蛋黄卵磷脂的制备
卵磷脂的制备及鉴定
卵磷脂的制备及鉴定(总2页)本页仅作为文档页封面，使用时可以删除This document is for reference only-rar21year.March卵磷脂的制备及鉴定一、实验目的要求1、熟悉鸡蛋黄制备卵磷脂的原理。
2、掌握卵磷脂的制备与减压蒸馏的基本操作方法。
二、实验重点和难点从蛋黄中制备卵磷脂的操作方法。
三、实验原理将卵黄中加乙醇，卵磷脂溶于乙醇溶液中，分离提取，蛋白质等某些杂质从沉淀物中除去。
但由于乙醇抽提时，其他脂质也一起被抽提，如甘油三酯、甾醇等。
利用卵磷脂不溶于丙酮的性质，用丙酮从粗卵磷脂溶液中沉淀磷脂，能使卵磷脂与其他脂质和胆固醇分离开来。
无机盐和卵磷脂可生成络合物沉淀，因此，可利用金属盐沉淀剂将卵磷脂从溶液中分离出来，由此除去蛋白质、脂肪等杂质，再用适当溶剂萃取出无机盐和其他磷脂杂质。
四、实验仪器、试剂与材料1、仪器：离心机、旋转薄膜蒸发仪、布氏漏斗、抽滤瓶、真空干燥箱、层析缸、紫外分光光度计。
溶液：取氯化锌10g，加水溶解并稀释至100ml，摇2、试液：l0%的ZnCl2匀，即得。
3、试剂与材料：氯化锌、95%乙醇、丙酮、氯仿、碘、甲醇、无水乙醇。
五、操作步骤1、粗提：取鸡蛋卵黄适量，用2倍于卵黄体积的95%乙醇混合搅拌、提取，离心分离（300Or/min，5min），将沉淀物重复提取3次，回收上清液。
然后减压蒸馏（45℃）至近干，用少量石油醚洗下粘壁的黄色油状物。
加入丙酮溶解，抽滤，分离出沉淀，真空干燥（40℃，3Omin），得到淡黄色的粗卵磷脂，称重。
2、精制：取一定量的卵磷脂粗品，加无水乙醇溶解，得到约10%的乙醇粗提液。
加入相当于卵磷脂质量的l0%的ZnCl溶液，室温搅拌0.5h。
分离沉淀2物，加适量冰丙酮（4℃）洗涤，搅拌lh，再用丙酮反复研洗，直到丙酮洗液为近无色止，得到白色蜡状的精制卵磷脂；干燥；称重。
3、鉴定：（1）薄层色谱分析：取卵磷脂样品与对照品分别制成2%氯仿溶液，用GF254硅胶板以氯仿：甲醇：水（65：25：4）为展开剂，展开，取出，干燥，碘蒸气显色。
蛋黄卵磷脂的提取
蛋黄卵磷脂的提取[实验目的]1.了解从动物中提取有效物质的一般原理和方法。
2.更好的理解和利用相似相容原理。
3.熟悉从蛋黄中提取卵磷脂的操作。
4.掌握薄层液相色谱的原理及操作方法。
[仪器与试剂]烧杯、量筒、三口瓶（100mL）、圆底烧瓶（100mL）、烧杯、分液漏斗、旋转蒸发仪、水浴锅、分液漏斗。
氯仿、无水乙醇、乙醚、三乙胺、氯化钠溶液（10%）、无水MgSO4、丙酮、GF254硅胶板。
[实验原理]实验采用混合溶液萃取法。
薄层色谱法又称薄板色谱法。
薄板色谱法按其固定相性质和分离机理可分为：吸附薄层法，分配薄层法，离子交换薄层法及尺寸排阻薄层法等。
薄层色谱法基本原理实质是吸附、解吸附、再吸附、再解吸附的连续过程。
[实验步骤]1.蛋黄卵磷脂的提取取新鲜的熟鸡蛋一个，完整的取出蛋黄，置于装有搅拌器、回流冷凝管和温度计的100mL三口瓶中，加入20mL混合溶剂（氯仿：乙醇=1：3），控制反应温度为35—40℃，搅拌30min。
抽滤，滤饼在同样条件下再提取一次。
滤液转入分液漏斗中，以5mL氯仿清洗抽滤瓶后一并加入分液漏斗中，加入40mL 10%氯化钠溶液。
分出氯仿层，用无水MgSO4干燥。
干燥后的氯仿层减压蒸馏近干，加入10mL丙酮，搅拌，冰水冷却后分离沉淀物。
用可能少的乙醚溶解沉淀物，转入烧杯，用1mL乙醚清洗烧瓶后也转入烧杯。
在搅拌下缓慢加入10mL丙酮，冰水冷却后除去溶剂，将产品置于真空干燥箱中干燥，得到白色或浅黄色蜡状卵磷脂产品，计算产率。
2.薄层色谱法（TLC）定性检测点样：取管口平整的毛细管吸取配置好的2%的卵磷脂氯仿溶液，点在薄层板上，点的直径一般为2-3cm，样品点在离薄层一端为1cm左右的起始线上，离板边约有1cm的距离。
展开：点样完毕，待溶剂挥干后，用氯仿、乙醇、三乙胺与水（体积比=1:1:1:0.3）的混合溶剂中进行展开，其方法是将薄层板斜放在盛有展开剂的层析槽内，薄板与展开剂液面成15°左右的夹角，点有样品的一端浸入溶剂中，深达0.5cm左右、切勿使溶剂浸没原点，盖好层析槽盖，当溶剂前沿达板的另一端1cm左右时，即可去除薄层板，标出溶剂前沿位置。
