牛奶中抗生素残留及其检测
鲜乳中抗生素残留量测定原理(一)
鲜乳中抗生素残留量测定原理(一)鲜乳中抗生素残留量测定引言鲜乳是我们日常饮食中重要的一部分，然而，为了保护牛群健康和提高产量，农民普遍使用抗生素来预防和治疗乳牛疾病。
尽管抗生素在牛体内被分解和排除，但仍有可能在牛奶中残留一定量的抗生素。
因此，针对鲜乳中抗生素残留量的测定显得尤为重要。
测定原理鲜乳中抗生素残留的测定可以采用多种方法，其中一种常用的方法是高效液相色谱（HPLC）法。
高效液相色谱（HPLC）法HPLC法运用液相对样品进行分离和测定，通过测定样品中特定化合物的浓度来确定抗生素的残留量。
具体步骤如下：1.样品预处理：首先，将鲜乳样品与适量的溶剂混合，使抗生素的分子从样品中转移到溶剂中。
这个步骤通常包括提取和净化。
2.样品注射：将预处理后的样品注入高效液相色谱仪中。
3.色谱柱分离：样品中的化合物在色谱柱中以不同的速率通过，分离出混合物中的目标化合物。
某些特定的色谱柱可对抗生素具有选择性。
4.检测器检测：使用特定的检测器（如紫外检测器）对分离出的目标化合物进行测定。
抗生素在特定波长下会吸收特定的光，因此可以通过检测样品对光的吸收来测定目标化合物的浓度。
5.数据分析：根据样品中目标化合物在色谱柱上的峰面积或峰高，结合标准曲线，计算出样品中抗生素的浓度。
抗生素残留量的标准和限制不同国家和地区对鲜乳中抗生素残留量有着不同的标准和限制。
这些标准和限制是为了保护消费者的健康，避免抗生素过量对人体造成潜在的风险。
通常，标准的抗生素残留限制应保持在安全的水平，最大限度地减少对人体健康的危害。
结论通过高效液相色谱法，我们能够准确测定鲜乳中抗生素的残留量。
这对于监测和控制鲜乳质量具有重要意义，有助于保护消费者的健康。
随着科学技术的不断发展，相信将来会有更先进的测定方法出现，为鲜乳中抗生素残留量的测定提供更好的解决方案。
我们期待着未来鲜乳产业的健康发展。
目前存在的问题与挑战尽管高效液相色谱法已经成为鲜乳中抗生素残留量测定的常用方法，但仍然存在一些问题和挑战需要解决。
牛奶中抗生素残留的危害及检测方法
牛奶中抗生素残留的危害及检测方法牛奶中抗生素残留是指生产牛奶过程中使用的抗生素残留在牛奶中的现象。
这可能是因为奶牛在患有疾病时，农民会给奶牛注射抗生素来治疗疾病，或者是在奶牛饲养过程中，农民使用抗生素来预防疾病的发生。
尽管抗生素在奶牛饲养和产奶过程中的使用是为了保证牛奶的质量和奶牛的健康，但过多的抗生素残留可能会对人类健康产生潜在的危害。
牛奶中抗生素残留可能导致人类对抗生素的耐药性增加。
长期摄入含有抗生素残留的牛奶，人体会逐渐产生对这些抗生素的耐药性，从而减弱对治疗感染性疾病的效果。
当人类患病时，需要使用抗生素进行治疗，但由于耐药性的增加，常规剂量的抗生素可能无法起到应有的疗效，导致病情加重或难以治愈。
抗生素残留可能对消费牛奶的人群产生过敏反应。
某些抗生素成分对某些人来说是过敏原，摄入含有抗生素残留的牛奶后，可能会引发过敏反应，如皮肤瘙痒、呼吸困难、恶心等症状。
对于某些敏感人群来说，抗生素残留应尽量避免。
抗生素残留可能对人体的内分泌系统产生干扰。
抗生素残留中的一些化学物质可能对人体的内分泌系统产生干扰，导致内分泌紊乱，影响人体的正常发育和生理功能。
特别是对于婴儿和幼儿来说，抗生素残留可能对其生长发育产生不良影响。
为了保证牛奶的质量和人类的健康，对牛奶中的抗生素残留进行检测是非常重要的。
常用的检测方法包括免疫学方法、生物学方法和化学方法。
免疫学方法主要利用抗生素与特异性抗体之间的免疫反应进行检测，如酶联免疫吸附测定法（ELISA）。
生物学方法主要是利用生物学试剂对抗生素进行筛选或检测，如生物传感器技术和细菌抑制试验。
化学方法则是通过色谱法、质谱法等对抗生素进行定量分析。
牛奶中抗生素残留的危害包括耐药性增加、过敏反应和内分泌干扰，为了保护人类健康，对牛奶中的抗生素残留进行检测是必要的。
不仅要加强牛奶生产过程中对抗生素的使用和管理，还要建立健全的抗生素残留检测制度，确保牛奶的安全和质量。
超高效液相色谱-_串联质谱法检测牛奶中10_种四环素类药物残留
超高效液相色谱-串联质谱法检测牛奶中10种四环素类药物残留傅雅丽1，林 欢1，毛琼丽2，孙仲葆1*（1.黄石市食品药品检验检测中心，湖北黄石 435000；2.劲牌有限公司，湖北大冶 435100）摘 要：建立牛奶中10种四环素类兽药残留量的高效液相色谱-串联质谱法。
样品经过EDTA-Mcllvaine 缓冲液超声提取，经离心和过滤后，取10 mL上清液经固相萃取柱（Oasis PRiME HLB）净化。
通过流动相（0.1%甲酸溶液-乙腈）梯度洗脱，经超高效液相色谱用ACQUITY UPLC BEH柱分离，进入质谱检测。
结果表明，10种四环素类药物在2.5～80.0 ng·mL-1线性关系良好，R均达到0.995以上；检出限（S/N=3）均为0.5 μg·kg-1；3个添加水平下的平均回收率在68.0%～101.2%，相对标准偏差为1.9%～11.6%（n=6），该方法可以满足四环素类兽药残留的定量分析。
