临床常见细菌的鉴定程序和思路-NXPOWERLITE
1-细菌学的临床应用(NXPowerLite) PPT课件
医院中约80%患者使用抗生素，做细菌检验的是这些患者 之中的5-10%
90%以上的患者凭经验用药，可能的原因： 报告发出时间太慢，阳性率太低，不能满足临床要求？ 凭经验用药的疗效好于按细菌报告用药的效果？ 利益的趋使？懒…习惯性？ 患者没钱？医院对合理使用抗生素没有具体规定？
这是个复杂，深奥的问题，目前尚不十分明了
例一：严重肺炎患者，高热、血象增高，如此 危重的病情，如使用价格昂贵的抗生素，患者 能够接受 推荐一种诊断治疗的方法：取脓痰直接涂片革 兰染色镜检，若见如图所示现象，则可确定为 典型的肺炎链球菌引起的大叶性肺炎，用青霉 素治疗为首选方案，治愈的可靠性在90%以上。 当患者及家属得知仅需一百多元即可治愈如此 严重的病情，会从心里感激并佩服医院医生的 医术高明
头孢菌素使用的现状
头孢菌素抗菌作用显著，对肝肾功能的 副作用相对较小,因而被广泛应用。
不应使用头孢菌素的几种情况： 1.产超广谱β～内酰胺酶的阴性杆菌 2.耐甲氧西林的葡萄球菌 3.对头孢无临床疗效的肠球菌 4.真菌。
常见的抗感染治疗模式：严重急性尿路感染患者， 通常的治疗手段是三代头孢菌素静脉滴注，疗程 4-7天，费用约500元。 推荐一种诊断治疗尿路感染的方法：取患者中段 尿5ml离心沉淀，沉渣涂片革兰染色镜检，若见如 图所示现象，立即取沉渣直接做药物敏感实验， 贴上有效、方便、经济的药物纸片，35°C培养46小时，即可报告如呋喃妥因、环丙沙星、复方磺 胺等抗生素的初步药敏结果。
一20岁小姑娘做近视眼矫正术。术后第2天眼痛， 并有脓性分泌物；立即使用头孢曲松3天；治疗无 效。症状加剧。 设想后果：角膜炎症无法控制——失明，只有做 角膜移植， ——到哪寻找角膜？ ——近期能否 找到？如此下去等待的是一场必输的医疗官司。
临床常见细菌的手工鉴定和结果判断
临床常见细菌的手工鉴定和结果判断一．细菌的鉴定步骤1、鉴定的概念：将一个未知的菌株按其生物学特性，经过与所有已知菌种进行比较后划归到一个已知菌种的分析过程。
2、对待鉴定的菌种要明确已经获得纯化培养或者该菌种在血平板上生长良好，有单个菌落可以进行生化试验。
（我们这里一般都是预先纯化培养）3、对待鉴定的菌种进行革兰染色，观察形态（G+c，G–b，G–c，G+b），做触酶，氧化酶实验，然后按科，属，种逐步鉴定。
要注意对待鉴定的菌种选择一个合适的鉴定系统，临床常见细菌的快速简单的鉴定系统我们都已经设计好，参考鉴定质控单。
4、按鉴定质控单的要求填写好病人XX，年龄，性别；标本类型，标本编号，送检日期等。
另外最重要的是要填写好该菌种的菌落形态以与有无溶血。
5、复习革兰染色，触酶实验，氧化酶实验。
⑴．革兰染色：是细菌鉴定过程中最常用最基本最重要的染色方法。
首先要将待鉴定的细菌涂片，固定（目的：杀死细菌，改变⑵．触酶实验(H2O2实验)：a.原理：具有过氧化氢酶的细菌能催化双氧水生成水和初生态氧，继而形成氧分子出现气泡。
b.方法：一般用玻片法，就是挑取菌落在洁净的玻片上涂开，滴加3%过氧化氢数滴，观察结果（立即有大量气泡产生者为阳性，不产生气泡者为阴性）。
要注意不能在血平板上进行实验，这样易出现假阳性；另外陈旧菌落要是进行实验可能会导致假阴性结果；还有不能在接种针或环上进行实验。
c.阳性对照用金黄色葡萄球菌，阴性对照用链球菌；试剂要避光置4℃冰箱保存。
d.应用：绝大多数含细胞色素的需氧和兼性厌氧细菌触酶实验阳性，链球菌属阴性。
临床常见细菌鉴定实验中我们一般用于区别葡萄球菌属（+），微球菌属（+），链球菌属（－）。
⑶．氧化酶实验（Kovac实验）：a. 原理：氧化酶又称细胞色素酶，是细胞色素呼吸酶系统的最终呼吸酶。