蛋黄卵磷脂的提取方法研究
蛋黄卵磷脂的提取方法研究
蛋黄卵磷脂是一种重要的营养成分，它含有丰富的卵磷脂、胆碱、不饱和脂肪酸等成分，对人体健康有着重要的作用。
因此，研究蛋黄卵磷脂的提取方法具有重要的意义。
常用的蛋黄卵磷脂提取方法主要有以下几种：
1. 酸水解法
酸水解法是将蛋黄中的卵磷脂通过酸水解反应分离出来的方法。
具体操作步骤为：将蛋黄加入酸性溶液中，使卵磷脂与蛋白质分离，然后通过离心、过滤等步骤分离出卵磷脂。
2. 溶剂萃取法
溶剂萃取法是将蛋黄中的卵磷脂通过溶剂的选择性萃取分离出来的方法。
具体操作步骤为：将蛋黄加入有机溶剂中，使卵磷脂与蛋白质分离，然后通过蒸发、干燥等步骤分离出卵磷脂。
3. 超声波法
超声波法是利用超声波的作用将蛋黄中的卵磷脂分离出来的方法。
具体操作步骤为：将蛋黄加入水中，然后通过超声波的作用使卵磷脂与水分离，最后通过离心、过滤等步骤分离出卵磷脂。
以上三种方法各有优缺点，选择合适的方法需要根据实际情况进行
选择。
在实际应用中，可以根据需要选择不同的方法进行提取。
蛋黄卵磷脂的提取方法研究对于提高蛋黄卵磷脂的利用价值具有重要的意义。
未来，我们还需要进一步深入研究，探索更加高效、环保的提取方法，为蛋黄卵磷脂的应用开发提供更好的技术支持。
蛋黄卵磷脂的制备研究
比较了水提方法与醇提法，醇提法效果较好。
为全面考查醇提法影响因素，设计了溶媒量、溶媒浓度和提取次数的３因素３水平正交试验，结果见表４。
试验结果及方差分析表明：乙醇回流法从多穗柯中提取总黄酮类化合物的最佳条件Ａ２Ｂ３Ｃ２即用２５倍量８０％乙醇回流２ｈ，影响因素的大小依次为：乙醇浓度、提取时间、溶媒量；此法提取的多穗柯中总黄酮类物质含量为１２．５９％。
３结 论对多穗柯中黄酮类物质的提取，水提法以８０℃的恒温水浴，ｐＨ值为１０的氢氧化钠液提取效果最好。
醇提法的正交试验的结果表明：多穗柯中黄酮类物质的最佳提取条件是Ａ２Ｂ３Ｃ２，即用２５倍量８０％乙醇回流２ｈ，醇提法提取总黄酮类物质的含量是１２．５９％。
而碱提法色素成分浸出太多。
所以，多穗柯中黄酮类物质的最佳提取方法是醇提法。
此法的提取工艺简单，条件容易控制，提取率高，提取剂乙醇易除净，所以可将此工艺应用于工业化生产，所生产的提取液可浓缩成膏状物，也可直接将其添加到保健饮料、糖果、绿豆羹、饼干或口服液中，作为保健食品、营养食品和功能食品的原料，应用前景良好。
参考文献：［１］中科院植物研究所．中国高等植物图鉴（第一册）［Ｍ］．科学出版社，１９７２．［２］廖代富，等．多穗柯叶的综合利用［Ｊ］．中国野生植物，１９９２（３）：１０．［３］江苏新医学院．中药大辞典［Ｍ］．上海：上海科技出版社，１９９７．２４３３．［４］郭建平，等．葛根药理作用研究进展［Ｊ］．中草药，１９９５，（３）：１６３．［５］马慧萍，贾正平，谢景文，等．淫羊藿总黄酮的提取分离工艺研究［Ｊ］．华西药学杂志，２００２，１７（１）：１．［６］覃洁萍，许学键，董明姣，等．广西藤茶中黄酮类成分的提取工艺研究［Ｊ］．中国现代应用药学杂志，２０００，１７（３）：１９６，［７］丁利君，吴振辉，蔡创海，等．金银花中黄酮类物质最佳提取工艺的研究［Ｊ］．食品科学，２００２，２３（２）：６２．蛋黄卵磷脂的制备研究吴晓英，林 影，叶倩君，李晶晶（华南理工大学生物工程系，广东 广州 ５１０６４０）摘 要：研究了鸡蛋卵黄卵磷脂的制备工艺和产品质量分析。
蛋黄卵磷脂的提取
六、注意事项
提高提取温度有利于提高产率，但是也 不宜过高。 使用丙酮、乙醚，室内应严格避免明火 且有良好的通风条件。
蛋黄卵磷脂的提取
一、实验目的
学习蛋黄卵磷脂的提取方法 学习搅拌器的使用
二、实验原理
卵磷脂是自然界中广泛分布的和所有细胞中存 在的甘油磷脂和神经鞘脂类的统称。 蛋黄的组成是51%水分，14.8%蛋白质； 34.6%的卵磷脂 使用溶剂提取卵磷脂时要注意，蛋黄是一种相 当稳定的乳状液，其中乳化剂是磷脂与蛋白质 结合的脂蛋白复合物。要充分把磷脂提取出 来，所用溶剂必须能破坏这种复合。
三、实验装置
四、试剂与仪器
