代料块栽香菇的培养基配制的技术方法

代料块栽香菇的培养基配制的技术方法

香菇体菌种的培育，一般有孢子分离法、组织分离法和蒸水分离法三种。孢子分离法是有性繁殖，菌种生活力强，但变异率高，一般难掌握，选育新品种时可采用此法。组织分离法及菇木分离法系无性繁殖，种性比较稳定、而且简便易行，生产上应用较多。

<1>培养基配制的原理

培养基是香菇菌丝体生长发育的基质、可以提供香菇菌丝体生长发育所必需的水分、碳源、氮源、各种元素和生长因素，使菌丝体能正常、健壮地生长。

a.水分：香菇菌丝中含有大量的水分。水分不仅是菌丝细胞原生质的主要成分，而且菌丝的一切生理活动均需在有水的情况下进行。因此，在配制各级培养基时，均要加入一定量的水分。

b.碳源：单糖(葡萄糖)、双糖(蔗糖、麦芽糖)、多糖(淀粉)都是香菇菌丝能够利用的有机碳源。一般来说，碳素是菌丝细胞中有机物的基本元素，并且也是能量的来源。

c.氮源：氮素是构成菌丝细胞中的蛋白质和核酸的主要元素，而蛋白质和核酸又是细胞质和细胞核的重要成分，生命活动中起着重要的生理作用。有机氮(氨基酸、蛋白质、尿素)和氨态氮(硫酸铵)都是菌丝细胞氮的来源。

d.无机盐类：菌丝所需的无机盐类数量很少，但在其生命活动中都是不可缺少的。在配制培养基时，要加入少量的磷、钾、硫、钙、镁等。培养基中加入磷酸二氢钾、硫酸镁、硫酸钙等，可满足对上述元素的要求。

e.生长因素：能调节香菇菌丝代谢活动的微量有机物，称之为生长因素。一般用作碳源的天然成分，如马铃薯、麦芽汁、麸皮、米糠等都含有丰富的生长因素，无需另加。维生素B1可促进香菇菌丝生长，制斜面培养基时可加入少量。

f.凝固剂：常用的凝固剂为琼脂(洋菜)，是由石花菜提制而成。培养基中各种营养物质的比例对香菇菌丝生长的影响很大。要根据香菇菌丝生长对各种营养物质的需要按比例配制。要注意对培养基pH值的调节。

<2>培养基配制的方法

香菇菌种分为母种、原种和栽培种三种。

a.母种培养基的制作配方：

马铃薯200克;葡萄糖20克;琼脂18～20克;水1000毫升(pH值5.5～6)

该配方适合香菇及多种食用菌分离和培育母种之用。如果作保藏菌种用，在配方中可再添加磷酸二氢钾2克，硫酸镁0.5克，维生素B110毫克。

制法：选择质量好的马铃薯洗净去皮(已发芽的要挖去芽及周围一小块)，将其切成薄片，称取200克。放入铝锅中，加入清水1000毫升，加热煮沸，维持30分钟，用四层纱布过滤，取其汁液，然后将琼脂放在水中浸泡后加入马铃薯汁液中，继续加热至全部溶化(加热过程中要用玻璃棒不断搅拌，以防溢出和焦底)，最后加入葡萄糖，并且热水补足1000毫升，测定并调节pH值(用5%的稀盐酸或5%的氢氧化钠溶液)到所需范围内。配制好的培养基要趁热分装入试管，装入量约为试管长度的1/5，装管时要注意勿使培基沾附试管口。分装完毕塞上棉塞，棉塞要求松紧适度，塞入长度约为棉塞总长度的2/3左右，使之既有利通气又能防止杂菌侵入。

塞好棉塞后，把试管直放在小铁丝筐中，盖上油纸或牛皮纸，用绳扎好，或用绳子把试管扎成几捆，棉塞部分用牛皮纸包扎好，竖直放入高压灭菌锅内，进行灭菌，在1.5公斤/厘米2压力下维持30分钟。

灭菌后，待培养基温度下降至60℃时，再撰成斜面，以防冷凝水积聚过多。摆斜面时，先在桌上放一木棒，将试管逐支斜放，使斜面长度不超过试管总长度的 1/2，冷却凝固后，即成斜面培养基。

灭菌后的斜面培养基，要进行无菌测定，可从中取出2～3支，放入30℃左右的恒温箱中培养3天，培养后表面如仍光滑，无杂菌出现，就可供接种。多次制作后，已有把握，可不做无菌测定试验。

