牛奶中抗生素残留检测技术
牛奶中抗生素残留的检测方法
doi:10.19369/j. cnki. 2095 — 9737.2021.04.043牛奶中抗生素残留的检测方法范松阳(黑龙江省地质矿产实验测试研究中心，黑龙江哈尔滨150000)摘要：牛奶等乳制品中如果残留抗生素既会导致品质变差，严重时还会对发酵乳制品的生产造成影响，使其产量降低，并导致后期产品风味变差，损害生产者的经济效益，同时人们摄入后会 严重危害健康，如导致人体发生过敏反应（过敏性休克、皮疹等），使肠道中有益菌的生长被抑制，而致病菌、念珠菌等大量增殖，引起局部或者全身感染，还会使人体对抗生素形成抗药性，明显加大临床治疗难度。
现概述奶牛中抗生素残留的检测方法，供参考。
关键词：牛奶；抗生素残留；检测方法中图分类号：T S252. 7 文献标识码：B文章编号2095—9737(2021)04 —0074 —021理化检测法1.1检测原理该法主要是根据抗生素分子的性质，使用相 关实验仪器对其进行分离检测。
分离时常用的实 验技术为电泳检测或者色谱检测等，检测时常用 的实验技术为紫外检测、化学发光检测、荧光检测 或者质谱检测等。
1.2优缺点该法具有精确可靠、重复性好、检测灵敏、分 离效率高、结果稳定的特点，属于检测抗生素残留 的一种精确方法。
2微生物检测法该法是检测牛奶抗生素残留时应用比较广泛 的经典方法，主要有氯化三苯基四氮唑法（T TC 法）、纸片法、管蝶法以及试剂盒法等。
2.1检测原理主要是根据抗生素对微生物的机能、生理代 谢产生的抑制作用来对样品中残留抗微生物药物 进行定性。
2.2优缺点这种检测方法具有费用低、操作简单、结果可 靠、不需使用高级实验设备的优点，可应用于普通 养殖场及实验室。
但由于需要进行微生物培养，因此有相对较长的检测时间，无法实现定量检测，不可检测出某些抗生素的最低限。
2.3常用方法2.3. 1T TC 法将9m L灭菌脱脂乳中接种提前制备好的嗜热链球菌菌种，放人3 6±1C恒温培养箱中经过15 h活化，然后对脱脂乳按1 〇 1比例进行稀释制 成测试菌液。
牛奶中抗生素残留的危害及检测方法
牛奶中抗生素残留的危害及检测方法牛奶是人们日常生活中常见的食品，其中所含的营养物质不仅能够滋养身体，还有助于提高体质和免疫力。
然而，由于养殖过程中存在着防疫和治疗等需要用到的药物，这些药物残留在牛奶中，可能会对人体造成不良影响，尤其是抗生素类药物。
抗生素残留对人体健康的危害抗生素是治疗疾病的重要药物，但如果残留在食品中，就可能造成对人体健康的危害。
抗生素残留可能会引起一系列不良反应，比如过敏、消化系统不适、免疫力下降、对药物产生抗拒性等，甚至会导致肝脏、肾脏等重要器官的损害。
为了确保牛奶中不存在抗生素残留，需要进行检测。
以下是常见几种抗生素类药物的残留检测方法：1. 青霉素类药物的残留青霉素类药物是公认的大肠杆菌等细菌感染的有效抗菌药物，但残留在食品中对人体有害。
目前，青霉素类药物的检测方法主要包括高效液相色谱法、液相色谱-串联质谱法、酶联免疫分析法和生物传感器等方法。
其中，高效液相色谱法和液相色谱-串联质谱法的检测精度高，并且具有较高的灵敏度和准确性。
2. 地塞米松的残留地塞米松是一种合成类地方性免疫耐受调节剂，主要应用于牲畜的体外免疫调节和兽医治疗。
但如果过量使用，就可能导致地塞米松在动物身体中的残留，从而污染牛奶等食品。
地塞米松的检测方法主要包括酶免疫测定、高效液相色谱等。
其中，酶免疫测定是一种速度快、操作简单、灵敏性好和准确性高的方法。
金霉素是一种广谱抗生素，用于治疗猪、牛等家畜的肺炎、败血症和伤寒等疾病，残留在食品中会引起人体过敏等不良反应。
金霉素的检测方法主要包括酶免疫分析、薄层色谱法、气相色谱法等。
其中，酶免疫分析是一种特异性好、检测范围广的方法。
总结在现代食品安全监管中，控制抗生素残留已经成为一个重要的问题。
对于牛奶中的抗生素残留，需要通过科学的检测和监管手段来避免对人体健康造成影响。
只有保证牛奶食品的安全和质量，才能让人们吃得更健康，饮得更放心。
TTC法
3TTC法(1)TTC试验原理TTC是取作为指示剂用的2、3、5-Triphenyte-trazoliumchloride(氯化三苯基四氮唑)的头一个字母的缩写，其原理是如果乳中有抗生素存在，则在向试样中加入菌种(嗜热链球菌)培养时细菌不增殖。
此时，由于作为指示剂加入其中的TTC不还原，所以，仍呈无色状态。
相反，如果没有抗生素存在，则加入的试验菌即行增殖，TTC还原变成红色，试样也随之染成红色。
也就是说试样呈奶的原色时为阳性，染成红色时阴性。
(2)设备和材料水浴箱、温箱、1ml与10ml灭菌试管各2支、灭菌巧15x15mm试管3支，100℃温度计、蜡笔、试管架。
(3)培养基和试剂菌种嗜热乳链球菌、经113℃温度灭菌20min的脱脂乳。
TTC试剂；称取2，3，5一氯化三苯基四氮唑1g，溶于25ml灭菌蒸馏水中，装人褐色瓶在7℃以下冰箱暗处保存。
临用时用灭菌蒸馏水稀释至5倍。
(4)菌液制备将菌种移种脱脂乳，经36士1℃的温度培养15h后，以灭菌脱脂乳1:1的比例稀释待用。
(5)操作顺序注:每份检样作2份，另外再作阴性和阳性对照各1份，阳性对照常用无抗生素的乳8ml，加抗生素及菌液和TTC，阴性对照常用无抗生素乳8ml加菌液和TTC。
