烟草转化方法及各类培养基配方
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表1 烟草转化中使用培养基
Table.1 List of the culture mediums in genetic transformation of tobacco
培养基
Culture medium 成分
ingredients
pH值
pH
继代培养基
Subculture medium MS 5.8 共生培养基（To）
Symbiotic culture medium MS+2.25mg/L6-BA+0.3mg/LNAA 5.8 筛选培养基（To＋）
Sifting medium MS+2.25mg/L6-BA+0.3mg/LNAA+400mg/Lcef+100mg/Lkam 5.8 壮芽培养基（P8＋）
Budding selection medium MS+0.1mg/L6-BA+0.01mg/LNAA+400mg/Lcef+100mg/Lkam 5.8 生根培养基（1/2MS＋）
Rooting medium 1/2MS+400mg/Lcef+100mg/Lkam 5.8 注：cef：头孢霉素，kam：卡那霉素； Note: cef: cefotaxime；kan: Kanamycin
MS基础培养基配方：（1L的配方）1/2 MS基础培养基配方：（1L的配方）MS 大量：50ml MS 大量：25ml
MS 微量：5ml MS 微量：2.5ml
MS 铁盐：5ml MS 铁盐：5ml
MS 有机：5ml MS 有机：5ml
糖：30g 糖：30g
琼脂：7.5g 琼脂：7.5g
6-BA母液浓度：0.5mg/ml
NAA母液浓度： 0.5mg/ml
Cef（头孢霉素）母液浓度：200mg/ml
Kam（卡那霉素）母液浓度：100mg/ml
注意：高温会导致Cef（头孢霉素）和Kam（卡那霉素）分解，因此需要在培养
基灭菌冷却后再在超净工作台内加入。
LB培养液配方：（1L的配方）
NaCl 10g （10g/L）
胰蛋白胨（TRYPTONE）10g （10g/L）
酵母提取物（YEAST EXTRACT）5g （5g/L）
LB固体培养基在液体配方的基础上1L加13g琼脂粉。