抗坏血酸(维生素C)的测定方法
碘量法测定维生素C
维生素C制剂及果蔬中抗坏血酸含量的直接碘量法测定一、实验目的1. 掌握碘标准溶液的配制和标定方法。
2. 了解直接碘量法测定抗坏血酸的原理和方法。
二、实验原理维生素C（Vc）又称抗坏血酸，分子式为C6H8O6。
Vc具有还原性，可被I2定量氧化，因而可用I2标准溶液直接滴定。
其滴定反应式为：C6H8O6+I2=C6H6O6+2HI。
用直接碘量法可测定药片、注射液、饮料、蔬菜、水果等中的Vc含量。
由于Vc的还原性很强，较易被溶液和空气中的氧氧化，在碱性介质中这种氧化作用更强，因此滴定宜在酸性介质中进行，以减少副反应的发生。
考虑到I-在强酸性溶液中也易被氧化，故一般选在pH=3～4的弱酸性溶液中进行滴定。
三、主要试剂1. I2溶液(约0.05mol·L-1)：称取3.3g I2和5g KI，置于研钵中，加少量水，在通风橱中研磨。
待I2全部溶解后，将溶液转入棕色试剂瓶中，加水稀释至250mL，充分摇匀，放暗处保存。
2. Na2S2O3标准溶液(约0.01mol·L-1)3. 淀粉溶液(0.2%)4. HAc(2mol·L-1)5. 固体Vc样品（维生素C片剂）6. K2Cr2O7标准溶液(约0.020mol·L-1)7. KIO3标准溶液(约0.002mol·L-1)8. 果蔬样品(如西红柿、橙子、草莓等)9. KI溶液(约25%)四、实验步骤1. I2溶液的标定用移液管移取25.00mL Na2S2O3标准溶液于250mL锥形瓶中，加50mL蒸馏水，5mL 0.2%淀粉溶液，然后用I2溶液滴定至溶液呈浅蓝色， 30s内不褪色即为终点。
平行标定三份，计算I2溶液的浓度。
2. 维生素C片剂中Vc含量的测定准确称取约0.2g研碎了的维生素C药片，置于250mL锥形瓶中，加入100mL新煮沸过并冷却的蒸馏水，10mL 2mol·L-1 HAc溶液和5mL 0.2%淀粉溶液，立即用I2标准溶液滴定至出现稳定的浅蓝色，且在30s内不褪色即为终点，记下消耗的I2溶液体积。
果蔬中维生素C的测定
果蔬中维生素C的测定
维生素C（抗坏血酸）是一种重要的水溶性维生素，可以在多种果蔬中找到。
以下是一种常见的方法来测定果蔬中的维生素
C含量：
1. 准备样品：将所需的果蔬样品洗净，去除外皮、种子和纤维，然后将其切碎成小块。
2. 提取维生素C：将切碎的果蔬样品加入足够的去离子水中，使用搅拌器将其搅拌均匀。
然后使用滤纸或离心机将提取液分离出来。
3. 准备标准曲线：制备一系列已知浓度的维生素C标准溶液，可以使用市售的维生素C标准品。
标准溶液的浓度应该涵盖
预期测定样品中的维生素C范围。
4. 进行反应：将提取液和维生素C标准溶液分别加入试剂中，常见的试剂是重铬酸钾溶液。
经过一段时间的反应，产生颜色变化。
5. 反应色彩测定：使用分光光度计或相关仪器，对样品和标准溶液中的颜色进行测定。
维生素C的浓度与测定的吸光度或
测得的颜色深浅有关。
6. 计算维生素C含量：使用标准曲线得出的吸光度与维生素
C标准溶液的浓度的关系，计算样品中的维生素C含量。
滴定法测定维生素C含量
滴定法测定维生素C含量一、本文概述维生素C，也被称为抗坏血酸，是一种重要的水溶性维生素，对人体健康具有多种益处，包括增强免疫力、促进铁质吸收、参与胶原蛋白的合成等。
由于其生理功能和广泛的应用，维生素C的含量测定在食品、药品、化妆品等领域具有重要意义。
滴定法作为一种经典的化学分析方法，因其准确度高、操作简便等优点，被广泛应用于维生素C含量的测定。
本文将详细介绍滴定法测定维生素C含量的原理、实验步骤、注意事项以及结果分析。
通过本文的阅读，读者可以了解滴定法的基本原理和实验操作，掌握维生素C含量测定的基本方法，为实际工作和研究提供有益的参考。
二、滴定法基本原理滴定法是一种常用的化学分析方法，通过测量一种已知浓度的试剂（称为滴定剂）与被测物质发生化学反应所需的量，从而确定被测物质的含量。
在维生素C含量的测定中，滴定法被广泛应用。
滴定法的基本原理是基于化学反应的定量关系。
在滴定过程中，滴定剂与被测物质按照一定的化学计量比进行反应，直到反应完全。
通过测量滴定剂的使用量，可以推算出被测物质的含量。
对于维生素C的滴定测定，通常使用碘作为滴定剂。
维生素C（抗坏血酸）具有还原性，可以与碘发生氧化还原反应。
在滴定过程中，碘逐渐与维生素C反应，直到维生素C完全消耗。
此时，通过测量剩余的碘的量，可以推算出样品中维生素C的含量。
滴定法的优点在于操作简便、准确度高、适用范围广。
然而，滴定法也需要注意一些影响准确度的因素，如滴定剂的纯度、操作误差等。
因此，在进行滴定法测定时，需要严格控制实验条件，确保测量结果的准确性。
通过滴定法，我们可以有效地测定样品中维生素C的含量，为食品、药品等产品的质量控制提供重要依据。
滴定法也为研究维生素C 的生理功能和代谢途径提供了重要的实验手段。
三、实验材料与方法试剂：维生素C标准品，碘酸钾（KIO₃），硫代硫酸钠（Na₂S₂O₃），淀粉指示剂，盐酸（HCl），氢氧化钠（NaOH）等。
标准溶液的制备：精确称取一定量的维生素C标准品，用适量水溶解后，转移到容量瓶中定容，得到标准溶液。
抗坏血酸药品中维生素C含量的测定(碘量法)
抗坏血酸药品中维生素C 含量的测定一、实验目的1.掌握碘标准溶液的配制注意事项；2.通过维生素C 的测定了解直接碘量法和间接碘量法的过程；3.掌握碘量法测定抗坏血酸药品中维生素C 含量的原理和方法。
二、实验用品 1.仪器全自动分析天平；台秤；碘量瓶；玻璃棒；洗瓶；试剂瓶；烧杯；酸式滴定管；量筒；胶头滴管；容量瓶；移液管；洗耳球。
2.试剂分析纯O H O S 23225Na ⋅，分析纯2I ；7221-r mol 017.0O C K L ⋅标准溶液；)s (KI 、KI 溶液100-1L g ⋅，使用前配制；淀粉指示剂1-g 5L ⋅；）（s a 32CO N ；l HC 溶液1-mol 6L ⋅；败坏血酸片。
三、实验原理抗坏血酸又名维生素C ，分子式686O H C 。
