显微镜观察方式对比
显微镜的七种观察方法
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按观察方法分 7-2
2.暗场:照明光通过物镜外
围射于试样，来自试样的干涉及 衍射光进入物镜并最终被观察到。
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暗场
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1 原理 丁道尔(Tyndall)现象，微粒对斜射光反射或衍射，增 大了人眼可见性。 2 特点 观察到极其微小物体，分辨率可达0.02 ~ 0.004 um (明场0.4um)—”超显微“。 3 缺点 只能观察到物体存在、运动和外部形态 不方便调节 标本要求高（灰尘、盖片、载片）
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使用抗衰减剂的效果
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汞灯灯箱构造
灯室，上下、左右旋钮，聚光镜旋钮
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按观察方法分 7-4
4.偏光:有些物质在两个呈
一定夹角的偏光滤片之间可现呈 鲜明的对比，或根据双折射性能 和定向呈现颜色
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偏光
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1 原理
依据波动光学原理观察和精密测定标本细节,或透明物体改变光束的物理参数,以 此判别物质结构的一种显微镜
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4 应用： 微小粒子、细菌形态观察 、细菌记数，透明标本观 察等
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按观察方法分 7-3
3.荧光:利用某些物质在受
到了紫外光或短波长的光激发照 射以后能够发射出比激发光波长 长的荧光的特性的观察方法
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荧光
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什么是荧光 ?
物质中的电子吸收光的能量由低能状态转变 为高能状态，再回到低能状态时释放出的光，是 非温度辐射光——冷光。即：物质吸收短波光， 发射出的长波光。
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按观察方法分 7-7
光学显微镜与电子显微镜的对比分析
光学显微镜与电子显微镜的对比分析光学显微镜与电子显微镜是研究物质微观结构的两种主要工具。
在物理、化学、生物、材料科学等领域中，它们被广泛应用于观察、分析和研究物质的微观结构。
本文将对这两种显微镜进行对比分析，探讨它们在不同情况下的优缺点。
1. 原理和工作方式的对比光学显微镜的原理是利用物镜将光线聚焦在物体表面上，产生放大的虚像，再经过目镜进行观察。
因此，光学显微镜适用于观察透明或半透明样品，并能提供较高的放大倍数。
相比之下，电子显微镜是利用电子束替代光线，以更高的能量轰击样品表面，然后观察电子束穿过样品的情况。
与光学显微镜不同，电子显微镜通常需要对样品进行金属蒸发、真空干燥等特殊处理，也需要对样品进行高度的打薄处理，从而克服电子束的浅穿透深度，并得到更具细节的球面形貌信息。
2. 分辨率的对比光学显微镜的分辨率取决于物镜的折射率和数值孔径，一般最高只能达到200-300纳米。
相比之下，电子显微镜利用电子束的波长远远小于可见光波长的弱点，可以产生比光学显微镜更高的分辨率。
