蛋白质的变性(课堂PPT)
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蛋白质变性ppt课件
在多肽链中带有氨基的一端称作N端，而带有羧基的一 端称作C端。
30
胰岛素的一级结构
31
32
3. 三级结构：是指多肽链借助各种作用力在二级结 构基础上，进一步折叠卷曲形成紧密的复杂球形分 子的结构。
稳定蛋白质三级结构的作用力有氢键、离子键、 二硫键和范德华力。
肌球素的三级结构
肌球素的三级结构
33
55
（4）费林反应: 含有酪氨酸的Pr因酪氨酸的酚基能育费林试剂
中的磷钼酸和磷钨酸反应，还原成蓝色化合物。利 用这一反应定量测定Pr。
56
蛋白质的二、三、四级结构的构象不稳定，在 某些物理或化学因素作用下，发生不同程度的改变称 为变性。变性是指蛋白质高级结构发生改变，而肽键 不断裂。变性后的蛋白质某些性质发生变化，主要包 括：
些碳水化合物是氨基葡萄糖、氨基半乳糖、半乳糖、 甘露糖、海藻糖等中的一种或多种，与蛋白质间的共 价键或羟基生成配糖体。糖蛋白可溶于碱性溶液。哺 乳动物的物的粘性分泌物、血浆蛋白、卵粘蛋白及大 豆某些部位中之蛋白质都属于糖蛋白。
44
3．核蛋白： 由核酸与蛋白质结合而成的复合物。存在细胞
核及核糖体中。
11
4.非极性氨基酸：具有一个疏水性侧链，在水中的溶 解度比极性氨基酸低。共有： 甘氨酸，丙氨酸、缬氨酸，亮氨酸、甲硫氨酸和异 亮氨酸(蛋氨酸)．
12
1. 旋光性：除甘氨酸外， 氨基酸的碳原子均是手性 碳原子，所以具有旋光性。 旋光方向和大小取决于其 侧链R基性质，也与水溶液 的pH有关。
13
2. 紫外吸收：20种AA在可见区内无吸收，但在紫外光 区酪氨酸、色氨酸和苯丙氨酸有吸收，其最大吸收波 λman分别为278nm、279nm和259nm，故此利用此性质 对这三种氨基酸进行测定。酪氨酸、色氨酸残基同样 在280nm处有最大的吸收，可用紫外分光光度法定量 分析蛋白质。
30
胰岛素的一级结构
31
32
3. 三级结构：是指多肽链借助各种作用力在二级结 构基础上，进一步折叠卷曲形成紧密的复杂球形分 子的结构。
稳定蛋白质三级结构的作用力有氢键、离子键、 二硫键和范德华力。
肌球素的三级结构
肌球素的三级结构
33
55
（4）费林反应: 含有酪氨酸的Pr因酪氨酸的酚基能育费林试剂
中的磷钼酸和磷钨酸反应，还原成蓝色化合物。利 用这一反应定量测定Pr。
56
蛋白质的二、三、四级结构的构象不稳定，在 某些物理或化学因素作用下，发生不同程度的改变称 为变性。变性是指蛋白质高级结构发生改变，而肽键 不断裂。变性后的蛋白质某些性质发生变化，主要包 括：
些碳水化合物是氨基葡萄糖、氨基半乳糖、半乳糖、 甘露糖、海藻糖等中的一种或多种，与蛋白质间的共 价键或羟基生成配糖体。糖蛋白可溶于碱性溶液。哺 乳动物的物的粘性分泌物、血浆蛋白、卵粘蛋白及大 豆某些部位中之蛋白质都属于糖蛋白。
44
3．核蛋白： 由核酸与蛋白质结合而成的复合物。存在细胞
核及核糖体中。
11
4.非极性氨基酸：具有一个疏水性侧链，在水中的溶 解度比极性氨基酸低。共有： 甘氨酸，丙氨酸、缬氨酸，亮氨酸、甲硫氨酸和异 亮氨酸(蛋氨酸)．
12
1. 旋光性：除甘氨酸外， 氨基酸的碳原子均是手性 碳原子，所以具有旋光性。 旋光方向和大小取决于其 侧链R基性质，也与水溶液 的pH有关。
13
2. 紫外吸收：20种AA在可见区内无吸收，但在紫外光 区酪氨酸、色氨酸和苯丙氨酸有吸收，其最大吸收波 λman分别为278nm、279nm和259nm，故此利用此性质 对这三种氨基酸进行测定。酪氨酸、色氨酸残基同样 在280nm处有最大的吸收，可用紫外分光光度法定量 分析蛋白质。
蛋白质的变性ppt课件
0 4 蛋白质的变性
主讲人：白晓燕
精品课件
1
实教验 材探 分究析
本节课选自人教版普通高 中课程标准实验教科书 化学（选修1） 化学与生 活 第一章 第三节
精品课件
2
实学验 情探 分究析
根据生活经验对蛋白质的变性有一定 的感性认识，但对于变性的特点、条 件及其定义并不明确。
精品课件Biblioteka 3实教验 学探 理究念 建构主义理论代表人物
2、加热会使蛋白质变性，吃生鸡蛋会比 熟鸡蛋好吗？
精品课件
21
谢谢
THE END
精品课件
22
感谢亲观看此幻灯片，此课件部分内容来源于网络， 如有侵权请及时联系我们删除，谢谢配合！
