氰化高铁血红蛋白测定法讲解
2013体检培训——血红蛋白
个浓度标准液校正。
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3. 仪器的质控 （1）分光光度计的校正
氰化高铁血红蛋白标准液： 含50、100、150、200g/L四种浓度，每 支标准约10ml。
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54
表6 可见光分光光度计波长540nm，光径1.0cm 标准液允许误差
精品课件
日期
表5 血红蛋白平行样测定质量控制表
2005.3.22
学校
学
采血人 崔丹
大兴榆垡中
编号 血红蛋白值 复测值
范围
是否合格
20
149
40
140
60
143
80
130
100
123
145
141.6<149<156.5
146
133<140<147
132
135.9<143<150.2
117
123.5<130<136.5
1 0 81 0 5 100(T)
95 92
1
2
3
5
6
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最大允许线 警告线
靶值线
警告线 最大允许线
4
次数
废液处理
原则：不允许直接排放到下水道， 建议委托专业机构处理。
试剂含有氰化钾，使用处理不当可造成严重公 害。氰化物必须在碱性及中性条件下，加入次氯酸 钠进行二级分解。
医务人员使用时，应首先做好职业防护。 废液处理，首先以水稀释（1:1）；然后，稀释 后的废液按每升加入35ml次氯酸钠；充分混匀后敞 开容器口，放置15小时以上，使CN-氧化成CO2和N2 挥发，或是水解成CO32-和NH4+，再排入下水道。
氰化高铁血红蛋白测定法讲解
0.200g 0.140g 0.5-1.0ml
上述成分分别溶于蒸馏水中混合，再加蒸馏水至1000ml混匀，试 剂为淡黄色透明溶液，PH值在7.0-7.4。血红蛋白应在5min内完 全转化为高铁血红蛋白。
▼贴标签：写明试剂名称、配制时间、有效期、贮存法。
检测步骤
制备标准曲线
将市售氰化高铁血红蛋白(HiCN)参考 液稀释为四种浓度(200g/L、100g/L、 50g/L、25g/L)，然后以HiCN试剂调零，分 别测定各自在540nm处的吸光度，以血红 蛋白浓度(g/L)为横坐标、绘制标准曲线。
常规检测操作
⑴ 取小试管1支，加入HiCN试剂5ml；
⑵ 用清洁干燥微量吸管准确吸取末梢静脉 血20ul；擦去管外余血，将吸管插入小试 管中稀释液底部，轻轻将血放出，并吸取 上清液，清洗吸管2-3次，混匀；
⑶ 静置5分钟后，测定待测标本在540nm下 的吸光度；
⑷ 查标准曲线求得血红蛋白含量。
131-172 g/L 113-151 g/L 180-190 g/L 110-120 g/L 120-140 g/L
警告值(危机值) Hb＜50 g/L 或 ＞ 250 g/L
贫血程度划分
轻度 Hb 正常下限 —91 g/L 症状轻微； 中度 Hb 90-60 g/L 体力劳动时心慌气短； 重度 Hb 60-31 g/L 休息时感觉心慌气短； 极重度 Hb ≤ 30 g/L 常合并贫血性心脏病。
氰化高铁血红蛋白测定法 方法学评价
是国际血液学标准化委员会推荐的参 考方法，该法操作简单、显色快、结果稳 定可靠、读取吸光度后可直接定值等优点。 其致命的弱点是氰化钾试剂中剧毒，使用 管理不当会造成公害。
试剂
氰化高铁血红蛋白测定法试剂
血常规检查及其意义医生解读
反映贫血的病理变化，对贫血的鉴别诊断有一
定的价值。
○诊断缺铁性贫血：IDA的病人95%以上RDW增
高，可与β-珠蛋白生成障碍性贫血（88%RDW正 常）鉴别。
贫血类型
大细胞均一性
大细胞不均一性 正细胞均一性 正细胞不均一性 小细胞均一性 小细胞不均一性
常见疾病
部分再障
2. 生理变化：
○年龄及性别 ○精神因素 ○剧烈体力劳动或运动
○生理性贫血
新生儿：红细胞明显增
高、两周后下降，6-7 岁最低 男性：25岁-35岁达高 峰 女性：13岁-15岁达高 值，21岁-35岁低水平， 以后渐渐增高
3．病理变化：
增多：
Male RBC＞6.0×1012/L Hb＞170g/L
3. 参考值：
RBC Hb
成年男性（4.0-5.5）×1012/L （120-160）g/L
成年女性（3.5-5.0）×1012/L （110-150）g/L
初生儿 （6.0-7.0）×1012/L （170-200）g/L
（二）临床意义：（多RBC和Hb一同观察）
1．影响因素：
○全身血液容量 ○全身血浆容量
（一）概述
定义：
RBC指单位体积（每升）血液内的红细胞数量。
Hb指单位体积血液中所含血红蛋白的量。
方法：
（1） 红细胞计数
手工法 ：取样 稀释
计数 计算
仪器法 阻抗分析或激光分析
（2）血红蛋白测定
氰化高铁血红蛋白法（HiCN法）：
取样 加转化液（溶血、转化） 比色
血液在血红蛋白转化液中溶血后，除SHb外各血红 蛋白均可被高铁氰化钾氧化成高铁血红蛋白，再 与CN-结合生成稳定的棕红色氰化高铁血红蛋白， 通过比色根据吸光度得血红蛋白的浓度。
实验三血红蛋白(Hb)及全血尿素氮
实验三血红蛋白（Hb）及全血尿素氮的测定一、血红蛋白的测定（氰化高铁血红蛋白法）血红蛋白（Hb）是一种结合色蛋白，色素部分是亚铁血红素，蛋白质部分是珠蛋白。
1分子的Hb是由4分子的亚铁血红素和1分子的珠蛋白结合而成的。
Hb的主要生理功能是：1、运输氧气（O2）和二氧化碳（CO2），2、缓冲作用。
每分子的Hb可结合4分子的氧气，在标准的情况下（0℃，1个大气压），每克Hb能结合1.39毫升氧气。