近年来，随着透射电子显微镜（TEM）电子光源的发展、样品处理技术的改进、以及计算机技术的普及，分辨率已经达到亚埃的数量级。
这种分辨率对于研究材料的结构、表面变形等现象非常有用。
3. 成像质量的对比由于光学显微镜的成像原理，它在观察透明样品、亦或者形貌微小，深度复杂的三维形貌物体时，容易出现像差。
这个问题对于光学显微镜来说是很难避免的，因为它受限于物像的传输和成像系统，并且成像质量和保真度和样品发出的光线有着很大的关系。
相较之下，电子显微镜的成像质量要好于光学显微镜，因为电子显微镜利用的是电信号而非光信号，不受光学像差的影响。
此外，基于其非光学成像的特点，电子显微镜对比度较高、成像的色彩具备一定的知识含量，适用于高质量、高分辨率的表面成像。
4. 应用领域的对比光学显微镜的优点在于成像速度快、成本低、对样品形貌的高度限制较少，可被应用于从教育、材料科学到生物学的许多领域，比如：在生物学领域，可以用于观察细胞组织和细胞培养；在材料科学中，可以用于检查材料的纯度、结构，甚至用于检查表面嵌入的缺陷。
光学显微镜和电子显微镜技术比较分析
光学显微镜和电子显微镜技术比较分析光学显微镜和电子显微镜是两种常见的显微镜技术。
它们都是现代科技发展中不可或缺的成果，并在科学研究、医学、制造业等众多领域中得到广泛应用。
本文将对这两种技术进行比较分析，探讨它们各自的优缺点及适用范围。
一、光学显微镜光学显微镜是指利用可见光线对样品进行放大观察的显微镜。
它的特点是操作简单、结构轻巧、成本低廉，适用于对生物细胞、组织、液体等进行观察和分析。
光学显微镜通过透射和反射两种方式进行观察。
优点：1.分辨率高，能够放大细胞、组织等细小物质，观察到一些不同形态和特征的细胞和组织结构。
2.操作简单，不需要复杂的样品处理过程，使用方便。
3.成本低廉，适用于普及教育、导览等场合使用。
缺点：1.放大倍数限制，最高放大倍数大约为1000倍，不能观察到更细小的物质。
2.对样品类型敏感，光学显微镜主要适用于非透明物质的观察，对于透明的物质如水和玻璃等，观察时会受到干扰。
3.成像受限，能够观察到的深度较浅，不能够对样品内部结构进行观察。
二、电子显微镜电子显微镜是一种利用高能电子束对样品进行放大观察的显微镜。
它具有极高的分辨率，适用于对细小物质如细胞、分子和原子的微观结构进行观察和分析。
优点：1.分辨率极高，可以放大物质至100万倍以上，能够观察到细胞和分子的微观结构。
2.高精度成像，高能电子束可以穿透物质进行成像，更好的解决了透明物体的成像问题。
3.广泛应用，适用于各种不同类型的样品，例如生物、材料科学、纳米技术等领域。
缺点：1.设备昂贵，需要极高的技术和设备成本。
2.对样品要求较高，样品需要进行复杂的处理和制备，否则会影响成像效果。
3.操作难度大，需要经过长时间的培训和训练，才能熟练操作。
三、比较从优缺点分析可以看出，光学显微镜和电子显微镜在不同的领域具有各自的优势。
光学显微镜广泛应用于微生物学、生物学、医学等领域，对于细胞、组织等进行观察和分析非常合适。
而电子显微镜则适用于各种研究需要高分辨率的领域，如材料科学、纳米技术等。
显微镜三种观察方法对比
显微镜三种观察方法对比显微镜是一种用于观察微小对象的工具，具有高分辨率和放大倍数高的优点。
在显微镜观察中，有三种常见的观察方法，分别是亮场显微镜、暗场显微镜和荧光显微镜。
下面将对这三种观察方法进行详细的对比。
首先是亮场显微镜。
亮场显微镜是最常见的显微镜观察方法，其工作原理是通过透射光源通过样本，然后经过物镜和目镜的放大来进行观察。
亮场显微镜适用于各种生物组织和细胞观察，可以显示样品的透明性和结构。
亮场显微镜的分辨率高，但对于透明性较差的样品，观察效果可能不明显。
此外，亮场显微镜可以使用常规光学染色方法，如吉姆萨染色、伊红染色等，以增加样品的对比度。
接下来是暗场显微镜。
暗场显微镜是亮场显微镜的一种改进，通过使用特殊的暗场物镜，使样本处于一种特殊的照明方式下，即样本与周围背景之间的一种对比现象。
暗场显微镜适用于观察透明性差的样品，如活细胞、微小生物等，能够增强样本的对比度，并能够观察到样品的细胞运动和变化。