微生物检测法的缺点是时间相对较长，状态判断通过肉眼辨别易产生误差，灵敏度低，操作相对复杂。
其优点是费用低，一般实验室都能操作。
2.1氯化三苯四氮唑法(TTC试验)本法是往检样中先加人菌液和TTC指示剂(2，3，5一氯化三苯四氮哇)，如检样中有抗生素存在，则会抑制细菌繁殖，TTC指示剂不被还原，不显色;如检样中无抗生素残留，则细菌大量繁殖，指示剂被还原而呈红色。
具体操作为:2.2.1菌液制备。
将嗜热乳酸链球菌接种人灭菌脱脂乳，置36℃士1℃培养箱中保温15h，再用灭菌脱脂乳以1:1比例稀释备用。
2.1.2操作步骤。
取乳样9ml放人试管中→置80℃水浴中保温5min→冷却至37℃以下→加人菌液lml→置36℃士1℃水浴中保温2h→加入4%TTC指示剂0.3ml→置36℃土1℃水浴中保温30min→观察牛乳颜色变化。
牛奶中抗生素残留的几种常用检测方法
牛奶中抗生素残留的几种常用检测方法1.高效液相色谱法（HPLC）：高效液相色谱是一种基于溶剂流动的液相色谱方法，具有灵敏度高、分离能力强等特点。
在牛奶中检测抗生素残留时，首先将牛奶样品经过样品前处理，去除干扰物，然后使用适当的洗脱液将抗生素从固相萃取柱中洗脱出来，最后用高效液相色谱对抗生素进行分离和定量。
2.毛细管电泳法（CE）：毛细管电泳法是一种基于电场作用下溶液中离子迁移速度的分析方法。
该方法具有高分离能力、快速分析速度等特点。
在牛奶中检测抗生素残留时，首先将牛奶样品进行前处理，然后通过毛细管电泳仪器进行分析。
该方法不仅可以同时检测多种抗生素，而且样品准备过程相对简单。
3.气相色谱法（GC）：气相色谱法是一种基于色谱柱分离原理的分析方法，通过适当的蒸发和衍生反应可以将抗生素样品转换为易于气相色谱分析的衍生化物。
该方法具有高度选择性、高灵敏度等优点。
在牛奶中检测抗生素残留时，通常需要进行样品前处理。
首先将牛奶样品中的脂肪物质去除，然后使用适当的溶剂将抗生素从样品中提取出来，并通过气相色谱进行分离和定量分析。
4.酶联免疫吸附法（ELISA）：酶联免疫吸附法是一种基于抗原-抗体反应原理的免疫学方法。
在牛奶中检测抗生素残留时，首先利用适当的蛋白质工程技术制备特异性抗生素抗体，然后将牛奶样品中的抗生素与抗体结合，通过酶标记的二抗或亲和素染色法对特异性抗体进行检测。
该方法具有灵敏度高、操作简单等特点。
5.高分辨质谱法（HRMS）：高分辨质谱法是一种基于质荷比检测的方法，具有高灵敏度、高分辨率等优点。
在牛奶中检测抗生素残留时，首先将牛奶样品经过适当的前处理，然后通过质谱仪对抗生素进行定性和定量分析。
该方法不仅可以同时检测多种抗生素，而且可以准确测定其残留量。
总结起来，牛奶中抗生素残留的检测方法包括高效液相色谱法、毛细管电泳法、气相色谱法、酶联免疫吸附法和高分辨质谱法等。
这些方法具有不同的优点和适用范围，可以根据具体需求选择合适的方法进行检测。
牛奶中抗生素残留的危害及检测方法
牛奶中抗生素残留的危害及检测方法1. 引言1.1 牛奶中抗生素残留的问题牛奶是人们日常生活中常见的饮品，富含丰富的营养物质，被广泛认为是一种健康的饮品。
近年来，牛奶中抗生素残留的问题引起了人们的关注。
抗生素残留是指在牛奶加工过程中或青草饲料中使用抗生素后，导致抗生素残留在牛奶中，并最终被人体摄入导致危害健康的现象。
抗生素残留对人体健康造成的危害不容忽视。
长期饮用含有抗生素残留的牛奶会导致人体对抗生素的耐药性增强，使得治疗疾病时抗生素疗效降低。
抗生素残留可能引起过敏反应或其他身体不适症状，影响人们的健康。
牛奶中抗生素残留的问题亟待引起重视，并需要采取有效的检测方法和预防措施来防止其对人体健康造成危害。
在接下来的内容中，将重点介绍牛奶中抗生素残留的检测方法、国内外监管标准、原因分析和预防措施，希望能够引起社会各界的关注和重视。
1.2 危害性牛奶是人们日常生活中常见的饮品，但牛奶中存在抗生素残留的问题给人们的健康带来了严重的危害。
抗生素残留会影响牛奶的品质和安全性，对人体健康造成危害。
长期摄入含有抗生素残留的牛奶会导致人体对抗生素产生耐药性，使得治疗疾病变得困难。
抗生素残留还会破坏人体内部微生物群落的平衡，影响人体健康。
抗生素残留还可能引发过敏反应，导致皮肤瘙痒、呼吸困难等症状，严重的甚至会危及生命。
而且，长期摄入含有抗生素残留的牛奶还可能导致内分泌系统紊乱，影响人体正常的生理功能。
牛奶中抗生素残留的问题具有严重的危害性，必须引起我们的高度重视。
建立有效的检测方法和加强监管措施，才能保障牛奶的品质和安全，保障人们的健康。
2. 正文2.1 检测方法牛奶中抗生素残留的检测方法主要包括生物传感器法、色谱法、质谱法等。
生物传感器法是利用生物体对抗生素具有高度特异性的反应进行检测，具有快速、灵敏、低成本等优点，但存在一定的干扰因素；色谱法则是通过分离和检测样品中的抗生素分子，具有高灵敏度和准确性，但需要专业的操作人员和设备；质谱法则可以提供更加准确的分析结果，同时可以同时检测多种抗生素，但设备昂贵，且操作复杂。
牛奶中抗生素残留检测技术的研究进展
相同 ， 但填料更加精细 （ 直径 ５—１ ｍ） 需高压泵推动 ， ０ ， 柱效 高 （０ １５塔板／ ， ｍ） 速度 快 ， 灵敏 度与 Ｇ Ｃ相 近。与 Ｇ Ｃ相 比， Ｐ Ｃ Ｈ Ｌ