HbO2比Hb具有较强的酸性，例如，在红细胞中，1毫摩尔的HbO2能产生1.88毫克当量的氢离子（H+），而1毫摩尔的Hb只能产生1.28毫克当量的H+。
因此，在组织中，每放出1毫摩尔O2（体积22.4毫升），就能多结合0.60毫克当量的。
因而Hb在调解体内酸碱平衡也有一定的作用。
所以，在运动训练和比赛中，Hb不仅能为组织提供氧气，促进物质的有氧代谢和带走CO2，而且也能起中和酸性的作用。
调查研究认为：正常人与运动员Hb含量没有明显差异。
故Hb的正常值男性为120-160克/升；女性110-150克/升。
贫血仍采用临床标准，即成年男性低于120克/升；成年女性低于105克/升；14岁以下的少年、儿童，不论男女，均以低于120克/升作为贫血标准。
Hb在运动训练的不同阶段，其含量不完全相同，这与运动员的机能状态、训练水平及遗传因素等关系密切。
因此，系统测试Hb的含量，对于评定运动员的机能状态和运动员选材等具有重要的意义。
（一）实验目的1、学习血红蛋白的生物学功能及在运动训练中的作用2、学习超微量血红蛋白的测定方法及原理，熟练掌握试管、相关仪器的操作技能（二）实验原理Hb被高铁氰化钾[K3Fe(CN)6]氧化成高铁血红蛋白（Hi），Hi与氰离子（CN-）结合成氰化高铁血红蛋白（HiCN），它在540nm有一吸收峰，测定其光密度，与标准血红蛋白进行比较，而得到Hb的含量。
（三）实验试剂和仪器1、试剂：（1）HiCN 稀释液：称取高铁氰化钾[K 3Fe(CN)6]200毫克，氰化钾（KCN ）50毫克，磷酸二氢钾（KH 2PO 4）140毫克，加蒸馏水稀释至1升。
血红蛋白测定方法
6.1 血红蛋白测定（氰化高铁法）消光系数法和标准曲线法任选其一测定血红蛋白。
１.6.1.1 光系数法１.6.1.1.1 原理血红蛋白(haemoglobin，Hb)被铁氰化钾氧化后生成高铁血红蛋白，再生氰离子结合形成氰化高铁血红蛋白（红色），氰化高铁血红蛋白（红色）极为稳定，在540nm波长下，毫克分子消光系数为44，据此，用分光光度法测其光密度，运用消光系数作血红蛋白的定量测定。
１.6.1.1.2 仪器721型或其它型号的分光光度比色计。
10微升量吸管。
１.6.1.1.3 试剂称取碳酸氢纳（）140毫克\铁氰化钾200毫克、氰化钾50毫克，用水溶解并稀释到1000毫升。
贮存於棕色试剂瓶内，在暗处或冰箱（+4℃）保存，至少可稳定数月到一年。
１.6.1.1.4 实验步骤１.6.1.1.4.1 试剂2.5毫升於5毫升带盖试管中，加入10微升血液，混匀后，放置15分钟。
１.6.1.1.4.2 选用0.5厘米光径比色杯，于540nm波长下，以试剂调零点，将所得样品管之光密度乘以73.6，即为血红蛋白之浓度（克%）。
计算公式如下：Ct=待测的血红蛋白（克%）浓度。
D 540 = 氰化高铁血红蛋白在540nm波长下测出的光密度。
HICN251=测定时血液的稀释倍数（血10微升加入试剂2.5毫升中）44=氰化高铁血红蛋白的毫克分子消光系数0.5=比色杯的光径10000=将（毫克/升）换算成（克%）的数字１.6.1.1.5 注意事项１.6.1.1.5.1 试剂不要放在聚乙烯瓶内，以免因氰离子与其反应而使试剂作用降低。
１.6.1.1.5.2 仪器因mM消光系数法完全依靠仪器的吸光度来计算,故此法要求所用的仪器性能要符合要求(如仪器的波长准确与否,以及灵敏度及线性等),否则将直接影响测定的结果。
1.6.1.1.5.3仪器在使用前最好以WHO规定的氰化高铁血红蛋白参考液校正后再使用。
参考液最好选用ICSH9国际血液学标准化委员会）确定的由RIV（莅国立公共卫生研究院）制定的氰化高铁血红蛋白参考液或上海医学化验所制血的氰化高铁血红蛋白标准液。
氰化高铁血红蛋白测定法
氰化高铁血红蛋白测定法氰化高铁血红蛋白测定法是一种常用的生物化学实验方法，用于测定血液中的血红蛋白含量。
本文将介绍这种测定方法的原理、步骤和应用。
一、原理氰化高铁血红蛋白测定法是基于血红蛋白与氰化高铁反应的原理。
血红蛋白是一种含有铁离子的蛋白质，与氰化高铁反应后形成氰合血红蛋白，其吸收波长为540 nm。
通过测定氰合血红蛋白的吸光度，可以间接测定血液中的血红蛋白含量。
二、步骤1. 血样处理：取适量的血液样品，离心分离出血浆，将血浆与氰化高铁试剂混合均匀。
2. 反应：将混合液放入分光光度计或分光比色计中，设定波长为540 nm，记录初始吸光度。
3. 添加还原剂：在反应过程中，加入适量的还原剂，如还原葡萄糖等，使氰合血红蛋白还原成血红蛋白。
4. 再次测定：记录还原后的吸光度。
5. 计算血红蛋白浓度：根据吸光度的变化，利用标准曲线或计算公式，计算出血液中的血红蛋白浓度。
三、应用氰化高铁血红蛋白测定法广泛应用于临床医学和生物研究中。
以下是该方法的几个常见应用：1. 临床诊断：血红蛋白是血液中的重要成分，其测定对于诊断贫血、血液病等疾病具有重要意义。
氰化高铁血红蛋白测定法可以快速、准确地测定血红蛋白含量，帮助医生进行诊断。
2. 药物研发：在药物研发过程中，需要评估药物对血红蛋白的影响。
氰化高铁血红蛋白测定法可以用于评估药物对血红蛋白的结合能力或解离能力，进而判断药物与血红蛋白的相互作用。
3. 营养评估：血红蛋白含量与身体的营养状况密切相关。
通过氰化高铁血红蛋白测定法，可以评估人体的血红蛋白含量，从而判断是否存在营养不良或缺铁性贫血等问题。
4. 动物实验：在动物实验中，血红蛋白的测定对于评估动物的健康状况和实验结果的可靠性至关重要。
氰化高铁血红蛋白测定法可以用于动物血液样品的血红蛋白浓度测定。
氰化高铁血红蛋白测定法是一种常用的测定血红蛋白含量的方法。
其原理简单，步骤明确，应用范围广泛。
在临床医学、药物研发、营养评估和动物实验等领域都有重要的应用价值。
氰化高铁血红蛋白测定法
