脉冲场电泳仪参数
脉冲场电泳仪参数
脉冲场电泳仪参数一、技术经济指标1、六角形电极的电泳槽,保证矢量电场的自由旋转,提供更高的分辨率、电泳速度和更精确的分离,对100bp-10Mb的DNA片段都能提供有效的分离。
2、自动演算:提供给用户一套程序用于优化实验参数。
只要输入待分离DNA片段的最小、最大长度,结合10个主要变量的确定,帮助使用者获得最理想的实验条件。
3、脉冲角度:可以在0-360°间自由选择脉冲角度,使用户可以在同一系统上实现大至染色体级、小至质粒DNA的有效分离。
4、时间转换梯度:有线性、非线性(凸形和凹形)两种脉冲时间梯度,非线性梯度可以提供更广泛的分离动态范围,使用户可以精确的确定分离片段的大小。
5、多状态功能:在一个Block中可以有15个电场矢量,每个电场矢量可以有自己的电压和转换时间,可有选择地对一定大小范围的片段进行更精细的分离,并且可以在同一次电泳中实现FIGE和CHEF两种技术。
6、二次脉冲功能:二次脉冲可加速DNA从琼脂糖凝胶中释放,从而有利于非常大的DNA片段的分离,并可提高分辨率。
7、技术应用:CHEF(钳式均衡电场)技术,产生均衡电场;PACE(程序自主控制电极)技术,根据片断大小的需要优化设定脉冲角度;FIGE(电场倒置)技术,为250KB以下小片断DNA提供快速分离;AFIGE(非对称场倒置)技术,精细分离小片断DNA,提高分辨率;以上技术的应用保证了科研人员在所有分子量范围内均能得到所最佳的线性分离。
8、性能指标:a. 电源输出:最高电压350V,0和0.6-9V/cm,0.1V/cm增量,连续可调b. 最大电流:0.5Ac. 延迟启动:最高72小时d. 电极调节能力:动态调节(反馈调整)±0.5%e. 程序储存:存储20个复杂实验程序,每个程序包含8个程序模块或99个简单程序f. 数据记录:键盘,条形码读取或RS-232接口g. 显示屏:2行×40字符/行,荧光显示h. 转换范围:50毫秒到18小时i. 转换角度:0-360°,0.5°增量j. 电泳时间:最高999小时/模块k. 脉冲中断设置:可以通过电压,频率,角度和持续时间设定二、设备产地:国外三、参考品牌及型号:无四、资质要求:4.1投标人需在中华人民共和国境内注册,持有合法有效的企业法人营业执照。
伯乐电泳参数(精)
伯乐电泳参数(精)美国伯乐小型垂直电泳槽,可装4块板,货号为1658001性能参数:1.凝胶数1-4块2.预制胶Ready Gel预制胶3.手灌胶用Mini-Protean长玻板制胶4.玻板尺寸(W x L:短玻板10.1 x 7.3 cm 带封边垫条的长玻板10.1 x 8.2 cm5.凝胶大小(W x L:6.手灌胶:8.3 x7.3 cm; 预制胶:8.6 x 6.8 cm2块胶缓冲液体积700 ml4块胶缓冲液体积1,000 ml7.典型SDS-PAGE电泳时间35-45 min (200V恒压8.建议电源PowerPac Basic或PowerPac HC9.大小(WxLxH12x16x18 cmPowerPac Basic基础电泳仪电源是PowerPac 300 的替代品,应用于浸没式水平电泳或小型垂直凝胶电泳等。
这款高品质的电源小巧、可叠放,并且编程简单。
PowerPac Basic基础电泳仪电源具有定时控制、PowerPac Basic基础电泳仪电源恒压或恒流输出以及暂停/继续运行等功能。
性能参数:1.电压:10-300V ,最小可调1V;2.电流:4-400mA ,最小可调1mA;3.功率:75W in maximum;4.输出:4对电源输出,可同时运行4个电泳槽;5.输出方式:恒压或者恒流方式,可编程;6.定时:1-999min,完全可调;7、暂停功能:有;8.操作条件:0-40度,湿度0-95%,无冷凝水;9.安全标准:EN61010;10.安全性能:经空载检测,突变负载检测,超载/短路保护,输入线保护,断电保护测试;11尺寸:24.5*21*6.5cm 。
六一快速凝胶电泳仪(槽)DYCP-44N型
*具有12个特别的marker上样孔
*美观漂亮,操作方便,可用8道移液器加样。
忆立赋提供的六一快速凝胶电泳仪(槽)DYCP-44N型的用途:
适用于PCR等多样品的DNA快速鉴定、分离。
可选择如下电泳仪电源配套使用
DYY-6C型 双稳定时电泳仪电源
DYY-7C型 转印电泳仪电源
忆立赋提供的六一快速凝胶电泳仪(槽)DYCP-44N型基本参数:
外形尺寸(L×W×H):260×110×40mm
凝胶板规格(L×W):200×100mm
试样格:(1+8)×12,1.5mm厚
重量:约0.5Kg
缓冲液总容量:约200ml
忆立赋提供的六一快速凝胶电泳仪(槽)DYCP-44N型产品的特点:
DY仪(槽)DYCP-44N型--忆立赋商城向您保证所售商品均为正品行货,忆立赋自营商品发票,与商品一起寄送。凭质保证书及忆立赋商城发票,与您亲临商场选购的商品享受相同的质量保证。忆立赋商城还为您提供具有竞争力的商品价格和运费政策,请您放心购买。亿立赋实验高效采购平台,产品全实验试剂耗材小仪器涵盖了实验室常用产品,满足日常所需,送产品24小时即可送达,质量优汇聚名品,产品质量保证,可赊销可提供2个月的信用赊销,给您省同类产品低于市场价20%左右。
六一快速凝胶电泳仪(槽)DYCP-44N型
六一快速凝胶电泳仪(槽)DYCP-44N型
忆立赋供应六一快速凝胶电泳仪(槽)DYCP-44N型,电泳槽,细胞计数仪,电泳仪,PCR仪,离心机,ph计。忆立赋多年诚信经营实验室常用仪器耗材,一次性耗材,一次性实验室耗材,只要项目有等设备耗材,质量保证,高效稳定.
