细菌生长繁殖与培养
细菌的培养
细菌培养细菌培养是指在体外环境中使用特定培养基和其他条件来促进细菌生长的一种方法。
它可以帮助我们在有限的条件下大量培育细菌,从而进行有关细菌的研究和应用。
细菌培养是一种用人工方法使细菌生长繁殖的技术。
细菌在自然界中分布极广,数量大,种类多,它可以造福人类,也可以成为致病的原因。
大多数细菌可用人工方法培养,即将其接种于培养基上,使其生长繁殖。
培养出来的细菌用于研究、鉴定和应用。
细菌培养是一个复杂的技术。
培养时应根据细菌种类和目的等选择培养方法、培养基,制定培养条件(温度、pH值、时间,对氧的需求与否等)。
一般操作步骤为先将标本接种于固体培养基上,做分离培养。
再进一步对所得单个菌落进行形态、生化及血清学反应鉴定。
培养基常用牛肉汤、蛋白胨、氯化钠、葡萄糖、血液等和某些细菌所需的特殊物质配制成液体、半固体、固体等。
一般细菌可在有氧条件下,37℃中放18~24小时生长。
厌氧菌则需在无氧环境中放2~3天后生长。
个别细菌如结核菌要培养1个月之久。
由于细菌无处不在,因此从制备培养基时开始,整个培养过程必须按无菌操作要求进行,否则外界细菌污染标本,会导致错误结果;而培养的致病菌一旦污染环境,就会引起交叉感染。
以疾病诊断为目的进行的培养,要选择合适的标本(血、尿、便、脓液、分泌物等),并应结合临床情况解释所得结果。
以光合细菌培养方法为例。
光合细菌培养的方法,按次序分为容器、工具的消毒,培养基的制备,接种和培养管理四个步骤。
(一)容器、工具的消毒参考、此处从略。
(二)培养基的制备1.培养用水如果培养的光合细菌是淡水种,菌种培养可用蒸馏水,生产培养可用消毒的自来水(或井水)配制。
如果培养的光合细菌是海水种,则用天然海水配制培养基,注意在海水中加入磷元素时,不能用磷酸氢二钾,应用磷酸二氢钾,不然会产生大量沉淀。
2.灭菌和消毒菌种培养用的培养基应连同培养容器用高压蒸气灭菌锅灭菌。
小型生产性培养可把配好的培养液用普通铝锅或大型三角烧瓶煮沸消毒。
细菌培养的基本原理
细菌培养的基本原理细菌培养的基本原理是通过提供适宜的环境条件来使细菌得到繁殖和生长。
细菌是单细胞微生物,具有较小的体积和简单的构造,对于其生长和繁殖需要提供一定的基础营养物质、水分、温度和pH等基本生长条件。
细菌培养的基本原理可以分为以下几个方面来说明。
首先,提供适宜的培养基。
培养基是指用来培养细菌和其他微生物的营养物质的混合物。
根据细菌的需求和性质的不同,可以制备出不同种类的培养基。
常见的培养基包括富含碳源和氮源的通用培养基、选择性培养基和差异培养基等。
细菌可以利用碳源进行能量代谢和生长,氮源则用于合成细胞组分。
其他元素如磷、硫、镁等也是细菌生长的必需元素,可以通过培养基提供。
其次,细菌培养需要提供适宜的水分。
水分是细菌生长所必需的,也是基质中营养物质的传递和代谢的媒介。
在培养基中,水分的含量要符合细菌生长和代谢的要求,过高或过低的含水量会影响细菌的生长。
细菌需要适度的含水量来实施细胞壁的合成、释放细胞外酶和物质的吸收。
第三,提供适宜的温度。
细菌的生长温度通常与其生态环境有关,不同种类的细菌有不同的生长温度范围。
例如,常见的致病菌如大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的适宜生长温度为37摄氏度,而嗜热菌能在高温环境下生长,嗜冷菌则能在低温环境下生长。
提供适宜的温度可以促进细菌酶的活性,保证细胞内代谢物质的正常循环和能量的产生。
第四,提供适宜的pH条件。
pH值是衡量溶液酸碱性的指标,细菌的生长需要在适宜的pH范围内才能进行。
不同种类的细菌对pH值的适应能力也有差异。
一般而言,大多数细菌的适宜生长pH范围为6.5-7.5。
高于或低于这个范围都会影响细菌的生长和代谢,甚至导致其死亡。
综上所述,细菌培养的基本原理包括提供适宜的培养基、水分、温度和pH条件。
