链酶亲和素
Streptavidin链霉亲和素CAS：9013-20-1
Streptavidin链霉亲和素CAS：9013-20-1
链霉亲和素（Streptavidin）是从链霉菌（Streptomyces sp.）中纯化出来的一种四聚体蛋白，它与维生素生物素结合紧密，Kd约为10-14mol/l，对生物素和生物素化分子的高亲和力识别使其成为诊断和实验室试剂盒中最重要的成分之一。
中文名称：链霉亲和素
英文名称：Streptavidin
外观：白色固体
分子量：60kda
规格：ml
纯度：≥95%
溶解度：water
CAS号：9013-20-1
质量控制：95%
储存条件：4℃
保存时间：1 year
用途：荧光标记等
产地：西安
注意事项:仅用于科研，不用于人体
Streptavidin-CY5.5
Streptavidin-CY5
Streptavidin-CY3
Streptavidin-TRITC
Streptavidin-FITC
Streptavidin-thiol
Avidin-CY3
Avidin-CY5
Avidin-CY5.5
Avidin (without modification)
Avidin-Sepharose
Avidin-thiol
Avidin-FITC
Avidin-TRITC
温馨提示：西安瑞禧生物供应产品仅用于科研，不能用于人体（YQ2020.11）。
链霉亲和素金属酶
链霉亲和素金属酶一、前言链霉亲和素金属酶是一种重要的酶类，具有广泛的应用价值。
本文将从链霉亲和素、金属酶及其特点、链霉亲和素金属酶的分类与结构、机理以及应用等方面进行详细介绍。
二、链霉亲和素1. 定义链霉亲和素（Streptavidin）是一种具有高度稳定性的蛋白质，分子量为约60kDa，由链霉菌（Streptomyces avidinii）分泌而来。
2. 特点（1）四聚体：由四个相同的多肽单元组成；（2）高度稳定：在极端条件下仍能保持完整性；（3）高度亲和力：对生物素有极强的结合能力。
三、金属酶及其特点1. 定义金属酶是指在催化反应中需要金属离子参与催化作用的酶类。
2. 特点（1）活性中心含有金属离子；（2）对底物选择性强；（3）反应速率快。
四、链霉亲和素金属酶的分类与结构1. 分类目前已发现的链霉亲和素金属酶主要分为三类，分别是：镍离子依赖性酶、铜离子依赖性酶和铁离子依赖性酶。
2. 结构链霉亲和素金属酶的结构与链霉亲和素相似，都是由四个相同的多肽单元组成。
不同之处在于，金属酶的活性中心含有金属离子。
五、链霉亲和素金属酶的机理链霉亲和素金属酶的催化机理主要包括两个方面：一是生物素与链霉亲和素结合；二是底物与金属离子协同作用。
六、链霉亲和素金属酶的应用1. 生物学研究：链霉亲和素金属酶可以作为标记物来检测蛋白质或核酸等生物分子。
2. 医学诊断：通过使用标记了链霉亲和素金属酶的抗体来检测疾病标志物。
3. 工业应用：利用其高度稳定性、高度选择性以及反应速率快等特点，可以广泛应用于制药、食品工业等领域。
七、结语链霉亲和素金属酶是一种具有广泛应用价值的酶类，其特点包括高度稳定性、高度亲和力、对底物选择性强以及反应速率快等。
在生物学研究、医学诊断以及工业应用等领域都有着重要的应用。
链霉亲和素磁珠制备
链霉亲和素磁珠制备1. 简介链霉亲和素（Streptavidin）是一种具有高度亲和力的蛋白质，可与生物素结合。
利用链霉亲和素磁珠可以实现对生物素标记的分子或细胞的快速富集、纯化和检测。
本文将详细介绍链霉亲和素磁珠的制备方法及其在科学研究中的应用。
2. 制备方法2.1 材料准备•磁性微珠：选择具有较好磁性、稳定性和表面活性的微珠作为载体材料。
•交联剂：选择适合与微珠表面反应并实现交联固定链霉亲和素的交联剂。
•链霉亲和素：从可靠来源购买纯度较高的链霉亲和素。
2.2 制备步骤步骤一：表面修饰将磁性微珠与交联剂进行反应，使其表面引入活性基团，以便与链霉亲和素进行交联固定。
具体步骤如下： 1. 将磁性微珠分散在适量的溶剂中，并充分悬浮均匀。
2. 加入适量的交联剂，与磁性微珠进行混合反应。
反应条件可以根据具体交联剂而定，一般需要一定的时间和温度。
3. 反应结束后，用磁力使磁性微珠沉淀，并将上清液去除。
步骤二：链霉亲和素固定将链霉亲和素与修饰后的磁性微珠进行交联固定，形成链霉亲和素磁珠。
具体步骤如下： 1. 将修饰后的磁性微珠分散在适量的溶剂中，并充分悬浮均匀。
2. 加入适量的链霉亲和素溶液，与磁性微珠进行混合反应。
反应条件可以根据具体要求而定，一般需要一定的时间和温度。
3. 反应结束后，用磁力使链霉亲和素磁珠沉淀，并将上清液去除。
3. 应用领域3.1 蛋白质纯化利用链霉亲和素磁珠可实现对带有生物素标记的蛋白质的快速富集和纯化。
通过与链霉亲和素的特异性结合，可以将目标蛋白质从复杂的混合物中高效地富集出来，提高纯化效率。
3.2 细胞分离链霉亲和素磁珠在细胞分离中具有重要应用价值。
通过将链霉亲和素磁珠与特定生物素标记的抗体结合，可以实现对特定细胞亚群的选择性富集。
这对于研究细胞表型、功能以及疾病机制具有重要意义。
3.3 分子检测链霉亲和素磁珠可用于分子检测中的信号放大。
