多囊卵巢综合征模型的构建与分析

合集下载

多囊卵巢综合征动物模型构建的比较研究

维普资讯
重庆医科大学学报２００８年第３３卷第４期（ｏｒａｆｏｇｉｄｃｌｉｒｉ０８Ｖ１３Ｎ．）ＪｕｎｌｎｑｎＭｅｉｖｓｙ２０．ｏ．ｏ４ｏＣｈｇａＵｎｅｔ３
ｏａ．ｌｄｓｒｍｌｅｆｓｘａｈｒｎｓｆｔｇｐａｍａｇｃｓ（Ｐ，ｔｇｉｓｌ（ＩＳ）ｉｔｅｔｏｍｄｌｗｒｖｒｂｏｅｕｅｌｏｅｕｌｏｍｏｅ．ａｉｌｌｏｅＦＧ）ｆｉｎｕｉＦＮｙｏｖｓｓｎｓｕｓａｎｎｎｈｗｏｅｅｅｓ
ｓｙｄＲｅｕｔＴｅｅｗｒ０ｐｒｎｆｒｔｌｉｅｕａｅｔｕｙｌｉｈｏｅｎ０ｅｃｔｏａｎｈａｓｅ．ｓｌ：ｈｒｅｅ９ｅｅｔｏａｏｔｇｒｇｌｓｏｓｃｃｎｔｅｍｄｌｉａｄ１０ｐｒｎｆｒｓｉｔｅｓｃｓｓｎｒｒｅｅｔｍｄｌｉｈｖｒｅｈｏｒｔｉｂｔｗｏｅａｈａｉｈｎｔａｏｏｔｌｏｅｉ．Ｔｅｏａｙｗｉｔｆａｎｏｈｔｏｍｄｌｗｓｅｖｒｔａｈｔｆｃｎｏ．Ｒｔｏｏｗｏｅｓｓｏｅｇｓｓｅｒｓａｆｂｔｔｏｍｄｌｈｗｄｓｈｐｌｙｔｖｒ—ｉｅｓｎｒｍｅｍａｉｓｔｎＴｅａｅａｅｓｃｕａｖｌｎｍｄｌ（．８±０１）Ｗｍｌｒｔａｈｓｎｏｃｓｃｏａｙｌｙｄｏｎｆｔｉ．ｈｖｒａｃｌｏｕａｉｏｅｙｉｋｅａｏｇｒｓｉ００４．０２ａｓａｅｈｎｔｏｅｉｓｌｍｄｌｉ（．９．６，ｅｎｍｅｆｃｒｏａｌｔｎｍｄｌｉ０１ ±０３）ｗｓｓａｅｈｎｔａｉｍｄｌｉ（．０．）ｏｅｉ００ ±００）Ｔｕｂｒｏｏｒｕａｉｏｅ（．０．６３ｈｐｅ２ａｍｌｒｔａｈｔｎｏｅｉ０ ±０８．ｌ７２Ｓｒｍｌｅｓｏ，ＨＦＨｉｃａｅｎｂｔｔｏｍｄ１ＳｒｍｌｅｆＥａｏｓｎｆａｔｉｃｅｓ（Ｏ０）ＨＯＡＩｆｅｕｅｌｆＴＬ／Ｓｎｒｄｉｏｗｏｅ．ｅｅｌｏ２ｈｄｎｉｉｃｎｎｒｅＰ＞．．Ｍ —Ｒｏｖｅｓｈｅｈｈｒｔａｈｔｏｏｔｌｗｔｄｌ（．ｏｏｌｗｒｉｅｈｎｔａｆｃｎｒｓｉｍｏｅｈｗｄｓｇｏｈｉ８８９±０８）ｓｉｃｎｌｈｈｒｔａｏｅｉ６８０４）．６ｉｆａｔｉｅｈｎｍｄｌ（．ｎｇｉｙｇｉ６± ．８．

多囊卵巢综合征模型大鼠卵巢中结缔组织生长因子及基质金属蛋白酶9的表达

多囊卵巢综合征模型大鼠卵巢中结缔组织生长因子及基质金属蛋白酶9的表达孙亚男【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2015(000)027【摘要】背景：有研究表明，卵泡发育、成熟、排卵和黄体形成以及退化等卵巢的生理过程都涉及细胞外基质的形成，而基质金属蛋白酶9和结缔组织生长因子与细胞外基质的形成有着密切的关系。

