植物组织水势的测定(小液流法)

植物组织水势的测定
染色： 4. 染色：用接种针沾入微量甲烯蓝粉末加入青霉素瓶 摇匀，溶液变蓝。（干燥针头先用蒸馏水湿润， 。（干燥针头先用蒸馏水湿润 中，摇匀，溶液变蓝。（干燥针头先用蒸馏水湿润， 加入的甲烯蓝量一定少，使各瓶中颜色基本一致） 加入的甲烯蓝量一定少，使各瓶中颜色基本一致）
5.观察液滴升降： 观察液滴升降： 用毛细吸管取青霉素瓶有色液 插入相应试 管中部 缓慢从毛细吸管尖端横向放出一滴 蓝色溶液， 轻轻取出滴管， 蓝色溶液 ， 轻轻取出滴管 ， 观察蓝色液滴的移 用白纸划一直线置于试管背面， 动方向并记录。（用白纸划一直线置于试管背面，方
植物组织水势的测定
植物组织水势和渗透势的测定方法： 植物组织水势和渗透势的测定方法： 水 势 测 定 渗 透 势
蒸气压渗透压计法 液相平衡法：小液流法、称重法、 液相平衡法：小液流法、称重法、质壁分离法 压力平衡法：压力室法 压力平衡法： 气相平衡法：露点法 气相平衡法：
冰点降低法
植物组织水势的测定
0.05
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
液滴移动方向
结果是否正确，为什么？
植物组织水势的测定
溶液浓度
0.05
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
液滴移动方向
结果是否正确，为什么？
注意事项： 注意事项：
所取材料在植株上的部位要一致，打取叶圆片要避开主脉和伤口。 ① 所取材料在植株上的部位要一致，打取叶圆片要避开主脉和伤口。 试管、移液管和毛细管等要洗净烘干， ② 试管、移液管和毛细管等要洗净烘干，移液管与毛细移液管应从低 浓度到高浓度依次吸取溶液。 浓度到高浓度依次吸取溶液。 甲烯蓝不宜加得过多（溶液呈稍深的蓝色即可）， ），否则将使实验组 ③ 甲烯蓝不宜加得过多（溶液呈稍深的蓝色即可），否则将使实验组 各管中溶液的比重均加大。 各管中溶液的比重均加大。 蔗糖溶液用前一定要摇匀，时间放久了的蔗糖溶液会分层， ④ 蔗糖溶液用前一定要摇匀，时间放久了的蔗糖溶液会分层，影响结 果。 叶片打孔及投入青霉素瓶中要快，防止水分蒸发影响实验结果。 ⑤ 叶片打孔及投入青霉素瓶中要快，防止水分蒸发影响实验结果。 释放蓝色液滴时要缓慢，防止过急挤压冲力影响液滴移动。 ⑥ 释放蓝色液滴时要缓慢，防止过急挤压冲力影响液滴移动。
植物生物学实验
植物组织水势的测定 小液流法） （小液流法）
植物组织水势的测定
目的要求: 目的要求:
1. 了解测定植物组织水势的方法及其优缺点 2. 学习用小液流法测定植物组织水势的方法 3. 了解WP4露点水势仪测定植物组织水势 了解WP4露点水势仪测定植物组织水势
植物组织水势的测定
水势表示水分的化学势， 水势表示水分的化学势 ， 象电流 由高电位处流向低电位处一样， 由高电位处流向低电位处一样 ， 水从水 势高处流向低处。 势高处流向低处。 植物体细胞之间， 植物体细胞之间，组织之间以及植 物和环境之间的水分移动方向都由水势 差决定。 差决定。
2.用打孔器在灰莉叶的不同部位打120片，混匀，每个青霉素瓶各放入 2.用打孔器在灰莉叶的不同部位打120片 混匀， 用打孔器在灰莉叶的不同部位打120 20片，（打孔要迅速 避开叶脉，选边缘整齐无破损的叶片） 打孔要迅速， 20片，（打孔要迅速，避开叶脉，选边缘整齐无破损的叶片） 3.从配制好的试管中各取2ml（量准确？）到相应的青霉素瓶中（ 从配制好的试管中各取2ml ？）到相应的青霉素瓶中 3.从配制好的试管中各取2ml（量准确？）到相应的青霉素瓶中（用一 不要润洗） 放置20 30min， 20— 只移液管由低 高，不要润洗）。放置20—30min，期间摇动数 以加速水分平衡。 次，以加速水分平衡。