电泳技术和电泳仪
电极
用于产生电场的部件,通常由 金属制成。
缓冲液
维持电泳过程中的pH值稳定 ,并具有导电性。
分离胶
用于分离不同带电粒子的凝胶 ,具有分子筛的作用。
电泳仪的功能和特点
高分辨率
能够分离和检测痕量级别的物 质。
高灵敏度
能够检测低浓度的物质。
快速分离
可在短时间内完成样品的分离 。
自动化
可实现自动化操作,提高工作 效率。
智能化
电泳仪的智能化主要体现在自动 化控制、数据分析和远程监控等 方面,通过与计算机和移动设备 的连接,实现了远程操作和实时
监控。
电泳技术和电泳仪的未来展望
交叉融合
随着多学科交叉融合的深入发展,电泳技术和电泳仪将与 质谱技术、纳米技术、生物信息学等领域进行更紧密的结 合,开拓新的应用领域。
个性化医疗
解释
电泳技术利用了带电粒子在电场 中的迁移率不同而实现分离,广 泛应用于生物、医学、环境监测 等领域。
电泳技术的原理
原理
在电场的作用下,带电粒子在电场中的迁移率取决于其电荷量、质量和分子大 小等因素。通过调整电场强度和电泳介质,可以控制带电粒子的迁移速度和分 离效果。
说明
电泳技术根据带电粒子的性质和分离目的的不同,可分为多种类型,如自由流 电泳、区带电泳、等电聚焦电泳等。
通过改进电泳介质和优化电泳条件,实现了对复杂样品的高分辨率分离,
提高了检测的灵敏度和准确性。
02
自动化和智能化
电泳技术正朝着自动化和智能化的方向发展,通过引入机器人技术和人
工智能算法,实现了电泳过程的自动化控制和智能化分析。
03
微流控芯片技术
微流控芯片技术结合电泳分离,可以实现样品的快速、高效分离,具有
ERIC-PCR与PFGE检测铜绿假单胞菌同源性的方法学比较
ERIC-PCR与PFGE检测铜绿假单胞菌同源性的方法学比较孙晶;常军霞;刘巍【摘要】目的比较肠杆菌基因间重复一致序列PCR(ERIC-PCR)与限制性内切酶联合脉冲场凝胶电泳(PFGE)检测铜绿假单胞菌同源性的方法学一致性.方法分别用ERIC-PCR和PFGE对北京某医院48株铜绿假单胞菌株进行分型,明确其是否有克隆传播.结果 ERIC-PCR方法鉴定有34株为同一克隆来源,其余14株被分为9种基因型.PFGE方法分型鉴定有38株为同一克隆来源,其余10株表现为7种基因型,均提示脑外科内的铜绿假单胞菌在2010年存在一个克隆株传播.两种方法学结果的符合率为89.5%,PFGE重复3次结果相似度达96.6%,ERIC-PCR重复5次结果相似度达75.4%.结论 ERIC-PC操作简便快速,重复性较好,与PFGE结果一致性高,适合在基层医院进行细菌流行病学分析.%Objectives Compare the methodology consistency of PFGE and ERIC-PCR used in Pseudomonas aeruginosa homology detection. Methods Pulse-field gel electrophoresis (PFGE) and Enterobacterial repetitive intergenic consensus polymerase chain reaction (ERIC-PCR) were performed respectively to detect molecular features of 48 pan-drug resistant Pseudomonas aeruginosa strains. Results In all, 34 strains were proved to be the same clone by ERIC-PCR, and the other strains were identified into 9 types; 38 strains were presented the same clone by PFGE, and the rest were classified into 7 types. The results showed that the same cloning strain was emerged in department of cerebral surgery in 2010. The coincidence rate of the two methods was 89.5%. PFGE had three repetitions, and the similarity was 96.6%; ERIC-PCR had five repetitions, and the similarity was 75.4%. Conclusion ERIC-PCR, with rapiddetection, good reproducibility and high consistency with PFGE, is easy and simple to handle. It is suitable for bacterial epidemiological analysis in primary hospital.【期刊名称】《中国抗生素杂志》【年(卷),期】2013(038)004【总页数】6页(P297-302)【关键词】铜绿假单胞菌;脉冲场凝胶电泳;肠杆菌基因间重复一致序列PCR【作者】孙晶;常军霞;刘巍【作者单位】北京市通州区潞河医院,北京101149【正文语种】中文【中图分类】R378.99+1铜绿假单胞菌是条件致病菌,可引起医源性感染及医院内获得性肺炎。
脉冲场凝胶电泳.
