血清总胆固醇测定
血清总胆固醇CHO测定
血清总胆固醇CHO测定1 检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。
2 实验原理胆固醇酯+H2O——→游离胆固醇+脂肪酸CO游离胆固醇+O2——→胆甾烯酮+ H2O2POD2H2O2+4-AAP+4-氯酚————→醌亚胺化合物在一定波长处比色，吸光率（△A）与T-CH浓度成正比。
3 标本：3.1 病人准备：应禁食12小时抽血，24h内不饮酒。
体检对象在抽血前24h内不作剧烈运动。
3.2 类型：血清。
3.3 标本存放留取标本后请尽快分离血清。
在冰箱保存的条件下（2～8℃）稳定3天， -20℃保存至少可以稳定3个月。
3.4 标本运输室温条件下运输。
3.5 标本拒收标准细菌污染的不能做测定。
4 实验材料4.1 试剂:宁波美康生物科技股份有限公司CHO测定试剂盒（浙械注准 20142400134）4.1.1 试剂组成R1试剂：三羟甲基氨基甲烷缓冲液 pH7.0 0.05mol/L胆固醇脂酶（CE） 800U/L胆固醇氧化酶（CO） 400U/L胆酸钠 3.5mmol/LR2试剂：4-氨基安替比林（4-APP） 1mmol/L辣根过氧化物酶（POD） 1000U/L4-氯酚 2.5mmol/L4.1.2 试剂准备试剂为即用式。
4.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。
试剂不可冰冻。
4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。
4.1.5 注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。
不可入口！避免接触皮肤及粘膜。
应采取必要的预防措施使用试剂。
4.2 校准品：使用雅培公司提供的TruCal U校准品对自动分析仪进行校准。
4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。
5.仪器AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪。
血清总胆固醇的测定
实验原理
• 第一步：血清胆固醇酯可被胆固醇酯酶水 解为游离胆固醇和游离脂肪酸 。
• 第二步：胆固醇在胆固醇氧化酶的氧化作 用下生成△4-胆甾烯酮和H2O2。
• 第三步：H2O2在4-氨基安替比林和酚存在 时，经过氧化物酶催化，反应生成苯醌亚 胺非那腙的红色醌类化合物，其颜色深浅 与标本中TC含量成正比。
• 鱼类。乌鱼又称黑鱼性寒味甘，能补脾利水同时 它又是一种高蛋白低脂肪食品。青鱼性平味甘， 能补气健脾化湿。鳆鱼又称鲍鱼，肉性平味甘咸， 蛋白质含量极高，而脂肪含量很低的清补营养品。 黄鳝甘温，古代医家认为它有添精益髓，又有通 血脉、壮筋骨的作用同时它又是一种低脂食品。 另外，如黄瓜、海带、羊栖菜、海藻、槐花等食 物，均有降低血中胆固醇的效果。
试剂
• 基础液：100ml 0.1mol/L 磷酸缓冲液 （pH=6.7）(含胆酸钠129mg),4-氨基安替 比林16mg,苯酚132mg,TritionX-100 0.2ml
• 酶试剂应用液：临用前取商品三酶（胆固 醇酯酶，胆固醇氧化酶，过氧化物酶）合 剂1ml,加基础液30ml,混匀既得
• 胆固醇标准液（5.17mmol/L）:精准称取胆 固醇200mg,用纯无水乙醇溶解，用乙醇定 容至100ml，分装4ºC保存，临用时取出
注意事项
• 1、最后加酶试剂，各管反应时间应一致； • 2、比色应在30min内完成； • 3、试管在操作前尽量保持干燥； • 4、试剂中酶的质量影响测定结果 ； • 5、若需检测游离胆固醇浓度，将酶试剂成
分中去掉胆固醇酯酶即可。
• 此法中血红蛋白高于2g/L时引起正干扰；胆 红素高于0.1g/L时有明显负干扰；血中维生 素C与甲基多巴浓度高于治疗水平时，会使 结果降低。高TG血症对本法无明显影响。 检测TC的血清(浆)标本密闭保存时，在4℃ 可稳定1周，－20℃可稳定半年以上。
血清总胆固醇测定实验报告
血清总胆固醇测定实验报告血清总胆固醇测定实验报告胆固醇是一种脂类物质，它在人体中起着重要的生理作用。
然而，当胆固醇水平过高时，就会增加心血管疾病的风险。
因此，了解自己的胆固醇水平对于保持健康至关重要。
本实验旨在测定血清中的总胆固醇水平，并通过结果分析对参与者的健康状况进行评估。
实验材料和方法：1. 实验材料：- 血清样本- 高精度血清胆固醇测定试剂盒- 试剂盒使用说明书- 分光光度计- 定量移液器和移液枪- 试管和离心管2. 实验步骤：a. 收集参与者的血液样本，并将其离心分离血清。
b. 根据试剂盒使用说明书，准备所需试剂和标准品。
c. 将标准品和血清样本分别加入试管中，并按照说明书中的步骤进行试剂添加和混合。
d. 使用分光光度计测量各试管中的吸光度，并记录结果。
e. 根据标准曲线计算出各样本中的总胆固醇浓度。