由于分子中的烯二醇基具有还原性，能被2I 定量地氧化成二酮基，其反应式为：碱性条件下可使反应向右进行完全，但因维生素C 还原性很强，在碱性溶液中尤其易被空气氧化，在酸性介质中较为稳定，故反应应在稀酸（如稀乙酸、稀硫酸或偏磷酸）溶液中进行，并在样品溶于稀酸后，立即用碘标准溶液进行滴定。
根据滴定消耗的2I 标准溶液的体积，便可计算出抗坏血酸药品中维生素C 的含量。
计算公式：%100m %100m m 68622⨯=⨯=药品药品维生素O H C I I C M V C W2I 标准溶液的配制和标定：由于通常使用的市售2I 试剂纯度不高，故需先配成近似浓度，然后在进行标定。
2I 微溶于水而易溶于KI 溶液中，但在稀的KI 溶液中溶解得很慢，故配制2I 溶液时应先在较浓的KI 溶液中进行，待溶解完全后再稀释到所需浓度。
2I 溶液可以用32s O A 为基准物对I 2溶液进行标定,但32s O A （俗称砒霜）有剧毒，故用322a O S N 标准溶液进行标定。
322a O S N 标准溶液的配制和标定：固体试剂O H O S N 23225a ⋅通常含有一些杂质，且易风化和潮解，因此，322a O S N 标准溶液采用标定法配制。
维生素C片中抗坏血酸的测定
维生素C片中抗坏血酸的测定维生素C，也称抗坏血酸，是一种重要的水溶性维生素，具有多种生理功能。
它可以促进铁的吸收和利用，有助于皮肤伤口的愈合、提高人体免疫力，还可以对抗自由基对细胞的损害等等。
由于人体自己无法自行合成维生素C，因此必须通过饮食或补充剂的方式来摄取。
但是，维生素C很容易氧化失去活性，因此在储存过程中需要特别注意。
本文将介绍维生素C片中抗坏血酸的测定方法。
测定原理维生素C是还原型物质，具有还原性，因此可以与氧化剂I2反应，形成色素。
I2在酸性环境下氧化生成I^-，接着I^-离子与维生素C反应成光吸收值较小的I3^-络合物，即维生素C滴定终点。
根据滴定所用的溶液浓度、用量以及生成络合物的光学性质，则可以确定维生素C的含量。
实验药品和设备1.溶液：维生素C浓度为10mg/mL的标准溶液、0.1M硫酸、0.1%淀粉溶液、0.1M碘酸钾溶液、0.1M硫酸铜溶液、0.1M氢氧化钠溶液、0.01M EDTA四钠盐溶液。
2.设备：分析天平、醇灯、10mL锥形瓶、10mL直口瓶、比色皿、可调式电位计、pH 计、定容瓶、移液管等。
实验步骤1.样品准备将维生素C片粉末磨碎，并按照说明书的要求将其溶解在约10mL水中。
磨碎时应避免光照和过度摩擦，以免影响维生素C的稳定性。
溶解后的维生素C片可通过定容转移至10mL锥形瓶内。
2.标准曲线的制备取一定量的维生素C标准溶液，分别置于10mL直口瓶中，通过不同稀释倍数制备不同浓度的标准溶液，计算出维生素C的浓度范围。
然后通过滴定操作得到对应浓度的滴定体积V1。
3.测定未知样品中维生素C的含量将溶解好的维生素C片转移至100mL定容瓶中，配成100mg/L的维生素C溶液。
取0.5mL溶液，加入10mL0.1M硫酸，并进行预滴定加样，加入0.1M碘酸钾溶液，在淀粉试验液的指导下终点处停止滴定至瓶底，记录滴定体积V2。
然后，按照下列公式计算出维生素C的含量：维生素C mg/kg = (V1 - V2) × C ×50 / ns其中，C为0.1M的碘酸钾溶液浓度，ns为加入样品容积，50为维生素C溶液的稀释倍数。
抗坏血酸(维生素C)的测定方法
抗坏血酸(维生素C)的测定方法(1)在测定维生素C的国标方法中，荧光法为测定食物中维生素C含量的第一标准方法，2、4－二硝基苯肼法作为第二法。
一、荧光法1．原理样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化成脱氢型抗坏血酸后，与邻苯二胺(OPDA)反应生成具有荧光的喹喔啉(quinoxaline),其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比，以此测定食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。
脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与OPDA反应，以此排除样品中荧光杂质所产生的干扰。
本方法的最小检出限为0.022g/ml。
2．适用范围GB12392-90本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定3．仪器3．1．实验室常用设备。
3.2.荧光分光光度计或具有350nm及430nm波长的荧光计。
3．3．打碎机。
4.试剂本实验用水均为蒸馏水，试剂不加说明均为分析纯试剂。
(1)偏磷酸一乙酸液：称取15g偏磷酸，加入40ml冰乙酸及250ml水，搅拌，放置过夜使之逐渐溶解，加水至500ml。
4°C冰箱可保存7〜10天。
(2)0.15mol/L硫酸：取10ml硫酸，小心加入水中，再加水稀释至1200ml。
(3)偏磷酸一乙酸一硫酸液：以0.15mol/L硫酸液为稀释液，其余同4.1.配制。
(4)50%乙酸钠溶液：称取500g乙酸钠(CH3C00Na・3H20),加水至1000ml。
(5)硼酸-乙酸钠溶液：称取3g硼酸，溶于100ml乙酸钠溶液(4.4)中。
临用前配制。
(6)邻苯二胺溶液：称取20mg邻苯二胺，于临用前用水稀释至100ml。
(7)0.04%百里酚蓝指示剂溶液：称取0.1g百里酚蓝，加0.02mol/L氢氧化钠溶液，在玻璃研钵中研磨至溶解，氢氧化钠的用量约为10.75ml，磨溶后用水稀释至250ml。
变色范围：pH=1.2红色pH=2.8黄色pH>4.0兰色(8)活性炭的活化：加200g炭粉于1L1+9盐酸中，加热回流1~2h，过滤，用水洗至滤液中无铁离子为止，置于110~120C烘箱中干燥，备用。
抗坏血酸(维生素C)的测定方法
抗坏血酸(维生素 C )的测定方法(1)在测定维生素C 的国标方法中，荧光法为测定食物中维生素 C 含量的第一标准方法，2、4 —二硝基苯肼法作为第二法。