目的：探讨卵巢中结缔组织生长因子及基质金属蛋白酶9的表达与多囊卵巢综合征的关系。

方法：将有规律动情周期的SD雌性大鼠随机分为2组，模型组大鼠采用来曲唑灌胃建立多囊卵巢综合征模型，对照组灌胃等量的羧甲基纤维素。

当模型组大鼠动情周期固有规律不存在，连续出现间期时采集大鼠的血清和卵巢组织，对照组在其间期采集标本进行检测。

结果与结论：放射免疫分析法和免疫组织化学染色法检测显示，与对照组相比，模型组的血清促黄体生成激素、血清垂体泌乳素、窦前卵泡卵泡膜胞浆中的结缔组织生长因子、卵泡基底膜胞浆结缔组织生长因子、白膜结缔组织生长因子以及黄体中基质金属蛋白酶9表达量明显升高(P <0.05)，促卵泡激素、血清雌二醇和卵泡基底膜中的基质金属蛋白酶9表达量则明显降低(P <0.05)。

结果证实，结缔组织生长因子可能与多囊卵巢综合征中可能与小卵泡的过多生长和排卵障碍有关，基质金属蛋白酶9可能与多囊卵巢综合征中的排卵障碍有关。

%BACKGROUND:Several studies have demonstrated that the physiological process of the ovary, including folicle development, maturity, ovulation, corpus luteum formation and regression, is related to the formation of extracelular matrix. However,matrix metaloproteinase 9 and connective tissue growth factors had a close relationship with the formation of extracelular matrix. OBJECTIVE:To investigate the relationship between the expression of connective tissue growth factor and matrix metaloproteinase 9 and polycystic ovary syndrome. METHODS:The female SD rats with regular estrous cycle were randomly divided into control and model groups. The rats in the model group were intragastricaly with letrozole to establish the model of polycystic ovary syndrome, while the rats in the control group were intragastricaly with the same amount of carboxymethyl celulose. When the natural law of estrous cycle of rats in the model group did not exist and consecutive interval appeared, rat serum and ovarian tissues were colected. Rats in the control group were detected by colecting specimen in the interval. RESULTS AND CONCLUSION:Radioimmunoassay and immunohistochemical staining results showed that compared with the control group, the expression of serum luteinizing hormone, serum prolactin levels, connective tissue growth factor in preantral folicles theca cytoplasm, connective tissue growth factors in folicular basement membrane cytoplasm, connective tissue growth factors in albuginea and matrix metaloproteinase 9 in corpus luteum significantly increased (P < 0.05). The contents of folicle stimulating hormone and serum estradiol, and expression of matrix metaloproteinase 9 in folicular basement membrane significantly decreased (P < 0.05). The results indicate that connective tissue growth factors may be related to the excessive growth of smal folicles and ovulation disorders in polycystic ovary syndrome, whilematrix metaloproteinase 9 may be related to ovulation disorders in polycystic ovary syndrome.【总页数】5页(P4412-4416)【作者】孙亚男【作者单位】大庆市油田总医院妇科九病区，黑龙江省大庆市 163001【正文语种】中文【中图分类】R318【相关文献】1.基质金属蛋白酶9、胰岛素样生长因子结合蛋白-1在多囊卵巢综合征中的表达[J], 胡舒勤2.基质金属蛋白酶9、胰岛素样生长因子结合蛋白-1在多囊卵巢综合征中的表达[J], 胡舒勤3.胰岛素样生长因子-1和转化生长因子-β1在来曲唑诱导多囊卵巢综合征模型大鼠中的表达及意义 [J], 陈巍4.来曲唑诱导的多囊卵巢综合征大鼠卵巢组织中角质细胞生长因子的表达 [J], 任伟慧;贾莉婷;张展;李占飞;李肖甫;孙琳;朱艳玲5.多囊卵巢综合征模型大鼠卵巢中结缔组织生长因子及基质金属蛋白酶9的表达[J], 孙亚男;因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