氰化高铁血红蛋白测定法氰化高铁血红蛋白测定法是一种常用的血红蛋白测定方法，通过测定血红蛋白在氰化高铁存在下的吸光度变化，可以定量测定血液中的血红蛋白含量。
本文将详细介绍氰化高铁血红蛋白测定法的原理、步骤、优缺点以及应用等方面内容。
一、原理：氰化高铁血红蛋白测定法是基于血红蛋白与氰化高铁形成氰化高铁血红蛋白（MetHbFe(CN)5）的特点进行测定的。
当血液中存在氰化高铁时，血红蛋白与氰化高铁发生反应，生成氰化高铁血红蛋白，其吸收峰位在630 nm处。
血红蛋白的浓度可以通过测定吸光度来推算。
二、步骤：1. 准备工作：配制所需试剂，包括含氰化高铁的溶液、去离子水等。
2. 标定溶液的制备：用血红蛋白标准溶液制备出不同浓度的标定溶液。
3. 测定样品的制备：取一定量的待测样品，加入适量的氰化高铁溶液进行反应。
4. 吸光度测定：使用分光光度计等仪器，测定标定溶液和待测样品的吸光度。
5. 数据处理：根据吸光度与血红蛋白浓度的关系，计算出待测样品中血红蛋白的浓度。
三、优缺点：1. 优点：（1）灵敏度高：氰化高铁血红蛋白测定法对血红蛋白的检测灵敏度较高，可以提供准确的浓度结果。
（2）操作简便：该方法的操作步骤相对简单，对实验条件的要求较低，适用于临床实验室快速测定血液样品中的血红蛋白含量。
（3）广泛应用：氰化高铁血红蛋白测定法被广泛应用于临床实验室、医疗机构以及科研领域，能够快速准确地测定血液中的血红蛋白含量。
2. 缺点：（1）有毒性：氰化高铁具有一定的毒性，需特别注意在实验过程中的安全操作，避免接触和摄入。
（2）受干扰较大：在应用过程中，有些物质如某些药物、代谢产物等可能会影响测定结果，造成测定误差。
四、应用：氰化高铁血红蛋白测定法广泛应用于临床和研究领域，主要用于以下方面：1. 临床检测：在医疗机构中，血红蛋白含量的测定对于诊断和治疗某些疾病至关重要。
通过氰化高铁血红蛋白测定法，可以快速准确地测定血液中的血红蛋白含量，以辅助疾病的诊断和治疗过程。
血红蛋白测定实验
血红蛋白测定实验一、实验目的与任务了解XF—1B型（或Hb—2000型）血红蛋白仪的使用方法，掌握血红蛋白的测定技术。
有训练运动员在较好训练效果的影响下血红蛋白正常值高于正常成年人，因此，血红蛋白的测定是评定训练效果的重要指标。
二、原理测定血红蛋白的方法很多，常见的有直接比色，光电比色法，沙利氏比色法（间接比色法）。
我们现在实验室用的是XF—1B型和Hb—2000型血红蛋白仪。
此仪器是采用氰化高铁法，应用光电比色的原理测定血红蛋白值的，其原理是：将全血样品20ul注入5ml氰化高铁血红蛋白稀释液内（亦称文—齐氏液），作251倍稀释，溶化红细胞释出血红蛋白。
稀释剂将血红蛋白先转变成高铁血红蛋白，再转化为氰化高铁血红蛋白。
然后，再用XF—1B 型（或Hb—2000型）Hb仪比色法直接测定显示浓度数，不需任何换算（每次测定只需5秒钟）。
三、实验器材XF—1B型和Hb—2000型血红蛋白仪、一次性血细胞吸管（刻度10～20ul）、采血针、75%酒精、消毒棉球、培养皿、烧杯、可调加液器、试管架、血红蛋白测定试剂（文—齐氏液）、氰化高铁血红蛋白标准液。
四、实验步骤1、插上电源，打开血红蛋白仪电源开关，按动进样开关，重复三次吸入蒸馏水，并通电预热20～30分钟。
观察显示是否为“零”。
（按出Hb仪器左下角“测试—定标”按键，使之处于“测试”状态。
）2、取试管一支，加入Hb测定试剂（文—齐氏液）5ml，放在试管架上备用。
3、采血、比色：先消毒，再用采血针在耳垂或无名指尖处采血，用干棉球擦去第一滴血，待第二滴血自然流出一大滴时，用血细胞吸管取血液20ul（注意：吸管内不可有气泡，否则需重新采血）。
擦去吸管外血液后，轻轻吹入测定管底部，并回吸数次洗净吸管，然后充分混合均匀。
待5分钟后，置Hb仪上比色。
4、记录：直接读数，记录下来。
Hb值通常以每100 ml血液中含Hb若干克来表示。
（g/ml）。
本仪器采用国际单位制（g/L），可直接显示Hb值（g/L）。
血红蛋白测定方法
6.1 血红蛋白测定（氰化高铁法）消光系数法和标准曲线法任选其一测定血红蛋白。
１.6.1.1 光系数法１.6.1.1.1 原理血红蛋白(haemoglobin，Hb)被铁氰化钾氧化后生成高铁血红蛋白，再生氰离子结合形成氰化高铁血红蛋白（红色），氰化高铁血红蛋白（红色）极为稳定，在540nm波长下，毫克分子消光系数为44，据此，用分光光度法测其光密度，运用消光系数作血红蛋白的定量测定。
１.6.1.1.2 仪器721型或其它型号的分光光度比色计。
10微升量吸管。
１.6.1.1.3 试剂称取碳酸氢纳（）140毫克\铁氰化钾200毫克、氰化钾50毫克，用水溶解并稀释到1000毫升。
贮存於棕色试剂瓶内，在暗处或冰箱（+4℃）保存，至少可稳定数月到一年。
１.6.1.1.4 实验步骤１.6.1.1.4.1 试剂2.5毫升於5毫升带盖试管中，加入10微升血液，混匀后，放置15分钟。
１.6.1.1.4.2 选用0.5厘米光径比色杯，于540nm波长下，以试剂调零点，将所得样品管之光密度乘以73.6，即为血红蛋白之浓度（克%）。
计算公式如下：Ct=待测的血红蛋白（克%）浓度。
D 540 = 氰化高铁血红蛋白在540nm波长下测出的光密度。
HICN251=测定时血液的稀释倍数（血10微升加入试剂2.5毫升中）44=氰化高铁血红蛋白的毫克分子消光系数0.5=比色杯的光径10000=将（毫克/升）换算成（克%）的数字１.6.1.1.5 注意事项１.6.1.1.5.1 试剂不要放在聚乙烯瓶内，以免因氰离子与其反应而使试剂作用降低。
１.6.1.1.5.2 仪器因mM消光系数法完全依靠仪器的吸光度来计算,故此法要求所用的仪器性能要符合要求(如仪器的波长准确与否,以及灵敏度及线性等),否则将直接影响测定的结果。
