浅谈中药制剂薄层色谱质量的影响因素——技术操作过程中的注意
中药指纹图谱的注意事项薄层色谱
多年操作的一些感受薄层色谱实验的规范化1合格的仪器设备，可减少由于仪器设备的不规范引起的误差。
2薄层板最好使用商品预制板，2005年版药典要求强制性使用商品预制板，以避免由于手工铺板的技巧不同制备的薄层板质量不同造成的重现性差，同时应使用规范的点样、展开、扫描及成像设备，以提高时效，。
点样应注意下列事项1避免劣质的点样毛细管或样品溶液的过载造成原点（条点）的扩散。
2避免毛细管对版面原点部位的机械损伤。
3避免由于粘稠的生物样品供试液或含有太多的杂质造成原点部位局部样品浓度过高而形成粘结。
4避免使用粘度过大或沸点太高或太低或比重大的溶剂溶解样品，如乙醚、氯仿、丁醇等溶剂。
推荐使用合格的点样仪，有条件的实验室可使用电脑控制的半自动或全自动的点样仪，以提高重现性和准确度。
采用半自动和全自动点样仪的优点1点样头不直接接触薄层板涂层，避免对版面原点部位的机械损伤。
2减少扩散，提高分离度。
3减少人为误差，提高重现性和准确度。
1展开剂的选择展开溶剂在色谱展开起着关键作用，至今薄层展开剂的优化基本上还是依靠经验。
试错法仍然是分析实验室在选择展开剂时最常用的方法。
1对展开剂的要求，视目的而有所不同，对鉴别而言，全色谱的分离度越高越好，斑点越多，可供鉴别判断的信息越多。
2对含量测定而言，欲测定的物质斑点与相邻的物质斑点分离应符合定量的要求，而其他斑点的分离度可以忽略。
环境因素的影向作为“开放系统”的薄层色谱，环境因素往往明显地影响色谱的层析行为。
1湿度对薄层色谱行为的影响：对于如硅胶、氧化铝这类亲水性吸附剂，以及对蔬水性展开溶剂，环境的相对湿度对其影响是明显的。
2温度对薄层色谱行为的影响，温度对层析行为最明显的影响是分离度和RF值。
经常遇到的一种情况是同样的实验需要在夏天做，或者在南方和北方的实验室重复实验，这就遇到温度不同造成的影响，而使结果不易重现。
最基本要求是在记录时的温度和相对湿度。
3溶剂蒸气对色谱行为的影响：薄层版面上负载的溶剂蒸气参与了色谱的分离，因而极性溶剂蒸气容易被硅胶颗粒吸附，即使非极性溶剂中微量的极性溶剂也可能改变色谱的分离情况。
中药薄层色谱影响因素分析及应用
中药薄层色谱影响因素分析及应用李向军;王超;王永;安军永;王世华;李晓燕;秦拢;王猛【摘要】This paper compared TLC have a greater impact on the temperature, humidity and other factors, TLC, Discusses solution, and examples. TLC of many factors, but the analysis of thin - layer chromatography is widely used in traditional Chinese medicine classical method, With the thin layer plate, point - like technology, expand the technology to view the technical aspects of the development. TLC. the standardization and improvement of the degree of operating equipment, comhined with a simple, convenient and economic sensitivity, high efficiency, will in the traditional Chinese medicine and its preparations quality control and inspection play an increasing role.%该文分析了对薄层色谱有较大影响的温度、湿度等因素,探讨解决方案,并举例说明.薄层色谱的影响因素较多,但薄层色谱法仍是中药分析中广泛应用的经典方法.随着薄层板、点样技术、展开技术、检视技术等方面的发展,薄层色谱的规范化,操作仪器化程度的提高,加之其简单、便捷、经济、灵敏、高效,薄层色谱法必将在中药及其制剂的质量控制及检验中发挥越来越大的作用.【期刊名称】《中国药业》【年(卷),期】2011(020)014【总页数】3页(P13-15)【关键词】中药;薄层色谱;分离原理;点样;展开【作者】李向军;王超;王永;安军永;王世华;李晓燕;秦拢;王猛【作者单位】河北以岭医药研究院有限公司,河北石家庄050035;河北以岭医药研究院有限公司,河北石家庄050035;河北以岭医药研究院有限公司,河北石家庄050035;河北以岭医药研究院有限公司,河北石家庄050035;河北以岭医药研究院有限公司,河北石家庄050035;河北以岭医药研究院有限公司,河北石家庄050035;河北以岭医药研究院有限公司,河北石家庄050035;河北以岭医药研究院有限公司,河北石家庄050035【正文语种】中文【中图分类】R284.1薄层色谱是中药鉴别、中药成方制剂质量标准主要的研究和控制手段之一，其研究质量对中药成方制剂新药项目的质量标准意义十分重要。
薄层色谱分析步骤及注意事项