一种新的稳定多囊卵巢综合征大鼠模型的建立

一种新的稳定多囊卵巢综合征大鼠模型的建立
多囊卵巢综合征（PCOS）是一种常见的内分泌紊乱疾病，通
常由高雄激素、胰岛素抵抗和卵巢多囊等因素所致。

尽管已有几个大鼠模型用于PCOS的研究，但它们常常缺乏灵敏的影响指标和转化性质。

本文报道了一种新的PCOS大鼠模型，该模型可提供更好的临床相关性和先进的评估工具，为对PCOS的预防和治疗提供更精确的研究平台。

建立PCOS模型的前期研究详细测定了模型选择的高雄激素、胰岛素抵抗和卵巢多囊的相关指标。

确立了超重和低能食物所致的PCOS模型的建立方法。

模型动物使用60只雌性Sprague-Dawley大鼠，均分为对照组和模型组，对照组接受正常饮食，模型组接受过量高脂食物（40％脂肪），并获得少量常规饮食。

在为期3个月的实验中，分别分析了大鼠的体重、进食量、胰岛素敏感性、可逆糖尿病、卵巢瘤大小、雄激素水平和生殖史的变化。

实验结果表明，与对照组相比，模型组大鼠出现了明显的多囊卵巢症，表现为卵巢体积扩大、卵巢囊肿形成和周期性卵泡数量增加。

模型组大鼠除了体重、进食量和胰岛素敏感性降低外，还出现了明显的卵巢瘤和雄激素水平异常等特征。

此外，模型组大鼠的生殖历史显示出异常，包括发情周期不规律、发情期缩短和孕率降低等。

本文介绍的PCOS大鼠模型是一种技术先进、指标敏感的疾病模型，可以提供更准确的PCOS疾病预测和治疗前景。

该模型的优点在于能够很好地反映PCOS的人类病理生理学特征，并
提供一种新的方法，将在PCOS的治疗和预防方面取得新的突破。

总之，本文中报道的新型PCOS大鼠模型，为更适用于生物学和生物医学方面的研究提供了一种新的工具和方法。

多囊卵巢综合征动物模型制作步骤及方法

多囊卵巢综合征动物模型制作步骤及方法1雄激素多囊卵巢综合征动物模型(1)复制方法①丙酸睾丸酮造模法：选出生后9d龄雌性大鼠，按1.25mg/只的剂量经颈背部一次性皮下注射丙酸睾丸酮，21d龄断乳后动物常规饲养，自由饮水和进食。

模型动物70d龄起连续作阴道涂片11d，观察到阴道上皮持续角化者即为造模成功。

模型动物血清中4-雄烯二酮、总睾酮、游离睾酮、胰岛素(Ins)和C-肽均显著升高。

②脱氢表雄酮造模法：选23d龄幼年雌性大鼠，按6mg/100g体重的剂量每天经皮下注射脱氢表雄酮，连续20d。

注射脱氢表雄酮后，模型动物的卵巢重量显著增加并呈多囊样改变，对闭锁卵泡进行显微测量其平均直径明显增大。

模型动物血清T、E2和空腹血糖水平明显升高，空腹及服糖后2h血胰岛素水平显著升高。

(2)模型特点该方法造模的基本原理为过高的雄激素干扰了卵泡的生长成熟，而出现不排卵，并可导致高胰岛素血症和胰岛素抵抗，与人多囊卵巢综合征(polycystic ovay syndrom, PCOS)有相似之处。

但注射外源性雄激素虽可诱发动物卵巢呈多囊改变，但在组织形态、激素改变及对药物治疗的反应等许多方面仍都与人多囊卵巢综合征有很大差异。

(3)比较医学临床上妇女多囊卵巢的形成是由于卵巢基质过度刺激、高雄激素血症、大量闭锁卵泡引起。

雌性大鼠通过注射外源性雄激素制作的多囊卵巢综合征病理模型，易自行恢复排卵，其不足之处是无多囊卵巢综合征表现的卵巢白膜增厚及体积增大，相反其体积和重量只有正常的1/2，在激素改变方面，模型鼠血中黄体生成激素(LH)不增加反而减少，对卵泡刺激素(FSH)和卵巢楔形切除术不敏感，这些与人多囊卵巢综合征有很大差别。

丙酸睾丸酮制造的模型除了无排卵、卵巢多囊性改变与人多囊卵巢综合征相似外，卵巢重量、体积及对治疗的反应都不同。

而脱氢表雄酮造模后卵巢重量显著升高，呈多囊样改变，出现高胰岛素血症和胰岛素抵抗与多囊卵巢综合征患者相似，但缺乏特征性的LH升高。

多囊卵巢综合征动物模型的研究进展

万方数据
塞盟史西医缱金监废２ＱＱ！生２月篪窆鲞筮！翅
张晓薇【司等认为ＤＨＥＡ诱导ＳＤ幼年雌性大鼠ＰＣＯＳ动物模犁卵巢病理改变及血内分泌改变与ＰＣＯＳ病人相似，并存在着明显的高胰岛素血症，是较理想的ＰＣＯＳ动物模型。２雌激素造模法
Ｌａｒａ等【１３】选用成年未交配ＳＤ大鼠，体重２００～２２０９，每日保持光照１４ｈ，且出现两次规律的４ｄ１次的动情周期，一次性注射戊酸雌二醇（ＥⅥ ２ｍｇ／只，并分别在７ｄ、１５ｄ、３０ｄ、６０ｄ处死，结果提示６０ｄ时卵巢呈现多囊样改变，造模成功。Ｅｌｉｚａｂｅｔｈ等１１４］用戊酸雌二醇造模法，分别一次性注射ＥＶｌｍｇ／只、２ｍｇ／只、４ｍｇ／只，并分别在１５ｄ、３０ｄ、６０ｄ处死动物，观察卵巢形态及其它改变，最终结果提示４ｍｇ／只剂量组３０ｄ时卵巢旱现多囊样改变，其余各项指标与人类接近，造模成功。该类方法造模的基本原理在于高雌激素使垂体对下丘脑的ＧｎＲＨ的敏感性增加，ＬＨ水平上升，同时持续的雌激素刺激对垂体ＦＳＨ有抑制作用，从而出现ＰＣＯＳ典型的垂体内分泌环境。３孕激素联合ＨＣＧ（人促绒毛膜促性腺素）造模
【１７】萤了强，赵勇军，史玉霞．益肾沈肝化脂汤对酒精性脂肪肝患者ＢＵＡ、ＴＢＡ的影响Ⅲ．围医论坛，２００３，１８（２）：２０．２ｌ
［１８］李晓陵，孙树凯，土嘉彦．“例脂肪肝与ＣＴ诊断对照研究【Ｊ】．中医药信息，２００２，１９（４）：５８
［１９］支ｌＪ明，褚玄任．实时Ｂ超在脂肪肝中的临床应用体会【Ｊ】．江苏中医药．２０００，２１（１０）：１５．１６
［１１】严付红．清肝降脂汤治疗非酒精性脂肪肝５０例川．巾国中西医结合消化杂志，２００６，１７（１）：６０—６１
【１２］朱叶￡生，王！≠亮．脂消胶囊治疗非酒精件脂肪肝５０例疗效观察［Ｊ】．新中医，２００６，３８（４）：３１．３２