酶并不直接与试剂（1%盐酸四甲基对苯二胺）起反应，而是首先使细胞色素c氧化，然后氧化型细胞色素c使对苯二胺氧化，出现深兰色反应。
简述一般细菌鉴定流程
简述一般细菌鉴定流程下载温馨提示：该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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细菌鉴定的基本思路(全)
细菌鉴定一、标本的处理：1、先按标准操作规程（SOP）对标本进行接种（一般种普通血平板和选择性麦康凯平板；真菌-沙保弱；链球菌-巧克力平板，CO2温箱；结核菌-罗氏;粪-SS）。
一般细菌置于35℃培养24h；真菌置于30℃培养2、后将标本涂片，进行革兰染色，判断是革兰阴性或阳性，杆状，球状，短杆，球杆及弧状。
二、根据菌落形态，颜色，光滑与否，边缘，大小，是否有溶血环等初步判断所属菌属。
三、生化鉴定（最主要的依据）定向实验(最重要两实验)API微生物鉴定系统生理生化鉴定：根据微生物对各种生理条件（温度、pH、氧气、渗透压）、生化指标（唯一碳氮源、抗生素、酶、盐碱性）代谢反应进行分析，并将结果转化成软件可以识别的数据，进行聚类分析，与已知的参比菌株数据库进行比较，最终对未知菌进行鉴定的一种技术。
生物梅里埃API试剂类型•API 20E革兰氏阴性杆菌鉴定•API 20NE非发酵菌鉴定•API STAPH葡萄球菌及微球菌常用5种•API STREP链球菌鉴定•API CORYNE棒状杆菌•API 20C AUX酵母菌•API 20A厌氧菌•API LISTERIA李斯特菌•API CAMPY弯曲菌属•API CH芽胞杆菌/乳酸杆菌三、药敏试验（辅助鉴定及指导临床用药）最常用的纸片扩散法即K-B法。
原理：该法是将含有定量抗菌药物的滤纸片贴在已接种了测试菌的琼脂表面上，纸片中的药物在琼脂中扩散，随着扩散距离的增加，抗菌药物的浓度呈对数减少，从而在纸片的周围形成浓度梯度。
同时，纸片周围抑菌浓度范围内的菌株不能生长，二抑菌范围外的菌株则可以生长，从而在纸片的周围形成透明的抑菌圈，不同的抑菌药物的抑菌圈直径因受药物在琼脂中扩散速度的影响而可能不同，抑菌圈的大小可以反映测试菌对药物的敏感程度，并与该药物对测试菌的MIC呈负相关。
结果分为敏感S、耐药R及中介I。
利用某些菌对某些药物天然耐药进而辅助鉴定结果正确与否,如嗜麦芽窄食单胞菌对亚胺培南(碳青霉烯类)天然耐药。
细菌鉴定流程
细菌鉴定流程
细菌鉴定流程一般分为以下几个步骤：
1. 样品收集：根据需要鉴定的细菌类型和来源，选择适当的样品收集方式。
样品可以是细菌培养物、体液、食物等。
2. 培养：将样品接种到适当的培养基上进行培养。
根据细菌的生长条件需求，选择适当的培养基，如富含寡营养物的普通培养基、特殊选择性培养基等。
3. 盱衡生长：根据细菌类型和特性，观察细菌的生长状况，如菌落形状、颜色、大小等。
4. 形态学鉴定：使用显微镜观察细菌的形态学特征，包括细菌的形状（球形、杆状、螺旋形等）、大小、菌落或细胞的结构、芽生等。
5. 生化鉴定：进行一系列生化试验以确定细菌的生化特性，如氧需求、发酵产物、酶反应、代谢产物等。
6. 免疫学鉴定：通过免疫学方法，如血清学试验、酶联免疫吸附试验等，检测细菌对特定抗体的反应性，以确定细菌的免疫学特性。
7. 分子生物学鉴定：应用分子生物学技术，如PCR（聚合酶链反应）、序列分析
等，检测细菌的DNA或RNA序列，以确定细菌的基因特征和亲缘关系。
8. 数据分析和鉴定：根据样品收集、培养、观察、试验等结果，综合分析得到的数据，确定细菌的鉴定结果。
可以参考细菌鉴定手册或数据库，进行对照确认。
这些步骤都需要进行严格的实验操作和分析，以确保细菌鉴定的准确性和可靠性。
不同类型的细菌鉴定流程可能会有所不同，具体流程可以根据实际需要进行调整和优化。