薄层色谱分析步调及注意事项之青柳念文创作薄层色谱法(thin layer chromatography简写TLC)是物理化学的分离技术，常常使用于药物的分离与分析现对此方法的分析步调及注意事项提点建议.薄层色谱分析步调完成TLC分析通常需经制板、点样、展开、检出4步操纵.⑴制板在一平面支持物(通常玻璃)上，平均地涂制硅胶、氧化铝或其他吸附剂薄层、样品的分离、检测就在此薄层色谱板上停止.一般选用适当规格的概况光滑平整的玻璃板.常常使用的薄层板规格有：10cm×20cm、5cm×20cm、20cm×20 cm等.称取适量硅胶，加入0.2％～0.5%羧甲基纤维素钠溶液（CMC-Na），充分搅拌平均，停止制板.一般来讲10cm×20cm的玻璃板，3～5g硅胶/块；硅胶与羧甲基纤维素钠的比例一般为1：2～1：4.制好的玻璃板放于水平台上，注意防尘.在空气中自然干燥后，置1l0℃烘箱中烘0.5～lh，取出，放凉，并将其放于紫外光灯(254nm)下检视，薄层板应无花斑、水印，方可备用.⑵点样用微量进样器停止点样.点样，先用铅笔在层析上距结尾lcm 处轻轻画一横线，然后用毛细管吸取样液在横线上轻轻点样，如果要重新点样，一定要等前一次点样残存的溶剂挥发后再点样，以免点样黑点过.一般黑点直径大于2mm，不宜超出5mm.底线距基线1～2．5cm，点间间隔为lcm左右，样点与玻璃边沿间隔至少lcm，为防止边沿效应，可将薄层板双方刮去1～2cm，再停止点样.⑶展开将点了样的薄层板放在盛在有展开剂的展开槽中，由于毛细管作用，展开溶剂在薄层板上缓慢前进，前进至一定间隔后，取出薄层板，样品组分固移动速度分歧而彼此分离.①展开室应预饱和.为达到饱和效果，可在室中加入足够量的展开剂；或者在壁上贴两条与室一样高、宽的滤纸条，一端浸入展开剂中，密封室顶的盖.②展开剂一般为两种以上互溶的有机溶剂，而且临用时新配为宜.③薄层板点样后，应待溶剂挥发完，再放人展开室中展开.④展开应密闭，展距一般为8～15cm.薄层板放入展开室时，展开剂不克不及没过样点.一般情况下，展开剂浸入薄层下端的高度不宜超出0.5cm.⑤展开剂每次展开后，都需要换，不克不及重复使用.⑥展开后的薄层板用适当的方法，使溶剂挥发完全，然后停止检视.⑦ Rf值一般节制在0.3～0.8，当Rf值很大或很小时，应适当改变活动相的比例.⑷黑点的检出展开后的薄层板颠末干燥后，常常使用紫外光灯照射或用显色剂显色检出黑点.对于无色组分，在用显色剂时，显色剂喷洒要平均，量要适度.紫外光灯的功率越大，暗室越暗，检出效果就越好.展开分离后，化合物在薄层板上的位置用比移值(Rf值)来暗示.化合物黑点中心至原点的间隔与溶剂前沿至原点的间隔的比值就是该化合物的Rf值.注意事项铺板用的匀浆不宜过稠或过稀：过稠，板容易出现拖动或停顿造成的层纹；过稀，水蒸发后，板概况较粗糙匀浆配比般是硅胶G:水=1：2～3，硅胶G:羧甲基纤维素钠水溶液=1:2.研磨匀浆的时间，根据经历来定，与空气湿度有关，一般通过拿起研棒时匀浆下滴的情况来断定，越稠越难下滴.匀浆的稀稠除影响板的平滑外，也影响板涂层的厚度，进一步影响上样量.涂层薄，点样易过载；涂层厚，显色不那末分明.通常，板的质量对薄层鉴此外影响不是很，影响最大的是展开剂的配制和展开系统的饱和.点样尽可能用小的点样管.如果有足够的耐性，最好只用1微升的点样管.样，点的黑点较小，展开的色谱图分离度好，颜色分明.样品溶液的含水量越小越好，样品溶液含水量大，点样黑点分散大.样品溶液的溶剂一般是无水乙醇、甲醇、氯仿、乙酸乙酯.点好样的薄层板用电吹风的热风吹干或放入干燥器里晾干.展开剂配制选择合适的量器把各组成溶剂移入分液漏斗，强烈振摇使混合液充分混匀，放置，如果分层，取用体积大的一层作展开剂.相对不该该把各组成溶液倒入展开缸，振摇展开缸来配制展开剂.混合不平均和没有分液的展开剂，会造成层析的完全失败.各组成溶剂的比例准确度对分歧的分析任务有分歧的要求，尽可能达到实验室仪器的最高切确度，比方：取1ml的溶剂，应使用1ml的单标移液管，移液管应符合计量认证要求，虽然时候这不是必须的.展开系统的饱和一般使用的是双槽的展开缸，一槽用来放展开剂，另外一槽可加入氨水或硫酸.把待展开的板放入两槽间的平台，斜架着，盖上展开缸的盖子.让展开剂的蒸气充满展开缸，并使薄层板吸附蒸气达到饱和，防止边沿效应，饱和时间在半小时左右.展开时不免要打开盖子把薄层板放入展开剂中，不过对薄层板与蒸气的吸附平衡影响不大，当然动作应该尽可能轻、快.温湿度的节制温湿度对薄层影响都很大.不冻结的提下，通常温度越低分离越好，较难的分离需在低温下分离，例如人参皂苷.湿度的影响，估计主要是影响薄层板的吸附才能，导致选择性（容量因子）的变更，湿度应根据实际情况确定.温度节制使用空调器或冰柜，湿度节制是通过在另外一展开槽放置相应浓度的硫酸.显色喷显色剂显色最重要是有好的雾化器.。
薄层色谱法的操作要点及影响因素
薄层色谱法的操作要点及影响因素李杨姜慧莹陈嘉兴杨爽黄帅*（吉林职业技术学院延边133400）摘要：目的：对薄层色谱法操作步骤中的影响因素进行分析，并以实验过程中实际案例说明薄层色谱法在实际操作中的主要影响因素。
方法：分别从供试品溶液的制备、选择吸附剂、点样、展开、显色与检视六个方面对薄层色谱法的影响因素加以阐述。
结果：薄层色谱法操作中供试品溶液的制备、对照品或对照药材溶液的制备、选择吸附剂、点样、展开、显色与检视对药物检测均有影响。
结论：对薄层色谱法的操作影响因素进行分析，对于药物检测具有指导意义。