流动相参与分离 机制 ， 其组 成 、 比例和 ｐ Ｈ值 等可 灵活调 节 ， ： 如 离子对 色谱 、 胶束 色谱 、 手性分 离色谱 等 ， 许 多极难 分 离的 待 使 测 物得 以分 析。反相 Ｈ Ｌ Ｐ Ｃ发展最快 ， 目前 已成为大多数 抗生素 残 留 的 常 规 分 析 方法 Ｊ 主要 原 因是 ： １ 化 学 键 合 固 定 相 （ 。 。 （） Ｃ 或 Ｃ） 性质稳定 ， 不流失 ；２ 使用水 、 （） 甲醇或 乙睛等水溶 性有 机 溶剂作 流动相 ， 不干扰紫外检测 ， 成本低 ；３ 样 品中极性杂质 先 （） 流 出， 只需待测物 出峰后 即可重复进样 ， 分析速度快 。
第４ ０卷第 １ ０期
２１ ０ ２年 ５月 Ｇ ａ ｇｈ ｕ Ｃ ｅ ｉ ｌ ｎ ｕ ｔ ｕ ｎ ｚ ｏ ｈ ｍ ｃ ｄ ｓ ｙ ａＩ ｒ
Ｖｏ ． ０ Ｎｏ ０ １ ４ ．１ Ｍａ ２ ２ ｖ． ０ｌ
牛 奶 中抗 生 素 残 留检 测 技 术 的 研 究 进 展 木
陈家越
是 关 键 问题 。液 一 联 用 要 通 过 一 个 “ 口 ’来 实 现 。在 接 口 质 接 ， 有 关 检 测 技 术 列 为 标 准 检 测 方 法 。
一
率很高 ， 故可极大地放大反应效果 ， 从而使测定 方法达到很 高的 敏 感 度 。１７ 年 Ｅ ｇａ 和 Ｐｒ — ｎ 表 了 酶 联 免 疫 吸 附 测 ９１ ｎｖｌ ｌ ｅ ｍ ａ ｎ发 ｌ 定（ ＬＳ 用 于 ＩＧ定量测 定的文章 ， Ｅ ＩＡ） ｇ 使得 １６ ９６年开始用 于抗 原 定 位 的 酶 标 抗 体 技 术 发 展 成 液 体 标 本 中微 量 物 质 的 测 定 方
牛奶中抗生素残留的危害及检测方法
牛奶中抗生素残留的危害及检测方法导言牛奶是人类常用的一种营养食品，富含蛋白质、脂肪、矿物质和维生素，被誉为"白色的液体黄金"。
在现代社会，随着生产工艺的不断改进和科学技术的进步，牛奶产业获得了长足的发展。
随之而来的问题也逐渐显现出来，牛奶中抗生素残留的问题便是其中之一。
抗生素残留会带来严重的健康隐患，因此及时发现并解决这一问题至关重要。
本文将会针对牛奶中抗生素残留的危害及检测方法进行详细的讨论。
一、牛奶中抗生素残留的危害1. 抗生素残留引发细菌耐药性在牛奶生产过程中，为了预防牛只患病，养殖户一般会通过饲料添加或者注射方式使用抗生素。
由于抗生素的滞留期和排泄周期的不同，导致在牛奶中留下一定量的抗生素残留。
在人们饮用了这些含有抗生素的牛奶后，抗生素会进入到人体内，长期饮用含有抗生素的牛奶会促进细菌对抗生素产生耐药性，从而降低抗生素的功效，增加了世界范围内的细菌耐药性问题。
2. 对人体健康产生严重危害抗生素残留的牛奶一旦进入人体，会通过饮用进入到人体内部，对人体健康产生严重的危害。
长期饮用含有抗生素的牛奶，会对人体的消化系统、免疫系统和内分泌系统产生不良影响，导致消化不良、免疫力下降、内分泌失调等一系列健康问题，严重的甚至可能引发一些顽固的疾病。
特别是对于孩子和老年人来说，由于抵抗力较弱，更容易受到影响。
3. 严重影响消费者信心抗生素残留的存在不仅会严重影响牛奶的品质，更严重的是会严重影响消费者的信心。
一旦发生抗生素残留引发的食品安全事件，不仅会对企业造成巨大的经济损失，更会使得消费者对牛奶产生长期的恐惧心理，严重危害牛奶产业的可持续发展。
针对牛奶中抗生素残留的问题，科研工作者们提出了各式各样的检测方法，其中主要包括生物传感技术、光学光谱技术、物化检测技术和色谱法等多种手段，这些方法均具有不同的特点和局限性，但都能有效地进行抗生素残留的检测。
1. 生物传感技术生物传感技术是一种利用生物学反应特异性和灵敏度的技术，通过对生物体的信号输出进行检测定量目标物质的方法。
浅析原料乳及乳制品中抗生素残留现状及微生物检测方法
129原料乳及乳制品中的抗生素残留是影响乳制品安全的关键因素，而通过微生物检测法可以有效检测出原料乳及乳制品中的抗生素残留，本文重点论述了我国原料乳及乳制品中抗生素残留的现状以及微生物检测方法。
一、我国原料乳及乳制品中抗生素残留现状在我国，原料乳及乳制品的安全问题主要是因为其中存在一定量的抗生素（用于治疗牛乳腺炎症）。
从食品保鲜的角度来说，抗生素能够有效抑制鲜奶中微生物的生长繁殖过程，从而延长鲜奶的保质期，但是不正确、不恰当用药却会导致乳制品中存在抗生素残留，从而造成食品安全隐患。
考虑到乳制品加工过程中会有大量微生物参与其中，所以抗生素残留较高必然会对微生物繁殖过程产生一定影响。
再者，如果长期食用抗生素残留超标的乳制品，人体健康也会深受影响，主要表现是抗生素残留超标，增加病原菌耐药性，同时严重破坏人体肠道中的微生物菌落平衡，导致人体出现不同程度的过敏反应。
因此，对原料乳及乳制品进行抗生素残留检测是必不可少的。
值得注意的是，我国原料乳及乳制品中抗生素残留的现状并不容乐观。
例如，一份针对北京、天津、石家庄5个零售点共77个牛奶样品的β－内酰胺酶残留检测结果显示，63.6％的样品检测呈阳性；一项针对西宁、南宁、广州、杭州、泉州、北京等城市乳制品质量的检测调查结果显示，在近800份乳品采样中，抗生素残留超标位居不合格项目之首。
二、原料乳及乳制品中抗生素残留的微生物检测方法抗生素检测技术的种类较多，根据技术原理主要包括免疫法、微生物检测法以及理化分析法。
