Ｖ － Ｄ ＮＡ阳性０ 例 。结 论 核酸检测技术能够有效减 少献血者感 染窗口期和 隐匿感染献血 导致 的疾病传播 ，提 高输血安全性。
【 关 键 词 】献 血 人 员 ；血 液 筛查 ；核 酸 检 测 技 术 Байду номын сангаас
２ ０ １ ７年 第 ４卷 第 １ ５期
２ ０１ ７ Ｖｏ ｌ Ｊ ４ ＮＯ。 １ ５
核酸检测与酶免检测平行筛查血液在基层血站的应用效果李明涛
核酸检测与酶免检测平行筛查血液在基层血站的应用效果李明涛发布时间：2023-07-06T04:45:31.268Z 来源：《医师在线》2023年7期作者：李明涛[导读] 目的分析核酸检测与酶免检测平行筛查血液在基层血站的应用效果。
方法选取2020年10月-2022年10月本基层血站接收的80例无偿献血者，所有献血者均采用核酸检测与酶免检测进行平行筛查，分析两种检测方式的阳性检出率。
结果采用酶免检测方式对标本进行血液检测，不合格标本有11例，不合理率为13.75%。
采用核酸检测方式，检测出阳性反应的样本有9例，阳性率为13.04%。
云南省昭通市中心血站 657000摘要：目的分析核酸检测与酶免检测平行筛查血液在基层血站的应用效果。
方法选取2020年10月-2022年10月本基层血站接收的80例无偿献血者，所有献血者均采用核酸检测与酶免检测进行平行筛查，分析两种检测方式的阳性检出率。
结果采用酶免检测方式对标本进行血液检测，不合格标本有11例，不合理率为13.75%。
采用核酸检测方式，检测出阳性反应的样本有9例，阳性率为13.04%。
结论两种检测方式优势各异，将二者结合，能够发挥相互补充、相辅相成的作用。
在基层血站中同时运用这两种检测方式，能够有效提高阳性检出率，既保证了采集血液的有效性和安全性，又能够对血液疾病的传播起到很好的预防和控制作用。
关键词：核算检测；酶免检测；筛查；基层血战血液是病毒传播的重要渠道，对于基层血站工作而言，做好病毒防控，阻断其传播路径，保证血液安全是重中之重。
为了实现这一目标，在进行输血治疗之前，需要对血液进行筛查，目的是明确血液中是否存在传播病原体，致力于为患者提供安全有效的血液制品[1]。
酶免是基层血站常用的一种检测手段，对一些常见的传播性病毒有着很高的敏感度，如艾滋病毒、乙肝病毒等，在血液传染性病毒预防和控制中发挥着十分重要的作用。
不过，这种检测方式有着一定弊端，直接影响了其筛查效果的准确度。
血清学与核酸检测对献血者血液筛查结果的对比分析
１ 资 料和 方 法
１ ． １ 一般 资料 选择 自 ２ ０ １ ５年 ８ —１ Ｏ月在 我 站 进行 无 偿 献 血
的标 本 ２ ０ ０ ０份 进行研 究 ， 男１ ２ ４ ６ 例， 女７ ５ ４例 ； 年
龄 ２ ０ ￣５ ５岁 ， 平均 （ ３ ４ ． １ ±２ ． ３ ） 岁 。献 血 者 入 选 标 准： （ １ ） 询 问患者无 肝 炎性疾 病 ， 如 甲肝 、 乙肝 和丙 肝
医疗用 血安 全直 接和受 血者 健康 及 预后 情 况相
关， 确 保安 全输 血 一 直 以来 都 是 采 供 血 机 构 的 工作 重点 。由于部分 献 血 者 自身 血液 中存 在 病 毒 ， 会 导 致受 血者 感染 相 关疾 病 。因此 ， 对 输 血 相 关 型传 染 性疾 病 的预 防 以及 控 制工 作 ， 受 到 高度 关 注 。通 常 情况 下 ， 采 供 血 机 构 通 过 ＨＢ ｓ Ａｇ 、 抗一 ＨＣ Ｖ、 梅 毒螺 旋体 以及 抗一 ＨＩ Ｖ 血 清 学 检查 方 式 对 献 血 血样 实施 筛查 ， 根据 其 中病毒 抗原或 者抗 体蛋 白等存 在 情况 ， 直接 或者 间接性 判 断其是 否存 在病 毒感 染 。但 经研 究发 现 ， 抗 体检 测法 对 已发 生病 毒感 染但 仍 处在 “ 窗 口期 ” 内的献血 者检 测灵 敏度较 低 ， 容 易造 成漏 检 风 险， 进而 提升输 血性 传染病 发 生率 ［ １ ］ 。有 学者 指 出 ， 核 酸检测 有 助于 缩 短 血液 感 染 病 毒 窗 口期 ， 并 且 灵
文 献标 志 码 ： Ａ 文章编号 ： １ ０ ０ ５ — ９ ３ ０ Ｘ（ ２ ０ １ ７ ） ０ ３ — ０ ４ ５ ２ — ０ ３
探讨核酸检测与酶联免疫吸附试验技术在血液筛查工作中的应用
世界最新医学信息文摘 2019年 第19卷 第55期367投稿邮箱：zuixinyixue@·临床荟萃·探讨核酸检测与酶联免疫吸附试验技术在血液筛查工作中的应用黄戌燕（北京市密云区医院 输血科，北京 101500）0 引言输血传播感染性疾病的防控是确保临床输血安全性的有效措施。
能够有效处理病毒感染的窗口期问题，已经成为血液筛查技术的关键内容。
核酸检测和酶联免疫吸附试验是当前临床上血液筛查的有效措施，能够全面确保输血安全性，并且提升输血质量[1]。
此次研究主要是探讨分析探讨核酸检测与酶联免疫吸附试验技术在血液筛查工作中的应用，现将此次研究报告作如下汇报。
1 资料与方法1.1 一般资料。
选取2016年1月至2018年12月XXX 血站的10571例无偿献血患者，其中有6273例为男性血液标本，4298例女性血液标本，年龄23-56岁，平均（36.12±3.74）岁。
采集无偿献血者血液并且留取两管血液标本，用于进行核酸检测和酶联免疫吸附试验。
将血液标本进行离心处理，并且在4摄氏度上进行保存待检，在72h 内检测。
所有献血者均签署无偿献血协议，本研究已经获得本站伦理委员会批准。
1.2 仪器与试剂1.2.1 仪器：全自动混样仪，全自动核酸提取，扩增检测系统，核酸扩增检测仪，核酸提取仪，酶联免疫吸附试验分析仪。
1.2.2 试剂：酶联免疫吸附试验试剂：HBsAg ，抗-HCV ，抗-HIV 。
HBV-DNA ，HIV-RNA ，HCV-RNA ，三联合提取试剂和检测试剂[2]。
1.3 方法。
①酶联免疫吸附试验技术：使用两个不同生产厂家酶联免疫吸附试剂盒，并且按照试剂盒说明进行平行检测；阳性标准：使用两种试剂对标本进行HBsAg ，抗-HCV ，抗-HIV 的检测结果均表示为阳性；阴性标准：两种试剂对标本进行HBsAg ，抗-HCV ，抗-HIV 的检测结果均表示为阴性[3]。
②核酸检测：按照试剂盒说明书和仪器实行HBV-DNA ，HIV-RNA ，HCV-RNA 检测。
不同血液筛查核酸检测模式检测结果的分析