关键词：超高效液相-质谱；四环素类药物残留；牛奶Detection of Ten Tetracycline Residues in Milk by UPLC-MS/MSFU Yali1, LIN Huan1, MAO Qiongli2, SUN Zhongbao1*(1.Huangshi Institutes for Food and Drug Control, Huangshi 435000, China; 2.Jing Brand Co., Ltd., Daye 435100, China)Abstract: A method for determination of tetracycline residues in milk by UPLC-MS/MS was developed. The target antibiotics in samples were extracted ultrasonically with EDTA-Mcllvaine solution. 10 mL of the supernatant was purified by solid phase extraction column (Oasis PRiME HLB) after centrifugation and filtration. It was eluted by mobile phase (0.1% formic acid-acetonitrile) gradient, separated by ultra-high performance liquid chromatography with ACQUITY UPLC BEH column, and detected by mass spectrometry. The results indicate that between 2.5～80.0 ng·mL-1, ten tetracycline drugs have a good linear relationship, with R reaching above 0.995; The detection limit (S/N=3) is all 0.5 μg·kg-1; The average recovery rate at three levels of addition ranges from 68.0% to 101.2%, with a relative standard deviation of 1.9% to 11.6% (n=6). This method can meet the quantitative analysis of tetracycline veterinary drug residues.Keywords: UPLC-MS/MS; tetracyclines residues; milk四环素类抗生素（Tetracyclines，TCs）主要包含四环素、金霉素、土霉素、强力环素等，是一类由链霉菌产生的广谱抗菌药，使用范围非常广[1]。
牛奶中抗生素残留的几种常用检测方法
牛奶中抗生素残留的几种常用检测方法1.高效液相色谱法（HPLC）：高效液相色谱是一种基于溶剂流动的液相色谱方法，具有灵敏度高、分离能力强等特点。
在牛奶中检测抗生素残留时，首先将牛奶样品经过样品前处理，去除干扰物，然后使用适当的洗脱液将抗生素从固相萃取柱中洗脱出来，最后用高效液相色谱对抗生素进行分离和定量。
2.毛细管电泳法（CE）：毛细管电泳法是一种基于电场作用下溶液中离子迁移速度的分析方法。
该方法具有高分离能力、快速分析速度等特点。
在牛奶中检测抗生素残留时，首先将牛奶样品进行前处理，然后通过毛细管电泳仪器进行分析。
该方法不仅可以同时检测多种抗生素，而且样品准备过程相对简单。
3.气相色谱法（GC）：气相色谱法是一种基于色谱柱分离原理的分析方法，通过适当的蒸发和衍生反应可以将抗生素样品转换为易于气相色谱分析的衍生化物。
该方法具有高度选择性、高灵敏度等优点。
在牛奶中检测抗生素残留时，通常需要进行样品前处理。
首先将牛奶样品中的脂肪物质去除，然后使用适当的溶剂将抗生素从样品中提取出来，并通过气相色谱进行分离和定量分析。
4.酶联免疫吸附法（ELISA）：酶联免疫吸附法是一种基于抗原-抗体反应原理的免疫学方法。
在牛奶中检测抗生素残留时，首先利用适当的蛋白质工程技术制备特异性抗生素抗体，然后将牛奶样品中的抗生素与抗体结合，通过酶标记的二抗或亲和素染色法对特异性抗体进行检测。
该方法具有灵敏度高、操作简单等特点。
5.高分辨质谱法（HRMS）：高分辨质谱法是一种基于质荷比检测的方法，具有高灵敏度、高分辨率等优点。
在牛奶中检测抗生素残留时，首先将牛奶样品经过适当的前处理，然后通过质谱仪对抗生素进行定性和定量分析。
该方法不仅可以同时检测多种抗生素，而且可以准确测定其残留量。
总结起来，牛奶中抗生素残留的检测方法包括高效液相色谱法、毛细管电泳法、气相色谱法、酶联免疫吸附法和高分辨质谱法等。
这些方法具有不同的优点和适用范围，可以根据具体需求选择合适的方法进行检测。
鲜乳中抗生素残留检验
