流式细胞仪工作原理及临床应用
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管即可检测，荧光信号较弱，需用光电倍增管接收并 放大。散射光和荧光信号接收后经 0 J H 转换成数字 信号送计算机处理，可在计算机上直观地统计染上各 种荧光染料的细胞各自的百分率。选择不同的单克隆 抗体及荧光染料，可同时测定一个细胞上的多种不同 细胞表面抗原表达、 的特征， 如细胞大小、 H1 0 含量、 癌基因蛋白等等。 如果对某种特征的细胞有兴趣，还可利用 6 ,@ 的分选功能将其分选出来， 以便进一步培养研究。 标本来源可以是血液、 尿液、 细胞培养液、 胸水、 腹水、 灌洗液、 新鲜实体瘤及活检组织标本、 石蜡固定 标本等。 6 ,@ 在临床上的应用 # K ! 在免疫学中的应用 # K ! K ! 淋巴细胞亚群分析 #
流式细胞仪工作原理及临床应用
作者： 作者单位： 刊名： 英文刊名： 年，卷(期)： 被引用次数： 杨进 山东省立医院医疗设备科,山东,济南,250021 医疗设备信息 INFORMATION OF MEDICAL EQUIPMENT 2002，17(1) 9次
相似文献(10条) 1.学位论文 周宇 激光爆破微泡对视网膜母细胞瘤细胞膜通透性影响的实验研究 2009
研究目的：1.探讨激光爆破脂质体微泡的可行性；2.研究激光及激光爆破微泡对视网膜母细胞瘤细胞增殖影响；3.研究激光爆破微泡对视网膜母细胞瘤细胞膜通 透性影响，并与超声爆破微泡进行对比。 研究方法 1.首先采用不同波长激光的大功率进行照射，采用DFY-Ⅱ型超声定量分析诊断仪检测微泡爆破率，筛选可成功爆破脂质体微泡的激光类型。 2.采用筛选出的Nd：YAG激光，用不同的激光参数照射微泡，比较不同参数下微泡的爆破率。 3.采用Nd：YAG激光，MTT法检测在不同的参数下激光及激光爆破微泡对视网膜母细胞瘤细胞增殖影响，并与超声爆破微泡进行对比。 4.采用流式细胞仪检测激光及激光爆破微泡对视网膜母细胞瘤细胞膜通透性影响，与超声爆破微泡进行对比。 研究结果 1.Nd：YAG激光在总能量>250mJ时能够成功爆破脂质体微泡；能量越高、微泡爆破率越高；激光总能量>500mJ时，其微泡爆破率>90％。 2.Nd：YAG激光总能量>500mJ时，对视网膜母细胞瘤细胞增殖有影响，加入微泡后对细胞损伤增加。 3.Nd：YAG激光照射可增加细胞膜通透性，联合微泡照射后细胞膜通透性明显增加，但均低于超声联合微泡照射组。 结论 1.氩-绿激光及固体多波长激光均不能爆破脂质体微泡。 2.Nd：YAG激光可成功爆破脂质体微泡，激光能量越大、微泡爆破率越高。 3.Nd：YAG激光总能量大于一定阈值时，对视网膜母细胞瘤细胞增殖有抑制作用，联合微泡照射后，细胞存活率明显减低。 4.Nd：YAG激光联合微泡照射可增加其对视网膜母细胞瘤细胞膜通透性的影响。
测定进行包括癌前病变及早期癌变的检出、 化疗指导 以及预后评估等工作。( )* 可精确定量 34 5 含量， 能对癌前病变的性质和发展趋势作出判断， 有助于癌 变的早期诊断。 细胞异常增值和分化障碍是肿瘤细胞的特性， 34 5 含量不仅能非常敏感的反映细胞代谢的异常， 而且能通过 34 5 倍体分析，细胞周期各时相的细胞 比例分析， 并结合细胞抗 原 的 表达多参 数 分 析， 全面 ! !##! 年第 $ 期 ! 万方数据
2.期刊论文 胡冰冰.杨录军.周燕虹.刘胜学.刘晋袆.曹佳.HU Bing-bing.YANG Lu-jun.ZHOU Yan-hong.LIU Sheng-xue.LIU Jin-yi.CAO Jia 小鼠骨髓嗜多染红细胞微核单激光流式细胞仪自动化检测 -癌变·畸变·突变2006,18(1)
背景与目的:建立快速检测小鼠骨髓嗜多染红细胞微核的流式细胞仪自动化方法.材料与方法:以环磷酰胺处理雄性KM小鼠,分别用丫啶橙(Acridine orange,AO)、 单激光流式细胞仪(Flow cytometer,FCM)、姬姆萨(Giemsa)法检测小鼠骨髓及外周血嗜多染、正染红细胞微核率,将检测结果进行比较.结果:以前置角散射光(Forward angle scatter,FSC)和DNA荧光(FL1)作图,清晰可见小鼠骨髓细胞被分成5个群体--有核细胞、嗜多染、正染、含微核的嗜多染及正染红细胞;环磷酰胺诱导的小鼠骨髓 嗜多染及正染红细胞微核率呈良好的剂量-反应关系;FCM、快速AO法与Giemsa法检测结果具有良好的相关性(r=0.973,P＜0.01;r=0.978,P＜0.01).结论:AO-FCM自动化 检测方法完全适用于小鼠骨髓红细胞微核率的检测.