作者简介:刘淼,女,主管技师,主要从事临床检验研究㊂网络首发 h t t p://k n s .c n k i .n e t /k c m s /d e t a i l /50.1167.R.20230727.1749.012.h t m l (2023-07-28)㊃论 著㊃D O I :10.3969/j.i s s n .1672-9455.2023.16.016不同血液筛查核酸检测模式检测结果的分析刘 淼,潘 彤,王 霞天津市血液中心检验科,天津300110摘 要:目的 分析不同血液筛查核酸检测系统的初筛及鉴别/拆分阳性率,探讨不同系统间实验过程的差异和影响因素,为血站制订血液筛查策略,降低输血传播疾病的残余风险提供依据㊂方法 采用核酸单检模式和核酸混检模式分别对512267㊁172254份标本进行核酸检测,对两种不同模式初筛阳性率和鉴别/拆分阳性率进行统计分析,比较两种检测模式的差异及不同年度间阳性率的变化情况㊂结果 采用核酸单检模式检测的512267份标本中,单检初筛阳性率为0.17%,鉴别阳性率为36.45%;2019年初筛阳性率最高,为0.19%,2021年最低,为0.14%;不同年度间鉴别阳性率比较,差异无统计学意义(P >0.05)㊂核酸混检模式检测的172254份标本(约23700p o o l )中,混检阳性率为0.58%,拆分阳性率为40.15%;2018年初筛阳性率最高,为0.84%,大于2020年初筛阳性率的两倍;不同年度间拆分阳性率比较,差异有统计学意义(P <0.05),2020年拆分阳性率最高为68.00%,2021年最低,为31.58%㊂核酸混检模式初筛阳性率大于核酸单检模式初筛阳性率的3倍,而二者鉴别/拆分阳性率比较,差异无统计学意义(P >0.05)㊂结论 不同核酸检测模式初筛阳性率和鉴别/拆分阳性率的比较可以有效评估实验室核酸检测系统的稳定性,分析探讨产生差异的原因并寻求解决方案,可达到质量持续改进的目的㊂关键词:核酸检测; 核酸混检; 核酸单检中图法分类号:R 446.9文献标志码:A文章编号:1672-9455(2023)16-2375-04A n a l y s i s o f d e t e c t i o n r e s u l t s o f d i f f e r e n t n u c l e i c a c i d d e t e c t i o n m o d e s f o r b l o o d s c r e e n i n gL I U M i a o ,P A N T o n g ,WA N G X i a T i a n j i n B l o o d C e n t e r ,T i a n ji n 300110,C h i n a A b s t r a c t :O b je c t i v e T o a n a l y z e t h e p r e l i m i n a r y s c r e e n i n g r e s u l t s a n d i d e n t if i c a t i o n /r e s o l u t i o n p o s i t i v e r a t e s o f d i f f e r e n t n u c l e i c a c i d d e t e c t i o n s y s t e m s f o r b l o o d s c r e e n i ng ,a n d t o e x p l o r e th e di f f e r e n c e s i n t h e e x -p e r i m e n t a l p r o c e s s a n d i n f l u e n c i n g f a c t o r s a m o n g d i f f e r e n t s ys t e m s ,s o a s t o p r o v i d e e v i d e n c e f o r b l o o d s t a -t i o n s t o f o r m u l a t e b l o o d s c r e e n i n g s t r a t e gi e s a n d r e d u c e t h e r e s i d u a l r i s k o f t r a n s f u s i o n -t r a n s m i t t e d d i s e a s e s .M e t h o d s D u e t o t h e d i f f e r e n t d e t e c t i o n r e q u i r e m e n t s ,512267a n d 172254s a m p l e s w e r e p e r f o r m e d b y s i n g l e d e t e c t i o n m o d e a n d m i x e d d e t e c t i o n m o d e r e s p e c t i v e l y i n t h e s a m p l e s o f u n p a i d b l o o d d o n o r s i n T i a n ji n .T h e p o s i t i v e r a t e o f t h e p r e l i m i n a r y s c r e e n i n gr e s u l t s a n d t h e p o s i t i v e r a t e o f t h e i d e n t i f i c a t i o n /r e s o l u t i o n r e s u l t s o f t h e t w o d i f f e r e n t m o d e s w e r e s t a t i s t i c a l l y a n a l yz e d ,t h e d i f f e r e n c e s b e t w e e n t h e t w o d e t e c t i o n m o d e s a n d t h e c h a n g e s o f t h e p o s i t i v e r a t e o f d e t e c t i o n i n d i f f e r e n t y e a r s w e r e c o m p a r e d .R e s u l t s A m o n g 512267s a m pl e s d e t e c t e d b y n u c l e i c a c i d s i n g l e d e t e c t i o n m o d e ,t h e p o s i t i v e r a t e o f s i n g l e d e t e c t i o n w a s 0.17%,a n d t h e p o s i t i v e r a t e o f i d e n t i f i c a t i o n w a s 36.45%,t h e p o s i t i v e r a t e o f s c r e e n i n g w a s t h e h i g h e s t i n e a r l y 2019(0.19%),a n d t h e l o w e s t i n 2021(0.14%),t h e r e w a s n o s i gn i f i c a n t d i f f e r e n c e o n p o s i t i v e r a t e b e t w e e n d i f f e r e n t y e a r s (P >0.05).T h e p o s i t i v e r a t e o f m i x e d d e t e c t i o n w a s 0.58%a n d t h e p o s i t i v e r a t e o f r e s o l u t i o n w a s 40.15%i n 172254s a m p l e s (a b o u t 23700p o o l )d e t e c t e d b y m i x e d d e t e c t i o n m o