然而，暗场显微镜的分辨率相对较低，不适用于需要高分辨率观察的研究。
最后是荧光显微镜。
荧光显微镜是一种利用样品自身的荧光来观察的显微镜。
荧光显微镜通过激光或者白炽光源照射样本，样品中的荧光物质吸收光能，并发出荧光信号。
荧光显微镜可以观察标记有特定荧光物质的样品，如荧光染料、荧光蛋白等。
荧光显微镜具有极高的分辨率和特异性，可以用来观察细胞内特定分子的动态过程，如蛋白质分布、细胞器的位置等。
此外，荧光显微镜还可以进行多通道观察，即同时观察多种不同颜色的荧光信号，以获得更多的信息。
综上所述，亮场显微镜是最常见的显微镜观察方法，适用于各种样品，分辨率高，观察效果明显。
暗场显微镜适用于透明性差的样品，能够增强样本的对比度，并可观察细胞运动和变化。
荧光显微镜通过检测样品自身的荧光信号，具有高分辨率和特异性，适用于观察具有特定荧光标记的样品。
不同的观察方法具有各自的优缺点，根据需要选择适合的方法进行观察，能够更好地满足研究的需求。
显微镜的七种观察方式
显微镜的七种观察方法发布时间：2013-1-7一．明视野观察（Brightfield）明视野镜检是大家比较熟悉的一种镜检方式，广泛应用于病理、检验，用于观察被染色的切片，所有显微镜均能完成此功能。
二．暗视野观察（Darkfield）暗视野实际是暗场照明发。
它的特点和明视野不同，不直接观察到照明的光线，而观察到的是被检物体反射或衍射的光线。
因此，视场成为黑暗的背景，而被检物体则呈现明亮的象。
暗视野的原理是根据光学上的丁道尔现象，微尘在强光直射通过的情况下，人眼不能观察，这是因为强光绕射造成的。
若把光线斜射它，由于光的反射，微粒似乎增大了体积，为人眼可见。
暗视野观察所需要的特殊附件是暗视野聚光镜。
它的特点是不让光束由下至上的通过被检物体，而是将光线改变途径，使其斜射向被检物体，使照明光线不直接进入物镜，利用被检物体表面反射或衍射光形成的明亮图象。
暗视野观察的分辨率远高于明视野观察，最高达0.02—0.004三．相差镜检法（Phasecontrast）在光学显微镜的发展过程中，相差镜检术的发明成功，是近代显微镜技术中的重要成就。
我们知道，人眼只能区分光波的波长（颜色）和振幅（亮度），对于无色通明的生物标本，当光线通过时，波长和振幅变化不大，在明场观察时很难观察到标本.相差显微镜利用被检物体的光程之差进行镜检，也就是有效地利用光的干涉现象，将人眼不可分辨的相位差变为可分辨的振幅差，即使是无色透明的物质也可成为清晰可见。
这大大便利了活体细胞的观察，因此相差镜检法广泛应用于倒置显微镜。
1相差显微镜的基本原理是，把透过标本的可见光的光程差变成振幅差，从而提高了各种结构间的对比度，使各种结构变得清晰可见。
光线透过标本后发生折射，偏离了原来的光路，同时被延迟了1/4λ（波长），如果再增加或减少1/4λ，则光程差变为1/2λ，两束光合轴后干涉加强，振幅增大或减下，提高反差。
在构造上，相差显微镜有不同于普通光学显微镜两个特殊之处：1.环形光阑（annulardiaphragm）位于光源与聚光器之间，作用是使透过聚光器的光线形成空心光锥，焦聚到标本上。
不同倍数下标本片
不同倍数下标本片在生物学、化学、物理学等科学研究领域，显微镜观察标本片是一种常见的实验方法。
显微镜的倍数不同，观察到的标本片细节也有所差异。
本文将介绍不同倍数显微镜下的标本片观察方法及其应用，帮助读者更好地选择和使用显微镜。
一、不同倍数显微镜下的标本片概述显微镜的倍数分为低倍镜和高倍镜两种。
低倍镜一般放大倍数在40倍以下，高倍镜则分为油镜（40-100倍）和荧光镜（大于100倍）。
在不同倍数下，观察到的标本片形态和细节有所不同。
二、低倍镜观察标本片的技巧与应用1.低倍镜观察标本片时，视野范围较大，适合整体观察和组织结构的初步识别。
2.调整光源和镜头，使标本片清晰可见。
光线过强容易产生光学折射和反光，影响观察效果。
3.低倍镜适用于细胞和组织的形态观察，如细胞数量、大小、形状等参数的测量。
4.在低倍镜下，可以初步筛选和筛选具有研究价值的标本片。
三、高倍镜观察标本片的技巧与应用1.高倍镜观察标本片时，视野范围较小，适合观察细小结构和细胞器。