通过满足这些基本条件,可以为细菌提供适宜的环境来进行繁殖和生长。
细菌培养是微生物学和生物技术研究中的重要手段,可以用于研究细菌生长规律、代谢途径、细胞组分及其功能等方面的问题,也可以用于制备生物工程和生物药品等。
细菌的繁殖和细菌培养特征
土壤中分离的放线菌
卡拉霉素链霉菌
游动放线菌
诺尔斯氏链霉菌
放线菌的形态构造
放线菌是具有菌丝、以孢子进行繁殖、G+ 的一类原核微生物,属于真细菌范畴。
多核的单细胞,大多由分枝发达的菌丝组成 菌丝直径与杆菌类似,约1mm 细胞壁组成与细菌类似, G+ (少数阴性) 细胞的结构与细菌基本相同
产生种类繁多的抗生素(在已报道过的近万种抗生素中,约 70%由放线菌产生;而其中90%由链霉菌属产生) 。
产生维生素(B12)、酶制制(葡萄糖异构酶,蛋白酶);在甾 体转化、石油脱蜡、烃类发酵、污水处理等方面也有应用。
少数寄生型放线菌可引起人、动物(皮肤、脑、肺和脚部感 染)、植物(如马铃薯和甜菜的疮痂病)的疾病。
5. 双歧杆菌(Bifidobacterium)
• 形态:G+ 、弯曲和常分叉的杆菌,专性厌氧 (哺乳婴儿粪便,能在肠道定植的益生菌) • 最适生长温度:37℃ • 用途:微生态调节剂
6. 大肠埃希氏菌(大肠杆菌) (Escherichia coli)
• 形态:G- ,短杆 • 最适生长温度:37 ℃ • 用途:食品卫生重要指示菌,
2.2.1.6食品中常见的细菌 (自己阅读)
1.假ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ胞杆菌属(Pseudomonas)
形态:G-杆状,一根鞭毛, 运动,不产芽孢。 生长温度:最低5℃或更低
作用:致病;冷藏食品 变质 用途:分解有机物质 (如污染物)能力强
铜绿假单胞菌菌落图及形态图
2. 醋酸杆菌属(Acetobacter)
• 个体形态:G-,短杆,老龄菌G+ ,单生、成对或链状,无 芽孢,有鞭毛,培养时间长易形成丝状、弯曲、棒状 等多 种畸形。专性需氧菌。 •最适生长温度: 30-35℃ •最适pH:5.4~6.3 •用途:醋酸发酵 恶臭醋杆菌(AS.1.41)巴氏醋酸菌(沪 酿1.01)
微生物细菌的生长
稳定生长期到来的原因
① 营养物尤其是生长限制因子的耗尽;
② 营养物的比例失调,例如C/N比值不合适等; ③ 酸、醇、毒素或H2O2等有害代谢产物的累积; ④ pH、氧化还原势等理化条件越来越不适宜等。
(四)衰亡期( decline phase或death phase)
在衰亡期中,个体死亡的速度超过新生的速度,整个群体呈现负 生长状态(R为负值)。 产生衰亡期的原因 外界环境对继续生长越来越不利,Eg.营养物质耗尽和有毒代谢产物 的大量积累等,从而引起细胞内的分解代谢大大超过合成代谢,继而 导致菌体死亡。 该时期死亡的细菌以对数方式增加,但在衰亡期的后期,由于部分细 菌产生抗性也会使细菌死亡的速率降低,仍有部分活菌存在。
细菌的生长曲线
• 定量描述液体培养基中微生物群体生长规律的实验曲
线,称为生长曲线(growth curve)。 • 在微生物学中提到的“生长”,均指群体生长。
根据微生物的生长速率常数(growthrateconstant ),即每小时的分裂次数 (R)的不同,一般可把典型生长曲线粗分为 迟缓期 、指数生长期 、稳定 生长期和衰亡期等4个时期 。
图 5 - 2 S treptococcus pyogenes 细胞壁的合成延伸 (引自 Robert F. Boyd , 1984 , p337 )
图 5 — 3 细胞壁生长区与扩增方向 (引自 Michael T. Madigan , 2003 ,第 141 页)
细菌的繁殖