鲜乳中抗生素残留检验鲜乳中抗生素残留检验张志诚 060409123（常熟理工学院，苏州常熟，215500）摘要：利用TTC快速检测法对牛奶中抗生素检测结果进行比较分析，根据检测结果认为样品牛奶中不含青霉素G类抗生素。
关键词：牛奶；抗生素残留；TTC；青霉素GAbstract：The TTC method is used to detect the antibiotic residue in milk.According to testresults,there’s no Penicillin-G class antibiotic residue.Key words：milk; antibiotic residue; TTC method; Penicillin-G class antibiotic 育，引言随着人们对食品安全问题的逐步关TTC不能还原，试验液为无色状态。
根据待注．长期饮用抗生素残留超标乳制品可能引测牛奶的着色情况判定是否有抗菌素存在。
起的菌群失调、产生耐药性。
该问题已引起该法简便、快速，无需特殊设备，2h～3 h消费者和乳品生产企业的高度重视。
虽然我可见报告。
检测各种抗生素所用的TTC法试国《生鲜牛乳收购标准》中并未对抗生素残验的灵敏度(最低检出量)分别为：青霉素留作出要求．。
但绝大部分乳品生产企业在 0．004U／mL，链霉素0．5 U／mL，庆大霉原料乳收购环节都已开展抗生素残留检测素0．4 U／mL，卡那霉素5 U／mL。
工作。
本文利用TTC法(嗜热链球菌抑制法)对牛奶中抗生素残留进行检测。
2.材料和方法1.原理TTC法，即氯化三苯基四氮唑法(tripheye tetrazolium chloride)，是目前我国食品卫生标准中规定的检查牛乳中抗生素残留的检测方法 (GB5409．85)。
样品经80℃杀菌后加入嗜热链球菌菌液。
培养一段时间后加入TTC( 2,3,5-氯化三苯四氮唑），若样品中不含抗菌素或其浓度低于检测限，试验菌繁殖，TTC被还原，试验溶液变成红色。
牛奶中抗生素残留的危害及检测方法
牛奶中抗生素残留的危害及检测方法牛奶作为我们日常生活中重要的营养食品之一，具有丰富的营养成分，但是如果牛奶中存在抗生素残留，对人体健康会有一定的危害。
本文将介绍牛奶中抗生素残留的危害，以及常用的检测方法。
抗生素是一种广泛应用于畜牧业的消费品，用于预防和治疗动物疾病，提高动物生产性能。
如果使用不当或超量使用抗生素，就会导致抗生素在畜牧产品中的残留。
牛奶中抗生素残留的危害主要有以下几个方面：1. 长期摄入抗生素残留的牛奶会破坏人体内部的微生态平衡。
抗生素不仅可以杀死有害菌，还会杀死人体内有益的菌群。
长期摄入抗生素残留的牛奶会导致肠道菌群失衡，降低人体免疫力，容易感染疾病。
2. 抗生素残留会增加人体对抗生素的耐药性。
长期摄入含有抗生素的牛奶，会导致人体内的细菌逐渐产生对抗生素的抗性，使抗生素疗效降低，从而增加了治疗感染性疾病的难度。
3. 抗生素残留可能会引起过敏反应。
有些人对某些抗生素过敏，如果摄入了含有抗生素残留的牛奶，可能会出现过敏反应，如皮疹、呼吸困难等症状。
为了保护消费者的健康，牛奶中抗生素残留的检测至关重要。
目前，常用的牛奶中抗生素残留的检测方法主要有以下几种：1. 荧光免疫检测法：该方法利用特定抗体与抗原结合后的荧光现象进行检测。
只需要将样品添加到试剂盒中，通过特定的仪器测量荧光的强度，即可判断样品中是否存在抗生素残留。
2. 高效液相色谱法：该方法利用高效液相色谱仪对样品中的抗生素进行分离和检测。
首先将样品进行处理，然后通过高效液相色谱仪分离样品中的抗生素成分，最后根据峰面积或峰高进行测定。
3. 比色法：该方法通过比色试剂与样品中抗生素之间的化学反应，形成有色产物来测定抗生素残留的含量。
该方法简便快速，但只适用于测定特定抗生素。
牛奶中抗生素残留对人体健康存在一定的危害，因此牛奶及其制品中抗生素残留的检测非常重要。
通过选择合适的检测方法，可以及时发现并预防牛奶中抗生素残留的问题，保障消费者的健康。
牛奶中兽药残留检测项目
牛奶中的兽药残留检测是确保牛奶质量和安全的重要环节。
以下是一些常见的牛奶中兽药残留检测项目：
1. 抗生素残留检测：牛奶中可能残留各种抗生素，如青霉素、头孢菌素、磺胺类等。
这些残留可能来自治疗奶牛疾病的用药。
检测抗生素残留可以确保牛奶中不含有害的抗生素成分。
2. 激素残留检测：牛奶中可能残留一些激素，如生长激素、孕激素等。
这些残留可能来自奶牛的繁殖管理。
检测激素残留可以确保牛奶中不含有害的激素成分。
3. 驱虫药残留检测：牛奶中可能残留一些驱虫药物，如伊维菌素、多拉菌素等。
这些残留可能来自奶牛的驱虫治疗。
检测驱虫药残留可以确保牛奶中不含有害的驱虫药物成分。
4. 解热镇痛药残留检测：牛奶中可能残留一些解热镇痛药，如布洛芬、对乙酰氨基酚等。
这些残留可能来自奶牛的疾病治疗。
检测解热镇痛药残留可以确保牛奶中不含有害的解热镇痛药成分。
5. 镇静剂残留检测：牛奶中可能残留一些镇静剂，如苯巴比妥、地西泮等。
这些残留可能来自奶牛的镇静治疗。
检测镇静剂残留可以确保牛奶中不含有害的镇静剂成分。
以上是一些常见的牛奶中兽药残留检测项目，具体的检测项目可能因地区、法规和市场需求而有所不同。