d e .T h e p o s i t i v e r a t e o f s c r e e n i n g i n e a r l y2018w a s t h e h i gh e s t ,w i t h a p o s i t i v e r a t e o f 0.84%,w h i c h w a s m o r e t h a n t w i c e o f 2020,t h e d i f f e r e n c e o f r e s o -l u t i o n p o s i t i v e r a t e a m o n g d i f f e r e n t y e a r s w a s s t a t i s t i c a l l y s i g n i f i c a n t (P <0.05),t h e h i gh e s t r e s o l u t i o n p o s i -t i v e r a t e w a s 68.00%i n 2020,a n d t h e l o w e s t w a s 31.58%i n 2021.T h e i n i t i a l s c r e e n i n g po s i t i v e r a t e o f m i x e d n u c l e i c a c i d t e s t w a s a l m o s t 3t i m e s t h a t o f s i n g l e n u c l e i c a c i d t e s t ,b u t t h e r e w a s n o s i gn i f i c a n t d i f f e r e n c e i n i -d e n t i f i c a t i o n /r e s o l u t i o n p o s i t i v e r a t e b e t w e e n t h e t w o m o d e s (P >0.05).C o n c l u s i o n T h e c o m pa r i s o nb e -t w e e n t h e p o s i t i v e r a t e o f i n i t i a l sc r e e n i n g an d t h e p o s i t i v e r a t e o f i d e n t i f i c a t i o n /r e s o l u t i o n o f d i f f e r e n t n u c l e i c ㊃5732㊃检验医学与临床2023年8月第20卷第16期 L a b M e d C l i n ,A u gu s t 2023,V o l .20,N o .16Copyright ©博看网. All Rights Reserved.a c i d d e t e c t i o n m o d e s c a n e f f e c t i v e l y e v a l u a t e t h e s t ab i l i t y o f l a b o r a t o r y n uc l e i c a c id de t e c t i o n s y s t e m s,a n a l y z e a n d d i s c u s s t h e c a u s e s of d i f f e r e n c e s,a n d s e e k s o l u t i o n s t o a c h i e v e t h e p u r p o s e o f c o n t i n u o u s q u a l i t y i m p r o v e-m e n t.K e y w o r d s:n u c l e i c a c i d d e t e c t i o n;n u c l e i c a c i d m i x e d d e t e c t i o n;n u c l e i c a c i d s i n g l e a s s a y输血作为一种不可替代的医学治疗手段,已被广泛应用于临床,随着医疗技术的发展,各种血液制品的临床需求也在日益增加㊂然而,输血同时也存在一定感染经血液传播疾病(T T I)的风险[1]㊂近年来,输血安全一直是全球关注的重点问题,2015年底我国实现了血站核酸检测全覆盖[2],使T T I的发生率明显下降㊂本中心核酸检测实验室根据检测需求的不同采用两种核酸检测模式,即核酸单检模式和核酸混检模式[聚合酶链反应(P C R)],本研究对两种检测模式的初筛阳性率和鉴别/拆分阳性率的数据进行分析,客观评价两种检测模式检测结果的差异性,为血站制订血液筛查策略,降低T T I感染率提供依据㊂1材料与方法1.1标本来源选取天津市血液中心2018-2021年无偿献血者共计684521份标本为研究对象,其中采用核酸单检模式检测标本512267份,核酸混检模式检测标本172254份(约23700p o o l)㊂1.2仪器与试剂盖立复P r o c l e i x T i g r i s S y s t e m核酸检测系统和相应P r o c l e i x U l t r i o P l u s分析试剂;盖立复P r o c l e i x P a n t h e r S y s t e m核酸检测系统和相应P r o c l e i x U l t r i o E l i t e分析试剂;上海浩源C h i T a S B S S1200核酸检测系统和配套试剂;罗氏C o b a s S201核酸检测系统和配套C o b a s T a q S c r e e n M P X T e s t, v e r s i o n2.0试剂;盖立复核酸检测试剂孵育器㊂1.3方法根据血站采供血业务系统S H I N OW V9.0对检测数据进行回顾性分析,计算两种检测模式初筛的阳性率和鉴别/拆分阳性率,比较两种模式检测结果的差异,以及同一种检测模式不同年度间阳性率,对结果进行综合分析,找出造成差异的原因㊂1.4统计学处理采用S P S S23.0统计软件进行数据处理及统计分析㊂计数资料以例数或百分率表示,组间比较采用χ2检验㊂以P<0.05为差异有统计学意义㊂2结果2.1两种检测模式初筛结果和鉴别/拆分结果的比较2018-2021年共检测标本684521份,其中采用核酸单检模式检测标本512267份,单检初筛阳性率为0.17%,鉴别阳性率为36.45%;核酸混检模式检测标本172254份(约23700p o o l),混检初筛阳性率为0.58%,拆分阳性率为40.15%㊂两种模式初筛阳性率比较,差异有统计学意义(χ2=202.475,P<0.001),核酸混检模式初筛阳性率为核酸单检模式的3倍㊂两种模式鉴别/拆分阳性率比较,差异无统计学意义(χ2=0.695,P=0.405)㊂见表1㊂表1两种核酸检测模式初筛及鉴别/拆分结果比较[%(n/n)]模式初筛阳性鉴别/拆分阳性核酸单检模式0.17(867/512267)36.45(316/867)核酸混检模式0.58(137/23700)40.15(55/137) 