实验结果：通过实验测定，我们得到了参与者血清中的总胆固醇浓度。
根据标准曲线和试剂盒提供的计算公式，我们可以将各样本的吸光度值转换为胆固醇浓度。
根据实验数据，我们将参与者的胆固醇水平分为以下几个等级：1. 理想范围：参与者的胆固醇水平在正常范围内，表明其心血管健康状况良好。
他们应继续保持健康的生活方式，包括均衡的饮食、适当的运动和定期体检。
2. 边缘范围：参与者的胆固醇水平略高于正常范围，但尚未达到危险水平。
他们应该注意饮食结构，减少高胆固醇食物的摄入，并增加运动量。
此外，定期监测胆固醇水平也是必要的。
3. 高风险范围：参与者的胆固醇水平明显升高，表明他们存在心血管疾病的风险。
他们应立即采取行动，改变生活方式，如低脂饮食、戒烟、减少酒精摄入等。
此外，医生可能会建议他们接受进一步的检查和治疗。
实验讨论：通过本实验，我们不仅可以测定参与者血清中的总胆固醇水平，还可以根据结果评估其心血管健康状况。
然而，需要注意的是，本实验只是初步评估，并不能替代专业医生的诊断和建议。
对于高风险范围的参与者，他们应该咨询医生，制定个性化的治疗方案。
血清总胆固醇TC测定操作规程
血清总胆固醇TC测定操作规程.docx血清总胆固醇（TC）测定操作规程1. 目的本操作规程旨在规范血清总胆固醇（TC）的测定过程，确保检测结果的准确性和重复性。
2. 原理血清总胆固醇（TC）测定通常采用酶法，通过胆固醇酯酶将胆固醇酯水解为游离胆固醇，然后利用胆固醇氧化酶将游离胆固醇氧化为胆甾酮和H2O2，最后利用过氧化物酶将H2O2分解为2H2O和O2，同时产生颜色变化。
颜色的深浅与血清中胆固醇含量成正比，可通过比色法测定。
3. 试剂和材料酶试剂盒（含胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶、过氧化物酶等）校准品和质控品血清样本蒸馏水移液枪及吸头比色杯恒温水浴箱自动生化分析仪或分光光度计4. 操作步骤4.1 准备工作确保所有试剂和样本均已在室温下平衡至25°C。
校准生化分析仪或分光光度计至适当的波长（通常为500-550nm）。
4.2 试剂准备根据试剂盒说明书，将酶试剂混合均匀，并预热至25°C。
4.3 样本处理取适量的血清样本，避免溶血和脂血样本。
如有必要，对样本进行离心，去除沉淀物。
4.4 加样使用移液枪准确取样，将血清样本加入比色杯中。
按照试剂盒说明书，加入等量的酶试剂至每个比色杯中。
4.5 反应将比色杯放入恒温水浴箱中，保持37°C反应一定时间（通常为5-10分钟）。
4.6 比色测定将反应后的比色杯放入自动生化分析仪或分光光度计中。
读取吸光度值，并根据标准曲线计算血清总胆固醇浓度。
5. 质量控制每次测定前，使用校准品进行仪器校准。
定期使用质控品进行质量控制，确保结果的准确性和稳定性。
6. 结果记录与报告记录所有测定结果，包括吸光度值、胆固醇浓度等。
根据医院或实验室的标准操作程序，编写并发布检测报告。
7. 安全注意事项操作时应穿戴适当的个人防护装备，如手套和实验服。
避免接触试剂和样本，尤其是避免吸入和摄入。
按照当地法规处理废弃物。
8. 维护和校准定期对生化分析仪或分光光度计进行维护和校准，确保仪器的准确性。
血清总胆固醇的测定和血清蛋白分离实验
血清总胆固醇的测定实验目的：测量血清中总胆固醇的含量实验原理：胆固醇酯加水在胆固醇酯酶的催化下生成游离胆固醇和脂肪酸。
游离胆固醇加氧在胆固醇氧化酶作用下生成胆烷4-烯-3-酮和过氧化氢，过氧化氢再加4-氨基安替比林和酚在过氧化物酶的作用下生成醌亚胺，醌亚胺在500nm 有特异吸收峰，吸收的强度与胆固醇含量成正比。
反应如下：胆固醇酯+H 2O 胆固醇酯酶→ 游离胆固醇+脂肪酸游离胆固醇+O 2 胆固醇氧化酶→ 胆烷-4-烯-3-酮+H 2O 2H 2O 2+4-氨基安替比林+酚过氧化物酶→ 醌亚胺染料+H 2O 实验操作：取干净干燥的小试管3支，标号，按下表操作混匀，置37℃水浴5-6分钟，以空白管校零，在500nm 波长下比色读取各管吸光度。
实验结果：As= 0.214 A T =0.143标准管胆固醇含量mmol/L=5.00mmol/L测定管胆固醇含量mmol/L=3.34mmol/L分析讨论：为保证实验结果准确，滴加液体时可以先滴加量少的液体，再滴加含量较大的血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳实验目的：醋酸纤维薄膜电泳把血清蛋白分离，并测定血清蛋白种类实验原理：带电颗粒在电场作用下，向着与其所带电性相反的电极移动，称电泳。
醋酸纤维薄膜电泳可把血清蛋白分离为：清蛋白、α1、α2、β、γ-球蛋白5条区带实验操作：1.点样：取在缓冲液中浸泡的醋酸纤维薄膜一条（2.5×8cm），轻轻夹于滤纸中，吸去多余的缓冲液，在薄膜的毛面上距一端约1.0cm～1.5cm处，用点样气沾上血清后迅速压一下，然后将毛面向下使两端紧贴在四层滤纸上，加盖，平衡2～3分钟，通电电泳。
2.电泳：恒压120V，0.6mA/cm，时间50～60分钟。
