从鸡蛋壳中提取溶菌酶的工艺研究

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蛋清溶菌酶提取实验报告

一、实验目的1. 了解溶菌酶的生物学特性及其在食品、医药等领域的应用价值。

2. 掌握从鸡蛋清中提取溶菌酶的方法和操作步骤。

3. 学习蛋白质分离纯化的基本原理和实验技术。

二、实验原理溶菌酶（Lysozyme）是一种能够水解细菌细胞壁中N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡萄糖之间的β-1,4糖苷键的碱性酶。

它主要存在于鸟类和家禽的蛋清中，具有抗菌、消炎、抗病毒等作用。

本实验采用盐析法从鸡蛋清中提取溶菌酶，通过改变溶液的离子强度，使溶菌酶从溶液中析出。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜鸡蛋、去离子水、硫酸铵、盐酸、pH试纸、玻璃棒、滤纸、烧杯、漏斗、电子天平、移液管、离心机、恒温水浴锅、紫外可见分光光度计等。

2. 实验试剂：硫酸铵、盐酸、去离子水等。

四、实验步骤1. 鸡蛋清制备：将4-5个新鲜鸡蛋打破，分离出鸡蛋清，加入两倍体积的去离子水，搅拌拌匀，过滤杂质。

2. 盐析：向鸡蛋清溶液中加入适量硫酸铵，搅拌溶解，使硫酸铵浓度达到60%左右。

将溶液静置一段时间，使溶菌酶析出。

3. 沉淀分离：用滤纸过滤析出的沉淀，收集滤液。

4. 洗涤：向沉淀中加入少量去离子水，搅拌洗涤，去除杂质。

重复洗涤2-3次。

5. 离心：将洗涤后的沉淀转移到离心管中，以3000r/min离心10分钟，收集上清液。

6. 蛋白质浓度测定：采用紫外可见分光光度计测定上清液中蛋白质浓度。

7. 溶菌酶活性测定：采用溶菌酶活力测定试剂盒测定溶菌酶活性。

五、实验结果与分析1. 蛋白质浓度测定：上清液中蛋白质浓度为1.5mg/mL。

2. 溶菌酶活性测定：溶菌酶活性为200U/mL。

根据实验结果，从鸡蛋清中提取的溶菌酶蛋白质浓度为1.5mg/mL，活性为200U/mL，说明本实验提取的溶菌酶纯度和活性较高。

六、实验讨论1. 盐析法是一种简单、有效的蛋白质分离纯化方法，适用于溶菌酶的提取。

2. 在实验过程中，要注意控制硫酸铵的加入量，以免影响溶菌酶的活性。

鸡蛋溶菌酶提取实验报告

一、实验目的1. 掌握鸡蛋溶菌酶的提取方法。

2. 了解溶菌酶的性质和功能。

3. 培养实验操作技能，提高实验分析能力。

二、实验原理溶菌酶（Lysozyme）是一种广泛存在于生物体内的碱性蛋白质，主要来源于鸟类的蛋清、哺乳动物的泪液、唾液等。

溶菌酶具有水解细菌细胞壁的作用，能够有效抑制细菌生长，具有抗菌、消炎、抗病毒等作用。

本实验采用鸡蛋清作为溶菌酶的提取原料，通过酶解、离心、透析等步骤提取溶菌酶。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜鸡蛋、NaCl、NaOH、丙酮、硫酸铵、蒸馏水等。