试剂：氯仿，乙醇，乙醚，氯化钠溶液 （10％），无水硫酸钠，丙酮，鸡蛋 仪器：三口烧瓶，烧杯，分液漏斗，机 械搅拌器，水减压蒸馏装置。
五、实验操作
新鲜鸡蛋一个，煮熟完整取出蛋黄，置于装 有搅拌器、回流冷凝管、温度计的100ml三口 烧瓶中。加入20ml混合溶剂（氯仿：乙醇 =1:3),控制温度为35～40℃，搅拌30min。 抽滤，滤饼在同样条件下再提取一次。滤液 转入分液漏斗，以5ml氯仿淌洗抽滤瓶后一并 倒入分液漏斗，加入40ml10％氯化钠溶液洗 涤，分出氯仿层，用无水硫酸钠干燥。
干燥后氯仿层用水减压蒸馏近干（水浴加热， 温度小于40℃）。加入10ml丙酮，搅拌，冰水 冷却后分离沉淀物。倾去上层丙酮层（尽量倒 净）。用尽可能少的乙醚溶解沉淀，转入烧 杯，另用1ml乙醚淌洗圆底烧瓶后也转入烧 杯。 搅拌下缓缓加入10ml丙酮，冰水冷却后倾去丙 酮层，在真空干燥箱中使固体产物挥发掉残留 溶剂后称量，得到白色或蛋黄色蜡状卵磷脂产 品。
蛋黄 卵磷脂 生产工艺
蛋黄卵磷脂生产工艺
蛋黄卵磷脂是从鸡蛋黄中提取出的一种生物活性物质。
其生产工艺一般包括以下步骤：
1. 鸡蛋选择：选用无添加、无污染的新鲜鸡蛋。
2. 分离蛋黄：将鸡蛋打开，将蛋黄和蛋白分离。
3. 清洗蛋黄：将蛋黄清洗干净，去除污染物和杂质。
4. 酶解：将蛋黄加入酶解液中，在适宜的温度、酸碱度和时间下进行酶解。
5. 分离卵磷脂：酶解后的蛋黄中含有卵磷脂和其他物质，需要通过分离纯化的方法将卵磷脂分离出来。
6. 浓缩、干燥：通过浓缩和干燥等方法将卵磷脂处理成粉末状，以便于存储和使用。
以上步骤均需要在高水平的生产流程控制下进行，以保证蛋黄卵磷脂的质量和安全性。
蛋黄中卵磷脂的提取项目报告
蛋黄中卵磷脂的提取项目报告引言卵磷脂是一种重要的生物分子，广泛存在于生物体组织细胞膜中，在保护细胞、保持细胞健康和参与代谢过程等方面发挥着重要的作用。
蛋黄中富含卵磷脂，因此从蛋黄中提取卵磷脂具有重要的意义。
本报告旨在介绍卵磷脂提取的方法和操作过程，并探讨蛋黄中卵磷脂提取的优化条件。
材料和方法1. 实验材料鸡蛋黄，氯仿，乙醇，硫酸钠，硫酸铜，脱色活性炭。
2. 实验步骤(1) 蛋黄分离将鸡蛋清与蛋黄分开，将蛋黄逐个捞出并洗净。
(2) 蛋黄液的制备将洗净的蛋黄放入搅拌机中，加入适量的盐水，混合均匀，制成蛋黄液。
(3) 卵磷脂的提取取一定量的蛋黄液，按体积比例1:1加入氯仿，搅拌30秒，放置静置。
收取上层乳白色的液体，转移到新的容器中。
(4) 脱色处理加入少量的脱色活性炭，并摇晃混匀。
静置15分钟，然后用过滤器分离出脱色后的液体。
(5) 卵磷脂提取量的测定将卵磷脂溶解在正丁醇中，然后用硫酸钠和硫酸铜定量，计算出卵磷脂的提取量。
结果和讨论本实验通过以上步骤从蛋黄中成功提取卵磷脂，并计算出提取量。
但是，在实验过程中也发现了一些问题，如提取效率低、脱色效果不理想等，需要进一步优化。
提高提取效率的主要方法是改变溶剂体系、控制温度和加入乳化剂等。
比如，可以将氯仿与丙酮混合使用，或使用丙酮-水混合液代替氯仿。
此外，将温度控制在15-20℃范围内也有助于提高提取效率。
最后，加入乳化剂，如十六烷基三甲基溴化铵等也可以提高提取效率。
对于脱色效果不理想的问题，可以通过添加更多的脱色活性炭和增加脱色时间来解决。
同时，调整溶液的pH值也可能改善脱色效果。
结论本实验成功地从蛋黄中提取了卵磷脂，但提取效率和脱色效果需要进一步优化。
通过改变溶剂体系、温度控制和加入乳化剂等方法，可以提高提取效率。
此外，采用更多的脱色活性炭和延长脱色时间以及调整溶液pH值可以改善脱色效果。
实验五、蛋黄中卵磷脂的提取、纯化与鉴定
实验五：蛋黄中卵磷脂的提取、纯化与鉴定一、实验目的⏹掌握从鲜鸡蛋中提取卵磷脂的方法与原理。
⏹卵磷脂鉴定的方法与原理。
⏹加深了解磷脂类物质的结构和性质。
二、实验内容磷脂是一类含有磷酸的脂类，机体中主要含有两大类磷脂，由甘油构成的磷脂称为甘油磷脂（phosphoglyceride）；由神经鞘氨醇构成的磷脂，称为鞘磷脂（sphingolipid）。
其结构具有由磷酸相连的取代基团（含氨碱或醇类）构成的亲水头（hydrophilic head）和由脂肪酸链构成的疏水尾（hydrophobic tail）。