关键词：薄层色谱影响因素操作要点中图分类号：R286.0文献标识码：A文章编号：1672-8351（2020）06-0001-02Key points and influencing factors of TLCLi Yang Jiang Huiying Chen Jiaxing Yang Shuang Huang Shuai（Jilin Polytechnic Yanbian133400）Abstract：Objective：This study analyzes the influencing factors in the operation steps of TLC，and illustrates the main influencing factors in actual operation by the actual case in the experimental process.Methods：The influencing factors of thin-layer chromatography were studied in detail from six aspects：preparation of test solution，selection of adsorbent，spotting，unfolding，color development and inspection.Results：The preparation of the test solution in the TLC operation，the preparation of the reference or control drug solution，the selection of the adsorbent，the spotting，the development，the color development and the inspection were all affected by the drug detection. Conclusion：The analysis of the factors affecting the operation of TLC is of guiding significance for the operation of drug detection. Keywords:Thin layer chromatography Influencing factors Operational points薄层色谱法系将供试品溶液点于薄层板上，在展开容器内用展开剂展开，使供试品所含成分分离，所得色谱图与适宜的标准物质按同法所得的色谱图对比[1，2]。
薄层色谱法操作技术控制要点分析
薄层色谱法操作技术控制要点分析【摘要】2015年版《中国药典》一部中，有4088项采用TLC法进行中药鉴别，可见薄层色谱法技术操作的普遍性。
但很多药学人员常常会由于操作技术不够规范而导致结果的不准确性，尽管其具有操作简便、结果直观的优势。
本文将对薄层色谱法操作技术控制要点进行概括分析，旨在为实际鉴别应用提供参考。
【关键词】薄层色谱法；操作技术；控制要点【中图分类号】TF724.5【文献标识码】A【文章编号】2096-0867（2016）-09-089-01薄层色谱（Thin-layer Chromatography，TLC）法自开始作为色谱法的一个分支应用以来，以其操作简便、结果直观的优势被广泛应用于中药鉴别和分析中[1]。
最为直观的证明就是在2015年版《中国药典》一部中，就有4088项采用TLC法进行中药鉴别。
尽管如此，仍有许多人由于操作技术不够规范而导致结果的不准确性。
本文将对薄层色谱法操作技术控制要点进行概括分析，旨在为实际鉴别应用提供参考。
1 TLC操作方法及其注意事项TLC的操作过程主要包括五个步骤：选择薄层板、点样、展开、显色、检视与记录[2]。
其中，薄层板上斑点的清晰度、分离度和重现性是判断薄层色谱效果的关键。
由于薄层色谱容易受外界环境的干扰，因此，需要严格对待操作过程中的每一个步骤。
1.1选择薄层板目前实验室多数采用市售硅胶G型薄层板或自制薄层板，前者的分离效果更优。
实验操作中对薄层板的要求是厚度均匀，表面平整光滑，无麻点气泡和破损污染等。
硅胶G薄层板适用于分离酸性和中性物质，因其表面pH值约为 5；分离碱性物质时可稀碱溶液自制薄层板，或用碱性展开剂展开，从而得到理想的图谱。
市售薄层板保存于阴凉干燥处，可直接使用；自制薄层板使用前一般应于110℃下活化 30 min，并置干燥器中备用。
不同批次的薄层板可能会影响试验的重新性，需注意。
1.2点样点样方式主要有自动点样和手动点样两种，后者以其灵活方便的优势应用较为普遍。
薄层色谱操作注意事项
薄层色谱操作注意事项影响薄层色谱分析的因素有很多，比如样品处理方法、薄层板制备技巧、点样方法、展开剂的遴选、温湿度的掌控等等很多方面，在这里对其操作要点作一下简单介绍:1铺制薄层板：铺板用的匀浆不宜过稠或过稀：过稠，板容易出现拖动或停顿造成的层纹；过稀，水蒸发后，板表面较粗糙。
匀浆配比一般是硅胶G:水=1：2～3，硅胶G:羧甲基纤维素钠水溶液=1:2。
研磨匀浆的时间，根据经验来定，与空气湿度有关，一般通过拿起研棒时匀浆下滴的情况来判断，越稠越难下滴。
匀浆的稀稠除影响板的平滑外，也影响板涂层的厚度，进一步影响上样量。
涂层薄，点样易过载；涂层厚，显色不那么明显。
通常，板的质量对薄层鉴别的影响不是很大，影响最大的是展开剂的配制和展开系统的饱和。
2点样：尽量用小的点样管。
如果有足够的耐性，最好只用1微升的点样管。
这样，点的斑点较小，展开的色谱图分离度好，颜色分明。
样品溶液的含水量越小越好，样品溶液含水量大，点样斑点扩散大。
样品溶液的溶剂一般是无水乙醇、甲醇、氯仿、乙酸乙酯。
点好样的薄层板用电吹风的热风吹干或放入干燥器里晾干。
薄层色谱用于定量时，点样是最主要的误差来源。
供试液的溶剂均有不同程度的洗脱力，所以在点样的同时，样品在原点就可是成环形展开，原点直径的扩散促进了这种展开，Kaiser称之为“上样环形色谱效应”。
如果样品在溶剂中的溶解度很大，原点将变成空心环。
这种效应对随后的先行展开造成很不利的影响。
供试液的溶剂在原点的残留，也会改变展开的选择性，特别是供试液的溶剂与展开剂的极性相差较大时更明显。