脉冲场凝胶电泳(PFGE实验原理、操作步骤和注意事项【实验原理】大分子DNA(一般长度超过20kb ,在某些情况下,超过40kb 在电场作用下通过孔径小于分子大小的凝胶时,将会改变无规卷曲的构象,沿电场方向伸直,与电场平行从而才能通过凝胶。
此时,大分子通过凝胶的方式相同,迁移率无差别(也称“极限迁移率”,不能分离。
脉冲场凝胶电泳技术解决了这一难题,它应用于分离纯化大小在10~2000kb 之间的DNA 片段。
这种电泳是在两个不同方向的电场周期性交替进行的,DNA 分子在交替变换方向的电场中作出反应所需的时间显著地依赖于分子大小,DNA 越大,这种构象改变需要的时间越长,重新定向的时间也越长,于是在每个脉冲时间内可用于新方向泳动的时间越少,因而在凝胶中移动越慢。
反之,较小的DNA 移动较快,于是不同大小的分子被成功分离。
在许多实用的PFGE 方法中,倒转电场凝胶电泳是最简单最常用的方法(FIGE。
通过把一个在不同电场方向有不同脉冲方式的脉冲电场加在样品上,倒转电场凝胶电泳(FIGE设备能把大小范围在10~2000kb 的DNA 片段分开。
FIGE 也可通过重新确定一个对准完全固定好角度的电场,这样会进一步扩展其分离极限达到10Mb 。
【仪器、材料与试剂】1. 制备DNA 样品所需材料1TEN 缓冲液(0.1mol/LTris,pH7.5;0.15mol/LNaCl;0.1mol/LEDTA。
2Seaplaque 琼脂糖(EC 缓冲液中浓度为2%。
3EC 缓冲液(6mol/LTris,pH7.5;lmol/L NaCl;0.5%4ESP 缓冲液(0.5mol/L EDTA,1%十二烷基肌氨酸钠,lmg/mL 蛋白酶K 。
5 溶葡萄球菌素(5mg/mL。
6RNase(10mg/mL。
7 胶模(由常规琼脂糖凝胶制得或购买成品。
8 苯甲基横酰氟(PMSF(17.4mg/mL 于乙醇中。
90.5μg/mL 溴化乙锭2. 分离、纯化大的DNA 片段所需材料1 紫外递质。
常用电泳仪的基本结构、性能指标与操作流程.
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(一)电泳电源 电泳电源是建立电泳电场的装置,作用是提
供一个连续调节的、稳定的电压或电流。 通常为 稳定(输出电压、输出电流或输出功率)的直流 电源。
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一、常用电泳设备的基本结构 (二)电泳槽
电泳槽是样品分离的场所,是电泳仪的一个主要 部件。槽内装有电极、缓冲液槽、电泳介质支架等。
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一、常用电泳设备的基本结构 (三)附加装置
辅助设备指恒温循环冷却装置、伏时积分器 凝胶烘干器等。有的还有分析检测装置。扫描或检 测设备分为可见光、紫外光、荧光和激光光源等。 可见光源和激光光源对染色的凝胶进行扫描,紫外 光源可以扫描不经染色的凝胶,并且荧光测量的灵 敏度最高。
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二、电泳仪的主要技术指标
输入患者资料
进入菜单,光标移到主菜单的P(患者)、输入患者资料
加样、 电泳
在电泳片上加样,选择设定好的试验程序、电泳
显色 / 染色、扫描
电泳完成后,自动保温显色或染色、烘干、自动扫描
结果编辑及打印
仪器编辑、确定打印份数、自动打印报告
关机
退到主屏幕,关闭电脑、电泳仪和扫描仪电源开关
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五、双向凝胶电泳仪操作示意图 13
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三、电泳技术的分类
(六)根据用法的类型可分为:双向电泳、交叉电 泳 、连续纸电泳、电泳-层析相结合技术等。
(七)根据不同的使用目的可分为:核酸电泳、血 清蛋白电泳、制备电泳、DNA测序电泳等。
双向凝胶电泳仪
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四、自动化电泳仪操作流程图
开机
分别打开电脑、电泳仪和扫描仪电源开关一仪器自检,显示主 菜单,即可开始工作
第一向 等电聚焦
PFGE原理及参数设置..