植物组织水势的测定
2、同一种物质浓度不同时其比重不一样， 、同一种物质浓度不同时其比重不一样， 浓度大的比重大， 浓度大的比重大，把高浓度的溶液一小液滴放 到低浓度溶液中时，液滴下沉；反之则上升。 到低浓度溶液中时，液滴下沉；反之则上升。 3、根据外液浓度的变化情况即可确定与 、 植物组织相同水势的溶液浓度。 植物组织相同水势的溶液浓度。根据以下公式 计算出溶液的渗透势，即为植物组织的水势。 计算出溶液的渗透势，即为植物组织的水势。
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植物组织水势的测定
思考题： 思考题：
1．试述小液流法测定植物组织水势的原理。 试述小液流法测定植物组织水势的原理。 2. 小液流法测定植物组织水势时，为什么 小液流法测定植物组织水势时， 操作时，应强调所用试管、 操作时，应强调所用试管、毛细管应保持 干燥？ 干燥？打取小圆片并投入到试管中时动作 应迅速？加入甲烯蓝时不能太多？ 应迅速？加入甲烯蓝时不能太多？
便观察） 便观察）
毛细管放置稳定
挤出小液滴
取出毛细管 观察液滴升降
液滴 植物材料
ψw >ψS ψw <ψS ψw =ψS
溶液浓度变小 溶液浓度变大 溶液浓度不变
静止不动
植物组织水势的测定
6.分别测定不同浓度中有色液滴的升降， 6.分别测定不同浓度中有色液滴的升降，找 分别测定不同浓度中有色液滴的升降 出与组织水分势相当的浓度， 出与组织水分势相当的浓度，根据原理公 式计算出组织的水势。
植物组织水势的测定
【实验原理】 实验原理】
植物材料浸入 不同浓度溶液中
植物材料水势 低于溶液水势
植物材料水势 等于溶液水势
植物材料水势 高于溶液水势
材料吸水
材料失水
外界溶液浓度变大 比重变大
外界溶液浓度不变 比重不变
外界溶液浓度变小 比重变小
浸过材料的溶液 浸过材料的溶液 滴回 同一浓度而未浸过材料的溶液中 同一浓度而未浸过材料的溶液中
第三轮需要完成的实验内容
• 植物光合速率的测定--改良半叶法
必须掌握的技能 ：
1.学会使用网络进行相关专业资料的检索。 学会使用网络进行相关专业资料的检索。 学会使用网络进行相关专业资料的检索 2.能运用所学的理论知识、实验方法来计设某一课题，并 能运用所学的理论知识、实验方法来计设某一课题， 能运用所学的理论知识 写出切实可行、有依据的实验设计方案。 写出切实可行、有依据的实验设计方案。 3.掌握电导率仪的使用方法。 掌握电导率仪的使用方法。 掌握电导率仪的使用方法 4.便携式光合系统测定仪的使用方法。 便携式光合系统测定仪的使用方法。 便携式光合系统测定仪的使用方法 5.作物无土栽培技术和要点。 作物无土栽培技术和要点。 作物无土栽培技术和要点 6.掌握实验结果计算、实验现象的观察记载、实验结果的 掌握实验结果计算、实验现象的观察记载、 掌握实验结果计算 综合分析。 综合分析。
比重小的液流上浮
比重不变的液流静止 比重大的液流下沉
此溶液的水势即等于所测材料的水势
植物组织水势的测定
溶液渗透势的计算： 溶液渗透势的计算：
ψS=﹣iCRT