多囊卵巢动物模型的研究进展

较与ＰＯＣＳ发病的异同，以及探讨模型在科研中的
大规模的实验需求，而且大鼠也有较规律的发情周
期．仅为４５． — 因此可以用于实验中持续观察多个ｄ发情周期的变化。另外，也有学者采用豚鼠建立ＰＯ模型，Ｃ但是与大鼠相比，豚鼠的价格相对较高，饲养条件较为严格。因此，一般情况下在建立ＰＯＣＳ
模型时最常用的动物为大鼠，在科研经费比较充足的情况下或对实验有特殊要求时，可以考虑采用恒
河猴建立模型。建立ＰＯ动物模型方法Ｃ
一
、
雄激素诱导ＰＯ模型Ｃ
１．脱氢表雄酮（ＨＡ诱导ＰＯ模型ＲｙＤＥ）Ｃｏ等［］每天给予未成年大鼠１ｇ３ｇ的ＤＥ持０ｍ或０ｍＨＡ，续用药３够导致大鼠卵巢的多囊样改变。０ｄ能
ｃｃｒ］ｌｎｏ２０，３２）７０ —１３ｎａｅ［．ＣｉＯｃｌ０５２（８：１５７１．ＪＪｎ，［０ＡａａａＷ，ｈｅ，ｈｌｍＡｅａＦｃｒａｏｉｅｉ２］ｗｄｌＯａＪＧｏｕ，ｌ１ａｔｓｓｃｔｗｔｌＡｉｒＵｏ．ｏｓａｄｈ
多囊卵巢综合征（ＣＳ是育龄期妇女月经紊ＰＯ）乱最常见的原因之一．以慢『无排卵和高雄激素为生特征的内分泌综合征。由于ＰＯ病因的复杂性及ＣＳ异质性，故至今对其发病机制的研究仍处于探索之中。良好的动物模型对于研究ＰＯＣＳ的发病机制至关重要。迄今国内外已建立了多个多囊卵巢（ｏｃｓｃｖｒｎＰＯ）物模型，仍无一个真正ｐｌｙｔａｉ，Ｃ动ｙｉｏａ但令人完全信服的模型。这是由于对ＰＯ的发病机ＣＳ制不了解，却要将ＰＯ所有病理表现引入到动物ＣＳ模型的困难Ｉ生所致。现主要介绍目前几种常见ＰＯＣ动物模型的建立方法，阐述模型建立的基本机制，比

多囊卵巢综合征生物样本库建设及管理

１材料与方法
１．１组织架构
治疗方式、治疗方案、用药方案、精子来源方式、卵子来源、
存储方式以及培养方式等），手术记录（取卵日期、取卯时
我院生物样本库设有管理委员会、学术委员会及伦理委员会，由专职人员负责管理。１．２环境设施
院实际情况制定生物样本库制度职责及标准操作流程
（ＳＯＰｓ），其中包括人员管理、仪器设备管理、实验管理、医院感染管理、档案管理，样本采集、处理、存储、质量控制、运输流程、销毁管理等。多囊卵巢综合征生物样本库的建立己通过江苏省苏北人民医院伦理委员会审核，具体采集计划由临床科室、样本库工作人员共同制定并确定～名临床协调人员，每日可采集病例由临床医生确定并签署知情同意书，一式三份，由临床科室、生物样本库、患者各执一份留存。
式以及存储位置等。例如，ＰＣ．１６００７２０．ＢＳ．Ｆ．０２，代表多囊
卵巢综合征，２０１６年第７２０号入库，血清，冰冻存储，第
二复份。
１．４流程管理按照中国医药生物技术协会生物样本库标准【】 ” 、国际生
物和环境样本库协会（ＩＳＢＥＲ）样本库管理规范［１２】，结合我
主要包括细胞分化［５Ｊ、细胞增生［６】、细胞凋亡『７．８］、基因及
可视化存储，能够与院内ＨＩＳ、ＬＩＳ、ＰＡＣＳ接口对接，实时获取临床资料。贝迪打印机、扫码机、条码采用低温二维码打印并于标签显示其样本编码、采集日期、类型、存储方