影响分辨率的因素
影响分辨率的因素包括:脉冲时间、电场夹角、电场强度、 电影温度、缓冲液以及电泳时间等。在脉冲场凝胶电泳中 通常包括脉冲时间、电场强度、温度、缓冲液组成、琼脂 糖类型和浓度以及电场夹角等参数而只是改变脉冲时间来 控制分辨样品的范围,即通过增加脉冲时间分离较大分子, 减少脉冲时间来分离较小分子。
大部分基于CHEF脉冲场凝胶电泳系统的操作手册使用 的电场夹角为120度。
电场角度
120 °
2.2 Mb 1.6 Mb
105 °
100 °
96°
94° 随着电场角度的减 少,两个大片段分 的更开。但是同时 小片段也在逐渐的 压缩。所以为了兼 顾不同大小的片段 需要选择一个合适 的电场角度。
大部分基于CHEF脉冲场凝胶电泳系统的操作手册使用的电场夹角为120。
脉冲时间
脉冲时间是指电场在某个角度持续的时间。
例如:脉冲时间为30s,即电场方向将会在30s变换一次。脉冲时
间是脉冲场电泳的核心参数。通常实验中使用的脉冲时间为一个范 围值如:2-20S。这样是为了使一定范围内的DNA片段都可以得 到理想的分离。这种脉冲时间的变换可以是线性的或者是非线性的。 线性是指脉冲时间在一定的电泳时间内是均匀变换的;而非线性的 变换可以使一定的脉冲时间相对集中,从而使相应大小的片断得到 更好的分离。
PFGE原理及相关参数
目前常用的脉冲场凝胶电泳仪器为箝位匀强电场系统(contour-clamped homogeneous electric field, CHEF)
方框代表琼脂糖凝胶,一排长方形小框代表DNA加样孔,六边形代表CHEF系 统的电极(4X6)。当电泳工作时,DNA分子以箭头方向迁移。
通常使用的缓冲液的温度为12℃-15℃。在这个温度内
全自动核酸电泳分析仪参数
全自动核酸电泳分析仪参数数量:1台技术参数:台面式、全自动毛细管电泳系统,采用毛细管凝胶电泳技术,用于DNA/双链核酸分子,RNA制控的电泳分析。
一、主要技术要求:1、光源:LED光源;2、信号采集:光电倍增管;3、通量:无须人工干预,一次性分析样本12-96个;4、上样方式:仪器自动上样,无须人工点样;5、上样形式:直接兼容0.2ml离心管、12联管、96孔微孔板等;6、运行时间:5-12分钟/一排12个样本;7、检测片段范围:15bp-10kb;8、分辨率:对<500bp的DNA片段,分辨率可达2-5bp;9、检测灵敏度:0.1ng/μl;9、上样体积:0.1μl,上样后原样品不受影响,可直接用于下游应用。
10、当样品量不足96个时,不会浪费多余凝胶11、具有专用的RNA质控分析软件,进行RNA质量分析12、采用预装式卡夹,即插即用,无须手工配制凝胶;13、种类:适用于DNA高分辨率分析、DNA快速筛查分析、大分子量DNA片段分析、RNA质量控制分析等应用;14、每轮分析后,仪器自动清洗毛细管,无须人工清洗;15、安全性:凝胶内核酸染色剂含量极低,且封闭灌装,运行前、后均对操作人员和实验环境不产生污染。
运行后废弃物中有害物质含量低于0.01%,可以直接废弃处理。
16、样品运行结束后,软件将自动处理、分析采集到的数据;17、数据形式:可以用电泳峰型图或胶图格式对分析结果进行显示;18、原始数据分析:可对电泳结果中的信号峰进行添加、删除,并计算峰高度、宽度、面积等参数;19、样品分析:可利用给定分子量标准品的信息,自动对被分析样品中所需片段的大小、浓度进行分析,并以表格形式给出报告;20、样品鉴别:用户可在软件中设置筛选特定片段大小的信号峰,并据此对样品种类作出判定并给出报告;21、数据导出:峰型图/胶图可以多种图像格式文件导出,样品分析结果可将图像、表格结合生成报告文件,与MS Office格式兼容;22、软件终身免费升级。
20070200电泳仪说明书
20070200电泳仪说明书(一)第一向等电聚焦(用自制的电泳上样缓冲液,17cm的胶条,pH 4-7)1. 从冰箱中取-20℃冷冻保存的水化上样缓冲液(I)(不含DTT,不含Bio-Lyte)一小管(1ml/管),置室温溶解。
2. 在小管中加入0.01g DTT, Bio-Lyte 4-6、5-7各2.5μl,充分混匀。
3. 从小管中取出400μl水化上样缓冲液,加入100μl样品,充分混匀。
4. 从冰箱取-20℃冷冻保存的IPG预制胶条(17cm pH 4-7),于室温放置10分钟。
5. 沿着聚焦盘或水化盘中槽的边缘至左而右线性加入样品。