细菌鉴定的方法和步骤
细菌鉴定的方法和步骤
细菌鉴定是通过一系列方法和步骤来确定细菌菌种的过程。
以下是常用的细菌鉴定方法和步骤：
1. 收集样品：从目标环境或感染部位收集细菌样品，如血液、尿液、唾液、食物等，以便后续实验。
2. 培养：将细菌样品接种到适当的培养基上，提供足够的营养物质和环境来促进细菌的生长。
3. 纯化：将单个细菌菌落分离出来，并通过连续的传代培养使其得到纯化，以避免不同细菌种类的混杂。
4. 形态观察：观察细菌在固体培养基上的形态特征，如菌落的形状、颜色、大小等，以及在显微镜下的细胞形态，如形状、大小、结构等。
5. 染色：将细菌样品进行染色，如革兰氏染色、抗酸染色等，以便观察不同细菌的染色特征。
6. 生理生化试验：进行一系列生理生化试验，如代谢产物的产生、酶活性、氧需求等，以确定细菌的代谢特征。
7. 耐受性检测：测试细菌对温度、pH值、氧气和抗生素等环境因素的耐受性，以进一步确认鉴定结果。
8. 分子生物学分析：利用分子生物学技术，如PCR、序列分析等，通过对细菌的基因组或特定基因进行分析，来确定细菌的物种。
9. 鉴定结果：根据以上步骤的结果和参考文献，将细菌归类到已知的菌属或菌种中，最终得出细菌的鉴定结果。
需要注意的是，细菌鉴定是一个复杂的过程，通常需要准备鉴别试剂和设备，以及具备相关实验操作的技术和经验。
生物技术猪病防治 沙门氏菌病(NXPowerLite)
3.传播途径 （ 1 ）垂直传播 经带菌卵或污染蛋 壳传播。 （ 2 ）水平传播 经消化道、呼吸道、 交配、人工授精、眼结膜感染。 4. 影响因素 气温骤变、空气潮湿、 饲养密度大、营养不良、饲料质量差及 喂量不足、换气不良等均可诱发本病。 还可与其他疾病混合感染。
临床症状
1.带菌卵 在孵化过程中出现死胚， 或不能出壳的弱胚，或出壳后不久因败血 症突然死亡。 2.雏鸡 潜伏期4-5天，有两种类型： 最急性型 往往无症状突然死亡，若 肺部病变严重时就表现呼吸困难和气喘。
卵泡变形
卵黄性腹膜炎
母鸡感染，卵泡变色、 变形，并有腹膜炎
鸡白痢
卵巢变性
出血性肺炎，并有黄白色结节
沙门氏菌 病死鸡肠管内充满黄白色稀粪
诊断
1.现场诊断 通过流行病学、临床症 状、病理变化作出初步诊断。 2.实验室诊断 包括细菌学检查（涂 片镜检、分离培养等）和血清学试验 （凝集试验）。 3.鉴别诊断 （ 1 ）与副伤寒和鸡伤寒区别 主要通 过细菌的分离鉴定。
病理变化
1.雏鸡 最急性型 病变不明显，有 时可看到肝脏肿胀或条纹状出 血；卵黄囊变化不大。 急性型 （1）肝脏、脾脏肿大、充血， 胆囊充满深绿色的胆汁；肺充 血、出血。
（ 2 ）实质器官（如肝、脾、心肌、 盲肠、鸡胃等）中出现了灰白色的 坏死灶或坏死结节。 （ 3 ）急性卡他性肠炎，盲肠膨大， 内含有干酪样的白色凝块。 （ 4 ）卵黄吸收不良，卵黄变成油 样或干酪样。 （5）个别鸡关节肿大。
仔猪副伤寒（慢性） （结肠、回肠黏膜上弥漫散在麦麸样坏死性纤维素性炎症）
肠壁增厚、粘膜溃疡
盲肠上有麸皮样坏死
胆囊黏膜坏死
扁 桃 体 坏 死
诊 断
1.现场诊断 慢性病例根据特征症状、病史 和病变不难诊断；急性病例不易诊断。 2.实验室诊断 细菌分离培养。 3.鉴别诊断 (1)急性型与猪瘟、猪丹毒、猪肺疫、水肿病 鉴别。 (2) 慢性型与消化道线虫 ( 如蛔虫病：咳嗽、 拉稀；鞭虫病：顽固性腹泻；粪便中可检出虫 卵)和慢性猪瘟(大肠粘膜扣状肿)区别。
颅内感染抗生素选择 (NXPowerLite)
国际社会应加强合作，共同推进新型抗生素的研究和开发，应对全 球性的抗生素耐药性问题。
确保新型抗生素的可及性
政府应制定相关政策，确保新型抗生素的可及性和公平分配，使所 有患者都能够获得高质量的医疗服务。
07
结论