通过将链霉亲和素磁珠与带有生物素标记的探针结合，可以实现对目标分子（如核酸、蛋白质）的高灵敏度检测。
链霉亲和素Streptavidin 说明书
链霉亲和素Streptavidin说明书货号：S9170规格：1mg/5mg/10mg保存：-20℃干燥保存，有效期至少保持2年。
纯度：≥95%活性：≥15Units/mg，（Green改良法测定）。
产品来源：大肠杆菌发酵工程菌株。
分子大小：60kDa产品简介：链霉亲和素（SA）是阿维丁链霉菌（Streptomyces avidinii）分泌的一种同型四聚体蛋白。
与生物素具有很高的亲和力，本制品为127AA最佳核心结构，每分子SA结合4个生物素分子，国际比活性12-15 U/mg。
SA与禽类亲和素（Avidin，AV）相比特异性更强，与生物素结合后半衰期长达6小时，而AV半衰期仅为1小时。
由于SA不含糖基且等电点接近于中性，因此SA在检测应用中具有比AV更低的非特异性背景。
本制品已广泛应用于包被免疫检测用微孔板，制备SA偶联酶制剂（如SA-HRP、SA-AP等），SA偶联荧光素（即荧光染料，如SA-FITC，SA-Cy2，SA-Cy3等）、SA偶联磁珠等，进而参与酶联免疫吸附和酶催化放大实验，免疫组化化学、亲和色谱填料制备、含StrepTagⅡ标签（8-AA寡肽）的蛋白纯化、生物传感器、生物纳米微球、预靶向制药研究和生物芯片被料等生物技术领域。
使用方法：一、微孔板包被1.用碳酸钠缓冲溶液（pH9.6）溶解冻干粉，将浓度稀释成3-10ug/ml（客户可设定梯度进行实验）注意：由于SA等电点是7.4，包被不建议使用中性缓冲液。
2.用移液器吸取100ul/孔，4℃过夜包被或者37℃包被2h；3.洗涤：倒尽板孔中液体，加200ul洗涤液，静放三分钟，反复三次，最后将反应板倒置在吸水纸上，使孔中洗涤液流尽，扣干4.后续进入封闭、洗涤、抗原抗体结合流程若不立即进入下游实验，包被板需要进行烘干保存时。
包被前，将包被液中加入20%蔗糖作为活性保护剂。
二、SA偶联磁珠2.1NHS活化1.充分混匀磁珠后，取100μl PangoBeads COOH磁珠到1.5ml离心管中，置于磁性分离上，待固液分离后去除上清液；2.取200μl MES溶液（25mM，pH 5.0）加入到离心管中，置于磁性分离上，待固液分离后去除上清液。
生物素链霉亲和素反应原理
生物素链霉亲和素反应原理
生物素链霉亲和素反应是一种体外生物学技术，其基本原理是将生物素和链霉亲和素结合起来形成稳定的生物素-链霉亲和素复合物，从而实现对目标分子的特异性识别和分离。
生物素是一种水溶性维生素，可以与链霉亲和素结合形成非常稳定的复合物。
链霉亲和素是一种大分子量蛋白质，具有高度的亲和力和特异性结合能力，在许多生命过程中具有重要的作用。
生物素链霉亲和素反应的方法是将生物素标记在目标分子上，然后将目标分子与链霉亲和素结合形成复合物。
通常，生物素标记可以实现在目标分子的NH2端、COOH端或内部氨基酸上。
链霉亲和素则通过亲和层析柱、免疫学检测等方法与生物素标记的目标分子特异性结合起来。
生物素链霉亲和素反应广泛应用于分子生物学、免疫学、蛋白质分离等领域。
它可以用于基因克隆、DNA/RNA杂交、蛋白质纯化、蛋白质相互作用研究、组学等方面。
链霉亲和素磁珠原理
链霉亲和素磁珠原理链霉菌素（Streptavidin）是一种来源于链霉菌（Streptomyces avidinii）的蛋白质，具有高度的亲和力和特异性结合生物素（Biotin）的能力。
而链霉亲和素磁珠则是将链霉菌素与磁珠结合，用于生物分离、纯化和检测等领域。
本文将介绍链霉亲和素磁珠的原理及其在生物科学领域中的应用。
链霉亲和素磁珠的原理主要基于链霉菌素与生物素的特异性结合。
生物素是一种小分子有机化合物，与链霉菌素结合后形成极为稳定的复合物，其结合力极强，不受pH、离子强度等因素的影响。
因此，链霉亲和素磁珠可通过链霉菌素与生物素的结合来实现对生物分子的特异性捕获和纯化。
在实际应用中，链霉亲和素磁珠通常被用于分离和富集含生物素标记的分子。
例如，研究人员可将生物素标记的抗体与链霉亲和素磁珠结合，然后利用磁场将目标分子特异性地富集到磁珠表面，再通过洗涤等步骤将非特异性结合的杂质去除，最终获得纯净的目标分子。
这种方法不仅操作简便、快速，而且能够避免对目标分子的损伤，因此在生物学实验中得到了广泛的应用。
除了在分离和富集生物素标记的分子方面，链霉亲和素磁珠还可用于生物分子的亲和纯化和检测。
例如，研究人员可将生物素标记的核酸与链霉亲和素磁珠结合，通过磁场将目标核酸富集到磁珠表面，然后进行亲和纯化和检测。
这种方法不仅能够高效地富集目标核酸，而且还能够避免对核酸的降解，因此在分子生物学和诊断领域具有重要的应用前景。
总之，链霉亲和素磁珠作为一种高效、特异性的生物分离和纯化工具，在生物科学领域具有广泛的应用前景。
通过充分利用链霉菌素与生物素的特异性结合原理，链霉亲和素磁珠能够实现对生物分子的特异性捕获、纯化和检测，为生命科学研究和生物医学诊断提供了重要的技术支持。
相信随着技术的不断进步和创新，链霉亲和素磁珠在生物科学领域中的应用将会越来越广泛，为人类健康和生命科学研究做出更大的贡献。