2.转换高倍镜时，需先将镜头移至标本片，然后缓慢旋转镜头转换器。
3.调整光源和镜头，使高倍镜下的标本片清晰可见。
高倍镜对光线的要求较高，需注意光线的强度和角度。
4.高倍镜适用于细胞器水平的研究，如线粒体、内质网等超微结构的观察。
四、不同倍数镜下标本片的优缺点比较1.低倍镜：优点是视野范围大，容易观察整体结构和形态；缺点是放大倍数较低，细节不易观察。
2.高倍镜：优点是放大倍数高，便于观察细小结构和细胞器；缺点是视野范围小，操作难度较高。
五、结合实际应用场景选择合适的倍数1.对于初步观察和筛选标本片，可选择低倍镜。
2.对于研究细胞器和超微结构，需使用高倍镜。
3.在实际操作过程中，可根据需要切换不同倍数的显微镜，以获得更好的观察效果。
总之，掌握不同倍数显微镜下的标本片观察方法，能帮助我们更好地开展科学研究。
光学显微镜的七种观察方式
上海超益光电科技有限公司
5.7、荧光观察
什么是荧光？
• 物质中的电子吸收光的能量由低能状态转变为高能状态，再回到低能状态时释放出的光， 是非温度辐射光——冷光。即：物质吸收短波光，发射出的长波光。
• 显微镜荧光利用光源激发——光化荧光
2019/7/17
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五、显微镜的七种观察方式
5.7、荧光观察
共轭面：吸收光线，直射光通过 物镜相板
补偿面：相位推迟，衍射光通过
聚光镜环状光阑
2019/7/17
5
五、显微镜的七种观察方式
5.3、相差观察
• 特点：
鉴定活体细胞最实用、最经济的方法
• 缺点：
需要光强高； 切片不能太厚(5~10um)； 盖片、载片需符合标准； 需增加单色滤镜以提高相差效果； 操作较麻烦； 相差荧光物镜的荧光成像效果较明场荧光物镜差。
2019/7/17
13
五、显微镜的七种观察方式
5.6、霍夫曼观察
• 原理：斜射光照射到标本产生折射、衍射，光线通 过物镜光密度梯度调节器产生不同阴影，从而使透 明标本表面产生明暗差异，增加观察对比度。
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2019/7/17
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五、显微镜的七种观察方式
5.6、霍夫曼观察
• 优点：
体荧光等
发荧光量的测定对物质定性、定量分析
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2019/7/17
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• 缺点：
只能观察到物体存在、外部轮廓、运动状态等； 物镜使用的局限，不方便调节； 对标本要求较高（灰尘、盖片、载片等）。
• 应用：
微小粒子、细菌形态观察、细菌记数，透明标 本观察等。
显微镜七种观察方式
显微镜七种观察方式
一、透射显微镜：
这种显微镜通过高倍透射光学系统将物体表层的透射光照射到放大镜
片上，使物体被放大，从而观察它的微观结构。
此外，可以通过涂抹不同
厚度的染料、加入使用紫外线源、加入高倍镜片、低倍玻璃、把它放进腔
体或把它和它的二维或三维图像连接在一起等方式来改变显微图像的效果。
二、扫描电镜：
它是一种计算机驱动的扫描技术，由一条直线扫描物体的表面，通过
把物体的表面反射光线映射到一个探测器上，从而获得一系列电学信号，
从而计算物体表面的细微结构和形状，以及由此推断物体的性质和状态。
三、后焦透镜：
它是一种原理类似于荧光显微镜的显微技术，使用荧光发射光束去照
亮物体，然后使用镜头聚焦到检测器，检测器将获得的物体图像转变为电
子信号，以方便计算机进一步处理。
四、激光扫描显微镜：
它是一种高精度的实时显微技术，使用激光照射物体表面，然后使用
透镜聚焦到检测器，检测器将获得的物体图像转变为电子信号，以方便计
算机进一步处理。
五、荧光显微镜：
它是一种放大微小物体的显微技术，其基本原理是使用一个荧光检测