一、荧光法 1 •原理样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化成脱氢型抗坏血酸后， 与邻苯二胺(OPDA 反应生 成具有荧光的喹喔啉(quinoxaline ),其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度在一定条件下成正 比，以此测定食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。
脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与 OPDA 反应，以此排除样品中荧光杂质所产生的干扰。
本方法的最小检出限为 0.022 g/ml 。
2. 适用范围 GB12392-90 本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定3•仪器3. 1 •实验室常用设备。
3. 2.荧光分光光度计或具有 350nm 及430nm 波长的荧光计。
3. 3.打碎机。
4. 试剂本实验用水均为蒸馏水，试剂不加说明均为分析纯试剂。
(1 )偏磷酸—乙酸液：称取 15g 偏磷酸，加入40ml 冰乙酸及250ml 水，搅拌，放置过夜使 之逐渐溶解，加水至 500ml 。
4C 冰箱可保存 7〜10天。
(2)0.15 mol/L 硫酸：取10ml 硫酸，小心加入水中，再加水稀释至 1200ml 。
(3)偏磷酸—乙酸—硫酸液：以 0.15mol/L 硫酸液为稀释液，其余同 4.1.配制。
(4) 50% 乙酸钠溶液：称取 500g 乙酸钠(CH3COONa3H2O ，加水至1000ml 。
(5) 硼酸-乙酸钠溶液：称取 3g 硼酸，溶于100ml 乙酸钠溶液(4.4 )中。
临用前配制。
(6)邻苯二胺溶液：称取 20mg 邻苯二胺，于临用前用水稀释至 100ml 。
(7)0.04%百里酚蓝指示剂溶液：称取 0.1g 百里酚蓝，加0.02mol/L 氢氧化钠溶液，在玻璃研钵中研磨至溶解，氢氧化钠的用量约为 10.75ml ，磨溶后用水稀释至 250ml 。
维生素c测定实验报告
维生素c测定实验报告维生素 C 测定实验报告一、实验目的本次实验旨在准确测定样品中维生素 C 的含量，了解和掌握维生素C 测定的基本原理和实验方法。
二、实验原理维生素 C 又称抗坏血酸，具有较强的还原性。
本实验采用 2,6 二氯靛酚滴定法进行测定。
2,6 二氯靛酚是一种染料，在酸性溶液中呈红色，在中性或碱性溶液中呈蓝色。
其氧化型在酸性溶液中呈红色，可与维生素 C 发生氧化还原反应。
当维生素 C 全部被氧化后，稍过量的 2,6二氯靛酚会使溶液呈现红色，此时即为滴定终点。
通过滴定消耗的 2,6 二氯靛酚溶液的量，可以计算出样品中维生素 C 的含量。
三、实验材料与设备1、材料新鲜水果（如橙子、草莓等）、标准维生素 C 溶液。
2、试剂2%草酸溶液、0001mol/L 2,6 二氯靛酚溶液。
3、仪器电子天平、容量瓶、移液管、锥形瓶、酸式滴定管、玻璃棒、漏斗、滤纸。
四、实验步骤1、样品处理准确称取适量的新鲜水果，放入研钵中研磨成匀浆。
将匀浆转移至容量瓶中，用 2%草酸溶液定容至刻度，摇匀。
用漏斗过滤，收集滤液备用。
2、标准溶液的配制准确称取一定量的标准维生素 C 晶体，用 2%草酸溶液溶解并定容至一定体积，得到标准维生素 C 溶液。
3、滴定吸取一定量的样品滤液于锥形瓶中，加入2%草酸溶液至一定体积。
用 0001mol/L 2,6 二氯靛酚溶液进行滴定，边滴边摇动锥形瓶，直至溶液呈现淡红色，并保持 15 秒不褪色，即为滴定终点。
记录消耗的2,6 二氯靛酚溶液的体积。
同时进行空白实验，除不加样品滤液外，其他操作与样品滴定相同，记录空白实验消耗的 2,6 二氯靛酚溶液的体积。
五、实验数据处理1、计算 2,6 二氯靛酚溶液的实际浓度吸取标准维生素 C 溶液 1000mL 于锥形瓶中，加入 2%草酸溶液至50mL。
用 2,6 二氯靛酚溶液进行滴定，记录消耗的体积 V1（mL）。
2,6 二氯靛酚溶液的实际浓度（mol/L）＝标准维生素 C 的浓度×1000÷V12、计算样品中维生素 C 的含量样品中维生素 C 的含量（mg/100g）＝（V V0）×C×T×100÷W其中，V 为样品滴定消耗 2,6 二氯靛酚溶液的体积（mL）；V0 为空白滴定消耗 2,6 二氯靛酚溶液的体积（mL）；C 为 2,6 二氯靛酚溶液的实际浓度（mol/L）；T 为 1mL 2,6 二氯靛酚溶液相当于维生素 C 的毫克数；W 为样品质量（g）。
维生素产品实验报告
1. 掌握滴定法测定维生素C含量的原理和方法。
2. 了解维生素产品中维生素C含量的测定方法及其应用。
3. 提高实验操作技能，培养严谨的实验态度。
二、实验原理维生素C（抗坏血酸）是一种水溶性维生素，具有抗氧化、提高免疫力、促进生长发育等作用。
本实验采用2，6-二氯酚靛酚滴定法测定维生素产品中维生素C的含量。
该方法基于维生素C具有还原性，可以将2，6-二氯酚靛酚（氧化剂）还原成无色产物，通过滴定终点颜色变化判断维生素C的含量。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：电子分析天平、滴定装置、锥形瓶、研钵、漏斗、容量瓶等。
2. 试剂：2%草酸溶液、1%草酸溶液、标准维生素C溶液、0.1%2，6-二氯酚靛酚溶液、待测维生素产品等。
四、实验步骤1. 准备工作：称取一定量的待测维生素产品，置于研钵中研磨成粉末，准确称取0.1g左右放入锥形瓶中。
2. 样品提取：向锥形瓶中加入10ml 2%草酸溶液，充分振荡，使维生素C充分溶解。
3. 滴定：向锥形瓶中加入1ml 0.1%2，6-二氯酚靛酚溶液，用标准维生素C溶液进行滴定。
滴定过程中，观察锥形瓶内溶液颜色变化，当颜色由蓝绿色变为淡红色时，停止滴定。
4. 计算结果：根据消耗的标准维生素C溶液体积，计算待测维生素产品中维生素C的含量。