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1、加入乙酸铅后有沉淀产生
2、向其中加入蒸馏水，沉淀不 溶解
变性
反应特点
有沉淀产生 沉淀不溶解
精品课件
13
想一想
（用类比的方法）
还有那些方法可以使蛋白质发生类似的反应？
精品课件
14
条件探索
精品课件
15
实验操作
无水 乙醇 15滴
实验现象
加热有沉淀生 成
加入蒸馏水沉 淀不溶解
加无水乙醇有 沉淀生成
加入蒸馏水沉 淀不溶解
精品课件
实验结论
发生了变性
发生了变性
16
归纳总结
变性反应的条件
物理因素：加热、加压、搅拌、振荡、紫外线照射、 超声波等
化学因素：强酸、强碱、重金属盐、三氯乙酸、尿素、乙 醇、丙酮等
定义：在某些物理因素和化学因素的影响下，蛋白质的理 化性质和生理功能发生改变的现象
主讲人：白晓燕
精品课件
1
实教验 材探 分究析
本节课选自人教版普通高 中课程标准实验教科书 化学（选修1） 化学与生 活 第一章 第三节
精品课件
2
实学验 情探 分究析
根据生活经验对蛋白质的变性有一定 的感性认识，但对于变性的特点、条 件及其定义并不明确。
精品课件Biblioteka 3实教验 学探 理究念 建构主义理论代表人物
2、加热会使蛋白质变性，吃生鸡蛋会比 熟鸡蛋好吗？
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21
谢谢
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1、加入乙酸铅后有沉淀产生
2、向其中加入蒸馏水，沉淀不 溶解
变性
反应特点
有沉淀产生 沉淀不溶解
精品课件
13
想一想
（用类比的方法）
还有那些方法可以使蛋白质发生类似的反应？
精品课件
14
条件探索
精品课件
15
实验操作
无水 乙醇 15滴
实验现象
加热有沉淀生 成
加入蒸馏水沉 淀不溶解
加无水乙醇有 沉淀生成
加入蒸馏水沉 淀不溶解
精品课件
实验结论
发生了变性
发生了变性
16
归纳总结
变性反应的条件
物理因素：加热、加压、搅拌、振荡、紫外线照射、 超声波等
化学因素：强酸、强碱、重金属盐、三氯乙酸、尿素、乙 醇、丙酮等
定义：在某些物理因素和化学因素的影响下，蛋白质的理 化性质和生理功能发生改变的现象
蛋白质7教学课件.ppt
可逆变性、不可逆变性。
蛋白质变性后其பைடு நூலகம்理化学性质变化表现为：
①疏水性基团暴露，水中溶解性降低； ②某些蛋白质的生物活性丧失，如失去酶活或免疫活性； ③肽键暴露出，易被酶催化水解； ④蛋白质结合水的能力发生了变化； ⑤溶液粘度发生了变化； ⑥蛋白质结晶能力丧失。
引起蛋白质变性的因素
❖ 物理因素： 温度（热，冷）、机械处理、电磁
蚕豆 11S 蛋白
94
72
3.72
向日葵 11S 蛋白 95
76
4.16
燕麦球蛋白
108
2.冷冻
❖ 低温处理也会导致蛋白质变性。
❖ 有利：利用这一点，我们可以通过冷冻及 冻结贮藏抑制微生物和酶的活性，延长烹 饪原料的保鲜期。
❖ 不利：长期的低温处理也会导致烹饪原料 蛋白质冻结变性而被破坏，如冷冻的鱼类、 肉类长时间放置，蛋白质持水力下降、肉 质硬化等现象。
的影响，蛋白质在等电点时最稳定，溶解度最低， 在中性pH 环境中，除少数几个蛋白质带有正电 荷外，大多数蛋白质都带有负电荷。
❖ 酸碱引起的蛋白质变性可能是因为蛋白质溶 液pH值的改变导致多肽链中某些基团的解离 程度发生变化，从而破坏了维持蛋白质分子 空间结构所必需的某些带相反电荷基团之间 因静电作用形成的键。
冷冻对蛋白质产生不利影响的原因：
❖ 1、蛋白质水合环境发生变化。 ❖ 2、体系结冰后盐浓度增大产生盐效应。 ❖ 3、冷冻浓缩效应，使二硫键交换反应增加。
3 机械处理
揉捏、振动、挤压或搅打等高速机械 剪切，都能引起蛋白质变性。
剪切速率愈高，蛋白质变性程度则愈大。 同时受到高温和高剪切力处理的蛋白质，则 发生不可逆变性。
蛋白质
Td
平均疏水性
蛋白质变性后其பைடு நூலகம்理化学性质变化表现为：
①疏水性基团暴露，水中溶解性降低； ②某些蛋白质的生物活性丧失，如失去酶活或免疫活性； ③肽键暴露出，易被酶催化水解； ④蛋白质结合水的能力发生了变化； ⑤溶液粘度发生了变化； ⑥蛋白质结晶能力丧失。
引起蛋白质变性的因素
❖ 物理因素： 温度（热，冷）、机械处理、电磁
蚕豆 11S 蛋白
94
72