颅内感染抗生素选择的重要性和挑战
重要性
颅内感染是一种严重的疾病，抗生素 选择是治疗的关键。正确的抗生素选 择可以有效控制感染，降低并发症和 死亡率。
抗生素穿透血脑屏障的能力是选择抗 生素的重要因素之一，不同抗生素对 血脑屏障的穿透能力不同。
临床医生需要根据患者的病情、病原 体类型和药敏试验结果等因素综合考 虑，选择最合适的抗生素。
02
颅内感染的病因和分类
病因
外伤
手术
邻近部位感染
颅脑外伤导致头皮、颅 骨、硬脑膜和脑组织受
损，进而引发感染。
开颅手术或脑室引流等 手术操作增加感染风险。
挑战
颅内感染的抗生素选择面临诸多挑战 ，包括病菌耐药性的增加、药物穿透 脑组织的难度以及缺乏特异性靶向的 治疗方法。
需要进一步研究和改进的领域
耐药性研究
深入研究病菌的耐药机制，发 现新的抗生素作用靶点，以提
高现有抗生素的有效性。
药物递送系统
开发新型药物递送系统，提高 抗生素在脑组织中的浓度，降 低副作用。
联合治疗策略
研究联合治疗策略，结合抗生 素与其他治疗方法，以提高颅 内感染的治疗效果。
临床试验
开展大规模的临床试验，验证 新型抗生素和治疗方法在颅内
感染中的疗效和安全性。
THANKS
03
氨基糖苷类抗生素
这类抗生素主要通过与核糖体30S亚单位结合，影响细菌蛋白质合成过
临床上鉴定病原菌的流程
临床上鉴定病原菌的流程
临床上鉴定病原菌的流程一般包括以下步骤：
1. 临床表现与病史：医生首先对患者的临床表现和病史进行详细的了解和分析，包括症状、体征和患病时间等。
2. 采集临床样本：医生根据患者的症状选择合适的临床样本进行采集，常见的样本包括血液、尿液、呼吸道分泌物、组织活检等。
3. 样本处理和预处理：采集到的样本需要进行处理和预处理，以去除干扰物质，并提高病原菌的浓度和纯度。
常见的预处理方法包括离心、滤液、稀释等。
4. 细菌培养：将处理后的样本接种到含有合适营养物的培养基上进行培养，以创造繁殖菌的适宜环境。
不同病原菌有不同的培养条件和时间，常见的培养方法包括血平板法、McConkey平板法等。
5. 菌落鉴定：根据菌落的外形、颜色、形态等特征进行初步鉴定，通常利用肉眼观察菌落的特征。
6. 生化试验：对初步鉴定的结果进行进一步确认，采用生化试剂进行特异性生化反应，通过观察反应结果来确定菌株的身份。
7. 抗生素敏感性试验：对鉴定出的病原菌株进行抗生素敏感性试验，确定其对不同抗生素的敏感性，以指导临床用药。
8. 分子生物学检测：对部分病原菌，尤其是难以培养或培养时间较长的病原菌，可以采用分子生物学方法进行检测，如PCR、DNA测序等。
9. 结果报告与解读：将实验结果整理并进行报告与解读，为临床医生提供指导性的诊疗意见。
需要注意的是，临床鉴定病原菌的流程会根据临床病情、样本类型、病原菌特性等因素有所差异，上述流程仅为一般步骤的参考。
细菌鉴定的方法和步骤
细菌鉴定的方法和步骤细菌鉴定是确定或确认细菌属种的过程，它是微生物学中非常重要的一部分，有助于了解细菌的特征、生态习性和其对人类的影响。
下面，我将介绍细菌鉴定的一般方法和步骤。
一、准备实验室条件和材料在进行细菌鉴定之前，需要准备好实验室条件和所需的材料。
实验室应具备洁净、无菌环境，预防细菌污染。
所需的材料包括培养基、培养皿、平板、显微镜、油浸物镜、背景颜色固定剂、染色试剂、耗材等。
同时，实验人员需要佩戴实验手套和口罩，保证操作的无菌性。
二、选择适当的培养基不同的细菌在不同的培养基上生长出不同的菌落，因此选择适当的培养基是细菌鉴定的关键。
常用的培养基有营养琼脂培养基、血琼脂培养基、马铃薯蔗糖琼脂培养基等。
根据需要鉴定的菌株特性和需求，选择适当的培养基。
三、样品采集和拮抗在开始鉴定之前，需要采集样品并进行扩培。
样品来源可以是病人的体液、环境中的土壤、水源、食品等。
样品采集最好是在无菌环境中进行，避免外来的细菌干扰结果。