3.染色：电泳完毕后，关闭电源，将薄膜取出，直接浸入氨基黑染色液中染色，取出用漂洗液浸洗3～4次，至背景完全无色为止。
实验结果:电泳后出现5条区带，从正极到负极，分别为清蛋白、α1、α2、β、γ，点样线。
血清总胆固醇测定标准操作规程
血清总胆固醇测定标准操作规程1.检验原理：（氧化酶法）血清中总胆固醇（TC ）包括游离胆固醇（FC ）和胆固醇酯（CE ）两部分。
血清中胆固醇可被脂蛋白酯酶水解为游离胆固醇和游离脂肪酸（FFA ），胆固醇在胆固醇氧化酶的氧化作用下生成胆甾烯酮和过氧化氢，过氧化氢在4-氨基安替比林和对羟基苯甲酸钠存在时，晶过氧化物酶（POD ）催化，反应生成苯醌亚胺非那腙的红色醌类化合物，其颜色深浅与标本中TC 含量成正比。
胆固醇酯+22O H −−−→−胆固醇酯酶胆固醇+脂肪酸 胆固醇+2O −−−−→−胆固醇氧化酶胆甾烯酮+22O H 222O H +4-AA+对羟基苯甲酸钠−−→−POD红色醌类物质+422O H 2.试剂主要组成成分3.样本要求：新鲜无溶血血清。
在22～25℃保存8小时，2～8℃保48小时，-20℃可保存1年。
样本应避免反复冻融！4.检验方法；仪器法（详见DF-603/DI-600标准操作规程） 5参考范围：6.检验结果的解释：6.1样本含量超出线性范围时，建议用0.9%（W/V）的氯化钠溶液稀释样本。
6.2.单位换算：mg/dl=mmol/L×38.77.检验方法的局限性7.1结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。
7.2若试剂浑浊，或以水空白在500nm处吸光度大于0.080时不能使用。
8.试剂性能指标8.1试剂外观：无色透明或淡黄色液体，无悬浮物及沉淀。
8.2装量：不低于标识值。
8.3空白吸光度：在500nm处，光径1cm时，空白吸光度A≤0.0808.4线性区间：试剂的线性区间为[0.5-20.0]mmol/L，在此线性区间内：a）线性相关系数r应不小于0.9900；b)[2.0-20.0]mmol/L区间内，线性相对偏差不超过±10%。
8.5准确度：使用具有溯源性的标准品进行测定，实测值与标识值的相对偏差应在±10%内。
8.6分析灵敏度：在500nm处，光径1cm时，测量已知浓度样品换算成1mmol/L 的总胆固醇时，吸光度变化△Ammol/L≥0.0028.7批内精密度：CV≤4.0%8.8批间差：R≤6.0%8.9稳定性：（2-8）℃下，原包装存放的试剂有效期为12个月.取到期后1个月的试剂进行测试，应满足1-8.7的要求。
实验三血清总胆固醇的测定
二、样品测定
取3支试管编号后，分别加入试剂，与标准曲线同时作比色测定:
管号
对照
样品①
样品②
稀释的未知血清样品
(mL)
0
0.40
0.40
邻苯二甲醛试剂(mL)
0.20
0.20
0.20
冰乙酸(mL)
0.40
0
0
混合酸(mL)
4.00
4.00
混合酸：冰乙酸100mL与浓硫酸100mL混合。
标准胆固醇贮存液(1mg/mL：准确称取胆固醇100mg溶于冰乙
酸中，定溶至100mL
标准胆固醇工作液(0.1mg/mL):将上述贮存液以冰乙酸稀释10倍，即取10mL用冰
乙酸稀释至100mL
二、测试样品
0.1mL人血清以冰乙酸稀释至4.00mL。
三、器材
实验三 血清总胆固醇的测定
目的要求
了解并掌握胆固醇测定的原理和方法。
实验原理
血清胆固醇(chol)测定是动脉粥样硬化性疾病防治、 临床诊断和 营养研究的重要指标。正常人血清胆固醇含量范围为100 ~250mg/mL。
胆固醇是环戊烷多氢菲的衍生物，它不仅参与血浆蛋白的组成， 而且也是细胞的必要结构成分， 还可以转化成胆汁酸盐、 肾上腺皮质 激素和维生素D等。胆固醇在体内以游离胆固醇及胆固醇酯两种形式 存在，统称总胆固醇。总胆固醇的测定有化学比色法和酶学方法两类。 本实验采用前一种方法。
正常人血浆和血清中含有酯类虽多，但却清澈透明？
胆固醇及其酯在硫酸作用下与邻苯二甲醛产生紫红色物质， 此物
质在550nm波长处有最大吸收。因此，可用比色法作总胆固醇的定量 测定。胆固醇含量在400mg/100mL以内时，与光吸收值呈良好线性关 系。
血清总胆固醇测定实验报告
血清总胆固醇测定实验报告一、实验目的血清总胆固醇（Total Cholesterol，TC）测定是临床生化检验中的常见项目之一，本实验旨在掌握血清总胆固醇测定的原理、方法和操作步骤，熟悉实验过程中的注意事项，并对实验结果进行准确分析和判断。
二、实验原理目前，血清总胆固醇测定常用的方法是酶法。
其原理是胆固醇酯酶（CE）将胆固醇酯水解为游离胆固醇（FC）和脂肪酸，胆固醇氧化酶（COD）将 FC 氧化为胆甾烯酮和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶（POD）的催化下与 4-氨基安替比林（4-AAP）和酚反应生成红色醌亚胺。
在一定波长下，通过比色法测定吸光度，从而计算出血清总胆固醇的含量。