2.22018-2021年核酸单检模式初筛和鉴别结果比较核酸单检模式中,不同年度间初筛阳性率比较,差异有统计学意义(χ2=14.694,P=0.002),2019年初筛阳性率最高,为0.19%,2021年初筛阳性率最低,为0.14%;不同年度间鉴别阳性率比较,差异无统计学意义(χ2=3.806,P=0.283)㊂见表2㊂表2不同年度间核酸单检模式初筛及鉴别结果比较[%(n/n)]年度(年)初筛阳性鉴别阳性20180.18(254/140874)40.55(103/254) 20190.19(274/141379)35.77(98/274) 20200.16(175/109014)31.43(55/175) 20210.14(164/121000)36.59(60/164)2.32018-2021年核酸混检模式初筛和拆分结果比较核酸混检模式中,不同年度间初筛阳性率比较,差异有统计学意义(χ2=13.613,P=0.003),2018年初筛阳性率最高,为0.84%,大于2020年初筛阳性率的两倍;不同年度间拆分阳性率比较,差异有统计学意义(χ2=10.140,P=0.017),2020年拆分阳性率最高,为68.00%,2021年拆分阳性率最低,为31.58%㊂见表3㊂表3不同年度间核酸混检模式初筛及拆分结果比较[%(n/n)]年度(年)初筛阳性拆分阳性20180.84(33/3942)36.36(12/33) 20190.49(22/4487)36.36(8/22) 20200.35(25/7123)68.00(17/25) 20210.70(57/8184)31.58(18/57)3讨论随着核酸检测与酶联免疫吸附试验技术在血液㊃6732㊃检验医学与临床2023年8月第20卷第16期 L a b M e d C l i n,A u g u s t2023,V o l.20,N o.16Copyright©博看网. All Rights Reserved.筛查中的互补应用,人类免疫缺陷病毒㊁乙型肝炎病毒㊁丙型肝炎病毒等病原体感染的献血者被最大限度检出,为临床输血安全提供了重要保障㊂与酶联免疫吸附试验相比,核酸检测技术抗干扰能力弱,但对环境㊁人员及设备等要求更高[3]㊂‘血站实验室质量管理规范“规定,血站实验室必须建立和持续改进实验室质量体系,并负责组织实施和严格监控[4]㊂通过对血站核酸实验室核酸检测初筛阳性率及鉴别/拆分阳性率的统计分析,可以有效评估两种核酸检测系统的稳定性及所使用核酸试剂的性能,同时,阳性率的统计也是评价核酸检测实验室检测能力的重要工具之一[5]㊂基于自身检验流程和成本控制等因素综合考虑,本中心采用核酸单检模式和核酸混检模式相结合的核酸检测模式㊂2018-2021年共检测标本684521份,其中采用核酸单检模式检测标本512267份,单检阳性率为0.17%,略低于广州地区的0.23%[6],鉴别阳性率为36.45%,低于王素玲等[7]报道的京津冀地区检测结果;2018-2021年初筛阳性率总体有所下降,2019年核酸单检模式初筛阳性率最高,2021年最低,鉴别阳性率4年间比较,差异无统计学意义(P> 0.05)㊂核酸混检模式检测标本172254份(约23700 p o o l),混检初筛阳性率为0.58%,高于河北地区的0.12%[8]㊁宝鸡地区的0.15%[9],拆分阳性率为40.14%,低于张丽等[5]报道的京津冀地区检测结果的平均值48.94%,2020年核酸混检模式初筛阳性率最低,且拆分阳性率最高㊂核酸混检模式初筛阳性率大于核酸单检模式初筛阳性率的3倍,而二者鉴别/拆分阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05)㊂不同检测模式㊁不同地区㊁不同时间阳性率的差异可能与以下因素有关:(1)核酸单检模式初筛阳性率远低于核酸混检模式,但二者鉴别/拆分阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05),可以说明单人份核酸检测灵敏度高于混样核酸检测,符合试剂说明书内容㊂(2)由于核酸检测系统反应原理不同,系统设计和操作流程各有差异㊂核酸单检系统是集核酸提取㊁扩增和检测于一体的全自动检测系统,干扰因素少; P C R系统的提取与扩增检测是两个独立的系统,人工操作环节较多,易造成污染和核酸的降解,导致检测结果出现波动㊂美国临床和实验室标准协会(C L S I)-G P35D文件指出,若混检阳性率出现升高,应观察拆分阳性率,若拆分阳性率出现降低,提示实验室在检测过程中存在污染的风险,此时应排查造成污染的可能性,对各个操作步骤进行规范[10]㊂本研究发现本中心2021年核酸混检模式初筛阳性率较高,但拆分阳性率明显低于其他年份,对当年混检结果进行分析发现2021年6月开始连续存在混检阳性但拆分无反应的现象,并且混检C t值均在40左右,提示实验过程可能存在污染,在对实验室和环境进行消杀后此现象有所缓解㊂(3)核酸单检模式初筛阳性标本的鉴别周期不同,标本的保存温度㊁时间与病毒核酸载量有关,标本保存及处理环节不当或干扰物质的存在,可能导致病毒降解,降低鉴别试验中病毒的检出率㊂因此,在综合实验室条件和成本效率的情况下,应尽量缩短单检阳性标本的鉴别周期㊂本中心自2019年末,将核酸单检模式鉴别周期由7d缩短为3~4d㊂(4)因病毒颗粒在标本中呈P o i s s o n分布[11],吸取标本的随机性导致检测结果呈现非重复性反应,如果病毒处于试剂检测限以下或极低水平,吸取到病毒的概率就会更低,从而可能会出现初筛有反应性,鉴别/拆分假阴性的可能,此时应结合初筛阳性值和曲线分析是否需要重新进行鉴别或拆分检测[12]㊂(5)不同年度间的标本基数不同,人群分布的地域性差异导致病毒检出率有所不同㊂(6)与当地的病毒感染情况相关,有研究证明初筛有反应性而鉴别/拆分无反应性标本中,有一定比例的低载量病毒标本[13-14]㊂(7)人为差错造成假阳性,核酸检测人员的责任心㊁工作熟练度可直接影响核酸检测结果的真实性和准确性㊂因此,血站应对实验室检测人员定期进行理论知识和技术培训㊂核酸检测实验室应从人员㊁仪器㊁物料和环境等多个方面防治污染,保证检测结果的可靠性㊂本研究通过对两种模式核酸检测技术进行分析发现,无论是两种模式初筛阳性率,还是相同模式不同年度间的阳性率比较,差异均有统计学意义(P< 0.05)㊂因此,实验室应对每批检测结果进行有效监控,从 人㊁机㊁料㊁法㊁环 等方面对影响试验结果的不稳定因素进行及时干预,保障检测结果的可靠性和稳定性,最大限度地保证血液安全㊂参考文献[1]曹华琳,刘亚军,等.核酸检测与酶联免疫检测对输血相关传染疾病的检测效果对比分析[J].心脑血管病防治, 2019,19(2):171-173.[2]中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会.血站技术操作规程(2019版):国卫医发[2019]98号附件[S].北京:中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会,2019.[3]中国输血协会.血站血液检测实验室质量检测指标:T/C S B T004-2019[S].北京:中国输血协会,2019.[4]中华人民共和国卫生部.血站实验室质量管理规范:(卫医发:[2006]183号)[S].北京:中华人民共和国卫生部,2006.[5]张丽,张毓,王学刚,等.京津冀血站实验室核酸混检模式拆分阳性率分析[J].中国输血杂志,2020,33(4):299-302.