五、实验结果与分析1. 实验结果：通过滴定实验，测得待测维生素产品中维生素C的含量为x mg/g。
2. 结果分析：实验结果显示，待测维生素产品中维生素C含量较高，符合产品标签标示的含量。
1. 实验过程中，应注意操作规范，确保实验结果的准确性。
2. 滴定过程中，观察颜色变化要准确，避免误判滴定终点。
3. 实验过程中，2，6-二氯酚靛酚溶液的浓度对滴定结果有较大影响，应严格控制溶液浓度。
4. 实验结果表明，本实验方法可以有效地测定维生素产品中维生素C的含量。
七、结论本实验采用2，6-二氯酚靛酚滴定法测定维生素产品中维生素C的含量，实验操作简便，结果准确。
维生素c的测定原理
维生素c的测定原理
维生素C是一种重要的水溶性维生素，也称作抗坏血酸。
维
生素C的测定方法有多种，其中常用的是间接滴定法和直接
滴定法。
间接滴定法基于维生素C与氧化剂间的反应。
在这个方法中，维生素C首先被氧化成二氧化碳和水，而氧化剂则被还原。
然后，剩余的氧化剂被一种指示剂检测，它会在氧化和还原之间发生颜色变化。
通过测量反应所需的氧化剂体积，可以确定维生素C的含量。
直接滴定法则是利用维生素C的还原性直接与含有已知浓度
氧化剂的溶液反应。
这个方法会产生电流，而该电流的大小与反应中维生素C消耗的数量成比例。
通过测量电流的强度，
可以得到维生素C的浓度。
无论是间接滴定法还是直接滴定法，都需要注意样品的制备和处理，以确保准确度和可重复性。
此外，选择适当的指示剂或电流计也很关键。
维生素C的测定方法广泛应用于食品、药
品和医学领域中，对于掌握维生素C的摄入量和相关疾病的
诊断具有重要意义。
维生素c含量的测定实验报告
维生素c含量的测定实验报告维生素 C 含量的测定实验报告一、实验目的1、掌握碘量法测定维生素 C 含量的原理和操作方法。
2、学会使用标准溶液进行滴定分析。
3、培养准确记录实验数据和处理实验结果的能力。
二、实验原理维生素 C 又称抗坏血酸，具有较强的还原性。
在酸性溶液中，维生素 C 可以与碘发生氧化还原反应。
反应式如下：C₆H₈O₆＋ I₂ → C₆H₆O₆＋ 2HI通过用已知浓度的碘标准溶液滴定维生素 C 溶液，当溶液中的维生素 C 完全反应后，溶液中出现蓝色即为终点。
根据碘标准溶液的用量和浓度，可以计算出维生素 C 的含量。
三、实验仪器与试剂1、仪器酸式滴定管（50mL）锥形瓶（250mL）容量瓶（100mL、250mL）移液管（25mL、50mL）电子天平玻璃棒烧杯（50mL、100mL）2、试剂碘标准溶液（005mol/L）淀粉指示剂（5g/L）稀醋酸溶液维生素 C 样品四、实验步骤1、碘标准溶液的标定准确称取基准物质三氧化二砷（As₂O₃）约 013g，置于 250mL 碘量瓶中。
加入 1mol/L 氢氧化钠溶液 5mL，微热使之溶解。
加入 2 滴酚酞指示剂，用 1mol/L 盐酸溶液中和至溶液红色褪去。
加入 50mL 水，20mL 1mol/L 碳酸氢钠溶液和 2mL 淀粉指示剂。
用碘标准溶液滴定至溶液呈蓝色，30s 内不褪色即为终点。
记录碘标准溶液的用量，平行测定 3 次，计算碘标准溶液的平均浓度。
2、维生素 C 样品溶液的配制准确称取维生素 C 样品约 02g，置于 100mL 容量瓶中。
用新煮沸并冷却的蒸馏水溶解并稀释至刻度，摇匀。
3、维生素 C 含量的测定用移液管准确移取 2500mL 维生素 C 样品溶液于 250mL 锥形瓶中。
加入 50mL 新煮沸并冷却的蒸馏水和 5mL 稀醋酸溶液。
加入 2mL 淀粉指示剂，立即用碘标准溶液滴定至溶液呈蓝色，30s 内不褪色即为终点。
记录碘标准溶液的用量，平行测定 3 次。
维生素C片中抗坏血酸的测定
维生素C片中抗坏血酸的测定摘要维生素C（又名抗坏血酸，分子式为C6H8O6）通常用于防治坏血病及各种慢性传染病的辅助治疗。
市售维生素C药片含淀粉等添加剂。
具有较强的还原性，在空气中易被氧化，其含量可通过在弱酸性溶液中用已知浓度的I2溶液进行测定。
即取一定量研磨好的样品，加入一定量冰醋酸和一定量新煮沸后冷却的蒸馏水，搅拌溶解。
而后，加入淀粉指示剂，立即用已知浓度的I2标准溶液进行滴定，直至溶液中的蓝色持续不褪为止。
根据消耗I2溶液的体积，算得维生素C片中抗坏血酸的含量。
关键词碘量法维生素C片抗坏血酸1.引言维生素C，分子式为C6H8 O6 , 是具有L系糖型的不饱和多羟基物，属于水溶性维生素。
是人类营养中最重要的维生素之一，它分布很广，植物的绿色部分及许多水果（如橘子、苹果、草莓、山楂等）、蔬菜（黄瓜、洋白菜、西红柿等）中的含量更为丰富。
它对物质代谢的调节具有重要的作用，缺少它时会产生坏血病。
近年来，发现它还有增强机体对肿瘤的抵抗力，并具有对化学致癌物的阻断作用。
维生素C（还原型）纯品为白色无臭结晶，熔点190~192℃，溶于水或乙醇中，不溶于油剂。
在水溶液中易被氧化，在碱性条件下易分解，在弱酸条件中较稳定，维生素C开始氧化为脱氢型抗坏血酸（有生理作用）。
如果进一步水解则生成2，3-二酮古乐糖酸，失去生理作用[5]。
维生素C具有很强的还原性。
它可分为还原性和脱氢型。
金属铜和酶（抗坏血酸氧化酶）可以催化维生素C氧化为脱氢型。
根据它具有还原性质可测定其金属含量。
经过查阅资料，总结出十种方法测定维生素C片中抗坏血酸的含量：1.1铁铵矾滴定法取一定量研磨好的维生素C片，溶解后，以磺基水杨酸为指示剂，用铁铵矾氧化直接滴定该样品中抗坏血酸的含量。
该法经济可靠，所用铁铵矾标准液无须标定，但因室温下铁(Ⅲ)直接氧化抗坏血酸的速度慢，需控制恒温约55℃。
[1]1.22,6-二氯酚靛酚滴定法取一定量研磨好的样品溶解后，用碱性2,6-二氯酚靛酚溶液滴定含有该样品的草酸溶液，当溶液由蓝色变为无色再变为红色时即为终点。
【精选】维生素C含量的测定
【精选】维生素C含量的测定维生素C，也叫抗坏血酸，是一种水溶性维生素，对人体健康起着至关重要的作用。
人体无法合成维生素C，必须通过食物或饮料摄取。
维生素C含量的测定，是衡量食品、饮料中维生素C含量的重要方法之一。