四、制备纯培养物为了获得纯种细菌，需要将样品进行拮抗并分离。
拮抗是指将细菌分离成单独的菌落，并在新的培养基上获得单个菌种的纯培养物。
常用的方法有稀释再悬浮平板法、分离斑点法、筛选法等。
通过将菌落接种到培养基上，经过单菌的选择和培养，最终得到纯种菌株。
五、观察菌落特征观察菌落形态是进行细菌鉴定的重要步骤之一。
菌落特征包括菌落大小、形状、质地、边缘、颜色等。
通常使用肉眼或显微镜对菌落进行观察，并记录下菌落的特征。
六、进行染色处理染色是细菌鉴定中常用的方法之一。
根据细菌细胞壁的性质，通常使用革兰氏染色、苏木精-伊红染色等常规方法进行染色处理。
通过染色，可以初步了解细菌的形态、结构和染色特性。
七、观察细胞的形态和结构将已染色的细菌样本放置在显微镜下，使用油浸物镜进行镜片调焦。
观察细菌细胞的形态特征，如形状（球形、棒状、螺旋形等）、大小、连杆性等。
此外，还可以观察细菌细胞的结构、附属结构（如鞭毛、菌毛等）以及内部结构（如胞浆、核质等）。
临床细菌培养鉴定流程及报告.介绍共56页
谢谢！
36、自己的鞋子，自己知道紧在哪里。——西班牙
37、我们唯一不会改正的缺点是软弱。——拉罗什福科
xiexie! 38、我这个人走得很慢，但是我从不后退。——亚伯拉罕·林肯
39、勿问成功的秘诀为何，且尽全力做你应该做的事吧。——美华纳
40、学而不思则罔，思而不学则殆。——孔子
Hale Waihona Puke 临床细菌培养鉴定流程及报告.介绍
11、获得的成功越大，就越令人高兴 。野心 是使人 勤奋的 原因， 节制使 人枯萎 。 12、不问收获，只问耕耘。如同种树 ，先有 根茎， 再有枝 叶，尔 后花实 ，好好 劳动， 不要想 太多， 那样只 会使人 胆孝懒 惰，因 为不实 践，甚 至不接 触社会 ，难道 你是野 人。(名 言网) 13、不怕，不悔(虽然只有四个字，但 常看常 新。 14、我在心里默默地为每一个人祝福 。我爱 自己， 我用清 洁与节 制来珍 惜我的 身体， 我用智 慧和知 识充实 我的头 脑。 15、这世上的一切都借希望而完成。 农夫不 会播下 一粒玉 米，如 果他不 曾希望 它长成 种籽； 单身汉 不会娶 妻，如 果他不 曾希望 有小孩 ；商人 或手艺 人不会 工作， 如果他 不曾希 望因此 而有收 益。-- 马钉路 德。
临床细菌培养鉴定流程及报告 PPT
⑵报告方式 由于检验结果报告的时效性,下呼吸道标本 细菌学检验结果分为初步和最终结果报告。 ▲ 初步报告:当标本涂片革兰氏染色细胞学 和细菌学镜检发现有临床诊断意义的结果时,应 及时发出描述性的初步报告。 ▲最终报告:镜检结果与分离培养结果相一致 时,最终报告规范的细菌名称和药敏试验结果。 若分离培养结果与镜检结果不一致时,仅报告分 离鉴定结果,不做药敏试验。若分离培养未检出 优势菌,可报“未培养出病原菌”。
⒋结果分析及报告
⑴结果分析 痰及下呼吸道分泌物标本易受到 定植在上呼吸道的正常菌群污染。当从送检标 本中分离出多种细菌时,确定那一种分离细菌是 引起下呼吸道感染的病原菌,这对临床诊断与治 疗至关重要。当在同一培养基上分离出1种以 上的病原菌(复合菌)时,要结合患者的临床症状, 涂片染色镜检情况及患者近期细菌分离培养结 果等,综合判断所分离的多种细菌中那一种细菌 估计为致病菌,通常多为优势菌。当分离的优势 菌与涂片染色镜检结果一致时,要做药敏试验。 若分离培养结果与涂片染色镜检结果不一致时, 可不进行药敏试验,以免误导,仅报告分离鉴定 结果,由临床大夫定夺是否重试。
(二)痰(即下呼吸道感染标本)
临床通常将正常人喉以上部位称为上呼吸道, 上呼吸道定植有大量的正常菌群,而气管以下包 括气管、支气管和肺泡称下呼吸道,通常无菌。 下呼吸道感染包括急性气管～支气管炎、慢性 支气管炎急性发作,支气管扩张继发感染及肺实 质感染(肺炎、肺脓肿)等。病原体有细菌、病 毒、衣原体、支原体、真菌、立克次氏体和原 虫等。