链霉亲和素结构式
链霉亲和素结构式链霉亲和素是一种具有广泛应用的生物大分子，在医药行业、生物技术领域，以及环境监测等多个领域中都有着重要的地位。
链霉亲和素也被称为蓝色亲和素，它是一种结构酸性染料，由苯丙酮和二硫化钠组成。
本文将深入探讨链霉亲和素的结构式及其特性。
一、链霉亲和素的结构式链霉亲和素的结构式为C32H22N6Na2O6S2（一个简写式为C.I.42660），其化学式为C32H22N6Na2O6S2。
链霉亲和素的分子量为678.65g/mol。
其化学式如下：该化学式的含义如下：1. C32代表该分子中有32个碳元素；2. H22代表该分子中有22个氢元素；3. N6代表该分子中有6个氮元素；4. Na2代表该分子中有2个钠元素；5. O6代表该分子中有6个氧元素；6. S2代表该分子中有2个硫元素。
从链霉亲和素的结构式中可以看出，该物质由许多不同的元素组成，包括碳、氢、氮、钠、氧和硫。
其分子结构包含了许多不同的化学键，包括烷基键、醛基键、羧基键等等，这些化学键的存在使得链霉亲和素的分子结构非常复杂。
二、链霉亲和素的特性链霉亲和素因其特殊的物理和化学性质广泛应用于不同领域中。
下面我们将介绍以下几个主要的特性：1. 蓝色色素链霉亲和素的别名为蓝色亲和素，这是因为它具有特殊的蓝色颜色。
这种颜色是由于链霉亲和素分子结构中的芳香环中存在结构裂环并缩环的构型所致。
链霉亲和素的蓝色颜色对药品和生物制品的组织染色非常重要。
2. 亲和性由于链霉亲和素分子中具有若干种化学官能团，因此可以与许多不同的物质结合。
在生物领域中，链霉亲和素被广泛应用于分离、纯化和检测相应的蛋白质或核酸分子。
3. 可溶性链霉亲和素是一种具有良好溶解性的化合物，可以溶于不同的溶剂中。
这种特性使得制备各种药物和生物制品成为可能，也能够满足不同应用场景的需要。
4. 稳定性链霉亲和素具有较高的热稳定性，可以在高温下对蛋白质和核酸分子进行染色。
此外，链霉亲和素还具有较高的化学稳定性，可以在不同的环境中保存很长时间而不受影响。
链霉亲合素
链霉亲合素链霉亲合素说明：与生物素结合，可用于免疫学研究。
别名：Streptomyces Avidinii；链霉亲合素分子量：约~60 kDaCAS＃：9013-20-1外观：白色或类白色粉末溶解性：溶于水或PBS，浓度1mg/ml。
储存条件：−20℃，保质期3年。
链霉亲合素描述链霉亲和素是一种来源于阿维丁链霉菌（streptomyces avidinii）的生物素结合蛋白质，其非特异性结合远比亲和素低，且与蛋清亲和素在中性pH值具有净正电荷和包含大约7%的碳水化合物相比，链霉亲和素蛋白具有在中性pH值几乎没有净电荷，不含有碳水化合物等更有利的化学性质，所以它被广泛用来作为抗生物素蛋白的替代品。
链霉亲和素是四聚体蛋白，大小为66KDa。
一分子链霉亲和素可以高度特异性地与四分子生物素结合，两者之间的亲和力极为强烈，链霉亲和素-生物素复合物的解离常数处于10 mol/L 数量级，这一性质常用于分子生物学用途[1] 。
其中一条完整的SA肽链中有159个氨基酸残基，分子量为16450。
消光系数与蛋白中Tyr含量有关，由于SA 中Tyr的含量比AV 多，所以SA的比消光系数也较AV 为高，两者分别为E 1mg/mL=3．40和E1mg/mL=1.57。
在282nm 上这两种蛋白结合生物素后并不改变其消光系数，而在233nm上，它们结合生物素后郡便其消光系数值增高，现在一般都是利用蛋白的这种吸光特点来测定它们的活性。
链霉亲和素分子由4条相同的肽链组成，其氨基酸组成中，甘氨酸和丙氨酸的含量较大，而且结合生物素的活性基团也是肽链中的色氨酸残基；链霉亲和素是一种稍偏酸性（pH6.0）的蛋白质，并且不带任何糖基。
在蛋白水解酶作用下，链霉亲和素可在N端10～12和C端19-21间断裂，形成的核心链霉亲和素仍然保持完整的结合生物素的能力。
链霉亲和素的活性单位也是以结合1μg生物素所需的量来表示，1mg链霉亲和素的最高活性可达18U。
链酶亲和素
实用标准文案链霉亲和素商品化应用简介一、链霉亲和素性质streptomyces avidinii分泌的一种蛋白质，）是由链霉菌streptavidin，SA链霉亲和素（条相同的肽链组成，其氨基酸组成中，甘氨酸和丙氨4分子量为65kD。
链霉亲和素分子由链霉亲和素是一种稍而且结合生物素的活性基团也是肽链中的色氨酸残基；酸的含量较大，）的蛋白质，并且不带任何糖基。
偏酸性（pH6.0链霉亲和素分子中每条肽链都能结合一个生物素，因此与亲和素一样，一个链霉亲和素）亦为个生物素分子，二者亲和常数（K分子也能结合4间断裂，和Ｃ端19-2112N端10～L10／mol。
在蛋白水解酶作用下，链霉亲和素可在15链霉亲和素的活性单位也是以结形成的核心链霉亲和素仍然保持完整的结合生物素的能力。
18U。
生物素所需的量来表示，１mg链霉亲和素的最高活性可达μ合1g二、亲和素和链霉亲和素的比较相同点14~18U：，SA生物素结合能力：、AV：13~15U1两个位点有110-111和懒氨酸：亲和素在氨基酸序列的70-70-2、活性中心依赖于色氨酸懒氨两个位点含有色氨酸-120-121-色氨酸懒氨酸，链霉亲和素在氨基酸序列的79-80和酸。