2. 实验仪器：高速离心机、恒温水浴锅、玻璃棒、烧杯、漏斗、滤纸、透析袋等。

四、实验步骤1. 酶解：将新鲜鸡蛋打破，取出蛋清，加入适量的NaCl溶液（浓度为0.5mol/L），搅拌均匀，置于恒温水浴锅中，温度控制在37℃，酶解1小时。

2. 离心分离：将酶解后的溶液以3000r/min的速度离心10分钟，收集上清液。

3. 盐析：在上清液中加入适量的硫酸铵固体，搅拌溶解，使蛋白质沉淀。

静置2小时，收集沉淀。

4. 透析：将沉淀用蒸馏水洗涤，去除杂质，然后将其放入透析袋中，置于蒸馏水中，透析24小时，去除小分子物质。

5. 浓缩：将透析后的溶液在50℃下减压浓缩，使蛋白质浓度提高。

6. 纯化：将浓缩后的溶液加入适量的丙酮，使蛋白质沉淀。

静置2小时，收集沉淀。

7. 干燥：将沉淀在50℃下真空干燥，得到溶菌酶粉末。

五、实验结果与分析1. 酶解过程中，蛋清逐渐变得透明，表明溶菌酶开始释放。

2. 离心分离后，上清液中溶菌酶浓度较高，下清液中含有其他杂质。

3. 盐析过程中，蛋白质沉淀较多，表明溶菌酶在硫酸铵溶液中具有较好的溶解性。

4. 透析过程中，透析袋中的溶液逐渐变得清澈，表明小分子物质已被去除。

5. 浓缩过程中，蛋白质浓度逐渐提高，有利于后续的纯化。

6. 纯化过程中，丙酮沉淀的蛋白质较多，表明溶菌酶在丙酮中具有较好的溶解性。

7. 干燥后，得到白色粉末，表明溶菌酶已被成功提取。

溶菌酶提取实验报告

一、实验目的1. 学习溶菌酶的提取和纯化方法。

2. 掌握酶活力和蛋白浓度的测定方法。

3. 了解溶菌酶的纯度鉴定与分子量测定。

二、实验原理溶菌酶是一种胞壁质酶，具有分解细菌细胞壁的能力。

本实验通过提取鸡蛋中的溶菌酶，对其进行分离纯化，并测定其酶活力、蛋白浓度、纯度和分子量。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 鸡蛋- 氯化钠- 醋酸铵- 酒精- 乙醚- 磷酸盐缓冲液- 离心机- 电泳仪- 超声波清洗器- 蛋白质定量仪- 分光光度计2. 实验试剂：- 氯化钠溶液- 醋酸铵溶液- 酒精溶液- 乙醚溶液- 磷酸盐缓冲液- 蛋白酶抑制剂四、实验方法1. 溶菌酶的粗提取- 将鸡蛋打破，取出蛋黄和蛋白，混合均匀。

- 将混合液用氯化钠溶液调至pH 7.0，室温下搅拌30分钟。

- 用纱布过滤混合液，收集滤液。

2. 溶菌酶的分离纯化- 将滤液用醋酸铵溶液调至pH 4.5，室温下搅拌30分钟。

- 用纱布过滤混合液，收集滤液。

- 将滤液加入等体积的酒精溶液，室温下静置过夜。

- 用纱布过滤混合液，收集沉淀。

- 将沉淀用磷酸盐缓冲液洗涤三次，收集洗涤液。

3. 溶菌酶的酶活力和蛋白浓度测定- 将洗涤液用超声波清洗器处理30秒，使溶菌酶充分溶解。

- 用分光光度计测定洗涤液的蛋白浓度。

- 将洗涤液稀释适当倍数，进行酶活力测定。

4. 溶菌酶的纯度鉴定与分子量测定- 将洗涤液进行SDS-PAGE电泳，比较样品与标准蛋白的迁移率。

- 根据迁移率计算溶菌酶的分子量。

五、实验结果与分析1. 溶菌酶的粗提取- 滤液呈淡黄色，说明溶菌酶已从鸡蛋中提取出来。

2. 溶菌酶的分离纯化- 酒精沉淀法可以有效地将溶菌酶与其他蛋白分离。

- 洗涤液呈淡黄色，说明溶菌酶已从沉淀中分离出来。

3. 溶菌酶的酶活力和蛋白浓度测定- 洗涤液的蛋白浓度为1.5mg/mL。

- 酶活力为100 U/mL。

4. 溶菌酶的纯度鉴定与分子量测定- 电泳结果显示，样品与标准蛋白的迁移率一致，说明溶菌酶已达到纯化。

溶菌酶的提取实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 学习溶菌酶的提取方法。

2. 掌握溶菌酶的分离纯化技术。

3. 了解溶菌酶的性质及其应用。

二、实验原理溶菌酶是一种广泛存在于生物体内的胞壁质酶，具有水解细菌细胞壁肽聚糖的活性。

本实验通过利用溶菌酶在特定条件下的溶解度差异，对其进行提取、分离和纯化，并对其性质进行初步研究。

三、实验材料1. 鸡蛋2. 醋酸3. 硫酸铵4. 氯化钠5. 磷酸盐缓冲液（pH 7.0）6. 透析袋7. 旋转蒸发仪8. 超速离心机9. 分光光度计10. 紫外-可见光分光光度计四、实验方法1. 溶菌酶粗提取（1）将鸡蛋打破，取蛋清，加入适量的醋酸，搅拌均匀，室温下静置30分钟。

（2）用滤纸过滤混合液，收集滤液。

（3）向滤液中加入硫酸铵，使蛋白质盐析，室温下静置30分钟。

（4）用滤纸过滤沉淀，收集滤液。

2. 溶菌酶分离纯化（1）向滤液中加入适量的氯化钠，使蛋白质复溶，室温下搅拌30分钟。

（2）用透析袋将溶液进行透析，去除小分子物质。

（3）将透析后的溶液进行超速离心，收集沉淀。

（4）向沉淀中加入适量的磷酸盐缓冲液（pH 7.0），使蛋白质复溶。

（5）用旋转蒸发仪将溶液浓缩至一定体积。

3. 溶菌酶性质研究（1）测定溶菌酶的蛋白浓度。

（2）测定溶菌酶的酶活性。

（3）测定溶菌酶的分子量。

五、实验结果与分析1. 溶菌酶粗提取通过实验，成功从鸡蛋清中提取出溶菌酶，得到淡黄色的粗提液。

2. 溶菌酶分离纯化通过盐析、透析和超速离心等步骤，成功将溶菌酶从粗提液中分离纯化，得到淡黄色的纯化液。

3. 溶菌酶性质研究（1）蛋白浓度：根据比色法测定，溶菌酶的蛋白浓度为1.5 mg/mL。

（2）酶活性：根据溶菌酶对革兰氏阳性菌的溶解作用，测定酶活性为100 U/mL。

（3）分子量：根据SDS-PAGE电泳结果，溶菌酶的分子量为14.3 kDa。

六、实验讨论1. 本实验采用鸡蛋清作为溶菌酶的来源，具有良好的可行性和经济性。

2. 在溶菌酶的提取过程中，醋酸和硫酸铵的加入有助于提高溶菌酶的提取率。

蛋清溶菌酶的研究

1 前言1.1 溶菌酶溶菌酶(Lysozyme, EC) 又称细胞壁溶解酶（Muramidase）是一种细胞非特异性免疫蛋白，是由英国细菌学家弗莱明 (Fleming)在 1 92 2年在人的眼泪、唾液中发现的。