综
合
好甚至温度过高导致保护而禁止曝光， 影响球管寿命 由于处于旋转的机架上，机架控制板及 35 + 系 统比较容易出问题，机架瞬间启动、瞬间停止对机架 的马达、 电源冲击都很大。 同时机架控制板及 35 + 系 统对直流电源的精度要求比较高， 电源电压的纹波或 偏差值不能太大。纹波太大就会对电路造成干扰， 图 像质量变差； 偏值太大， 就会使电路不能正常工作， 导 致图像伪影的产生。 从检索统计结果中可以看出， 除上面所讲的部件 易出故障外， 其它一些部件也有故障出现。要杜绝故 障的发生是不可能的， 但只要日常工作中注意对机器 的维护、 保养， 完全可以将 ) 1 机的故障率降到最低， 最大地提高社会效益和经济效益。 #
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流式细胞仪 . 6 789 :; < 8= >< >? 6 ,@ % 是在荧光激 活细胞分离器 . 6 7A8?>B:>5:> 0 :< 4C D< >E , >77 F 8? < >? 计算机 6 0 , G % 的基础上发展起来的。随着激光技术、 检测速度、 统计的精确 技术的发展， 6 ,@ 的灵敏度、 度都得到提高。单克隆抗体技术的发展以及人类白细 胞分化抗原意义的确认，更促进了 6 ,@ 的应用和发 展。 细胞表面抗原表达等进行定 6 ,@ 可对细胞大小、 量、 快速、 客观、 多参数相关检测， 同时可用于细胞内 的核酸定量， 细胞周期分析， 细胞因子和 H1 0 倍体、 粘附分子的检测，细胞凋亡的研究及肿瘤相关抗原的 监测。 在免疫 6 ,@ 已广泛用于基础研究与临床检验。 学、 细胞遗传学、 分子生物学、 血液学、 肿瘤学、 药理 学、 病理学等领域发挥着重要作用。 流式细胞仪主 ! 流式细胞仪的结构及工作原理 要由 I 部分组成—细胞流动室，激光聚焦区，检测系 统， 数据处理系统。 将待测标本制备成单细胞悬液，经荧光染色后由 气压装置送入流动室，流动室由样品管和鞘液管组 成，鞘液管充满流动的鞘液，鞘液流与样品流压力不 等，当两者压力差达到一定程度时，鞘液裹挟着样品 流迫使细胞有序地排列成单列，逐个通过喷嘴进入激 光聚焦区。如果我们将细胞中感兴趣的部分特异地标 上荧光染料，那么这些染料将在通过激光检测区时受 激光束激发，产生散射光和荧光信号，通过一些波长 选择通透性滤光片，我们可将不同波长的散射光和荧 光信号区分开来。散射光是从细胞表面或细胞内颗粒 散射出来的原激发 光 谱， 其 信 号比较强， 用 光 敏 二极
重要依据。 白细胞在其分化的不同阶段承担不同功能 时有不同的特征抗原表达， ( )* 可结合单克隆抗体， 提高白血病分型诊断的符合率， 根据白血病细胞所表 达相关细胞的种系抗原，可将它分为 0 细胞系、1 细 胞系、 髓细胞系、 红细胞系和巨核细胞系， 可确诊白血 病的分型和分期， 并可探明慢粒急变时的细胞来源。 微小残留病变是白血病复发的主要根源。 ( )* 以其特有的高分辨力与敏感性可在患者缓解期检测 是否有残留病变细胞，可及早发现，采取措施避免复 发。 !& 2
6 ,@ 可同时检测出一 种或几种淋巴细胞细胞表面抗原，将不同的淋巴细胞 亚群区分开来，并计算出它们相互间的比例。通过对 病人淋巴细胞各亚群数量的测定来监控病人的免疫 状态， 指导治疗。 # K ! K # 感染及其治疗效果观察 由于 ) 淋巴细胞在人体免疫系统中承担着重要 功能，故当感染发生时，) 淋巴细胞各亚群的变化很 敏感地反映感染的状态与程度，6 ,@ 对 ) 淋巴细胞 各亚群的测定可有助于对感染的诊断及疗效的动态 观察， 且比传统方法更快捷、 更真实、 更具统计意义。 # K ! K L 还可利用 6 ,@ 对器官或骨髓移植病人进行 监控， 指导抗感染及免疫抑制剂的使用。 . 下转第 #+ 页） ・ !"・