再者，亲水性溶剂残留在原点吸收大气中的水分（特别在高湿度环境）对色谱的影响也不可低估。
因此点样时的同步干燥或继后干燥以除去原点残存的溶剂是需要的。
但应尽可能避免高温加热，如用吹风筒加热，样品变为固态后，部分或全部强烈的吸附在吸附剂的颗粒上，而促进了硅胶的有催化作用的活性表面故态化学反应，导致样品的变性（尤其热不稳定物质），至少移动相在展开时对这部分样品的溶解速度比移动速度慢得多而形成拖尾（斑点拖尾的原因之一）。
薄层色谱注意事项
薄层色谱注意事项
薄层色谱是一种常用的分离和分析技术，但在使用过程中需要注意以下几点：
1. 薄层板的选择：不同的薄层板材料和厚度适用于不同的分析目的，应根据实验要求选择适当的薄层板。
2. 样品的制备：样品的制备要求纯度高、溶解度适宜、浓度适中，样品沉淀或悬浮物应去除。
3. 样品施加量：样品施加量不宜过多，一般为2-5μL，避免施加过量导致结果失真。
4. 开始实验前的预处理：薄层板应先蒸发干燥，同时保持操作环境干燥，以避免水汽和污染物对实验结果的干扰。
5. 显色剂的使用：显色剂的选择应与样品性质匹配，显色后应立即照相或测量和记录扫描结果。
6. 扫描条件的选择：扫描条件的选择应根据样品性质、显色剂和仪器的特点选择适当的条件，以获得最佳的扫描结果。
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薄层层析和纸色谱操作注意事项
关于薄层色谱的一点体会总结：薄层层析和纸色谱操作注意事项一、应用：薄层色谱是一种微量、快速、简便的分析方法。
适用于微量样品的分离、鉴定和制备。
在中药制剂制备过程中，经适宜的工艺来取舍处方中各药材的各类成分，从而达到保持或改变药物作用性质或降低其毒副作用的目的。
而薄层色谱法具有分离与鉴定的双重功能，通过薄层图谱与对照品、对照药材的图谱相比较，除了能鉴出有效成分或特征成分外，还以完整的色谱图作为一个整体对制剂加以鉴别，提高了鉴别的准确性，尤其当有效成分尚不确切时，更显示出薄层色谱法的实用性。
薄层色谱分析法由于适合国情、简便、快速，能有效地、直观地反映药品地真实性、稳定性，现已成为中药制剂的鉴别和质量控制的行之有效的方法之一。
操作二、操作要点：（一）薄层层析1、铺制薄层板：将吸附剂1份和水2.5-3.0份（或加入黏合剂的水溶液）在研钵中向一方向研磨混合,去除表面的气泡后，进行涂布（厚度为0.2～0.3mm）,颠板，于室温下，置水平台上晾干，在反射光及透视光下检视，表面应均匀，平整，无麻点、无气泡、无破损及污染，于100-110℃烘30分钟,冷却后立即使用或置干燥箱中备用。
2、点样：用点样器点样于薄层板上,一般为圆点，点样基线距底边1.0～1.5cm，样点直径一般不大于2mm,点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜。
若因样品溶液太稀，可重复点样，但应待前次点样的溶剂挥发后方可重新点样，以防样点过大，造成拖尾、扩散等现象，而影响分离效果。
点样时必须注意勿损伤薄层表面。
注：在薄层色谱中，样品的用量对物质的分离效果有很大影响，所需样品的量与显色剂的灵敏度、吸附剂的种类、薄层的厚度均有关系。
样品太少，斑点不清楚，难以观察，但样品量太多时往往出现斑点太大或拖尾现象，以至不易分开。
3、展开将点好样品的薄层板放入展开缸的展开剂中，浸入展开剂的深度为距原点5mm为宜，密封，待展开至规定距离（一般为8～15cm），取出薄层板，晾干，待检测。
薄层色谱分析的主要影响因素
Part Ⅰ
薄层色谱分析的主要影响
因素
一、样品的预处理及供试液的制备
样品供试液净化的方法
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二、薄层色谱的上样技术
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三、吸附剂活性与相对湿度对薄层色
谱的影响
相对湿度的控制方法w
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四、溶剂蒸气在薄层色谱中的作用
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黄连中生物碱的薄层鉴别w
黄连中生物碱的薄层鉴别
人参及西洋参的薄层鉴别
五、关于薄层色谱的优化
及溶剂系统(展开剂)的选择w
目前主要方法：
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单一溶剂极性顺序
黄连中生物碱的薄层鉴别
不同展开剂对人参皂苷的分离效果
六、温度对薄层色谱的影响w
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不同温度下人参中人参皂苷的薄层层析行为（氯仿-甲醇-水65：35：10，
下层溶液）
三七总皂苷的薄层鉴别
七、影响蒲层色谱的其他因素
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不合格的手铺自制板
新鲜溶剂与多次开瓶使用后的溶剂
参考书目
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实验室中的薄层色谱正确操作薄层色谱仪器的注意事项
实验室中的薄层色谱正确操作薄层色谱仪器的注意事项实验室中的薄层色谱：正确操作薄层色谱仪器的注意事项薄层色谱是一种广泛应用于实验室分析的技术，它通过将待测物质与移动相沿着一层固定相上进行分离，实现对化合物的定性和定量分析。
在进行薄层色谱实验时，正确操作薄层色谱仪器是确保实验成功的关键。
本文将介绍薄层色谱仪器的正确操作注意事项。