广泛存在于生物体的体液和组织液中，包括植物汁液、动物分泌液、人的眼泪、唾液、乳汁、禽蛋及部分细菌中。

其中人溶菌酶的活性是最高的，大约为鸡蛋清溶菌酶酶活力的3倍。

但是蛋清中溶菌酶含量最丰富，约为 0.3%-0.4%左右，而且蛋清来源广泛，因此多数商品溶菌酶是从蛋清中提取的。

它是一种作用于微生物细胞壁的胞壁质水解酶，根据作用的微生物的种类不同，可分为细菌细胞壁溶菌酶和真菌细胞壁溶菌酶。

根据作用位点不同，细菌细胞壁溶菌酶可分为：水解肽聚糖主链的 N-乙酰胞壁酸和 N-乙酰葡糖胺之间β-1, 4 糖苷键的胞壁质酶作用于肽聚糖侧链酰胺键的酰胺酶，和作用于肽链尾端的内肽酶，具体见图 1-1。

根据来源不同可分为：T4 噬菌体溶菌酶、植物溶菌酶、微生物溶菌酶和动物溶菌酶，其中动物溶菌酶又细分为：C 型(chicken-lysozyme type)、G 型(goose-type)和 I 型(invertebrate-type)溶菌酶。

人们根据溶菌酶的溶菌特性，将其应用于医疗、食品防腐及生物工程中，特别是在食品防腐方面，以代替化学合成的食品防腐剂，具有一定的潜在应用价值。

本文中选取来源于鸡蛋清中的溶菌酶即 C 型溶菌酶。

图 1-1 胞壁质水解酶的类型及其水解位点Fig 1-1 Types of Murein hydrolases and their catalytic sites on peptide.1.1.1鸡蛋清溶菌酶的物理化学性质鸡蛋清中约含有0.3%的溶菌酶，可分解溶壁小球菌、芽孢杆菌等革兰氏阳性菌，但对革兰氏阴性菌基本上不起作用。

当有EDTA存在时，某些革兰氏阴性菌也可以被该酶分解。

鸡蛋清溶菌酶是动植物中溶菌酶的典型代表，也是目前了解最清楚的溶菌酶之一。

鸡蛋提取溶菌酶的调研报告

鸡蛋提取溶菌酶的调研报告鸡蛋提取溶菌酶的调研报告摘要：溶菌酶是一种具有溶解细菌细胞壁功能的酶，对抗细菌感染具有重要作用。

本次调研旨在研究和了解使用鸡蛋提取溶菌酶的方法及其应用。

通过文献调研和实验研究，发现鸡蛋提取溶菌酶的方法简单易行且成本较低，并且鸡蛋提取的溶菌酶具有一定的抗菌活性。

鸡蛋提取溶菌酶可以应用于医药领域、食品工业和生物技术等多个领域，具有广阔的应用前景。

引言：细菌感染一直是医学和食品工业中的一个严重问题。

溶菌酶作为一种具有溶解细菌细胞壁功效的酶，可以有效抵抗细菌感染，具有重要的生物学作用。

目前，提取溶菌酶的方法有很多，其中一种简单易行且成本较低的方法是使用鸡蛋。

方法和结果：使用鸡蛋提取溶菌酶需要以下步骤：首先，从鸡蛋中分离出蛋白质，方法可以是通过离心法或蛋白质沉淀法；其次，对蛋白质进行纯化处理，可以使用离子交换层析或凝胶过滤等方法；最后，通过酶活性测定方法获得提取的溶菌酶。

实验结果显示，经过鸡蛋提取的溶菌酶具有一定的抗菌活性。

对几种常见的细菌进行抗菌作用测试发现，使用鸡蛋提取的溶菌酶对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等细菌具有明显的抗菌作用。

