凝血试验影响因素分析高春彪

凝血试验影响因素分析江苏省常州市儿童医院（213003）高春彪

凝血试验主要包括：凝血酶原时间（PT）、凝血酶时间（TT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、纤维蛋白原（Fib）及各种凝血因子的抗原与活性检测等。凝血试验对于手术以及抗凝、溶栓治疗起着极为重要的作用。由于其反应的特殊性不同于一般的酶类检测，当其启动因子被某个因素激活后，就会发生一系列的连锁反应，导致检测结果的极大误差[1]，故加强凝血试验的标准化和质量控制显得尤为重要。笔者结合工作体会，就凝血试验中的一些影响因素作了分析，现报告如下。

1标本的采集

采集血液标本前要让患者处于平静状态，情绪激动、剧烈运动会引起一些血浆成分的变化（如血小板增多、凝血和纤溶系统激活等）。

采血时止血带捆扎后应尽量在1min内完成消毒、穿刺。静脉显露不明显时，切忌用手拍打，反复穿刺可造成血管损伤，使组织因子进入血液，导致溶血PT缩短[2]。

对于患者有多个检验项目需同时采样时，凝血试验样本应采集第一管[3]。

应用抗凝药物治疗的患者，采血时应考虑到抗凝剂的半衰期，在服用抗凝药物治疗后应固定采血时间[4]。

2抗凝剂的使用

根据国际血液学标准化委员会（ICSH）及国际血栓与止血委员会（ICTH）推荐，使用3.2%枸橼酸钠作为凝血系列检查的抗凝剂。

凝血检查抗凝剂与全血的比例应为1∶9。若标本太少或者抗凝剂量太多，则过度抗凝，会造成PT、APTT延长；若标本太

多或抗凝剂量太少，则抗凝不足，会使PT时间缩短。

当红细胞压积（HCT）>55％或<25％时，应按照公式重新计算抗凝剂的用量，即抗凝剂的量（mL）=0．00185×全血量（mL）×［100-HCT（％）］[5]。

3标本的处理及保存

凝血检测中，对标本的离心时间与速度，大部分教材要求是3000r/min，而离心的主要目的是为了获得血小板血浆。依照PT、APTT、Fib的检测原理来分析，血小板的数量和功能对APTT的影响应该是最明显的。因此对检测APTT的标本离心速度不应低于3000r，时间不应少于10min。而如果只针对PT、FIB的检测时则适当缩短离心时间[5]。

离心后的标本应及时上机检测，全血贮存在2~8℃冰箱不超过4h。若全部试验不能在4h内完成，应将血浆装在小试管中快速冷冻。-20℃可保存2周，-70℃保存6个月。冰冻的血浆融化时，不能静置于室温中融化，应放置在37℃水浴中轻轻摇动，使其迅速融化[1]。

4仪器与试剂

随着经济的发展，检验科的自动化程度越来越高。绝大多数的实验室都已用上了全自动或半自动的血凝仪。由于血凝仪的型号及检测方法各不相同，因此使用前应仔细阅读仪器的使用说明书及参加厂方的操作培训，了解仪器的工作原理。使用中应定期做好仪器的维护保养，每天做好室内质量控制，积极参加省市临床检验中心组织的各类室间质量评估活动，对仪器每天的工作状态做到心中有数。有些单位出于控制成本的考虑，使用非配套试剂进行日常检测工作。不同厂家的试剂，其试剂成分及浓度均有差异。如PT试剂，

各厂家的敏感

实用医技杂志2013年2月第20卷第2期Journal of Practical Medical Techniques，February2013，Vol.20，No.2

指数均不同，甚至同一品牌不同批号试剂的敏感指数亦有差别，因而会直接影响到PT的检测结果。故临床检验中心统计各家医院质量控制数据时，不但要按仪器分组，还要统计使用试剂的情况。所以尽量选用配套试剂，避免因小失大[6]。另外试剂配制过程中，水的质量也极为重要。有些试剂对水的pH值、离子浓度要求较为苛刻，所以配制试剂时应尽量使用去离子水。

5药物的影响

某些药物本身就具有影响凝血机制的功能或具有协同抗凝作用。如大剂量使用青霉素，血浆青霉素浓度达5000U/mL 时，PT、APTT明显延长，且随着浓度的增加而时间延长；头孢哌酮具有甲硫甲唑环的侧链与前凝血酶原相仿，羧酶可错误地与抗生素结合而导致凝血酶原的形成减少，干扰肝脏中维生素K的代谢，导致低凝血酶原血症[7]。同时由于新药的不断问世，而这些药物对凝血试验影响方面的报道也较少，这就需要我们在日常工作中不断地摸索、总结。

6其他因素的影响

标本发生溶血后对凝血试验的结果也造成一定的影响。溶血标本中含有成熟红细胞膜破裂而释放出的磷脂，在凝血过程中磷脂是促凝物质，使得APTT和PT比非溶血标本的测定值偏低，因此实验室不应使用溶血标本[3]。我们在日常检测中经常遇到脂血标本，这类标本对于光学法的血凝仪影响很大，使得检测结果变异较大。对于这类标本，我们应及时与临床联系，同时在检验报告单上作出说明。对于一些特别异常的结果，首先要确定仪器、试剂等是否无误，质量控制是否在控。待确定无误后，才能将报告发出。笔者曾检测到一患者的APTT>120s，经确认仪器、试剂等均无误，质量控制在控，与临床医生联系发现此患者为一血友病患者，此结果符合血友病的特征。

综上所述，影响凝血试验的因素较多，它涉及到分析前、分析中和分析后的质量控制问题，而且许多问题也不是实验室一个部门能解决的。因此在日常工作中，实验室工作人员除了要做好自身的质量控制工作以外，还应与医生、护理人员及患者多沟通，及时发现问题、解决问题，努力提高凝血检验的质量，为广大患者服务。

参考文献

[1]郭笑如，黄浩南，肖婷.对凝血试验影响因素的探讨.血栓与

止血学，2011，17（4）：186-187.

[2]杨继明，张爱华，肖中华，等.标本采集量对凝血项目检测结

果的影响.实验与检验医学，2011，29（1）：75.

[3]王瑾.影响凝血试验测定结果的因素分析.检验医学与临床，

2008，5（16）：1025.

[4]程育春，赵燕霞，侯临平，等.血凝的影响因素分析.实用医

技杂志，2011，18（7）：712-713.

[5]叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程.3版.南

京：东南大学出版社，2006：210-211.

[6]陈晓燕.临床血栓与止血检验分析的质量保证探讨.实用医技

杂志，2011，18（5）：527.

[7]卢本亮，梁冰.影响凝血实验的几个因素.实用医技杂志，

2004，11（5）：720-721.

（收稿日期：2012-11-11）

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