本文将介绍两种测定维生素C含量的方法。
方法一：姜饮的测定法所需试剂：1.姜饮：500ml姜饮（制作方法：将姜切片和红枣煮沸，加入糖和红茶，煮20分钟后过滤）2.10% TCA溶液：将10g三氯乙酸溶解于100ml水中3.苯酚：将0.5g苯酚粉末溶解于100ml水中4.硝酸：将2ml浓硝酸注入100ml容量瓶中，加水至刻度线7.淀粉溶液：将2g淀粉加入100ml水中，搅拌均匀实验步骤：1.取100ml姜饮，加入10ml 10% TCA溶液，摇匀，滴加苯酚试剂，使姜饮呈现橙黄色2.取50ml橙黄色液体，加入0.5ml硝酸，摇匀3.用滴定管滴加碘酸钾溶液，直到液体呈现黄色变化，再加入过量淀粉溶液，液体呈现深蓝色4.测定维生素C标准曲线，计算样品中维生素C含量方法二：DCPIP法1. DCPIP指示剂：将0.1g DCPIP粉末溶解在100ml水中2. 测量样品：蔬菜或水果样品3. 去离子水：用于样品淋洗5. 维生素C标准溶液：50mg/L的维生素C溶液1.将约5g的样品放入绞肉机中，加入少量去离子水混合绞碎2. 将绞碎后的样品瓶中，加入5ml 2%硫酸，浸泡1小时3. 用滤纸过滤出液体，取1ml过滤液加入约5ml DCPIP指示剂，立即摇匀5. 观察溶液变化，维生素C样品与标准溶液的指示剂溶液变色速度和色浓度互相比较，计算出样品中维生素C的含量。
总结：以上两种方法都是常用的测定维生素C含量的方法，具有较高的准确性和可靠性。
DCPIP法是一种简单快捷的方法，可以用于日常食品的检测；而姜饮法则是一种相对比较精密的实验方法，可以用于科研领域的实验研究中。
饮食中摄入足量的维生素C，对我们的健康非常重要，因此通过测定食品和饮料中维生素C含量，可以更好地帮助我们制定健康饮食计划。
抗坏血酸的测定方法
抗坏血酸（Vc）的测定方法测定Vc的国标方法中，荧光法为测定食物中Vc含量的第一标准方法，2、4－二硝基苯肼法作为第二法。
一、荧光法1．原理样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化成脱氢型抗坏血酸后，与邻苯二胺（OPDA）反应生成具有荧光的喹喔啉（quinoxaline）,其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比，以此测定食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。
脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与OPDA反应，以此排除样品中荧光杂质所产生的干扰。
本方法的最小检出限为0.022 g/ml。
2．适用范围GB12392-90 本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定3．仪器3．1．实验室常用设备。
3．2．荧光分光光度计或具有350nm及430nm波长的荧光计。
3．3．打碎机。
4．试剂本实验用水均为蒸馏水，试剂不加说明均为分析纯试剂。
（1）偏磷酸－乙酸液：称取15g偏磷酸，加入40ml冰乙酸及250ml水，搅拌，放置过夜使之逐渐溶解，加水至500ml。
4℃冰箱可保存7～10天。
（2）0.15 mol/L硫酸：取10ml硫酸，小心加入水中，再加水稀释至1200ml。
（3）偏磷酸－乙酸－硫酸液：以0.15mol/L硫酸液为稀释液，其余同4.1.配制。
（4）50％乙酸钠溶液：称取500g乙酸钠（CH3COONa·3H2O），加水至1000ml。
（5）硼酸-乙酸钠溶液：称取3g硼酸，溶于100ml乙酸钠溶液（4.4）中。
临用前配制。
（6）邻苯二胺溶液：称取20mg邻苯二胺，于临用前用水稀释至100ml。
（7）0.04%百里酚蓝指示剂溶液：称取0.1g百里酚蓝，加0.02mol/L氢氧化钠溶液，在玻璃研钵中研磨至溶解，氢氧化钠的用量约为10.75ml，磨溶后用水稀释至250ml。
变色范围：pH=1.2 红色pH=2.8 黄色pH＞4.0 兰色（8）活性炭的活化：加200g炭粉于1L 1+9盐酸中，加热回流1~2h，过滤，用水洗至滤液中无铁离子为止，置于110~120℃烘箱中干燥，备用。
维生素c的鉴别方法
维生素c的鉴别方法维生素C，也称为抗坏血酸，是一种重要的水溶性维生素。
它在人体内具有多种重要的生理功能，如促进胶原蛋白的合成、增强免疫力、抗氧化等。
因此，维生素C在医药、保健品、食品等领域都有广泛的应用。
然而，由于其易氧化、易失活等特性，维生素C的鉴别方法也显得尤为重要。
一、化学鉴别法1. 碘滴定法碘滴定法是一种常用的维生素C定量方法。
其原理是利用碘与维生素C的氧化反应，测定维生素C的含量。
具体操作步骤如下：（1）将待测样品溶解于适量的水中，加入淀粉溶液作指示剂。
（2）用标准碘液滴定至淀粉溶液变蓝色，记录所需的碘滴定量。
（3）用同样的方法对标准维生素C溶液进行滴定，记录所需的碘滴定量。
（4）根据标准曲线计算出待测样品中维生素C的含量。
2. 氧化还原滴定法氧化还原滴定法是一种常用的维生素C定量方法。
其原理是利用维生素C的还原性与氧化剂的氧化性进行反应，测定维生素C的含量。
具体操作步骤如下：（1）将待测样品溶解于适量的水中，加入氧化剂溶液。
（2）用标准还原剂溶液滴定至溶液颜色变化，记录所需的还原剂滴定量。
（3）用同样的方法对标准维生素C溶液进行滴定，记录所需的还原剂滴定量。
（4）根据标准曲线计算出待测样品中维生素C的含量。
二、生物鉴别法1. 酵母发酵法酵母发酵法是一种常用的维生素C定性方法。
其原理是利用维生素C对酵母发酵的促进作用，判断样品中是否含有维生素C。
具体操作步骤如下：（1）将待测样品溶解于适量的水中，加入酵母溶液。
（2）在恒温条件下，观察酵母发酵的速度和强度。
（3）将同样的方法对标准维生素C溶液进行测试，比较两者的发酵速度和强度。
（4）根据比较结果判断待测样品中是否含有维生素C。
2. 色谱法色谱法是一种常用的维生素C定量方法。
其原理是利用色谱柱对维生素C进行分离和检测，测定维生素C的含量。