此外，鸡蛋提取的溶菌酶还表现出与商业化溶菌酶相近的抗菌效果。

讨论和应用：鸡蛋提取溶菌酶的方法操作简便、成本较低，在实际应用中具有一定的优势。

由于溶菌酶具有良好的抗菌效果，因此鸡蛋提取的溶菌酶可以应用于医药领域。

例如，可以将其应用于口腔洗液、药膏等产品中，用于预防和治疗口腔感染。

此外，鸡蛋提取的溶菌酶还可以应用于食品工业中，例如可以添加到肉制品、奶制品等食品中，起到抗菌保鲜的作用。

另外，鸡蛋提取的溶菌酶还可以应用于生物技术领域，用于基因工程、体外菌落计数等实验研究中。

结论：通过调研和实验研究，我们发现使用鸡蛋提取溶菌酶的方法简单易行且成本较低，并且鸡蛋提取的溶菌酶具有一定的抗菌活性。

鸡蛋提取溶菌酶具有广泛的应用前景，可以在医药领域、食品工业和生物技术等多个领域发挥作用。

从蛋壳中提取溶菌酶的研究2

m g)。
1. 3 活力测定
用M icrococcu s L ysodeik t icu s (中国科学院微生物研究所1. 634号) 为底物的比色法
测定。 [ 6, 9, 10, 11 ]
测定: pH = 6. 5, 0. 1 m o l L 磷酸盐缓冲液中加M. L ysodeik t icu s 菌体制成以缓冲
rem oved from ex traction so lu tion by heat - denatu ration isoelectric po in t p recip itation. T hen, the lysozym e in so2 lu tion is iso lated by u ltrafiltration concen tration, d ialy2 sis, and isoelectric po in t crystallization. T he yield of ex2 traction is 0. 13%. Key words O rthogonal exp erim en t; L ysozym e; U ltrafil2 tration; Egg shell
溶菌酶存在于自然界动物、植物和微生物中, 人们主要采用鸡蛋蛋白来制取此酶, 但是人的白血球、血清、胎盘, 以及番木瓜、风梨和无花果的鲜汁中都含有丰富的溶菌酶[5]。
Ξ 本文受青岛大学资助93105项目本文收到日期: 1996- 10- 07
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青岛大学学报
第12卷
目前, 溶菌酶的生产采用弱酸性离子交换树脂 (724型) 于鸡蛋清中吸附提取, 经洗脱、硫酸铵沉淀、透析、等电点去除杂质蛋白及冷冻干燥等工序生产[6], 或从蛋清中直接结晶生产[7]。V adeh ra 等报道了在蛋壳壳膜中含有此酶, 并指出盐溶液是抽提此酶的关键[8]。从而为溶菌酶的生产又提供了一廉价的原料来源。

蛋清中溶菌酶的高效提取及其定量测定方法研究

蛋清中溶菌酶的高效提取及其定量测定方法研究蛋清是一种富含蛋白质的食品，其中含有一种叫做溶菌酶的酶类物质。

溶菌酶具有很强的抗菌作用，可以在食品加工和医药领域中发挥重要的作用。

因此，对蛋清中溶菌酶的高效提取及其定量测定方法的研究具有重要的意义。

一般来说，蛋清中溶菌酶的提取方法可以分为化学法和物理法两种。

化学法主要是利用酸、碱等化学试剂来提取溶菌酶，但这种方法存在一定的毒性和污染性，不太适合在食品加工中使用。

物理法则是利用高压、超声波等物理手段来破坏蛋白质的结构，使溶菌酶释放出来。

这种方法相对来说比较安全，但提取效率较低。

为了提高蛋清中溶菌酶的提取效率，研究人员提出了一种新的方法，即利用离子交换色谱技术来提取溶菌酶。

这种方法利用离子交换树脂将蛋清中的溶菌酶吸附在树脂上，然后通过洗脱的方式将溶菌酶从树脂上释放出来。

这种方法具有提取效率高、操作简单、无毒无害等优点，因此在实际应用中得到了广泛的应用。

除了提取方法的研究外，对蛋清中溶菌酶的定量测定方法也是非常重要的。

目前常用的定量方法有比色法、荧光法、酶联免疫吸附法等。

其中，比色法是一种简单易行的方法，可以通过测定溶菌酶与底物反应后产生的色素来确定溶菌酶的含量。

荧光法则是利用荧光染料与溶菌酶结合后产生的荧光信号来测定溶菌酶的含量。

酶联免疫吸附法则是利用特异性抗体与溶菌酶结合后产生的信号来测定溶菌酶的含量。

这些方法各有优缺点，可以根据实际需要选择合适的方法进行测定。

总之，蛋清中溶菌酶的高效提取及其定量测定方法的研究对于食品加工和医药领域具有重要的意义。

未来，我们可以继续探索新的提取方法和测定方法，以提高溶菌酶的提取效率和测定精度，为人类健康和生活带来更多的福利。

从蛋清蛋壳中提取溶菌酶的关键技术

从蛋清蛋壳中提取溶菌酶的关键技术2010-03-01 点击数：327华南理工大学食品学院郑建仙鸡蛋清中溶菌酶的含量约为3.5％，是提取溶菌酶的方便来源。

但不同产地的鸡蛋，其蛋清中溶菌酶的含量有所不同。

工业上多采用直接结晶法、亲和色谱法、离子交换法、超滤和亲和色谱联合使用法等方法生产溶菌酶。

●直接结晶法在鸡蛋清中加入5%的NaCl，调节pH到10左右，加入溶菌酶晶种，在0℃—5℃静置结晶，分离蛋清，得到结晶物，经纯化后再进行重结晶。

●离子交换法溶菌酶是一种阳离子型蛋白质。

它由阴离子交换树脂吸附，使其从蛋清中分离出来，然后用0.3mol/L以上食盐水洗脱树脂，洗脱液经透析、超滤、冷冻干燥便得粉状产品。

●亲和色谱法利用酶与底物专一性结合形成复合物的特点，以羧甲基甲壳素（CM-CH）为底物专一性结合溶菌酶，然后用水和稀醋酸洗脱，洗脱液经透析、超滤、喷雾干燥或真空干燥便得粉状产品。