医疗设备信息
仪器原理与使用
流式细胞仪工作原理及临床应用
杨 （山东省立医院 进 济南 #"$$#! % 医疗设备科， 山东
&摘
要 ’ 流式细胞术是 #$ 世纪 ($ 年代发展起来的一种快速对单细胞进行定量分析和分选的新技术， 随着单克隆抗体技术、 激
光技术、 计算机技术、 流体力学、 荧光染料等多学科新技术的高度发展， 它在生物医学领域的应用越来越广泛。 本文着重介绍流式细 胞仪的工作原理、 临床应用及使用中应注意的问题。 & 关键词 ’ 流式细胞仪； 激光； 单抗； 荧光 & 中图分类号 ’ ) * (+ & 文献标识码 ’ , & 文章编号 ’ !$$( - ("!$ . #$$# % $! - $$!" - $!
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（上接第 $% 页） !& $& ’ ( )* 还可用来对其它免疫功能性疾病如 强直性脊髓炎、 变态反 + , - . 系统性红斑狼疮 / 病人， 应性疾病、 肾病综合症等进行检测与疗效观察。 !& ! ( )* 在白血病中的应用 白血病免疫分型是选择化疗方案和判断预后的 了解细胞的生物学行为，从而帮助肿瘤的诊断，选择 治疗方案和预后判断。 不同类型的肿瘤对化疗药物的敏感程序不同， 可 利用 ( )* 进行细胞周期分析，适当选用周期特异性 药物或非周期特异性药物， 为治疗方案和药理学研究 提供依据。 ( )* 还可进行活细胞内活性酶的检测。利用活 细胞酶探针测量单一活体细胞内酶的活性。 ( )* 还 可作细胞凋亡检测。 对以往的病理组织进行回顾性研 究。 2 注意的问题 有关流式细胞仪的一般故障与排除， 设备维修手 册中已有介绍， 不再赘述。提及一点操作者易忽略的 问题， 就是样品处理后最好在荧光显微镜下快速检查 一下，若在荧光显微镜下看到的效果很差，有细胞碎 ( )* 在肿瘤学中的应用 ( )* 在肿瘤学中的应用主要是利用 34 5 含量 片和凝集团， 在流式细胞仪上看到的情况会更差。不 仅不会获得有价值的结果，还会堵塞管道及喷嘴，带 来更大的麻烦。碰到这种情况， 可将样品重新处理后 观察。 随着单抗技术及其他相关技术的不断发展， 流式 细胞仪的应用领域将会得到不断的开拓， 成为科研与 临床不可缺少的重要手段。 这就要求操作人员熟悉了 解仪器各部分基本原理，减少和避免设备故障的发 生。 # ・ !"・
! #$$# 年第 ! 期 ! 万方数据
医疗设备信息
缆与发生器、 高压电缆与球管之间若接触不良很容易 发生高压打火， 缠绕在机架上的高压电缆在机架旋转 过程中若被机架静止部分挂住则会发生脱落而引起 事故。 球管是一个消耗性部件， 它的使用寿命与制造材 料、 制造工艺、 使用环境、 使用条件、 使用方法都有密 切关系。球管的更换分两种情况 6 老化和损坏。若球 管内真空度或绝缘度下降球管就会出现打火现象； 灯 丝烧坏、 阳极板或旋转阳极驱动电机损坏也会导致球 管报废。球管老化主要表现在图像质量下降上， 早期 / 还可以通过增大扫描条件 . 78 、 、 等来校正， 后 95 : 期则禁止高条件扫描模式的使用。 球管的冷却装置对 球管的使用也密切相关， 冷却装置故障 . 如风扇不转 / 或性能不好 . 冷却源自文库油粘度上升 / 就会使球管散热不 及正常使用。
管即可检测，荧光信号较弱，需用光电倍增管接收并 放大。散射光和荧光信号接收后经 0 J H 转换成数字 信号送计算机处理，可在计算机上直观地统计染上各 种荧光染料的细胞各自的百分率。选择不同的单克隆 抗体及荧光染料，可同时测定一个细胞上的多种不同 细胞表面抗原表达、 的特征， 如细胞大小、 H1 0 含量、 癌基因蛋白等等。 如果对某种特征的细胞有兴趣，还可利用 6 ,@ 的分选功能将其分选出来， 以便进一步培养研究。 标本来源可以是血液、 尿液、 细胞培养液、 胸水、 腹水、 灌洗液、 新鲜实体瘤及活检组织标本、 石蜡固定 标本等。 6 ,@ 在临床上的应用 # K ! 在免疫学中的应用 # K ! K ! 淋巴细胞亚群分析 #
