钙磷测定-原子吸收光谱法

注意事项： 血标本宜采用血清或肝素抗凝血浆； 标本应避免溶血； 米吐尔试剂宜新鲜少量配制。
方法评价 无需除蛋白，快速简便； 显色稳定，特异性较高； 溶血、脂血和黄疸标本可产生干扰。
钙磷的测定
1、钙的测定
方法：
原子吸收光谱法
络合滴定法
分光光度法（甲基百里香酚兰法）
原子吸收光谱法 原理：使用空气-乙炔焰，钙焰的光吸收特 征是422.7nm。 评价：灵敏度高； 准确（测定血浆总钙含量的参考方 法）； 费用昂贵。
络合滴定法 EDTA络合滴定法 原理：血清中钙离子在碱性溶液中与钙红 指示剂结合成为可溶性复合物，使溶液 成淡红色。EDTA Na2对钙离子的亲和力 很大，与该复合物中的钙离子络合，使 指示剂重新游离，溶液呈现蓝色。以 EDTA Na2滴定量计算血清钙的含量。 评价：快速、简便、用血量少； 特异性较差； 终点不易掌握。
2、磷的测定（测定血中的无机磷）
方法： 染料法（孔雀绿直接显色测定法） 酶学法（联酶反应） 还原钼兰法
还原钼蓝法： 卫生部临检中心推荐使用硫酸亚铁 或对甲基氨基苯酚硫酸盐（米吐尔）作 还原剂。
还原钼兰法的原理： 利用磷在酸性溶液中与钼酸铵反应生 成磷钼酸复合物，用对甲基氨基苯酚硫 酸盐还原生成钼蓝，在680nm波长有吸收 峰，在一定范围内其含量与吸收强度成 正比。
甲基百里香酚兰法的原理： 在碱性条件下，血清钙与甲基百里香 酚蓝（Methyl Thymol Blue，MTB）结合 生成蓝色络合物，在一定浓度范围内其 色泽的深浅与钙的浓度成正比。
注意事项： 显色剂应新鲜配制； 所用玻璃器材必须严格清洗； 避免标本溶血。 评价：方法简便； 显色稳定。wenku.baidu.com