细菌可以以无性或者遗传重组两种方式繁殖,最主要的方式是 以二分裂法这种无性繁殖的方式:一个细菌细胞细胞壁横向分 裂,形成两个子代细胞。 并且单个细胞也会通过如下几种方式发生遗传变异:突变(细 胞自身的遗传密码发生随机改变),转化(无修饰的DNA从一个 细菌转移到溶液中另一个细菌中),转染(病毒的或细菌的DNA ,或者两者的DNA,通过噬菌体转移到另一个细菌中),细菌接 合(一个细菌的DNA通过两细菌间形成的特殊的蛋白质结构,接 合菌毛,转移到另一个细菌)。细菌可以通过这些方式获得DNA ,然后进行分裂,将重组的基因组传给后代。许多细菌都含有 包含染色体外DNA的质粒。
细菌生长繁殖条件
细菌生长繁殖条件细菌生长繁殖条件是指细菌在特定的环境条件下,能够获得足够的营养物质,从而实现生长和繁殖的条件。
细菌生长繁殖的条件主要有温度、pH值、氧气、营养物质、抑菌物质等几个方面。
首先,温度是细菌生长繁殖的重要条件。
不同细菌对温度的适宜范围不同,一般来说,温度越高,细菌的生长繁殖速度越快,但也有一些细菌对温度的适宜范围较窄,如果温度超出其适宜范围,细菌就会死亡。
一般来说,细菌的最适宜温度范围在20℃~45℃之间,其中有些细菌的最适宜温度范围可以达到60℃。
其次,pH值也是细菌生长繁殖的重要条件。
不同细菌对pH值的适宜范围也不同,一般来说,pH值越接近中性,细菌的生长繁殖速度越快,但也有一些细菌对pH值的适宜范围较窄,如果pH值超出其适宜范围,细菌就会死亡。
一般来说,细菌的最适宜pH值范围在5.5~7.5之间,其中有些细菌的最适宜pH值范围可以达到9.0。
再次,氧气也是细菌生长繁殖的重要条件。
不同细菌对氧气的适宜范围也不同,一般来说,氧气越多,细菌的生长繁殖速度越快,但也有一些细菌对氧气的适宜范围较窄,如果氧气超出其适宜范围,细菌就会死亡。
一般来说,细菌的最适宜氧气范围在0.5%~20%之间,其中有些细菌的最适宜氧气范围可以达到100%。
此外,营养物质也是细菌生长繁殖的重要条件。
不同细菌对营养物质的需求也不同,一般来说,营养物质越丰富,细菌的生长繁殖速度越快,但也有一些细菌对营养物质的需求较少,如果营养物质不足,细菌就会死亡。
一般来说,细菌的最适宜营养物质范围包括氮源、碳源、磷源、微量元素等,其中有些细菌还需要有机物质作为营养物质。
最后,抑菌物质也是细菌生长繁殖的重要条件。
不同细菌对抑菌物质的适宜范围也不同,一般来说,抑菌物质越少,细菌的生长繁殖速度越快,但也有一些细菌对抑菌物质的适宜范围较窄,如果抑菌物质超出其适宜范围,细菌就会死亡。
一般来说,细菌的最适宜抑菌物质范围包括抗生素、抗菌素、抗真菌素等,其中有些细菌还需要有机物质作为抑菌物质。
细菌的生长繁殖
渗透压
(二) 生长方式与速度 细菌个体的生长繁殖
繁殖方式----细菌以简单的二分裂方式进行繁殖。 繁殖方式 细菌以简单的二分裂方式进行繁殖。 细菌以简单的二分裂方式进行繁殖 繁殖速度----繁殖一代所需时间(代时) 繁殖速度 繁殖一代所需时间(代时)约20-30min。 繁殖一代所需时间 。 但少数细菌代时较长,如结核分枝杆菌代时为18小时。 小时。 但少数细菌代时较长,如结核分枝杆菌代时为 小时
光滑型菌落 (S型) 型
粗糙型菌落 (R型) 型 粘液型菌落 (M型) 型
(三). 细菌在半固体培养基中的生 情况——动力试验 长 情况 动力试验
1、3:有动力 、 : 2:无动力 :
培养细菌的方法
根据不同标本及不同培养目的,可选用 根据不同标本及不同培养目的, 不同的接种和培养方法。 不同的接种和培养方法。常用的有分离培 养和纯培养两种方法。 养和纯培养两种方法。 病原菌的人工培养一般采用35-37℃,培 ℃ 病原菌的人工培养一般采用 养时间多数为18-24h,但有时需根据菌种 养时间多数为 , 及培养目的作最佳选择。 及培养目的作最佳选择。
O2 :根据细菌代谢时对氧气的需要与否分四类: 根据细菌代谢时对氧气的需要与否分四类:
有氧环境不能生长的原因 1.缺乏细胞色素及细胞色素氧化酶 缺乏细胞色素及细胞色素氧化酶 2.缺乏超氧化物歧化酶 缺乏超氧化物歧化酶
C O2 :对细菌生长也很重要,大部分细菌在代谢中产 对细菌生长也很重要,
可满足需要, 生的 C O2可满足需要,个别细菌初次分离时需人工 供给5-10%C O2 供给
细菌的生长繁殖与培养
(一)生长繁殖的条件 营养物质 碳源、氮源、 水、碳源、氮源、无机盐及生长因子为细菌的代谢 及生长繁殖提供必需的原料和充足的能量 酸碱度(pH) 酸碱度 多数病原菌最适PH为 多数病原菌最适 为7.2----7.6 温度 病原菌最适温度为37度 病原菌最适温度为 度
细菌的生长繁殖
细菌的生长繁殖一、细菌生长繁殖的条件细菌生长繁殖除需须要的养分物质外还需有相宜的环境,包括温度、度及气体等。
1.充沛的养分细菌的生长繁殖、新陈代谢必需有充沛的养分物质才干提供其菌体所需的原料及能量。
2.相宜的温度不同细菌对温度的要求不同,据此可分为嗜冷菌、嗜温菌、嗜热菌三种类型。
病原菌均为嗜温菌,多数病原菌最适生长温度为35~37℃,少数病原菌如最适温度为20~28℃,空肠弯曲菌最适温度为36~43℃。
3.相宜的酸碱度各类一细菌对于生长环境中氢离子的浓度要求不同,多数在中性至弱碱性环境中酶活性高,生长良好,多数病原菌最适pH值范围为7.2~7.6,个别细菌如结核分枝杆菌最适pH 值范围为6.5~6.8(偏酸性),霍乱弧菌最适pH值范围为8.4~9.2(偏碱性)。
因细菌在生长繁殖过程中可分解糖类产酸,使周围环境的pH 值下降,故人工培养细菌时应加入缓冲剂,防止培养基酸碱度发生变幻影响分别培养。
4.相宜的气体细菌生长繁殖时所需的气体主要是和氧气。
多数细菌在其代谢过程中所产生的CO2即可满足本身需求,惟独少数细菌如、等在初次分别培养时需提供5%~10%CO2才干生长。
按照细菌对氧分子的需求,将其分为以下几种。
(1)专性需氧菌(obligate aerobe)一类必需在有氧的环境中才干生长的细菌,具有完美的呼吸酶系统,以氧分子作为氢受体举行有氧呼吸。
如结核分枝杆菌、炭疽芽胞杆菌等。
(2)微需氧菌(microaerophilic bacterium)一类在低压氧(5%~6%)环境中生长最好,氧浓度大于10%时生长被抑制的细菌。
如、等。
(3)兼性厌氧菌(facultative anae-obe)一类在有氧或无氧环境中均能生长的细菌,在无氧环境中举行无氧发酵,在有氧环境中举行需氧呼吸,不同环境中所产生的代谢产物不同。
多数病原菌属此类。
(4)专性厌氧菌(obligate anaerobe)一类只能在无氧环境中才干生长的细菌,缺乏完美的呼吸酶系统,只能举行无氧酵解,因游离氧对其有毒性作用,在有氧时生长受抑制甚至死亡。
细菌的繁殖、代谢、培养、消毒ppt课件
细胞壁、膜有半透性 G+菌 20~25大气压 G-菌 5~6大气压
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渗透压
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第二节 细菌的营养与生长繁殖
一、细菌的营养物质
水:营养的吸收与代谢均需水 碳源:合成菌体成分,提供能量 病原菌主要来源于糖类 氮源:合成菌体成分 病原菌主要来源于氨基酸、蛋白胨等 无机盐:常用元素(K\Na\Ca\Mg\P\S\Fe) 微量元素(Co\Mn|Mo\Zn) 生长因子:生长必需但自身不能合成的物质, 如维生素、氨基酸等。
有助于细菌鉴别
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抗生素(Antibiotics):多粘菌素、杆菌肽
细菌素(Bacteriocins)
抗菌蛋白,只能杀伤有亲缘关系的细菌, 无治疗意义,用于细菌分型、流行病学调 查。
大肠杆菌产生大肠菌素(Colicin)