三、实验材料与设备1、材料血清样本：新鲜无溶血、无脂浊的血清。
试剂盒：包含胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶、过氧化物酶、4-氨基安替比林、酚等试剂。
2、设备分光光度计移液器恒温水浴箱离心机四、实验步骤1、样本处理空腹采集静脉血，置于干燥无抗凝剂的试管中，室温下静置 30 分钟使其凝固。
以 3000 转/分钟离心 10 分钟，分离血清，备用。
2、试剂准备按照试剂盒说明书的要求，将试剂 R1 和试剂 R2 分别配制好，并放置于恒温水浴箱中预热至规定温度。
3、测定操作取两支干净的比色管，分别标记为空白管和测定管。
空白管中加入蒸馏水20μL 和试剂R1 1000μL，混匀，置于 37℃恒温水浴箱中保温 5 分钟。
测定管中加入血清样本20μL 和试剂R1 1000μL，混匀，置于 37℃恒温水浴箱中保温 5 分钟。
然后，向空白管和测定管中分别加入试剂R2 500μL，混匀，置于37℃恒温水浴箱中保温 10 分钟。
4、比色测定以空白管调零，在分光光度计 500nm 波长处读取测定管的吸光度值（A）。
五、实验结果计算血清总胆固醇（mmol/L）＝（测定管吸光度空白管吸光度）×校准品浓度÷校准管吸光度六、实验结果本次实验测定的血清总胆固醇结果为_____mmol/L。
血清总胆固醇的测定实验报告
血清总胆固醇的测定实验报告胆固醇是人体内一种重要的脂质物质，它在维持细胞膜的完整性、合成激素和胆汁酸等方面发挥着重要作用。
然而，过高的血清总胆固醇水平会增加心脑血管疾病的风险。
因此，及时测定血清总胆固醇水平对于预防和治疗心脑血管疾病具有重要意义。
本实验旨在通过测定血清中总胆固醇的含量，掌握其测定方法，并了解不同因素对血清总胆固醇含量的影响，为临床诊断和研究提供参考。
1. 实验原理。
本实验采用酶法测定血清总胆固醇含量。
首先，将血清样本与试剂中的胆固醇酯酶和胆固醇氧化酶发生反应，将胆固醇酯水解成游离的胆固醇和脂肪酸，然后游离的胆固醇与试剂中的胆固醇氧化酶再次发生反应，生成过氧化物酶，最终生成带有颜色的化合物。
通过测定产生的有色产物的光密度，即可计算出血清中总胆固醇的含量。
2. 实验步骤。
（1）取适量血清样本，离心沉淀，取上清液备用。
（2）将标准品和上清液分别加入反应管中，加入试剂A和试剂B，混匀后放置37℃恒温水浴中反应一定时间。
（3）加入硫酸后，混匀放置10min，再加入试剂C混匀后放置2min。
（4）测定吸光度值，并根据标准曲线计算出血清总胆固醇的含量。
3. 实验结果。
通过实验测定，得出不同血清样本中总胆固醇的含量分别为X mg/dL、Ymg/dL和Z mg/dL。
根据实验结果，我们可以得出……（根据实验结果进行分析和讨论）。
4. 实验结论。
本实验通过酶法测定了血清中总胆固醇的含量，结果表明……（根据实验结果进行结论）。
5. 实验注意事项。
（1）在实验过程中，要注意血清样本的保存和处理，避免样本受到污染或变质。
（2）在试剂配制和使用过程中，要按照相关操作规程，严格控制试剂的质量和使用量。
（3）实验操作过程中，要注意实验室安全，避免发生意外。
6. 实验意义和应用。
本实验方法可以准确测定血清中总胆固醇的含量，为临床诊断和研究提供了重要的参考数据。
同时，也为进一步研究血清总胆固醇与心脑血管疾病的关系提供了实验基础。
血清总胆固醇(TCH)测定
授课对象：06级检验1-5班 课 时：2学时血清总胆固醇（TCH ）测定目 标：1.掌握酶法测血清TCH 的基本原理及注意事项。
2.熟练操作步骤。
3.了解TCH 测定的主要临床意义。
实验用品：总胆固醇酶试剂盒（3v ），，721型分光光度计，YZ-602稀释器，血清等。
内 容： 原理：胆固醇酯 + H 2O −−−−→−胆固醇酯酶胆固醇 + RCOOH胆固醇 + O 2 −−−−−→−胆固醇氧化酶Δ 4 -胆甾烯酮 + H 2O 2H 2O 2 + 4 – AA + 酚 −−−−→−过氧化物酶醌亚胺染料 + H 2O在500 nm 波长下比色测定，可求得标本内总胆固醇的含量。
操作步骤：加入物 R S B 血清（μl ） 15 — 标准液(μl) — 15 — 蒸馏水 — — 15 酶工作液(ml)1.51.51.5混匀，置37℃水浴6～10分钟。
以B 管校“0”，500 nm 波长比色，取A 值。
结果计算：TCH (mmol/L) = A R / A S × 5.17结果报告：TCH：mmol/L正常参考值： 2.33～5 .69mmol/L临床意义：TCH↑：常见于动脉粥样硬化等。
TCH↓：甲亢、严重贫血、急性感染等。
注意事项：1.试剂与样品的用量可按其比例放大缩小，计算公式不变。
2.溶血标本胆红素引起正偏差，维生素C、谷胱甘肽、氟化物引起负偏差。
3.样品中的总胆固醇＞15.5mmol/L, 用生理盐水稀释后再重新测定，结果乘以稀释倍数。
课后小结：。
胆固醇测定实验报告
本次实验旨在通过学习血清总胆固醇（Total Cholesterol，TC）的测定方法，掌握酶法测定胆固醇的原理和操作步骤，并了解血清总胆固醇在临床诊断中的应用。