在槽两端各1cm左右不要加样,中间的样品液一定要连贯。
注意:不要产生气泡。
否则影响到胶条中蛋白质的分布。
6. 当所有的蛋白质样品都已经加入到聚焦盘或水化盘中后,用镊子轻轻的去除预制IPG 胶条上的保护层。
7. 分清胶条的正负极,轻轻地将IPG胶条胶面朝下置于聚焦盘或水化盘中样品溶液上,使得胶条的正极(标有+)对应于聚焦盘的正极。
确保胶条与电极紧密接触。
不要使样品溶液弄到胶条背面的塑料支撑膜上,因为这些溶液不会被胶条吸收。
同样还要注意不使胶条下面的溶液产生气泡。
如果已经产生气泡,用镊子轻轻地提起胶条的一端,上下移动胶条,直到气泡被赶到胶条以外。
8. 在每根胶条上覆盖2-3ml矿物油,防止胶条水化过程中液体的蒸发。
需缓慢的加入矿物油,沿着胶条,使矿物油一滴一滴慢慢加在塑料支撑膜上。
9. 对好正、负极,盖上盖子。
设置等电聚焦程序。
10.聚焦结束的胶条。
立即进行平衡、第二向SDS-PAGE电泳,否则将胶条置于样品水化盘中,-20℃冰箱保存。
(二)第二向SDS-PAGE电泳1. 配制10%的丙烯酰胺凝胶两块。
配80ml凝胶溶液,每块凝胶40ml,将溶液分别注入玻璃板夹层中,上部留1cm的空间,用MilliQ水、乙醇或水饱和正丁醇封面,保持胶面平整。
聚合30分钟。
一般凝胶与上方液体分层后,表明凝胶已基本聚合。
技术参数脉冲电压测试仪技术参数
技术参数1 .脉冲电压测试仪技术参数:•波前时间•半峰值时间•峰值电压•仪器内阻•仪器主电容•脉冲间隔时间•脉冲次数•极性•其它:配有波形检测口,1.2 ± 30 %50 Rs ± 20 %1000V ~ 12. 5 kV 土3%40Q ± 10%(新IEC标准要求)5、99 秒1 ~ 9999 次正、负可外接数字存储示波器检测波形。
2.全自动综合淋雨试验箱主要技术参数1、内箱尺寸:W1000XD1000XH1000 mm2、外形尺寸:W1500XD1200XH2050 mm一)滴水试验装置/IPX1、IPX21、滴水槽:600X600X100;(长X 宽X 高mm);2、降水量:1 〜5mm/min;(±0. 5mm/min),可调;3、降水面积:600X600 mm (0. 36m2);4、滴水孔径:0(). 4mm;5、滴水孔距:20 X 20mm;6、倾斜15°滴水试验(IPX2):配SUS304不锈钢15°斜架;7、供水压力:NO. IMpa;8、滴水槽:安装于试验箱顶部,高度不可调;9、滴水量、水位控制:IPX1 滴水量 1 mm/min (+0. 5mm/min), IPX2 滴水量3mm/min ( +0. 5mm/min), 滴水位高度由电磁阀、流量计;10、时间控制器:可设定试验时间:11、针孔防堵塞:采用压缩空气吹干针头积水,防止水渍堵塞针头。
二)摆管淋雨试验装置/IPX3、IPX41、摆管半经:R400nun;2、喷孔:中0.4mm,两孔间距:50mm;3、摆管摆幅:±180°(接近)、±120°、±90°、±60°、±30°(可调,自动,任意角度);4、摆管内径:O 16mm;5、摆管摆动速度:可调(自动);6、试样台:变频器传动,转盘直径C600mm,承重50kg,高度可手动升降(最大范围200mm),转速:1〜100r/min可调,无极调速;7、流量:。
全自动琼脂糖凝胶电泳仪技术参数
1、电泳介质:琼脂糖凝胶
2、整套系统须为全自动分析系统:点样、电泳孵育、染色、脱色、烘干能在同一仪器中进行
▲3、电泳速度:≧100标本/小时
4、点样方式:机内自动点样、一次点样成功、无需重复点样
▲5、加样系统:全自动加样,采用微孔滤纸渗透加样方式加样,加样梳为一次性,避免交叉污染,且试剂盒内配备,无需另购
▲9、免疫固定电泳:可在电泳过程中,直接将抗体快速加在琼脂糖凝胶板上的血清中,5秒钟使抗体完全覆盖到血清上,抗体结合血清充分反映。操作简便。
▲10、尿蛋白电泳:可以按电荷量大小和分子量大小来排列两种方法检测。尿液不需要浓缩,最低检测量可以达15mg/L。投标时需提供尿蛋白电泳后胶片。
▲11、脑脊液电泳:应用酶标记抗血清进行免疫固定来检测、分辨脑脊液中的寡克隆区带,通过血清和脑脊液对照,电泳结果可直观看出患者中枢神经系统是否受到感染、血脑屏障是否受损。需提供与该仪器配套的原装试剂,并在投标时出具该试剂国家医疗器械进口注册证。
12、电脑部分:电脑为品牌机,CPU:P4,内存:2G,硬盘:500G,17寸液晶显示器,数据可联网。