维生素
某些肠道菌合成,如B族维生素、VK。
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2019
第一节 细菌的理化性状
一、细菌的化学组成
水 占细胞总重量75%-90%
有机物 碳、氢、氮、氧、磷、硫等
无机离子 钾、钠、铁、镁、钙、氯等 特有成分
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肽聚糖、胞壁酸、磷壁酸等
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二、细菌的物理性状
光学性质 表面积 带电现象 半透性 半透明 体积小、表面积大 G+菌 pI 2~3 G-菌 pI 4~5 中性环境 带负电荷
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四、影响细菌生长的因素
营养物质充足 氢离子浓度(pH)
多数病原菌最适pH为7.2~7.6
温度
多数病原菌最适37℃
细菌接种培养与生长现象的观察
细菌接种培养与生长现象的观察细菌是一种微生物,它们在生命活动中具有重要的作用。
对细菌进行接种培养与生长现象的观察,可了解其生存繁殖机制,为防治疾病提供理论依据。
本文将介绍细菌接种培养和生长的观察现象。
一、细菌接种培养1.接种方法细菌的接种方法有三种:涂布法、坡面法和冲击法。
涂布法是将细菌培养基涂抹在培养皿中,接种样品后,使其均匀分布在培养基上。
坡面法是将细菌培养基倾斜放置,接种样品后,使其在培养基表面形成斜坡状。
冲击法是将细菌样品在明胶块或琼脂糖上泡发,然后将其取下,放置在含有特定养分的培养基上。
2.培养条件细菌的培养条件包括温度、pH值、营养物质、湿度等。
常见的细菌培养温度是37℃,pH值为7.0左右。
细菌所需的营养物质不同,有些能够利用简单的碳水化合物进行生长,而有些则需要更为复杂的营养物质。
湿度也是细菌生长的重要因素,过低或过高的湿度会对其生长产生影响。
二、细菌生长现象1.菌落形态细菌在培养基上生长后形成的结构称为菌落,其形态可分为几种。
点状菌落是呈圆点状的,直径不大于1毫米,表面光滑。
分叉菌落是分叉状的,呈不规则形状。
环状菌落是呈圆环状,表面光滑。
凝胶状菌落是呈3D立体状,表面光滑。
2.生长速度细菌的生长速度与其所处的环境和营养物质有关。
通常来讲,细菌越适应培养环境,生长速度越快。
细菌在生长初期,会出现一个对数生长期,此时细菌的增长速度很快。
随着时间的推移,细菌的生长速度逐渐减缓,并进入一个稳态生长期。
3.色素现象形成色素是细菌生长过程中的一种现象。
许多细菌在生长过程中会产生色素,并且不同颜色的色素会对其的生长产生影响。
一些菌株会生产出蓝色、红色或黄色的色素,有些则会产生紫色或绿色的色素。
4.抗菌性细菌在生长过程中还会表现出一种抗菌性,即细菌之间会形成菌斑,表现为一种聚集状的现象。
当培养基上的细菌密集到一定程度时,会形成一些特殊的结构,如粘液囊和生物膜,从而形成一种保护性屏障,使得细菌对外部环境的抵抗力增强。
细菌的营养与生长繁殖
对 糖 的 发 酵
对 蛋白质的发酵
枸橼酸盐利用试验
尿素酶试验
甲基红试验
吲哚试验
硫化氢试验
单糖发酵试验
VP试验
其他试验
单糖 甲酸 CO2 + H2O
糖发酵:
胱氨酸 醋酸铅 硫化铅 硫化氢 甲硫氨酸 硫酸亚铁 硫化亚铁
配制注意事项
合适配方
注意成分浓度比例
pH适宜
无 菌
六、细菌的人工培养
按主要营养物质的来源:天然培养基和合成培养基 按物理状态:固体、液体、半固体培养基 按用途:基础培养基 营养培养基 选择培养基 鉴别培养基 厌氧培养基
培养基的类型
(二)细菌的培养方法及生长现象
固体培养法:细菌的分离、纯化、鉴定、保存、计数 液体培养法:收集菌体、获得发酵产物、菌种鉴定 半固体培养法:观察运动、保种、测定生化反应 厌氧培养法:厌氧菌的培养