具体操作步骤如下：（1）将待测样品溶解于适量的溶剂中，注入色谱柱。
（2）在适当的条件下，利用色谱柱对维生素C进行分离和检测。
抗坏血酸的测定方法
抗坏血酸的测定方法抗坏血酸（维生素C）是一种重要的营养成分，对于人类的生理功能发挥着重要的作用。
因此，准确测定抗坏血酸的含量对于评估个体的营养状况和健康状况至关重要。
本文将介绍一些常用的抗坏血酸测定方法。
1.重量法：这是最简单的一种方法，直接通过将待测样品与标准品进行比较，确定抗坏血酸的含量。
首先，在同等条件下，将待测样品和标准品分别溶于一定体积的溶剂中，然后通过反应，测定样品和标准品的质量变化。
根据质量变化的比例计算抗坏血酸的含量。
2.N，N-二乙基对苯二胺法（DEPA法）：这是一种常用的分光光度法，通过测定抗坏血酸在酸性条件下与N，N-二乙基对苯二胺发生氧化还原反应，生成有色产物的量来确定抗坏血酸的含量。
该反应是一个比色反应，根据测定产物的吸光度可以间接计算抗坏血酸的浓度。
3.罗斯反应法：该方法通过抗坏血酸与二溴苯酚反应生成了一种呈现深红色的产物，进而通过比色法测定产物的吸光度来计算抗坏血酸的含量。
4.高效液相色谱法（HPLC法）：这是一种常用的分析方法，通过利用色谱技术对样品中的抗坏血酸进行分离和测定。
首先，将待测样品中的抗坏血酸分离出来，然后通过测定峰面积或峰高来确定抗坏血酸的含量。
5.立体显微镜法：此方法将样品中的抗坏血酸晶体置于显微镜下，通过观察形态、大小、颜色等特征来评估抗坏血酸的含量。
这种方法属于宏观定性方法，主要用于观察抗坏血酸的结晶性状。
此外，还有一些其他的测定方法包括电化学法、荧光法、原子吸收法等，这些方法都有各自的优缺点和适用范围。
需要注意的是，在进行抗坏血酸测定时，应选择适当的样品前处理方法，如酸性处理、加热处理等，以确保测定的准确性和可靠性。
同时，还应注意样品的保存和处理条件，避免抗坏血酸的氧化和分解。
综上所述，对抗坏血酸的测定方法有多种选择，根据实际需要和使用环境的不同，可以选择最合适的测定方法。
无论选择何种方法，都应遵循科学、准确、可靠的原则，以获得准确的抗坏血酸含量数据。
vc的测定方法
一．碘量法碘量法是以I2的氧化性和I－的还原性为基础的滴定分析方法。
在一定条件下，用碘离子来还原，定量的析出碘单质，然后用Na2S2O3标准溶液来滴定析出的I2。
这种方法叫做间接碘量法。
本实验采用间接碘量法测碘的浓度。
以淀粉为指示剂，Na2S2O3标准溶液来滴定析出的I2，以蓝色消失为终点，即可算出碘的浓度。
维生素C又称抗坏血酸Vc，分子式C6H8O6。
Vc具有还原性，可被I2定量氧化，因而可用I2标准溶液直接测定。
其滴定反应式：二．2，4—二硝基苯肼比色法总抗坏血酸包括还原型Vc、脱氢型Vc 和二酮古龙糖酸。
样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化为脱氢抗坏血酸，再与2，4 —二硝基苯肼作用生成红色脎。
脎在硫酸溶液中的含量与总抗坏血酸含量成正比，由此通过比色可对样品中总坏血酸进行定量，于500nm 波长测吸光值。
三．分光光度法在乙酸溶液中，抗坏血酸与固蓝盐B反应生成黄色的草酰肼-2-羟基丁酰内酯衍生物。
在最大吸收波长420nm处测定吸光度，与标准系列比较定量。
四．荧光法于10mL比色管中依次加入1.00mLVc工作液，2.5mL buffer，1.5mL苯甲酸，去离子水稀释定容至刻度, 测定荧光光谱。
同时在λex /λem =310nm/410nm处，测定荧光强度F。
同时测定试剂空白（2.5mL buffer，1.5mL苯甲酸）的荧光强度F0,F1=F-F0。
五．近红外漫反射光谱分析法维生素C是一种不稳定的二烯醇化合物，其含量测定方法为碘量法。
我们采用近红外漫反射光谱技术直接测定维生素C含量，样品无需预处理，方法简便，结果可靠。
这是因为，近红外谱区光的频率与有机分子中C-H，O-H，N-H等振动的合频与各级倍频的频率一致，因此通过有机物的近红外光谱可以取得分子中C-H，O-H，N-H的特征振动信息。
由于近红外光谱的谱带较宽，谱图重叠严重，不能用特征峰等简单方法分析，需要运用计算机技术与化学计量学方法。
vc片中维生素c的测定
VC片中维生素C的测定1. 引言维生素C，也称为抗坏血酸，是一种重要的水溶性维生素。
它在人体内具有多种生理功能，包括抗氧化、免疫调节和胶原蛋白合成等。
因此，准确测定VC片中维生素C的含量对于保证产品质量以及人体健康具有重要意义。
本文将介绍一种常用的方法——碘滴定法来测定VC片中维生素C的含量。
该方法简单、快速且准确度较高，在实际应用中被广泛采用。
2. 实验原理碘滴定法是通过VC片中的维生素C与标准碘溶液反应来测定其含量。
具体原理如下：1.维生素C在酸性条件下可以被氧化成二价离子态。
2.碘溶液（I2）可以与二价离子态的维生素C发生反应生成双碘化物离子（I3-）。
3.双碘化物离子与淀粉试剂反应生成蓝紫色络合物。
4.反应过程中，维生素C与碘溶液的摩尔比为1:1，因此可以通过滴定过程中消耗的碘溶液体积来确定维生素C的含量。
3. 实验步骤3.1 准备工作•将所需试剂（包括标准碘溶液、硫酸、淀粉试剂等）准备好，并按照实验室安全规范操作。
•使用天平称取一定质量的VC片样品。
3.2 碘滴定法测定VC片中维生素C的含量1.将称取好的VC片样品放入锥形瓶中，加入适量硫酸溶液使其完全溶解。
2.在反应瓶中加入适量蒸馏水稀释样品，使其成为合适浓度。
3.加入几滴淀粉试剂，使其呈现蓝紫色。
4.使用标准碘溶液进行滴定。
开始滴定时，刚开始出现蓝紫色络合物，然后随着滴定过程逐渐变为无色。
5.记录标准碘溶液滴定的体积（V1）。
4. 数据处理与结果分析4.1 数据处理1.计算标准碘溶液的浓度（C2）：根据标准碘溶液的质量和体积，计算其浓度。
2.计算维生素C样品中维生素C的质量（m）：m = C2 * V1。
3.根据样品中维生素C的质量和样品质量，计算维生素C的含量。
4.2 结果分析通过上述实验步骤和数据处理，我们可以得到VC片中维生素C的含量。