一、样品处理和施加样斑在进行薄层色谱实验之前，首先需要将待测样品进行准备和处理。
样品应当经过充分的提纯和浓缩，以保证实验结果的准确性。
在处理样品时，应注意避免样品与皮肤直接接触，并注意合理使用个人防护措施，如实验手套等。
处理好样品后，可使用微量注射器或玻璃毛细管将样品滴在薄层色谱板的样品点处。
二、适当的上样量和样斑位置在进行薄层色谱实验时，选择适当的上样量对于实验结果的准确性至关重要。
上样量过多或过少都可能导致色斑不清晰，影响分离效果。
一般来说，对于常规薄层色谱板，上样量应控制在1-2微升左右。
此外，样斑位置的选择也是重要的。
应将样斑施加在离色谱板底部约1.5厘米处，以避免样斑扩散到上部分离系统。
三、色谱板的放置和开展色谱在将样斑施加在色谱板上后，需要将色谱板放置在色谱槽或色谱缸中，用适当的溶剂进行溶剂移动相的插入。
为了保证色谱的准确性，在放置色谱板时应确保色谱板的底部与移动相不接触，通常采用满料装填等方式来保持适当的距离。
此外，溶剂前处理也是至关重要的一步，可采用对称浸润法或双向浸润法，以保证溶剂在色谱板上均匀分布。
四、色谱结果的显现和分析完成色谱过程后，需要将色谱板取出，并根据需要对其进行显现。
显现方法包括紫外灯照射法、荧光染料显现法、化学显现法等。
选择适当的显现方法可以提高实验结果的清晰度和可读性。
完成显现后，可以使用扫描仪或色谱仪进行色谱图的分析和解读。
根据样斑的迁移距离和相对位置，可以准确确定各组分的相对含量和对应化合物的鉴定。
五、安全措施和仪器检查在进行薄层色谱实验时，安全措施必不可少。
中药薄层色谱鉴别检验中的影响因素及问题探讨
中药薄层色谱鉴别检验中的影响因素及问题探讨本文就对影响中药薄层色谱鉴别检验质量的各项因素进行分析，对控制影响因素的各项方案进行探究，提升控制效果。
标签：中药；薄层色谱；分离原理；影响因素中药薄层色谱鉴别检验主要是通过薄层色谱上斑点的有无完成药品真伪的判断，通过斑点的大小及颜色完成药品品质的分析。
中药薄层色谱鉴别检验在操作的过程中主要将供试品溶液点在薄层板上，通过层析缸中的展开剂完成药物分离[1]。
检验人员根据色谱图状况，将供试品色谱与对照物色谱进行比对，通过薄层扫描实现药品鉴别、检查及药品含量测定。
该种操作在检验的过程中具有非常高的实用价值，结果直观性强，分析准确性相对较高，值得进行深入研究和应用。
1 薄层色谱鉴别方法及原理中药薄层色谱鉴别检验是中药鉴别、中药成方制剂质量控制的重要方式。
我国通过多年研究明显提升了对照药材及对照技术的控制效果，各种控制操作较为简便、成本较为低廉，已经被广泛应用。
1.1 鉴别方法中药薄层色谱鉴别检验实施的过程中要先将样品溶液通过毛细管点于薄层板一端，然后要在密闭层析缸内完成薄层板上的样品组分分离操作。
加入的展开剂（或吸附剂）在薄层板上移动，带动样品中的各项组分逐渐扩散，展开剂中不同极性的溶剂，在提升样品移动效果的同时，对各组分进行分离，最终完成展开操作。
由于样品各组分性质不同，其展开移动过程中的距离也不相同，当展开达到一定程度时，显示分离的组分斑点。
操作人员可以通过显色剂等在薄层板上显示斑点位置，当组分具有颜色时可以直接观察，当组分不具有颜色时需要喷显色试剂后观察，对斑点状况进行对比、分析。
1.2 分离原理在上述操作过程中，由于吸附剂对不同成分的吸附效果不相同，成分在吸附后的移动相至固定相过程中会产生连续吸附，导致吸附之间相互分离，形成不同斑点。
上述连续吸附、解吸附、再吸附、再解吸附的过程中由于固定相的差异，可以形成不同薄层色谱，可以通过对同一样品在不同固定相上的分离或不同展开剂中展开而得到的斑点状况进行对应对比，提升药品检验的准确性。
中药薄层色谱鉴别检验中的影响因素及对策研究
中药薄层色谱鉴别检验中的影响因素及对策研究摘要：本文主要研究重点为中药薄层色谱鉴别检验工作，结合既往工作经验，对检验影响因素展开讨论，并提出相应的解决对策，确保检验工作高质量开展。
本文研究结果表明，在该检验方法中，涉及影响因素相对较多，应切实加强针对性对策，做好检验管理工作，进而确保检验结果的可靠性。
关键词：中药薄层色谱鉴别；鉴别检验；影响因素引言：随着薄层板点样技术、展开技术方面的快速发展，仪器设备精密度的提高，薄层色谱检验技术在中药检验中得到了广泛应用[1]。
由于存在灵敏度高、鉴别专属性强的优势，薄层色谱鉴别在《中国药典》中的应用比例逐步增高。
但是该技术的应用易受到相关影响因素干扰，存在检验结果重复性和稳定性不高的情况。
因此，加强对检验影响因素控制工作，可更好缩短检验周期，降低检验成本[2]。
1.检验影响因素和解决对策1.1 点样技术点样过程中，当点样量过小，则易造成斑点不清晰，影响结果判断；点样量过大时，易造成拖尾现象，影响分离度。
此时可采用更换点状或带状点样方式，调节合适点样量[3] [4]。
若存在原点残存溶剂残留，也会对展开剂的选择性产生影响，故点样后应根据供试品成分的热稳定性对其选择合适的干燥方式：吹风机冷风吹干，避免高温加热，防止热不稳定成分被破坏或样品变成固态后，促成硅胶的活性表面固态化学反应[3]。
1.2 展开剂展开剂的比例、用量、溶剂蒸汽都对薄层色谱的展开效果有着较大影响。
展开过程，配制展开剂应严格控制比例的准确度；放置展开剂的用量，在展开缸中深度应距原点 5 mm 为宜，切勿将原点浸没，避免成分被展开剂溶解而不随展开剂在板上分离[4]。
溶剂蒸汽处理不到位可能会造成影响斑点分离度、产生第二前沿、边缘效应等影响薄层色谱质量的现象[5]。
操作人员可根据具体的薄层色谱效果选择合适的饱和方式,如调整往展开缸中放置展开剂和薄层板的顺序；在展开缸中贴上与展开缸高、宽同样大小的滤纸辅助饱和[3]；根据展开效果调整预饱和时间[4]；在分离生物碱时，置于氨蒸气饱和的展开环境中展开[6]等。