器来检测物体上发出的不同波长的荧光。
dic观察方式
dic观察方式
DIC（differential interference contrast）显微镜观察方式是一种
常见的显微镜观察方法，用以增强透明样品的对比度。
以下是DIC观察方式的步骤：
1. 确保DIC装置安装正确：DIC模块一般包括偏光片、光源、偏振器和置物台。
确保所有组件正确安装并对齐。
2. 调整望远镜：将望远镜调至合适的焦点和眼轴高度。
3. 设置光源：开启光源，调整亮度和对比度，以获得清晰的图像。
4. 校准偏光片：将样品放在置物台上，并观察到样品的形状。
根据样品的形状和特点，调整偏光片，使样品的边缘和细节更容易可见。
5. 调整偏振器：根据样品类型，调整偏振器以增强对比度。
可以旋转偏振器或调节其角度，直到获得所需的对比度。
6. 对焦：使用聚焦旋钮将样品调至最佳焦点。
同时可以微调偏振器和偏光片，以获得更好的图像。
7. 观察和记录：在适当的放大倍率下，观察并记录样品的结构和细节。
DIC观察方式通过使用偏光和差分干涉来增加样品的对比度，
特别适用于透明样品（如细胞、光学薄片等）。
该方法能够提供高分辨率的图像，并能显示样品的形状、边缘和细节。
光学显微镜与电子显微镜在细胞观察上的比较
光学显微镜与电子显微镜在细胞观察上的比较简介:细胞是构成生命的基本单位，对细胞的观察和理解对于生物学研究至关重要。
光学显微镜（OM）和电子显微镜（EM）是两种常用于细胞观察的工具。
虽然两者都可以提供有关细胞结构和功能的信息，但它们在原理、分辨率、样品制备、成像方法和应用领域等方面存在显著差异。
本文将比较光学显微镜和电子显微镜在细胞观察上的优缺点，以及它们在不同领域的应用。
一、原理和分辨率光学显微镜是利用可见光来观察样品。
它使用了透镜系统来放大样品的细节，并使用目镜观察图像。
然而，由于可见光的波长限制，光学显微镜的分辨率被限制在约200纳米。
与此相反，电子显微镜使用了电子束来照射样品。
与可见光相比，电子束具有更短的波长，因此电子显微镜的分辨率可以达到纳米级。
这意味着电子显微镜能够提供更高的细节和更清晰的图像，使研究者能够观察到更小的细胞结构。
二、样品制备在使用光学显微镜观察细胞时，样品制备相对简单。
通常只需通过染色或显微技术使细胞可见，并将其放置在载玻片上进行观察。
这样的处理方法可以保持细胞的活性，并且不需要复杂的设备或处理步骤。
然而，在电子显微镜中观察细胞需要更复杂的样品制备过程。
由于电子束对细胞和有机物敏感，细胞必须经过固定、脱水和浸渍等步骤。
最终，细胞需要被固定在树脂中，然后切片以为电子束的穿透提供通道。
尽管这些处理步骤会导致细胞失去活性并且可能引入制品的人为错误，但电子显微镜可以提供较高的细节和更高的分辨率。
三、成像方式光学显微镜图像的形成基于透射光和反射光，通过利用与样品相互作用的光线来捕捉图像。
透射光和反射光的差别可以提供关于细胞结构和组织的信息。
然而，由于细胞的折射率和吸收率不同，光学显微镜在透视深度和细胞内部结构的可视性方面受到一定限制。
与之相比，电子显微镜使用电子束通过样品进行传输。
由于电子束具有较短的波长，它们能够穿透并传输到样品的内部，从而提供更高对比度、更清晰的图像和更丰富的细节。
显微镜的七种观察方法 ppt课件
显微镜的七种观察方法
应用： 矿物质、化学物品鉴别 鉴别纤维、染色体、淀粉粒、细胞中晶体 植物病理检验 鉴别骨骼、牙齿、胆固醇、神经纤维、肿 瘤细胞、横纹肌和毛发等
BAND PASS
落射荧光显微镜各部件特性和 作用
• 分色镜:
T%
反射激发光,荧光透过 ＜A 反射
＞A 透过
A
nm
• 吸收滤色镜:
T%
荧光透过,阻挡杂光
＜B 阻挡
＞B 透过
显微镜的七种观察方A法
B
nm
落射荧光显微镜各部件特性和 作用
分色镜: 反射激发光,荧光透过
T% ＜A 反射
＞A 透过
吸收滤色镜:
依据波动光学原理观察和精密测定标本细节,或透明物体改变光束的物理参数,以 此判别物质结构的一种显微镜
偏振器1
自然光（多 振动面）
偏振器2
偏振光（单 一振动面）