二、实验原理血清总胆固醇的测定采用酶法，利用胆固醇酯酶将胆固醇酯水解为胆固醇和脂肪酸，再利用胆固醇氧化酶将胆固醇氧化为胆汁酸，同时生成过氧化氢。
在过氧化氢的作用下，加入的4-氨基安替比林和酚酞在酸性条件下生成红色化合物，其颜色深浅与胆固醇含量成正比。
通过比色法测定吸光度，即可计算出血清中胆固醇的含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 血清样品- 胆固醇酯酶试剂- 胆固醇氧化酶试剂- 4-氨基安替比林试剂- 酚酞试剂- 磷酸缓冲液- 96孔微孔板- 吸量器- 酶标仪2. 实验仪器：- 恒温水浴锅- 离心机- 移液器- 烧杯- 移液管1. 准备工作- 将所有试剂和器材准备好，并确保其清洁、干燥。
- 将血清样品进行编号，并在实验过程中注意避免交叉污染。
2. 样品处理- 取一定量的血清样品，按照实验要求进行稀释。
- 将稀释后的血清样品加入微孔板中，每孔加入一定量的胆固醇酯酶试剂。
3. 酶反应- 将微孔板放入恒温水浴锅中，在37℃下孵育一定时间，使胆固醇酯酶与胆固醇发生反应。
4. 洗板- 将微孔板取出，用去离子水冲洗3次，以去除未反应的酶和底物。
5. 添加试剂- 向每个微孔中加入一定量的胆固醇氧化酶试剂、4-氨基安替比林试剂和酚酞试剂。
- 加入磷酸缓冲液，使溶液pH值保持在酸性范围内。
6. 比色- 将微孔板放入酶标仪中，在特定波长下测定吸光度。
- 将吸光度值与标准曲线进行对比，计算出血清中胆固醇的含量。
7. 结果分析- 根据实验结果，分析血清总胆固醇水平与临床诊断的关系。
五、实验结果与分析1. 实验结果- 根据实验数据，绘制标准曲线，并计算出样品中胆固醇的含量。
2. 结果分析- 通过实验结果，了解血清总胆固醇水平与临床诊断的关系，为临床诊断提供依据。
血清总胆固醇测定实验报告
血清总胆固醇测定实验报告背景介绍：总胆固醇（TC）是指血浆中所有脂蛋白的胆固醇总和，包括低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和极低密度脂蛋白胆固醇（VLDL-C）。
总胆固醇水平的高低与心血管疾病的发生密切相关，因此对其进行准确测定具有重要的临床意义。
实验目的：通过本实验，掌握血清总胆固醇的测定方法，了解其在临床诊断中的应用。
实验原理：本实验采用酶法测定血清总胆固醇，其原理为将胆固醇酯酶和胆固醇氧化酶加入样本中，将胆固醇和脂蛋白水解为游离胆固醇和过氧化物，再由过氧化物与酚类物质发生反应，生成有色产物，最后通过比色计测定其吸光度，从而计算出总胆固醇的含量。
实验步骤：1. 取血清标本，离心分离血清。
2. 用标准吸光度计预热，设置波长为500nm。
3. 取适量样本和对照品，加入试剂A和试剂B，混匀后在37°C恒温水浴中反应15分钟。
4. 加入试剂C混匀，再在37°C恒温水浴中反应5分钟。
5. 用比色计在波长为500nm处对样本和对照品吸光度，计算总胆固醇含量。
实验结果：样本A吸光度为0.6，对照品吸光度为0.3，根据标准曲线计算出样本A的总胆固醇含量为5.0mmol/L。
样本B吸光度为0.7，对照品吸光度为0.4，计算出样本B的总胆固醇含量为6.0mmol/L。
实验结论：根据上述实验结果，样本A的总胆固醇含量正常，而样本B的总胆固醇含量超标，提示可能存在心血管疾病的风险。
因此，血清总胆固醇的测定对于心血管疾病的筛查和诊断具有重要意义，有助于及时采取预防和治疗措施。
总结：通过本次实验，我们掌握了血清总胆固醇的测定方法及其临床意义，了解了其在心血管疾病中的重要性。
在临床实践中，我们应该重视血清总胆固醇的监测，及时发现异常情况并采取相应的干预措施，以保障患者的健康。
血清总胆固醇测定
加毕，混匀，静置10分钟后，以对照管校0于550nm测 定吸光值，从标准曲线中查出相应的浓度。
• 吸光度与液层厚度和溶液浓度的乘积成正比，称
为朗伯—比尔定律，简称比尔定律，即光的吸收 定律。
• 吸光系数的大小，取决于物质(溶质、溶剂)的本性和光的波
长。 1. 物质不同，则吸光系数不同，所以吸光系数可作为物质的 特性常数。在分光光度法中，常用摩尔吸光系数ε来衡量显 色反应的灵敏度，ε值越大，灵敏度越高。 2. 溶剂不同，其吸光系数亦不同， 3. 光的波长不同，其吸光系数亦不同。如将不同波长的单色 光依次通过被分析物质，分别测得吸光度，然后绘制吸光 度—波长曲线，称为吸收曲线(absorption curve)，吸收曲 线上有极大值 的部分，称为吸收峰。吸收峰所对应的波长， 称为最大吸收波长，以符号λmax表示 ，这是物质定性的依 据之一。 4.单色光的纯度也影响吸光系数。单色光越纯，即经单色器分 光后的波长范围越窄，其吸光系数越大。
实
验
பைடு நூலகம்
五
血清总胆固醇的测定（邻苯二 甲醛法）
一、试验目的
• 学习分光光度计的原理及操作 • 学习用分光光度法测定胆固醇含量及
标准曲线的制作
二.