在生物膜中磷脂的亲水头位于膜表面，而疏水尾位于膜内侧。
磷脂是重要的两亲物质，它们是生物膜的重要组分、乳化剂和表面活性剂。
磷脂依照氨基醇的不同可分：（1）磷脂酰胆碱（卵磷脂）（PC），分布：植物主要有大豆等，动物主要有脑、精液、肾上腺、红细胞，蛋卵黄（8-10%）。
其主要作用是控制肝脂代谢，防止脂肪肝的形成；（2）、磷脂酰乙醇胺（脑磷脂）（PE），参与血液凝结；（3）、磷脂酰丝氨酸（PS）；（4）、磷脂酰肌醇（PI）；（5）、磷脂酰甘油（PG）；（6）、二磷脂酰甘油（心磷脂）。
蛋黄磷脂属动物胚胎磷脂，含有大量的胆固醇和甘油三酯及许多人体不可缺少的营养物质和微量元素。
卵磷脂是生命的基础物质，人类生命自始至终都离不开它的滋养和保护。
卵磷脂存在于每个细胞之中，更多的是集中在脑及神经系统、血液循环系统、免疫系统以及肝、心、肾等重要器官。
卵磷脂也被誉为与蛋白质、维生素并列的“第三营养素”。
蛋黄卵磷脂可将胆固醇乳化为极细的颗粒，这种微细的乳化胆固醇颗粒可透过血管壁被组织利用，而不会使血浆中的胆固醇增加。
三、实验原理、方法和手段原理一：卵磷脂是生物体组织细胞的重要成分，主要存在于大豆等植物组织以及动物的肝、脑、脾、心、卵等组织中，尤其在蛋黄中含量较多(10%左右)。
卵磷脂和脑磷脂均溶于乙醚而不溶于丙酮，利用此性质可将其与中性脂肪分离开；卵磷脂能溶于乙醇而脑磷脂不溶，利用此性质又可将卵磷脂和脑磷脂分离。
实验八、蛋黄卵磷脂的制备
1、鸡蛋黄卵磷脂的制备工艺原理和方法。
《专业综合实验2》
教学方法：讲授、实际指导。 教学时数：8学时。 教学过程:
三、实验原理
卵磷脂最早发早发现于1844年，由法国学者葛布利（Gobley） 从蛋黄中分离出来，故而得名。卵磷脂是构成生物体细胞膜的重 要成分之一，广泛存在于动植物体内。虽然许多食物中都含有一 定的卵磷脂，其中大豆、卵黄和动物肝脏中的卵磷脂含量较高。 卵磷脂既是一种重要且安全的食品乳化剂，有事一种保健食品。 此外还广泛应用于临床上心脑血管及肝、肿瘤等疾病的治疗，及 作为药物载体。
《专业综合实验2》
将2.5g粗卵磷脂溶于25ml无水乙醇中，加入相当 于卵磷脂质量10%的Zncl2的水溶液3ml，室温下搅 拌0.5h，得金属盐卵磷脂络合物沉淀，过滤，收集 沉淀物。加入冰冷丙酮50ml洗涤沉淀物，搅拌1h， 过滤，收集沉淀物，置搪瓷盘中摊平，厚度不易超 过1.5cm，40℃左右减压真空干燥2～4h，可得淡黄 色蜡状的精制卵磷脂，准确称量，记录。
收集上清液45下减压蒸馏至近干用少量石油醚溶解得石油醚溶液于石油醚溶液中加入适量丙酮分离出沉淀物置搪瓷盘中摊平厚度不易超过15cm40左右减压真空干燥24h得淡黄色的卵磷脂粗品准确称量记录
《专业综合实验2》
实验八、蛋黄卵磷脂的制备
化学与环境工程学院 主讲：孟江平
一、实验目的
《专业综合实验2》
1、了解并掌握鸡蛋黄卵磷脂的制备工艺原理 和方法。
《专业综合实验2》
三、实验实验方法与步骤
1、蛋黄的收集 采用放置于冰箱保存的新鲜鸡蛋。打蛋是要注意保 证蛋黄的完整性，分离蛋黄，备用。 2、卵磷脂的提取 取100g鸡蛋卵黄于烧杯中，加入200ml95%乙醇， 置磁力搅拌器室温下搅拌1h，3000r/min离心分离 10min，将沉淀物再加入95%乙醇，重复以上步骤3 次。收集上清液，45℃下减压蒸馏至近干，用少量石 油醚溶解，得石油醚溶液，于石油醚溶液中加入适量 丙酮，分离出沉淀物，置搪瓷盘中摊平，厚度不易超 过1.5cm，40℃左右减压真空干燥2～4h，得淡黄色 的卵磷脂粗品，准确称量，记录。 3、卵磷脂的纯化
高纯度蛋黄卵磷脂的制备工艺的开题报告
高纯度蛋黄卵磷脂的制备工艺的开题报告一、研究背景及意义磷脂是一类重要的生物大分子，在细胞膜的结构和功能中发挥着重要作用。
而蛋黄中含有高丰度的卵磷脂，因此成为了制备纯化磷脂的理想原料。
高纯度的蛋黄卵磷脂具有广泛的应用价值，例如用作制剂辅料，油脂乳化剂等。
但是，目前蛋黄卵磷脂制备工艺仍存在不少问题，例如分离不彻底、工艺复杂等因素，因此有必要对其制备工艺进行深入研究。
二、研究目的本文旨在通过实验研究，探究制备高纯度蛋黄卵磷脂的工艺，优化工艺参数，提高产品的产量和纯度，为其广泛应用提供可靠的基础研究。