13、分析软件:WINDOWS XP操作平台,具有中文分析软件系统,并能与医院计算中心联网。
14、扫描速度:≧100标本/分钟
15、售后服务:整机免费保修一年,终身维Байду номын сангаас。免费培训检验人员和工程师。
6、加样量:≦40ul/标本
▲7、检测项目:≧6项,并且都具有试剂项目注册证
8、可检测项目包括:血清蛋白、血红蛋白、尿蛋白(按分子量大小排列)、本周氏蛋白、脑脊液(等电聚焦法)、泪液、免疫固定、同工酶(LDH、CK-MB、ALP、CK-MB亚型)、糖化血红蛋白HbA1c、脂蛋白+Lp(a)、高分辨率电泳等;
脉冲场凝胶电泳试验流程
脉冲场凝胶电泳实验流程一、准备样品1. 琼脂糖包埋的样品常用的DNA提取方法不能得到完整的大分子量DNA。
大分子量DNA很脆弱,在制备过程中容易因移液等操作造成机械剪切。
将完整细胞包埋入琼脂糖后再进行裂解,去除蛋白的操作,可防止大分子量DNA的断裂。
琼脂糖块包埋的DNA可以避免被机械剪切,并且是一种简单的操作方法。
处理过的包埋有DNA的琼脂糖块可以直接放入琼脂糖凝胶的点样孔。
在将细胞包埋入琼脂糖之前要先确定细胞浓度,尽管吸光度很常用,但是并不可靠。
单位吸光度对应的细胞浓度会因菌株不同或培养基不同而有差异。
这会影响琼脂糖块中DNA的含量,导致上样量过大或不足。
不论细菌、真菌还是哺乳动物细胞,使用血球计数板均可得到准确和高重复性的细胞浓度。
Bio-Rad提供一次性的样品模具(货号:170-3713)。
每个模具可制备50个10 x 5 x 1.5 mm的琼脂糖胶块。
样品制备过程中的酶可以快速有效的扩散进入胶块,用Bio-Rad标准梳子制胶,胶块不需要修剪就可直接放入点样孔。
2. 液体样品小于200kb的DNA片断可以不用琼脂糖包埋,可直接以液体形式加入点样孔。
当操作的DNA大于50kb时,必须用大开口的吸头。
如果只电泳液体样品,使用厚度0.75 mm的梳子可以获得更锐利的条带和更高的分辨率。
3. 制备琼脂糖包埋的哺乳动物DNA该方法中用到的缓冲液,酶和琼脂糖均包含于试剂盒CHEF Mammalian Genomic DNA Plug Kit (货号:170-3591)。
1)将细胞悬浮于等渗盐溶液或不含血清的培养基中并置于冰上。
用血球计数板对细胞计数,每毫升琼脂糖块需要5 x 107个细胞,每个10 x 5 x 1.5 mm的样品块需要0.1 mL琼脂糖。
2)准备2% CleanCut™琼脂糖(货号:170-3594),用微波炉融化并置于50 °C水浴。
3)1000g、4 °C离心细胞悬液5分钟,用琼脂糖块一半体积的细胞悬浮缓冲液(10 mM Tris, pH 7.2,20 mM NaCl, 50 mM EDTA)重悬细胞并置于50 °C水浴。
核酸电泳仪技术要求
4.10
使用培训
支持
4.11
工程师培训
支持
3.大型垂直电泳转膜系统技术要求
序号
技术和性能参数名称
技术参数和性能要求
备注
1
设备使用需求
1.1
设备用途
用于大型垂直电泳及转印
1.2
实验对象
蛋白分子
1.3
特殊功能需求
可用于大型双向垂直电泳实验
2
主要技术参数
(一行只写一个参数)
2.1
★参数1
电压范围:10-498 V;电流范围:0.01-2.45 A;电源功率:1~498W
2.8
参数8
液晶显示屏:≥128x64像素,亮背景
2.9
参数9
编程:储存≥9个方法,每个最多9个步骤,时间控制:≥99小时
2.10
参数10
电泳槽为注塑一次成形
2.11
参数11
缓冲液容量:≥990mL
2.12
参数12
水平电泳槽胶面积:≥14X24cm
2.13
参数13
盛胶盘带有紫外透明的荧光标识
3
配置需求
2
主要技术参数
2.1
★参数1
电源电压范围:10-498 V
2.2
★参数2
电源电流范围:0.01-2.45 A
2.3
★参数3
输出插孔:至少4对并联
2.4
★参数4
1次电泳可以跑1-120个样品
2.5
参数5
具有可恒压、恒流或恒功率输出等多种方式
2.6
参数6
电源功率:1~498W
2.7
参数7
具有空载监测;荷载突变监测;过载/短路监测;过压保护等功能
电泳的条件及参数
电泳的条件及参数电泳是一种在电场作用下通过溶液中的带电粒子分离的方法。
它被广泛应用于生化、分子生物学、生物化学和医疗等相关领域。
电泳主要包括凝胶电泳和毛细管电泳两种。
凝胶电泳常用于分离DNA、RNA和蛋白质等分子,而毛细管电泳主要用于分析蛋白质、药物和有机物等化合物。