(2)报告方式
初步报告:在分离出细菌后,进行革兰氏染 色,作出初步报告。
最终报告:有意义的阳性结果报告,应报告 菌落计数、细菌种名及药敏结果。
无意义的阳性结果报告,报告菌落数、 革兰氏染色形态特征,并注明是纯培养或 是混合菌生长。
微生物细菌鉴定流程
微生物细菌鉴定流程近年来，微生物细菌在医学、环境科学、食品安全等领域中的重要性日益凸显。
而准确、快速地鉴定微生物细菌的种类，对于疾病的防治、环境污染的监测以及食品质量的保障都具有重要意义。
下面将以人类的视角，为你详细介绍微生物细菌鉴定的流程。
第一步：样本采集鉴定微生物细菌的第一步是采集样本。
样本的选择和采集方法直接关系到鉴定的准确性和可行性。
常见的样本包括血液、尿液、粪便、食品、土壤等。
采集样本时要注意避免污染，使用无菌工具进行采集，并妥善保存以保持样本的完整性。
第二步：样本处理在样本采集后，需要进行处理以提取微生物细菌。
处理方法根据不同的样本类型而有所不同。
例如，对于食品样本，可以进行均质化和稀释，以增加微生物的浓度。
对于血液样本，可以进行离心和沉淀，以获得血浆或血清。
第三步：培养和分离经过样本处理后，接下来需要将微生物细菌培养和分离。
培养是指将样本中的微生物细菌在适宜的培养基上进行生长。
培养基的选择要根据不同的细菌种类和特性来确定。
分离是指将不同的细菌分开，以便后续的鉴定。
分离可以通过涂布法、滴定法、稀释法等多种方法进行。
第四步：形态学观察在分离细菌后，需要进行形态学观察。
形态学观察包括观察细菌的形状、大小、颜色等特征。
这些特征能够提供一些线索，帮助鉴定细菌的种类。
第五步：生理生化测试除了形态学观察外，生理生化测试也是鉴定微生物细菌的重要手段。
生理生化测试通过对细菌的代谢、酶活性、生长特性等进行检测，来推测细菌的种类。
常见的生理生化测试包括氧需求性测试、碳源利用测试、酶活性测试等。
第六步：分子生物学鉴定在形态学观察和生理生化测试的基础上，可以进行分子生物学鉴定。
分子生物学鉴定通过分析微生物细菌的DNA或RNA序列，来确定其种类。
常见的分子生物学鉴定方法包括PCR、测序等。
第七步：鉴定结果分析最后一步是对鉴定结果进行分析。
根据形态学观察、生理生化测试和分子生物学鉴定的结果，确定微生物细菌的种类。
细菌病的实验室诊断流程
细菌病的实验室诊断流程
1、标本收集
实验室诊断流程的第一步是收集所要检测的标本，如尿样、血样、痰样或细胞等。
收集的标本必须是新鲜的，并必须完好无损。
2、分离或培养病原菌
获取的标本中可能含有多种病原菌，因此，需要进行培养及分离的工作来获取纯种的病原菌。
从医学的角度来讲，分离或培养出的病原菌必须是纯种的，以便于进一步的诊断。
3、鉴定病原菌
获取纯种的病原菌后，检测人员需要对病原菌进行鉴定。
检测病原菌通常采用生化组分分析、菌落形态分析、系统发育分析、菌属认定或DNA测序等技术，确定诊断标本中疑似病原菌的种属、生物学特性，以及它们的抗药性基因组布局等。
4、鉴定病原菌的抗药性
实验室鉴定的病原菌抗药性有助于医生选择更有效的抗药药物。
常用
的抗药性检测方法有ANTIBIOTIC DISCS试验和电泳膜扩散试验。
这些检测方法对不同的病原菌菌株，针对不同的抗生素，采取不同的实验条件，预测目标病原菌对一定抗生素的敏感性及耐受性。
5、细菌致病性诊断
在检测病原菌的抗药性后，为了更加准确地诊断病原菌的致病性，还需要采取更多的检测措施。
通常采用血清学检测或抗原免疫检测的方法，对标本中的抗原物质进行测定。
6、诊断报告
在进行完上述所有流程之后，检测人员最后会将检测结果写入报告，包括受检者的个人信息，标本收集、分离及鉴定流程，诊断结果及抗药性等内容，以便医生根据报告判断需要提供何种治疗方法，制定出更为有效和安全的治疗方案。