三、研究内容1、收集蛋黄原料，进行简单的处理提取出蛋黄卵磷脂。
2、优化脱脂处理过程的各项关键参数的选择，包括温度、溶剂的种类、比例以及分配辅酶A相、脂肪酸等组分的时间、顺序和比例等。
3、采用酸水解法和碱水解法相结合的方法，以最大程度上提高合成产率和单一磷脂的含量为目的，处理试验产物干燥后，使用乙酸乙酯或氯仿等多种溶剂进行提取和纯化。
4、对制备的高纯度蛋黄卵磷脂进行结构表征，包括紫外-可见吸收光谱、质谱、核磁共振等技术。
五、研究方法1、从鸡蛋中提取蛋黄原材料，采用脱脂法，移去余油，得到纯净的蛋黄卵磷脂；2、通过正交试验等方法，优化脱脂处理过程的各项关键参数；3、在优化脱脂处理过程的基础上，采用酸水解法和碱水解法相结合的方法，提取和纯化试验产物；4、通过紫外-可见吸收光谱、质谱、核磁共振等技术，对制备的蛋黄卵磷脂进行结构表征。
六、预期成果及其意义通过本次实验的开展，在制备高纯度蛋黄卵磷脂的工艺探索中对各关键参数优化，得到高产高纯的蛋黄卵磷脂，并为其后续在制药、食品等领域的应用奠定了基础。
同时也为蛋黄卵磷脂制备工艺的进一步改进提供了参考和指导。
蛋黄卵磷脂
蛋黄卵磷脂蛋黄卵磷脂本品系从鸡蛋黄提取精制而得的磷脂混合物。
含氮（N）应为1.75%～1.95%，含磷（P）应为3.5%～4.1%，含磷脂酰胆碱（PC）应大于72.0%，含磷脂酰乙醇胺（PE）应不得过10.0%。
本品系以蛋黄粉为原料，经丙酮处理、脱油、脱水，再用无水乙醇提取精制而得。
本品为乳白色或淡黄色的粉末或蜡状固体，具有轻微的特臭，触摸时有轻微滑腻感。
本品在乙醇、乙醚、氯仿或石油醚（沸程40～60(C）中溶解，在丙酮和水中几乎不溶。
皂化值应为195～212（附录ⅦH）。
【中文名称】蛋黄卵磷脂【英文名称】Danhuangluanlinzhi【英文别名】Egg Yolk Lecithin【CAS】[93685-90-6]卵磷脂是人体细胞的重要营养源，是构成神经组织的重要成分，属于高级神经营养素。
卵磷脂在人体中占体重的1％左右，但在大脑中却占到脑重量的30％；而在脑细胞中占到70-80％。
卵磷脂集中存在于脑、神经系统、血液循环系统、免疫系统及心、肝、肺、肾等重要器官，使人体细胞膜的基本组成部分。
细胞膜是细胞的卫士，它决定了细胞之间能量和信息的传递。
因此与蛋白质、维生素并列为“第三营养素”。
人的一生各个阶段都不能缺乏卵磷脂：--青少年缺乏卵磷脂，大脑及智力发育迟缓；--成年人缺乏卵磷脂，大脑疲劳，反应迟钝、头昏头痛、记忆减退；--孕妇缺乏卵磷脂，影响胎儿大脑的正常发育，甚至异常；--中老年人缺乏卵磷脂，易患老年痴呆、高血脂症、动脉粥样硬化。
显然，卵磷脂具有多项生理调节功能，能促进人体新陈代谢、提高智力、增强免疫力、预防疾病、增进健康，尤其是卵磷脂中所含的磷脂酰胆碱是神经“信号”的传递介质。
神经系统缺乏这一重要“介质”，人体将大幅度降低思维和神经传导的敏捷性。
正如美国唐诺.布朗博士所说：“没有哪一种营养素像卵磷脂一样能在那么多方面作用来增进、保持人们的健康和青春活力。
”本品选用的是从蛋黄中分离出来的蛋黄卵磷脂,属动物胚胎磷脂，含有人体不可缺少的营养物质包括微量元素。
实验二：鸡蛋卵磷脂的制备与检测(薄层色谱技术)
生化分离工程实验实验二：鸡蛋卵磷脂的制备与检测（薄层色谱技术）实验项目：蛋黄中卵磷脂的提取与TLC检测实验原料：鲜鸡蛋、纯化卵磷脂实验试剂：乙醇-石油醚（3:1）混合试,丙酮（pH8),1mol/L 的碳酸钠溶液，硅胶，蒸馏水实验仪器：旋转蒸发仪、恒温水浴箱、真空泵、布氏漏斗、抽滤瓶、电子天平烘箱、固定厚度涂布器、方形层析缸、玻璃板、研钵。
辅助器材：毛细管、玻璃棒、滤纸、漏斗、10ml 量筒、50ml 量筒、烧杯，圆底烧瓶等。
参考文献：[1]谭天伟. 生物分离技术.北京：化学工业出版社.，2007.7[2]蒋本国，王艳颖，李春斌，刘秋.生物化学实验.大连民族学院。
