银杏叶叶绿素铜钠盐质量标准

*
≥4.25 ≤0.25 ≤4.0 ≤5000 / ≤3 ≤10 / / / ≤10.0 /
≈9.1 0 0 0 100 0 0 6.7~9.5 0 8 0 ≈44
≥4.50 ≤0.20 ≤3.5 ≤4000 / ≤3 ≤10 / / / ≤10.0 /
炽灼残渣（硫酸灰份）,w/%
注: 1、由于 pH 仅是保证产品中不含游离氢氧化钠而已，因此本标准里不再规定其下限，但增加了相应的溶解 度要求； 2、吸光度比值的理论值的得出是依据液相色谱对应两个主成份峰的紫外及可见光谱数据得到。其中纯叶绿 素 a 铜酸的吸光度比值为 A404/A632=2.52, 纯叶绿素 b 铜酸的吸光度比值为 A428/A612=4.48(A404/A632=4.42),按叶绿素 a 铜酸：叶绿素 b 铜酸=8:2 计，其混合物吸光度比值的理论值≈3.0； 3、总铜理论值是根据叶绿素铜钠盐中铜离子及两个叶绿素铜钠盐主要成份的相对分子量计算得出; 4、炽灼残渣(硫酸灰份)理论值是根据两个叶绿素铜钠盐主要成份中铜（按 9%计）及钠（按 7%计）的含量 计算得出。 由于炽灼残渣(硫酸灰份)理论值跟铜及钠含量相关,且理论值已远远超过 30%,30%限定值仅适合低含 量的叶绿素铜钠盐,所以在本标准中取消了此指标。
* [3]
≤0.25 ≤4.0 ≤10 ≥80 ≤3 ≤10 5.0~9.0 / ≥4.0 ≤8.0
[4]
炽灼残渣 （硫酸灰份） ,w/%
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银杏叶制叶绿素铜钠盐(工业级,不可食用) 项目 pH 吸光度[E (405±3nm)]
1% 1cm
指标 9.5~11.0 ≥568 3.0~3.9 / / 3.0
美国药典 USP-35 版 9.5~10.7 / 3.0~3.9 ≥4.25 ≤0.25 ≤5.0 / / ≤3 ≤10 5.0~7.0 ≤0.50 ≥4.0 / ≤30.0
吸光度比值
[2]
总铜(Cu),w/% 游离铜(Cu),w/% 干燥失重 ,w/% 银杏酸(以 C13 计)/(mg/kg) 主成份色谱纯度,A/% 总砷(以 As 计)/(mg/kg) 铅(Pb)/(mg/kg) 钠(Na) ,w/% 铁(Fe) ,w/% 氮(N) ,w/% 非必要硫酸灰份,w/%
流量：1.0ml/min。 检测器：紫外检测器，检测波长=210nm。 进样量：20μL。 峰的识别：利用对照银杏酸标准品所提供的色谱图与供试品溶液所测得的色谱图对比，识 别出银杏酸 C13，C15 和 C17 的峰。 系统适应性：参考标准 标准：银杏酸 C13 和 C15 之间的分离度大于 2.0 拖尾因子：银杏酸 C13，C15 和 C17 峰的对称因子为 0.8—1.05 总银杏酸的百万分之含量计算以银杏酸 C13 表示，使用以下公式：
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银杏叶制叶绿素铜钠盐质量标准（试行稿）
主要成分 本品为由银杏叶提取的叶绿素或脱镁叶绿素，经皂化、铜代及脱除银杏酸后得到的主要成 份为叶绿素铜钠盐以及部分天然有机酸钠盐的混合物。 分子式和相对分子质量 分子式 铜叶绿酸三钠:C34H31O6N4CuNa3 铜叶绿酸二钠:C34H31O6N4CuNa2 相对分子量 铜叶绿酸三钠:724.17（按 2007 年国际相对原子质量） 铜叶绿酸二钠:684.16（按 2007 年国际相对原子质量） 理化指标 银杏叶制叶绿素铜钠盐(食用级)理化指标 项目 溶解度(g/100ml)[1] pH 吸光度[E (405±3nm)]