其中，微生物检测方法能够实现对原料乳及乳制品中抗生素残留、微生物代谢及其生理机能的有效分析，同时了解抗生素残留对于浅析原料乳及乳制品中抗生素残留现状及微生物检测方法微生物代谢生理机能的抑制作用。
在检测过程中，如果原料乳及乳制品样品中存在对抗生素敏感的微生物，则表示待检测样品中没有抗生素残留；反之，微生物的生长则会受到严重抑制，在培养基上逐渐形成明显的抑菌圈。
牛奶中抗生素的检测方法
牛奶中抗生素的检测方法(总4页)-CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1-CAL-本页仅作为文档封面，使用请直接删除牛奶中几种抗生素检测方法热[ 作者：云月英,王文龙|转贴自：本站原创|点击数：725|更新时间：2009-8-10|文章录入：imste2009年第2期 ](内蒙古科技大学生物与化学工程学院，内蒙古包头 014010)摘要：文章就牛奶中抗生素残留的几种检测方法做了一个系统综述，介绍了普通方法、色谱法、免疫法、牛乳发酵活性实验法、Benedict试剂法、DELVOTEST检测法、Deivoteur p试剂等方法。
提出，其中色谱法、免疫法及其联用技术在残留分析方面的研究与应用取得了长足进展，在抗生素残留快速检测中效果明显。
关键词：牛奶；抗生素；检测中图分类号：TS207 文献标识码：A 文章编号：1007—6921(2009)02—0077—03牛奶中抗生素残留问题在世界范围内一直没有被彻底攻克，已成为行业发展以及食品安全的隐患之一。
抗生素主要指能抑制或杀死其他微生物的一类化学物质，如青霉素、四环素、金霉素、链霉素、氯霉素、磺胺类药物等。
在医学上，抗生素被广泛的应用于预防和治疗多种微生物感染性疾病以及某些癌症。
在奶业的源头中，抗生素使用频率很高，特别是治疗牛乳房炎，常常大剂量反复使用。
据统计，约有十多种抗生素以一种或多种联合的形式采用粉剂、涂擦剂、注射剂，以及乳导管注入等方式加以应用，导致抗生素残留相当严重，在奶牛饲料中，也含有抗生素添加剂。
目前，国内外用于检测奶及奶制品中抗生素残留的方法很多，而为满足奶及奶制品生产需要和遵守新法规，人们对快速检测开始感兴趣，而高效液相色谱法、酶联免疫吸附测定法等方法具有最低检出限量低、准确性好、灵敏性强、重现性好的特点，成为残留分析的主流。
1 牛奶中抗生素的弊处牛奶中不允许残留抗生素，主要有两个原因：第一，占人口一定比例的人对抗菌素尤其是青霉素过敏，人们长期饮用或食用抗生素残留的牛奶或奶制品，也就相当于长期低剂量的摄取抗生素，其危害性主要有：①使人体产生耐药性，给今后患病使用抗生素治疗带来不良影响；②抗生素对过敏体质的人会出现过敏反应，危及健康；③破坏人体内正常菌群的平衡状态，使菌群失调，甚至造成二重感染，使重症患者病情难以控制。
胶体金免疫层析技术在牛奶抗生素残留检测中的应用
杜 宗 绪
（ 潍坊职业学院 ， 山东 潍坊 ２ ６ １ ０ ３ １ ）
摘
要： 胶体金免疫层析技术不仅操作简便 、 快速 、 特异， 而且特别适用于广大基层检验人员 的现场检测 。介绍 了
胶 体金 免疫层析技术 ， 综述 了胶体金免疫层析技 术在 牛奶 中 １ ４ 种 一 － 内酰胺类抗生素 、 ５ 种 四环素类抗生素 、 １ 种 氨基糖苷类抗生素 、 １种氯霉素类抗生素 、 ２ 种 大环内酯 类抗生素 、 １ ２种磺胺类抗生素和 １ １ 种氟喹诺酮类抗 生素
氯霉素类氯霉素是一种广谱抗生素具有良好的抗菌药胺对甲氧嘧啶磺胺异嗯唑磺胺甲氧哒嗪磺胺多理特性被广泛应用于各类家禽家畜水生动物及辛种磺胺类抗生素的残留结果表明磺胺二甲蜜蜂中各种传染病的防治结果表明应用胶体金基嘧啶的检测限为斗磺胺异嗯唑的检测免疫层析技术可检测牛奶中氯霉素残留检测限为限为斗班磺胺氯哒嗪和磺胺对甲氧嘧啶的检斗检测时间为测限为斗磺胺间二甲氧嘧啶磺胺间甲氧嘧王玮等制备了平均粒径为的胶体金啶和磺胺苯酰的检测限为斗磺胺嘧啶的检用来标记抗氯霉素多克隆抗体将氯霉素半抗原与测限为磺胺甲氧哒嗪和磺胺多辛的卵清蛋白的偶联物包被在硝酸纤维素膜上作为检检测限为斗磺胺喹嗯啉和磺胺甲嗯唑的检测带羊抗兔二抗作为质控带依据免疫竞争法原测限为斗
残 留检测中的应 用 ； 同时对胶 体金免疫层析技术在牛奶 中抗生素残 留检测 中的应用前景进行 了展望 ， 指出 了其未
来 的 ４个发展方 向。
关键词 ： 胶 体金 免疫 层析技术 ； 牛奶 ； 抗生素残 留； 快速检测 ； 应用
中 图分 类号 ： ￥ ８ ５ ９ ． ８ ４ 文献标识码 ： Ａ 文章编号 ： １ ０ ０ ２ — ２ ４ ８ １ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ７ — ０ ７ ６ ２ — ０ ５
牛奶中抗生素残留现状及检测方法的研究进展
牛奶中抗生素残留现状及检测方法的研究进展【摘要】本文论述了牛奶中抗生素残留的原因和危害性，综述了抗生素残留检测的三类方法，包括理化检验法、微生物检测法和免疫分析法，为进一步开展牛奶抗生素残留检测提供参考。
【关键词】牛奶；抗生素残留；检测方法0 前言长期以来，抗生素被广泛地用于人和动物疾病的防治，在奶牛饲养业中作为医治乳房炎等疾病的药物，是一种高效的兽药，但抗生素残留在牛奶中会造成对人体健康的危害。
随着生活水平的提高，牛奶中抗生素残留问题日益受到消费者的重视，已成为乳业管理和技术的难题之一。