流式细胞仪工作原理及临床应用
作者： 作者单位： 刊名： 英文刊名： 年，卷(期)： 被引用次数： 杨进 山东省立医院医疗设备科,山东,济南,250021 医疗设备信息 INFORMATION OF MEDICAL EQUIPMENT 2002，17(1) 9次
相似文献(10条) 1.学位论文 周宇 激光爆破微泡对视网膜母细胞瘤细胞膜通透性影响的实验研究 2009
研究目的：1.探讨激光爆破脂质体微泡的可行性；2.研究激光及激光爆破微泡对视网膜母细胞瘤细胞增殖影响；3.研究激光爆破微泡对视网膜母细胞瘤细胞膜通 透性影响，并与超声爆破微泡进行对比。 研究方法 1.首先采用不同波长激光的大功率进行照射，采用DFY-Ⅱ型超声定量分析诊断仪检测微泡爆破率，筛选可成功爆破脂质体微泡的激光类型。 2.采用筛选出的Nd：YAG激光，用不同的激光参数照射微泡，比较不同参数下微泡的爆破率。 3.采用Nd：YAG激光，MTT法检测在不同的参数下激光及激光爆破微泡对视网膜母细胞瘤细胞增殖影响，并与超声爆破微泡进行对比。 4.采用流式细胞仪检测激光及激光爆破微泡对视网膜母细胞瘤细胞膜通透性影响，与超声爆破微泡进行对比。 研究结果 1.Nd：YAG激光在总能量>250mJ时能够成功爆破脂质体微泡；能量越高、微泡爆破率越高；激光总能量>500mJ时，其微泡爆破率>90％。 2.Nd：YAG激光总能量>500mJ时，对视网膜母细胞瘤细胞增殖有影响，加入微泡后对细胞损伤增加。 3.Nd：YAG激光照射可增加细胞膜通透性，联合微泡照射后细胞膜通透性明显增加，但均低于超声联合微泡照射组。 结论 1.氩-绿激光及固体多波长激光均不能爆破脂质体微泡。 2.Nd：YAG激光可成功爆破脂质体微泡，激光能量越大、微泡爆破率越高。 3.Nd：YAG激光总能量大于一定阈值时，对视网膜母细胞瘤细胞增殖有抑制作用，联合微泡照射后，细胞存活率明显减低。 4.Nd：YAG激光联合微泡照射可增加其对视网膜母细胞瘤细胞膜通透性的影响。
测定进行包括癌前病变及早期癌变的检出、 化疗指导 以及预后评估等工作。( )* 可精确定量 34 5 含量， 能对癌前病变的性质和发展趋势作出判断， 有助于癌 变的早期诊断。 细胞异常增值和分化障碍是肿瘤细胞的特性， 34 5 含量不仅能非常敏感的反映细胞代谢的异常， 而且能通过 34 5 倍体分析，细胞周期各时相的细胞 比例分析， 并结合细胞抗 原 的 表达多参 数 分 析， 全面 ! !##! 年第 $ 期 ! 万方数据
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背景与目的:建立快速检测小鼠骨髓嗜多染红细胞微核的流式细胞仪自动化方法.材料与方法:以环磷酰胺处理雄性KM小鼠,分别用丫啶橙(Acridine orange,AO)、 单激光流式细胞仪(Flow cytometer,FCM)、姬姆萨(Giemsa)法检测小鼠骨髓及外周血嗜多染、正染红细胞微核率,将检测结果进行比较.结果:以前置角散射光(Forward angle scatter,FSC)和DNA荧光(FL1)作图,清晰可见小鼠骨髓细胞被分成5个群体--有核细胞、嗜多染、正染、含微核的嗜多染及正染红细胞;环磷酰胺诱导的小鼠骨髓 嗜多染及正染红细胞微核率呈良好的剂量-反应关系;FCM、快速AO法与Giemsa法检测结果具有良好的相关性(r=0.973,P＜0.01;r=0.978,P＜0.01).结论:AO-FCM自动化 检测方法完全适用于小鼠骨髓红细胞微核率的检测.