(2)合成代谢产物
2、侵袭性酶:透明质酸酶、血浆凝固酶
3、毒素
、鉴别作用
1.合成产物:如 色素
2.细菌素 (bactericin)
D、补充营养物质
维生素:B6、B12、K等
C、治疗疾病
抗生素(antibiotic) —— 是某些微生物产生的抑制或杀灭其 它微生物的物质。
复习题目
1.代谢; 分解代谢;合成代谢;发酵;IMViC试验 2.细菌合成代谢产物及其临床意义。
简单扩散
运输 方式
浓度 方向
载体
动力
构型 变化
营养 物质
简单扩散
高→低
—
浓度梯度
—
水、脂肪酸
促进扩散
高→低
载体
浓度梯度
细菌的生长繁殖与变异
1.营养物质 水
碳源 :糖类、有机酸
氮源 :蛋白质或蛋白质的降解产物(如蛋白胨、氨基酸等)
无机盐 :如磷、硫、钾、钠、镁、钙、铁等。 生长因子:B族维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等。 2.氢离子浓度(pH) 7.2~7.6 3.温度 37度 4.气体:氧和二氧化碳 5.渗透压
1.按其营养成分和用途不同分类 (1)基础培养基:能满足一般细菌生长繁殖的营养。 (2)营养培养基:基础培养基中加入葡萄糖、血液、血清、酵 母浸膏等物质,专供营养要求较高或有特殊需求的细菌生长。 (3)选择培养基:选择所需分离的细菌而抑制其他细菌生长的 培养基。 (4)鉴别培养基:供细菌生化反应试验用的,可以鉴别细菌。 (5)厌氧培养基
(四)人工培养细菌的意义
1.在医学中的应用 (1)细菌的鉴定和研究 (2)细菌性疾病的诊断和治疗 (3)生物制品的制备 2.其他方面的应用 (1)在工农业生产中的应用 (2)在基因工程中的应用
四、细菌的变异
细菌的遗传
概念:细菌在一定的环境条件下,亲代将其生物学性状 传给子代,而且代代相传,称为遗传。
(二)细菌的遗传物质
(三)细菌变异的机制 基因突变 基因的转移和重组
转化(transformation)是受体菌直接摄取供体菌游离的DNA片 段,通过与染色体重组,获得了供体菌的部分遗传特性。
转导(transduction)是噬菌体为媒介,把供细菌的基因转移到受 体菌内,导致后者基因改变的过程。
1.细菌的繁殖方式 :无性二分裂繁殖
一、细菌的生长繁殖 (一)生长繁殖的条件 (二)细菌生长繁殖的规律:
1.细菌的繁殖方式 :无性二分裂繁殖
20~30 min 2.细菌的繁殖速度:
细菌的营养与生长繁殖
C、治疗疾病
抗生素(antibiotic) —— 是某些微生物产生的抑制或杀灭其
它微生物的物质。
D、补充营养物质
维生素:B6、B12、K等
复习题目
1.代谢; 分解代谢;合成代谢;发酵; IMViC试验 2.细菌合成代谢产物及其临床意义。
—生长曲线
生长曲线(growth curve) 描述细菌群体在整个培养期间的菌数变化规律
的曲线。典型的生长曲线可分为延迟期、对数期、
稳定期和衰亡期。
2、细菌群体的生长繁殖
迟缓期 (lag phase): 适应、活化期 对数期 (log phase):迅速生长期,典型性 稳定期 (stationary phase):新生、死亡平衡特征产物积累期
(3)发酵
1×G —— 乳酸+2×ATP
2、细菌的代谢产物: 分解产物与合成产物
(1)分解代谢产物和细菌的生化反应
细菌的生化反应实验:
酶系不同 对底物分解能力不同 最终代谢产物不同
对糖的分解:
需氧
TCAC:CO2、H2O 酸、醛、醇等
多糖 —胞外酶 单糖 丙酮酸
厌氧
对蛋白质的分解:
脱氨基酶 NH3 +酸
细 菌
吸取 营养
新陈 代谢
细菌 繁殖
细菌 生长
第二节 细菌的营养与生长繁殖 第三节 细菌的新陈代谢
第二节 细菌的营养与生长繁殖
1. 细菌细胞的化学组成 2. 细菌所需的营养物质 3. 吸收营养物质的方式 4. 细菌的营养类型 5. 细菌的生长繁殖(掌握) 6. 细菌的人工培养(熟悉)