3.72
向日葵 11S 蛋白 95
76
4.16
燕麦球蛋白
108
2.冷冻
❖ 低温处理也会导致蛋白质变性。
❖ 有利：利用这一点，我们可以通过冷冻及 冻结贮藏抑制微生物和酶的活性，延长烹 饪原料的保鲜期。
❖ 不利：长期的低温处理也会导致烹饪原料 蛋白质冻结变性而被破坏，如冷冻的鱼类、 肉类长时间放置，蛋白质持水力下降、肉 质硬化等现象。
的影响，蛋白质在等电点时最稳定，溶解度最低， 在中性pH 环境中，除少数几个蛋白质带有正电 荷外，大多数蛋白质都带有负电荷。
❖ 酸碱引起的蛋白质变性可能是因为蛋白质溶 液pH值的改变导致多肽链中某些基团的解离 程度发生变化，从而破坏了维持蛋白质分子 空间结构所必需的某些带相反电荷基团之间 因静电作用形成的键。
冷冻对蛋白质产生不利影响的原因：
❖ 1、蛋白质水合环境发生变化。 ❖ 2、体系结冰后盐浓度增大产生盐效应。 ❖ 3、冷冻浓缩效应，使二硫键交换反应增加。
3 机械处理
揉捏、振动、挤压或搅打等高速机械 剪切，都能引起蛋白质变性。
剪切速率愈高，蛋白质变性程度则愈大。 同时受到高温和高剪切力处理的蛋白质，则 发生不可逆变性。
蛋白质
Td
平均疏水性
实验二蛋白质沉淀变性反应 ppt课件
的病人
有机酸沉 淀
生成不溶性盐
苦味酸、鞣酸、三氯醋酸、 磺基水杨酸等生物碱试剂
沉淀蛋白滤液等
蛋白质沉淀分类
（1）可逆沉淀反应：蛋白质分子内部结构并未发生 显著变化，基本保持原有的性质，沉淀因素除去后， 能溶于原来的溶剂中。例如：盐析、乙醇低温短时作 用，可用于蛋白质提纯。 （2）不可逆沉淀反应：蛋白质分子内部结构、空 间构象遭到破坏，失去原来的天然性质，不再溶于 原溶剂。例如：加热、有机酸反应。
步骤
现象
取试管1，加入1mL蛋白质氯化 观察有无蛋白质的沉
钠溶液和21mL95%乙醇
淀
静置，弃去上清液，取出部分 蛋白沉淀，加少量蒸馏水
观察沉淀的再溶解
解释结论
3. 蛋白质的不可逆反应——重金属盐（3支试管）
试管 操作
现象
操作
现象
试管 1 ①1mL蛋白质溶液
观 察 有 无 弃去上清液，取 观察沉淀
蛋白质分 子表面
水化膜 同种电荷
稳定的亲水胶 脱水，失去电荷
沉淀反应
可逆沉淀反应 （不变性沉淀反应）
如：盐析作用…
不可逆沉淀反应 （变性沉淀反应） 如：重金属盐沉淀作用…
三、实验仪器和试剂
1. 试剂
• 蛋白质溶液：取10mL鲜鸡蛋清，用蒸馏水稀释至 200ml，搅拌后用2-3层纱布过滤，新鲜配制。加 入少量氯化钠可加速溶解球蛋白。
（1）盐析 （2）有机试剂 （3）重金属盐 （4）有机酸 （5）加热
…………
蛋白质沉淀变性的常见方法
常用方法 盐析
有机试剂 盐析
原理 破坏蛋白质胶体溶液的水化
层和电荷层 脱水作用；降低水的介电常 数和蛋白质溶解度；蛋白质
析出
有机酸沉 淀
生成不溶性盐
苦味酸、鞣酸、三氯醋酸、 磺基水杨酸等生物碱试剂
沉淀蛋白滤液等
蛋白质沉淀分类
（1）可逆沉淀反应：蛋白质分子内部结构并未发生 显著变化，基本保持原有的性质，沉淀因素除去后， 能溶于原来的溶剂中。例如：盐析、乙醇低温短时作 用，可用于蛋白质提纯。 （2）不可逆沉淀反应：蛋白质分子内部结构、空 间构象遭到破坏，失去原来的天然性质，不再溶于 原溶剂。例如：加热、有机酸反应。
步骤
现象
取试管1，加入1mL蛋白质氯化 观察有无蛋白质的沉
钠溶液和21mL95%乙醇
淀
静置，弃去上清液，取出部分 蛋白沉淀，加少量蒸馏水
观察沉淀的再溶解
解释结论
3. 蛋白质的不可逆反应——重金属盐（3支试管）
试管 操作
现象
操作
现象
试管 1 ①1mL蛋白质溶液
观 察 有 无 弃去上清液，取 观察沉淀
蛋白质分 子表面
水化膜 同种电荷
稳定的亲水胶 脱水，失去电荷
沉淀反应
可逆沉淀反应 （不变性沉淀反应）
如：盐析作用…
不可逆沉淀反应 （变性沉淀反应） 如：重金属盐沉淀作用…
三、实验仪器和试剂
1. 试剂
• 蛋白质溶液：取10mL鲜鸡蛋清，用蒸馏水稀释至 200ml，搅拌后用2-3层纱布过滤，新鲜配制。加 入少量氯化钠可加速溶解球蛋白。
（1）盐析 （2）有机试剂 （3）重金属盐 （4）有机酸 （5）加热
…………
蛋白质沉淀变性的常见方法
常用方法 盐析
有机试剂 盐析
原理 破坏蛋白质胶体溶液的水化
层和电荷层 脱水作用；降低水的介电常 数和蛋白质溶解度；蛋白质
析出
蛋白质的理化性质ppt课件
44
蛋白质的热变性与凝固作用
2、蛋白质的凝固作用