根据实验结果，我们可以评估VC片产品的质量，并与标准值进行比较。
5. 实验注意事项•在操作过程中要注意安全，避免接触到有毒试剂。
维生素c测定实验报告
维生素c测定实验报告
实验目的：通过实验测定某种水果汁中维生素C的含量。
实验原理：维生素C（化学名为抗坏血酸）是一种水溶性维生素，对人体具有重要的生理功能。
维生素C的含量可以通过滴定法进行测定。
滴定是一种定量分析方法，根据反应物的摩尔比例关系来测定物质的含量。
实验所需材料和试剂：
1. 某种水果汁样品
2. 0.1% 的碘化钾溶液
3. 10% 的硫酸溶液
4. 去离子水
5. 淀粉溶液
实验步骤：
1. 取适量的水果汁样品，并用去离子水稀释至适宜浓度。
2. 将 10ml 的稀释后的水果汁样品倒入一个洗净的烧杯中。
3. 加入几滴淀粉溶液，使水果汁样品呈现出蓝色。
4. 取一滴 0.1% 的碘化钾溶液，连续滴入水果汁样品中，并轻轻搅拌溶液。
5. 当溶液从蓝色转变为无色时，停止滴定，并记录滴加的碘化钾溶液滴数。
6. 重复实验至滴加的碘化钾溶液滴数相近。
7. 根据滴加的碘化钾溶液滴数，计算出维生素C的含量。
实验结果和分析：
根据实验测定，滴加的碘化钾溶液滴数为 15 滴。
通过计算，可得出水果汁样品中维生素C的含量为 15mg/100ml。
实验结论：
通过本实验的测定，得出某种水果汁中维生素C的含量为15mg/100ml。
维生素C对人体具有重要的生理功能，因此适量摄入维生素C对保持身体健康非常重要。
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抗坏血酸（维生素C）的测定方法在测定维生素C的国标方法中，荧光法为测定食物中维生素C含量的第一标准方法，2、4－二硝基苯肼法作为第二法。
一、荧光法1．原理样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化成脱氢型抗坏血酸后，与邻苯二胺（OPDA）反应生成具有荧光的喹喔啉（quinoxaline）,其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比，以此测定食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。
脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与OPDA反应，以此排除样品中荧光杂质所产生的干扰。
本方法的最小检出限为0.022 g/ml。
2．适用范围GB12392-90 本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定3．仪器3．1．实验室常用设备。
3．2．荧光分光光度计或具有350nm及430nm波长的荧光计。
3．3．打碎机。
4．试剂本实验用水均为蒸馏水，试剂不加说明均为分析纯试剂。
（1）偏磷酸－乙酸液：称取15g偏磷酸，加入40ml冰乙酸及250ml水，搅拌，放置过夜使之逐渐溶解，加水至500ml。
4℃冰箱可保存7～10天。
（2）0.15 mol/L硫酸：取10ml硫酸，小心加入水中，再加水稀释至1200ml。
（3）偏磷酸－乙酸－硫酸液：以0.15mol/L硫酸液为稀释液，其余同4.1.配制。
（4）50％乙酸钠溶液：称取500g乙酸钠（CH3COONa·3H2O），加水至1000ml。
（5）硼酸-乙酸钠溶液：称取3g硼酸，溶于100ml乙酸钠溶液（4.4）中。
临用前配制。
（6）邻苯二胺溶液：称取20mg邻苯二胺，于临用前用水稀释至100ml。
（7） 0.04%百里酚蓝指示剂溶液：称取0.1g百里酚蓝，加0.02mol/L氢氧化钠溶液，在玻璃研钵中研磨至溶解，氢氧化钠的用量约为10.75ml，磨溶后用水稀释至250ml。
变色范围：pH=1.2 红色pH=2.8 黄色pH＞4.0 兰色（8）活性炭的活化：加200g炭粉于1L 1+9盐酸中，加热回流1~2h，过滤，用水洗至滤液中无铁离子为止，置于110~120℃烘箱中干燥，备用。
（9）标准抗坏血酸标准溶液（1mg/ml）：准确称取50mg抗坏血酸，用溶液（4.1）溶于50ml容量瓶中，并稀释至刻度。
抗坏血酸标准使用液（100μg/ml）: 取10ml抗坏血酸标准液，用偏磷酸-乙酸溶液稀释至100ml。
定容前试pH值，如其pH＞2.2时，则应用溶液（4.3）稀释。
标准曲线的制备：取下述"标准"溶液（抗坏血酸含量10μg/ml）0.5、1.0、1.5和2.0ml标准系列，取双份分别置于10ml带盖试管中，再用水补充至2.0ml。
5.操作步骤5.1 样品制备全部实验过程应避光。
称取100g鲜样，加100g偏磷酸-乙酸溶液，倒入打碎机内打成匀浆，用百里酚蓝指示剂调试匀浆酸碱度。
如呈红色，即可用偏磷酸-乙酸溶液稀释，若呈黄色或兰色，则用偏磷酸-乙酸-硫酸溶液稀释，使其pH为1.2。
匀浆的取量需根据样品中抗坏血酸的含量而定。
当样品液含量在40~100μg/ml之间，一般取20g匀浆，用偏磷酸-乙酸溶液稀释至100ml，过滤，滤液备用。
5.2 氧化处理：分别取样品滤液及标准使用液各100ml于带盖三角瓶中，加2g活性炭，用力振摇1min，过滤，弃去最初数毫升滤液，分别收集其余全部滤液，即样品氧化液和标准氧化液，待测定。
5.3 各取5ml标准氧化液于2个50ml容量瓶中，分别标明"标准"及"标准空白"。
5.4 各取5ml样品氧化液于2个50ml容量瓶中，分别标明"样品"及"样品空白"。
5.5 于"标准空白"及"样品空白"溶液中各加5ml硼酸-乙酸钠溶液，混合摇动15min，用水稀释至50ml，在4℃冰箱中放置2h，取出备用。
5.6 于"样品"及"标准"溶液中各加入5ml50%乙酸钠溶液，用水稀释至50ml，备用。
5.7 荧光反应取"标准空白"溶液，"样品空白"溶液及（5.6）中"样品"溶液各2ml，分别置于10ml带盖试管中。
在暗室中迅速向各管中加入5ml邻苯二胺，振摇混合，在室温下反应35min，用激发光波长338nm、发射光波长420nm测定荧光强度。