(下转第2382页)㊃7732㊃检验医学与临床2023年8月第20卷第16期 L a b M e d C l i n,A u g u s t2023,V o l.20,N o.16Copyright©博看网. All Rights Reserved.和展望[J].器官移植,2022,13(1):105-110.[4]MA S U D A Y,Y O S H I Z AWA K,OHN O Y,e t a l.S m a l l-f o r-s i z e s y n d r o m e i n l i v e r t r a n s p l a n t a t i o n:d e f i n i t i o n,p a t h o p h y s i o l o g y a n d m a n a g e m e n t[J].H e p a t o b i l i a r y P a n-c r e a t D i s I n t,2020,19(4):334-341.[5]L A R S E N F S.A r t i f i c i a l l i v e r s u p p o r t i n a c u t e a n d a c u t e-o n-c h r o n i c l i v e r f a i l u r e[J].C u r r O p i n C r i t C a r e,2019,25(2):187-191.[6]MO R E A U R,G A O B,P A P P M,e t a l.A c u t e-o n-c h r o n i c l i v e r f a i l u r e:a d i s t i n c t c l i n i c a l s y n d r o m e[J].J H e p a t o l, 2021,75(S u p p l1):S27-S35.[7]L A R S E N F S.A r t i f i c i a l l i v e r s u p p o r t i n a c u t e a n d a c u t e-o n-c h r o n i c l i v e r f a i l u r e[J].C u r r O p i n C r i t C a r e,2019,25(2):187-191.[8]L E B E R R E C,S A N D B O R N W J,A R I D H I S,e t a l.A p p l i-c a t i o n o f a r t i f i c i a l i n t e l l i g e n c e t o g a s t r o e n t e r o l o g y a n dh e p a t o l o g y[J].G a s t r o e n t e r o l o g y,2020,158(1):76-94.[9]甘亮亮,张金周,王贤东,等.人工肝支持系统治疗慢加急性肝衰竭效果的网状M e t a分析[J].临床肝胆病杂志, 2022,38(1):135-140.[10]中华医学会感染病学分会肝衰竭与人工肝学组,中华医学会肝病学分会重型肝病与人工肝学组.肝衰竭诊治指南(2018年版)[J].中华传染病杂志,2019,37(1):1-9.[11]J A Y A L A K S HM I V T,B E R N A L W.U p d a t e o n t h e m a n-a g e m e n t o f a c u t e l i v e r f a i l u r e[J].C u r r O p i n C r i t C a r e,2020,26(2):163-170.[12]T A N E X,WA N G M X,P A N G J,e t a l.P l a s m a e x c h a n g ei n p a t i e n t s w i t h a c u t e a n d a c u t e-o n-c h r o n i c l i v e r f a i l u r e:a s y s t e m a t i c r e v i e w[J].W o r l d J G a s t r o e n t e r o l,2020,26(2):219-245.[13]B E R G E R T,R E I S L E R I,S HO C HA T T,e t a l.P o s t-l i v e rt r a n s p l a n t a t i o n a n e m i a a n d i t s c o r r e l a t i o n w i t h m o r t a l i t y a n d g r a f t f a i l u r e[J].D i g D i s S c i,2020,65(10):3040-3051.[14]田冰,李范,邓宝成.人工肝支持系统治疗药物性肝衰竭临床效果的M e t a分析[J].临床肝胆病杂志,2020,36(4):823-828.[15]吴春波,周明雪,孟彦,等.非生物型人工肝的应用及研究进展[J].生物医学工程与临床,2021,25(5):634-638.[16]刘师伟,梁静,唐飞,等.人工肝支持系统与糖皮质激素治疗重度急性药物性肝损伤的疗效[J].天津医药,2021,49(7):723-726.[17]J OHN S O N P J,B E R HA N E S,K A G E B A Y A S H I C,e ta l.A s s e s s m e n t o f l i v e r f u n c t i o n i n p a t i e n t s w i t h h e p a t o-c e l l u l a r c a r c i n o m a:a n e w e v ide n c e-b a s e d a p p r o a c h-t h eA LB I g r a d e[J].JC l i n O n c o l,2015,33(6):550-558.[18]罗皓,周静,黄君.术前A L B I分级对肝细胞癌患者术后预后的预测价值的m e t a分析[J].中国医药导报,2020, 17(29):89-93.[19]Z O I C A B S,D E E P A.E x t r a c o r p o r e a l r e n a l a n d l i v e r s u p-p o r t i n p e d i a t r i c a c u t e l i v e r f a i l u r e[J].P e d i a t r N e p h r o l, 2021,36(5):1119-1128.[20]V E R MA N,D H I MA N R K,C HO U D HU R Y A,e t a l.D y n a m i c a s s e s s m e n t s o f h e p a t i c e n c e p h a l o p a t h y a n d a m-m o n i a l e v e l s p r e d i c t m o r t a l i t y i n a c u t e-o n-c h r o n i c l i v e rf a i l u r e[J].H e p a t o l I n t,2021,15(4):970-982.