各向同性：单折射体，光性质不因照射方向而改变，普 通气体、液体、非结晶固体等
各向异性：双折射体，光速度、折射率、吸收和振动面、
振幅随照射方向不同，晶体、纤维等
）
显微镜的七种观察方法
显微镜的七种观察方法
显微镜的七种观察方法
按观察方法分七种
明场
DIC 暗场
荧光
偏光
霍夫曼 相差
显微镜的七种观察方法
显微观察方式
显微镜的七种观察方法
按观察方法分 7-1
1.明场:照明光直接通过聚
光镜入射于试样，并透过试样后 进入物镜并最终被观察到。
显微镜的七种观察方法
明场
显微镜的七种观察方法
明场观察方式
常规观察方式 应用领域：
常规镜检、病理、染色标本 优点：
显微镜三种观察方法对比
略有差别。由于两光束的裂 衍射，光线通过物镜光密度 物质也可成为清晰可见
距极小，而不出现重影现象，梯度调节器产生不同阴影， （相差板＋相位板构生共轭
使图象呈现出立体的三维感 从而使透明标本表面产生明 关系）
觉。
暗差异，增加观察对比度
微分干涉 DIC
浮雕相衬 RC
相差 PH
Differential interference Contrast
ห้องสมุดไป่ตู้
Relief Contrast
观察无色透明的物体
观察无色透明的物体
Phase Contrast
观察无色透明的物体
图象呈现出浮雕壮的立体感，图象显示阴影或近似三维结 观察效果更为逼真，无光晕 构而不会产生光晕；
利用被检物体的光程之差进
束。分裂出来的光束的振动 2002年，专利到期，各显微 行镜检，也就是有效地利用 方向相互垂直且强度相等， 镜厂家纷纷推出采用以自己 光的干涉现象，将人眼不可
原 光束分别在距离很近的两点 名义命名的RC技术产品
分辨的相位差变为可分辨的
理 上通过被检物体，在相位上 斜射光照射到标本产生折射、振幅差，即使是无色透明的
时，不能用塑料培养皿。 中的细胞,器官和组织；
中的细胞,器官和组织；
微分干涉 DIC
Differential interference Contrast
浮雕相衬 RC Relief Contrast
相差 PH Phase Contrast
微分干涉称镜检术是利用特 1975年，Robert Hoffman 制的渥拉斯顿棱镜来分解光 博士发明
无立体结构，光晕
特 点
微分干涉衬灵敏度高，制片 表面不能有污物和灰尘。标 本厚，适合贴壁
显微镜七种观察方式
（五）微分干涉观察方法
4 应用： 无色透明活体标本的细微结构，无 色荧光标本，染色标本，显微操作 等
*
DIC-PH
*
DIC-PH
*
（六）浮雕相衬显微镜
6 调节
1. 10X 物镜调节柯勒照明 2. （可以参照偏光观察方法，先调节偏光
镜正交） 3. 拿走标本，取下目镜，观察物镜后焦平
面 4. 将起偏镜、物镜方DIC棱镜和检偏镜放
*
多重染色标本的多色观察
FITC+Texas Red+DAPI
*
三色滤色镜的特性曲线
激发
分色
吸收
*
双重染色标本的单色和双色观 察
WU
WIB
DUAL BAND
DAPI+FITC
WIBA
WIG
*
WIB
FITC+PI
单色滤色镜的特性曲线
*
双色滤色镜的特性曲线
*
现行显微镜特点和各种滤色镜
*
自由组合 激 发块
470
550
CY3
552
565
TRITC
541
572
*
Propidium Iodide 530
615
滤色镜的特性
激发
分色
吸收
激发块型号 —— U-MWIBA
U- 通用型(BX/IX)
M- mirror unit, 激发块组
W- SW / W / N-超宽带/ 宽带 / 窄带激发
I- 使用干涉镀膜滤光片,激发/发射效率更高,
*
(三)相差பைடு நூலகம்察方式
2 特点 鉴定活体细胞最实用、最经济的方法 3 缺点 需要光强高 切片不能太厚(2~10um) 盖片、载片需符合标准 最好配用单色滤光镜 操作较麻烦 荧光效果不如明场物镜
目与微米目测与显微镜观察的精确度对比
目与微米目测与显微镜观察的精确度对比目与微米目测与显微镜观察的精确度对比一直是科学研究和工程领域中的一个重要议题。
随着科技的发展和仪器设备的更新换代，科学家们对目测和显微镜观察在测量和观察方面的精确度进行了深入的研究和比较。