多囊卵巢综合征(最新指南)

诊断标准
(1)育龄期 PCOS 的诊断（根据 2011 年中国 PCOS 的诊断标准）
疑似 PCOS:月经稀发或闭经或不规则子宫出血是诊断的必须条件。另外再符合下列 2 项中的 1 项:( a) 高雄激素表现或高雄激素血症;( b) 超声表现为 PCO。
临床表现
(三) 胰岛素抵抗相关的代谢异常
7. 心血管疾病风险: 随着年龄的增长,PCOS 患者心血管疾病风险显著升高。 PCOS 患者血管功能不良与肥胖相关。此外，与年龄和 BMI 匹配的非 PCOS 患者相比,PCOS 患者中颈动脉内膜中层增厚、冠状动脉钙化以及轻度主动脉钙化更为显著。
临床表现
2. 体格检查: 测定身高、体重、腰围、臀围、血压, 评估多毛和痤疮,检查有无甲状腺肿大,评估乳房发育情况(Tanner 分级) ,并了解有无挤压溢乳,是否有萎缩纹、黑棘皮病及阴蒂肥大。
辅助检查
在临床上，遇有下列情况时要想到PCOS 的可能:1月经失调;2阴毛初现提前(pubarche)和多毛;3肥胖和胰岛素抵抗;4不育。这些表现越多,程度越重,PCOS 的可能性就越大。但是,确诊有赖于必要的辅助检查,并排除引起高雄激素血症、肥胖、多毛、月经稀少/闭经和卵巢多囊的其他相关性疾病。
发病机制
PCOS 的发病机制未明,公认的事实是:
高LH 伴正常或低水平 FSH
恒定的低雌激素水平
卵巢存在多个囊性卵泡和间质增生
1
2
3
4
5
雄激素增多
胰岛素抵抗(高胰岛素血症)
胰岛素抵抗和高雄激素血症的关系
IGF:胰岛素样生长因子;IGFBP-1:IGF 结合蛋白-1；SHBG:性激素结合球蛋白;FT:游离睾酮

多囊卵巢综合征动物模型构建与评价

多囊卵巢综合征（ＣＳ是一种发病多因性，ＰＯ）病理生理和临床表现多态性的内分泌综合征，导致是育龄妇女不孕的内分泌及代谢紊乱性疾病。ＰＯＣＳ患者以长期无排卵、雄激素血症、岛素抵抗和高胰高胰岛素血症为基本特征。其病理生理学改变范
一
２脱氢表雄酮（ＨＡ）模法：ｎｅｓｎ等Ｊ．ＤＥ造Ａｄｒｏ
提出，ＤＥ以ＨＡ皮下注射诱导ｓＤ雌性大鼠ＰＯ造ＣＳ
模，用２采３日龄ＳＤ清洁级大鼠，２ｌ断乳，在１Ｅ龄适
应喂养２ｄ后，２ｌ开始造模。建模组大鼠每于３Ｅ龄日皮下注射ＤＥＨＡ每１０ｇ体重６ｍ０ｇ＋０２ｍ．Ｌ注射油剂，续２；立ＤＡ诱导的大鼠模型。连０ｄ建ＨＥ
世界中西医结合杂志２１年第６卷第１０１０期
ＷｏｌＪｕｎｌｆｎｅｒｔｄＴａｉｏａａｄＷｅｔｒｅｉｉ２１，１，ｏ１ｒｏｒａｏＩｔａｒｄｔｎｌｎｓｎＭｄｃｅ０１Ｖｏ６Ｎ．０ｄｇｅｉｅｎ．
・９１・３
・
综述・
多囊卵巢综合征动物模型构建与评价
李巍巍侯丽辉郝松莉李勤吴效科
【关键词】多囊卵巢综合征；大鼠；雄激素；雌激素
【中图分类号】７１７【Ｒ１．５文献标识码】Ａ【文章编号】１７ — ６３２１）００１ — ３６３６１（０１１ — ９３０

