病理生理学实验流程

实验项目：肾前性及肾性因素导致家兔急性肾衰竭的比较。

实验目的：1、了解不同因素导致家兔急性肾衰竭的程度。

2、复制不同因素导致家兔急性肾衰竭的模型。

3、观察急性肾功能不全时动物血尿素氮、血肌酐、尿蛋白含量及肾

形态等因素的变化，分析其发生机制。

实验原理：1、中毒导致肾衰竭（肾性急性肾功能衰竭）：采用甘油160 mg/kg 体重造成家兔急性肾小管坏死坏死，复制急性肾功能不全的动物模型，

通过观察动物血尿素氮、尿及肾形态的变化。

致病机制:小鼠肌肉注射甘油后, 由于禁水及甘油的高渗透压造成

局部体液蓄积而引起血容量降低,肾血流量减少,血液粘度增加,肾

血管阻抗增加,血管自身调节功能丧失,导致肾小球滤过率下降;另

外,高渗透压造成肌肉及肌肉血管的溶解,肌红蛋白、血红蛋白及钾

的释放,产生肾毒性最终造成肾小球及肾小管损伤,功能异常。甘油

引起的ARF 兼有肾缺血及内源性毒性物质对肾脏损伤的双重作

用，类似于挤压综合征。（我们不清楚是否需要禁水）

2、缺血及施用血管收缩药物引起肾功能衰竭（肾前性急性肾功能衰

竭）：采用人工夹闭双侧肾动脉方法使肾脏缺血，引起肾灌注压下

降，肾血管收缩等一系列变化，引起急性肾小管坏死。

实验器材和药品：手术器械，20%乌拉坦，50%甘油，普鲁卡因，生理盐水，肝素，插管，刻度试管。

注：50%甘油配制方法:量取甘油50mL用右旋糖酐-70稀释至100mL。

实验步骤：1、肾性急性肾功能衰竭模型：

⑴提前将一只家兔限制饮水18h。

⑵提前24h肌肉注射50%甘油10ml/kg复制急性中毒性肾功能不全。

⑶24h后将家兔用20%乌拉坦麻醉3-4ml/kg、固定，对家兔进行肝素

化。

⑷下腹部正中切口，膀胱穿刺取尿3ml，离心后做尿蛋白定性实验。

⑸做颈总动脉插管，取3ml动脉血，离心后做血清尿素氮和血肌酐含

量的测定。

⑹处死动物，取肾，测定肾系数。

⑺剖开肾脏，观察肾皮质和肾髓质的变化。

2、肾前性急性肾功能衰竭模型

⑴取一只正常家兔称重，20%乌拉坦麻醉3-4ml/kg麻醉，固定在兔台

上，肝素化家兔。

⑵下腹部正中切口，寻找左右肾。

⑶行颈总动脉插管。

⑷夹闭双侧肾动脉，至少60min。

⑸待60min时间到后，取尿，离心后做尿蛋白定性实验。

⑹取3ml动脉血，离心后做血尿素氮及血肌酐含量的测定。

⑺处死动物，取肾，测定肾系数。

⑻剖开肾脏，观察肾皮质和肾髓质的变化。

3、肾性因素+肾前性因素。

⑴提前将一只家兔限制饮水18h。

⑵提前24h肌肉注射50%甘油10ml/kg复制急性中毒性肾功能不全。

⑶24h后将家兔用20%乌拉坦麻醉3-4ml/kg、固定，对家兔进行肝素

化。

⑷下腹部正中切口，夹闭双侧肾动脉，至少60min。

⑸行颈总动脉插管。

⑹待60min时间到后，取尿，离心后做尿蛋白定性实验。

⑺取3ml动脉血，离心后做血尿素氮及血肌酐含量的测定。

⑻处死动物，取肾，测定肾系数。

⑼剖开肾脏，观察肾皮质和肾髓质的变化。

4、空白对照组

⑴取一只正常家兔称重，20%乌拉坦麻醉3-4ml/kg麻醉，固定在兔台

上，肝素化家兔。

⑵行膀胱取尿，做尿蛋白定性实验。

⑶行颈总动脉插管。

⑷取3ml动脉血，离心后做血尿素氮及血肌酐含量的测定。

⑸处死动物，取肾，测定肾系数。

⑹剖开肾脏，观察肾皮质和肾髓质的变化。

注意事项：1、麻醉深度适宜。

2、取尿及膀胱插管时动作轻柔，必要时滴加普鲁卡因进行局麻。避

免对动物造成过度刺激。

3、取血时注意不要凝血，取血的注射器和试管提前肝素化。

4、插管时注意排空气泡，注意将插管提前灌注肝素。

5、动物体重尽量相近。