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［pH 值］ 取本品 0.50g，加水 50ml 溶解后，测定 pH 值应符合相应指标值。 ［总铜］ 精密量取铜标准贮备溶液 10ml ［精密称取硫酸铜 （CuSO4·5H2O） 0.196g， 置 500ml 量瓶中，加 1mol/L 硫酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀。每 1ml 相当于 100mg 铜］ ，置 100ml 量 瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。精密量取 5ml、10ml、15ml、20ml，分别置 100ml 量瓶中，加 水稀释至刻度，摇匀，作为标准品溶液。另精密称取本品约 0.1g，置凯氏烧瓶中，加硫酸 2ml、 硝酸 2ml 和 30%过氧化氢溶液 1ml，缓缓加热，直至出现淡绿色。如果溶液出现棕色，继续加 硝酸 0.5ml，直至淡绿色出现。冷却后，用水分次转移至 250ml 量瓶中，并稀释至刻度，摇匀， 精密量取 10ml，置 200ml 量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。照原子吸收分光 光度法，在 324.8nm 的波长处测定吸收度，计算，即得。 ［游离铜］ 精密量取铜标准贮备溶液 10ml，置 100ml 量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。 精密量取 1ml、2ml、4ml、6ml，分别置 100ml 量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为标准品溶 液。另精密称取本品约 0.1g，加水约 50ml 溶解后，用 1mol/L 盐酸溶液调节 pH 值至 3.5，加水 至 100ml，滤过，取续滤液作为供试品溶液。照原子吸收分光光度法，在 324.8nm 的波长处测 定吸收度，计算，即得。 ［银杏酸］ 供试品溶液：取本品 1.0g，加水 15ml，异丙醇 15ml，超声溶解。再加石油醚 （60~90，下同）10ml，剧烈振摇下加 50%硫酸 12 滴，离心，取石油醚层清夜，即得。 对照溶液：取 10.0mg 白果新酸（C13）对照品，加 50ml 甲醇溶解。取该溶液 2ml，并用甲 醇稀释至 50ml。 色谱条件： 柱尺寸：L=0.25 m, Φ=4.6 mm 固定相：辛基硅烷硅胶色谱(C8 柱,粒径:5μm) 柱 温：35℃ 流动相：流动相 A：0.01%磷酸水溶液； 流动相 B：0.01%磷酸乙腈溶液。 梯度表： 时间 (min) 0~30 30~31 31~40 流动相 A (% V/V) 25→10 10 25 流动相 B (%V/V) 75→90 90 75
1% 1cm
指标 ≥10 ≤11.0 ≥800 3.0~3.6 ≥6.0
理论值 ≥10 / / 3.0 ≈9.1 0 0 0 100 0 0 6.7~9.5 0 8 0 ≈44
内控值 ≥10 ≤10.5 ≥1000 3.0~3.4 ≥7.0 ≤0.1 ≤3.5 ≤8 ≥85 ≤3 ≤5 6.0~9.0 / ≥5.0 ≤5.0 / /
色谱图中 1 ，2 峰紫外及可见光谱图
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［干燥失重］ 取本品，在 105℃干燥至恒重，减失重量不得过 4.0%。 ［非必要硫酸灰份］ 取本品 0.5g，置已在 550±50℃炽灼至恒重的坩埚中，精密称定，缓 缓炽灼至完全炭化， 放冷至室温； 加硫酸 0.5～1ml 使湿润， 低温加热至硫酸蒸气除尽后， 置 550 ±50℃下炽灼 2 小时，移置干燥器内，放冷至室温，精密称定后，再在 550±50℃炽灼至恒重， 即得硫酸灰份。 非必要硫酸灰份按下式计算： 非必要硫酸灰份 % 硫酸灰份 % - 总铜 % - 游离铜 % 4.90