营养物质(nutrient):细菌生长繁殖、 进行生理活动所需的物质,是细菌生存 的重要物质基础。
细菌的生长繁殖
细菌的生长繁殖1)细菌的繁殖裂殖(schizosonx)是细菌最普遍、最主要的繁殖方式。
在细菌细胞分裂前,先进行染色体DNA的复制,所形成的双份染色体DNA彼此分开,移向细菌细胞两端,在细菌细胞中间形成横隔壁和细胞膜,产生两个子细胞。
若分裂产生的两个子细胞大小基本相等,称为同型分裂。
若分裂产生的两个子细胞大小不等,则称为异型分裂。
异型分裂多发生于陈旧培养基中。
除裂殖外,少数细菌进行出芽繁殖;少数细菌进行有性繁殖,通过性菌毛传递遗传物质,但频率很低。
2)细菌在固体培养基上的培养特征一个或少数几个细菌在固体培养基上生长繁殖所形成的肉眼可见的微生物群体,称为菌落。
在特定的条件下,细菌具有一定的培养特点,且有较高的稳定性和专一性。
3)细菌在半固体培养基上的培养特点以穿刺接种法将细菌接种至含0.3%――0.5%的琼脂的半固体培养基中,如果细菌不长鞭毛,只能在穿刺线上生长;如果长鞭毛,则不但在穿刺线生长,也在穿刺线的周围扩散生长。
4)细菌在液体培养基中的培养特征在液体培养基中,细菌生长能使培养基浑浊。
浑浊情况因细菌对氧气的要求不同而有区别:好养菌仅使培养液上部浑浊;厌氧菌仅使培养液下部混浊;兼性厌氧菌则使培养液均匀混浊。
有的细菌可在培养液表面形成菌环或菌膜或在底部产生絮状沉淀,有的产生气泡、色素。
细菌在液体培养基中的培养特征也是分类鉴定的依据之一。
[例2.18]细菌有哪几种形态?答:球状、杆状、螺旋状和丝状。
[例2.1-9]细菌有哪些一般结构和特殊结构?答:细菌的一般结构包括细胞壁、细胞膜、细胞质和拟核。
细菌的特殊结构包括鞭毛、荚膜、芽抱。
[例2.1-10]可用什么培养技术判断细菌的呼吸类型和能否运动?如何判断?答:利用在半固体培养基中的穿刺接种技术可以判断细菌的呼吸类型和运动情况。
根据细菌在半固体培养基中的培养特征来进行判断。
1页。
细菌生长繁殖实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 观察细菌在不同培养基上的生长情况;2. 掌握细菌生长繁殖的基本规律;3. 学习细菌分离和纯化的方法;4. 了解细菌生长繁殖过程中的关键因素。
二、实验原理细菌是单细胞微生物,主要通过二分裂的方式进行无性繁殖。
在适宜的条件下,细菌繁殖速度极快,代时(Generation time)一般为20~30分钟。
细菌生长繁殖过程中,经历迟缓期、对数期、稳定期和衰亡期四个阶段。
本实验通过观察细菌在不同培养基上的生长情况,分析细菌生长繁殖过程中的关键因素。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎双球菌等;2. 培养基:牛肉膏蛋白胨培养基、琼脂糖培养基、血琼脂培养基等;3. 仪器:高压蒸汽灭菌器、恒温培养箱、显微镜、接种环、无菌试管等。
四、实验方法1. 培养基制备:按照实验要求,将牛肉膏蛋白胨培养基、琼脂糖培养基、血琼脂培养基等分别进行配制,分装至无菌试管,高压蒸汽灭菌后备用。
2. 细菌接种:将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎双球菌等分别接种至牛肉膏蛋白胨培养基、琼脂糖培养基、血琼脂培养基等,放入恒温培养箱中培养。
3. 细菌生长观察:定期观察细菌在不同培养基上的生长情况,记录细菌生长曲线,分析细菌生长繁殖过程中的关键因素。
4. 细菌分离和纯化:在细菌生长旺盛时期,取少量菌液,接种至琼脂糖培养基,进行平板划线分离。
挑选单菌落,进行纯化培养。
5. 细菌形态观察:将纯化后的细菌制片,进行革兰染色,观察细菌形态。