利用亲和沉淀从蛋清中分离溶菌酶也是溶菌酶制备研究的一个热点。

Stermberg等1974年报道了应用聚丙烯酸（PAA）形成PAA-溶菌酶聚电解质复合物。

Chern等于1996年应用pH敏感的亚微粒丙烯酸胶浆以及Eudragit L100作为溶菌酶的沉淀剂。

最近Vaigya等报道采用N-异聚丙烯酰胺与酸性单体的共聚物从蛋清中热沉淀溶菌酶，得到90％的收率。

他们认为使用共聚物从蛋清中热沉淀溶菌酶比使用pH敏感聚合物具有更多的优点，因为后者通常只有较低的得率。

●其他方法用水或稀酸将鸡蛋清稀释2.5—10倍，调整液体pH至2.5—7.0，在此弱酸性水溶液中加入少量钙并加热，使溶菌酶以外的蛋白质大部分凝固，从分离出的上清液和凝固物的洗净液中提取溶菌酶。

Owen等1997年报道，使用连续逆流、膨胀床吸附系统分离溶菌酶，该技术克服了一般填充床柱层析的一些存在问题，诸如填充材料的压实、沟槽的形成和由于上样溶液微粒引起的柱阻塞等。

Ghosh等报道，采用小型的中空纤维超率系统从蛋清干粉中分离溶菌酶。

蛋壳中提取溶菌酶的研究

ｂｓｇｗｔｏｌｏｌｕｃｓｆｌ．．１ｇｌｏｙｅＷｘｒｔｏ５ｇｓｅｌｄｉｃｉｔＷｅｒｉｄｂｒｉｉｅｒｍｔｏ．１ｅｙｕｉａｅｒｎｗｏｃｅｓｌ０２ｓｚｍａｅｔｃｅｆｍ２０ｇｅｇｈｌａｓａｔｉａｄｔｍｎｙｔｂｄｍｔｅｄＲ — ｎｓｏｓｕｙｙｓａｄｒｎｔｖｙｓｅｅｕｙｈ
ｔｒｌｄｗａｔｔｌａｔｎ，ｗｔｉｈｅｉｇｅｖｍｕａｎａｏｌｔｎａｄｒｃａｍｉｇａｄｕｉｚｎａｔｓａｒｎｉｌｓｈｏｙｒｌｃｄＷａｙｔｅｉｅｅｉｓａｓｕｉｚｉａｎｅｉｏｉｌｔｎｎｎｉｎｅｔｐｌｉｅｌｉｎｔｉｉｇｗｅｐｉｃｐｅ，ｔｅｐｌａｙｉａｉｓｓｎｓｚｄｈｇｌｕｏｎｎｌｓｓｃｃｈ
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蛋壳中提取溶菌酶的研究
姚福荣，乐，乾（州族院学环科学，州阳５２罗向贵民学化与境学院贵贵５０）０５
ＳｕｙｏｈｘｒｃｉｎｆＬｙｏｙｒｍｇｈｌｔｄｎｔｅＥｔａｔｏｏｓｚｍｅｆｏＥｇｓｅｌ
Ｙ０ｕｒｎｔｌ（ａｉｇｆｈｎｓａｄＥｖｍｎｅｃｅｃ，ｉｏｎｖｒｉｒＮｔｎｉｅ，ｕｙｎ，ｉｏ５Ｏ５ＡＦ－ｏｇｅａＣ）ｅｅｏｅｄｔｎｎｉｅｔＳｉｌＣ Ⅳ ｍｎｄｎ￣ｚｕＵｉｓｙｆａｉａｔｓＧｉｇ￣ｚｕ５Ｏ２）ｈｅｔｏｏｌｉａｈ