不同点：AV=66KD, SA=54KD分子量：、1精彩文档．实用标准文案带正电较多，非特异性结合较强。
等电点：AV=10.5, SA=6.0, AV2、深，位阻效应较强，长臂生物素更适合。
SA的生物素结合位点较AV3、位阻效应：协同结合。
随机结合，SA4、生物素的结合：AV SA含甘氨酸丙氨酸较多，无糖和二硫键。
10%氨基酸序列：AV 含二硫键和糖，5、ELISA中的应用三、链霉亲和素在）可用于测定抗原，，ELISA酶联免疫吸附剂测定（enzyme linked immunosorbent assay种必要的试剂：①固相的抗原或抗体，②酶标也可用于测定抗体。
在这种测定方法中有3可根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件，记的抗原或抗体，③酶作用的底物。
链霉亲和素失活温度
链霉亲和素失活温度链霉亲和素（Streptavidin）是一种来源于链霉菌的蛋白质，具有很高的亲和力和特异性结合能力。
它广泛应用于生物学和生物化学领域的分析、检测和实验研究中。
链霉亲和素失活温度是指在高温条件下，链霉亲和素的活性和结合能力丧失的温度。
本文将从链霉亲和素的结构和性质、失活原因和影响因素以及应对措施等方面，对链霉亲和素失活温度进行探讨。
一、链霉亲和素的结构和性质链霉亲和素是由链霉菌产生的一种蛋白质，它是一种四聚体，每个亚基分子量约为13.5kDa。
链霉亲和素的结构非常稳定，能够在酸性和碱性条件下保持其活性。
它具有一个特殊的结构域，称为亲和素结合亚基（biotin-binding subunit），能够与生物素（Biotin）非常强烈地结合。
这种结合是一种高度特异性和可逆性的结合，其结合常数达到10^15 M^-1，远远高于其他蛋白质和配体之间的结合常数。
二、链霉亲和素失活原因和影响因素链霉亲和素的失活温度主要受到以下几个方面的影响：1. 高温引起的构象变化：链霉亲和素在高温条件下，由于分子的构象变化，可能导致其结合亲和力降低，从而丧失活性。
2. 酸碱性条件的影响：链霉亲和素在极端酸碱条件下，如pH值过高或过低，可能导致其结构发生改变，进而影响其结合能力和活性。
3. 氧化和还原反应：链霉亲和素中的半胱氨酸残基对氧化剂和还原剂非常敏感，一旦发生氧化或还原反应，可能导致其结构和功能的改变，从而失去活性。
4. 金属离子的存在：某些金属离子，如铜离子和铁离子等，对链霉亲和素的活性具有抑制作用，会影响其结合能力和亲和力。
5. 长时间的储存和不当的处理：链霉亲和素在长时间储存或不当的处理条件下，如温度过高、冷冻解冻等，可能导致其结构和功能的改变，进而失活。
为了保持链霉亲和素的活性和稳定性，在实验和应用中需要注意以下几个方面：1. 控制温度：在使用链霉亲和素时，应尽量避免将其暴露在高温环境下，尤其是超过其失活温度的温度。
链霉亲和素poly-hrp80缀合物制备原理
链霉亲和素poly-hrp80缀合物制备原理链霉亲和素(poly-HRP80)是一种用于酶免疫测定的标记物质，具有高灵敏度和高稳定性。
其制备原理涉及到链霉亲和素的选择性结合性质以及酶标记的方法。
下面将详细介绍链霉亲和素poly-HRP80缀合物制备的原理。
1.链霉亲和素的选择性结合特性链霉亲和素是一种具有高亲和力的亲和试剂，可与链霉素结合。
链霉亲和素由于其稳定的结构和独特的亲和特性，被广泛应用于免疫分析领域。
链霉亲和素具有两个主要的结合位点，其中一个结合位点与链霉素结合，另一个结合位点可以与其他分子或试剂结合，例如酶标记物。
2.链霉亲和素poly-HRP80缀合物的制备方法链霉亲和素poly-HRP80的制备是通过将链霉亲和素与辣根过氧化酶(HRP)缀合而成的。
HRP是一种常用的酶标记物，具有高灵敏度和稳定性。
其制备方法如下：(1)链霉亲和素的收集与纯化：链霉亲和素可通过发酵链霉菌生产得到。
首先，通过培养链霉菌在培养基中合成链霉素。
链霉亲和素可以从链霉菌中分离纯化得到。
链霉亲和素的纯化可以通过离子交换层析、亲和层析、凝胶过滤等技术进行。
(2)辣根过氧化酶(HRP)的制备与纯化：辣根过氧化酶是一种常用的酶标记物，可以与链霉亲和素结合形成链霉亲和素poly-HRP80缀合物。
辣根过氧化酶可以通过辣根的分离提取获得。
提取的辣根过氧化酶通过离心等工艺步骤进行纯化。
(3)链霉亲和素poly-HRP80缀合物的制备：首先，将纯化的链霉亲和素与纯化的辣根过氧化酶在适当的缓冲液中结合反应一段时间。
链霉亲和素与辣根过氧化酶可以通过共价键或非共价键结合。
反应结束后，通过适当的纯化方法去除未缀合的链霉亲和素和辣根过氧化酶，得到纯净的链霉亲和素poly-HRP80缀合物。
3.链霉亲和素poly-HRP80缀合物的应用链霉亲和素poly-HRP80缀合物广泛应用于酶免疫测定中。
其高亲和力和酶标记特性使其成为一种理想的标记物。
生物素-链霉亲和素,作为荧光标记
生物素-链霉亲和素，作为荧光标记一、生物素-链霉亲和素的定义生物素-链霉亲和素是一种用于标记生物分子的荧光标记物。
它是由生物素和链霉亲和素组成的复合物。