2010.7[3]刘宝全. 生化分离工程实验讲义（内部试用版）.大连民族学院生命科学院.2011.6操作步骤：操作说明及结果纪录：1取10.0g 鸡蛋黄↓2蛋黄用30ml 丙酮（pH8）搅拌1h↓3过滤后，滤渣用丙酮洗2-3 次↓↘收集滤渣4用30ml 乙醇-石油醚（3:1）混合试剂搅拌浸提1h↓↘收集滤液5抽滤↓6旋转蒸发（40℃）↓7收集产品，进行检测TLC 检测制板称取 20 g 孔径为 6 nm 的硅胶 60, 用45mL 1- 1mol·L 的碳酸钠溶液稀释, 置于研钵中研磨, 调成均匀的糊状物, 用涂布器将糊状物均匀地铺在玻璃板上, 铺完后于室温下风干, 使用前在110 ℃烘箱中活化。
↓点样用毛细管在层析板距下端 2. 5 cm 处点两个样,自制卵磷脂样品和标准品, 样点的间距为3 cm。
↓展开将展开剂置于层析缸中平衡 30m in, 使溶剂的蒸汽压在层析缸中达到平衡, 然后放入层析板, 溶液自下而上在层析板上展开, 上升速度约 6 cm/h 当展开到层析板高度的3/4 处即可取出, 置室温下干燥。
↓显色将显色剂均匀地喷雾在层析板上, 可立即看到有蓝色斑点出现提取卵磷脂的关键步骤1.抽滤时滤纸的剪法选择大小合适的布氏漏斗，放在滤纸上，用铅笔绕着漏斗的外径画圈，在滤纸上对应漏斗径尖头处的方向画个箭头，以便于放滤纸时好找方向。
卵磷脂
1方法1.1 蛋黄卵磷脂的粗提首先将蛋黄均质放入带塞瓶中备用，称取一定量的均质蛋黄放入洁净的带塞三角瓶中，加入一定量的乙醇，搅拌30min后，静置一定时间；然后加入1/3乙醇用量的乙醚，搅拌15min后，静置相同的时间；接着过滤；滤渣进行二次提取，加入乙醇与乙醚的混合液(体积比为3:1)，无需搅拌静置浸渍相同时间；第二次过滤，合并二次滤液，低温减压旋转蒸发浓缩至少量，加入一定量丙酮除杂，卵磷脂即沉淀出来，过滤，滤饼用丙酮冲洗几次，至到冲洗液无色，即得到卵磷脂粗品，在真空干燥箱中干燥后，充入氮气低温保存。
1.2柱层析分离纯化卵磷脂将适量的柱硅胶(60～100目)用氯仿打成浆状，湿法装柱，准确称量卵磷脂粗品(EPC)2.63g用尽可能少的氯仿溶解后，倒入柱子内。
用不同浓度梯度的氯仿/甲醇混合液连续冲洗(氯仿:甲醇分别用40:1、35:1、30:1、25:1、20:1、15:1、10:1、5:1、1:1、2:3、1:2、1:3)，每个浓度以100ml 总量分批加入，当加入氯仿/ 甲醇浓度为1:1 时，以后的溶液加入量根据需要变大，即洗脱液梯度变化要慢些。
根据柱中色带及薄层层析不停的检测收集液的结果，分开收集各种不同成份的洗脱液，把出现单一斑点，且在同一块薄层板上与标品卵磷脂有同一R f值的洗脱液收集在一起，然后旋转蒸发浓缩成膏状，再在冻干机上干燥，即得我们所期望的纯白色的卵磷脂精品，充入氮气低温保存。
1.2卵磷脂的检测取硅胶G加入用蒸馏水配制的0.4%羧甲基纤维素钠(CMCNa)溶液搅成糊状，用涂敷器均匀地铺在10 cm×20 cm玻璃层析板上，薄层厚度0.3 cm，自然晾干后放入烘箱中活化1～2h，活化温度110～120℃，活化后的薄层板放入干燥器内备用。
将卵磷脂样品与对照品分别配成2%氯仿溶液，用硅胶板进行层析，展开剂为氯仿:甲醇:水(65:25:4)，层析完毕后，取出薄板，干燥，碘蒸气显色。
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盐和碳酸氢钠存量不足引起。胞囊纤维变性严重影响脂肪的吸收，摄入脂肪有
30%-60%吸收不良，因而会造成脂肪痢。溶血磷脂酰胆碱能使摄入脂肪移位，将 甘油一酯及脂肪酸在低共熔基质中相结合。在有碳酸氢钠离子及胆汁盐情况下， 变得容易吸收。 （4）健康心脏 证实卵磷脂对心脏健康有积极作用，因为它能调节胆固醇在人体内的含量、有效 降低胆固醇、高血脂及冠心病的发病率。
4、操作步骤 （1）取新鲜鸡蛋一只，除去蛋清取其蛋黄，加入 20ml95%乙醇混合搅拌，4000rpm,离心10min,回收上清液， 将沉淀物反复提取三次，抽滤回收上清液，合并二次滤 液 （2）滤液进行减压蒸馏至近干，得到黄色油状物，用石 油醚洗下油状物，加丙酮分离沉淀物，及粗卵磷脂 （3）按20g卵磷脂：250ml无水乙醇，溶解粗卵磷脂，滴 加60%ZnCl2沉淀卵磷脂，直至不产生沉淀，抽滤 （4）加10ml左右冰丙酮洗涤搅拌，至丙酮溶液为近无色， 抽滤得到白色蜡状精制卵磷脂
二、蛋黄卵磷脂的制备