NICU院内感染控制-(NXPowerLite)
contents
目录
• NICU院内感染现状 • NICU院内感染控制的重要性 • NICU院内感染控制策略 • NICU院内感染控制管理 • NICU院内感染控制案例分析 • NICU院内感染控制未来展望
01 NICU院内感染现状
感染发生情况
01
新技术应用
人工智能
利用AI技术进行数据分析和预测， 提高感染控制的预警和响应速度。
物联网技术
实现医疗设备、环境监测等领域的 智能化管理，实时监测和预防感染 风险。
3D打印技术
用于定制化医疗器械和防护设备的 制作，提高医疗操作的安全性和舒 适性。
抗菌药物研发
新型抗菌药物
研发更高效、低毒性的抗菌药物， 以应对耐药菌株的挑战。
使用手消毒剂。
提供充足的手卫生设施，包括 洗手液、干手纸巾和手消毒剂
等。
抗菌药物合理使用
抗菌药物是治疗NICU院内感染的重 要手段之一。
在使用抗菌药物前，应进行细菌培养 和药敏试验，以确定敏感药物。
应根据患者的具体病情和医生的建议， 合理选用抗菌药物。
避免滥用抗菌药物，以免产生耐药菌 株和不良反应。
案例二：呼吸机相关性肺炎预防与控制
详细描述
总结词：规范使用呼吸机、 定期更换呼吸机管道、加强
呼吸道护理
01
02
03
医护人员需经过专业培训， 规范使用呼吸机，减少呼吸
机相关感染的风险。
定期更换呼吸机管道，避免 管道细菌滋生和传播。
04
05
加强呼吸道护理，定期为患 儿吸痰、清洁口腔，保持呼
吸道通畅。
案例三：导管相关性血流感染预防与控制
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特殊细菌耐药的特点
MRS的耐药特点：严格按照NCCLS的执行标准来 筛选和确证葡萄球菌是否为MRS。要能区分 MRSCoP和MRSCoN确证试验中的差别。了解 MRS的耐药机理是什么？它的耐药特点什么？对 其结果的评价；Rx
ESBLs的耐药特点：严格按照NCCLS的执行标准 来筛选和确证肠杆菌科细菌是否为ESBLs。掌握 ESBLs的筛选和鉴定试验，了解其耐药机理，掌 握其耐药特性。对其结果作出临床评价；Rx：对 青霉素类、头胞类及氨曲南耐药，即使体外试验 为敏感 。
② 沙门氏菌和志贺氏菌 警告：不应报告 选用1、2代头孢及氨基甙类，因为体外活性 表现有活性，但临床无效。
③ 利福平不能单独用于化疗。否则易产生 耐药性；
注意菌落形态和染色特点
做OPT试验等，注意PRP的问题
β溶血等链球菌
①考虑A群乙型链球菌，作BAC试验或Latex分群 特别考虑标本来源…… ②考虑B群乙型链球菌，做CAMP试验或Latex分群 特别考虑标本来源…… ③根据染色特点、菌落在血平板上的溶血特点和菌
落大小等考虑——肠球菌 进一步作胆汁七叶苷、6.5%NaCL 要求掌握肠球菌的耐药性特点 ④其他特征不明显的链球菌就用板条或Latex分群作
对培养出细菌的评价
1. 考虑是否有污染； 2. 结合标本的评价，评价细菌的临床价值； 3. 结合标本的采集部位； 4. 无菌部位标本所生长细菌，要排除污染的可
能性； G+球菌
葡萄球菌
链球菌
观察溶血情况
观察菌落的大小、特点
Gram染色的形态特点
筛选出有意义的细菌。对待与体表相通部位 的标本，排除常居菌和正常菌群的“背景噪 音”干扰，以便有效地进行下一步实验。对 于这一点，要求我们对致病菌、潜在病原菌、 正常菌群和条件致病菌以及正常菌群地分布 及临床价值要熟练掌握。没意义的细菌得出 的结果没有意义，会对临床产生误导作用。 浪费试验室的人力物力。有害而无利。
肠球菌（E.C）的耐药特性
注意VRE的检测，Van 6ug/ml,>1菌落=耐药， 通过MIC测定和动力试验产生的色素来区别 获得性耐药（VanA,VanB）和那些对van中 等水平耐药的E.C