天然蛋白质变性后，变性蛋 白质分子互相凝集或相互穿插 缠绕在一起的现象成为蛋白质 的凝固（coagulation） 。
凝固作用分两个阶段： 首先是变性； 其次失去规律性的肽链聚集缠绕在一起而凝固或结絮;
45
淀，加热后变成红色 31
六、蛋白质的颜色反应
7. 乙醛酸反应—色氨酸的特有反应
在蛋白质溶液中加入HCOCOOH，将 浓硫酸沿管壁缓慢加入，不使相混， 在液面交界处，即有紫色环形成
色氨酸的反应（吲哚环的反应） 鉴定蛋白质中是否含有色氨酸 明胶中不含色氨酸
32
六、蛋白质的颜色反应
8. 坂口反应—精氨酸特有的反应
19
蛋白质仍能保持生物活性的沉淀方法
（1）盐析—中性盐沉淀 What’s salt precipitation of protein? 盐溶作用 盐析作用
20
蛋白质仍能保持生物活性的沉淀方法
（1）盐析—中性盐沉淀
What’s salt precipitation of protein? 定义：在蛋白质溶液中加入大量中性盐，以
沉淀原理：
① 脱水作用——破坏水化膜； ② 使水的介电常数降低，蛋白质溶解度降低。
24
蛋白质仍能保持生物活性的沉淀方法
（2）有机溶剂沉淀法 处理条件： ① 低温操作；
② 沉淀完全后尽快分离；
（3）酸沉淀法 机制：破坏电荷，等电点沉淀。
25
四、蛋白质的沉淀作用
3.沉淀方法：
沉淀后蛋白质仍能保持生物活性的沉淀方法 沉淀后蛋白质失去生物活性的沉淀方法
同性电荷蛋白质分子互相排斥。
7
蛋白质颗粒的表面电荷和水化膜
蛋白质的热变性与凝固作用
2、蛋白质的凝固作用
天然蛋白质变性后，变性蛋 白质分子互相凝集或相互穿插 缠绕在一起的现象成为蛋白质 的凝固（coagulation） 。
凝固作用分两个阶段： 首先是变性； 其次失去规律性的肽链聚集缠绕在一起而凝固或结絮;
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淀，加热后变成红色 31
六、蛋白质的颜色反应
7. 乙醛酸反应—色氨酸的特有反应
在蛋白质溶液中加入HCOCOOH，将 浓硫酸沿管壁缓慢加入，不使相混， 在液面交界处，即有紫色环形成
色氨酸的反应（吲哚环的反应） 鉴定蛋白质中是否含有色氨酸 明胶中不含色氨酸
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六、蛋白质的颜色反应
8. 坂口反应—精氨酸特有的反应
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蛋白质仍能保持生物活性的沉淀方法
（1）盐析—中性盐沉淀 What’s salt precipitation of protein? 盐溶作用 盐析作用
20
蛋白质仍能保持生物活性的沉淀方法
（1）盐析—中性盐沉淀
What’s salt precipitation of protein? 定义：在蛋白质溶液中加入大量中性盐，以
沉淀原理：
① 脱水作用——破坏水化膜； ② 使水的介电常数降低，蛋白质溶解度降低。
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蛋白质仍能保持生物活性的沉淀方法
（2）有机溶剂沉淀法 处理条件： ① 低温操作；
② 沉淀完全后尽快分离；
（3）酸沉淀法 机制：破坏电荷，等电点沉淀。
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四、蛋白质的沉淀作用
3.沉淀方法：
沉淀后蛋白质仍能保持生物活性的沉淀方法 沉淀后蛋白质失去生物活性的沉淀方法
同性电荷蛋白质分子互相排斥。
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蛋白质颗粒的表面电荷和水化膜
蛋白质在贮藏加工中的变化精品课件
化合物的形成。
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4
一：生物活性丧失
蛋白质的生物活性：指蛋白质所具有的酶、 激素、毒素、抗原与抗体、血红蛋白的载 氧能力等生物学功能。
生物活性丧失是蛋白质变性的主要特征。 有时蛋白质的空间结构只要轻微变化即可 引起生物活性的丧失。
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5
二：某些理化性质的改变