实验原理
• 根据物质对光的吸收特征和吸收强度，对物质进
行定性和定量的分析方法，称为分光光度法 (spectrophotometry)。该法具有一定的灵敏度和准 确度，分析手续较简便快速，仪器设备也不复杂， 故应用很广。
•
四、操作步骤 五.实验结果 六.结果讨论
管号
0
1 0.3
2 0.2
3 0.1
4 0
X(样品) 0.3
醋酸 0.4 液（毫 升） 标准胆 0
血清总胆固醇测定法
血清总胆固醇测定法1.实验原理胆固醇酯被胆固醇酯酶水解酶(CEH)水解成游离胆固醇，后者被胆固醇氧化酶(COD)氧化成胆甾烯酮并产生过氧化氢，再经过氧化物酶(POD)催化，使4-氨基安替比林与酚（三者合称PAP）反应，生成红色醌亚胺色素（Trinder反应）。
醌亚胺的最大吸光度在500nm左右，吸光度与标本中TC含量成正比。
反应式如下：CEH胆固醇酯+ H2O 胆固醇＋脂肪酸COD胆固醇＋O2Δ4-胆甾烯酮＋H2O2POD2H2O2+ 4-AAP +酚苯醌亚胺(显色) + 4H2O 2. 标本：2.1 病人准备：12小时禁食。
2.2 类型：血清，肝素或EDTA抗凝血浆。
3. 标本存放：血清稳定性：20～25℃保存可稳定1周；4～8℃保存可稳定1周；-20℃保存可稳定3个月。
4. 标本运输：常温条件下保存运输。
5. 标本拒收标准：细菌污染的标本。
6. 实验材料6.1 试剂欧泰克总胆固醇试剂盒（货号：112 1307170 1 试剂8×70ml）6.1.1 试剂组成Tris缓冲液pH7.3 50mmol/L酚20mmol/L4-氨基安替比林 1.0mmol/L 胆固醇酯酶(CHE) ≥400U/L 胆固醇氧化酶(CHO) ≥200U/L 过氧化物酶(POD) ≥4000U/L 6.1.2 试剂准备试剂为即用式。
6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。
试剂不可冰冻。
6.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。
6.1.5 注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。
不可入口！避免接触皮肤及粘膜。
应采取必要的预防措施使用试剂6.2 校准品：使用罗氏复合校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。
6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。
血清总胆固醇的测定实验报告
血清总胆固醇的测定实验报告一、实验目的。
本实验旨在通过测定血清中的总胆固醇水平，了解被检测者的心血管健康状况，为预防和治疗心血管疾病提供参考依据。
二、实验原理。
血清总胆固醇是指血液中所有脂蛋白和游离胆固醇的总和，通常以毫摩尔/升（mmol/L）为单位进行测定。
在实验室中，我们采用酶法测定血清总胆固醇，即通过酶的催化作用将胆固醇氧化成酮醇，然后通过比色法测定产生的色素来确定总胆固醇的浓度。
三、实验步骤。
1. 采集被检测者的静脉血样本，放置于离心管中，离心10分钟后取上清液。
2. 将上清液放入试剂盒中，按照说明书的操作步骤进行样本处理和试剂添加。
3. 使用分光光度计测定样本吸光度，根据标准曲线计算出血清总胆固醇的浓度。
四、实验结果。
根据实验测定，被检测者的血清总胆固醇水平为X mmol/L。
五、实验分析。
根据血清总胆固醇的测定结果，结合被检测者的年龄、性别、生活方式等因素，可以初步判断其心血管健康状况。
若总胆固醇水平偏高，可能存在心血管疾病的风险，需要进一步进行相关检查和干预措施。
若总胆固醇水平正常，被检测者的心血管健康状况良好。
六、实验注意事项。
1. 在采集血样和进行实验操作时，要严格遵守无菌操作规范，确保实验结果的准确性和可靠性。
2. 实验过程中要注意化学试剂的使用安全，避免接触皮肤和吸入气体，必要时戴上防护手套和口罩。
3. 实验设备的使用和维护要符合相关规定，保证设备的正常运转和数据的准确性。
七、实验结论。
通过本次实验测定，我们成功得出了被检测者的血清总胆固醇水平，并对其心血管健康状况进行了初步分析。
实验结果对于预防和治疗心血管疾病具有一定的参考价值。
八、实验展望。
在今后的实验中，我们将进一步完善实验方法，提高测定精度和准确性，为更多人群的心血管健康提供更多的数据支持和科学依据。
以上就是本次血清总胆固醇的测定实验报告，希望对大家有所帮助。
总胆固醇的测定方法
总胆固醇的测定方法
总胆固醇是一种重要的生物标志物，它与心血管疾病的发生密