1.6.1.1.5.3仪器在使用前最好以WHO规定的氰化高铁血红蛋白参考液校正后再使用。
参考液最好选用ICSH9国际血液学标准化委员会）确定的由RIV（莅国立公共卫生研究院）制定的氰化高铁血红蛋白参考液或上海医学化验所制血的氰化高铁血红蛋白标准液。
氰化高铁血红蛋白测定法试剂
氰化高铁血红蛋白测定法试剂氰化高铁血红蛋白测定法是一种常用的生化实验方法，用于分析和测定血液中的血红蛋白含量。
本文将全面介绍该测定法的原理、操作步骤及实验结果的解读，以及实验中需要注意的事项。
氰化高铁血红蛋白测定法的原理是利用氰化高铁与血红蛋白形成氰合血红蛋白，通过测定其最大吸收波长处的吸光度来确定血红蛋白的浓度。
这个测定法在实验室应用广泛，特别适用于快速分析大量样本。
操作步骤如下：1. 准备试剂：将氰化高铁溶液定容至10ml，并使用洗瓶洗净可塑性吸光管。
2. 取1ml待测血清，加入两滴牛磺酸溶液，充分混合。
3. 加入2ml的氰化高铁溶液，尽量避免溶液溢出或产生气泡。
4. 轻轻倾斜吸光管，充分混合后，放置在室温下孵育5分钟。
5. 将孵育后的吸光管置于1cm光程比色皿中，切不可触摸吸光池。
6. 使用5% NaOH溶液分别置于两个比色皿中，作为空白对照。
7. 使用比色计在最大吸收波长（540nm）测定各组的吸光度值。
8. 计算血红蛋白浓度。
根据标定曲线和吸光度值的关系，描绘标定曲线并用所测吸光度值参照标定曲线，查得相应血红蛋白浓度。
实验结果的解读需要注意以下几个方面：1. 血红蛋白浓度的计算：在标定曲线上查找所测吸光度值对应的血红蛋白浓度，可得到最终结果。
2. 结果的参考范围：血红蛋白浓度的正常范围在男性为130～175g/L，女性为115～155g/L。
3. 实验误差的排除：实验过程中，应严格控制各实验条件的一致性，避免外界因素对实验结果的影响。
同时，在同一天内重复检测样本可以提高实验结果的可靠性。
需要注意的事项：1. 操作安全：氰化高铁溶液有毒，操作时应佩戴手套和护目镜，并避免接触皮肤和吸入气体。
2. 实验条件：实验室应具备较好的通风条件，同时实验过程中，避免光线、震动和干扰。
3. 校准和质控：每天开始实验前进行仪器校准，并使用已知浓度的标准品进行质控，以确保实验结果的准确性和可靠性。
综上所述，氰化高铁血红蛋白测定法是一种简便、快速、准确的血红蛋白测定方法。
03[1].红细胞计数、血红蛋白定量
![03[1].红细胞计数、血红蛋白定量](https://img.taocdn.com/s3/m/805ad324af45b307e871973d.png)
计数误差
技术误差 固有误差：仪器误差 计数域误差
质量控制
1避免技术误差，纠正仪器偏差 2缩小计数域误差 3排除异常标本的干扰 4室内、室间质量评价
（Hemoglobin，Hb或HGB） Hemoglobin，Hb或HGB） （原卟啉、Fe2+） 原卟啉、 亚铁血红素 （原卟啉、Fe2+） 原卟啉、 亚铁血红素
相对缺氧， 三. 剧烈体力运动和劳动 相对缺氧，↑ 妊娠中、 血液稀释， 五. 妊娠中、后期 血液稀释，↓
一. 相对性增多 血液浓缩 二. 绝对性增多 1. 原发性红细胞增多 常见于真性红细胞增多症等 2. 继发性红细胞增多 常见于：心血管疾病、肺部疾病、 常见于：心血管疾病、肺部疾病、 异常血红蛋白病等
红细胞检验的意义
贫血的诊断和形态学分类 骨髓造血功能评价与疗效观察 动态观察疾病的变化 治疗监测与安全防护
( red blood cell count, RBC )
一. 原理 等渗稀释液将血液稀释一定倍数 将血液稀释一定倍数， 用等渗稀释液将血液稀释一定倍数，充 入计数池中， 入计数池中，于显微镜下计数一定体积 内的红细胞数， 内的红细胞数，经过换算求得每升血液 中的红细胞数量。 中的红细胞数量。 二. 器材 1.显微镜 2.微量吸管 1.显微镜 2.微量吸管 3.计数板 改良Neubauer 计数板： Neubauer计数板 3.计数板：改良Neubauer计数板
1.红细胞手工显微镜计数法： 1.红细胞手工显微镜计数法： 红细胞手工显微镜计数法 原理、改良Neubauer计数板的结构、 Neubauer计数板的结构 原理、改良Neubauer计数板的结构、 操作方法、结果计算及注意事项。 操作方法、结果计算及注意事项。 2.血红蛋白测定 血红蛋白测定： 2.血红蛋白测定： 氰化高铁血红蛋白(HiCN) (HiCN)测定法 氰化高铁血红蛋白(HiCN)测定法 十二烷基硫酸钠血红蛋白测定法 3.红细胞计数和血红蛋白测定的参考 3.红细胞计数和血红蛋白测定的参考 值及临床意义。 值及临床意义。
血红蛋白测定标准操作程序SOP文件
版序：ABCD
页码：第2页，共2页
[计算结果]
1，血红蛋白(g/L)=测定管吸光度×64458×251/44000
=测定管吸光度×367.7
2，血红蛋白(g/L)=（测定管吸光度/标准管吸光度）×标准浓度（g/L）
[质量控制]
1．每天检测工作前后，清洁仪器表面，确保仪正常进行。
[试剂及仪器]
1，试剂：
HiCN试剂的配法:
氰化钾50mg
高铁氰化钾200mg
无水磷酸二氢钾140mg
Triton X-100 1.0ml
蒸馏水加至1000ml
纠正pH至7.0-7.4
此液为淡黄色透明溶液,用蒸馏水调零,比色杯光径1.000cm，波长540nm处的吸光度应为零。贮存在棕色有塞玻璃瓶中，放4°C冰箱保存.一般可用数月。
2，仪器：
（1）一次性微量吸管。
（2）721型分光光度计。
[标准品]
人标准血红蛋白液（卫生部临床检验中心）
[质控品]
COULTER ACT4CPLUS全血质控品。（血液细胞自动化分析仪介绍）
[标本采集]
未梢血或静脉血用EDTA-K2抗凝。
凝集，血量小于0.4 ML或抽血时间超过四小时为不合格标本，拒收。