本文将介绍目测和显微镜观察的定义、原理以及它们在精确度上的不同之处。
首先，目测是指通过肉眼直接观察物体，并用人眼来估测其尺寸或结构的方法。
目测常用于日常生活中，比如测量一张纸的大小、测量家具的尺寸等。
相较于目测，显微镜观察是通过显微镜这种精密的仪器来观察物体。
显微镜可以放大被观察物体的细节，使我们能够看到肉眼无法观察到的微小结构和颗粒。
显微镜广泛应用于生物学、医学、材料科学等领域，具有更高的分辨率和精确度。
其次，目测和显微镜观察在精确度上存在一定的差异。
目测尽管可以根据人眼的主观判断来进行估测，但受到了人眼自身的限制以及环境条件的影响。
例如，当观测光线较暗或者物体颜色较浅时，人眼容易出现视觉疲劳或者出现误差。
另外，人眼对于微小结构或者微粒的识别和测量也存在一定的限制，往往无法进行精确的观察和测量。
相比之下，显微镜观察具有更高的精确度和可靠性。
显微镜通过光学或电子的原理，将被观察物体放大数百到数千倍，从而能够清晰地看到更小的结构和颗粒。
而且，现代显微镜通常配备有高分辨率的相机和软件，可以实现数字化的观察和测量。
这种数字化观察和测量不仅能够消除观察者主观误差，还可以提供更精确的数据和结果。
此外，显微镜观察还可以应用各种技术和方法来增强观察的精确度。
例如，借助显微镜观察中的调焦技术，可以实现不同深度的观察和测量，从而获得更加立体的结构信息。
同时，显微镜还可以利用荧光染色、相差显微镜、共焦显微镜等技术来提高观察的对比度和分辨率，进一步提高精确度。
综上所述，目测和显微镜观察在精确度上存在一定的差异。
目测主要依赖人眼的主观判断，并且受到环境和个体差异的影响，精确度相对较低。
而显微镜观察通过精密仪器的辅助，能够提供更高的分辨率和精确度，可以观察和测量微小结构和颗粒。
显微镜霍夫曼观察方式
显微镜霍夫曼观察方式一、引言显微镜霍夫曼观察方式是一种常用的显微镜观察方式，可以帮助我们更加深入地了解样本的结构和特性。
本文将详细介绍显微镜霍夫曼观察方式的原理、步骤和应用。
二、什么是显微镜霍夫曼观察方式显微镜霍夫曼观察方式是一种透射光学技术，通过控制光源和样品之间的角度来调节样品的对比度和亮度。
它可以帮助我们更好地观察样品中的细节结构和特性。
三、显微镜霍夫曼观察方式的原理在显微镜霍夫曼观察方式中，我们使用一个称为霍夫曼调制器的装置来控制光源和样品之间的角度。
这个装置由两个玻璃板组成，它们之间有一层液晶分子。
当电场施加到液晶分子上时，它们会旋转偏振光线，并改变光线通过玻璃板时所发生的相位差。
这种相位差会影响到样品上反射和透射的光线，从而改变样品的亮度和对比度。
四、显微镜霍夫曼观察方式的步骤1. 准备好显微镜和霍夫曼调制器。
2. 将样品放在显微镜上，并调节焦距。
3. 打开光源并将其调整到合适的亮度。
4. 旋转霍夫曼调制器，观察样品的亮度和对比度变化。
5. 根据需要进行进一步调整，以获得最佳观察效果。
五、显微镜霍夫曼观察方式的应用显微镜霍夫曼观察方式广泛应用于生物学、材料科学、医学等领域。
它可以帮助研究人员更好地观察细胞、细菌、纤维等样品结构，从而深入研究其特性和功能。
同时，在材料科学中，它也可以帮助我们更好地了解材料中的晶体结构和成分分布。
在医学领域中，它还可以用于病理学检查和诊断。
六、结论通过本文的介绍，我们了解了显微镜霍夫曼观察方式的原理、步骤和应用。
这种观察方式可以帮助我们更好地了解样品的结构和特性，从而推动科学研究和技术发展的进步。
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显微镜观察方式比较：
1.明场（Brightfield-BF/H）
用于常规镜检，观察；病理或染色标本。
优点：
1.应用广泛，操作简单；
2.视野亮度高，均匀；
3.价格相对较低；
4.物镜适用于荧光观察。
缺点：
1.对比度低（透明或未染色标本）；
2.成像没有立体感。
2.相差（Phase Contrast-PH）
最常规的活细胞观察方式，用于对无色透明的标本进行观察，尤其适用于培养的活细胞，组织观察。