凝胶电泳是一种将电泳样品置于凝胶中进行分离的方法。
常用的凝胶材料包括聚丙烯酰胺凝胶(Polyacrylamide Gel,SDS-)、琼脂糖凝胶(Agarose Gel)和聚乙烯醇凝胶(Polyvinyl Alcohol Gel)等。
其中,SDS-主要用于蛋白质的分离,Agarose Gel主要用于分离DNA和RNA。
凝胶浓度的选择取决于待分离分子的大小范围。
凝胶电泳的条件和参数包括:1. 电泳缓冲液:凝胶电泳中的缓冲液主要用于维持pH值和离子强度的稳定,以保证分离效果。
常用缓冲液包括Tris-酒石酸缓冲液(Tris-HCl Buffer)和磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffer)等。
2.电泳电流:电泳电流的选择取决于凝胶类型和待分离分子的大小。
通常,较高的电流可以加快分离速度,但也会产生较高的电热效应,可能影响分离结果。
电流的单位是安培(A)。
3. 电泳时间:电泳时间是指样品在电场下进行分离的时间。
较长的电泳时间可以获得更好的分离效果,但会消耗更多的时间和能量。
电泳时间的单位是分钟(min)。
4.电泳温度:电泳温度是指凝胶电泳过程中的温度。
温度的选择取决于待分离分子的稳定性。
通常,在室温下进行凝胶电泳可以获得较好的分离效果。
5.样品加载量:样品加载量是指将待分离样品加载到凝胶上的量。
加载量的选择取决于待分离分子的浓度和检测灵敏度。
较高的加载量可以增加分析的灵敏度,但可能导致样品在电场中的过分聚焦。
6. 可视化方法:凝胶电泳分离完成后,需要使用染色剂或放射线进行可视化。
常用染色剂包括Coomassie蓝、银染和乙基溴化锑等。
北京市六一仪器厂 电泳仪 DYY-12C 说明书
电泳仪()使用说明书DYY- 12C电泳仪( 型号: DYY – 12C )特别声明本使用手册中所包含的任何信息属北京市六一仪器厂独家所有。
没有经过我司具体的书面许可,不得以任何形式包括电子文件、机械印刷、影印、缩影胶片、记录带(片)以及其他任何形式来全部或部分复制、保存或传播本手册中的任何信息。
本手册的分发只有经过我司书面授权方可印刷,销售和使用。
特别提示使用该仪器前,请认真阅读使用说明书。
使用说明书应与仪器放在一起,以便操作者随时阅读,一旦说明书丢失,请向我们索取。
用途概述电泳技术是目前分子生物学上不可缺少的重要分析手段。
它在基础理论、农业、工业、医药卫生、法医学、商检、教育以及国防科研等实践中有着广泛的用途。
电泳是指混悬于溶液中的样品荷电颗粒,在电场影响下向着与其自身带相反电荷的电极移动。
生物学上的重要物质如蛋白质、核酸、同工酶等,在溶液中能吸收或给出氢离子从而带电。
因此,它们在电场影响下,在不同介质中的运动速度是不同的。
这样用电泳的方法就可以对其进行定量分析,或者将一定混合物分离成各个组分以及作少量制备。
DYY-12C型电泳仪正是根据这一原理设计的高压电源,它与序列分析电泳槽或冷却板多用电泳槽、循环冷却器等组成完整的系统,可完成核苷酸序列分析电泳、分析型等电聚焦电泳,SDS常规聚丙烯酰胺凝胶电泳、各类普通凝胶及薄膜电泳,免疫电泳,双向电泳等多种功能。
该产品按医用电气设备安全分类属I类B型普通设备。
适用范围电泳仪是应用电泳技术时使用的仪器。
在医院临床化验中,在公安、政法工作检测中,在大专院校试验室中进行电泳时使用该仪器。
结构及特点1. 本仪器为全电脑化操作控制,大屏幕液晶显示;2. 采用高性能的开关电源作为本机的输出核心,输出功率大,负载能力强,控制精度高,工作稳定可靠;3. 稳压、稳流、稳功率状态可以相互转换,以确保使用的安全;4. 具有过载、变载、短路、开路、超限、外壳漏电等保护功能;5.具有4种模式及记忆储存功能,可方便的调用和安排程序;6.具有2组并联的输出端子,可进行多槽并用;7.可记忆储存编辑9组9步程序;性能1. 电源:交流220V ±10%(50Hz±2%);2. 输入功率:最大约400V A;3. 输出电压:(20~5000)V (显示精度:2V );操作步骤:1.按下电源开关后,显示屏出现:显示时间为6秒,同时系统初始化,蜂鸣4声,设置常设值。
脉冲场凝胶电泳