蛋白质变性后理化性质发生改变，如溶解 度降低而产生沉淀，因为有些原来在分子 内部的疏水基团由于结构松散而暴露出来, 分子的不对称性增加，蛋白质分子凝聚从 溶液中析出，因此粘度增加，扩散系数降 低。
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15
交联的形成：如Є-N-（γ-谷氨酰基/天冬氨 酰基）赖氨酰基的交联，涉及赖氨酸、谷 氨酰胺、天冬酰胺残基之间的转酰胺反应。
蛋白质交联的条件：碱性pH加热、中性pH 加热到200℃以上、离子辐照。
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16
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17
•4.6 热变性可使一些具有毒性的蛋白质 和抗营养因子失活
16、业余生活要有意义，不要越轨。2020年9月22日 星期二 10时4分59秒10:04:5922 September 2020
17、一个人即使已登上顶峰，也仍要 自强不 息。上 午10时4分59秒 上午10时4分10:04:5920.9.22
谢谢大家
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20
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6
三：生物化学性质的改变
蛋白质变性后，分子结构松散，不能形成结晶， 易被蛋白酶水解。
蛋白质的变性作用主要是由于蛋白质分子内部的 结构被破坏。天然蛋白质的空间结构是通过氢键 等次级键维持的，而变性后次级键被破坏，蛋白 质分子就从原来有序的卷曲的紧密结构变为无序 的松散的伸展状结构（但一级结构并未改变）。
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4
一：生物活性丧失
蛋白质的生物活性：指蛋白质所具有的酶、 激素、毒素、抗原与抗体、血红蛋白的载 氧能力等生物学功能。
生物活性丧失是蛋白质变性的主要特征。 有时蛋白质的空间结构只要轻微变化即可 引起生物活性的丧失。
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5
二：某些理化性质的改变
蛋白质变性后理化性质发生改变，如溶解 度降低而产生沉淀，因为有些原来在分子 内部的疏水基团由于结构松散而暴露出来, 分子的不对称性增加，蛋白质分子凝聚从 溶液中析出，因此粘度增加，扩散系数降 低。
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15
交联的形成：如Є-N-（γ-谷氨酰基/天冬氨 酰基）赖氨酰基的交联，涉及赖氨酸、谷 氨酰胺、天冬酰胺残基之间的转酰胺反应。
蛋白质交联的条件：碱性pH加热、中性pH 加热到200℃以上、离子辐照。
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•4.6 热变性可使一些具有毒性的蛋白质 和抗营养因子失活
16、业余生活要有意义，不要越轨。2020年9月22日 星期二 10时4分59秒10:04:5922 September 2020
17、一个人即使已登上顶峰，也仍要 自强不 息。上 午10时4分59秒 上午10时4分10:04:5920.9.22
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6
三：生物化学性质的改变
蛋白质变性后，分子结构松散，不能形成结晶， 易被蛋白酶水解。
蛋白质的变性作用主要是由于蛋白质分子内部的 结构被破坏。天然蛋白质的空间结构是通过氢键 等次级键维持的，而变性后次级键被破坏，蛋白 质分子就从原来有序的卷曲的紧密结构变为无序 的松散的伸展状结构（但一级结构并未改变）。
生化实验-蛋白质的变性、凝固及沉淀反应性质.ppt
结构和性质都不变 适当条件下可重新溶解 是分离和纯化的基本方法 结构和性质都发生变化 沉淀不再溶解于水
变性蛋白易于沉淀
沉淀蛋白不一定变性
接近于等电点附近的蛋白质溶液加热， 可使蛋白质发生凝固 不可逆变性状态
加热醋酸法
水/无机盐/尿素
水/无机盐/尿素/蛋白 质
蛋白质变性凝固
变性、沉淀、凝固之间关系
老年痴呆者脑血管中产生大量难溶性蛋白的诱因