切相关。
因此，准确测定总胆固醇水平对于预防和治疗心血管疾病
具有重要意义。
下面将介绍几种常见的总胆固醇测定方法。
1. 酶法测定，这是目前常用的总胆固醇测定方法。
该方法通过
酶法将胆固醇氧化成酮醇，然后使用特定的试剂进行比色测定，根
据产生的色素浓度来计算总胆固醇的含量。
2. 色谱法测定，色谱法是一种高效分离和测定物质的方法，通
过气相色谱或液相色谱技术可以准确地测定血清中的总胆固醇含量。
3. 免疫测定法，这种方法利用特定的抗体与总胆固醇结合，形
成抗原-抗体复合物，然后通过免疫学技术进行测定。
总的来说，这些方法都可以准确地测定总胆固醇的含量，但在
选择测定方法时需要根据实际情况和实验室条件进行合理选择。
通
过准确测定总胆固醇水平，可以及时发现心血管疾病的风险，并采
取相应的预防和治疗措施，有助于保护心血管健康。
血清总胆固醇测定实验报告
血清总胆固醇测定实验报告一、实验目的。
本实验旨在通过测定血清中的总胆固醇含量，了解被测者的血脂代谢情况，为临床诊断和治疗提供参考依据。
二、实验原理。
总胆固醇是人体内的一种脂质物质，主要存在于血浆中。
在正常情况下，总胆固醇主要由低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和极低密度脂蛋白胆固醇（VLDL-C）三部分组成。
总胆固醇的测定是通过酶法或化学法测定血清中总胆固醇的含量，以反映被测者的血脂代谢情况。
三、实验步骤。
1. 采集被测者静脉血标本，禁食12小时以上。
2. 将采集的血清标本离心，取上清液用于测定。
3. 使用生化分析仪器，按照厂家提供的试剂盒说明书进行总胆固醇的测定。
4. 记录测定结果，并进行数据分析。
四、实验结果。
经测定，被测者血清中总胆固醇含量为XXX mmol/L（参考范围，2.85-5.69 mmol/L），属于正常范围。
五、实验分析。
根据实验结果，被测者的总胆固醇含量处于正常范围内，说明其血脂代谢情况良好。
但在临床实际操作中，还需结合被测者的其他临床指标进行综合分析，以全面了解其健康状况。
六、实验注意事项。
1. 采集血样时需遵守无菌操作规范，避免污染。
2. 实验过程中需严格按照试剂盒说明书进行操作，避免误差。
3. 实验结束后，及时清洗和消毒实验用具，保持实验环境整洁。
七、实验总结。
本次实验通过测定血清总胆固醇含量，了解了被测者的血脂代谢情况。
实验结果显示，被测者的总胆固醇含量处于正常范围内，说明其血脂代谢情况良好。
实验过程中，我们严格遵守了操作规范，保证了实验结果的准确性和可靠性。
实验结果为临床诊断和治疗提供了重要参考依据。
八、参考文献。
[1] XXX. 血脂代谢异常与心血管疾病的关系[J]. 中国循证心血管医学杂志, 2018, 20(3): 365-368.[2] XXX. 血清总胆固醇测定技术规范与质量控制[J]. 中国检验医学, 2019, 42(5): 689-692.以上为本次血清总胆固醇测定实验的报告内容，如有不足之处，欢迎批评指正。
血清总胆固醇测定实验报告
血清总胆固醇测定实验报告一、实验目的血清总胆固醇（Total Cholesterol，TC）测定是临床生化检验中常见的项目之一。
本次实验的目的是掌握血清总胆固醇测定的基本原理、操作方法和结果分析，了解血清总胆固醇水平在健康评估和疾病诊断中的意义。
二、实验原理目前常用的血清总胆固醇测定方法为酶法。
胆固醇酯酶（CE）首先将胆固醇酯水解为游离胆固醇和脂肪酸，胆固醇氧化酶（COD）催化游离胆固醇氧化生成胆甾烯酮和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶（POD）的作用下与 4-氨基安替比林（4-AAP）和酚反应生成红色醌亚胺化合物。
在 500nm 波长处测定吸光度，吸光度的高低与血清中总胆固醇的含量成正比，通过与标准品比较可计算出血清总胆固醇的浓度。
三、实验材料1、仪器分光光度计恒温水浴箱移液器离心机2、试剂胆固醇测定试剂盒（包括胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶、过氧化物酶、4-氨基安替比林、酚等）标准胆固醇溶液（浓度已知）血清样本四、实验步骤1、试剂准备按照试剂盒说明书将试剂配制成工作液，置于 37℃恒温水浴箱中预温。
2、样本处理采集空腹静脉血，离心分离血清。
3、标准曲线绘制取 5 支试管，分别加入0μl、50μl、100μl、150μl、200μl 标准胆固醇溶液，用生理盐水补足至200μl。
各管中胆固醇的浓度分别为0mmol/L、25mmol/L、50mmol/L、75mmol/L、100mmol/L。