男:120-160g/L
女:110-150g/L
[临床意义]
血红蛋白浓度测定（HGB）临床意义与红细胞的基本相同，一般情况下红细胞数与血红蛋白浓度之间有一定的比例关系，但在部份贫血患者，二者数值的比值与正常人的比值有一定的差异，这些差异对贫血诊断和鉴别诊断有帮助。
2．每天利用三水平质控品与标本同步进行室内质控一次，及时查找失控原因并纠正。
3．在工作中，当发现标本某些检测结果项出现倾向性结果时，必须重新进行一次室内质控制，找出和排除原因。
高铁血红蛋白鉴定试验
高铁血红蛋白鉴定试验高铁血红蛋白鉴定试验是一种现代化的检测方法，通过对血红蛋白的分析，能够有效地判断人体健康状况和患病风险。
本文将为大家介绍高铁血红蛋白鉴定试验的原理、流程以及其在临床应用中的指导意义。
高铁血红蛋白鉴定试验的原理是基于血液中的血红素含量与人体健康之间的关系。
血红蛋白是红细胞中的重要成分，它能够将氧气从肺部运输到身体各个组织，维持身体正常的代谢活动。
然而，如果血液中的血红素含量过高，就可能导致高铁血红蛋白的形成，进而影响氧气的正常运输，对身体健康造成不利影响。
高铁血红蛋白鉴定试验的流程主要包括血样采集、样本处理、检测仪器分析和结果解读等环节。
首先，医务人员会在患者的手臂上采集一小管血液样本，这个过程通常是无痛的，但需要注意消毒和采集技巧。
采集的血样经过处理，将血红蛋白与其他成分分离，然后放入专门的高铁血红蛋白分析仪器中进行检测。
检测仪器会根据血液中的血红蛋白含量，判断是否出现高铁血红蛋白的情况。
最后，医务人员会根据检测结果进行解读，并向患者提供相应的指导和建议。
高铁血红蛋白鉴定试验在临床应用中起到了重要的指导意义。
一方面，它可以帮助医生及时发现患者中高铁血红蛋白的存在，有利于早期干预和治疗。
高铁血红蛋白可能与多种疾病的形成有关，如心脑血管疾病、代谢性疾病等，因此及早发现问题并进行治疗，对于预防患病具有重要意义。
另一方面，高铁血红蛋白鉴定试验也可以作为健康人群的常规体检项目之一，通过定期检测，了解自身健康状况，及时采取合理的预防措施，有助于保持身体的健康状态。
总之，高铁血红蛋白鉴定试验是一种生动、全面、有指导意义的现代化检测方法。
凭借其简便、快速和准确的优势，可以帮助人们及时发现潜在的健康问题，提供指导意义的检测结果，并为临床治疗和健康管理提供科学依据。
我们鼓励大家认识高铁血红蛋白鉴定试验的重要性，并积极参与相关检测，保障自身健康。
氰化高铁血红蛋白测定法简介
氰化高铁血红蛋白测定法简介目录•1拼音•2英文参考•3概述•4氰化高铁血红蛋白测定法的别名•5分类•6取材•7氰化高铁血红蛋白测定法的原理•8试剂•9操作方法•10正常值•11化验结果临床意义•12附注•13相关疾病1拼音qíng huà gāo tiě xuè hóng dàn bái cè dìng fǎ2英文参考cyanmethemoglobin determination method3概述Hb测定大致分为：①根据Hb分子组成，测定总Hb法（全血铁法）；②根据血液物理特性测Hb（比重法、折射仪法）；③根据Hb 与O2可逆性结合的特性测Hb（血气分折法）；④根据Hb衍生物光谱特点进行的定量测定等4大类，其中有些方法简单易行，而得到长期广泛应用（如沙利法），但随着技术的进步和研究的深入，缺点日渐显著，逐渐被淘汰。
为统一Hb测定方法，1966年国际血液学标准化委员会推荐氰化高铁Hb测定法作为Hb测定标准法。
1978年国际临床化学联合会和世界病理学会联合发表的国际性文件中重申了HiCN 法。
4氰化高铁血红蛋白测定法的别名氰化高铁Hb测定法5分类临床血液检查 > 红细胞6取材血液7氰化高铁血红蛋白测定法的原理血液在Hb转化液中溶血后，除SHb外各种Hb均可被高铁氰化钾氧化为高铁Hb再与CN结合生成稳定的棕红色氰化高铁Hb。
HiCN 最*** 峰在540nm,最小吸收峰为504nm。
特定标准条件下，毫摩尔消光系数为44L·mmol－1·cm。
因此，根据标本的吸光度，即可测定Hb浓度。
在没有符合WHO标准的分光光度计的条件下，亦可用HiCN参考液制标准曲线，或计算出换算常数，间接计算Hb浓度（g/L）。
HiCN的消光系数是44mmol－1·cm－1，可根据下列公式进行计算Hb浓度：A/44×64458（mg）/1000×251＝A×367.7＝Hb（g/L）式中A是在540nm处HiCN吸光度，64458mg是Hb的毫克分子量，1000是将毫克转换为克，251是实验时血液的稀释倍数。
氰化高铁血红蛋白测定法
氰化高铁血红蛋白测定法氰化高铁血红蛋白测定法是一种常用的生物化学分析方法，用于测定样品中的血红蛋白含量。
血红蛋白是人和动物体内的重要蛋白质，它负责将氧气从肺部输送到全身各个组织。
血红蛋白含量的测定对于诊断贫血、血液病等疾病具有重要意义。
下面将详细介绍氰化高铁血红蛋白测定法的原理、步骤和应用。
一、原理氰化高铁血红蛋白测定法通过将血红蛋白与氰化高铁反应生成氰化高铁血红蛋白，利用其在特定波长下的吸光度来测定血红蛋白的含量。
具体原理如下：1. 血红蛋白与氰化高铁反应生成氰化高铁血红蛋白：血红蛋白中的亚铁离子与氰化高铁反应生成氰化高铁血红蛋白，反应方程式如下：Hb + [Fe(CN)6]3- → Hb[Fe(CN)6]2- + CN-2. 氰化高铁血红蛋白在特定波长下有较大的吸光度：氰化高铁血红蛋白在540nm波长处具有极大吸光度，利用分光光度计可以测定其吸光度值。
二、步骤氰化高铁血红蛋白测定法的具体步骤如下：1. 样品制备：将待测样品（例如血液、血浆等）取适量加入离心管中。
2. 氰化高铁处理：向样品中加入适量的氰化高铁试剂，充分混匀后，置于室温下反应一定时间。
3. 反应停止：加入适量的醋酸溶液，使反应停止。
4. 分光光度计测定：将反应后的样品溶液转移至分光光度计比色皿中，设置波长为540nm，测定吸光度值。