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［铅盐］ 取炽灼残渣项下遗留的残渣，加 5%硝酸溶液 5ml 使溶解后，移至 50ml 量瓶中， 坩埚用水充分洗涤，洗液并入量瓶中，加水至刻度，摇匀，精密量取 20ml，置 25ml 具塞比色 管中，加枸橼酸铵溶液（1→2）1ml，盐酸羟胺溶液（1→5）5 滴，麝香草酚蓝指示液 1 滴，滴 加氨试液至溶液呈蓝色，加氰化钾试液 2ml，精密加入双硫腙氯仿溶液 2ml，振摇 1 分钟，静置 分层后，氯仿层所显的颜色与标准铅溶液 2ml，加 3%硝酸溶液 2ml 与水 14ml 同法处理后的颜 色比较，不得更深。 ［砷盐］ 取本品 1.0g，置凯氏烧瓶中，加硫酸 5ml，硝酸 10ml，加热至溶液澄清，放冷， 移入蒸发皿中， 凯氏烧瓶用水分次洗涤， 洗液并入溶液中， 蒸干， 加盐酸 5ml 与水适量使成 28ml， 除酸性氯化亚锡溶液加 1ml 外，依法检查（中国药典 2010 年版二部附录 VIII J 第一法） ，含砷 量不得过百万分之三。 ［钠含量］ 精密量取钠标准贮备溶液 2.5ml、5.0ml、10.0ml、15ml［称取 254.2 毫克的氯 化钠（事先置于 105℃下干燥 2 h） ，溶于 50 毫升的水中，再转移至一个 1000 毫升容量瓶，用 水稀释至刻度，摇匀。每一毫升相当于 100 µg 钠］,分别置于４个 100 毫升量瓶中，各加 10ml 非离子表面活性剂（1g 溶解于 500ml 水中） ，加水稀释至刻度，摇匀，作为标准品溶液。 空白:移取 10 毫升的非离子表面活性剂（1g 溶解于 500ml 水中）到 100ml 容量瓶,用水稀释 至刻度。 供试品溶液:称取叶绿酸铜钠盐 100mg 到 1000ml 容量瓶。 加入 100ml 非离子表面活性剂 （1g 溶解于 500ml 水中）和 400 毫升的水，充分振摇使溶解，再用水稀释至刻度。 照原子吸收分光光度法，分别测定标准品溶液、空白和供试品溶液在 589.0nm 的波长处的 吸收度，计算，即得。 ［氮含量］ 取本品约 0.5g，精密称定,连同称量纸置干燥的 500ml 凯氏烧瓶中；然后依次 加入硫酸钾(或无水硫酸钠)10g 和硫酸铜粉末 0.5g，再沿瓶壁缓缓加硫酸 20ml；在凯氏烧瓶口 放一小漏斗并使烧瓶成 45°斜置，用直火缓缓加热，使溶液的温度保持在沸点以下，等泡沸停 止，强热至沸腾，待溶液成澄明的绿色后，继续加热 30 分钟，放冷。沿瓶壁缓缓加水 250ml， 振摇使混合，放冷后，加 40%氢氧化钠溶液 75ml，注意使沿瓶壁流至瓶底，自成一液层，加锌 粒数粒，用氮气球将凯氏烧瓶与冷凝管连接；另取 2%硼酸溶液 50ml,置 500ml 锥形瓶中，加甲 基红-溴甲酚绿混合指示液 10 滴；将冷凝管的下端插入硼酸溶液的液面下，轻轻摆动凯氏烧瓶， 使溶液混合均匀，加热蒸馏，至接受液的总体积约为 250ml 时，将冷凝管尖端提出液面，使蒸 汽冲洗约 1 分钟，用水淋洗尖端后停止蒸馏；馏出液用硫酸滴定液 (0.05mol/L)滴定至溶液由蓝 绿色变为灰紫色，并将滴定的结果用空内试验校正。每 lml 硫酸滴定液(0.05mo1/L)相当于 1.401mg 的 N。 类别 备注 ［磷酸盐缓冲溶液（pH7.5） ］0.15moL/L 磷酸氢二钠溶液 84ml，加 0.15moL/L 磷酸二氢钾 溶液至 100ml，摇匀，即得。 ［枸橼酸铵溶液（1→2） ］取枸橼酸铵 50g，加水溶解并稀释至 100ml，加麝香草酚蓝指示 液 2 滴，加氨试液至蓝色，用双硫腙氯仿液分次洗涤，每次 20ml，至双硫腙氯仿液保持绿色， 再用氯仿抽提，除去残留的双硫腙，至氯仿层无色，即得。本液应临用时新鲜配制。 ［盐酸羟胺溶液（1→5） ］取盐酸羟胺 20g，加水溶解使成 100ml，照枸橼酸铵溶液配制法