蛋白质变性、沉淀和凝固可在细胞、组织的哪 些生命过程中出现？试举例与哪些疾病（或病 变）的发生相关？
变性属于蛋白质本质的变化，沉淀和凝固属于 一种现象 变性不一定沉淀，变性蛋白质只在等电点附近才沉 淀，沉淀的变性蛋白质也不一定凝固
注意事项
Байду номын сангаас
逐滴加入，仔细观察 酒精灯使用前注意酒精量的多少，加热时试管 口不可对人，不用时熄灭 酒精灯加热时，要进行晃动,避免局部高温,引 起试管炸裂 用过的枪头、滤纸放于污物缸 苦味酸属危险试剂 用过的试管仔细清洗
实验一
蛋白质的变性、凝固 及沉淀反应
生物化学与分子生物学教研室
验证关于蛋白质的相关理论 学会分析蛋白质的基本实验方法 讨论蛋白质分析在科研和临床工作中的意义
在某些物理和化学因素作用下，蛋白质 理化性质的改变和生物学活性的丧失。
引起蛋白质变性的理化因素 加热 乙醇等有机溶剂 强酸、强碱 重金属盐 生物碱试剂
学习蛋白质变性的意义 消灭病原微生物 蛋白质制剂的保存 保护体内蛋白质
变性的可逆性 可逆变性：除去变性因素，蛋白质空间结 构可以恢复原状。 不可逆变性：除去变性因素，蛋白质空间结构 不能恢复原状。 一般轻度变性是可逆，过度变性是不可逆。
实验一蛋白质变性凝固及沉淀(WT)ppt课件
精选课件
3
蛋白质的变性 (denaturation)
在某些理化因素的作用下，蛋白质严格的空间结构 被破坏（不包括肽键的断裂），从而引起若干理化性质 和生物学性质改变的现象。
精选课件
4
变性后的蛋白质称变性蛋白,能使蛋白质变性 的物质叫蛋白质变性剂。
高温、高压
物理因素
紫外线、X射线、
变性因素
电离辐射和超声波等 强酸、强碱
在等电点的蛋白质 （亲水胶体）
脱水
脱水
++ +
+
+
+
+
+
带正电荷的蛋白质
（疏水胶体）
碱
酸
不稳定的蛋白质颗粒 （沉淀）
蛋白质胶精选体课颗件 粒的沉淀
-
-
-
-
-
-
-
-
带负电荷的蛋白质 （亲水胶体）
脱水
-
-
-
---
带负电荷的蛋白质
（疏水胶体）
8
蛋白质的沉淀
可逆沉淀
结构和性质都不变 适当条件下可重新溶解 是分离和纯化的基本方法
实验一
蛋白质的变性、凝固及沉淀
生物化学与分子生物学教研室
精选课件
1
实验目的
能够说出蛋白质变性、凝固反应的原理及实验方法 能够说出蛋白质沉淀反应的原理及实验方法 能够运用盐析法及重金属沉淀法
精选课件
2
主要实验内容
蛋白质的加热变性凝固 蛋白质沉淀反应
蛋白质盐析 重金属盐沉淀蛋白质 生物碱试剂沉淀蛋白质
精选课件
6
蛋白质的胶体性质及沉淀:
蛋白质分子颗粒大小1-100nm之间,属胶体颗 粒范围，在溶液中能形成稳定的胶体。
《蛋白质的变性》课件
细胞功能失调
细胞内的蛋白质相互作用 和功能依赖于其正确的构 象，变性导致这些相互作 用和功能失调。
免疫反应抑制
一些抗原性蛋白质变性后 ，其免疫原性减弱或消失 ，导致免疫反应受到抑制 。
对生物结构的影响
细胞器结构破坏
细胞内许多重要功能由细胞器完成， 而这些细胞器的结构主要由蛋白质构 成，因此蛋白质变性可破坏细胞器结 构。
蛋白质变性过程中的结构变化研究
蛋白质变性过程中，其结构会发生改变。未来研究将进一步探究这种结构变化与功能变化之间的关系，为理解 蛋白质的功能和调控提供更多线索。
蛋白质变性对生物的影响研究
蛋白质变性对生物体内平衡的影响
蛋白质在生物体内发挥着重要的功能，其变性可能会影响生物体内平衡，对生 物体的生长、发育和代谢等产生影响。未来研究将进一步探究这种影响及其机 制。
蛋白质变性的过程
01
02
03
初期
蛋白质分子中的次级键， 如氢键、疏水键等发生变 化，导致蛋白质的空间构 象开始变得不稳定。
中期
蛋白质的空间构象被破坏 ，导致其理化性质发生改 变。
后期
蛋白质的生物活性完全丧 失，成为变性蛋白。
03
蛋白质变性的影响
对生物活性的影响
酶活性丧失
蛋白质变性后，其空间构 象发生变化，导致酶的活 性中心被掩盖，从而失去 催化活性。
染色体畸变
膜结构破坏
生物膜的主要成分是蛋白质和脂质， 蛋白质变性可破坏膜的稳定性，导致 膜结构破坏。
在细胞分裂过程中，蛋白质参与染色 体的组装和分离，变性可能导致染色 体畸变。
对生物功能的影响
代谢紊乱
许多酶促反应在体内是连续进行的，蛋白质变性可导致这些酶促 反应受阻，从而导致代谢紊乱。
蛋白质变性说课终稿ppt课件
加强临 床知识 的学习
学习吸收 好的教学 方法
改进教学 方法
请各位领导、老师批评指正!