本文综述了牛奶中抗生素的残留现状和危害，并介绍了三大类检测方法。
1 牛奶中抗生素的来源牛奶中抗生素的残留主要以下几个方面原因：（1）对泌乳期奶牛用药不当引起牛乳中抗生素残留；（2）把抗生素作为奶牛饲料添加剂使用；（3）因挤奶工具和贮奶设备造成的患病奶牛与健康奶牛之间的交叉污染；（4）部分不法奶农为防止细菌的大量繁殖和牛奶的酸败而人为添加抗生素。
2 牛奶中残留的抗生素的种类及其危害抗生素在奶牛疾病预防和治疗中发挥了巨大的作用，但牛奶中残留的抗生素对人体存在潜在的危害，表现在：（1）引起过敏反应，由于许多抗生素药物如青霉素、四环素、磺胺类药物均有一定抗原性，可引起人们的过敏反应；（2）诱导人体内产生耐药性菌株，造成人体内的菌群失调，使人的免疫力降低，严重时可危及病人生命；（3）影响奶制品品质，降低产量和质量，给生产者造成经济损失；（4）一些化学性质稳定的抗生素被排泄到环境中将会造成环境污染，破坏生态平衡；（5）抗生素本身存在一定的副作用（见表1）。
表1 常见抗生素的种类及副作用3 牛奶中抗生素残留标准随着消费者和国家主管部门对牛奶中抗生素残留危害的认识，2001-2002年农业部公布了《无公害食品生鲜牛乳》（NY/T 5045-2001），规定了“抗生素不得检出”，2002 年12月又发布了《动物性食品中兽药最高残留限量》，其中对牛乳中的兽药残留限量作了明确规定，2008年10月6日，国务院第二十八次常务会议通过《乳品质量安全监督管理条例》，将抗生素残留检测项目列为强制性检测项目。
牛奶抗生素检测方法
牛奶抗生素检测方法
牛奶中抗生素残留的检测方法通常包括以下几种：
1. 高效液相色谱-质谱联用技术（HPLC-MS/MS）：这是目前最常用的方法之一，其原理是利用高效液相色谱和质谱联用技术，可以对牛奶中的抗生素进行快速、准确的检测和分析。
2. 酶联免疫吸附测定法（ELISA）：这种方法利用特定的抗体和牛奶中的抗生素结合，通过酶的作用来检测抗生素的残留量，具有高灵敏度和快速的特点。
3. 色谱-质谱联用技术（GC-MS/MS）：这种方法也是一种常用的检测方法，通过气相色谱和质谱联用技术可以对牛奶中的抗生素进行准确的检测和分析。
4. 生物传感技术：这种技术利用生物传感器对牛奶中的抗生素进行检测，具有快速、灵敏度高，操作简便等优点。
需要注意的是，以上方法都需要在实验室条件下进行，使用专业设备和技术进行检测，确保牛奶中的抗生素残留符合国家标准和食品安全要求。
牛奶中抗生素残留的检测
牛奶中抗生素残留的检测摘要研究了链霉素与1.5%硫酸铁铵的0.25mol/L硫酸液的显色反应。
利用链霉素的特有性质（麦芽酚）反应[1]，链霉素在碱性溶液中，链霉糖经重排使环扩大形成麦芽酚，麦芽酚与硫酸链霉素溶液形成紫红色配位化合物[2]。
本实验据此分析得到在NaOH的溶液中，以硫酸铁铵为显色剂在525nm波长下用分光光度法测定硫酸链霉素的含量。
回归方程A=0.0882C+0.0003，相关系数r=0.9998，链霉素在0.5～3.0μg/mL的浓度范围具有良好线性关系。
该方法操作简便快捷，结果稳定可靠。
关键词分光光度；抗生素；残留；牛奶0 引言随着抗生素在乳畜饲养业中的广泛应用，牛奶中抗生素残留问题日益受到国际社会的重视。
而硫酸链霉素是常用氨基糖苷类抗生素，主要对结核杆菌，多种革兰氏阴性杆菌有效，在较低浓度时抑菌，较高浓度时则杀菌，在兽药抗生素领域广泛应用[3]。
目前抗生素的残留检测方法多样，而笔者采用硫酸链霉素与硫酸铁铵发生显色反应，并采用分光光度法测定硫酸链霉素的含量，该方法操作简单，方便快捷，适合在实际工作中运用。
1 实验部分1.1主要仪器及试剂723型分光光度计台式电动离心机注射用硫酸链霉素山东鲁抗医药股份有限公司提供国家准字H37020187 产品批号：110715 1g（100万个单位）；1.5%硫酸铁铵的0.25mol/L硫酸液；冰醋酸；0.2mol/LNaOH。
1.2实验方法取样品50mL水浴加热至40℃，取1mL冰醋酸滴加于其中，边加边搅拌直到沉淀析出完全，冷却至室温，离心。
取3mL离心后的清液于试管中，并加入4mLNaOH，在60℃水浴加热10min，冷却后，移入25mL容量瓶中，加入3mL 显色剂，定容。
静置20分钟，于525nm下测定吸光度。
通过工作曲线，得到相应硫酸链霉素的浓度[4]。
2 结果与讨论2.1吸收曲线精密称取链霉素标准品0.0504g溶于水，置50ml容量瓶中定容，即得1mg/mL 链霉素标准液。
牛奶中抗生素残留及其检测分析研究进展
摘要：抗生素在畜牧业中广泛应用，不可避免地造成牛奶中残留抗生素。
抗生素残留不仅危害人类健康，同时也影响牛奶的品质，造成经济损失。
本文就牛奶中抗生素残留的来源和危害以及牛奶中抗生素残留的检测方法作一综述。
关键词：牛奶；抗生素残留；微生物法；高效液相色谱法；色/质联用法；免疫法随着抗生素在乳畜饲养业中的广泛应用，牛奶中抗生素残留问题日趋受到国际社会的重视。
对此，检测技术也迅速发展，以寻求简便、快速、准确、敏感性高的检测方法满足日趋严格的残留限量的要求，保障人们饮用牛奶的卫生和安全。
1 牛奶中抗生素残留的来源及其危害1.1 牛奶中抗生素残留的来源一般认为，对泌乳牛用药不当或不注意安全时间是牛乳中抗生素残留的重要因素，尤其是使用乳房灌注法治疗乳腺炎时，易造成牛乳中抗生素残留。