向各管中加入 20ml 工作液，充分混匀，37℃水浴 10 分钟。
以空白管调零，在 500nm 波长处测定各管吸光度。
以胆固醇浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
4、样本测定取200μl 血清样本，加入 20ml 工作液，充分混匀，37℃水浴 10 分钟。
测定样本管的吸光度，根据标准曲线计算出血清总胆固醇的浓度。
五、实验结果1、标准曲线记录各标准管的胆固醇浓度和对应的吸光度值，绘制标准曲线。
标准曲线应呈线性关系，相关系数（r）应大于 098。
血清总胆固醇测定实验注意事项
血清总胆固醇测定实验注意事项
血清总胆固醇测定实验是一种常见的医学检查项目，用于评估一个人是否患有高胆固醇症。
在进行这项实验之前，需要注意以下几点事项：
1. 检查前禁食。
在进行血清总胆固醇测定实验之前，需要进行至少8小时的禁食。
这是因为食物摄入会影响血液中的胆固醇水平，从而影响检查结果的准确性。
2. 禁用一些药物。
在进行血清总胆固醇测定实验前，需要避免使用一些药物，如胆固醇降低药物、维生素C等。
这些药物会影响血液中的胆固醇水平，从而影响检查结果的准确性。
3. 注意身体状态。
在进行血清总胆固醇测定实验前，需要注意身体状态。
如有感冒、发热等症状，需要等症状消失后再进行检查，否则会影响检查结果的准确性。
4. 遵守医生的指示。
在进行血清总胆固醇测定实验前，需要遵守医生的指示，按照医生的要求进行检查。
总之，在进行血清总胆固醇测定实验前，需要注意以上事项以确保检查结果的准确性。
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/100毫升。
血液中胆固醇含量过高，表示胆固醇代谢 可能发生障碍。冠状动脉粥样硬化患者的血 清胆固醇含量往往偏高。因此临床化验上测
定血清胆固醇含量将有助于诊断某些疾病。
人体胆固醇来自食物及体内合成两个途径。 1. 2/3由肝脏制造出
2.其余的1/3来自食物，尤以肥肉﹑内脏、
蛋黄含量较高。
机体的胆固醇以两种形式存在:
（三）实验反应原理
胆固醇及其酯在硫酸作用下与邻苯二甲
醛产生紫红色物质，此物质在550nm波长处有
最大吸收。因此，可用比色法作总胆固醇的
定量测定。
胆固醇含量在400mg/100mL以内时，与光
吸收值呈良好线性关系。
三、实验步骤 1、制作标准曲线
2、样品测定,人血清(已经稀释，直接使用)
四、注意事项
高密度脂蛋白扮演清道夫角色，它将周边组织 多余的胆固醇送回肝脏，排出体外，达到抗血管硬 化的目的。它还有维护血管内皮细胞功能，及保护 血管免于血栓的形成。高密度脂蛋白增加，动脉壁 被胆固醇囤积的机会就减少。因此它是“好的胆固 醇”。
（二）血液 组成：血细胞（有形体） 血浆（包含血清及纤维蛋白原） 血浆是血液的重要组成分，呈淡黄色液体， 水分占90～92％，溶质以血浆蛋白为主 。 血浆总胆固醇的1/3以游离形式存在，2/3为 与脂肪酸结合之胆固醇酯。
实验五
人血清总胆固醇的测定 ----化学比色法
一、实验目的
1.了解胆固醇 2.学习胆固醇测定的原理和方法
二、实验原理
（一） 胆固醇cholesterol
是一种环戊烷多氢菲的衍生物。早在18世 纪人们已从胆石中发现了胆固醇，它广泛存在 于动物体内，尤以脑及神经组织中最为丰富， 在肾、脾、皮肤、肝和胆汁中含量也高。其溶 解性与脂肪类似，不溶于水，易溶于乙醚、氯
仿等溶剂。
是合成胆汁酸，维生素D以及甾体激素的原料
胆固醇是动物组织细胞所不可缺少的重要 物质，它不仅参与形成细胞膜。
自然界中的胆固醇主要存在于动物性食 物之中，植物中没有胆固醇，但存在结构上 与胆固醇十分相似的物质——植物固醇。植 物固醇无致动脉粥样硬化的作用。
正常人体内血液总胆固醇110～220毫克
1.强酸注意实验安25毫升浓硫酸缓慢倒入25毫升冰乙 酸中，边加边搅
4.混合酸粘度大，要用封口膜混匀。比色前也需要混匀 5.样品测定中对照不做，用标准曲线中的0号管 6.接触血清戴手套一只，实验结束要洗手
五、思考题
酯类难溶于水，将它们均匀分散在水中则形成 乳浊液。为什么正常人血浆和血清中含有酯类虽多， 但却清澈透明？
游离的胆固醇
胆固醇酯
胆固醇必须和脂蛋白结合才能运送到体
内各部分；脂蛋白又分低密度脂蛋白LDL和
高密度脂蛋白HDL。
低密度脂蛋白胆固醇 LDL-C
低密度脂蛋白把胆固醇从肝脏运送到全身组织， 过量时，它携带的胆固醇便积存在动脉壁上，久了 容易引起动脉硬化。因此低密度脂蛋白被称为“坏 的胆固醇”。
高密度脂蛋白胆固醇HDL-C