3 、呈色反应
特殊理化试剂反应
稳定因素
变性的条件 变性的本质 变性的结果
蛋白质的鉴定
水化膜 同种电荷
变性的实际应用
3 、沉淀、凝固
蛋白质的分离、纯化
教学反思
教 学 反 思 Text in
Text in
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here
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教学设计
蛋白质的变性
概 念：
变性的条件
变性的本质
变性的结果
热、紫外线、有机 溶剂、强酸强碱
空间结构的改变， 不涉及以一级结构
生物学活性的丧失 理化性质的改变
某些物理或化学因素，能够破坏蛋白质的空间结构，引起蛋白质理化性 质改变并导致其生理活性丧失，这种现象称为蛋白质的变性。
应 用：
蛋白制剂要避光，低温保存 高温高压灭菌，乙醇及紫外线的消毒灭菌
图示法阐述变性的本质
教学设计
蛋白质的变性
高温高压、紫外线、 乙醇、强酸强碱
N
空间结构的破坏
菌体蛋白、 毒素蛋白 变性失去 致病性
变性的蛋 白质易于 沉淀
C
教学设计
3、课堂小结
(板书内容)
蛋白质的理化性质及应用
一般理化性质
1 、两性解离 2 、紫外吸收
等电点(pI)
A 280
电泳方法分离蛋白质 分光光度法测定蛋白质
教学方法
教学方法
讲授法、举例法
图示法
归纳整合法
积极整合各种教学资源，采用信息化手段辅助教学
教材内容的设置 学生的知识背景
临床实用性
《蛋白质的变性》课件
《蛋白质的变性》PPT课 件
本PPT介绍了蛋白质的变性现象，包括变性的定义和基本概念，蛋白质的变 性类型和特点，变性对蛋白质结构和功能的影响，变性的原因和诱导方法， 常见的蛋白质变性实验技术，蛋白质变性与疾病的关系，最后进行总结与展 望。
变性的定义和基本概念
1 变性
是指蛋白质结构的不可逆性失去生物活性的过程。
2 基本概念
变性是由于蛋白质的二级、三级甚至四级结构发生改变而丧失特定活性。
蛋白质的变性类型和特点
1 类型
变性可分为热变性、酸碱变性、有机溶剂变性和表面活性剂变性等。
2 特点
变性后蛋白质失去天然构象，结构和功能丧失或降低，但其氨基酸组成不变。
变性对蛋白质结构和功能的影响
1 结构
变性使蛋白质的三级结构发生改变，失去原有的折叠方式。
酸碱变性实验
在酸性或碱性条件下，破 坏蛋白质的结构。
有机溶剂变性实验
将蛋白质样品溶解在有机 溶剂中，观察其结构和功 能的变化。
蛋白质变性与疾病的关系
1 疾病
2 机制
某些疾病与蛋白质的变性有关，如变性性 关节炎和变性性糖尿病。
蛋白质变性导致异常蛋白的积聚和沉积， 损害组织和器官功能。
总结与ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ望
1 总结
变性是蛋白质结构和功能失去的过程，可由多种因素引起。
2 展望
未来的研究可以探索变性的防治方法和开发相应的药物。
2 功能
变性导致蛋白质失去特定功能，如酶活性或受体结合能力等。
变性的原因和诱导方法
1 原因
2 诱导方法
变性的原因有温度变化、酸碱环境变化、 有机溶剂作用、离子浓度变化等。
可以通过加热、调整pH值、加入有机溶剂 或改变离子浓度来诱导蛋白质变性。
本PPT介绍了蛋白质的变性现象，包括变性的定义和基本概念，蛋白质的变 性类型和特点，变性对蛋白质结构和功能的影响，变性的原因和诱导方法， 常见的蛋白质变性实验技术，蛋白质变性与疾病的关系，最后进行总结与展 望。
变性的定义和基本概念
1 变性
是指蛋白质结构的不可逆性失去生物活性的过程。
2 基本概念
变性是由于蛋白质的二级、三级甚至四级结构发生改变而丧失特定活性。
蛋白质的变性类型和特点
1 类型
变性可分为热变性、酸碱变性、有机溶剂变性和表面活性剂变性等。
2 特点
变性后蛋白质失去天然构象，结构和功能丧失或降低，但其氨基酸组成不变。
变性对蛋白质结构和功能的影响
1 结构
变性使蛋白质的三级结构发生改变，失去原有的折叠方式。
酸碱变性实验
在酸性或碱性条件下，破 坏蛋白质的结构。
有机溶剂变性实验
将蛋白质样品溶解在有机 溶剂中，观察其结构和功 能的变化。
蛋白质变性与疾病的关系
1 疾病
2 机制
某些疾病与蛋白质的变性有关，如变性性 关节炎和变性性糖尿病。
蛋白质变性导致异常蛋白的积聚和沉积， 损害组织和器官功能。
总结与ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ望
1 总结
变性是蛋白质结构和功能失去的过程，可由多种因素引起。
2 展望
未来的研究可以探索变性的防治方法和开发相应的药物。
2 功能
变性导致蛋白质失去特定功能，如酶活性或受体结合能力等。
变性的原因和诱导方法
1 原因
2 诱导方法
变性的原因有温度变化、酸碱环境变化、 有机溶剂作用、离子浓度变化等。
可以通过加热、调整pH值、加入有机溶剂 或改变离子浓度来诱导蛋白质变性。
蛋白质变性与沉淀ppt课件
去除上述稳定因素可使蛋白质沉 淀析出。
蛋白质沉淀析出常用的方法有 等电点法、盐析法、重金属离子沉 淀法、有机酸试剂沉淀法、有机溶 剂沉淀法等。
（二）蛋白质变性原理
蛋白质受某些物理或化学因 素的影响，空间结构发生改变， 生物活性丧失。称为蛋白质变性。
