HDN产前血型血清学检验操作规程

HDN产前血型血清学检验操作规程 SXYJ-GZ-0218

1目的辅助临床诊断母婴血型不合而引发的新生儿溶血病的预测。

2适用范围既往患有新生儿溶血病病史、不明原因流产或死胎史的孕妇；夫妇ABO血型不相容的孕妇；Rh阴性并有过流产史、输血史的孕妇。

3职责检测者负责依据此程序进行HDN产前血型血清学检验操作。

4材料与设备抗-A、抗-B血清、反定型试剂红细胞、血型物质或二硫苏糖醇（DTT）；实验室常规应用的耗材备品准备充分、仪器设备运行状态正常

5操作方法

5.1ABO血型鉴定（方法参见SXYJ-GZ-0202）

5.1.1ABO血型不合可致ABO溶血：例如，孕妇O型，丈夫A型/B型/AB型；

5.1.2ABO系统以外溶血：孕妇可以是A、B、O、AB型，丈夫ABO血型可以是和孕妇同型，

也可以不同型。

5.2RhD抗原鉴定（方法参见SXYJ-GZ-0205）。

5.3免疫性抗体检查

5.3.1IgM抗A(B)破坏：夫妇ABO血型不合；

5.3.1.1血型物质中和法：以孕妇为O型，丈夫为A型为例：取孕妇血清0.15ml或0.05ml

加A型血型物质0.15ml，混匀→置室温15分钟→得到中和后血清、若孕妇为O 型，丈夫为AB型，可分别用A型、B型血型物质中和；

5.3.1.2二硫苏糖醇法(DTT)：取0.1ml孕妇血清加0.7ml DTT做1:8稀释， 37℃水浴30分

钟；

5.3.2ABO以内免疫性抗体（IgG性质的抗A或/和抗B）检测：用中和或处理后血清2d加

入相应的Ac或/和Bc（或用丈夫细胞）悬液1d，离心，检测是否中和彻底，若仍有

凝集，可加大中和液的比例至中和后血清为理想血清。

5.3.3检出免疫性抗体者同时报效价，抗-A（B）抗体效价参考值为8-64。ABO以外红细胞

血型抗体的筛选和鉴定：方法参见SXYJ-GZ-0216。

5.3.4效价的检测：IgG抗A（B）用中和或处理后血清、ABO以外抗体用女血清分别加相应

的红细胞悬液测定（方法参见SXYJ-GZ-0217）。

5.3.5溶血素检测：取4支小试管，标明序号，在每支管中加入0.2ml的生理盐水，再在

第一支管中加入孕妇0.2ml血清，依次向后做倍比稀释，最后一管中吸出0.2ml混

合液弃去，在每管中加入等量的丈夫3％红细胞悬液或含有相应抗原的试剂红细胞悬

液，混匀置37℃孵育1小时，取出离心后观察其溶血程度。按红细胞溶解的百分比进行判读。

6结果判定根据凝集强度(方法参见SXYJ-GZ-0202:5.2.1.6)对结果进行判读。

7报告发放每周四下午13:00发放报告，检验申请者到中心血站三楼输血研究所领取。

8注意事项溶血素检测常规时不做（2009年11月23日后），如果临床医生要求可加做此项实验。

9相关记录

输血相关免疫学检测会诊申请单（JL-SXYJ-0501-1）

HDN产前血型血清学检验记录（JL-SXYJ-0107）