薄层色谱注意事项
薄层色谱注意事项
薄层色谱是一种常用的分离技术，但在操作过程中也需要注意以下事项：
1. 样品处理：样品处理的质量对分离效果有重要影响，应注意避免样品中的杂质和水分对分离结果的影响。
2. 薄层板的选择：根据分离物的性质选择不同类型的薄层板，如硅胶、铝板或玻璃板等。
同时，应注意薄层板的质量，避免出现变形或损坏等情况。
3. 涂层均匀性：涂层均匀性是保证分离效果的重要因素。
涂层不均匀会导致分离效果差、峰形不对称等问题。
因此，在涂层时应注意均匀性。
4. 显色剂的选择：不同的显色剂对不同的化合物有不同的选择性，应根据需要选择合适的显色剂。
5. 条件控制：控制分离过程中的温度、湿度、 pH 值等因素对结果具有重要影响，应注意控制条件。
6. 结果的分析：对分离结果进行准确的分析，包括峰面积、保留因子、分离度等指标，有助于评估分离效果和优化条件。
总之，薄层色谱需要注意多个因素才能保证分离效果和结果的准确性。
- 1 -。
薄层色谱法检验中药应注意的问题
第9卷第17期·总第121期2011年09月·上半月刊146表2 不同运动量对小鼠常压耐缺氧及急性脑缺血缺氧实验的影响（±s） 组别常压耐缺氧实验小鼠存活时间(min) 急性脑缺血缺氧小鼠张口呼吸时间(min)空白对照组 54.8±16.1 14.0±1.4模型对照组 89.0±13.7##——尼莫地平组 42.8±15.6** 17.0±0.8#高运动量组 68.2±12.5* 18.5±3.0#中运动量组 57.3±30.0 19.0±2.2##低运动量组 62.5±15.4* 17.25±2.2#注：与空白对照组相比，#P＜0.05，##P＜0.01；与模型对照组相比，*P＜0.05，**P＜0.013 讨论3.1 不同运动量对亚硝酸钠导致记忆障碍小鼠的潜伏期的影响文献报道，亚硝酸钠一次性腹腔注射是复制小鼠记忆巩固障碍模型很常用的方法[9]，大量的亚硝酸钠进入机体后，可以将原来正常的血红蛋白氧化，使其变为高铁血红蛋白，使其失去携氧的能力，引起机体各种组织缺氧[10]。
脑组织缺氧，可以引起记忆巩固障碍。
不同运动量能显著缩短亚硝酸钠导致记忆障碍小鼠的Morris水迷宫定向游泳实验的潜伏期，说明不同运动量可以改善亚硝酸钠导致记忆障碍小鼠的空间学习记忆能力。
3.2 不同运动量对亚硝酸钠模型小鼠的常压耐缺氧能力的影响将亚硝酸钠模型小鼠放在密闭广口瓶中，使小鼠进一步接受缺氧因素的损害。
注射亚硝酸钠本身已经造成机体的组织缺氧，所以模型组小鼠对缺氧会产生适应现象，对缺氧已经有了较强的耐受力，所以放入广口瓶中的模型组小鼠存活时间较长；而尼莫地平与不同运动量均能对抗亚硝酸钠引起的缺氧作用，所以这些小鼠没有提前适应缺氧现象，不能耐受密闭缺氧，所以存活时间较短。
3.3 不同运动量对小鼠的耳廓微循环及耐急性缺血性缺氧能力的影响脑组织的供血供氧不足会导致神经细胞生化代谢过程下降，进而可引起脑老化、甚至导致痴呆，国内外已有相关报道[11]。
最新.薄层色谱法在中药检验中的应用及操作要点
d a b2 f
北柴 胡
大叶 柴胡
锥叶 柴胡
西南 藏柴 柴胡 胡
操作要点及常见问题分析-标准物质的选择
中药材 选择该味药材的主要活性成分，必要的时候要用 多个薄层来鉴别，尽可能全面的反应该味药材的薄层特征。
丹参 丹参酮ⅡA为丹参中的菲醌类成分，具有扩张冠脉的 作用；丹酚酸B为其水溶性的活性成分，具有抗氧化、抗 自由基、对心脑血管缺血-再灌注损伤具有保护作用。为丹 参中主要的活性成分。《中国药典》2015年版一部中，丹 参的鉴别所选用的标准物质为丹参对照药材、丹参酮ⅡA、 丹酚酸B。
在检验中的应用 鉴别
分为以对照品为对照、以对照药材为对照、以对照品和对照药材联合对照三 种方式，在中药及中药材检验中应用广泛。
白芷薄层色谱鉴别（以对照品为对照）： 1、欧前胡素 2、异欧前胡素 3-13、白芷药材
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
在检验中的应用 鉴别
红参薄层色谱鉴别（以对照药材为对照）： 1、红参对照药材 2-11、红参药材
操作要点及常见问题分析-影响因素
供试品溶液 当供试品溶液杂质较多，色带干扰严重，目标成分与
其他斑点的分离度较差。宜选择合适的方法对供试品溶液进行净化。
1
2
3
1:未经Al2O3小柱的人参样品； 2:未经Al2O3小柱的红参样品； 3:经过Al2O3小柱的红参样品； （*：与其他皂苷斑点位置重叠的人参皂苷 Ro）
操作要点及常见问题分析-点样
手动点样 最常用的为定量点样毛细管，规格有0.5μl、1μl、 2μl、3μl、5μl、10μl等。
操作要点及常见问题分析-手动点样要点
可用点状点样及条带状点样两种方式。
薄层色谱的特点以及注意事项 薄层色谱操作规程
薄层色谱的特点以及注意事项薄层色谱操作规程薄层色谱又叫薄板层析，作为色谱法中的一种，它也是快速分别和定性分析少量物质的一种很紧要的试验技术，属固液吸附色谱。
薄层色谱兼备了柱色谱和纸色谱的优点，不仅适用于少量样品的分别；而且在制作薄层板时，又可用来精制样品，特别适用于挥发性较小或较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的质。
此外薄层色谱法还可以用来跟踪有机反应及进行柱色谱之前的一种“预试”。
薄层色谱仪器特点：1、操作简单。
2、占用空间小且性能稳定，经久耐用可免维护。
3、圆形色谱板转速可调，适应不同分别要求。
4、经过安全设计，使用安全性高。
5、分别部件使用数控机床加工，同心性好，辨别率高。
6、接受步进电机掌控恒流泵，流量精准，调整便利。
