尿碘比色法定量测试剂盒产品说明书中文版

尿碘比色法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）

主要用途

尿碘比色法定量检测试剂是一种旨在通过过硫酸铵热消解预处理后，运用砷铈催化还原方法，测定样品中无色还原产物，即采用比色法测算尿碘含量的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良桑德尔-科尔索夫（Sandell–Kolthoff）方法、成功实验证明的。适用于各种尿液样品尿碘含量的检测。产品即到即用，操作简捷，性能稳定，检测敏感。

技术背景

碘在甲状腺生理学方面起着主要作用，碘化合物是正常脊锥动物生长和发育所必需的。尿碘（urinary iodine）检测成为饮食碘摄入监测的最常用的工具，从而评价人群碘缺乏症（iodine deficiency disorders；IDD）的状况。尿碘的检测方法主要运用桑德尔-科尔索夫反应（Sandell–Kolthoff reaction），即首先进行过硫酸铵（ammonium persulfate）热消解预处理后，在亚砷酸（arsenious acid）还原剂的存在下，通过碘催化黄色的硫酸铈铵（ceric ammonium sulfate）还原为无色的三价铈（cerous form）的反应，在分光光度仪（405nm 波长）下出现吸收峰值的降低变化，来定量测定样品中尿碘的含量。

产品内容

消解液（Reagent A）5毫升

还原液（Reagent B）5毫升

显色液（Reagent C）3毫升

标准液（Reagent D）500微升

稀释液（Reagent E）500微升

产品说明书1份

保存方式

保存在—20℃冰箱里；试剂具有腐蚀性，注意操作安全；有效保证6月

用户自备

1.5毫升离心管：用于标准样品配制和样品保存的容器

（微型）台式离心机：用于样品制备

干式恒温仪：用于反应孵育

比色皿或96孔板：用于比色的容器

分光光度仪或酶标仪：用于比色分析

实验步骤

一、标准样品配制

1．准备好待测样品，置于冰槽里备用

2．设定好分光光度仪：波长405nm，并置零

3．准备好5个1.5毫升离心管，标记为1至5号管

4．分别加入50微升稀释液（Reagent E）到2至5号管

5．移取100微升标准液（Reagent D）到1号管，混匀

6．小心移取50微升1号管标准液（Reagent D）到2号管，混匀

7．小心移取50微升2号管稀释的标准液（Reagent D）到3号管，混匀

8．小心移取50微升3号管稀释的标准液（Reagent D）到4号管，混匀

9．将1至5号管放进冰槽里备用，避免光照；标准管浓度见下表

管号稀释液（Reagent E）标准液（Reagent D）标准尿碘浓度

1 ――100微升300微克/升

2 50微升50微升1号管150微克/升

3 50微升50微升2号管75微克/升

4 50微升50微升3号管37.5微克/升

5 50微升0 0

二、样品测定

1．分别移取50微升新鲜的待测样品或上述配制的标准液（Reagent D）到1.5毫升离心管

2．分别加入100微升消解液（Reagent A），混匀

3．放进100℃干式恒温仪孵育60分钟

4．置于室温下冷却15分钟，或直至室温均衡

5．分别移取50微升上述预处理样品到新的比色皿或96孔板

6．分别加入100微升还原液（Reagent B），混匀

7．分别加入50微升显色液（Reagent C），混匀

8．放进25℃恒温培养箱孵育30分钟，避免光照

9．即刻放进分光光度仪或酶标仪检测（405nm波长）：获得吸光读数

10．构建标准曲线：纵座标（Y轴）为吸光读数；横座标（X轴）为标准尿碘浓度（微克/升）

11．根据标准曲线获得样品对应尿碘浓度

12．计算样品实际尿碘浓度（微克/升）

【根据标准曲线获得样品对应尿碘浓度（微克/升）X样品稀释倍数】

注意事项

1．本产品为50次操作，包括标准测定

2．操作时，须戴手套

3．建议收集新鲜尿液；保存在-70℃冰箱里

4．试剂具有腐蚀性，注意操作安全

5．样品中避免使用硫氰酸钾（potassium thiocyanate；大于等于0.1毫摩尔/升）、抗坏血酸（ascorbic acid；

大于等于4 毫摩尔/升）、硫酸亚铁铵（ferrous ammonium sulfate；大于等于16毫摩尔/升）等，否则干扰检测

6．本产品测定理想范围在0至300微克/升（0至2.36微摩尔/升）

7．孵育时，避免光照

8．如果待测样品浓度过高或过低，可以调整样品浓度；注意在计算实际浓度时，不要忘记乘上样品稀释倍数

9．吸光读数越低，碘含量越高

10．国际上规定：尿碘水平在0至0.15微摩尔/升（0至19微克/升）为严重缺乏；0.16至0.38微摩尔/升（20至49微克/升）为中度缺乏；0.40至0.78微摩尔/升（50至99微克/升）为轻度缺乏；0.79至1.56微摩尔/升（100至199微克/升）为正常；1.57至2.36微摩尔/升（200至299微克/升）为偏高；大于2.37微摩尔/升（300微克/升）为过高

11．本公司提供系列医学生化检测试剂产品

质量标准

1．本产品经鉴定性能稳定

2．本产品经鉴定检测敏感