随着畜牧业的发展，在牛饲料中添加饲料添加剂已十分广泛，其中含量有一定比例的抗生素，主要作用是预防疾病的发生，这也是牛乳抗生素残留重要原因。
此外，在高温季节，一些不法交奶户为防止乳的酸败，往往向牛乳中掺杂各种抗生素，这也是乳中抗生素残留的一个来源。
1983年，Egan[1]调查表明，重用经抗生素治疗的乳牛用过的挤乳器给正常乳牛挤乳，可使正常牛的乳中残留抗生素，于是他指出：挤乳是乳中抗生素残留的另一个来源。
1.2牛奶中抗生素残留的危害牛奶是老少皆宜的营养品，牛奶中若含有抗生素，对长期饮用者来说无疑是等于长期服用小剂量的抗生素，对抗生素有过敏体质的人服用残留抗生素的乳后会发生过敏反应。
即使是正常饮用者，体内的某些条件性致病菌易产生耐药性，一旦患者再用同种抗生素治疗很难奏效。
抗生素是奶牛场治疗乳房炎的常规药物。
由于长期大量使用抗生素，使耐药菌株增加，一些乳房炎病例变得难以用常规方法治愈。
这又促使临诊兽医在治疗过程中加大抗生素的用量。
此外，牛奶中抗生素残留会影响奶制品的品质，如果用含抗生素的奶做酸奶或乳酪等，则残留在其中的抗生素会抑制细菌的发酵，使产量和质量降低。
牛奶中抗生素残留的危害及检测方法
牛奶中抗生素残留的危害及检测方法摘要：在奶牛的日常管理过程中，抗生素常作为治疗药物和饲料添加剂，如果大剂量使用会造成药物残留和产生耐药性等问题。
牛奶中残留抗生素既会对人体健康带来危害，还会影响生产。
由于检测和控制牛奶中抗生素残留是一个复杂的过程，且产品生产过程中也可能随时混入一些不是常用的抗生素，进一步加大检测的难度。
因此，奶牛饲养过程中合理利用抗生素，对保证机体及其副产品的安全非常重要。
现主要对牛奶中抗生素残留的危害进行探讨，并介绍常用的检测方法，供大家参考。
关键词：牛奶;抗生素;危害;免疫法;快速检测法中图分类号：S859.79+6 文献标识码：B文章编号：2095-9737（2019）05-0139-021 危害1.1 影响人体健康1.1.1 导致过敏反应由于多种抗菌药（如四环素、青霉素、磺胺类药物等）都具有一定的抗原性，能够导致人体发生过敏反应，如经常饮用含有低剂量抗生素的牛奶，使机体在抗生素的反复刺激下而出现致敏。
如果人已经被致敏，在其再次接触相同抗生素时，会出现过敏反应。
1.1.2 引起肠道菌群失调正常情况下，人体肠道内菌群的变化会与人体相适应，部分菌群可抑制其他菌群的大量繁殖，但如果长时间摄入抗生素，会破坏这种平衡状态，造成条件致病菌大量繁殖，从而致病。
近几年，国外大量研究指出人们食入残留抗生素的动物性食品，会对胃肠道的正常菌群造成不良影响。
1.1.3 影响人体的免疫功能部分抗生素可阻碍免疫活性细胞的生长或者容易使其被破坏，如氨苄青霉素等可影响骨髓白细胞的生成，造成白细胞数量减少，从而使机体的细胞免疫功能降低。
部分抗生素会影响免疫系统的功能，如四环素类会对血清中白细胞的趋化性产生抑制，影响淋巴细胞的增殖，导致中性粒细胞的吞噬功能减弱。
1.2 危害生态平衡废弃牛奶中如果含有一些性质稳定的抗生素，会在环境中长时间保持稳定，从而对环境造成污染。
据报道，环境中的土霉素、链霉素较难被降解;低浓度的螺旋霉素可很快降解，但高浓度则需要6个月才可完全降解;在有氧的条件下，杆菌肽锌需要3～4个月才可完全降解，在无氧环境中需要更长的时间才可降解。
牛奶中抗生素残留的危害及检测方法
牛奶中抗生素残留的危害及检测方法牛奶中抗生素残留是牛奶中存在的一种潜在的危害，抗生素残留的存在可能导致乳制品对人体健康造成潜在风险，因此现代养殖中的抗生素使用应该受到合理的限制与管理。
本文将介绍牛奶中抗生素残留的危害和检测方法。
抗生素残留是指动物在治疗过程中或者禁用期间再次投药导致药物残留在动物体内，被乳腺排出的未经处理的牛奶中。
抗生素残留在牛奶中可能会对人体健康造成潜在威胁。
1.对细菌的抗药性抗生素是一种杀菌或抑制菌生长的药物，常常用于治疗感染和疾病，但是长期的抗生素使用可能导致对某些菌株的抗药性增强，导致细菌对抗生素的耐受性增强2.人体健康风险抗生素残留在牛奶中被人体吸收，会对人体健康造成潜在风险，导致人体对抗生素的抗药性增强，甚至引发过敏反应，牛奶中抗生素残留对儿童和老年人尤为危险。
3.影响生产者信誉若检测出牛奶中存在较高水平的抗生素残留，不仅会影响消费者的信心，同时也会影响生产者的信誉与市场竞争力。
针对牛奶中抗生素残留的问题，现在常见的检测方法主要包括生物检测法和化学检测法两种。
1.生物检测法生物检测法是检测抗生素残留最常用的方法。
这种方法通过蛋白质结合技术将乳汁分离，将不同抗生素添加到不同份分离的液体中，观测不同的反应并确定抗生素是否存在。
但是生物检测需要对不同种类的抗生素配制不同的试验剂，生产成本较高且操作复杂。
2.化学检测法化学检测法包括高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱法（GC）、免疫吸附层析试剂盒法等。
这种方法主要是使用化学方法来检测抗生素浓度，但是化学方法有时可能会发生误判和假阳性结果的情况，需要依赖先进的仪器和专业的化学技术人员进行操作，具有一定的局限性。
三、结论在牛奶生产中，应该非常注重对牛奶中抗生素的残留情况进行检测和限制，以保证消费者的健康安全。
同时，生产者也需要加强对动物的健康管理，合理使用抗生素。