7、带有紫外全波长检测器，不需要进行紫外察看设备。
8、带有全自动馏分收集器，进行无人化分别收集。
9、带有样品净化过滤柱，防止显现不可逆吸附。
注意事项：1、薄层经打开后用刮刀或捕集器将斑点的吸附剂捕集后，再用适当有机溶剂洗脱，然后用可见、紫外分光光度法、荧光分光光度法测定含量。
2、样品斑点不能喷显色剂，以免影响不测定，斑点位置的确定方法。
3、样品在紫外线下发射荧光的，可在紫外灯下察看斑点并用针划去斑点位置。
4、用碘蒸汽显色，在组分处理出棕色斑点（碘吸附后会挥发）。
5、用标准物对比，将标准点于边上一测显色时，盖住样品，定出斑点位置。
薄层色谱仪的相关介绍薄层色谱又叫薄板层析，是色谱法中的一种，是快速分别和定性分析少量物质的一种很紧要的试验技术，属固—液吸附色谱；它兼备了柱色谱和纸色谱的优点，一方面适用于少量样品（几到几微克，甚至0.01微克）的分别；另一方面在制作薄层板时，把吸附层加厚加大；因此，又可用来精制样品，此法特别适用于挥发性较小或较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的质。
此外，薄层色谱法还可用来跟踪有机反应及进行柱色谱之前的一种“预试”。
薄层色谱是在被洗涤干净的玻板（10×3cm左右）上均匀的涂一层吸附剂或支持剂；带干燥、活化后将样品溶液用管口平整的毛细管滴加于离薄层板一端约1cm处的起点线上；凉干或吹干后置薄层板于盛有打开剂的打开槽内，浸入深度为0.5cm。
薄层色谱中应注意的问题
5 酒精灯的使用
酒精灯是实验室中常用的加热仪器。酒精的加入量 不能超过酒精灯容积的2/3，也不能少于酒精灯容积 的1/3；禁止向燃着的酒精灯添加酒精；禁止用燃着 的酒精灯引燃另一只酒精灯；用完酒精灯后，必须用 灯帽盖灭，不可用嘴去吹；应用外焰部分进行加热； 不要碰倒酒精灯，万一洒出的酒精在桌上燃烧起来， 不要惊慌，应立刻用湿抹布扑盖。
6 胶头滴管的使用
6 胶头滴管的使用
吸有试剂的滴管不可倒置，以免 试剂流入滴头，沾污试剂或腐蚀橡胶 胶帽；不要把滴管放在实验台或其他 地方，以免沾污滴管。用过的滴管要 立即用清水冲洗干净（滴瓶上的滴管 不要用水冲洗），以备再用。严禁用 未经清洗的滴管再吸取别的试剂。
7 量筒的使用
使用量筒量液时，应把量筒放在水平的桌面 上，使眼睛的视线和液体凹液面的最低点在 同一水平面上，读取和凹面相切的刻度即可 。不可用手举起量筒看刻度。量取指定体积 的液体时，应先倒入接近所需体积的液体， 然后改用胶头滴管滴加。
（3）用洗液洗涤后的仪器，应用自来水冲 净，用纯化水润洗内部3次。
碱性高锰酸钾洗液
取高锰酸钾4g溶于少量水中，向该溶液中慢慢加 入100ml 10%的NaOH溶液，混匀。 用于洗涤被油或有机物沾污的器皿 注意事项：1 洗后的器皿上如残留有MnO2沉淀物，
可用盐酸或草酸洗液洗涤； 2 洗液不应在所洗的器皿中长期存留。
固体样品加热时生成气体（硫化氢、氨气）的操 作，宜选用细的硬质试管。开始加热时，管口略向 下倾斜,先使试管均匀受热后,再在固体样品处加热 ,防止试管受热不均或冷凝水倒流而炸裂。 注意（1）该类型的反应生成的气体往往有刺激性
或毒性，操作时应在通风处或室外进行。 （2）加热后的试管不能骤冷，防止破裂。
（如不能将加热的试管放到冷的实验台上）
薄层色谱操作注意事项
薄层色谱操作注意事项影响薄层色谱分析的因素有很多，比如样品处理方法、薄层板制备技巧、点样方法、展开剂的遴选、温湿度的掌控等等很多方面，在这里对其操作要点作一下简单介绍:1铺制薄层板：铺板用的匀浆不宜过稠或过稀：过稠，板容易出现拖动或停顿造成的层纹；过稀，水蒸发后，板表面较粗糙。
匀浆配比一般是硅胶G:水=1：2～3，硅胶G:羧甲基纤维素钠水溶液=1:2。
研磨匀浆的时间，根据经验来定，与空气湿度有关，一般通过拿起研棒时匀浆下滴的情况来判断，越稠越难下滴。
匀浆的稀稠除影响板的平滑外，也影响板涂层的厚度，进一步影响上样量。
涂层薄，点样易过载；涂层厚，显色不那么明显。
通常，板的质量对薄层鉴别的影响不是很大，影响最大的是展开剂的配制和展开系统的饱和。
2点样：尽量用小的点样管。
如果有足够的耐性，最好只用1微升的点样管。
这样，点的斑点较小，展开的色谱图分离度好，颜色分明。
样品溶液的含水量越小越好，样品溶液含水量大，点样斑点扩散大。
样品溶液的溶剂一般是无水乙醇、甲醇、氯仿、乙酸乙酯。
点好样的薄层板用电吹风的热风吹干或放入干燥器里晾干。
薄层色谱用于定量时，点样是最主要的误差来源。
供试液的溶剂均有不同程度的洗脱力，所以在点样的同时，样品在原点就可是成环形展开，原点直径的扩散促进了这种展开，Kaiser称之为“上样环形色谱效应”。
如果样品在溶剂中的溶解度很大，原点将变成空心环。
这种效应对随后的先行展开造成很不利的影响。
供试液的溶剂在原点的残留，也会改变展开的选择性，特别是供试液的溶剂与展开剂的极性相差较大时更明显。
再者，亲水性溶剂残留在原点吸收大气中的水分（特别在高湿度环境）对色谱的影响也不可低估。
因此点样时的同步干燥或继后干燥以除去原点残存的溶剂是需要的。
但应尽可能避免高温加热，如用吹风筒加热，样品变为固态后，部分或全部强烈的吸附在吸附剂的颗粒上，而促进了硅胶的有催化作用的活性表面故态化学反应，导致样品的变性（尤其热不稳定物质），至少移动相在展开时对这部分样品的溶解速度比移动速度慢得多而形成拖尾（斑点拖尾的原因之一）。
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化、 分离三步 ， 在操作过程 中影 响这三步 骤的 因素分析
如下 ：
下， 提取次数多 ， 有效成分 的提取率 高 。当提 取次数 超