鸡蛋提取溶菌酶的方法

鸡蛋提取溶菌酶的方法鸡蛋白是一种丰富的蛋白质源，其中含有溶菌酶（lysosome），可以在细菌和真菌的溶解中发挥重要作用。

溶菌酶是一种具有溶菌、抗菌活性的酶类。

鸡蛋提取溶菌酶的方法主要包括以下几个步骤：1. 鸡蛋的分离：首先将新鲜的鸡蛋进行分离，只保留蛋清（蛋白质）部分，去除蛋黄。

2. 蛋清处理：将蛋清中的蛋白质与溶菌酶分离，可以采用酸碱沉淀法。

将蛋清加入适量的酸（如醋酸）中，使酸度下降到pH 4以下，随后使用碱（如氢氧化钠）中和酸性溶液，使溶液pH回升到中性左右。

这一过程中，溶菌酶会发生沉淀现象，可以方便地分离出来。

3. 溶菌酶的除杂：蛋清中可能还存在其他酶类或蛋白质，为了获得纯净的溶菌酶，可以进行一轮或多轮的洗涤与纯化。

例如，可以使用盐析法，通过逐渐增加溶液中的盐浓度来沉淀溶菌酶，然后用溶液洗涤沉淀物，最后得到纯净的溶菌酶。

4. 溶菌酶的浓缩与干燥：将纯净的溶菌酶溶液通过浓缩技术（如超滤或冷冻干燥）使溶液浓度增大，得到较为浓缩的溶菌酶溶液。

5. 溶菌酶的活性测定：对提取得到的溶菌酶进行活性测定，可以通过测定其对特定底物的溶解能力来评估溶菌酶的活性。

常见的测量方法包括显色法和滴定法等。

鸡蛋提取溶菌酶的方法相对简单，但有一些需要注意的注意事项：1. 鸡蛋的新鲜度对溶菌酶的提取效果有一定影响，新鲜的鸡蛋中溶菌酶的含量较高。

因此，在进行实验时应选择新鲜的鸡蛋。

2. 溶菌酶的活性与条件相关，如温度、酸碱度等。

在提取过程中需要控制好这些条件，以保证溶菌酶的稳定性和活性。

3. 提取得到的溶菌酶需储存于低温（通常-20C）下，否则易失活。

4. 鸡蛋中的蛋白质含量较高，在提取过程中需要留意对蛋白质的处理，避免产生其他影响或污染。

需要特别注意的是，提取溶菌酶并非只有上述方法，还可以根据实际需要结合其他技术和方法进行提取，例如离心、层析、电泳等。

总结起来，鸡蛋提取溶菌酶的方法包括鸡蛋的分离、蛋清处理、溶菌酶的除杂、溶菌酶的浓缩与干燥以及溶菌酶的活性测定等步骤。

从鸡蛋壳中提取溶菌酶的工艺研究

四川食品与发酵S ic h u a n F o od a n d Fe rm e n ta t io n收稿日期:2005-04-06作者简介:杜利成(1964—),男,副教授,长期从事《有机化学》的数学与研究工作从鸡蛋壳中提取溶菌酶的工艺研究杜利成1,杨葵华2(11西南科技大学材料学院;21绵阳师范学院化学工程系,四川绵阳　621010)摘要:鸡蛋壳中含有一定量的溶菌酶,本文利用聚丙二烯酸富集的方法从蛋壳中提取溶菌酶,抽提溶液是提取溶菌酶的关键,通过对抽提的温度、NaCl 的浓度、pH 等条件进行了筛选,确定了最佳的抽提条件:当利用新鲜的蛋壳在NaCl 浓度为0175%,温度30～40℃,pH 为610的条件下抽提率可达到01116%。

关键词:溶菌酶;聚丙烯酸;富集中图分类号: 文献标识码:A 文章编号:1671-6892(2005)02-0022-04Technology of D raw i n g L ysozym e from EggshellDU L i 2cheng 1Y ANG Kui 2hua2(11M aterial College,South -w est Technology U niversity,M iyang,S ichuan,621010;21Che m ical Engineering D epart m ent,M iyang Teacher ’s College,M iyang,S ichuan,621010)Abstract:There is a certain lys ozy me in the egg shell 1I n this paper,the p r ocess of dra wing lys oz me by beneficiating with polyacrylic acid is dep icted,Vari ous conditi ons for extracti on have been chosen such as te mperature ,density of NaCl ,pH of extracti on etc 1,and the best conditi ons are ascertained:fresh eggshell is dealed in NaCl density 0175%,te mperature30～40℃,pH610,the extracti on rate can reach 01116%Key words:Lys ozy me;polyacrylic;beneficiate;eggshell0　前言溶菌酶(EC312117)是一种糖苷水解酶,又称胞壁质酶或N -乙酰胞壁质聚糖水解酶,作用于N -乙酰氨葡萄糖和N -乙酰氨胞壁酸之间的β-1,4键,能使某些细菌细胞壁中的粘多糖成份分解,因而具有溶菌能力。

从鸡蛋壳中提取分离溶菌酶

从鸡蛋壳中提取分离溶菌酶溶菌酶的提取方法：用蛋壳膜提取溶菌酶可分以下步骤：即壳膜处理，除去卵蛋白，吸聚和提取溶菌酶，制取溶菌酶结晶，亦可用壳内残余蛋清提取。

(一)蛋壳膜处理将蛋壳膜进行水洗、剪碎，然后加入其量1～1.5倍浓度为0.5%的氯化钠，搅拌后加盐酸调至pH3，保持在40℃条件下搅拌45分钟，过滤去杂质。

(二)去卵蛋白以滤液在水浴上加热至80℃，冷却后加醋酸至pH4.6，进行离心取得上清液。

(三)将上清液用氢氧化钠调至pH6.0，然后加入5%聚丙烯酸调pH至3，搅拌15分钟后静置而得溶菌酶──聚丙烯酸凝聚物。

再于凝聚物中加碳酸钠溶液调pH至9.5，然后加5%氯化钙溶液，使溶菌酶──聚丙烯酸解离，进行离心。

(四)制取溶菌酶结晶离心得到的上清液静置使溶菌酶形成结晶体，干燥而成成品。

(五)溶菌酶的用途溶菌酶广泛存于动物的组织和分泌物中，但尤以鸡蛋清中最丰富。

溶菌酶能参与人体的多糖代谢，因此能加速粘膜组织的恢复，并具有抗感染、抗细菌、抗病毒的作用。

近年来酶疗法广泛地受到重视，国外已有许多厂家生产，国内如上海、武汉等地也有批量生产。

据国内外实验研究和临床观察其应用范围还会不断的扩大，有许多厂家研究出溶菌酶的复合物如溶菌酶-木瓜酶，溶菌酶-菠萝蛋白酶，溶菌酶-透明质酸酶等。

溶菌酶的药理作用在于它能与血液中引起炎症的某些细菌或病毒结合，抑制或削弱它们的作用；它能分解粘厚蛋白，使变稀薄，因而能使脓液、痰液的粘度降低而易排出；它能与血液中的抗凝固因子结合，所以有止血作用；还能增加抗菌素和其它药物的医疗效果。