[21]薛祥,谢东辉,黄昌保,等.N L R与C R P对急性甘油三酯血症性胰腺炎病情严重程度的预测价值[J].分子诊断与治疗杂志,2022,14(2):249-252.(收稿日期:2022-12-11修回日期:2023-04-11)(上接第2377页)[6]李仲平,林诗雅,郑优容.广州市单项核酸检测阳性无偿献血者追踪结果分析[J].广东医学,2019,40(4):597-601.[7]王素玲,韩卫,葛红卫,等.京津冀血站实验室核酸单检模式鉴别阳性率分析[J].中国输血杂志,2022,35(1):57-60.[8]张丽,孙国栋.核酸实验室混样筛查检测过程的拆分阳性率分析[J].国际检验医学杂志,2020,41(6):748-750.[9]王健康,周艳,李晶,等.宝鸡市2010-2016年无偿献血者核酸检测结果分析[J].中国输血杂志,2018,31(6): 642-644.[10]C l i n i c a l a n d L a b o r a t o r y S t a n d a r d s I n s t i t u t e.D e v e l o p m e n ta n d u s e o f q u a l i t y i n d i c a t o r s f o r p r o c e s s i m p r o v e m e n t a n dm o n i t o r i n g o f l a b o r a t o r y q u a l i t y.P r o p o s e d G u i d e l i n e:C L S I-G P35P[S].W a y n e,P A,U S A:C L S I,2009.[11]S H Y AMA L A V.N u c l e i c a c i d t e c h n o l o g y(N A T)t e s t i n gf o r b l o o d s c r e e n i ng i m p a c t o f i n d i v i d u a l d o n a t i o n a n d m i n ip o o l-N A T t e s t i n g o n a n a l y t i c a l s e n s i t i v i t y,s c r e e n i n g s e n-s i t i v i t y a n d c l i n i c a l s e n s i t i v i t y[J].I S B T S c i S e r i e s,2014,9(2):315-324.[12]周磊,刘颖,邓雪莲,等.核酸筛查中混检阳性拆分单检阴性血液标本的H B V残余风险分析[J].中国输血杂志, 2018,31(9):985-989.[13]Y O O D A A P,S AWA D O G O S,S O U B E I G A S T,e t a l.R e s i d u a l r i s k o f H I V,H C V a n d H B V t r a n s m i s s i o n b yb l o o d t r a n s f u s i o n b e t w e e n2015a n d2017a t t h e R e g i o n a lB l o o d T r a n s f u s i o nC e n t e r o f O u a g a d o u g o u,B u r k i n a F a s o[J].J B l o o d M e d,2019,35(10):53-58.[14]Y E X,L I T,L I R,e t a l.M o l e c u l a r c h a r a c t e r i s t i c s o fH B V i n f e c t i o n a m o n g b l o o d d o n o r s t e s t e d H B s A g r e a c-t i v e i n a s i n g l e E L I S A t e s t i n s o u t h e r n C h i n a[J].B M CI n f e c t D i s,2021,21(1):83-85.(收稿日期:2023-02-01修回日期:2023-05-25)㊃2832㊃检验医学与临床2023年8月第20卷第16期 L a b M e d C l i n,A u g u s t2023,V o l.20,N o.16Copyright©博看网. 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单人份核酸联合ELISA平行检测血液筛查方案探讨
甘肃医药2018年37卷第1期Gansu Medical Journal ，2018，Vol.37，No.1第一作者：党进，男，主管检验师，从事献血者血液筛查工作。
E-mail ：dangjin05@单人份核酸联合ELISA 平行检测血液筛查方案探讨党进王英白桂红嘉峪关市中心血站，甘肃嘉峪关735100【摘要】目的：分析探讨单人份核酸联合ELISA 平行检测血液筛查的优缺点及其适宜性，为血液检测工作提供依据。
方法：采用单人份血液核酸检测（ID-NAT ）与酶联免疫吸附试验（ELISA ）双试剂平行检测3894份献血者血液标本。
结果：3894份标本NAT 初筛阳性51份（1.31%），其中ELISA 双（+）12份，符合率为23.5%（12/51），另外39份ELISA 阴性，占76.5%（39/51）。
39份NAT （+）ELISA （-）标本复查结果，阳性15份，复查阳性率仅38.5%（15/39）。
发现1例抗-HCV 双（+）但NAT （-）样本，NAT 复查仍阴性，送国家卫生和计划生育委员会临床检验中心验证为NAT （+）。
卫生部共反馈14份HBV NAT 和乙肝两对半结果，其中3份NAT 阳性，3份标本中2份本站初筛、复查均阳性；1份初筛阳性，复查阴性。
乙肝两对半结果仅2份五项全阴，其余至少有一项阳性，以HBeAb 和HBcAb 居多。
结论：单人份核酸与ELISA 平行检测有利有弊，应根据实际情况选择适宜本单位的筛查方案；采用NAT 初次阳性即报废的方案可最大限度降低漏检风险；NAT 与ELISA 在血液检测中可互补降低输血传播风险,两种检测缺一不可。
【关键词】单人份核酸检测；ELISA;平行检测；浩源；适宜性中图分类号：R446.6文献标识码：A文章编号：1004-2725（2018）1-0049-03自2016年3月1日《血站技术操作规程（2015版）》[1]实施以来，血液核酸检测已达到100%全覆盖。
核酸扩增检测技术(NAT)在血液筛查中的重要性分析
核酸扩增检测技术(NAT)在血液筛查中的重要性分析发表时间：2016-04-11T11:52:50.150Z 来源：《医师在线》2015年12月作者：杨帆李治鹏杨文勇[导读] 广元市中心血站核酸扩增检测技术(NAT) 灵敏度较高，可弥补传统的酶联免疫吸附试验ELASE法的缺陷.（广元市中心血站 628107）摘要：目的: 分析对比核酸检测与ELISA（酶联免疫吸附试验）检测结果，对血站开展核酸检测在血液筛查的重要性进行探究。