多囊卵巢综合征动物模型的构建及中药干预机制述评

ＩＰＯ动物模型常用造模方法ＣＳ
ＰＯＣＳ除了有内分泌及代谢方面的异常外，组织病理学改变主要为双侧卵巢增大并呈多囊性〔Ｃ改变，ＰＯ）而且发现ＣＰＯ不仅存在于人许多动物都可以发生卜如牛、、鼠、猫豚大鼠等。大鼠有较稳定的动情周期，对于实验研究来说比较经济方便，目前最常用作为ＰＯ研究的实验动物。由于ＰＯＣＣＳ在不同的个体往往呈不同症状表现，因此，一些研究者从不同的病理角度采用不同造模方法建立了接近ＰＯ某些病理ＣＳ特征的动物模型。目前造模的方法主要有雄激素造模法、雌激素造摸法、孕激素联合ＨＧ造模法、岛索联合ＨＧ造Ｃ胰Ｃ模法等。１雄激素造模法＿１有丙酸皋丸酮造模法和脱氢表雄酮（ＨＡ）ＤＥ造模法两种不同给药方法。１１丙酸攀丸酮造模法阴根据过高的雄激素可以干扰．
后每只模型摘取一侧卵巢对其局部的超微结构和细胞因子及基因表达等进行了观察分析，模型表现出了与人类多变卵巢综合征相似的临床表现：月经出现紊乱，可见卵巢表面平滑、白膜增厚，白膜下见许多不同发育程度的卵泡及闭锁卵泡，卵巢白膜明显胶原化，形成胶原纤维素宽带，板层状包呈绕卵巢等，血清生殖激素和糖、脂代谢水平也出现了与人类ＰＯ相似的明显改变，ＣＳ外观上休重和毛发均有增加，由于雄激素水平增高，模型猴体力和攻击性大大增强。Ｒｅｕ猴是ｈｓｓ最接近人类生捎生理的动物，具有和人类相似的卵巢周期和月经周期规律，－０月是月经周期最为稳定的时期，利于造４１模观察和对模型进行评价。尤其适用于以生殖功能紊乱为主

来曲唑诱导大鼠多囊卵巢综合症模型的构建及相关microRNAs的筛选验证

华中科技大学硕士学位论文来曲唑诱导大鼠多囊卵巢综合症模型的构建及相关microRNAs的筛选验证姓名：***申请学位级别：硕士专业：妇产科学指导教师：***2011-05来曲唑诱导大鼠多囊卵巢综合症模型的构建及相关microRNAs的筛选验证华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科研究生班自芹导师钟刚教授摘要第一部分来曲唑诱导大鼠PCOS动物模型的构建及基因芯片的制备筛选目的： 1. 采用来曲唑灌胃方法构建雌性Wistar大鼠PCOS动物模型，并分析比较模型组与对照组的血清睾酮（T），雌二醇（E2）和黄体生成素（LH）水平变化，胰岛素抵抗相关的特征及卵巢的形态学改变。

2. 利用基因芯片的技术筛选两组之间差异表达的microRNAs，探讨其参与PCOS发生和发展过程中的可能机制。

方法：1、选取6周龄清洁级的雌性Wistar大鼠，随机分组为模型组和对照组，每组各20只。

PCOS模型组: 每日来曲唑1 mg/( kg·d)溶于1%的羧甲基纤维素(CMC)中,连续灌服21 d；对照组：不予处理，正常喂养。

从用药的第10天开始每日进行阴道涂片至用药期结束，在最后一次应用来曲唑24h(并禁食12h)后，同时在处理对照组大鼠时，尽量控制其在动情间期。

水合氯醛麻醉后切取卵巢，心脏取血，分离血清。

全自动化学发光检测仪测定血清T，E2和LH；放射免疫学方法测定空腹血清胰岛素（FINS）, 血糖仪测定空腹血糖（FBG），并计算胰岛素抵抗指数（HOMA1-IR）；称重卵巢并测定大鼠体重；卵巢组织切片，HE染色，并观察其病理变化。

2．从造模成功的PCOS模型组及正常对照组中各随机选取3只大鼠，10%的水合氯醛腹腔麻醉后，心脏取血后迅速取出双侧卵巢，称重后将其中的一个卵巢液氮冷冻固定保存，送往北京博奥生物有限公司应用最新版本15.0的LC-science microRNAs表达谱微阵列芯片进行筛选microRNAs。

多囊卵巢综合征诱导排卵疗效预测模型的构建

多囊卵巢综合征诱导排卵疗效预测模型的构建王翠芸;赵彤;樊桂玲【期刊名称】《实用临床医药杂志》【年(卷),期】2024(28)10【摘要】目的分析多囊卵巢综合征(PCOS)患者诱导排卵疗效的影响因素,并构建PCOS患者诱导排卵疗效预测模型。