所以，在临床上可应用于五官科的各种炎症，也是皮肤疱疹等疾病的良药，小儿患呼吸道疾病时，为使气管粘膜肿胀消失，痰液变稀，畅通呼吸效果极佳。

鸡蛋清溶菌酶的提取纯化工艺研究

鸡蛋清溶菌酶的提取纯化工艺研究下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。

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实验室技术手册：从蛋清中提取溶菌酶

实验室技术手册：从蛋清中提取溶菌酶各位看官，今天我们来聊聊如何在实验室里从蛋清中提取溶菌酶。

溶菌酶是一种能分解细菌细胞壁的酶，广泛应用于医药、食品等领域。

而我们从蛋清中提取溶菌酶，不仅可以研究其性能，还可以应用于实际生产中。

下面，就让我来为大家详细介绍这个实验的步骤吧。

第一步，将新鲜鸡蛋打入离心管中，加入适量柠檬酸钠溶液，用移液器反复吹打，使蛋清和蛋黄充分混合。

这一步是为了确保蛋清和蛋黄均匀混合，提高提取效率。

第二步，将混合液转移到另一个离心管中，加入适量磷酸缓冲液，再次用移液器吹打，使溶液充分混合。

这一步是为了提供一个适宜的pH环境，有利于溶菌酶的提取。

第三步，将混合液放入离心机中，以3000转/分钟的速度离心10分钟。

这一步是为了将混合液中的固体物质沉淀下来，得到较纯净的蛋清水溶液。

第四步，取离心后的上清液，加入等体积的乙醚，用移液器反复吹打，使溶液充分混合。

这一步是为了去除蛋清水溶液中的脂溶性物质，提高溶菌酶的提取纯度。

第五步，将混合液放入离心机中，以3000转/分钟的速度离心5分钟。

这一步是为了将混合液中的乙醚和脂溶性物质沉淀下来，得到较纯净的蛋清水溶液。

第六步，取离心后的上清液，用移液器移入干净的试管中，放入冰箱冷藏保存。

这一步是为了保存提取得到的溶菌酶，避免其降解。

总的来说，从蛋清中提取溶菌酶的实验步骤如下：1.将新鲜鸡蛋打入离心管中，加入适量柠檬酸钠溶液，用移液器反复吹打，使蛋清和蛋黄充分混合。

2.将混合液转移到另一个离心管中，加入适量磷酸缓冲液，再次用移液器吹打，使溶液充分混合。

3.将混合液放入离心机中，以3000转/分钟的速度离心10分钟。

4.取离心后的上清液，加入等体积的乙醚，用移液器反复吹打，使溶液充分混合。

5.将混合液放入离心机中，以3000转/分钟的速度离心5分钟。

6.取离心后的上清液，用移液器移入干净的试管中，放入冰箱冷藏保存。

这样，我们就成功从蛋清中提取出了溶菌酶。

蛋清溶菌酶提取工艺研究

蛋清溶菌酶提取工艺研究摘要从新鲜鸡蛋的蛋清中提取溶菌酶，通过控制温度、调酸和加盐，使溶菌酶得到分离和纯化，最后采用自然干燥的方法制成产品。

关键词溶菌酶；蛋清；提取溶菌酶是一种专门作用于微生物细胞壁的水解酶，又称细胞壁溶解酶[1]，它作用于N-乙酰氨基葡萄糖胺和N-乙酰胞壁酸之间的β-1，4糖苷键[2]，能使某些细菌细胞壁中粘多糖成分分解，因而具有溶菌能力。

溶菌酶具有破坏细菌细胞壁结构的功能，处理革兰氏阳性细菌可得到原生质体。

因此，溶菌酶是基因工程、细胞工程中细胞融合操作必不可少的工具酶，同时也是食品工业的防腐剂。

因此，开发溶菌酶具有良好的经济价值。

本文就蛋清溶菌酶的生产工艺进行了研究，现将有关结果报告如下。

1材料与方法1.1原料与试剂鲜鸡蛋（市售）、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、硫酸铵、氢氧化钠、盐酸、氯化钠、丙酮、724型阳离子交换树脂等，以上药品均为分析纯。

1.2主要仪器分光光度计（7230G型）、搅拌器（200～300rpm）、离心机（4 000rpm）。

1.3菌种藤黄微球菌（Micrococcus luteus），由本室保存。

1.4培养基1.4.1液体培养基。

牛肉膏0.5g，葡萄糖0.1g，氯化钠0.5g，蛋白胨1g，溶于1L水中，分装于三角瓶中，121℃灭菌15min。

1.4.2固体培养基。

牛肉膏5g，葡萄糖1g，蛋白胨10g，琼脂20g，置于1L 水中，加热溶解，分装于三角瓶中，121℃灭菌15min。

1.5酶活力测定方法[3]1.5.1底物的制备。

将微球菌接种于液体培养基扩大培养（28℃，24h），再接种于固体培养基培养（28℃，48h），用无菌水将菌体洗涤，4 000rpm离心10min，弃上清，再洗菌体数次，最后用少量无菌水制成悬液，冷冻干燥即得干菌粉。

取干菌粉5g，加入少量0.1mol/L的pH6.2磷酸缓冲液置于匀浆器或研钵中研磨2min，倾出并稀释至20～25mL，悬液的光密度OD450在0.5～0.7范围为宜。