牛奶生产企业和监管机构通常会进行这些检测，以确保牛奶的质量和安全。
消费者也可以选择购买经过检测合格的牛奶产品，以保障自身健康。
鲜奶的抗生素检验
实验三、鲜奶中抗菌素残留检验（TTC法）我国《食品卫生法》中规定，奶牛在应用抗菌素期间和停药后5天内的乳汁不得销售。
牛奶中抗菌素残留的最主要原因有两点，一是奶牛患某些疾病如乳房炎时大量应用抗菌素治疗；二是为保证群体饲养奶牛的健康，饲养人员在饲料中广泛添加抗菌素。
牛奶中抗菌素残留不仅会引起某些特殊人群的过敏反应；而且由于人们长期间接吸收低剂量的抗菌素，可引起病原菌对多种抗菌素产生耐药性。
因此，检测牛乳中的抗菌素残留已成为一项急需开展的常规检验工作。
(一)原理乳中有抗菌素存在，则检样中虽加入菌液培养物，但因细菌的繁殖受到抑制而使指示剂TTC不还原，不显色。
与此相反，如果没有抗菌素存在，则加入菌液即行增殖，TTC被还原而显红色。
也就是说检样呈乳的原色时为阳性，呈红色为阴性。
(二)试剂与器材1．水浴锅2．100℃温度计3．灭菌吸管(10ml、1ml)，灭菌试管(15mm×150mm)。
4．脱脂乳(经113℃灭菌20min)5．4% TTC (2,3,5-氯化三苯基四氮唑)水溶液,配制时先用95%乙醇溶解后，再用蒸馏水配成4% TTC浓度。
6．菌种：嗜热乳酸链球菌。
(三)操作步骤1．菌液制备将菌种移种脱脂乳，经36±1℃培养15h后，以灭菌脱脂乳1：1稀释待用。
2．取检样9ml，置无菌试管内，80℃水浴加热5min。
3．冷却至37℃以下，加菌液1ml后36±1℃水浴培养2h，加入TTC 0.3ml 指示剂，室温培养30min。
4．结果观察：乳中有抗菌素存在时，加入指示剂TTC后牛乳不显色，即抗菌素阳性；相反，如果没有抗菌素存在，则加入TTC后显红色，即抗菌素阴性。
抗菌素阳性者，再于水浴中培养30min第二次观察（见表26）。
表26 显色状态判断标准(GB 4789.27－94)显色状态判断未显色者阳性微红色者可疑桃红色～红色阴性。
牛奶中抗生素残留的危害及检测方法
牛奶中抗生素残留的危害及检测方法牛奶是人们日常生活中常见的饮品，它富含丰富的营养物质，对人体健康有益。
由于生产、存储和运输过程中的不恰当操作，牛奶中可能会残留抗生素。
这些抗生素残留对人体健康会造成危害，因此需要采取有效的检测方法来确保消费者的健康。
抗生素残留的危害主要有以下几个方面：1. 隐性抗生素耐药性：长期摄入牛奶中的抗生素残留物会增加人体耐药性，使得人体在遇到真正的细菌感染时抗生素的疗效大大降低。
这对人们的身体健康产生了极大的威胁。
2. 长期摄入对生殖系统的危害：一些抗生素如四环素类抗生素和氨苄西林等，长期摄入对男性的精子质量和数量有一定的负面影响，对女性则可能对卵巢功能产生一定的影响，可能导致不孕症。
3. 造成草食动物抗生素残留：奶牛等草食动物由于进食含有抗生素的饲料，也可能会导致其体内抗生素含量超过标准，从而使得牛奶中残留有抗生素。
为了监测牛奶中抗生素残留情况，需要使用一些专业的检测方法。
以下是几种常见的检测方法：1. 色谱质谱联用法：这是一种常用的分析方法，可以对牛奶样品中的抗生素残留进行定性和定量分析，具有灵敏度高、检测速度快的特点。
2. 酶联免疫吸附试验法（ELISA）：这是一种常用的抗原-抗体反应分析方法，通过测定牛奶样品中抗生素与抗体结合反应的光学信号变化，来确定样品中抗生素残留的含量。
3. 快速液相色谱法（HPLC）：这是一种高效的液相色谱分析方法，可以对抗生素残留进行准确测定，其优点在于分析时间短，准确性高。
4. 生物传感技术：利用生物传感器对牛奶中的抗生素进行监测，通过测量生物传感器的信号变化，来确定样品中的抗生素残留情况。
牛奶中的抗生素残留对人体的健康有一定的危害，因此需要采取有效的检测方法来确保消费者的健康。
色谱质谱联用法、ELISA、HPLC和生物传感技术是目前常用的检测方法，它们具有灵敏度高、检测速度快、准确性高等优点，有助于对牛奶中抗生素残留进行快速、准确的检测。
牛奶抗生素检测方法
牛奶抗生素检测方法
牛奶中抗生素残留的检测方法通常包括以下几种：
1. 高效液相色谱-质谱联用技术（HPLC-MS/MS）：这是目前最常用的方法之一，其原理是利用高效液相色谱和质谱联用技术，可以对牛奶中的抗生素进行快速、准确的检测和分析。
2. 酶联免疫吸附测定法（ELISA）：这种方法利用特定的抗体和牛奶中的抗生素结合，通过酶的作用来检测抗生素的残留量，具有高灵敏度和快速的特点。
3. 色谱-质谱联用技术（GC-MS/MS）：这种方法也是一种常用的检测方法，通过气相色谱和质谱联用技术可以对牛奶中的抗生素进行准确的检测和分析。
4. 生物传感技术：这种技术利用生物传感器对牛奶中的抗生素进行检测，具有快速、灵敏度高，操作简便等优点。
需要注意的是，以上方法都需要在实验室条件下进行，使用专业设备和技术进行检测，确保牛奶中的抗生素残留符合国家标准和食品安全要求。
鲜奶中四环素类药物残留检测方法建立
鲜奶中四环素类药物残留检测方法建立——高效液相色谱法近年来，由于在奶牛饲料和治疗中广泛应用到了四环素类抗生素(TCs)，从而引起牛奶中TCs 的残留。
长期食用含TCs的牛奶会危害人体健康，因此应严格控制畜禽肉中TCs的残留量。