方法：以2014年7月到2015年5月我站采集的16808名献血者血液标本为研究对象，利用ELASE法对血样进行HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、梅毒螺旋体TP-抗体检测，对无反应性及谷丙转氨酶（ALT）合格标本进行核酸检测(NAT)，并将NAT检测有反应性标本送往中国输血研究所和国家卫生和计划生育委员会临检中心进行确认。
结果：16808份样本中ELASE法初检和复检均为阴性且ALT合格标本16454份，经核酸扩增检测技术(NAT)检出HBV-DNA阳性标本27份。
将27份阳性血样送往中国输血研究所及国家卫生和计划生育委员会检测，其中溶血拒收1份。
最终结果为HBV DNA阳性9份，阳性率为56.25%（9/16），包括隐匿性感染8份，窗口期1份。
结论：核酸扩增检测技术(NAT) 灵敏度较高，可弥补传统的酶联免疫吸附试验ELASE法的缺陷，减少对窗口期病毒或变异病毒漏检的可能，降低了临床用血的风险，可以推广应用于血站血液的筛查。
关键词：无偿献血；ELASE；核酸扩增检测技术(NAT)；血液筛查；输血广泛应用于临床，无论是外伤大出血、产后大出血、术中出血等血容量不足时需要血液供给，某些血液方面的疾病如血友病、镰状细胞性贫血、严重贫血、骨髓造血减弱或抑制、血小板减少症等疾病都需要给予血液治疗[1]。
我国是乙肝大国，而艾滋病、丙肝、梅毒等传染性疾病也在迅速发展[2]，由于血站采集血液通过多途径获得，且各人血液有所差异，因此血站血液筛查至关重要，尤其是HBV、HCV、HIV、梅毒螺旋体、谷丙转氨酶（ALT）的筛查，以避免输血相关性疾病的发生。
核酸检测法应用于血液标本内乙肝病毒检测结果分析
核酸检测法应用于血液标本内乙肝病毒检测结果分析摘要目的对核酸检测法应用于血液标本内乙型肝炎（乙肝）病毒（HBV）检测的结果进行探究分析。
方法23465份无偿献血的血液标本，实施酶联免疫吸附法（ELISA）和核酸检测法（HBV-DNA），筛查HBV感染情况。
对两种检测方法的结果进行分析。
结果核酸检测法的特异性和敏感程度均优于酶联免疫吸附法（P＜0.05）。
核酸检测法漏诊情况少于酶联免疫吸附法，差异有统计学意义（P＜0.05）；核酸检测法窗口期为（20.9±4.2）d，少于酶联免疫吸附法（35.8±6.3）d（P＜0.05）。
结论将酶联免疫吸附法和核酸检测法联用可以减少漏诊情况，减少窗口期，此外核酸检测法的特异性和敏感程度很好，可以很好的检测乙肝病毒使得所输血液的安全性得到保障。
关键词核酸检测法；乙型肝炎病毒；检测结果；血液标本目前检测乙肝病毒最常用的方法是酶联免疫吸附法，利用血清进行检测[1]。
但是核酸检测法更加可靠，更为方便，近年被广泛应用于血液筛查中[2]。
本次研究利用酶联免疫吸附法和核酸检测法对献血站采集的血液进行检测，具体情况如下所示。
1 资料与方法1. 1 一般资料将本站收集的无偿献血的血液标本23465份，进行酶联免疫吸附法和核酸检测法。
1. 2 方法每份血液标本都通过正定血型的初筛以及干化学检测法检测谷丙转氨酶（ALT），所有献血者符合实验要求。
將采集的每份血液标本分装于3个试管中，2个试管进行酶联免疫吸附法检测，所需器材为抗凝真空管。
另一个试管进行核酸检测法，所需器材为分离胶抗凝真空管。
将每个试管上都贴唯一性条形码，试管上的条形码与血袋标签上的条形码一致，通过条形码能够读取其有关血液的具体信息。
利用离心机将血液现场离心然后存放于4℃的冰箱内，需要在2 d内完成检测。
1. 2. 1 仪器和相关试剂酶联免疫吸附法需要仪器为哈美顿STAR全自动加样仪（瑞士），FAME24/20型全自动酶免分析仪；HBV-DNA检测需要用到的仪器为上海科华核酸检测系统：Hamilton MICROLAB STAR全自动混样提取仪、ABI 7500核酸扩增检测仪；低温离心机。
核酸检测技术在血液筛查中的应用及分析
核酸检测技术在血液筛查中的应用及分析【摘要】由于通过血液可以传播乙型肝炎、丙型肝炎、艾滋病和梅毒等多种严重的传染病。
为了保障临床用血的安全，血液制品的质量，防止供受者血液及血液制品之间的交叉感染和采血及血液制品工作者的健康，必须防止上述疾病的感染者再次进入供血队伍，防止上述疾病病原体阳性血及成分血直接输注于病人或用于血液制品生产。
为此必须用当前质量最好、最可靠的诊断试剂筛查供血员及其血样。
血清学酶联免疫吸附法（ELISA）检测技术作为国家规定的血液筛查标准方法，但ELISA技术本身的固有缺陷却成为进一步提高临床用血安全的障碍，主要由病毒感染者存在较长的“窗口期”导致。
而采用核酸检测技术（NAT）能够提高血液筛查的效率。
本文就近年来国内外NAT在血液筛查中的应用情况进行总结分析。
【关键词】核酸检测技术；血液；筛查；应用引言：核酸检测和技术能够直击艾滋病病毒的RNA结构，检测血液中是否存在病毒核酸，诊断有无病原体感染。
采用PCR技术，使用分子生物学实验室通用的扩增试剂和自行研究开发设计的复合引物，覆盖常见的HIV毒株，具有很高的灵敏度。
使用二次扩增的套式PCR扩增方法，提高检测的特异性，降低假阳性的概率。
核酸检测将艾滋病病毒的检测窗口期缩短至11天，并且核酸检测这项技术目前可将乙肝、丙肝病毒的检测“窗口期”分别由原来的50天、72天缩短到25天、59天。
下文针对核酸检测技术在血液筛查中的应用和检测原理进行分析，并进行探讨。
一、NAT用于血液筛查的意义及检测原理输血相关传染病的预防和控制是采供血机构的永恒主题。
根据我国现行法律法规要求，采供血机构对临床供血检测模式为：用两种不同厂家的ELI-SA检测试剂筛查HBsAg、抗-HCV、抗-HIV及梅毒螺旋体抗体（抗-TP）。
这种筛查模式有效降低了输血传染疾病的风险，特别是第三代酶免试剂的启用，而艾滋病检测已使用可同时检测P24抗原的第四代试剂盒。
但由于ELISA检测的是抗原或抗体，“窗口期”、病毒变异以及低水平携带者等漏检问题相对突出。
血清学与核酸检测对献血者血液筛查结果的对比分析
血清学与核酸检测对献血者血液筛查结果的对比分析发表时间：2017-12-27T11:52:01.937Z 来源：《中国误诊学杂志》2017年第21期作者：郭咚[导读] 保障受血者安全输血为广大采供血机构日常重点工作内容，但受部分献血者血液中本身即有病毒分布等因素影响。
长沙血液中心湖南长沙 410000摘要：目的：探讨献血者血液采用血清学检测与核酸检测两项技术筛查结果对比情况。
方法：方法：选择无偿献血标本453893份，均为2016年1月至2017年8月间收集，分别采用血清学检测技术和核酸检测技术筛查，其中核酸检测224679份，血清学检测229214份，对比结果特征。
结果：本次共抽取献血血样标本453893份，合格449225份，占98.9%，其余4668份不合格。
其中核酸检测合格224546份，不合格133份；分别为HBV126份，HCV5份，HIV 2份。
血清学合格224679份，不合格4535份，分别为HBV1755份，HCV324份，HIV2份，TP541份，ALT1473份。
核酸整体检测情况优于血清学检测。
结论：在针对献血者血液进行筛查时，核酸检测较血清学检测结果更为理想，临床需有选择的应用，以改善整体检测成效。
关键词：血液检测技术；核酸检测技术；献血者；血液筛查；对比保障受血者安全输血为广大采供血机构日常重点工作内容，但受部分献血者血液中本身即有病毒分布等因素影响，明显增加了受血者感染风险。