尤其是要在动物治疗结束后，检测一段时间，确认牛奶不含有任何抗生素残留，才能将其投入市场销售，从而提高消费者的信心和市场竞争力。
牛奶中抗生素残留的危害及检测方法
牛奶中抗生素残留的危害及检测方法【摘要】牛奶是人们日常生活中常见的饮品，但牛奶中存在抗生素残留的问题严重影响着人体健康。
本文首先探讨了抗生素残留对人体健康的危害，特别是对婴幼儿造成的潜在威胁。
随后介绍了现有的检测技术和新兴的检测方法，以及监管规定和措施。
文章最后提出了加强对抗生素残留监管，促进牛奶生产安全和质量保障，保障消费者权益的重要性。
通过加强监管和推动技术进步，可以有效遏制牛奶中抗生素残留的问题，提升牛奶品质，保障消费者身体健康。
【关键词】牛奶、抗生素残留、危害、检测方法、健康、婴幼儿、监管、质量保障、消费者权益、生产安全1. 引言1.1 牛奶中抗生素残留的危害牛奶中抗生素残留是一个严重的问题，可能会对人体健康造成严重危害。
抗生素残留在牛奶中的主要原因是因为部分农民在养殖过程中滥用抗生素，导致抗生素残留在奶牛体内，进而通过奶牛的乳汁传播到牛奶中。
当消费者饮用这些含有抗生素残留的牛奶时，可能会对肝脏、肾脏等重要器官产生损害，甚至引发抗生素耐药性的问题。
据研究发现，长期摄入含有抗生素残留的牛奶还可能导致免疫系统功能下降，使得身体更容易被细菌、病毒等侵袭。
牛奶中抗生素残留的危害不容忽视，需要加强监管和检测措施来防止这一问题的发生。
1.2 牛奶中抗生素残留的检测方法牛奶中抗生素残留的检测方法是确保牛奶质量和消费者健康的重要环节。
目前，常用的检测方法主要包括生物传感技术、色谱-质谱联用技术、免疫测定技术等。
生物传感技术是一种快速、灵敏的检测方法，通过生物传感器检测牛奶中的抗生素残留。
这种方法具有操作简便、成本低廉等优点，但同时也存在灵敏度不高、检测范围有限的缺点。
色谱-质谱联用技术则是目前最常用的检测方法之一，其通过分离和识别样品中的化学成分，可以准确、快速地检测出牛奶中的抗生素残留。
这种方法在精确性和准确性方面表现突出，但需要专业人员操作，成本较高。
免疫测定技术是一种基于抗体与抗原特异性结合的检测方法，通过对牛奶样品中的抗生素进行特异性识别，可以较为准确地检测出抗生素残留。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
牛奶中抗生素残留的
主要来源是奶牛饲养中普
遍采用的药物性饲料添加
剂，其根源是工厂化、高
密度饲养方式使奶牛面临
发病和死亡的巨大压力。
抗生素不仅被用于动物疾
病的治疗，而且作为药物
性饲料添加剂，使用剂量
通常是治疗剂量的1／3或更低。这种长
期的亚治疗剂量抗生素的使用不仅诱导
素；残留； 检测技术
团
牛奶中抗生素残留是
个全球性问题，日益受到
世界各国政府的重视。世
界粮农组织(FAO )、世
界卫生组织(WHO )的
食品法对牛奶中抗生素最
高残留限量都有明确规
定，欧盟(EC )和美国
食品与药品管理局
(FDA )等也有具体严格
的规定，禁止抗生素残留
超出最高残留限量
维普资讯
方法相似。
1．1提取
牛奶中抗生素残留提取前通常用水、
磷酸盐缓冲液或稀酸溶液等稀释。一般
采取离心除去脂肪，液一液分配也常用
于脱脂。例如，乙腈或酸性水相提取液，
可以用正己烷、环己烷和异辛烷洗涤，以
除去脂类杂质。亦可将有机相提取液在
一20℃或一80 oC冷冻，使样液中的脂
将脂溶性杂质留在有机相中。如大环内
酯类和林可霉素类具有亲脂性，液一液
分配时，在碱性介质中本类抗生素被抑
制电离，可用二氯甲烷、乙酸乙酯、氯
仿来提取。再将提取液蒸发至干，用流
动相溶解后进样分析，或用酸性缓冲液
进行抽提。为达到更好的净化效果，有
时需要几步液一液分配，以消除干扰杂
质，但操作繁琐、费时，溶剂用量大。
环素类药物降解为脱水物，加热又可转
变为差向异构体。常用的弱酸性溶剂有
EDTA—MclIvaine缓冲液(pH值4．0)、
琥珀酸盐缓冲液、酸化乙腈等。另外，
三氯乙酸(pH值4．0)、柠檬酸盐缓冲
液、柠檬酸盐缓冲液／乙酸乙酯和盐酸／
甘氨酸缓冲液亦用于样品的提取和沉淀
蛋白。
1．2净化
粗提取液中的被分析物浓度相当
都会导致牛奶中抗生素残留超标。乳
汁中残留的抗生素可随食物链流入人
体，因而必须对乳制品中的抗生素残
留量进行检测。
1样品处理
牛奶的含水量约为87％ ，蛋白质
(酪蛋白)为3．3％ ，脂肪(甘油三酯)
为3．7％ ，糖类(乳糖)为4．7％ ， 以
及无机盐、维生素和酶类，是一种复
杂的非均相体系。乳脂球的主要成分
的蛋白质经沉淀除去，所得清液采用
C18柱分离测定，流动相为乙腈一磷酸
二氢钠，流速为0．5mL／mIn，梯度洗
团m8 6 5a
脱，紫外检测波长为355nm。当土霉
素、四环素和金霉素的质量浓度不大
于2．00 u g／mL时，其峰面积与浓度
之间存在良好线性关系。方法检测限：
土霉素为15．0 Ll g／kg，四环素为20．0
硅烷化试剂50℃衍生30min后测定。该
方法在添加浓度为0．1～1．0ng／mL时，
氯霉素回收率为71．2％ ～87．8％，批问
变异系数为14．3％ ～19．7％ ，检测限为
0．04 u g／L，定量限为0．10 u g／L，达到
了欧盟的规定要求，适合牛奶中氯霉素
残留分析。
2．2．3薄层色谱法(TLC )