优点：
目前观测活细胞标本最经济，实用的方法。
缺点：
1.需要特殊的相差物镜（Ph）；
2.需要光强高；
3.切片不能太厚；
4.操作较麻烦；
5.荧光效果不如明场物镜。
物镜上的相位板不同，可以分为正/负相差两种不同的观察效果，负相差多用于生殖医学中精子形态的观察。
（正负相差的区别在于一个背景更黑，一个样品更黑）
原理：利用物体不同结构成分之间的折射率和厚度的差别，把通过物体不同部分的光程差转变为振幅（光强度）的差别，经过带有环状光阑的聚光镜和带有相位片的相差物镜实现观测的显微镜。
在构造上，相差显微镜有不同于普通光学显微镜4个特殊之处：
1.环形光阑（annular diaphragm）位于光源与聚光器之间，作用是使透过聚光器的光线形成空心光锥，焦聚到标本上。
2.相位板（annular phaseplate）在物镜中加了涂有氟化镁的相位板，可将直射光或衍射光的相位推迟1/4λ。
分为两种：
（1）A+相板：将直射光推迟1/4λ，两组光波合轴后光波相加，振幅加大，标本结构比周围介质更加变亮，形成亮反差（或称负反差）。
（2）B+相板：将衍射光推迟1/4λ，两组光线合轴后光波相减，振幅变小，形成暗反差（或称正反差），结构比周围介质更加变暗。
3.合轴调节望远镜：用于调节环状光阑的像与相板共轭面完全吻合。
3.微分干涉（Differential Interference Contrast-DIC）
使被检物体产生三维立体浮雕感觉。
用于无色透明标本的形状轮廓、内部结构、运动情况等观测及显微操作等。
优点：
1.观察效果更直观
2.无需特殊物镜，与荧光观察配合更好
缺点：
1.需要光强高
2.调节较复杂
3.不能应用于塑料容器培养物的观察
4.霍夫曼（Hoffman Modulation Contrast -HMC）
斜射光照射到标本产生折射、衍射，光线通过物镜光密度调节器产生不同阴影，从而使透明标本表面产生明暗差异，增加观察对比度。
是提高活细胞和组织的对比度的斜照明技术。
优点：
1.提高未染色标本的可见性和对比度
2.图像显示阴影或近似三维结构而不会产生光晕
3.可检测双折射物质（岩石切片，水晶，骨头）
4.可检测玻璃，塑料培养皿中的细胞，器官和组织
5.聚光镜的工作距离可以设计地更长
6.RC物镜也可用于明场，暗场和荧光观察
缺点：
1.观察效果与标本方向密切相关
2.操作较复杂
3.必须有多元件，结构复杂的高数值孔径RC物镜
4.荧光效果不如明场物镜
应用：
所有类型的细胞，组织（无论活体，染色，未染色），晶体表面细节，透明聚合物，玻璃和其他类似材料，尤其适用于显微操作。
在医疗上的典型应用-辅助生殖。
5.塑料DIC（Plastic DIC）
ZEISS公司新型专利设计的Plas DIC
可观察塑料培养器皿，对较厚的贴壁细胞和卵母细胞效果更明显，是显微操作和转基因操作的最佳观察方式。
ZEISS专利，兼具DIC和HMC的优势，且不需要特殊物镜。
6.荧光（Fluorescent-FL）
特性：
1.吸收光，必须有激发光源
2.荧光波长＞激发波长
3.荧光强度极小于激发光强度
优点：
1.高特异性-靶向标记
2.对细胞刺激小，可以活体染色
3.能进行多重染色-共定位
用途：定位，定性，定量的研究。
7.暗场（Dark Field-DF）
原理：
丁达尔（Tyndall）效应，微粒对斜射光反射或衍射，增大了人眼可见性。
特点：
能观察到极其微小的物体，分辨率可达0.02~0.04 μm（明场为0.4 μm）。
缺点：
1.只能观察到物体的存在，运动和外部状态
2.不方便调节
3.标本要求高（灰尘、盖片、载片）
应用：
微小粒子、细菌形态观察、细菌计数，透明标本观察等。
8.偏光
有些物质在两个呈一定夹角的偏光滤片之间可能呈鲜明的对比，或根据双折射性能和定向呈现颜色。
原理：
根据波动光学原理观察和精密测定标本细节，或透明物体改变光束的物理参数，
以此判别物质结构的一种显微镜。
应用：
矿物质、化学物品鉴别；鉴别纤维、染色体、淀粉粒、细胞中晶体；植物病理检验；鉴别骨骼、牙齿、胆固醇、神经纤维、肿瘤细胞、横纹肌和毛发等。