本文在参考国内外检测方法的基础上，建立了用液相色谱法测定鲜奶中四环素类抗生素残留量最佳方法，填补了我单位这方面工作的技术空白，可为牛奶样品中四环素类药物及其代谢产物残留的监督检验和残留监控提供技术支持。
1．仪器与试药戴安公司高效液相色谱仪（带可变波长紫外检测器），漩涡混合器，超声波仪，离心机，氮吹仪。
土霉素(0TC)、四环素(TC)、金霉素(CTC)标准储备液配制：准确称取0TC、TC、CTC 固体标准品各0.01g，用0.1mol/L盐酸溶解，并用甲醇定容至10mL，此三种标准储备液含量为1mg/mL (4℃下可保存一周)。
混合标准溶液：取0TC、TC标准储备液各1mL，CTC标准储备液2mL，用甲醇定容至1O ml，此混合标准液中OTC、TC含量分别为100μg／ml（ppm），CTC含量为200μg／ml（ppm） (当天配制当天使用)。
Mcllvalane-EDTA缓冲溶液配制：分别称取1水柠檬酸11.8g,12水磷酸氢二钠27.6g，12水乙二胺四乙酸二钠37.2g，溶于1L水中，用盐酸调节PH至3.8。
0.01mol/L磷酸二氢钠溶液配制：称取1.56g磷酸二氢钠溶于100 mL水中，用30%硝酸调节PH 至2.5，经微孔滤膜过滤，超声备用。
2、色谱条件色谱柱：安捷伦ODS-C18,4.6×250mm，5μm；预柱：C18微柱；流动相:乙腈+0.01mol/L磷酸二氢钠溶液=27+73；流速：0.8 mL／min检测波长：355 nm；柱温：室温；进样量：2OμL。
3、实验步骤样品测定：取2mL鲜奶样品，加入50 mLMcllvalane-EDTA缓冲溶液，漩涡混合1min,低温超声10min，转移至50 mL聚丙烯离心管中，冷却至4℃，以5000r/min的速度离心10min（温度低于15℃），过滤，取5mL上清液过C18微柱（先用3mL甲醇，2mL水预洗），用1mL水洗涤小柱并挤干，最后用2mL甲醇洗脱，洗脱液经氮吹仪吹干后用甲醇+水（浓度比为30：70）溶解，过0.45μm 滤膜，取20μL进样，记录峰高，从工作曲线上查得含量。
牛奶中抗生素残留及其检测
一
１ 生物 检 测法 微 生物 检 测 法是 应 用较 广 泛 的 方 ．微 的抑 制 作 用，来 定性 或 定 量确 定 样 品 中抗 微 生物 药 物 残
其测 定原 理是 根 据抗 生 素对微 生 物 的生理 机 能 、 代谢 便、 速、 确、 快 准 敏感 性 高 的检 测 方 法 满 足 日趋 严 格 的 残 法 ， 牛奶 中抗 生素残 留的来 源及 其危 害
同时也 影 响牛奶 的品质 ， 造成 经济损 失 。
状 以及 残 留 的 检 测 方 法 。
甚 至有 的企 业 为 降低 成本 提高 效益 ，将 抗 生素 残 留不符 前 不 久对 市场 上 １ 知名 品牌 乳 制 品 的抽样 检 查 结果 ， ８个
摘 要 ： 文综述 牛奶 中抗 生素残 留 的来 源和 危 害 、 本 现 合 要求 的原料 奶加 工 成产 品 出售或 转 而做 成奶 粉 。根据
牛 奶 中抗 生 素 残 留 的危 害 主要 表 现 在 两 个 方 面 ， 程基 本相 同 ， ④ 而选 用 的菌种 不 同。 草 杆 菌纸片 法 检测 的 枯
为了确定阳性物质是否为青霉素（ 或 对人类健 康 的危 害 。 生 素残 留会 使人 被 动地接 受 ， 积 结果易出现假阳性 ， 抗 并
、
１ ． 中抗生 素残 留的来 源 牛奶
一
留， 如纸片法（Ｄ）Ｔ Ｃ法 、 Ｐ 、Ｆ 拭子法 （Ｔ Ｐ 等。采用传统 ＳＯ ） 的 微 生物 检 测 方法 ， 点是 ：１时 间 长 ； ） 色状 态 判 断 缺 （） （显 ２
通过 肉眼辨 别 ， 易产 生误 差 ， 对微 红色 者 无法 做 出 准确 判 前 趋 向研 究 更 为灵 敏 、 准确 、 简便 、 速 的 微生 物 检测 方 快
牛奶中抗生素残留的危害及检测方法
牛奶中抗生素残留的危害及检测方法牛奶是人们日常生活中经常饮用的一种营养丰富的饮品。
但是，由于现代畜牧业生产中广泛应用抗生素等药物，导致牛奶中存在大量的抗生素残留，对人体健康造成极大威胁。
本文将介绍牛奶中抗生素残留的危害及检测方法。
1.对人类健康的威胁牛奶中存在的抗生素残留，对人类健康造成严重影响。
长期饮用含有抗生素的牛奶会使人体内免疫力下降，易感染各种疾病，甚至引起过敏反应。
有些抗生素如四环素类药物还会使钙、镁等矿物质元素与牙齿、骨骼等发生结合，导致钙、镁元素的流失，引起牙病、骨质疏松等问题。
2.导致抗生素耐药性的增加现代畜牧业的生产过程中大量应用抗生素等化学药物，长期饮用含有抗生素的牛奶不仅可能对人们的健康构成威胁，同时也容易导致抗生素耐药性的增加。
当人们长期饮用含有抗生素的牛奶，会产生抗药性的细菌，这些细菌会迁徙到环境中，带来更大的风险。
1.色谱法色谱法是一种准确检测抗生素残留的方法。
该方法利用物质在不同液相和固相间的分配规律，实现分离和检测。
通过高效液相色谱、气相色谱，可以确切测定出抗生素在牛奶中的残留情况，针对特定抗生素的检测灵敏度很高。
2.酶联免疫法酶联免疫法是近年来常用的一种检测抗生素残留的方法。