制取蛋黄卵磷脂的方法有很多，有有机溶剂法，无机盐复合沉淀法，乙酸乙酯 纯化法，超临界CO2萃取法等，这里着重介绍有机溶剂法 1、实验原理
有机溶剂法是根据蛋黄中各组分在溶剂中的溶解度不同而进行分离的。
室 温 下 , 取 10mL 新 鲜 蛋 黄 用 两 倍 体 积 的 乙 醇 进 行 提 取 , 混 合 搅 拌 , 离 心 (3000r/min)5min,将沉淀物重复抽提几次后,取上清液,60℃蒸馏至近干,加入丙酮,分
项目三：蛋黄卵磷脂的制 备
姓名：朱 鹏 飞 学号：2012040941 组别： 7 组 班级：生物技术1211
目录：
一、蛋黄卵磷脂的相关知识 二、蛋黄卵磷脂的制备
三、蛋黄卵磷脂的检测 四、卵磷脂在生活中的价值与应用
一、蛋黄卵磷脂的相关知识
磷脂最早是由Uauquelin于1812年从人脑中发现，Golbley于1844年从蛋黄中 分离出来，并于1850年按照希腊文lekithos（蛋黄）命名为Lecithin（卵磷脂）,
（2）脂肪酸的检测：沉淀中加入水，并加入硝酸后用胶头滴管加入两滴10%醋酸 铅，观察清液变浑浊，液体中有入1%CuSO4 1滴于试管中，滴加2滴20%NaOH溶
液，振摇，溶液呈蓝色，有些许絮状物，加入1mL水解液，振摇，溶液稍许浑浊， 颜色变深。 （4）胆碱的检查：加入1mL水解液于试管中，滴加硫酸酸化，以pH试纸试之，加 入1滴碘化铋钾溶液，观察得溶液呈淡黄色且有絮状物。
脂，可使大脑神经及时得到营养补充，保持健康的工作状态，利于消除疲劳，激
化脑细胞，改善因神经紧张而引起的急躁、易怒、失眠等症。 另外，吸烟的人应该多多的补充卵磷脂。
因为有这些生物学功能，常有以下的应用
① 保护肝脏 ② 健康心脏
③ 促进大脑发育，增强记忆力，预防老年痴呆症 ④ 血管的“清道夫” ⑤ 糖尿病患者的营养品（卵磷脂不足会使胰脏机能下降，无法分泌充分 的胰岛素，不能有效地将血液中的葡萄糖运送到细胞中，这是导致糖 尿病的基本原因之一。） ⑥ 有效地化解胆结石（体内过多的胆固醇会发生沉淀，从而形成胆结石， 胆结石90%是由胆固醇组成。）
⑩ 良好的心理调和剂 因此它的适用人群是：婴幼儿，学生、知识分子及中老年人，长期饮酒、 营养过剩及脂肪肝患者，、糖尿病患者，胆结石患者，爱美的女士，便秘人群。
谢谢观赏！
2、薄层层析法 含义：薄层层析是将吸附剂或者支持剂（有时加入固化剂）均匀地铺在一块玻璃上， 形成薄层。把欲分离的样品点在薄层上，然后用适宜的溶剂展开，使混合物得以分
离的方法。由于层析在薄层上进行故而得名。
（1）制板 称取20 g 孔径为6 nm 的硅胶60, 用45mL 1- 1mol•L 的碳酸钠溶液稀释, 置于研钵中研磨, 调成均匀的糊状物, 涂布器将糊状物均匀地铺在玻璃板上, 铺完后于室温下风干, 使用 前在110 ℃烘箱中活化。 （2）点样 用毛细管在层析板距下端2. 5 cm 处点两个样,自制卵磷脂样品和标准品, 样点的间距为 3 cm。
所以又称为蛋黄素，并以希腊文命名为Lecithos（卵磷脂）。
卵磷脂属于一种混合物，是存在于动植物组织以及卵黄之中的一组黄褐色 的油脂性物质，卵磷脂是生物膜的重要组分 , 其构成成分包括磷酸、胆碱、脂 肪酸、甘油、糖脂、甘油三酸酯以及磷脂。卵磷脂被誉为与蛋白质、维生素并 列的“第三营养素”。 蛋黄中含有丰富的卵磷脂，牛奶、动物的脑、骨髓、心脏、肺脏、肝脏、 肾脏以及大豆和酵母中都含有卵磷脂。其中又以属蛋黄、大豆和动物肝脏的含 量最高，鸡蛋中的卵磷脂品质最高，但是难以提取，这使得其价格堪与黄金相 媲美。
能力。卵磷脂是一种天然的解毒剂，它能分解体内过多的毒素，并经肝脏和肾脏 的处理排出体外，正常人体内含有许多毒素，特别是在肠道内，当这些毒素含量 过高时，便会随着血液循环沉积在皮肤上，从而形成色斑或青春痘。再加上卵磷 脂良好的亲水性和亲油性，缺乏会导致皮肤粗糙、有皱纹。另外，卵磷脂所含的 肌醇还是毛发的主要营养物，能抑制脱发，使白发慢慢变黑。 （7）调剂心理 社会竞争日趋激烈，人们长期处在紧张的环境和种种压力下，常患有焦虑、急躁、 易怒、失眠、耳鸣等症，即植物神经紊乱，通常被称为神经衰弱。经常补充卵磷
离沉淀物,真空干燥30min,得到淡黄色粗制卵磷脂,称重.
