血浆凝血酶原时间测定

【摘要】目的总结血浆凝血酶原时间测定的操作和临床意义，为临床治疗提供依据。方法6研究近年来我科进行的血浆凝血酶原时间测定报告。结论ｐｔ测定中操作及报告方式必须规范化，才能正确指导临床用药。【关键词】血浆凝血酶原时间测定血浆凝血酶原时间测定(prothrombintime，pt)，是在体外模拟外源性凝血途径的全部条件，测定血浆凝固所需的时间，用以反映外源凝血途径有关因子是否异常，是筛检凝血功能最基本，最常用的试验之一。 1．原理在抗凝血浆中，加入足够量的组织凝血活酶(组织因子，tf)和适量的钙离子，即可满足外源凝血的全部条件。从加入钙离子到血浆凝固所需要的时间即称为血浆凝血酶原时间。pt的长短反映了血浆中凝血酶原、纤维蛋白原和因子v、ⅶ、x的水平。 2．试剂 (1)抗凝剂：109mmol／l枸橼酸钠液(相当于含2个分子结晶水的枸橼酸钠32g／l)。 (2)凝血活酶试剂：市售商品，应标有isi、批号及有效期。冻干者应按说明书指定的溶液复溶。 (3)氯化钙(cacl2)溶液：浓度为25mmol／l(目前大部分商品试剂已将凝血活酶、缓冲液与氯化钙液事先混合好，可不必另配cacl2液)。 (4)质控物(正常及异常对照血浆)：有商品供应。3．仪器 (1)手工法：秒表，保持36．5～38．5℃的恒温水浴箱。 (2)仪器法：各种自动或半自动凝血仪，严格按各自的说明书操作。仪器法依测定原理主要有三种：光学法即比浊法、电流法即钩方法和黏度法即磁珠法。 4．血液标本的采集、运送及贮存 (1)用一次性塑料采血器或硅化玻璃注射器，采静脉血液。采血技术要熟练，不可过多损伤血管及周围组织，致使组织液混入血液中。采血时止血带不可束缚过紧，并不应超过2分钟。针筒内见到回血即应解开止血带，否则某些凝血及纤溶因子会活化，并可使血细胞比容(hct)升高。 (2)静脉采血1．8ml，加入含有109mmol／l枸橼酸钠溶0．2ml的试管中，充分混匀。最好用已加有定量枸橼酸钠液的专用硅化真空采血管采血，以保证血与枸橼酸钠液比例准确，防止凝血因子活化，并保持清洁，防止不洁的试管和不合格橡皮塞的污染。 (3)贮血应用清洁塑料管或硅化玻璃管或其他不沾湿的容器，避免接触活化凝血因子。取得血液后应尽快送到血液检验室。在运送中应避免剧烈振动和日光直射。一般要求自采血到测定不得超过4小时，不可久贮。如在室温中贮存过久，v因子会破坏；另一方面，在4℃贮存过久，会导致第ⅶ因子活化。实验室在取得血样后应尽快分离血浆并尽快测定。血液如发现凝固，应弃去不用。 5．标本制备 pt和aftt试验都必须用乏血小板血浆(ppp)，以3000转／分钟，离心30分钟。用浊度法测定终点的自动化凝血仪，溶血和较明显的黄疸及脂血均会影响测定结果，此时可改用手工法或电子机械式(非比浊法)凝血仪测定。 6．测定步骤 (1)手工法①按上述方法制备乏血小板血浆。②将氯化钙凝血活酶溶液，健康人混合冻于血浆和待测血浆，置37％水浴中预温5分钟。