该方法通过对特定的抗体和抗原进行特异性反应实现抗生素残留的检测。
首先将牛奶样品提取，然后加入抗生素特异性抗体，进行特异性结合，最后利用底物或荧光等信号来检测抗生素的含量。
该检测方法只需具备简单的设备和操作技巧，测定灵敏度较高，可同时检测多个抗生素。
三、结语抗生素残留严重危害了牛奶的品质和安全，对人们的健康带来了不可忽视的风险。
因此，必须采取有效的措施，加强对抗生素残留的监管和检测，确保牛奶的质量和安全，保障人们的健康。
高效液相色谱法测定牛奶中的四环素类抗生素残留
实验六 高效液相色谱法测定牛奶中的四环素类抗生素残留姓名： 班级：食品科学学号：一 目的要求1 通过实验强化对高效液相色谱法分离及定量分析原理的理解；2 直观了解流动相组成在高效液相色谱中对分析物保留时间和分离度的影响；3 直观了解高效液相色谱仪的结构；4 掌握利用外标法进行定量分析的方法。
二 实验原理在畜牧生产过程中，将一些抗菌素作为添加剂以较低浓度加入到饲料中，可使导致动物生产效率下降的支原体病等慢性传染病得到有效抑制，因而能够促进动物生长。
但是，这种做法常导致在动物性食品中的抗生素残留，人类食用后导致耐药菌群的产生，将会产生一系列严重后果。
四环素类抗生素就是被经常使用的一类抗生素，其中四环素（Tetracycline, TC ）、土霉素（Oxytetracycline, OTC ）和金霉素（Chlortetracycline, CTC ）就是该类抗生素中的三种，是提取自链霉菌属培养液的广谱抗生素，结构如下：我国和欧盟规定其在牛奶中的最大残留限量为0.1 mg/kg 。
三种抗生素在酸性条件下稳定，易与蛋白质发生强烈结合，且易与金属离子形成鳌合物。
在乙二胺四乙酸二钠（EDTA ）存在条件下，用草酸甲醇提取可获得较高回收率。
三种抗生素的共有结构均可在C 18柱上产生保留，OTC 和CTC 均与TC 仅差一个取代基，采用适当的流动相，以反相色谱方式可将三者有效分离。
三者具有共同的发色团，在225、268和360nm 均有吸收，短波吸收易受干扰，采用360nm 作为吸收检测波长可获得较好的同时测定结果。
采用外标法对样品中三种抗生素进行定量分析。
对标准溶液系列分别进行高效液相色谱分离，测定三者各自的峰面积，并以此回归三者的工作曲线，样品分离后通过测定三者各自峰面积，可在各自工作曲线上计算出浓度。
三 仪器与试剂1 仪器LC-20AT 型高效液相色谱仪，配备SPD-20A 型紫外检测器（日本Shimadzu 公司）；B5500S-MT 型超声清洗器（上海必能信超声有限公司）；L500台式离心机（长沙湘仪离心机仪器有限公司）；BS 124S 电子分析天平（北京赛多利斯科学仪器有限公司）。
牛奶中抗生素残留的危害及检测方法
牛奶中抗生素残留的危害及检测方法牛奶中抗生素残留是牛奶中存在的一种潜在的危害，抗生素残留的存在可能导致乳制品对人体健康造成潜在风险，因此现代养殖中的抗生素使用应该受到合理的限制与管理。
本文将介绍牛奶中抗生素残留的危害和检测方法。
抗生素残留是指动物在治疗过程中或者禁用期间再次投药导致药物残留在动物体内，被乳腺排出的未经处理的牛奶中。
抗生素残留在牛奶中可能会对人体健康造成潜在威胁。
1.对细菌的抗药性抗生素是一种杀菌或抑制菌生长的药物，常常用于治疗感染和疾病，但是长期的抗生素使用可能导致对某些菌株的抗药性增强，导致细菌对抗生素的耐受性增强2.人体健康风险抗生素残留在牛奶中被人体吸收，会对人体健康造成潜在风险，导致人体对抗生素的抗药性增强，甚至引发过敏反应，牛奶中抗生素残留对儿童和老年人尤为危险。
3.影响生产者信誉若检测出牛奶中存在较高水平的抗生素残留，不仅会影响消费者的信心，同时也会影响生产者的信誉与市场竞争力。
针对牛奶中抗生素残留的问题，现在常见的检测方法主要包括生物检测法和化学检测法两种。
1.生物检测法生物检测法是检测抗生素残留最常用的方法。
这种方法通过蛋白质结合技术将乳汁分离，将不同抗生素添加到不同份分离的液体中，观测不同的反应并确定抗生素是否存在。
但是生物检测需要对不同种类的抗生素配制不同的试验剂，生产成本较高且操作复杂。
2.化学检测法化学检测法包括高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱法（GC）、免疫吸附层析试剂盒法等。
这种方法主要是使用化学方法来检测抗生素浓度，但是化学方法有时可能会发生误判和假阳性结果的情况，需要依赖先进的仪器和专业的化学技术人员进行操作，具有一定的局限性。
三、结论在牛奶生产中，应该非常注重对牛奶中抗生素的残留情况进行检测和限制，以保证消费者的健康安全。
同时，生产者也需要加强对动物的健康管理，合理使用抗生素。
尤其是要在动物治疗结束后，检测一段时间，确认牛奶不含有任何抗生素残留，才能将其投入市场销售，从而提高消费者的信心和市场竞争力。
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牛奶中抗生素残留及其检测徐州市畜禽水产品检测中心摘要:抗生素在畜牧业中广泛应用，这造成了牛奶中大量残留抗生素。