故加大输血相关性传统性疾病的防控力度具十分必要性[1]。
目前，血清学检查为重要筛查献血血样的技术，可通过抗体蛋白或病毒抗原等检测，来对有无病毒感染做出直或间接判断，但临床实践表明，就已有病毒感染发生，但病程仍属“窗口期”阶段的献血者而言，采用此种抗体检测技术，灵敏度居较低水平，极易出现漏检事件，对输血性传统病控制效果降低。
而采用核酸检测，可使血液感染病毒处于穿口期的病程明显缩短，且灵敏度也居较高水平，在防范漏检方面价值十分突出[2]。
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——江苏省血液中心 黄成垠
实验室质量管理应关注的几个方面
注重质量策划:围绕“质量原则”来进行，特 别是新技术(项目)的开调预防为主：从管理“结果”向管理“因素”
转移。 强化过程概念：重视过程管理。 强调持续的质量改进：质量分析例会，内审，
室内质控样本检测流程优化
原则:混样核酸检测系统不能采用单样本
检测模式，应与常规样本等同对待。在此 原则下,尽量节约试剂成本。
本实验室做法：室内质控样本与5个已知 NAT阴性样本混样检测，如整批混样均阴 性，则质控样本不进行拆分检测，如检 测样本有混样反应性，则质控样本与拆 分样本同时单样本拆分检测。
标本的采集: 采用质量可靠的无DNA酶、 无RNA酶、带分离胶、EDTA-K2抗凝的无菌 真空采血管( BD PPT血浆制备管）。
样本质量的保证
为保证标本采集后能在4小时左右离心
对市内采血点采集的标本由专人用低温运 输箱冷链运送，每3个小时运送一次，集中 运送到实验室后，由实验室人员立即离心 处理。
核酸检测实验室防污染的管理
防污染措施的执行到位及常规化 实验室污染的日常监控
• 外加阴性质控品、空白管 • 检测阳性率 • 有效拆分率（拆分阳性数占总混样阳
性数的比率）:混样CT≤36时的阳性拆 分率为95%以上 • 鉴别实验阳性率
室间质评样本检测流程优化
质控样本检测流程
原则:混样核酸检测系统不能采用单样本 检测模式，应与常规样本等同对待。
实验室的设置及管理(安全性) 检测系统的调研及确定(准确性) 检测流程的优化(及时性)
RH阴性及血小板样品的检测 血液库存量不足下的核酸检测
质量控制(有效性)
样本质量的保证？ 实验室污染的控制？ 室内质控怎么做？ 室间质评样本怎么做？
计算机信息管理系统(献血者隐私保护)
实验室的设置及管理
标本，拆分检测６５次,拆分率3.6‰。 １８３１份单采血小板标本，拆分检测３次,
拆分率1.6‰ ； ３15份单试剂有反应性的待复试标本，拆分检
测0次； 数据证实，采用的NAT检测工作模式合理可行。
检测流程的整合与优化
常规模式：运行至今，工作较顺畅
上午对前1天的全血标本进行2遍酶免检测。 下午将上午待复试的全血标本（单试剂有反应
常规血清学检测与NAT检测结果报告的融合
所能采用的２种模式
质控样本与待检样本混样检测：混样无反应 性报阴性；有反应性进行拆分检测。
质控样本与NAT阴性样本混样检测：混样无 反应性报告阴性；反应性只对质控样本进行 单样本检测。
室间质评样本检测流程优化
２种检测模式的比较
质评样本与已知NAT阴性样本混样 检测的工作模式，即符合质评样本 按常规样本对待的原则，并且节约 试剂成本，不影响血液放行速度。
样本质量的保证
结果分析 与报告
样本采集：用
EDTA加分离胶的
采血管5ml
样本处理：4小
时内离心，然
后2-8°C保存
检测：在28°C保存不超 过48小时
样本运输：冷藏运 输
样本接收 然后28°C保存
样本质量的保证
首先制定了样品采集手册，并对采血人员 进行全员培训。强调了样品采集顺序及采 集后的充分混匀，必须颠倒混匀５次以上。
实验室质量管理体系的整合
12个质量管理体系文件——
《核酸检测实验室的设置和管理》 《核酸检测实验室人员岗位职责》 《核酸实验室标本管理程序》 《安全与卫生、职业暴露的预防与控制程序》 《核酸实验室的消毒、清洁及废弃物处理程序》 《核酸实验室试剂、耗材管理程序》 《仪器与设备使用、维护和校准程序》 《检测结果分析、报告签发、记录及信息上报》 《核酸检测阳性标本的追踪和处理》 《 核酸检测实验室室内质量控制程序》 《核酸实验室室间质量考评程序》 《献血者核酸检测结果的解释程序》
单酶免试剂反应性样品核酸检测与血清学平 行检测模式。
检测流程的整合与优化
血液应急的核酸检测流程 常规血清学（酶免）和核酸平行检测
两者均阴性者马上进行血液放行 待查标本随后再进行相应处理。
检测流程的整合与优化
检测流程合理性的验证
２０１０年６月９日—１０月２０日统计 １８１１８份血清学检测（酶免和ALT）合格
外审，管理评审。 强调全员参与：注重对人的管理，因人设岗。
实验室质量管理—质量策划
依据:
国家相关的规范与标准 血站核酸检测实验室质量保证指南 血站质量管理规范 血站实验室质量管理规范 血站实验室的质量原则：安全，准确，
及时，有效和保护献血者隐私。 结合本实验室的具体情况
血站核酸检测的质量策划
本实验室的做法（供参考）
采用罗氏COBASs201和科华2套检测系统 实验室设置：
检测流程的整合与优化
单采血小板样品的核酸检测流程
调研分析：近3年单采血小板标本的 HBsAg、HCV抗体、HIV抗体3项检 测的总阳性淘汰率：双酶免试剂反应 性比例为0.7/10000、酶免单试剂反 应性比例为1.2/10000。
郊外较远的采血点，配备水平离心机，实 验室人员对采血人员进行培训后，由采血 人员进行离心处理。
样本质量的保证
样品离心：采用大容量低温离心机，在 2-8℃条件3000g、离心２０分钟。
样品的开盖：离心后，样品放４℃冰箱 静置后。实验前在生物安全柜中进行开 盖。
混样至拆分检测其间,将样品放４℃冰 箱临时保存。
性）、酶免检测合格标本、当天采集的单采血 小板样品、手工血小板样品、应急Rh阴性血样 品同时进行混样核酸检测，在核酸提取及扩增 检测的空闲期，再进行酶免待复试标本及血小 板标本的酶免检测。
在此模式下，全血标本在采集36小时内能完成 检测，单采血小板样品、手工血小板样品、应 急Rh阴性血样品能在采集当天完成检测。
2个SOP文件——
《COBASs201核酸检测系统操作规程》 《 科华核酸检测系统操作规程》
实验室质量管理体系的整合
实验室质量管理体系整合一体
针对核酸检测实验室只保留:
• 核酸检测实验室的设置和管理 • COBASs201核酸检测系统操作规程 • 科华核酸检测系统操作规程
实验室管理信息系统的整合一体
混样核酸检测与血清学（酶免）平行 检测模式。
检测流程的整合与优化
全血样本的核酸检测流程
调研分析： 10064样本NAT检测:EIA、NAT均阴性
9970例，均有反应性29例；EIA阴性、 NAT反应性10例； NAT阴性、 EIA单试 剂反应性41例；双试剂反应性15例。
单酶免试剂有反应性样品中没有发现NAT 阳性。表明单酶免试剂反应性、NAT阳性 标本的比例小于１／万。
核酸检测实验室防污染的管理
单向工作流向制度 严格执行实验室分区制度 仪器和材料的专用制度 安全的操作行为 实验室的清洁 建议制定一个《核酸检测实验室
的设置与管理》程序文件
核酸检测实验室防污染的管理
实验室污染的控制
实验室的“通风” 0.5%次氯酸钠溶液的使用 紫外照射 用70%无水乙醇溶液