生物素是一种维生素B7，也称作维生素H，它与链霉亲和素的结合具有较高的亲和力。
链霉亲和素则是一种可以与生物素结合并发出荧光的物质。
将生物素-链霉亲和素与所需标记的生物分子结合后，可以利用链霉亲和素的荧光发射信号来对生物分子进行检测和观察。
二、生物素-链霉亲和素的制备生物素-链霉亲和素通常通过化学合成的方式进行制备。
首先需要合成生物素分子和链霉亲和素分子，然后将两者进行反应结合，得到生物素-链霉亲和素复合物。
制备好的生物素-链霉亲和素可以在实验室中用于各种生物标记的研究工作。
三、生物素-链霉亲和素的特性1. 高亲和力：生物素和链霉亲和素之间的结合具有较高的亲和力，能够稳定地结合在一起，确保标记物在实验过程中不会轻易分离。
2. 显著荧光特性：生物素-链霉亲和素复合物具有明显的荧光特性，可以在适当的荧光激发条件下发出强烈的荧光信号，便于实验者进行观察和测量。
3. 稳定性：生物素-链霉亲和素复合物在适当的条件下具有良好的稳定性，可以在实验室中长时间保存和使用。
四、生物素-链霉亲和素在生物学研究中的应用1. 蛋白质标记：生物素-链霉亲和素可以用于标记目标蛋白质，通过观察蛋白质的荧光信号，可以研究蛋白质在细胞中的表达和定位等信息。
2. 细胞标记：生物素-链霉亲和素可以用于标记细胞膜表面的生物分子，有助于研究细胞相互作用和信号传导等生物学过程。
3. 分子探针：生物素-链霉亲和素作为一种标记物，可以用于研究分子间的相互作用和结构等相关信息。
4. 荧光显微镜：生物素-链霉亲和素标记的细胞和分子可以在荧光显微镜下观察，进一步拓展了荧光显微镜技术在生物学研究中的应用。
五、结语生物素-链霉亲和素作为一种荧光标记物，在生物学研究中发挥着重要的作用。
它具有高亲和力、显著的荧光特性和良好的稳定性，能够在生物标记的实验中提供可靠的信号和结果。
strep tag
strep tag
Strep-tag蛋白纯化
链亲和素（Streptavidin,亦称链霉亲和素)
是从细菌亲和素链霉菌中纯化出的一种60kDa的蛋白质。
链亲和素同源四聚体对生物素（即维生素B7）具有极高的亲和力。
生物素与链亲和素的结合是已知自然界中最强的非共价相互作用之一，其解离常数（Kd）大约是10−14mol/L。
因为链亲和素-生物素复合物对有机溶剂、变性剂（如盐酸胍）、洗涤剂（如SDS与曲拉通）、蛋白水解酶类及极端温度和pH具有良好耐受力，故链亲和素被广泛用于分子生物学与生物纳米技术中。
Streptomycesadidiniil中纯化获得，和鸡蛋清来源的Avidin （亲和素）在空间结构以及与生物素的亲和力方面具有高度的相似性。
和Avidin不同的是，Streptavidin是一种非糖基化蛋白，并且基本不带电荷。
Avidin的pI=-10.5，在中性pH条件下呈碱性。
由于Streptavidin和Avidin相比在中性条件下不带电荷，因此Streptavidin的非特异性结合比Avidin低很多，这样检测时的非特异性背景就低很多。
因此目前在生物素检测时通常使用Streptavidin替代Avidin。
链霉亲和素磁珠原理
链霉亲和素磁珠原理
链霉亲和素磁珠原理是一种基于链霉亲和素和磁性珠子的结合反应原理。
链霉亲和素是一种特异性结合DNA的蛋白质，它可以与DNA序列特异性地相互作用，从而实现DNA的捕获和富集。
磁性珠子则是一种具有磁性的微珠，通过外加磁场可以实现对其运动的控制。
在链霉亲和素磁珠的原理中，首先将链霉亲和素分子固定在磁性珠子的表面。
然后将含有目标DNA的样品与链霉亲和素磁珠混合，由于链霉亲和素和DNA之间的特异性相互作用，目标DNA会与链霉亲和素结合在一起。
接下来，通过外加磁场的作用，链霉亲和素磁珠可以被吸附在反应容器的壁上或磁性架上，而其他非特异性结合物质则会被洗脱掉。
这样就可以将目标DNA分离出来，实现其富集和纯化。
最后，通过改变环境条件，例如改变盐浓度或pH值，可以破坏链霉亲和素和DNA之间的结合，释放出目标DNA。
通过这种原理，可以快速、高效地富集和纯化目标DNA，为后续的分析和应用提供了基础。
需要注意的是，在文中不能再出现与标题相同的文字，这样以避免重复和冗余。
链霉亲和素结构
链霉亲和素结构
链霉亲和素是一种在生化领域中常用的蛋白质亲和纯化工具。
它是一种来源于细菌的蛋白质，可以与在目标蛋白质表面特定标签上的亲和标签结合，以便在杂质中选择性纯化目标蛋白质。
链霉亲和素的分子结构主要包括其氨基酸序列、三级结构和四级结构。
链霉亲和素的氨基酸序列由12个亚基组成，每个亚基都含有122个氨基酸。
这些亚基被连接在一起形成一个长链。
链霉亲和素的亲和位点主要由亚基结构中的两个肽键组成，这些肽键形成“酰化”桥。
酰化桥与亲和标签中的组氨酸相互作用，形成了高亲和力的结合。
此外，每个亚基的三级结构是由两个β片层和三个$α$螺旋组成的，这种结构有助于链霉亲和素与标签的高度特异性结合。
链霉亲和素的四级结构是由其12个亚基之间的相互作用所形成的，这些相互作用包括疏水作用、静电作用和氢键作用等。
疏水作用主要发生在亚基的正反面之间，通过垂直
放置形成了内部疏水核心。
静电作用主要是由亚基螺旋上带有的离子基团（如羧基和胺基）与周围的离子以及水分子形成的。