方法选取患有PCOS不孕且适用促排卵治疗的患者200例为研究对象。

所有患者实施来曲唑或来曲唑联合尿促性素诱导排卵方案。

按照诱导排卵的疗效分为有效组(n=160)和无效组(n=40)。

回顾性收集、分析2组患者临床资料。

采用Logistic回归分析法分析PCOS患者诱导排卵疗效的影响因素,并构建诱导排卵疗效的列线图预测模型。

评估PCOS患者诱导排卵疗效的列线图模型的预测效能。

结果有效组的排卵数、排卵例数占比、成熟卵泡数目、子宫内膜厚度大于无效组,雄激素水平低于无效组,差异有统计学意义(P<0.05)。

Logistic回归分析结果显示,雄激素、排卵数、成熟卵泡数目、子宫内膜厚度是PCOS患者诱导排卵疗效的影响因素(OR<1,P<0.05)。

受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,排卵数、成熟卵泡数目、子宫内膜厚度、雄激素水平评估PCOS患者诱导排卵疗的曲线下面积(AUC)值大于0.60。

列线图预测模型验证结果显示,校准曲线的一致性指数值为0.984。

结论雄激素、排卵数、成熟卵泡数目和子宫内膜厚度为PCOS患者诱导排卵疗效的影响因素,基于上述因素构建的列线图预测模型的评估效能较好。

【总页数】5页(P116-120)【作者】王翠芸;赵彤;樊桂玲【作者单位】河北省唐山中心医院生殖医学科【正文语种】中文【中图分类】R714.15;R319;R271.14【相关文献】1.来曲唑与克罗米酚诱导多囊卵巢综合征伴不孕患者促排卵疗效观察2.来曲唑和氯米芬诱导多囊卵巢综合征不孕患者排卵的临床疗效3.氯米芬与来曲唑诱导多囊卵巢综合征不孕患者排卵的疗效分析4.诱导排卵联合卵泡穿刺术对多囊卵巢综合征性排卵障碍患者的治疗效果5.针药联合治疗来曲唑诱导排卵的多囊卵巢综合征不孕患者临床疗效观察因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

多囊卵巢综合征动物模型的研究分析

（Ｖ造模法１ ③ 孕激素联合ＨＧ造模法：下埋植左旋Ｅ）５卅；Ｃ皮１一甲基炔诺酮硅胶棒（）［下注射ＨＣｔＯ④ 胰岛素８３￣Ｉｍｍｌ皮Ｇｋ、：ｆＳ联合ＨＣ造模法：下注射ＨＣＩ）ＮＧ皮Ｇ加胰岛素ｉ；芳香化 ”⑤
有关ＰＯＣＳ的造模方法有多种，但迄今为止尚无一种公
认的标准方法。目前报道的方法有以下几种：雄激素造模 ①
法：用的雄激素有皮下注射丙酸睾丸酮Ｉ、下注射脱氢选皮 ≈
常见的生殖功能障碍性疾病，主要表现为卵巢的雄激素过多所造成的闭经、毛、胖及无排卵，发生率占生育年龄妇多肥其
女的５１％。％～０目前其发病原因临床尚无定论，立ＰＯ建ＣＳ动物模型对其病因的基础研究以及指导临床的诊断和治疗有
拉睾酮钠造模法Ｅ皮下注射硫酸普拉睾酮钠９／０ｇ相当ｌｍｇ１０（
于ＤＡ６ｇ１０）续２ｄ｜来曲唑造模法连续灌服２ｄＨＥｍ／０ｇ，连０｜４：１１：雌激素造模法为一次性注射戊酸雌二醇（Ｖ２ｇ只，ｄ１２１Ｅ）ｍ／６０
酶抑制剂造模法㈣：目前正在研究的是用非甾体类芳香化酶抑制剂来曲唑诱导雌性大鼠ＰＯ。ＣＳ以上为国内外采用较多的和正在研制的各种ＰＯＣＳ动物模型建立的方法．由于ＰＯ但ＣＳ并非一种简单的疾病，病理其生理变化涉及广泛，因而在动物模型的研究中并没有成熟

多囊卵巢综合征表型分析及易感基因基因型表型关联性研究

近年来，基因学研究取得了重大突破，越来越多的研究PCOS的遗传基础。易感基因的基因型—表型关联性研究有助于我们深入理解PCOS的发病机制，并可能为疾病的早期诊断和个性化治疗提供依据。
本次演示将就PCOS的表型分析以及易感基因与PCOS表型的关联性进行探讨。我们首先需要理解PCOS的各种表型，包括经典的PCOS表型（如高雄激素血症、卵巢多囊样改变等）和其他可能的表型（如代谢异常、心理问题等）。然后，我们将探讨与PCOS相关的易感基因及其可能的基因型—表型关联。
多囊卵巢综合征的表型分析
PCOS的经典表型通常包括月经不规律、高雄激素血症、卵巢多囊样改变等。然而，随着认识的深入，我们发现PCOS的表型远比这复杂。除了经典的生殖异常， PCOS患者还可能表现出代谢异常（如肥胖、胰岛素抵抗、血脂异常等）
以及心理问题（如焦虑、抑郁等）。这些表型之间的相互关联以及它们与疾病严重程度和病程的关系仍需进一步研究。
4、AR gene：雄激素受体（AR）基因是另一个与PCOS相关的基因。其变异可能影响雄激素的信号传导，进而导致高雄激素血症和生殖功能障碍。
参考内容
多囊卵巢综合征（PCOS）是一种常见的妇科内分泌疾病，影响全球约5%-10% 的育龄女性。PCOS不仅对女性的生殖健康产生严重影响，还可能导致代谢紊乱、心血管疾病和心理健康问题。本次演示将介绍近年来关于多囊卵巢综合征易感基因及心理因素的研究进展。
1、临床分型
根据临床表型，PCOS可分为两种主要类型：经典型和无排卵型。经典型PCOS 以高雄激素、持续无排卵、卵巢多囊改变为特征，而无排卵型PCOS则以无排卵和卵巢多囊改变为特征，但不一定伴有高雄激素。此外，根据是否存在代谢异常，还可以进一步将PCOS分为肥胖型和非肥胖型。