蛋白质变性，分可逆；不可逆。
三、实验仪器与试剂
试管和刻度吸量管冲洗干净，桌面擦干 净，登记签名。
4.值日生听老师安排，认真打扫， 经老师批准才能离开实验室。
六、思考题
1.临床抢救重金属中毒患者， 为什么用鸡蛋清或牛奶？
2.蛋白液中加入适量乙醇，为 什么会产生沉淀？
3.蛋白液在碱性条件下加入 ZnSO4 ，为什么会产生沉淀？
4.蛋白液中加入三氯醋酸 ，为 什么会产生沉淀？
1）实验原理
负电荷
OH-
COO-
P
pH > pI
COONH2
重金属离子M+
P
COOH
H+
NH3+
P
pI pH < pI NH + 3
两性离子 正电荷
酸根X-
盐↓
COO-M+
P NH
2
COOH P
NH3+X-
盐↓
2）操作步骤
试剂（滴） 5%蛋白质溶液 0.1mol/L NaOH
10% ZnSO4 1%三氯醋酸
实验项目 蛋白质变性与沉淀
一、实验目的
1.掌握蛋白质变性与沉淀 的原理及各种沉淀方法；
2.熟悉刻度吸量管的正确 使用；Байду номын сангаас
3.了解蛋白质变性与沉淀 两者的关系。
二、实验原理
（一） 蛋白质沉淀原理
蛋白质沉淀析出常用的方法有 等电点法、盐析法、重金属离子沉 淀法、有机酸试剂沉淀法、有机溶 剂沉淀法等。
（二）蛋白质变性原理
蛋白质受某些物理或化学因 素的影响，空间结构发生改变， 生物活性丧失。称为蛋白质变性。
蛋白质变性，分可逆；不可逆。
三、实验仪器与试剂
试管和刻度吸量管冲洗干净，桌面擦干 净，登记签名。
4.值日生听老师安排，认真打扫， 经老师批准才能离开实验室。
六、思考题
1.临床抢救重金属中毒患者， 为什么用鸡蛋清或牛奶？
2.蛋白液中加入适量乙醇，为 什么会产生沉淀？
3.蛋白液在碱性条件下加入 ZnSO4 ，为什么会产生沉淀？
4.蛋白液中加入三氯醋酸 ，为 什么会产生沉淀？
1）实验原理
负电荷
OH-
COO-
P
pH > pI
COONH2
重金属离子M+
P
COOH
H+
NH3+
P
pI pH < pI NH + 3
两性离子 正电荷
酸根X-
盐↓
COO-M+
P NH
2
COOH P
NH3+X-
盐↓
2）操作步骤
试剂（滴） 5%蛋白质溶液 0.1mol/L NaOH
10% ZnSO4 1%三氯醋酸
实验项目 蛋白质变性与沉淀
一、实验目的
1.掌握蛋白质变性与沉淀 的原理及各种沉淀方法；
2.熟悉刻度吸量管的正确 使用；Байду номын сангаас
3.了解蛋白质变性与沉淀 两者的关系。
二、实验原理
（一） 蛋白质沉淀原理
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定义：在某些物理因素和化学因素的影响下，蛋白质的理 化性质和生理功能发生改变的现象
知识补充
蛋白质变性本质：一般认为蛋白质的二级结构和三 级结构有了改变或遭到破坏，都是变性的结果。
应用拓展
应用拓展
钡盐也属于重金属盐，医院在做胃透视时 要服用“钡餐”，BaSO4会不会使人中毒？ 能否改服BaCO3？
0 4 蛋白质的变性
主讲人：白晓燕
1
实教验 材探 分究析
本节课选自人教版普通高 中课程标准实验教科书 化学（选修1） 化学与生 活 第一章 第三节
实学验 情探 分究析
根据生活经验对蛋白质的变性有一定 的感性认识，但对于变性的特点、条 件及其定义并不明确。
实教验 学探 理究念 建构主义理论代表人物
课后作业
1、搜集生活中更多关于蛋白质变性的应 用实例
2、加热会使蛋白质变性，吃生鸡蛋会比 熟鸡蛋好吗？
谢谢
THE END
22
（用类比的方法）
还有那些方法可以使蛋白质发生类似的反应？
条件探索
实验操作
无水 乙醇 15滴
实验现象
加热有沉淀生 成
加入蒸馏水沉 淀不溶解
加无水乙醇有 沉淀生成
加入蒸馏水沉 淀不溶解
实验结论
发生了变性 发生了变性
归纳总结
变性反应的条件
物理因素：加热、加压、搅拌、振荡、紫外线照射、 超声波等
化学因素：强酸、强碱、重金属盐、三氯乙酸、尿素、乙 醇、丙酮等
基维
皮
果
亚
斯
杰
学生是“学习主体”，学习是在“学 习情景”中通过“协作”和 “会话” 自主实现“知识意义构造”的过程
实教验 学探 目究标
知识与技能
了解蛋白质变性 特点，知道蛋白 质的变性在生活 中的应用
过程与方法
通过观察演示实验和 自己动手实验体会学 习化学探索新知的方 法
情感态度与价值观
通过实验，提高学生科学素养，激 发学生的学习兴趣
9
实知验 识探 回究顾
盐析实验
向鸡蛋清溶液中加入Na2SO4溶液 蛋白质溶液与轻金属盐反应，蛋白质析出
重 ， 蛋白质溶液与 金属盐反应……
加水沉淀溶解
蛋白质与乙 酸铅的反应
实验步骤
2~3滴
实验现象
1、加入乙酸铅后有沉淀产生
2、向其中加入蒸馏水，沉淀不 溶解
变性
反应特点
有沉淀产生 沉淀不溶解
பைடு நூலகம்
想一想
实教验 法探 学究法
教法
引导探索
发现法
学法
实验
类比 归纳
实教验 学探 思究路
情景 创设 引入 新课
实验 探究 学习 新知
应用 拓展 学以 致用
布置 作业 巩固 提高
实板验 书探 设究计
蛋白质的变性
一、实验探究 1、蛋白质的变性现象 2、蛋白质变性的条件探索
二、应用拓展
0 4 蛋白质的变性
主讲人：白晓燕