握E.C的耐药特性以及充分了解氨基甙类高 耐筛选的意义。对其结果作出正确的临床评 价；Rx
① 了解AmpC酶的耐药特性；Rx
临床常见细菌的鉴定程序和思路
包括药敏实验
没有好的标本就没有好的检验结果。我们的工作都 是从接收到标本开始，那么保证标本质量为其首要。 所以对于标本的处理要严格按照标本处理手册来进 行。包括标本的质量审定（是否合格），接种合适 的培养基，选择适当的培养条件（如温度，气体环 境等等）。对于手册上要求作Gram染色的标本要 作染色，以对标本作出一个初步的评价。对于镜下
作卫星试验，鉴定是否为流感嗜血杆菌；掌 握药敏试验方法和步骤。
测定Beta内酰胺酶的方法和临床意义。
充分了解新版NCCLS 药敏试验执行标准， 将其贯彻于试验工作之中。
其中包含了抗生素药敏试验的纸片法和稀释 法执行标准。其中对细菌特殊耐药性作了明 确解释并对其耐药性的确认试验也做出了执 行标准。
见有较多脓细胞的标本要尽量找出细菌，除了 Gram染色还可考虑吖啶橙、抗酸和Jimsa等染色。 对于这类细胞多的标本作Gram染色时最好用传统
的Gram染液 充分考虑标本的潜在病原菌，对照标本接种手册， 选择适合的培养基接种，选择适当的气体环境放入
孵箱内培养。
细菌的分析鉴定
观察培养基中生长的菌落特点：
血平板的溶血特点
触酶阳性
触酶（-）、胆汁七叶苷、6.5%NaCL
按照葡萄球菌的进行进一步鉴定
学会使用胶乳试剂快速检测金黄色葡萄球菌
和MRSA
要求掌握葡萄球菌凝固酶的试管法测定实验
α溶血
掌握MRSA、MRSCoN及其筛选和确认试验 首先考虑肺炎链球菌
掌握MRS的耐药机理和耐药性特点
ESBLs又分为他啶型和噻肟型，在我国主要为噻肟型。 现已在世界各地引起多次医院感染爆发流行。
产ESBLs代表菌株为大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯氏菌。
PRP的耐药特点：按照NCCLS的执行标准来筛 选和确证肺炎链球菌是否为PRP。
PRP的耐药机理。
PRP的耐药特性。对其结果作出临床评价。
Rx：对于青霉素中介或耐药的菌株，不推荐做氨 苄西林，氨苄西林/舒巴坦，头胞克罗，头胞他美， 头胞克肟，头胞唑肟，氯碳头胞和美罗培南的药 敏试验，因为目前尚无可靠的判定标准。应该告 诉医生PRP对这些药的敏感率较低。…
菌落的大小，是否光滑，菌落边缘是否 整齐，菌落的颜色——如无色似水滴状、 白色、灰色、黄色、以及色泽的深浅， 是否透光及透光的强弱，菌落产生光泽， 等等；菌落产生的溶血环的情况——α溶 血、β溶血、水溶性溶血、脂溶性溶血和 其他的溶血特点；细菌产生的气味—— 如铜绿假单胞菌的“生姜”味，酵母菌 的酵母味，芳香黄杆菌的水果糖芳香味 等等；
超广谱ß -内酰胺酶
(Estended-spectrum ß -latamases,ESBLs)
ESBLs是质粒介导的，为TEM-1，TEM-2和SHV-1的 突变酶，包括TEM-3到TEM-26，SHV-2SHV-6共近 60种，与TEM-1，TEM-2和SHV-1相比，仅有1到4 个氨基酸的不同，由在分子质粒编码的，质粒分子 量大约在23Kbs到100Kbs之间，能够被酶抑制剂所 抑制，属于A类酶(分子生物学分类)。可以通过结合 试验转给敏感菌，
系统试验鉴定
+ + --
肠杆菌科
板条系统鉴定
G-杆菌
路标：O-F试验 OX
-- -- ±
非发酵菌 板条系统鉴定
+++
弧菌科
板条系统鉴定
慨然法
G-杆菌的特殊耐药性
ESBLs AmpC酶 嗜麦芽
嗜血杆菌（苛养菌）
分离培养基：流感嗜血杆菌分离平板（巧克 力）；菌落形态——无色或浅灰色似水滴； G-细小杆菌或初代分离时为G-细长杆菌。