5. 血红蛋白含量计算：根据标准曲线，将吸光度值转换为血红蛋白的含量。
三、应用氰化高铁血红蛋白测定法广泛应用于医学、生物化学等领域。
其主要应用包括以下几个方面：1. 临床诊断：通过测定血红蛋白的含量，可以判断患者是否存在贫血等疾病。
贫血是指血液中红细胞或血红蛋白含量低于正常范围的一类疾病，通过测定血红蛋白含量可以帮助医生进行贫血的早期诊断和治疗。
2. 药物研究：氰化高铁血红蛋白测定法可以用于评估药物对血红蛋白的影响。
一些药物可能会影响血红蛋白的合成或稳定性，通过测定血红蛋白含量可以评估药物的毒副作用和治疗效果。
血红蛋白 测定方法
血红蛋白测定方法血红蛋白测定是一种常见的临床检测方法，用于评估人体的血液健康状况。
血红蛋白是红细胞中的重要成分，它能够携带和输送氧气到人体的各个组织和器官中，维持正常的生理功能。
因此，血红蛋白的浓度对人体的健康至关重要。
本文将介绍血红蛋白测定方法的原理、步骤以及其在临床实践中的应用。
血红蛋白测定的原理基于血红蛋白与一种叫做氰化物的化学试剂的反应。
氰化物与血红蛋白结合后形成一种稳定的配合物，其吸光度与血红蛋白的浓度呈正相关关系。
因此，通过测定这种配合物的吸光度，我们可以间接地确定血红蛋白的浓度。
血红蛋白测定的步骤大致包括标本采集、血红蛋白与氰化物反应、吸光度测定以及结果计算。
首先，需要采集被测者的静脉血标本。
常用的采血部位为前臂的静脉，通过无菌的一次性针头和采血管进行采血。
采血过程中，注意要遵循无菌操作规范，以确保样本的纯净度。
采集到的血样需要立即进行处理，避免血红蛋白在样本存放过程中的分解。
将血样置于试剂盒中，与一种叫做氰化钾的化学试剂发生反应。
这是因为氰化物与血红蛋白结合后，会形成一种稳定的红色配合物。
接下来，使用光度计或分光光度计对样品进行吸光度测定。
测定波长选择在一个适当的范围内，一般为540纳米（nm）。
根据样品的吸光度值，可以利用相关的计算公式来计算血红蛋白的浓度。
血红蛋白测定方法的准确性和可靠性对于临床诊断和治疗至关重要。
因此，在进行血红蛋白测定时，需要严格按照操作规程执行，并根据仪器的特点和要求进行操作。
比如，在采血过程中，要注意采用无菌操作，避免样本被污染。
在氰化物与血红蛋白反应的步骤中，要控制反应的时间和温度，以确保反应的充分和准确性。
在测定吸光度时，还要根据仪器的要求进行波长的选择，避免干扰因素对测定结果的影响。
血红蛋白测定方法在临床实践中具有广泛的应用。
首先，血红蛋白测定可以用于评估贫血的程度，了解患者的贫血状况。
贫血是指血液中的血红蛋白浓度降低，导致供氧不足的疾病。
通过血红蛋白测定，医生可以判断贫血的轻重程度，并指导治疗方案的选择。
氰化高铁法
氰化高铁法第一篇：氰化高铁法原理:血红蛋白在高铁氰化钾和氰化钾的作用下,生成极为稳定的氰化高铁血红蛋白(红色),其颜色深浅与血红蛋白的含量成正比。
氰化高铁血红蛋白在540 nm 波长下,毫克分子消光系数为44 ,据此,用分光光度法测其吸光度,运用消光系数作血红蛋白的定量测定,其化学反应式如下: 血红蛋白——铁氰化钾——高铁血红蛋白——氰化钾——氰化高铁血红蛋白(红色)试剂: 碳酸氢钠(NaHCO3)140 mg ,铁氰化钾[ K3 Fe(CN)6 ]200 mg ,氰化钾(KCN)50 mg ,均为分析纯。
用水溶解并稀释到1 000 mg ,贮存于棕色试剂瓶内,在暗处或冰箱(4 ℃)保存,至少可稳定数月到1 年。
操作步骤: ①取试剂2.5 mL 于5 mL 带盖试管中加入10μL 血液,混匀后,放置15 min。
②选用0.5 cm 光径比色杯,于540 mm 波长下,以试剂调零点,将所得样品管之吸光度乘以73.6 ,即为血红蛋白之浓度。
计算公式如下: Ct =(D540HiCN ×251/ 44 ×0.5)×64 458/ 10 000 = 73.6 ×吸光度。
Ct 为待测的血红蛋白浓度。
D540HiCN为氰化高铁血红蛋白在540 mm 波长下测出的吸光度。
251 为测定时血液的稀释倍数(10μL 血加入215 mL 试剂中)。
44 为氰化高铁血红蛋白的毫克分子消光系数。
0.5 为比色杯的光径。
64 458 为血红蛋白的相对分子质量。
第二篇：氰化技术主管竞聘稿做氰化技术的排头兵尊敬的各位领导、各位评委老师您们好：我叫XXX，我竞聘的岗位是青海山金氰冶技术主管。
我将从个人简介、任职优势、工作思路几方面进行竞聘演讲，希望能得到大家的支持。
一、个人简介1．工作经历二、我的任职优势1、经验使我对氰化技术工作得心应手对于氰化、氧化系统，我做过每个工段操作工。
二十多年一路干过来，我掌握的技术都是实打实的，流程哪个环节出现问题、哪个设备出现异常会带来什么后果，我都能在第一时间找出原因和解决办法，也由于这个原因，来此之前任莱州市治炼厂氰化厂副帮长。
血红蛋白测定
血红蛋白测定【实验目的】掌握血红蛋白测定的临床意义熟悉毛细管采血过程，分光光度计的操作了解血红蛋白测定的注意事项【实验原理】血液在血红蛋白转化液中表面活性剂的作用下溶血后，血红蛋白（除SHb外）被高铁氰化钾（K3Fe（CN）6）氧化为高铁血红蛋白（Hi），Hi再与氰化钾（KCN）中的氰离子（CN-）结合生成稳定的棕红色氰化高铁血红蛋白（HiCN）。
HiCN最大吸收波峰在540nm,最小吸收谷为504nm。
可用分光光度计直接测定或用HiCN 标准液比色法测定。
即可求出待测血红蛋白浓度。
此法称HiCN法。
【试剂】血红蛋白转化液（文齐氏液，Van kampen-Zijlstra’液）：氰化钾50 mg ，提供氰离子（CN-）高铁氰化钾200 mg ，氧化剂无水磷酸二氢钾140 mg ，缓冲液成分，维持溶液的pH值，【实验操作】????（1）取一支试管加入5.0ml HiCN试剂，取全血20μl，加入到5.0ml HiCN试剂中，混匀后静置5 min，使血红蛋白转化完全。