本文论述了牛奶中残留抗生素的原因及其危害性，并列举了目前较为流行的牛奶中抗生素残留的检测方法，介绍了其检测原理。
为了了解徐州市牛奶中抗生素的残留情况，随机抽取样品40份，分别采用TTC法和纸片法对样品进行抗生素残留的检测，以农业部2001年发布的无公害食品牛奶中“抗生素不得检出”为判断标准。
调查结果显示徐州市牛奶中有部分牛奶存在抗生素的残留。
关键词：牛奶，抗生素残留，国标TTC，微生物法Assay on Residue of Antibiotics in MilkAbstracts: Antibiotics are used in stockbreeding abroad, and It is the reason why there is residue of antibiotics in milk. The reason and hazard of antibiotics residue are discussed in this paper. Several kinds of popular antibiotics screening test are listed and their principle is introduce simultaneously. In order to know the situation of antibiotics residue in milk from Xuzhou, we selected 40 samples at random. And detected the residue of antibiotics in milk by TTC and paper disc. Antibiotics should not be detected from milk according to the standard issued by the department of agriculture in 2001, but the test results showed that the residue of antibiotics in milk from Xuzhou is higher.Key words: milk, antibiotics residue, TTC, microbial test抗生素是治疗动物疾病的常用药物，并作为饲料成分被广泛使用。
但抗生素容易在动物体内及其产品中残留，经过食用后进入人体，给人类的健康造成危害。
目前人们对牛奶的消费量越来越大，牛奶中残留的抗生素会对饮用者的身体健康造成危害，也会对牛奶发酵过程的发酵剂产生抑制作用，从而使牛奶变质造成经济损失。
牛奶中抗生素残留的问题日益受到社会的重视。
一牛奶中抗生素残留情况的简介1抗生素的种类介绍抗生素类是主要的兽药添加剂和兽药残留物质，约占药物添加剂的60%，在世界及我国的农产品或食品进出口贸易中，常需检测的抗生素残留主要有以下六类：⑴内酰胺类：内酰胺类抗生素主要用于抗革兰氏阳性细菌感染，也能有效抑制抗革兰氏阴性细菌。
尽管仅有少数的这类化合物被用来治疗养殖动物疾病，然而这就有可能以残留物形成出现在食品中。
尤其是青霉素G因为价廉广谱，而被广泛应用。
因此对内酰胺类药物尤其是青霉素G残留的检测十分重要。
这类抗生素主要包括青霉素、头孢霉素、头孢噻呋、阿莫西林等。
⑵磺胺类：磺胺类药物作为预防和治疗用药广泛用于食用动物中。
磺胺类药物的副作用有过敏反应，尿结石和造血紊乱。
这类抗生素主要包括磺胺二甲嘧啶、磺胺二甲氧嘧啶、磺胺甲嘧啶、磺胺嘧唑等。
⑶四环素类：主要用于食用动物和海洋动物的养殖。
土霉素和金霉素被加入饲料以促进生长和预防疾病。
这类抗生素主要包括四环素、金霉素、土霉素、强力霉素等。
⑷氨基糖苷类：氨基糖苷类抗生素主要用于治疗动物的各种感染，并以亚剂量给药方式预防疾病和提高饲料利用率。
已经发现这类抗生素损害颅神经，引起失聪和损害肾脏，因此它们在食品中的残留引起关注。
这类抗生素主要包括庆大霉素、新霉素、链霉素、二氢链霉素等。
⑸大环内酯类：这类抗生素治疗革兰氏阳性菌及李斯特菌和支原体的某些菌株效果较好。
常用于治疗动物的感染，牛的呼吸道疾病及治疗乳腺炎。
这类抗生素主要包括红霉素、泰乐霉素、林可霉素等。
⑹氯霉素类：这类抗生素在治疗人的疾病时，会产生再生障碍性贫血、再生不良性贫血、粒性白血球减少、舌炎、口腔炎等副作用。
因此已经被人类所禁用。
农业部也于2002年将其列为禁用的18种兽药之一。
这类抗生素主要包括氯霉素、甲砜（氯）霉素、氟砜尼可等。
2牛奶中抗生素残留的来源随着畜牧业的发展，在奶牛的饲料中添加一定比例的抗生素已经十分普遍了，主要是预防疾病的发生，这也是牛奶中残留抗生素的主要来源。
其次，对乳牛用药不当也是造成牛奶中抗生素残留的又一来源。
特别是当使用乳房灌注法治疗奶牛的乳房炎时，容易造成牛奶中残留抗生素。
此外在高温季节，一些不法产奶户为了防止牛奶酸败，往往向牛奶中加入各种抗生素，这也是牛奶中抗生素残留的一个来源。
经过调查表明：重用经过抗生素治疗的乳牛用过的挤乳器给正常乳牛挤乳，也可使正常牛的牛乳中残留抗生素，由此可见，挤乳是牛奶中抗生素残留的另一个来源。
