烟草转化方法及各类培养基配方
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
表1 烟草转化中使用培养基
Table.1 List of the culture mediums in genetic transformation of tobacco
培养基
Culture medium 成分
ingredients
pH值
pH
继代培养基
Subculture medium MS 5.8 共生培养基(To)
Symbiotic culture medium MS+2.25mg/L6-BA+0.3mg/LNAA 5.8 筛选培养基(To+)
Sifting medium MS+2.25mg/L6-BA+0.3mg/LNAA+400mg/Lcef+100mg/Lkam 5.8 壮芽培养基(P8+)
Budding selection medium MS+0.1mg/L6-BA+0.01mg/LNAA+400mg/Lcef+100mg/Lkam 5.8 生根培养基(1/2MS+)
Rooting medium 1/2MS+400mg/Lcef+100mg/Lkam 5.8 注:cef:头孢霉素,kam:卡那霉素; Note: cef: cefotaxime;kan: Kanamycin
MS基础培养基配方:(1L的配方)1/2 MS基础培养基配方:(1L的配方)MS 大量:50ml MS 大量:25ml
MS 微量:5ml MS 微量:2.5ml
MS 铁盐:5ml MS 铁盐:5ml
MS 有机:5ml MS 有机:5ml
糖:30g 糖:30g
琼脂:7.5g 琼脂:7.5g
6-BA母液浓度:0.5mg/ml
NAA母液浓度: 0.5mg/ml
Cef(头孢霉素)母液浓度:200mg/ml
Kam(卡那霉素)母液浓度:100mg/ml
注意:高温会导致Cef(头孢霉素)和Kam(卡那霉素)分解,因此需要在培养
基灭菌冷却后再在超净工作台内加入。
LB培养液配方:(1L的配方)
NaCl 10g (10g/L)
胰蛋白胨(TRYPTONE)10g (10g/L)
酵母提取物(YEAST EXTRACT)5g (5g/L)
LB固体培养基在液体配方的基础上1L加13g琼脂粉。