????（2）分光光度计，波长540nm ，比色杯光径1.0cm ，杯温20-300C，以蒸馏水或空白转化液调零，测定样品吸光度值（A）。
【计算】根据比尔定律，浓度与吸光度成正比，所以实际操作中我们还可以直接用待测液的吸光度A测/标准液的吸光度A标＝待测液的浓度C测/标准液的浓度C标来直接计算待测液的浓度。
【参考值】男性：120 ~160g／L ，女性：110 ~150g／L ，新生儿：170 ~200g／L 。
【临床意义】照书上写图1 红细胞和血红蛋白的生理变化曲线红细胞计数医学决定水平：高于6.8×1012/L，应采取相应治疗措施；低于3.5×1012/L可诊断贫血；低于1.5×1012/L应考虑输血。
血红蛋白测定（Hb）标准操作程序-检验小胖的日志-网易博客
血红蛋白测定（Hb）标准操作程序-检验小胖的日志-网易博客血红蛋白测定(Hb)标准操作程序血液检验SOP 2009-12-08 19:41:15 阅读200 评论1 字号：大中小订阅一.目的：规范血红蛋白测定标准操作二.适用范围：适用于测定血红蛋白三.支持性文件：全国临床检验操作规程第三版四.原理：氰化高铁血红蛋白(HiCN)法五.仪器：722s分光光度计六.试剂：HiCN试剂的配法：氰化钾 50mg高铁氰化钾 200mg无水磷酸二氢钾 140mgTriton X-100 1.0ml蒸馏水加至1000ml 纠正pH至7．0～7．4七.样本要求：静脉采血使用EDTA-K2抗凝。
毛细血管采血应擦去第一滴血，以免混入组织液影响结果。
标本采集完成放置5-10分钟后测定。
八.操作步骤：1．取全血20ul，加到5ml HiCN试剂中。
充分混匀，静置5min。
2．分光光度计(常规测定时带宽应小于6nm)，波长540nm处，光径(比色杯内径) 1．0cm，以HiCN试剂调零，测定吸光度(A)。
查标准曲线求血红蛋白的含量。
血红蛋白(g／L)＝测定管吸光度X64458*251/44000＝测定管吸光度X367．7式中：①64458是目前国际公认的血红蛋白平均分子量。
②44000是1965年国际血液学标准化委员会(1CSH)公布的血红蛋白摩尔吸光度。
③251是稀释倍数。
3、标准曲线的制备：将市售的氰化高铁血红蛋白（HiCN）参考液稀释为四种浓度（200g/L,100g/L,50g/L,25g/L）然后以HiCN试剂调零。
分别测定各自在540nm处的吸光度。
以血红蛋白浓度为横坐标其对应的吸光度为纵坐标绘制标准曲线。
4.结果输入上海新和中文操作系统打印报告。
九.参考范围：男：120—160g／L (12—16g／d1)女：110～150g／L(11～15g／d1)新生儿：170—200g／L(17—20g／d1)十.注意事项：1.HiCN试剂不能贮存于塑料瓶中，否则会使CN-丢失，测定结果偏低。
生物材料溶血性标准化评价方法比较_溶血率法和氰化高铁血红蛋白法
生物材料溶血性标准化评价方法比较:溶血率法和氰化高铁血红蛋白法张伶俐 朱蔚精 谭言飞 屈树新 张兴栋△(四川大学分析测试中心生物学评价实验室,生物材料工程研究中心,成都 610064) 摘要 采用游离血红蛋白直接测定法即溶血率测定法(根据ISO TR7405)和氰化高铁血红蛋白法(根据ISO 1099324)测定了羟基磷灰石(陶瓷)和胶原(高分子材料)的溶血性能,结果提示这两种方法的结论是一致的,且氰化高铁血红蛋白法较血红蛋白直接测定法有灵敏、稳定、可比性好等优点,值得推广应用。
但它存在着一些标准中尚未明确规定的问题。
作者在大量试验和不违背标准原则的基础上提出了一些改进意见,使它更具有可操作性,以便于标准化评价生物材料的溶血性能。
关键词 生物学评价 血液相容性 溶血试验Com par ison between Hem olysis Percen tage M ea surem en t and Hem iglob i ncyan ide M ea surem en t for Standard iz i ng the Eva lua tion ofHem olytic Properties of B ioma ter i a lsZhang L i ngl i Zhu W e ij i ng Tan Yanfe i Qu Shux i n Zhang X i ngdong∃(B iolog ica l E va lua tion L aborota ry,A na ly sis and T esting Cen ter,E ng ineering R eseach Cen ter in B io m a teria ls,S ichuan U n iversity,Cheng d u 610064,Ch ina) Abstract In th is study,tw o m ethods——the supernatant hemoglobin spectropho tom etry,i.e.hemo lysis percentage m easurem ent(acco rding to ISO TR7405)and the hem iglobincyanide m easurem ent(acco rding to ISO 1099324)——w ere used to assay the hemo lytic p roperties of hydroxyapatite(bi oceram ics)and co llagen(po lym er).T he results show ed that the conclusi ons draw n from using the tw o m ethods w ere basically