多囊卵巢综合征大鼠模型建立及其血清25羟基维生素D3水平关联性分析

埋ＨＥ然后后显微镜下观察。对照组ｌ５只大鼠进行灌服１％羧甲基纤维素，其余饲养与实验组相同，共计２１天。用相同的方法采取大鼠血液
进行检测，并称重卵巢与子宫，并用相同方法对卵巢进行制片观察。
３．１来曲唑建立ＰＣＯＳ大鼠模型的理论依据和评价芳香化酶是雌激素形成的限速酶，存在于人体的各组织中，卵巢内该酶的活性下降或水平过低便可导致雄激素水平升高，从而可引发多囊卵巢综合征］。Ｋａｆａｌｉ等以来曲唑诱导雌性大鼠建立ＰＣＯＳ动物模型，取得满意效果。本研究运用来曲唑诱导后发现，实验组ＬＨ升高、ＦＳＨ升高、Ｐ降低，实验组大鼠血清Ｔ显著升高，ＬＨ／ＦＳＨ比值也增大。结果提示来曲唑诱导ＰＣＯＳ大鼠模型的建立有效。但是，单纯雄激素造模使得大鼠卵巢无明显白膜增厚，重量也只有一般的１，２，这
就与人ＰＯＣＳ有较大不同】。但本研究通过来曲唑诱导建立ＰＣＯＳ大鼠
实验组剩余ｌ５只大鼠在运用来曲唑１ｍｇ／（ｋｇ・ｄ）溶于１％羧甲基纤维素
１０ｍＬ，连续灌服２ｌｄ后接受维生素Ｄ灌服，连续３周。然后进行心脏
总之，来曲唑诱导大鼠建立ＰＣＯＳ与人体情况基本符合，有较佳的实验价值。研究结果显示，体内２５一（ＯＨ）Ｄ水平能反应机体内分
泌情况，ＰＣＯＳ大鼠体内２５一（ＯＨ）Ｄ水平较低，通过维生素Ｄ干预

多囊卵巢综合征的小鼠模型

病和代谢综合征等的风险显著增加。ＰＣＯＳ的病因不明，已有研究显示其发病机制可能为以下几个方
面：（１）高雄激素血症和／或雄激素活性升高；（２）垂体ＬＨ的分泌增加，同时ＦＳＨ水平相对降低；（３）胰岛素抵抗、高胰岛素血症以及肥胖；（４）交感神经兴奋性升高；（５）基因缺陷¨ 。为了更好地了解ＰＣＯＳ的病理机制，并为今后改善ＰＣＯＳ的治疗提供实验依据，实验室工作中需
前常用的ＰＣＯＳ小鼠模型，并总结了不同模型的生 ห้องสมุดไป่ตู้ 与代谢特征。
一
、
雄激素诱导的ＰＣＯＳ小鼠模型
高雄激素血症不仅是ＰＣＯＳ患者最为突出的特
及其引发的痤疮和多毛症、黄体生成素（１ｕｔｅｉｎｉｚｉｎｇ
雄酮（ｄｅｈｙｄｒｏｅｐｉａｎｄｒｏｓｔｅｒｏｎｅ，ＤＨＥＡ）和双氢睾酮（ｄｉｈｙｄｒｏｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ，ＤＨＴ），其中睾酮的生物活性
最强。
常和脂肪肝等，同时，病人患心血管疾病、２型糖尿
征之一，也在ＰＣＯＳ的发生发展中起着中心作用，影响了患者的生殖和代谢表型。自１９６２年Ｍａｈｅｓｈ和Ｇｒｅｅｎｂｌａｔｔ从ＰＣＯＳ患者的卵巢中分离出了雄激素以后，雄激素就开始用于诱导ＰＣＯＳ动物模型。雄激素主要包括三种：睾酮（ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ，Ｔ），脱氢表