式中 ψS—溶液的渗透势，以MPa为单位； 溶液的渗透势， MPa为单位 为单位； R＝0.008314MPa·L·mol﹣1·K﹣1 T—绝对温度，即273+t℃； 绝对温度， 273+t℃ C—溶液的摩尔浓度，以mol·kg－1 为单位 溶液的摩尔浓度， i－溶液的等渗系数，蔗糖=1。 溶液的等渗系数，蔗糖=1。
植物组织水势的测定
溶液浓度
0.05
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
液滴移动方向
具有平衡浓度结果
植物组织水势的测定
溶液浓度
0.05
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
液滴移动方向
无平衡浓度结果
植物组织水势的测定
溶液浓度
0.05
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
液滴移动方向
错误结果
植物组织水势的测定
溶液浓度
植物组织水势的测定
（二）实验材料
灰莉叶片
植物组织水势的测定
【用具】 用具】
试管架； 试管; 打孔器; 毛细管； 镊子; 试管架 ； 试管 ; 打孔器 ; 毛细管 ； 镊子 ; 青霉素 瓶
【试剂】 试剂】
蔗糖溶液 蔗糖溶液 甲烯蓝粉末
植物组织水势的测定
（三）操作步骤
1. 配制不同浓度的蔗糖溶液
试管 1mol·kg1mol·kg-1 蔗糖溶液（ ） 蔗糖溶液（ml） 蒸馏水（ml） 蒸馏水（ml） 浓度 1 0.5 9.5 0.05 2 1 9 0.1 3 2 8 0.2 4 3 7 0.3 5 4 6 0.4 6 5 5 0.5
一、液体交换法测定植物组织水势
小液流法
问题： 小液流法测定植物组织水势的原理？ 小液流法测定植物组织水势的原理？
植物组织水势的测定
（一）原理
1、当植物组织与外液接触时发生水分交换： 、当植物组织与外液接触时发生水分交换： 植物组织的水势低于外液的渗透势（ ★ 植物组织的水势低于外液的渗透势（溶质 势），组织吸水，外液浓度变大；ψ植物<ψS 组织吸水，外液浓度变大； 植物组织的水势高于外液的渗透势（ ★ 植物组织的水势高于外液的渗透势 （溶质 势），组织失水，外液浓度变小；ψ植物> ψS 组织失水，外液浓度变小； 若两者相等，则水分交换保持动态平衡， ★ 若两者相等 ，则水分交换保持动态平衡 ， 外液浓度保持不变； 外液浓度保持不变； ψ植物＝ψS
《植物生理实验》 植物生理实验》 安排及综合性实验方案
第一轮需要完成的实验内容： 第一轮需要完成的实验内容： 实验 小流液法测定植物组织 水势 实验 实验 缺素培养 膜透性鉴定
第二轮需要完成的实验内容： 第二轮需要完成的实验内容：综合性实验
(一) 目的要求： 一 目的要求： 利用《植物生理学》课堂理论 植物的矿质营养 植物的矿质营养、 利用《植物生理学》课堂理论—植物的矿质营养、植物的 光合作用、植物的逆境生理等相关知识综合分析“ 光合作用、植物的逆境生理等相关知识综合分析“玉米或 烟草等植株完全液培养和缺素培养苗的生理差异”。 烟草等植株完全液培养和缺素培养苗的生理差异” (二) 需要完成的实验内容： 二 需要完成的实验内容： 植物水溶液和缺素培养症状观察,TTC法测根系活 实验四 植物水溶液和缺素培养症状观察 法测根系活 力 实验五 叶绿素定量测定 实验六 SOD活性测定 活性测定 (三) 要求同学用所学的相关知识综合分析实验结果。 三 要求同学用所学的相关知识综合分析实验结果。