生物效应检定法

药物累积量法 又称毒理效应 法, 其基本原 理是将血药浓 度多点动态测 定与动物急性 死亡率测定蓄 积性的方法相 结合, 测定药 物动力学参数。
1.生物效价法
一种营养素的生物学效价是指该营 养素被动物食入后，被小肠吸收并 能参与代谢过程，贮存在动物体内 的部分占食入总量的比值，可概括 为相对利用率和绝对利用率
3、生物热动力学法
应用：常用于中药、药物制剂的微生物检查
依据
（1）：一切生命活动 均伴随着能和物质的 代谢与转化
（2）：微生物的生长 的能量代谢规律性、特 征性明显，可被微量量 热系统灵敏检视
例子：肖小河等利用生物热动力学对注射 剂进行无菌检查
4.药物累积法
• 定义：药物累积法又称毒理效应法，该法系在用药后不同间隔对多组动物
生物效 应强度
研究概况
• 早在20世纪50年代，我国医药学者就开始利用生物活性检 测法进行中药质量控制方面的研究。
• 19Leabharlann Baidu1年我国生药学家楼之岑院士报告了利用小鼠口服植物 性泻剂（大黄）排出湿便效应，建立了泻下药的生物活性 检测方法；
• 1997年周重阳等利用抗菌效应测定大蒜油中大蒜辣素和大 蒜新素等活性物的含量。
结果分析
大黄拮抗 FIB 的效果作为其 活血化瘀功效的评价指标， 应用于中药质量控制
2.药理效应法
药理效应法的含义：
根据药物的效应在一定条件下与体内药量呈对应关系， 根据效应的变化推知体内药量的变化，进而描述药物 的体内过程。
研究对象：
药理效应物质基础不明确，成分复杂不适合用血药浓 度法等其它方法研究的药物。
血药浓度法以某一单 一的化学成分为指标 进行检测
实验步骤：
确定量效关系。
确定时效关系。
拟合得到主要的药物动力学参数。
进行生物等效性评价。
应用实例：
周晓铢应用药理效应法同时测定双氯芬酸钠与青风藤 水提物药动学参数，实验研究表明，应用药理效应法 所测得药动学参数接近于药物在体内的真实情况。对 青藤碱的内在质量的评价和临床应用起到很好的指 导作用。
2005年版 《中国药典》 一部中水蛭 通过计算水 蛭粉末的抗 凝血酶活性 的方法进行 含量测定。
消栓肠溶胶 囊的效价测 定方法借鉴 了生物制品 中酶效价测 定方法。
张恩户等采用 体外抑菌法测 定连翘及其制 剂的抗菌活性， 用生物活性检 测法作为连翘 及其制剂的质 量控制方法。
二、方法介绍
生物效应的检定方法★ ★ ★
生物学效价也称“生物学利用率（Bioavailability）”。
张子仪(1994)指出，生物学效价包括消化率、代谢率、同化、有效 性和可利用率等多重涵义。
有人概括，生物效价是一种计量单位，是针对药物代谢动力学来说 的，通常都是单位有效量。
例子：
活血化瘀与凝血过程有密切关联，纤维
生物效价法测定大黄炮制品蛋活白血原化在瘀凝功血效酶的作用下生成纤维蛋白，
然后形成凝胶，这是血液凝 固基本过程的最后关键步骤。
效应指标为纤维蛋白原 ( FIB)
进行效价测定，记录成胶情 况及对应的纤维蛋白原剂量
大黄活血化瘀效价 ( U) = FIB 质量浓度 ( mg / mL) × 梯度 FIB 体积 ( mL) 大黄供试液梯度浓度 × 大黄供试液体积 ( 50 μL)
4.指标性成 分不能客观 地反映道地 药材的物质
内涵。
板蓝根、冬虫夏草
分别以精氨酸和腺苷为指标成分控制质量，但 与疗效几无关系。
人参
人参茎叶中人参皂苷 含量远高于人参(主 根)，若仅以皂苷含 量高低来量化质量， 必然得到人参茎叶优 于人参(主根)的结论
道地药材是历代中医评价中药
• 这些研究，为中药质量生物活性检测方法的建立奠定了基 础，但基于当时技术水平条件的限制，方法并不成熟，操 作比较繁琐，精密度和重现性不高，在实际研究中尤其是 中药质量标准中没有得到推广应用。
这些生物活性测定法在中药质量控制方面 中 药有含从得检了量2到测1较 的很 的世大 方好 进纪的 法的 一开发 开应 步始展始用发，，收，展生一入都。物些药有活生典益性物等于检活法中测性定药法检标质在测 准量中技 中生药术 。物质测活量定性控中制
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•所谓的生物效 价通常是以其完 成某种特定的生 理作用的程度作 指标来衡量，而 且标准参比物作 100%进行比较 而得。
•其基本思想是 选择适当的药理 效应作为观测指 标, 得出剂量效应曲线、时间 -效应曲线和时 间-体存药量曲 线, 从而得出药 物动力学参数。
•热力学的基本 原理在生命现 象以及和生命 现象有关的物 理现象中的应 用, 称为生物热 力学。
重复用药, 从而求出体存率, 并据此进行药动学计算。
• 应用实例：
1. 黄衍民等以小鼠的急性死亡率为指标,测定了乌头注射液的表观药动学参数, 结果表明药物的消除呈一级动力学过程并符合一室模型,为临床合理用药提供 了科学依据。
2. 周昆等用多次给药的小鼠半数致死量法,测定了香加皮配方颗粒在体内的残存 量和表观毒代动力学参数。结果发现香加皮配方颗粒体内残存量并不是随着 时间而一直降低,在6,12h出现了两个高峰点,其后呈一级动力学 消除,12h以 后消除相的消除半衰期t1/2= 7.55h,消除速度常数K=0.0918/h。可知香加皮配 方颗粒的毒性成分代谢过程较复杂,可能存在肠肝循环或毒性代谢产物生成。
第四组
中药分析 第四组
生物效应测定法 在中药中的应用
发展概况
生
方法介绍
物 效
应
测
应用及价值
定 法
问题及解决
一、发展概况
生物效应测定法的定义
生物效应测定法：以药理学为基础，生物统计为方法，运用
特定的实验设计，是利用药物对于生物整体、离体器官、细胞 、酶或分子等所起的作用, 在严格控制的试验条件下,通过比较 对照品和供试品对生物体或离体器官与组织的特定生物效应,从 而控制和评价供试品质量、活性或作用强度。
三、应用及价值
中药鉴定
质质量量控控制制
生物效应
评价技术 的应用
安全评价
现行的以指标性成分定性定量分析为核心内容 的中药质量控制方法体系存在很多局限。
1.指标性成分 不一定是有效
成分。
2.即使是有效 成分，其含量 高低与质量优 劣也不一定有 必然联系。
3.指标性成分 不能真实地反 映中药制剂的 稳定性变化。