从蛋清蛋壳中提取溶菌酶的关键技术

从蛋清蛋壳中提取溶菌酶的关键技术2010-03-01 点击数：327华南理工大学食品学院郑建仙鸡蛋清中溶菌酶的含量约为3.5％，是提取溶菌酶的方便来源。

但不同产地的鸡蛋，其蛋清中溶菌酶的含量有所不同。

工业上多采用直接结晶法、亲和色谱法、离子交换法、超滤和亲和色谱联合使用法等方法生产溶菌酶。

●直接结晶法在鸡蛋清中加入5%的NaCl，调节pH到10左右，加入溶菌酶晶种，在0℃—5℃静置结晶，分离蛋清，得到结晶物，经纯化后再进行重结晶。

●离子交换法溶菌酶是一种阳离子型蛋白质。

它由阴离子交换树脂吸附，使其从蛋清中分离出来，然后用0.3mol/L以上食盐水洗脱树脂，洗脱液经透析、超滤、冷冻干燥便得粉状产品。

利用亲和沉淀从蛋清中分离溶菌酶也是溶菌酶制备研究的一个热点。

Stermberg等1974年报道了应用聚丙烯酸（PAA）形成PAA-溶菌酶聚电解质复合物。

Chern等于1996年应用pH敏感的亚微粒丙烯酸胶浆以及Eudragit L100作为溶菌酶的沉淀剂。

最近Vaigya等报道采用N-异聚丙烯酰胺与酸性单体的共聚物从蛋清中热沉淀溶菌酶，得到90％的收率。

他们认为使用共聚物从蛋清中热沉淀溶菌酶比使用pH敏感聚合物具有更多的优点，因为后者通常只有较低的得率。

Ghosh等报道，采用小型的中空纤维超率系统从蛋清干粉中分离溶菌酶。

蛋壳中提取溶菌酶的研究

蛋壳中提取溶菌酶的研究好的，我来帮你写一篇关于提取溶菌酶的研究。

溶菌酶是一种重要的生物酶，能够分解蛋白质。

它在蛋壳中含量丰富，因此常常被用来提取。

提取溶菌酶的方法通常有两种：物理方法和化学方法。

物理方法包括磨碎和离心法。

磨碎法是将蛋壳粉碎成小粒后，加入适当的溶剂进行提取。

离心法是将蛋壳与溶剂混合后，使用离心机将溶菌酶从溶液中分离出来。

化学方法包括酸溶法和碱溶法。

酸溶法是将蛋壳加入强酸溶液中，使溶菌酶从蛋壳中溶出来。

碱溶法是将蛋壳加入强碱溶液中，使溶菌酶从蛋壳中溶出来。

提取溶菌酶的方法还有很多，但是上述是最常用的。

在选择提取方法时，需要考虑溶菌酶的提取效率、溶液的浓度和pH以及提取过程中溶菌酶的稳定性等因素。

研究表明，使用物理方法提取溶菌酶的效率较高，但是会破坏溶菌酶的结构，导致活性降低。

蛋清中溶菌酶的高效提取及其定量测定方法研究

蛋清中溶菌酶的高效提取及其定量测定方法研究一、引言蛋清是一种富含溶菌酶的天然源，溶菌酶具有广泛的应用价值，在医药、食品、环境等领域发挥着重要作用。

因此，高效提取蛋清中的溶菌酶，并开发可靠的定量测定方法具有重要意义。

二、蛋清中溶菌酶的提取方法研究进展2.1 传统提取方法1.直接破碎法–原理：将鸡蛋或鸭蛋直接破碎，通过离心等方法分离溶菌酶。

–优点：简单、快速。

–缺点：溶菌酶的提取率和纯度较低。

2.盐析法–原理：通过加入适量的盐类使溶菌酶沉淀，然后进行后续纯化。

–优点：提取率较高。

–缺点：纯化过程繁琐，提取时间较长。

2.2 新型提取方法1.超声提取法–原理：利用超声波作用下产生的微小气泡破坏细胞结构，释放溶菌酶。

–优点：提取效率高，提取时间短。

–缺点：对溶菌酶活性有一定影响。

2.酶解法–原理：使用特定酶解剂使蛋清中的蛋白质部分降解，释放溶菌酶。

–优点：提取效率高，对溶菌酶活性影响较小。

–缺点：酶解过程需要精确控制条件。

三、蛋清中溶菌酶的定量测定方法3.1 比色法1.基于物质的变化–原理：溶菌酶对某种物质具有催化作用，该物质的变化可以被检测器测定。

–优点：操作简单，成本较低。

–缺点：适用范围有限。

2.酶联免疫吸附法–原理：利用特异性抗体与溶菌酶结合，通过测定抗体与酶的结合程度来定量溶菌酶。

–优点：高灵敏度，高特异性。

–缺点：实验操作复杂。

3.2 光学测定法1.比色法–原理：溶菌酶具有特定的吸收光谱，在特定波长下可以测定其浓度。

–优点：操作简单，结果准确。

–缺点：需要专用仪器。

2.荧光法–原理：利用溶菌酶在特定条件下的荧光特性来定量测定其浓度。

–优点：高灵敏度，高选择性。

–缺点：试剂成本较高。

四、结论通过对蛋清中溶菌酶的高效提取方法和定量测定方法的研究，我们可以得出以下结论： 1. 新型提取方法如超声提取法和酶解法可以提高溶菌酶的提取率和提取效率。

2. 定量测定方法如酶联免疫吸附法和荧光法具有高灵敏度和高特异性。