溶液配制参考
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一、常用溶液的配制
（一）溶液配制注意事项
1．药品要有较好的质量试剂分为优级纯（保证试剂，Guaranteed reagent，G．R．）、分析试剂（Antalytical reagent，A．R．）化学纯（Chemical pure，C．P．）和实验试剂（Laboratory reagent，L．R．）等等。工业用的化学试剂，杂质较多，只在个别情况下应用，如配洗液用的硫酸、配干燥剂的氯化钙等。
2．药品称量要精确。
3．配制试剂用水应用新鲜的去离子水或双蒸馏水，比电阻值在50万欧姆以上，pH在5.5~7.0之间才可应用，在组织培养等特殊用途时应注意此项要求，配制一般化验用溶液只要求用双蒸馏水或去离子水。
４．配好后的溶液，应立即除菌处理（如高压灭菌、抽滤或加抑菌物质），以防杂菌生长。
（二）0.067（1/15）Mol/L磷酸缓冲液
1．1/15Mol/L磷酸二氢钾溶液的配制：称取磷酸二氢钾（KH2PO4，A．R．）9.08g，用蒸馏水溶解后，倾入1 000ml容量瓶内，再稀释至刻度（1 000ml）。
2．１/15Mol/L磷酸氢二钠溶液的配制：称取无水磷酸氢二钠（Na2HPO4，A.R.）9.47g（或者Na2HPO4·2H2O 11.87g）用蒸馏水溶解后，放入1 000ml容量瓶内，再加蒸馏水稀释至刻度（1 000ml）。
3．按附表的比例，配制成不同pH值的缓冲溶液。
附表1 磷酸盐缓冲液配制法（单位：毫升）
pH 1/15Mol/L
Na2HPO4
1/15Mol/L
KH2PO4
pH 1/15Mol/L
Na2HPO4
1/15Mol/L
KH2PO4
5.8 8.0 92.0 7.1 6
6.6 23.4
5.9 9.9 90.1 7.2 72.0 28.0
6.0 12.2 8
7.8 7.3 76.8 23.2 6.1 15.3 84.7 7.3 80.8 19.2 6.2 1
8.6 81.4 7.5 84.1 15.9 6.3 22.4 77.6 7.6 87.0 13.0 6.4 26.7 73.3 7.7 8
9.4 10.6 6.5 31.8 68.2 7.8 91.5 8.5 6.6 37.5 62.5 7.9 93.2 6.8 6.7 43.5 56.5 8.8 94.7 5.3 6.8 49.6 50.4 8.1 95.8 4.2
6.9 55.4 44.6 8.2 9
7.0 3.0
7.0 61.1 38.9 8.4 98.0 2.0
（三）0.15Mol/L PB液
附表2 0.15Mol/LPB液配制法
pH 0.15Mol/L Na2HPO4（ml）0.15Mol/L NaH2PO4（ml）
6.4 26.5 73.5
6.6 3
7.5 62.5
6.8 49.0 51.0
7.0 61.0 39.0
7.2 72.0 28.0
7.4 81.0 19.0
7.6 87.0 13.0
Na2HPO4·2H2O分子量=175.05 0.15Mol/L溶液含26.3g/L。
Na2HPO4·12H2O分子量=358.22 0.15Mol/L溶液含53.7g/L。
NaH2PO4·H2O分子量=138.00 0.15Mol/L溶液含20.7g/L。
NaH2PO4·2H2O分子量=156.03 0.15Mol/L溶液含23.4g/L。
（四）0.2Mol/L PB缓冲液
附表3 0.2mol/L PB缓冲液配制法
pH 0.2 Mol/L Na2HPO4（ml）0.2Mol/L NaH2PO4（ml）
5.8 8.0 92.0
6.0 12.3 8
7.7
6.2 18.5 81.5
6.4 26.5 73.5
6.6 3
7.5 62.5
6.8 49.0 51.0
7.0 61.0 39.0
7.2 72.0 28.0
7.4 81.0 19.0
7.6 87.0 13.0
7.8 91.5 8.5
8.0 94.7 5.3
0.2Mol/L Na2HPO4·2 H2O溶液35.1g/L
Na2HPO4·12 H2O溶液含71.64g/L
0.2Mol/LNaH2PO4·H2O溶液含27.60g/L
NaH2PO4·2 H2O溶液含31.21g/L
欲配0.1Mol/L PB缓冲液则在0.2Mol/L PB缓冲液的基础上加H2O稀释1倍即可。欲配制PBS液时，则在溶液中加0.85％的NaCl溶液即可。
（五）无钙镁离子磷酸缓冲盐水（PBS）
（0.15Mol/L PH 7.2）
NaCl 8.0g
KCl 0.2g
Na2HPO4 1.15g
（如为Na2HPO4·12H2O，则为2.89g）
KH2PO40.2g
将上述试剂依次溶于 1 000ml去离子水中，完全溶解后，115℃高压灭菌10min~15min，存在4℃冰箱中备用。此液可用于配制和稀释细胞分散剂以及洗涤细胞培养物。
（六）硼酸盐缓冲液（Borate saline buffer）
1．硼酸（Ｈ3BO3）
0.2Mol/L硼酸：硼酸12.37g加水至1 000ml。
2．硼砂（Na2B4O7）
0.05Mol/L硼砂：硼砂19.07g加水至1 000ml。
附表4 不同pH的0.2Mol/L硼酸缓冲液配制法
pH 0.05Mol/L硼砂
（ml）0.2Mol/L硼酸
（ml）
pH 0.05Mol/L硼砂
（ml）
0.2Mol/L硼酸
（ml）
7.4 1.0 9.0 8.2 3.5 6.5 7.6 1.5 8.5 8.4 4.5 5.5
7.8 2.0 8.0 8.7 6.0 4.0
8.0 3.0 7.0 9.0 8.0 2.0
（七）巴比妥缓冲液
1．pH8.2离子强度0.05Mol/L巴比妥缓冲液
巴比妥钠47.6g
蒸馏水 3 000ml
1.17N HCl 55.0ml
（1.17 N HCl=193ml浓HCl加1 807ml蒸馏水）
⑴将4.76g巴比妥钠溶于3 000ml蒸馏水。
⑵加1.17 N HCl 55ml。
⑶用HCl调节pH到8.2，并加蒸馏水至4 265ml。
2．pH8.4 0.06Mol/L巴比妥缓冲液
巴比妥 1.84g
巴比妥钠10.30g
加蒸馏水至 1 000.00ml
3．pH8.6 0.06Mol/L巴比妥缓冲液
巴比妥 1.66g
巴比妥钠12.76g
加蒸馏水 1 000.00ml
（八）0.2Mol/L醋酸盐缓冲液见表附表5
附表5 0.2Mol/L醋酸盐缓冲液配制法
pH 0.2Mol/L
Tris（ml）0.1Mol/L
HCl（ml）
pH 0.2Mol/L
Tris（ml）
0.1Mol/L
HCl（ml）
23℃37℃23℃37℃
9.10 8.95 25 5 8.06 7.90 25 27.5