氢键作用是由亚基之间的氨基酸基团和侧链之间的氢
键所形成的。
这种多元相互作用形成了紧密的凝聚态，担任着该酶内部结构的支撑和保
持亲和标签与链霉亲和素交互作用的稳定性。
链霉亲和素和生物素结合位点
链霉亲和素和生物素结合位点
链霉亲和素是一种从链霉菌培养物中提取的蛋白质，具有四个与生物素（Biotin）亲和力极高的结合位点。
它是一种60-kDa的链霉菌avidinii细胞外蛋白，也是一种生物素结合蛋白，包含四个亚基，每个亚基都有一个生物素结合位点。
这种四聚体蛋白能与生物素形成非常稳定的复合物，因此，链霉亲和素在生物技术和医学研究中具有广泛的应用。
链霉亲和素与生物素的结合能力极强，这种结合具有高度的特异性和稳定性。
这种特性使得链霉亲和素在生物素标记技术中发挥了重要的作用。
例如，在免疫组织化学和免疫细胞化学中，链霉亲和素常被用作生物素化抗体的放大系统，通过链霉亲和素与生物素的结合，可以将生物素化的抗体与链霉亲和素连接在一起，从而增强信号的强度，提高检测的灵敏度。
此外，链霉亲和素还被广泛应用于蛋白质相互作用的研究。
通过将目标蛋白质与生物素标记，然后利用链霉亲和素与生物素的结合特性，可以方便地将目标蛋白质从复杂的混合物中分离出来，从而实现对目标蛋白质的纯化和鉴定。
总的来说，链霉亲和素和生物素的结合位点为生物医学研究提供了强有力的工具。
这种结合具有高度的特异性和稳定性，使得链霉亲和素在生物素标记技术和蛋白质相互作用的研究中发挥了重要的作用。
随着科学技术的不断发展，链霉亲和素的应用领域还将不断扩大，为生物医学研究带来更多的可能性。
链霉亲和素偶联纳米材料的方法
链霉亲和素偶联纳米材料的方法链霉亲和素（streptavidin）是一种常用于生物实验中的蛋白质，能与生物素（biotin）进行强烈的非共价结合。
由于链霉亲和素和生物素之间的结合是非常牢固和特异的，这一特性被广泛应用于生物技术领域。
通过把链霉亲和素与纳米材料结合起来，可以进一步扩展其应用范围，并赋予纳米材料更多的功能性。
链霉亲和素偶联纳米材料的方法有多种，下面我将介绍其中的几种常用方法。
一、化学偶联法：化学偶联法是一种常用的方法，它通过在纳米材料表面引入适当的官能团，然后与链霉亲和素上的氨基酸基团（如赖氨酸）进行化学反应，实现链霉亲和素和纳米材料的偶联。
1.羧基化：将纳米材料表面的羟基或胺基进行羧基化，引入羧基官能团。
常用的方法有在碳纳米管表面引入酸性官能团，如氧化，或是使用吡咯烷酮等化学剂。
2.活化：利用化学反应活化羧基化的纳米材料表面，引入亲核试剂，如N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）和1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)-碳二亚胺（EDC）。
这些试剂可以与赖氨酸产生酯键。
3.偶联：将羧基化和活化的纳米材料与链霉亲和素溶液混合，经过一定的反应时间，酯键形成，实现链霉亲和素和纳米材料的偶联。
二、生物组装法：生物组装法是一种基于生物分子亲和性的自组装方法，通过利用生物体内的细胞因子或酶等，在纳米材料表面直接固定链霉亲和素。
1.质子化偶联：通过质子化的双亲性荧光染料（如菲罗红、魁雅氏黄酮），选择性地与链霉亲和素结合，然后将染料-链霉亲和素复合物吸附在纳米材料表面。
这种方法简单易行，但不同纳米材料的吸附效果可能不同。
2.酶法偶联：利用生物酶的亲和性，可以将酶作为媒介，将链霉亲和素和纳米材料结合起来。
例如，可以利用亲和原理，将链霉亲和素连接到酶标记的抗体上，然后将抗体和纳米材料一起加入反应体系中，酶可定向固定在纳米材料上，从而将链霉亲和素与纳米材料结合。
三、静电吸附法：静电吸附法是一种将链霉亲和素吸附到纳米材料表面的简单有效的方法。
streptavidin beads原理
链霉亲和素（Streptavidin）磁珠是一种在生物技术和免疫学研究中广泛应用的固相载体。
其原理基于链霉亲和素与生物素（Biotin）之间极高特异性和亲和力的非共价相互作用。
这种结合是自然界中最紧密的非共价键之一，具有极低的解离常数（Kd≈10^-15 M），这意味着一旦生物素化分子遇到链霉亲和素，它们会迅速且牢固地结合。
工作原理：1.链霉亲和素与生物素结合：o链霉亲和素是一个四聚体蛋白质，每个亚基都有一个高度疏水的生物素结合位点。
因此，一个链霉亲和素分子理论上可以结合多达四个生物素分子，但由于空间构象限制，通常结合效率为3-4个生物素分子。
2.生物素标记物：o在实验中，研究人员首先将目标分子（如抗体、酶、核酸、肽或细胞表面抗原等）通过化学方法生物素化，即在这些分子上连接生物素标签。
3.磁珠耦合：o链霉亲和素被固定在磁性微珠上，形成链霉亲和素磁珠。
这些磁珠一般由二氧化硅、聚合物或其他材料制成，并具有磁响应性，可以通过外部磁场进行定向移动和分离。
4.结合与分离过程：o生物素化的靶分子溶液与链霉亲和素磁珠混合时，由于链霉亲和素对生物素的高亲和力，生物素化的分子会被快速捕获到磁珠表面，从而实现固液相转换。
o通过应用磁场，可以轻易地将结合了靶分子的磁珠从溶液中分离出来，而未结合的物质则可以通过离心或者倾倒废液去除。