2、实验流程
熟鸡蛋蛋黄
加乙醇研磨（乙醇萃取） 蒸发 加丙酮搅拌
抽滤
将过滤液移入蒸发皿 加氯仿溶解油状物
黄色油状物 离心 成品
3、原料、试剂、仪器与器材
原料：熟鸡蛋一个 试剂：95%乙醇溶液、丙酮溶液、乙醚 仪器与器材：烧杯、研钵、布氏漏斗、玻璃棒、量杯、真空 干燥箱、电炉、蒸发皿
（3）展开 将展开剂置于层析缸中平衡30m in, 使溶剂的蒸汽压在层析缸中达到平衡, 然后 放入层析板, 溶液自下而上在层析板上展开, 上升速度约6 cm/h 当展开到层析板 高度的3/4 处即可取出, 置室温下干燥。 （4）显色 将显色剂均匀地喷雾在层析板上, 可立即看到有蓝色斑点出现
四、卵磷脂在生活中的价值与应用
⑦ 胎、婴儿神经发育的必需品（人体脑细胞约有150亿个，其中70%早在
母体中形成。婴幼儿时期是大脑形成发育最关键时期，卵磷脂可以促 进大脑神经系统与脑容积的增长、发育。为了促进胎儿脑细胞能健康 发育，孕妇补充足够的卵磷脂是很重要的。） ⑧ 消除青春痘、雀斑并滋润皮肤 ⑨ 卵磷脂可以促进肠胃血液循环及肠胃蠕动，有助于预防及改善便秘
三、蛋黄卵磷脂的检测
检测卵磷脂的方法有检测水解产物、薄层层析法、和紫外光吸收光谱法，这 里重要介绍检测水解产物和薄层层析法 1、检测水解产物法 检测原理：卵磷脂可在碱性溶液中加热水解，得到甘油、脂肪酸、膦酸和胆酸。 （1）水解：在卵磷脂中加入20%氢氧化钠溶液并在沸水浴中水解，冷却过滤，得
到白色沉淀。
目前市场上的卵磷脂多是从大豆中提取，工业用卵磷脂的剂型主要有：液体、
颗粒、粉末三种，液体浓度在70%左右，颗粒及粉末可达95%以上。卵磷脂软胶 囊是以液体卵磷脂为原料加入甘油或大豆油稀释后，用明胶包裹而成，有效成分
含量低一般少于60%，价格较低，是大部分品牌卵磷脂采用的剂型。
它的功效有： （1）人体营养需要 人体所需的外源性胆碱90%是由卵磷脂提供，当膳食胆碱不足时，体内尚存卵磷 脂的内源资源即也可补充人体需要 （2）对血清脂质的调节作用 调节血清脂质水平意味着能降低胆固醇水平，保护肝脏，也能改善记忆力，加强 免疫力以及抗脂肪肝的活力。 （3）有助于胞囊纤维变性时对脂肪的吸收 胞囊纤维变性是一种外分泌腺失调，一般都是因为体内脂质有限，胰脂酶，胆汁
（5）有益大脑，增强记忆力，延缓衰老
脑神经细胞中卵磷脂的含量约占其质量的17%-20%。卵磷脂的充分供应保证充分 的“胆碱”与人体内的“乙酰”合成为“乙酰胆碱”，“乙酰胆碱”是大脑内的 一种信息传导物质，脑部的神经传导物质（乙酰胆碱）减少是引起老年痴呆的主 要原因，补充卵磷脂能提高脑细胞的活性化程度，提高记忆与智力水平。长期补 充卵磷脂可以减缓记忆力衰退的进程，预防或推迟老年痴呆的发生。 （6）滋润皮肤 卵磷脂是人体每一个细胞不可缺少的物质，如果缺乏，就会降低皮肤细胞的再生