consistent,and the lat2 ter w as mo re sensitive,stable and comparable.How ever,som e of the p rocedures in the hem iglobincyanide m ethod w ere no t defined in details.So based on our experi m ents w e have offered som e suggesti ons and i m p rovem ents, w h ich do no t deviate from ISO and A STM standards,fo r h iher p racticability of usig it in standardizing the evalua2 ti on of the hemo lytic p roperties of bi om aterials.H em iglobincyanide m easurem ent is w o rthy of w ider app licati on.Key words B i o logical evaluati on H emocompatibility H emo lysis test1 引 言与血液直接或间接接触的生物材料必须评价它的血液相容性。
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计算公式
血红蛋白(g/L)=测定管吸光度×64458/44000 ×251
=测定管吸光度×367.6
式中：64458为目前国际公认的血红蛋白平均分子量 44000为1965年国际血液学标准化委员会公布的 血红蛋白摩尔吸光系数。 251为稀释倍数
生物参考区间
成年男性 成年女性 新生儿 婴儿 儿童
131-172 g/L 113-151 g/L 180-190 g/L 110-120 g/L 120-140 g/L
警告值(危机值) Hb＜50 g/L 或 ＞ 250 g/L
贫血程度划分
轻度 Hb 正常下限 —91 g/L 症状轻微； 中度 Hb 90-60 g/L 体力劳动时心慌气短； 重度 Hb 60-31 g/L 休息时感觉心慌气短； 极重度 Hb ≤ 30 g/L 常合并贫血性心脏病。
0.200g 0.140g 0.5-1.0ml
上述成分分别溶于蒸馏水中混合，再加蒸馏水至1000ml混匀，试 剂为淡黄色透明溶液，PH值在7.0-7.4。血红蛋白应在5min内完 全转化为高铁血红蛋白。
▼贴标签：写明试剂名称、配制时间、有效期、贮存法。
检测步骤
制备标准曲线
将市售氰化高铁血红蛋白(HiCN)参考 液稀释为四种浓度(200g/L、100g/L、 50g/L、25g/L)，然后以HiCN试剂调零，分 别测定各自在540nm处的吸光度，以血红 蛋白浓度(g/L)为横坐标、绘制标准曲线。
氰化高铁血红蛋白测定法 方法学评价
是国际血液学标准化委员会推荐的参 考方法，该法操作简单、显色快、结果稳 定可靠、读取吸光度后可直接定值等优点。 其致命的弱点是氰化钾试剂中剧毒，使用 管理不当会造成公害。
试剂
氰化高铁血红蛋白测定法试剂
氰化钾[KCN]
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
0.050g
高铁氰化钾[(K3Fe(CN)6)] 无水磷酸二氢钾 [KH2PO4] 非离子表面活性剂
试剂应保持新鲜，至少一个月配制一次
样本中白细胞过高或球蛋白异常增高时， 可干扰实验，解决方法是：白细胞过高， 离心后取上清液比色；球蛋白异常增高 (如肝硬化者)，比色液中加入少许固体氯 化钠或碳酸钾，混匀后溶液澄清后再比 色
血红蛋白 （HGB）
临床意义
生理性变化
增高
减低
•新生儿、
•主要见于婴幼儿
常规检测操作
⑴ 取小试管1支，加入HiCN试剂5ml；
⑵ 用清洁干燥微量吸管准确吸取末梢静脉 血20ul；擦去管外余血，将吸管插入小试 管中稀释液底部，轻轻将血放出，并吸取 上清液，清洗吸管2-3次，混匀；
⑶ 静置5分钟后，测定待测标本在540nm下 的吸光度；
⑷ 查标准曲线求得血红蛋白含量。
注意事项
HiCN试剂应贮存在棕色的有塞的玻璃瓶中， 不能贮存在塑料瓶中，否则会使CN-丢失，测 定结果偏低
HiCN试剂应在4℃保存，不能0℃保存，因结 冰可使试剂失效
白细胞过高或球蛋白异常增高时，可产生浓 度干扰实验
氰化钾试剂是剧毒品，测定后的废液应除毒 处理后再弃去
质量控制
HiCN试剂应4℃保存，否则试剂失效，直 接影响检测质量
高原地区居住者 老年人
•及妊娠中晚期等
血红蛋白 （HGB）
临床意义
病理性变化
增高
•真性红细胞增多、 代偿性红细胞增多症
•先天性心脏病、 慢性肺部疾病、脱水
减低
•各种贫血、白血病 •产后、手术后、大 量失血
结果分析
测定值假性增高
稀释倍数不准确 红细胞未完全溶解 血浆中脂质或蛋白质量增加
废液处理
氰化钾试剂是剧毒品，测定后的废液 应首先以水稀释(1:1)，再加次氯酸钠 35ml/L，充分混匀，放置15小时以上，使 CN-氧化成CO2和N2挥发，再排入下水道， 废液不能直接与酸性溶液混合，避免产生 剧毒的氰氢酸气体
(HGB)
氰化高铁血红蛋白测定法
原理：
血液中除硫化红蛋白(SHb)外的各种血 红蛋白(如氧化血红蛋白、碳氧血红蛋白、 高铁血红蛋白或其他衍生物)均可被高铁氰 化钾氧化称高铁血红蛋白，再与氰离子(CN-) 结合，生成稳定的氰化高铁血红蛋白，氰化 高铁血红蛋白在波长540nm处有一个较宽的 吸收峰，它在540nm处的吸光度同它在溶液 中的浓度成正比，常规测定可以从HiCN参 考液制作的标准曲线上读取结果。