5.应用举例：o在T细胞活化实验中，链霉亲和素磁珠可以用于结合生物素化的抗CD3抗体和其他共刺激分子（例如生物素化的抗CD28抗体），形成人工APC（Antigen Presenting Cell模拟物）。
当T细胞与这些磁珠上的抗体复合物接触时，能够提供激活所需的双信号，从而实现高效、可控的T细胞活化。
6.纯化与检测：o链霉亲和素磁珠也广泛应用于样品纯化，如生物素标记的cDNA、蛋白质以及其他生物分子的分离和纯化，以及在各种诊断和药物筛选平台中作为固相吸附剂。
综上所述，链霉亲和素磁珠利用了生物素-链霉亲和素系统的高度特异性结合性质，成为一种灵活且高效的生物技术工具，在多种科研和临床应用中发挥重要作用。
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链霉亲和素商品化应用简介一、链霉亲和素性质链霉亲和素（streptavidin，SA）是由链霉菌streptomyces avidinii分泌的一种蛋白质，分子量为65kD。
链霉亲和素分子由4条相同的肽链组成，其氨基酸组成中，甘氨酸和丙氨酸的含量较大，而且结合生物素的活性基团也是肽链中的色氨酸残基；链霉亲和素是一种稍偏酸性（pH6.0）的蛋白质，并且不带任何糖基。
链霉亲和素分子中每条肽链都能结合一个生物素，因此与亲和素一样，一个链霉亲和素分子也能结合4个生物素分子，二者亲和常数（K）亦为1015L／mol。
在蛋白水解酶作用下，链霉亲和素可在N端10～12和Ｃ端19-21间断裂，形成的核心链霉亲和素仍然保持完整的结合生物素的能力。
链霉亲和素的活性单位也是以结合1μg生物素所需的量来表示，１mg链霉亲和素的最高活性可达18U。
二、亲和素和链霉亲和素的比较相同点1、生物素结合能力：AV：13~15U，SA：14~18U2、活性中心依赖于色氨酸-懒氨酸：亲和素在氨基酸序列的70-70和110-111两个位点有色氨酸-懒氨酸，链霉亲和素在氨基酸序列的79-80和120-121两个位点含有色氨酸-懒氨酸。
不同点：1、分子量：AV=66KD, SA=54KD2、等电点：AV=10.5, SA=6.0, AV带正电较多，非特异性结合较强。
3、位阻效应：SA的生物素结合位点较AV深，位阻效应较强，长臂生物素更适合。
4、生物素的结合：AV随机结合，SA协同结合。
5、氨基酸序列：AV含二硫键和10%糖，SA含甘氨酸丙氨酸较多，无糖和二硫键。
三、链霉亲和素在ELISA中的应用酶联免疫吸附剂测定（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）可用于测定抗原，也可用于测定抗体。
在这种测定方法中有3种必要的试剂：①固相的抗原或抗体，②酶标记的抗原或抗体，③酶作用的底物。
根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件，可设计出各种不同类型的检测方法。
生物素－链霉亲和素系统在ELISA中的应用有多种形式，1、用于间接包被：可以在固相上先预包被链霉亲和素，原用吸附法包被固相的抗体或抗原与生物素结合，通过链霉亲和素－生物素反应而使生物素化的抗体或抗原间接包被。
这种包被法主要有以下优点：① 增加吸附的抗体或抗原量，而且使其结合点充分暴露。
② 阴性对照、空白对照本底低，检测敏感性高。
③ 用链霉亲和素替代抗体包被微孔，避免了抗体包被微孔时容易发生失活(或不易保存)。
④ 通过生物素将抗体结合于链霉亲和素包被的酶标板上，可克服传统物理吸附方法造成的抗原抗体结合能力大量丧失的不足。
⑤ 生物素标记捕获抗体、酶标指示抗体和样品中的抗原三者在均相中形成复合物后，再通过生物素结合于链霉亲和素包被的酶标板上，由于链霉亲和素和生物素之间亲和力极强，并且具有高度的特异性和稳定性，因而可提高检测灵敏度。
实例：CTnT检测实验中，双抗体夹心ELISA法最低检测值为7.25μg/L，使用链霉亲和素包被法最低检测值达到1.0μg/L，较双抗体夹心ELISA法灵敏度提高7倍。
2、用于终反应放大：在常规ELISA中的酶标抗体也可用生物素化的抗体替代，然后连接亲和素－酶结合物，以放大反应信号。
由于SA的等电点低，表面带的正电荷少，因此它和聚苯乙烯板载体的静电吸附力弱，SA的阴性对照显色明显比AV低，这样在ELISA上应用SA可进一步提高方法的灵敏度。
链霉亲和素对生物素化的抗体是一个主动的吸附过程，生物素化的抗体吸附在链霉亲和素表面，抗体排列整齐，分布均匀，抗体容易保持功能，而被动吸附抗体排列极不规则容易导致大量抗体失去功能，所以将生物素-链霉亲和素免疫反应系统引入竞争法中，可以大大提高酶联免疫的灵敏度和特异性。
实例1: 地高辛的生物素-链霉亲和素免疫法测定实验中，传统方法被动吸附只有约5％的抗体具有功能，生物素-链霉亲和素体系中60％的抗体具有功能。
实例2：淋球菌抗原测定方法实验中，生物素-链霉亲和素法检测灵敏度为0.625 μg/L，相当于3.5×104/ml淋球菌，而同时进行常规ELISA测定时，其灵敏度为1.25 μg/L。
四、链霉亲和素相关商品1、标记化链霉亲和素用酶或荧光素等修饰链霉亲和素，应用于ELISA放大检测信号，提高检测灵敏度。