3牛奶中抗生素残留的危害虽然对食品中药物残留食用后是否会引起严重的后果仍有争议，但是目前可以肯定的是，饮用含抗生素残留的牛奶，会对人体造成伤害，尤其是那些长期饮用者。
牛奶中含有抗生素，对长期饮用者来说无疑是等于长期服用小剂量的抗生素，那些对抗生素过敏的人服用残留抗生素的牛奶后会发生过敏反应，如皮疹，过敏性休克等等，严重时甚至会危及生命。
即使是正常的饮用者也会破坏肠道内的菌群平衡，会使病菌，念珠菌大量增殖而导致局部或全身感染，并引起胃肠疾病和生理紊乱，使体内的某些致病菌产生耐药性，使该种抗生素失去对患者的治疗效果。
而且抗生素具有一定的毒性，长期服用含抗生素的牛奶会对服用者的肝肾功能造成一定的伤害，严重的还会引起致癌、致畸、甚至致突变。
从牛奶加工的角度看，抗生素残留会抑制发酵细菌的生长，影响牛奶的发酵。
使得牛奶的产量和质量大幅度降低。
而市场不允许出售含抗生素残留过量的牛奶又造成了牛奶生产者经济上的损失。
4牛奶中抗生素的残留现状我国过去对牛奶中抗生素残留的卫生指标没有明文规定，直到2001年10月农业部发布实施了《无公害食品生鲜牛乳行业标准》，对生鲜牛乳的卫生指标定为“抗生素不得检出”。
所以2001年以前我国市场上出售的生鲜牛奶抗生素残留情况还是比较严重的。
王晓光（1992年）测得长春市市售鲜牛奶中抗生素残留阳性率为3.3%。
葛华等（1996年）对西宁市市售各种乳制品进行了检测，检测结果抗生素残留阳性率为4.3%。
张利琴（1999年），测得西宁市市售鲜奶中抗生素残留阳性率为2%。
常建军（2000年）测得西宁市市售鲜奶中抗生素残留阳性率为5.3%。
从已知道的信息看，即使是在2001年农业部发布实施了《无公害食品生鲜牛乳行业标准》之后，我国也并没有严格执行这一标准。
马群飞等（2002年）对福建省生鲜牛乳抗生素残留进行测定，结果86件生鲜乳样中共检出抗生素残留阳性17件，检出率高达17.8%。
丁洁等（2004年）对南京市牛奶中的抗生素残留进行检测，结果南京市市售奶粉的抗生素残留阳性率为26.7%，消毒牛奶的抗生素残留阳性率为8.0%。
从以上信息可以看出我国牛奶中抗生素残留状况十分令人担心，有关部门应该加强对牛奶生产的管理，有效检测和监控牛奶中的抗生素等药物的残留，保证人们饮用牛奶的卫生和安全。
二检测方法简介根据WHO提供的数据，欧盟药典确定了食品中各种抗生素残留的最大限制(MRL)，MRL也就是欧盟药典认为食品中含有某种兽药残留的最大量。
为了使原料乳和乳制品中的抗生素符合MRL的要求，奶牛厂和监督部门都在寻找准确可行的抗生素检测方法。
目前牛奶中抗生素残留的检测方法有很多，比较常用的是微生物法，如纸片法﹑TTC法等。
此外还有其他理化方法，主要包括:高效液相色谱法、色谱/质谱连用法、免疫法等等。
纸片法，即PD（paper disc）法。
根据所用菌种的不同，常用的纸片法可以分为枯草杆菌纸片法和嗜热脂肪杆菌纸片法。
这两种方法主要是用来检测牛奶中的β-内酰胺类抗生素。
它们的操作过程基本相同只是所选的菌种不同。
枯草杆菌纸片法的结果易出现假阳性，为了确定阳性物质是否是青霉素，要对加热后的乳样用青霉素酶处理，以灭活乳样中的青霉素，然后再进行检测。
而嗜热脂肪杆菌纸片法不仅可以检测奶样中的β-内酰胺类抗生素，并且可以确定样品中是否还存在其他抑菌物质。
因此，实践中嗜热脂肪杆菌纸片法在奶样检测中的应用比枯草杆菌纸片法更为广泛。
国标TTC法，TTC即氯化三苯基四氮唑(tripheye tetrazolium chloride)，这是目前我国规定的检查牛乳中抗生素残留的检测方法(GB5409-85)。
在牛乳中加入菌种，一般是嗜热链球菌，经过培养后加入TTC指示剂，观察颜色变化，从而确定牛奶中的抗生素残留情况。
如果牛奶中含有抗生素残留则培养后菌种并不增殖，此时加入的TTC指示剂不发生还原显色状态；如果没有抗生素的残留则培养后菌种可以增殖，此时加入TTC指示剂则TTC被还原成红色。
高效液相色谱法，高效液相色谱法是目前广泛应用的一种理化检测方法，它引用了气相色谱理论，在技术上采用了高压泵，高效固定相和高灵敏度检测器，实现了分离速度快，效率高和操作自动化。
高效液相色谱法测定牛奶中的药物残留都要经历样品处理（包括样品的提取，脱蛋白，离心，层析柱净化，衍生化等步骤），残留药物的分离和残留药物的检测。
色谱/质谱联用法，色谱/质谱联用法由于实现了高效层析分离和检测联机，可以用电脑控制层析条件和数据处理。
它的特异性，灵敏度和重复性都很好，并且可以一次同时完成同一样本中多种药物及其代谢物检测，对分析牛奶中青霉素类抗生素，质谱作为一种专一检测器已经获得了广泛的应用。
免役法，目前药物残留免役分析技术主要分为两大类：一是相对独立的分析方法，即免役测定法如RIA，ELISA，固相免役传感器等。
二是将免役分析技术与常规理化分析技术联用，如利用免役分析的高选择性作为理化测定中的净化手段，典型的方式为免役亲和色谱。
牛奶中的抗生素残留是涉及人类健康的公共卫生问题，应该重视和加强检测工作，并努力研究发展一些简单，快速的多残留分析技术，实现分析过程的自动化或智能化，以提高分析效率，降低成本，保证消费者的健康。
本次实验是在徐州市兽医卫生监督所完成的，主要采用的是国标TTC法。