康、正常产奶奶牛的鲜(生)乳样品
1 35份，对磺胺类、四环素类和氯霉
素类8种抗生素残留进行了检测，结果
抗生素残留阳性检出率为53．3％；含2
种以上抗生素残留阳性样品49份， 占
被检样品的36．3％。
在奶牛业生产中， 生产者不遵守
药物规定的休药期、使用违禁药物、
动物个体代谢差异以及不合理用药等
体系中组分、价态、化学性质相近的
元素和化合物进行分析。色谱分析是当
前残留检测的主流技术。
2．2．1液相色谱法(LC)
液相色谱法是迄今为止应用最为
广泛的兽药残留检测方法，特别适用于
高沸点、大分子、强极性和热稳定性差
的化合物的分析。蔡颖等建立了反相高
效液相色谱法测定乳制品中土霉素、四
环素和金霉素残留量的方法。乳制品中
固相萃取法具有操作简便、快速等
优点，常用的固相萃取有硅胶、氧化
铝、C18和环己基填料等。将正相和反
相吸附剂配伍使用，可起到互为补充的
。t v 圈质量安全
作用。由于四环素类不易从水相进入有
机相，可采用固相萃取柱净化。采用硅
胶基质的SPE柱时，四环素类易与固定
相的硅醇基发生吸附， 可通过加入
和磺胺嘧啶(sulfaquanidine)的筛选测
定。
2．1．2荧光光谱法
荧光光谱法适用于本身具有荧光基
团或经衍生化后具有荧光基团的抗生素
的检测。如在碱性含金属离子的溶液中，
四环素类药物表现出很强的荧光性，但
在酸性介质中或者是没有二价金属离子
存在的情况下，这种荧光性是很弱的。
Kazuo 1waki等使用磷酸二氢钠、EDTA、
此方法对四环素类药物的检测限是49～
190pg。此方法经改进以后，已成为日本
检测四环素类药物的标准方法。
2．2色谱法
色谱法是近代分析化学中发展最
快、应用最广的分离分析技术，在化
学、生物学等领域发挥着越来越重要的
作用，并正发展成为一门新兴学科。现
代色谱分析将分离和连续测定结合，也
可以浓缩、分离、测定联用，对复杂
菌酶和o(一乳清蛋白对具有氨基糖苷基
的潮霉素B发生可逆结合，可达到净
化、浓缩的目的。基质固相分散法
(MS P D)，即将样品与固相填料(如
C18填料)搅拌均匀，然后装入层析柱
中，以适当的溶剂洗脱分析物，可用于
牛奶中伊维菌素和苯丙咪唑类的净化。
2 分析方法
牛奶中抗生素的残留分析按照分离
康，尤其抗菌药物、毒性作用强的药
物要确定弃乳期或休药期(disca rd
time)。目前，全世界约有1／3以上的
奶牛患有各种类型的乳房炎，奶牛乳
房炎不仅影响产奶量(可降低产奶量
1 0％ ～1 5％ )、乳的品质和母牛过早
淘汰，最主要的危害是导致药物残留，
甚至危及人的健康。刘军等分批采集健
经很少应用。
2．2．4毛细管电泳法(CE)
毛细管电泳是近年发展较快的新技
术，与常用的HPLC相比，它不受运行
放射受体测定法(radiO recePtO r
assays o
2．1光谱法
2．1．1分光光度法
分光光度法主要应用于样品中个别
磺胺类药物的分析，最常用的方法为
重氮化一偶合反应分光光度法。无N4
药物，经水解，在酸性介
质中经重氮化后，可在碱性中与酚类
薄层色谱法一般使用硅胶板，用
混合溶剂作展开剂，晾干后用一定的显
色剂喷雾显色(显色可采用生物自显影
法和化学法)，用分光光度法或荧光法
检测。其检测限一般为50～100 u g／kg，
设备简单，可作为筛选方法。但对于牛
奶中抗生素残留，此法缺乏灵敏度和准
确度。TLC法样品处理繁琐，显色过程
复杂，方法重现性和灵敏度低，目前已
u g／kg，金霉素为18．0 u g／kg，回收
率为86．0％ ～1 02．3％。
2．2．2气相色谱法(GC)
兽药残留的气相色谱检测方法较
少，最典型的是氯霉素类药物残留，彭
莉等研究了牛奶中氯霉素残留的气相色
谱测定方法。用乙酸乙酯提取，蒸干，
4％ 氯化钠溶液溶解残渣，正己烷脱脂
后过C18固相萃取柱净化，甲醇洗脱，
EDTA等硅醇基阻断剂来解决，并在淋
洗液中加入草酸。免疫亲和柱具有专一
性高、净化效率高等优点，已用于牛奶
中潮霉素B(hyg romycin B)的净化。
免疫亲和柱使用专一性的抗体，价格较
昂贵。此外，免疫亲和柱具有选择性识
别和可逆结合其它分子的配体，亦可作
为亲和色谱的固定相。例如，固定化溶
力日工
牛奶中抗生素残留检测技术
侯亚莉重庆市饲料兽药监察所
朱奎丁双阳 中国农业大学动物医学院
[摘要]本文综述了牛奶中抗生
素残留的原因、检测方法及相
应对策。牛奶中抗生素残留的
检测方法主要包括光谱法、色
谱法及色谱一质谱联用技术、
免疫分析法、微生物学测定法
以及样品的前处理。
关键词： 牛奶； 抗生
为乳脂、类脂、酶、无机盐和水构成的
膜，使乳球能稳定地悬浮在奶中并保
护内部的乳脂免遭脂肪酶的水解，剧
烈振荡时球膜被破坏，脂肪球即相互
粘合析出。奶中还有大量的由酪蛋白
或脂蛋白构成的胶束体系，振荡、酸
化或加热时胶束结构解体，蛋白质沉
淀析出。奶样处理包括脱脂和脱蛋白
2步，采用的方法与组织样品处理的
氯化钙组成的缓冲液作为四环素的荧光
增强剂。在EDTA为25mmol／L，钙离子
为0．35mmol／L，pH值为6．50时，可达
到最高的灵敏度。此方法在3．75ng水平
精密度为1．12％ ～2．20％。四环素和土
霉素的线性范围为0．075～37．500ng，
金霉素的线性范围为0．225～37．500ng。