过 ２～３次时 ， 提取率增 加不 明显。所 以， 提取次数 以 ２
～
１ 样 品 粉 碎 度 的 处 理
３次 为 好 。
样 品粉碎 的过粗 或者 过细 均影 响 到 色谱 的质 量 。
避免加热 提取 。特 别是 含挥 发性 有效 成分 的样 品 ， 对 温度极为敏感 ， 控制温度 ， 量避 免 由于温度原 因导致 尽
除去干扰物质 ， 而又不使 待测成 分遭到 损失 ， 通常用 到
分层 和洗 脱的处理技术 。在 用分液 漏斗分层 提取有 效 成 分时 ， 有效成分或者在 上层 ， 或者在下层 。得 出 的结
・
７ ２・
科 学教 育 Ｓｉ ｃ ｄｃｔ ｎ ｃ ｎｅＥ ｕａｉ ｅ ｏ
２１ 年第４期（ １ 卷） ０１ 第 ７
浅谈 中药 制剂 薄层 色谱 质 量 的影 响 因素
技 术 操 作 过 程 中的 注意
陈 微 （ 吉林省白山 市长自山 职业技术学院中 药技能教 研室 １ ３０ ３ ０） ４
摘 要 影响薄层色谱 分析的因素很 多 ， 够保 证薄层色 潜的重现性 、 能 准确性和 分离度 良好 ， 中药制剂安全性 的基 是
础保障。本文在阐明各种闲素对薄层色谱分析的影响作用的基础上进行简单合理的分析， 并针对 目前薄层色谱分析
技术操作过程 中经常出现的问题 ， 汲取 他人知 识的同时联系 自己的实践经验 ， 在 提出相应的对策 ， 以利 于大家总结 提
２１ 年第４期（ ７ ０１ 第ｌ 卷）
科 学教 育 ＳｉｎｅＥ ｕａｏ ｃｅｃ ｄｃｔ ｎ ｉ
・ ３ ７・
对 农 村 中小 学 多 体 教 的 思 媒 学 考
王 成 （ 甘肃省陇西县教研室 ７８ ０ ４１ ） ０
摘 要 随着时代的发展。 多媒体计算机和网络教 学以其丰富的媒体表现形式、 强大的 教学交互功能、 可无限扩展的
状存 在时 ， 在提取 的有效 成分 受温度 、 分子加 速运动 影
响不 大的情况 下 ， 以采取 加热 或超声 的办法 协助 分 可
温度 既可以提高 有效 成分 的提 取率 ， 可 以降低 也 有效成分 的含量 。因此 ， 掌控 好温度 ， 验便成 功 了一 实 半 。提取 、 净化 、 分离过 程 中加 热 ， 分子运 动加快 ， 利 有 于活性物 质的溶 出 ， 从而提 高提取 、 净化 、 分离 的速率 。 但 当温度过高 时 ， 杂质溶 出量 也相应 增大 ， 活性 成分 易 分解破坏 。对 含有 多量淀 粉 、 液质 等多 糖类 的 中草 黏
高。
关键词
薄层色谱
技术ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ作
影响因素
注意事项
薄层 色谱是 一项重 要 的色 谱分 析技 术 ， 由于它 的 优越性 已被广泛应用 于化学 分析的 多种领 域。 目前特 别是在食 品药 品化学 分析 中 ， 彰 显 出了它 弥 足珍 贵 更 的地位 。它 的发展历程是 由最初 的“ 点滴 色谱 ” 发展 到 “ 带色谱” 或 “ （ 板色谱 ” ， ） 最后 发展 到今 天 的 “ 薄层 色 谱” 。与其它色谱 比较 ， 薄层 色谱具 有简单 、 迅速 、 敏 灵 度高 、 分离效能 好等 优点 ， 就技 术操 作来 看 ， 在很 但 存
离， 使两相均达到澄清液 体。
５ 净 化 分 层 的 处理
样 品提取液 中常含有各 种非测 定成分 ， 如脂 肪 、 蛋 白质 、 色素 、 质等 ， 腊 在进 行薄层 色谱分 析时 ， 会受到 这 些物 质的干扰。因此 ， 样品 提取液经过 适 当的处理 ， 将
药加热 ， 有效成 分遇 热易 分解 ， 而影 响 过滤 速 度 ， 故应
多 因素影 响着色谱 的质量 。我们 着重从 样 品有 效成分
挥发 损失 。经验得出的结论是 在操作 过程 中严格按 照
药典 和标 准的温 度要求进 行样 品处理． 室温 系指 ｌ Ｏ～ ３℃ ； ０ 放冷系指放冷 至室 温 ； 温 系指 ４ 微 ０—５ ￣ 冷水 ０Ｃ；
系指 ２～１ ￣ 冰浴 系指 ２ 以下 ； 浴温 度系指 ９ ０Ｃ； ℃ 水 ８～ １０ ； ０ ℃ 热水系指 ７ Ｏ～８ ℃ 。 Ｏ
２ 温度的处理
在用两相互不 相溶 的 溶剂进 行萃 取 有效 成分 时 ， 分离 的彻底 与否直接关 系到有效 成分 的提取率 。经 验 得 出的结 论是首先将两相互不 相溶 的溶剂用 力振荡摇 匀。待静 止一段时间 ， 相溶 剂重新分离 开来 ， 两 若短 时
间内不能完成分 离 ， 者分 离不 完全还 有少 许 的乳 浊 或
３ 提 取 时 间 、 数 的 处 理 次
提取时 间、 提取 次 数 也 是影 响 色 谱 质 量 的 因素 。
提取 时间过长是 没有 必要 的 ， 因为有效 成 分随提 取 时 间的延长而增 加 ， 直至达 到平衡 为止 ， 活性成 分不再 溶
提取前技术操作注 意来进行分析 。
样 品有效成 分提取前 的技术操 作 主要是指 样 品预
出。若继续 提取 ， 效成 分提取 得 率呈 现的 是缓 慢 上 有
升的趋势。不仅 浪费 时 间， 且往 往 使无 效成 分 随时 间 延长 而大量提 出 ， 响质量 。在其 它条 件不 变 的情 况 影
处理技术 。药 品经 预处理 使供 试 液得 以净 化 ， 保证 是
色谱 清晰的第 一步。样 品 的预处 理主 要包 括 提取 、 净
４ 分 离 程 度 的 处 理
因为样 品粉碎 的过 粗 ， 测组分 不 能完 全 的被提 取 出 被 来， 过细使扩散速度受到影响 ， 而且 黏液 质等 多糖 类用 水提取时 ， 溶质 间更 易形 成糊状 ， 不易 过滤 ， 响 有效 影 成分 的浸 出。经验 得 出的结 论是 选适 宜 的筛 孔过 筛 ， 取通过筛孔 的颗粒为宜 。