五、实验结果与分析1. 细菌在不同培养基上的生长情况:金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎双球菌等在不同培养基上的生长情况良好,生长曲线呈典型S型。
2. 细菌生长繁殖过程中的关键因素:细菌生长繁殖过程中,关键因素包括:(1)营养物质:细菌生长繁殖需要丰富的营养物质,如碳源、氮源、无机盐等。
本实验中,牛肉膏蛋白胨培养基提供了丰富的营养物质,有利于细菌生长繁殖。
(2)温度:细菌生长繁殖的最适温度因菌种而异。
细菌的生长繁殖与培养
(三)细菌在半固体培养基中的生长现象
有 鞭 毛 菌
无 鞭 毛 菌
有 鞭 毛 菌
无 鞭 毛 菌
• 三、人工培养细菌的实际意义
1. 感染性疾病的诊断和防治
标本
增菌培养
分离培养
诊断
染色 纯培养 显微镜观察
初步诊断
生化鉴定
确定诊断
治疗
最敏感药物
青
链
青
培养
庆 红
链
庆
红
标本
药浸纸片
2. 细菌的鉴定与研究
中性产物
PH<5.4 PH>4.5 甲基红指示 剂呈红色 甲基红试 验阴性
4. 枸橼酸盐利用试验(citrate utilization test)
机理:产气杆菌在以枸橼酸盐为唯一碳源的培养基上生长,分
解枸橼酸盐产生CO2,并转变为碳酸盐,同时分解培养
基中的铵盐生成氨,使培养基由中性变为碱性,含溴麝 香草酚蓝(BTB)指示剂的培养基由淡绿色变为深兰色,
学习目标
• 通过本章的学习要熟悉细菌生长繁殖的条
件、繁殖方式及速度;熟悉细菌在培养基
中的生长现象及意义;掌握细菌的代谢产 物及意义。
前 言
细菌是一大类具有独立生命活动的单细胞微生 物,能从外界环境中摄取营养物质,合成自身
细胞成分并获得能量,同时不断排出废物,完
成新陈代谢,得以生长繁殖。细菌的生长繁殖 与环境条件密切相关,条件适宜时,细菌的生 长繁殖及代谢旺盛,改变条件时可使细菌生命 活动受到抑制或使细菌死亡。
半固体培养基
• 二、细菌在培养基中的生长现象
(一)细菌在液体培养基中的生长现象
沉 淀 生 长
混 浊 生 长
菌 膜 生 长
细菌的繁殖和细菌培养特征
5. 双歧杆菌(Bifidobacterium)
• 形态:G+ 、弯曲和常分叉的杆菌,专性厌氧 (哺乳婴儿粪便,能在肠道定植的益生菌) • 最适生长温度:37℃ • 用途:微生态调节剂
6. 大肠埃希氏菌(大肠杆菌) (Escherichia coli)
• 形态:G- ,短杆 • 最适生长温度:37 ℃ • 用途:食品卫生重要指示菌,
2. 醋酸杆菌属(Acetobacter)
• 个体形态:G-,短杆,老龄菌G+ ,单生、成对或链状,无 芽孢,有鞭毛,培养时间长易形成丝状、弯曲、棒状 等多 种畸形。专性需氧菌。 •最适生长温度: 30-35℃ •最适pH:5.4~6.3 •用途:醋酸发酵 恶臭醋杆菌(AS.1.41)巴氏醋酸菌(沪 酿1.01)
菌苔(1awn) 众多菌落连成一片(斜接种物)2. 菌落特征描述
大小、形状、隆起程度、边缘、 表面状态、光泽、质地、 颜色、透明度
3. 细菌菌落的特点 湿、粘、半透明、易挑起、质地均匀、内外正反颜色一致
4. 不同形态结构细菌的菌落的特点
•球菌菌落:小、圆、隆起、边缘整齐 •杆菌菌落:较大、较圆 •鞭毛菌菌落:大、扁平、形态不规则或边缘多缺刻 •芽孢菌菌落:不透明、粗糙、多褶皱、边缘不规则 •荚膜菌菌落:光滑、粘稠、湿润(透明蛋清状)
气泡
色泽 ???
细胞特征、相对密 度、运动能力、对 氧气等不同
2.2.1.6食品中常见的细菌 (自己阅读)
1.假单胞杆菌属(Pseudomonas)
形态:G-杆状,一根鞭毛, 运动,不产芽孢。 生长温度:最低5℃或更低
作用:致病;冷藏食品 变质 用途:分解有机物质 (如污染物)能力强
铜绿假单胞菌菌落图及形态图
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