高压灭菌操作步骤和注意事项：

(Ⅰ)在灭菌锅内加水至水位标记高度，首次使用需先进行一次试验，水过少易烧干造成事故，水过多棉塞易受潮。

(Ⅱ)放火锅内的材料，不宜太挤，否则会影响蒸汽的流通和灭菌效果。体积大的瓶子，要分层放置或延长灭菌的时间。

(Ⅲ)盖上锅盖，同时均匀拧紧锅盖上的对角螺旋，勿使漏气，关闭气阀。

(Ⅳ)点火、逐渐升温。水沸后，待锅内压力升至0.5 公斤/厘米2时，逐渐开大放气阀，放净锅内冷空气至压力降至"0"，再关闭放气阀。如不放尽冷空气，即使加大至所需压力，而温度达不到应有的程度，也不能达到彻底灭菌的要求。

(V)继续DO%至所需压力时，开始记灭菌时间，调节火力大小，始终维持所需压力至一定时间。

(Ⅵ)停火。让压力自然回降至"0"时，打开放气阀。

(Ⅶ)打开锅盖，用木块垫在盖下，让蒸汽渐渐溢出，借余热烘干棉塞。

(Ⅷ)取出已灭菌的材料，并清除剩水，以防锅底锈蚀。

b.原种培养基的制作

配方甲：

锯木屑78%;米糠(或麸皮)20%;蔗糖1%;硫酸钙(石膏粉)1%;水适量;

配方乙：

棉籽壳40%;锯木屑40%;麸皮或米糠20%;蔗糖1%;石膏粉1%;水适量

制法：木屑以阔叶树的为好，棉籽壳(木屑)均要求干燥无霉烂、无杂质。米糠或麸皮要求新鲜、无虫。将木屑(或棉籽壳)与麸皮、石膏粉拌匀，蔗糖溶于水，将其加直至用手紧握一把培养料时，指缝间有水渗出而不下滴为宜。然后将其装入菌种瓶中，边装边用捣木适度压实，直装至瓶颈处为止，压平表面，再在培养基中央钻一洞直达瓶底。最后用清水洗净瓶的外壁及瓶颈上部内壁处，上棉塞。用牛皮纸包住棉塞及瓶口部分，用绳扎紧。放入高压锅内，在1.5 公斤/厘米2

的压力下维持1.5小时。如采用土法灭菌，当蒸笼内达100℃后再维持6～8小时。

c.栽培种培养基的制作

栽培种培养基的配方及制作方法同源种。当采用其他用料栽培香菇时，可将上述两种配方中的锯末屑用料代替，其余成分不变，构成多种代用料配方。

<3>菌种的分离和培育

香菇菌种制作分母种、原种、栽培种三个逐步扩大的阶段。实践证明，香菇菌种的好坏优劣，不仅直接影响到香菇的产量和质量，而且关系到香菇栽培的成败。因此，必须认真做好菌种分离和培育工作。

a.母种的分离和培育

母种是菌种生产的关键，直接关系到原种和栽培种的质量，也是香菇丰产的保证。因此，必须认真做好种菇的选择和分离培育工作。

种菇要选择符合该品种特性的个体：要在出菇早、出菇均匀、产量高的菌块上或菇木上挑选，选出朵形端正、盖肉肥厚、柄短粗、无虫害的子实体做种菇。

组织分离法：选择符合种菇要求的菇蕾。用75%酒精揩拭表面后，用小刀把菇蕾纵剖为二，在菌盖与菌精交界处，切取0.5立方厘米的一小块菌肉，移放在斜面培养基中央。如用已开伞的香菇做分离材料，则选菌盖与菌柄交界的菌肉。

接种后，将试管放在22℃～24℃恒温箱中培养2～3天后，组织块上长出白色的菌丝，并向培养基上蔓延生长。当菌丝在斜面上长满后，再移到新的斜面培养基上，培育成母种。

b.原种和栽培种的培育

把母种接到木屑(或棉籽壳)、米糠培养基上进行培育，用以繁殖栽培种用的菌种称为原种。已培育好的母种用接种针挑取蚕豆大一小块放入原种培养基上，经22℃～24℃下培育35～45天，菌丝体长满全瓶，即成原种。母支每种约可接6～8瓶原种。

原种直接到相同培养基中扩大培养;用于压块用种为栽培种。从原种里掏出菌种移入灭过菌的瓶子中，培养温度22℃～24℃，培育时间约2个月以上。每瓶原种可接栽培种60～80瓶。