脉冲场凝胶系统操作规范文件编号:VBQW11##-##版本号:A0制定:制定日期:审核:审核日期:批准:批准日期:颁发部门:质量保障中心发行日期:文件更改记录版本号发行日期变更原因、依据及详细变更内容制定人分发部门具体部门目录1. 目的 (4)2. 适用范围 (4)3. 职责 (4)4. 操作规范 (4)4.1 简介 (4)4.1.1. 技术原理 (4)4.1.2 主要仪器设备和试剂 (4)4.2 准备工作 (5)4.3 灌胶 (5)4.4 上样 (6)4.5 主机程序设置 (6)4.6 凝胶染色和观察 (6)4.7 电泳槽清理 (7)5. 注意事项 (8)6. 常见故障及解决方法 (8)7. 关于参数设置的几点建议 (9)8. 试剂配制 (11)1.目的指导技术员规范地使用脉冲场凝胶系统。
2.适用范围本标准适用于利用脉冲场凝胶系统对相关产品进行检测。
3.职责分子部门负责本文件的编写,质量保障部及检验人员负责本标准的监督。
4.操作规范4.1简介4.1.1. 技术原理常规的琼脂糖凝胶电泳采用单一的均匀电场,一定大小的线状DNA分子经凝胶的分子筛作用以一定的速率由负极向正极移动。
但当DNA分子的长度超过一定极限后,其迁移率于则于分子大小无关,而主要是决定于电场强度。
实践表明,长度大于50kb的DNA不能在恒场强的琼脂糖凝胶电泳中较好的分离。
脉冲场凝胶系统(Pulsed field gal electrophoresis, PFGE)正好解决这一问题。
PFGE采用两个交变电场,即两个电场交替地开启和关闭,DNA的电泳方向随着电场的变化而改变,大分子的DNA得以分离。
严格来讲,“脉冲”场电泳有些用词不当,应称作“交替”场电泳。
电场变换方向的间隔时间为脉冲时间,其分为从数秒到几小时。
通常脉冲时间越长分辨的DNA片段越长。
图一. 脉冲场电泳交变示意图图一是根据Carle和Olson最初设计的正交场电泳装置(orth-ogona1 field gel electrophoresis,OFAGE) 绘制的PFGE示意图。
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脉冲场电泳仪参数
一、技术经济指标
、六角形电极的电泳槽,保证矢量电场的自由旋转,提供更高的分辨率、电泳速度和更精确的分离,对的片段都能提供有效的分离。
、自动演算:提供给用户一套程序用于优化实验参数。
只要输入待分离片段的最小、最大长度,结合个主要变量的确定,帮助使用者获得最理想的实验条件。
、脉冲角度:可以在°间自由选择脉冲角度,使用户可以在同一系统上实现大至染色体级、小至质粒的有效分离。
、时间转换梯度:有线性、非线性(凸形和凹形)两种脉冲时间梯度,非线性梯度可以提供更广泛的分离动态范围,使用户可以精确的确定分离片段的大小。
、多状态功能:在一个中可以有个电场矢量,每个电场矢量可以有自己的电压和转换时间,可有选择地对一定大小范围的片段进行更精细的分离,并且可以在同一次电泳中实现和两种技术。
、二次脉冲功能:二次脉冲可加速从琼脂糖凝胶中释放,从而有利于非常大的片段的分离,并可提高分辨率。
、技术应用:
(钳式均衡电场)技术,产生均衡电场;
(程序自主控制电极)技术,根据片断大小的需要优化设定脉冲角度;(电场倒置)技术,为以下小片断提供快速分离;
(非对称场倒置)技术,精细分离小片断,提高分辨率;
以上技术的应用保证了科研人员在所有分子量范围内均能得到所最佳的线性分离。
、性能指标:
. 电源输出:最高电压,和,增量,连续可调
. 最大电流:0.5A
. 延迟启动:最高小时
. 电极调节能力:动态调节(反馈调整)±%
. 程序储存:存储个复杂实验程序,每个程序包含个程序模块或个简单程序
. 数据记录:键盘,条形码读取或接口
. 显示屏:行×字符行,荧光显示
. 转换范围:毫秒到小时
. 转换角度:°,°增量
. 电泳时间:最高小时模块
. 脉冲中断设置:可以通过电压,频率,角度和持续时间设定
二、设备产地:国外
三、参考品牌及型号:无
四、资质要求:
投标人需在中华人民共和国境内注册,持有合法有效的企业法人营业执照。
投标人需具有所投品牌产品售后服务的能力和资质,参与竞价时必须上传所投品牌生产厂家出具的项目授权书(提供原件备查),需在安徽设有售后服务点。
投标人需按国家规定提供有关的进口许可证明。
五、服务要求:
中标人负责设备现场安装及调试。
设备安装时,现场必须提供免费培训直至能完全独立操作。
交货时必须提供由生产厂家出具设备的售后服务承诺书及原厂证明。
设备质保期为一年。
若设备发生故障,四小时内必须响应,如故障导致设备无法运转,需要现场检修,一个工作日内到达现场。