综
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好甚至温度过高导致保护而禁止曝光， 影响球管寿命 由于处于旋转的机架上，机架控制板及 35 + 系 统比较容易出问题，机架瞬间启动、瞬间停止对机架 的马达、 电源冲击都很大。 同时机架控制板及 35 + 系 统对直流电源的精度要求比较高， 电源电压的纹波或 偏差值不能太大。纹波太大就会对电路造成干扰， 图 像质量变差； 偏值太大， 就会使电路不能正常工作， 导 致图像伪影的产生。 从检索统计结果中可以看出， 除上面所讲的部件 易出故障外， 其它一些部件也有故障出现。要杜绝故 障的发生是不可能的， 但只要日常工作中注意对机器 的维护、 保养， 完全可以将 ) 1 机的故障率降到最低， 最大地提高社会效益和经济效益。 #
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重要依据。 白细胞在其分化的不同阶段承担不同功能 时有不同的特征抗原表达， ( )* 可结合单克隆抗体， 提高白血病分型诊断的符合率， 根据白血病细胞所表 达相关细胞的种系抗原，可将它分为 0 细胞系、1 细 胞系、 髓细胞系、 红细胞系和巨核细胞系， 可确诊白血 病的分型和分期， 并可探明慢粒急变时的细胞来源。 微小残留病变是白血病复发的主要根源。 ( )* 以其特有的高分辨力与敏感性可在患者缓解期检测 是否有残留病变细胞，可及早发现，采取措施避免复 发。 !& 2
6 ,@ 可同时检测出一 种或几种淋巴细胞细胞表面抗原，将不同的淋巴细胞 亚群区分开来，并计算出它们相互间的比例。通过对 病人淋巴细胞各亚群数量的测定来监控病人的免疫 状态， 指导治疗。 # K ! K # 感染及其治疗效果观察 由于 ) 淋巴细胞在人体免疫系统中承担着重要 功能，故当感染发生时，) 淋巴细胞各亚群的变化很 敏感地反映感染的状态与程度，6 ,@ 对 ) 淋巴细胞 各亚群的测定可有助于对感染的诊断及疗效的动态 观察， 且比传统方法更快捷、 更真实、 更具统计意义。 # K ! K L 还可利用 6 ,@ 对器官或骨髓移植病人进行 监控， 指导抗感染及免疫抑制剂的使用。 . 下转第 #+ 页） ・ !"・
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流式细胞仪工作原理及临床应用
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医疗设备信息
缆与发生器、 高压电缆与球管之间若接触不良很容易 发生高压打火， 缠绕在机架上的高压电缆在机架旋转 过程中若被机架静止部分挂住则会发生脱落而引起 事故。 球管是一个消耗性部件， 它的使用寿命与制造材 料、 制造工艺、 使用环境、 使用条件、 使用方法都有密 切关系。球管的更换分两种情况 6 老化和损坏。若球 管内真空度或绝缘度下降球管就会出现打火现象； 灯 丝烧坏、 阳极板或旋转阳极驱动电机损坏也会导致球 管报废。球管老化主要表现在图像质量下降上， 早期 / 还可以通过增大扫描条件 . 78 、 、 等来校正， 后 95 : 期则禁止高条件扫描模式的使用。 球管的冷却装置对 球管的使用也密切相关， 冷却装置故障 . 如风扇不转 / 或性能不好 . 冷却源自文库油粘度上升 / 就会使球管散热不 及正常使用。