产品实例：① 绿色荧光素（FITC）标记Streptavidin蛋白产品说明荧光素标记抗体（FA）是目前广泛用于免疫病理、细胞化学、流氏细胞学、病理学及自身抗体的临床免疫中的特异、灵敏、定性和定位相结合的免疫化学试剂。
荧光素抗体为制备的抗血清，再经过亲和层析纯化的方法制成抗体的IgG成分，并采用直接标记法，将异硫氰酸荧光素共价交联到链霉亲和素分子的氨基基团分子上，经过纯化、蛋白定量、FITC浓度及效价鉴定而制备完成。
应用范围：1. 免疫组织及免疫病理中抗原、抗体检查，如：各肿瘤抗原检查，细胞凋亡检测。
2.用于细胞因子等检查的荧光流式细胞仪测定。
3.用于临床自身免疫病的多种自身抗体荧光检查，如：抗核抗体，抗心肌酶抗体.4.白细胞分型抗原的免疫荧光染色。
5.用于细菌、病毒、梅毒螺旋体、钩端螺旋体等微生物的抗原及抗体检测。
主要性能：0.3ml或根据试验需求的各种包装，并提供浓缩液或冻干粉，含有0.01%NaN3防腐剂。
链霉亲和素含量在1mg/1ml左右.FITC为Sigma异构体I,约在70-80ug/ml,495nm为最大吸收峰，激发波长525 nm .工作浓度：用0.01mol/l pH7.4 PBS 作1：20–1：50稀释使用。
保存：-20℃可保存一年，避免反复冻融。
②辣根过氧化物酶标记链霉亲和素产品类别详细说明产品编号英文名称 Streptavidin/HRP中文名称辣根过氧化物酶标记链霉亲和素生产产地产品类别二抗（标记化合物）克隆号产品价格产品标准 1mg/ml产品应用免疫学及分子生物学2、链霉亲和素酶标板将链霉亲和素直接或间接预包被在酶标板上，稳定性高，易于保存，使用时只要加入生物素化的抗体或者抗原即可。
产品实例：ImmobilizerTM-链霉亲和素酶标板/板条适用于生物素化生物分子瞬间耦合链霉亲和素共价粘附在表面上可以随时使用无需进行封闭步骤极佳的结合力（例如F96透明20pmol/孔*）表面流失率低容易接触到反应位置点非特异性结合信噪比高室温下稳定试剂消耗率低白色和黑色的板用于发光或荧光应用上可以选择384孔板*实际的结合力可能由于耙分子的大小和位阻特性而改变Nunc Immobilizer TM 链霉亲和素目录编号436014 4360115 436016 436020 436022规格F96 F96 F96 F8 C8 LockWellTM 颜色透明白色黑色透明透明总容量，ul/孔400 400 400 400 350100 100 100 100 100建议耦合容量，ul/孔数量每包/箱 1/15 1/15 1/15 1/15 1/153、链霉亲和素磁珠链霉亲和素磁珠由1 μm 超顺磁微粒与高纯度链霉亲和素共价结合而成。
磁珠可用于捕获生物素标记的底物，包括生物素标记的抗原、抗体和核酸。
由于生物素-链霉亲和素的相互作用很强，其结合常值（Ka）为1015 M-1，并且链霉亲和素的非特异性结合率很低，使得被捕获的底物可满足后续实验要求，包括mRNA 的分离和一抗、二抗的获得。
亲水性链霉亲和素磁珠由2 μm 超顺磁颗粒与高纯度链霉亲和素共价结合形成。
由于这种磁珠有50－60％的磁性成分，因而使得它非常适用于自动化高通量实验操作。
它们也可用来捕捉生物素标记的底物，比如像抗原、抗体和核酸。
对蛋白质和核酸的非特异结合非常低。
产品实例：Dynabeads® M-280 Streptavidin链霉亲和素磁珠产品描述：链亲和素包被的Dynabeads ®为分离生物素抗体，核酸或其他生物素配体和靶分子的最佳选择。
这种链亲和素-生物素的高亲和力( Kd值10-15 )在分子上有着广阔的应用。
磁珠是单层而不是多层的链亲和素重组体。
这对自由生物素或生物素配体和靶分子而言，在空间排列有着绝大多数的生物素结合位点。
没有过量的物理吸附链亲和素确保了只有微量的链亲和素会遗漏。
批次间变化小，结果重复性好。
优点和特性：•直接快速捕获任何生物素靶分子•灵活的固相操作和优化的液相反应动力学•磁性操作易于适应自动化平台•批次重复性高，结果可靠一致本产品包含：共价偶联了链亲和素重组体的Dynabeads® (2.8 µm) ，保存在PBS中，pH 7.4，0.1% BSA 和0.02% NaN3 作防腐剂。
应用：过去15年中,，Dynabeads® M-280 Streptavidin已有达到了前所未有的广泛应用。
主要应用在制备单链DNA模板，分离RNA和DNA结合蛋白，固定长链DNA片段，纯化测序产品，特效捕获核酸。
Dynabeads®被全世界的IVD仪器使用了不少于25,000例。
浓度：10mg/ml储存条件：2-8 ℃结合能力：磁珠的结合能力由DNA片段长度决定。
1mg磁珠结合700-1,000 pmoles自由生物素，200 pmoles生物素标记的核苷酸(单链) ，5 - 10µg生物素标记抗体和5 pmoles的2 - 4 kb双链DNA片段。
结合大片段DNA (>2kb)，我们推荐使用Dynabeads® kilobaseBINDER试剂盒(货号601.01 ) 。
英文名称：Dynabeads® M-280 Streptavidin中文名称：Dynabeads链霉亲和素磁珠M-280试剂盒。