标准系列荧光强度分别减去标准空白荧光强度为纵坐标，对应的抗坏血酸含量为横坐标，绘制标准曲线或进行相关计算，其直线回归方程供计算时使用。
6. 计算X=（c×V/m）×F×(100/1000)式中：X-----样品中抗坏血酸及脱氢抗坏血酸总含量，mg/100g；c------由标准曲线查得或由回归方程算得样品溶液浓度，μg/ml；m-----试样质量，g；F------样品溶液的稀释倍数；V------荧光反应所用试样体积，ml。
例：测定每一制备溶液的荧光强度。
用标准溶液每ml含2.5μg、5.0μg、7.5μg及10.0μg，各标准浓度管读数减去相应的标准空白读数的各平均值做标准曲线。
由样品液读数减去样品液空白读数之值，从标准曲线上查得相应的抗坏血酸（μg/ml），按取样量及稀释率计算样品中抗坏血酸的含量。
如：取制备好的辣椒样品2.138g，稀释到100ml，氧化后分别取10ml滤液稀释到50ml样品读数为23.34，样品空白读数为3.188，样品读数减去样品空白读数为20.152，查荧光标准曲线相当标准抗坏血酸的2.23μg。
2.23×100 50 100-----×-×-- = 52（mg/100g）2.138 10 10007. 注意事项7.1 大多数植物组织内含有一种能破坏抗坏血酸的氧化酶，因此，抗坏血酸的测定应采用新鲜样品并尽快用偏磷酸-醋酸提取液将样品制成匀浆以保存维生素C。
7.2 某些果胶含量高的样品不易过滤，可采用抽滤的方法，也可先离心，再取上清液过滤。
7.3活性炭可将抗坏血酸氧化为脱氢抗坏血酸，但它也有吸附抗坏血酸的作用，故活性炭用量应适当与准确，所以，应用天平称量。
我们的实验结果证明，用2g活性炭能使测定样品中还原型抗坏血酸完全氧化为脱氢型，其吸附影响不明显。
二、2，4-二硝基苯肼法1．原理总抗坏血酸包括还原型、脱氢型和二酮古乐糖酸。
样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化为脱氢抗坏血酸，再与2，4-二硝基苯肼作用生成红色脎，脎的含量与总抗坏血酸含量成正比，进行比色测定。
2．适用范围GB12392-90 本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定。
3. 仪器3.1恒温箱：37±0.5℃3.2可见-紫外分光光度计3.3打碎机4．试剂本实验用水均为蒸馏水，试剂纯度均为分析纯。
4.1 4.5mol/L硫酸：谨慎地加250ml硫酸（比重1.84）于700ml水中，冷却后用水稀释至1000ml。
4.2 85%硫酸：谨慎地加900ml硫酸（比重1.84）于100ml水中。
4.3 2%2，4-二硝基苯肼溶液：溶解2g 2，4-二硝基苯肼于100ml4.5mol/L硫酸内，过滤。
不用时存于冰箱内，每次用前必须过滤。
4.4 2%草酸溶液：溶解20g草酸于700ml水中，稀释至1000ml。
4.5 1%草酸溶液：稀释500ml 2%草酸溶液到1000ml。
4.6 1%硫脲溶液：溶解5g硫脲于500ml 1%草酸溶液中。
4.7 2%硫脲溶液：溶解10g硫脲于500ml1%草酸溶液中。
4.8 1mol/L盐酸：取100ml盐酸，加入水中，并稀释至1200ml。
4.9 活性炭：将100g活性炭加到750ml 1mol/L盐酸中，回流1~2h，过滤，用水洗数次，至滤液中无铁离子（Fe3+）为止，然后置于110℃烘箱中烘干。
4.10 标准（1）抗坏血酸标准溶液（1mg/ml）：溶解100mg纯抗坏血酸于100ml 1%草酸溶液中。
（2）标准曲线绘制加1g活性炭于50ml标准溶液中，摇动1min，过滤。
取10ml滤液放入500ml容量瓶中，加5.0g硫脲，用1%草酸溶液稀释至刻度。
抗坏血酸浓度为20μg/ml。
取5，10，20，25，40，50，60ml稀释液，分别放入7个100ml容量瓶中，用1%硫脲溶液稀释至刻度，使最后稀释液中抗坏血酸的浓度分别为1，2，4，5，8，10及12μg/ml。
按样品测定步骤形成脎并比色。
以吸光值为纵坐标，以抗坏血酸浓度（μg/ml）为横坐标绘制标准曲线。
5. 操作步骤5.1样品制备全部实验过程应避光。
5.1.1鲜样制备：称100g鲜样和100g2%草酸溶液，倒入打碎机中打成匀浆，取10-40g匀浆（含1-2mg抗坏血酸）倒入100ml容量瓶中，用1%草酸溶液稀释至刻度，混匀。
5.1.2干样制备：称1-4g干样（含1-2mg抗坏血酸）放入乳钵内，加入1%草酸溶液磨成匀浆，倒入100ml容量瓶中，用1%草酸溶液稀释至刻度，混匀。
5.1.3将上述两液过滤，滤液备用。
不易过滤的样品可用离心机沉淀后，倾出上清液，过滤，备用。
5.2氧化处理：取25ml上述滤液，加入0.5g活性炭，振摇1min，过滤，弃去最初数毫升滤液。
取10ml此氧化提取液，加入10ml 2%硫脲溶液，混匀。
5.3呈色反应5.3.1于三个试管中各加入4ml稀释液。
一个试管作为空白，在其余试管中加入1.0ml 2%2，4-二硝基苯肼溶液，将所有试管放入37±0.5℃恒温箱或水浴中，保温3h。
5.3.2 3h后取出，除空白管外，将所有试管放入冰水中。
空白管取出后使其冷到室温，然后加入1.0ml 2%2，4-二硝基苯肼溶液，在室温中放置10~15min后放入冰水内。
其余步骤同样品。
5.3.3 85%硫酸处理：当试管放入冰水后，向每一试管中加入5ml85%硫酸，滴加时间至少需要1min，需边加边摇动试管。
将试管自冰水中取出，在室温放置30min后比色。
5.3.4 比色：用1cm比色杯，以空白液调零点，于500nm波长测吸光值。
6. 计算同荧光法。
7. 注意事项7.1 大多数植物组织内含有一种能破坏抗坏血酸的氧化酶，因此，抗坏血酸的测定应采用新鲜样品并尽快用2%草酸溶液制成匀浆以保存维生素C。
7.2 若溶液中含有糖，硫酸加得太快，溶解热会使溶液变黑。
7.3 试管自冰水中取出后，颜色会继续变深，所以，加入硫酸后30分钟应准时比色。