微生物的筛选

一
二
微生物筛选原理及介绍
微生物筛选的流程
微生物筛选的操作
三
一、微生物筛选介绍
1、概念 2、筛选及纯化的方法
3、培养基的选择
概念
筛选及纯化的方法
培养基的选择
概念： 在混杂的微生物群体中，按照微生物的代谢 特征，分离出特定功能的微生物，并进行纯化直 至获得单一菌株的操作过程。
土壤是微生物的大本营，混杂着大量的微生物， 从中分离可得到只含有一种微生物的纯培养。
样品
富集培养
梯度稀释
采样：土壤样品，梅花形布点采样， 取得的用四分法进行取样，将样品 放入4 ℃冰箱中保存待用。
涂布培养
划线纯化
斜面保存
样品
富集培养
梯度稀释
涂布培养
富集培养：指从微生物混合群开始, 对特定种的数量比例不断增高而引向 纯培养的一种培养方法。在适于目标 微生物而不适于其他微生物生长的条 件下继续培养，则目标微生物将成为 优势种而得到纯培养。
划线纯化
斜面保存
样品
富集培养
梯度稀释
以筛选产DMS功能微生物为例： 取2.5g土样置于50ml改良基 础盐液体培养基中，28 ℃震 荡培养4天。
涂布培养
划线纯化
斜面保存
样品
富集培养
梯度稀释
涂布培养
划线纯化
斜面保存
样品
富集培养
梯度稀释
涂布培养
划线纯化
① 将菌种用无菌水制成悬液。 ② 取若干只无菌试管，每只内盛9ml无菌 水。 ③ 吸取上述菌悬液lml加入第1只含有无 菌水的试管内。也就是10-1。 ④ 从第1只试管内(10-1)吸取lml注入第2 只含有无菌水的试管内，也就是10-2。 ⑤ 用同样方法，制成10-3～10-8的菌悬液。
斜面保存
样品
富集培养
划线目的：逐步纯化，直至出现单菌 落，获得纯菌株。3~5次。
梯度稀释
涂布培养
划线纯化
斜面保存
Байду номын сангаас
样品
富集培养
梯度稀释
涂布培养
划线纯化
斜面保存
样品
富集培养
梯度稀释
涂布培养
划线纯化
斜面保存
样品
富集培养
梯度稀释
涂布培养
划线纯化
斜面保存
将接种菌株的斜面放入4 ℃冰箱中保存。 至此，已经完成了微生物的初筛。有关微 生物的更多信息可以用鉴别培养基对其进 行复筛，或者运用其他手段对其进行鉴别。
概念
筛选及纯化的方法
培养基的选择
微生物筛选的方法有：稀释涂布法和平板划线法。 稀释涂布法：将土壤溶液稀释成一定的梯度，将其 涂布到固体平板培养基上。 平板划线法：挑取稀释涂布后长出的菌落，在固体 平板培养基上划线培养，获取纯菌落。
概念
筛选及纯化的方法
培养基的选择
细菌的筛选：选择性培养基 根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化 学、物理因素的抗性而设计的培养基。其功能是 使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该 菌的筛选效率。
概念
筛选及纯化的方法
培养基的选择
细菌的保存：牛肉膏蛋白胨培养基 配方（g）：牛肉膏3,蛋白胨10,氯化钠5，琼脂15, 蒸馏水1000ml，pH7.2。
二、微生物筛选纯化的流程
样 品
富 集 培 养
梯 度 稀 释
涂 布 培 养
平 板 划 线 纯 化
斜 面 保 存
三 微生物筛选纯化的操作
注意事项： ①筛选之前，提前制作好试验用的培养基。 ②与培养微生物相关的试验器材需要灭菌，方法为 在 121 ℃的条件下高压灭菌20分钟。 ③与微生物相关的操作需要在无菌操作台上进行。 操作之前15分钟打开紫外灯。