氰化高铁血红蛋白法

2013体检培训——血红蛋白

有气泡、悬浮物。（8）仪器开机后使用血红蛋白标准液检测，久放或搬动后须四
个浓度标准液校正。
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3. 仪器的质控（1）分光光度计的校正
氰化高铁血红蛋白标准液：含50、100、150、200g/L四种浓度，每支标准约10ml。
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表6 可见光分光光度计波长540nm，光径1.0cm 标准液允许误差
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日期
表5 血红蛋白平行样测定质量控制表
2005.3.22
学校
学
采血人崔丹
大兴榆垡中
编号血红蛋白值复测值
范围
是否合格
20
149
40
140
60
143
80
130
100
123
145
141.6<149<156.5
146
133<140<147
132
135.9<143<150.2
117
123.5<130<136.5
1 0 81 0 5 100(T)
95 92
1
2
3
5
6
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最大允许线警告线
靶值线
警告线最大允许线
4
次数
废液处理
原则：不允许直接排放到下水道，建议委托专业机构处理。
试剂含有氰化钾，使用处理不当可造成严重公害。氰化物必须在碱性及中性条件下，加入次氯酸钠进行二级分解。
医务人员使用时，应首先做好职业防护。废液处理，首先以水稀释（1:1）；然后，稀释后的废液按每升加入35ml次氯酸钠；充分混匀后敞开容器口，放置15小时以上，使CN-氧化成CO2和N2 挥发，或是水解成CO32-和NH4+，再排入下水道。

氰化高铁血红蛋白测定法讲解

0.200g 0.140g 0.5-1.0ml
上述成分分别溶于蒸馏水中混合，再加蒸馏水至1000ml混匀，试剂为淡黄色透明溶液，PH值在7.0-7.4。血红蛋白应在5min内完全转化为高铁血红蛋白。
▼贴标签：写明试剂名称、配制时间、有效期、贮存法。
检测步骤
制备标准曲线
将市售氰化高铁血红蛋白(HiCN)参考液稀释为四种浓度(200g/L、100g/L、 50g/L、25g/L)，然后以HiCN试剂调零，分别测定各自在540nm处的吸光度，以血红蛋白浓度(g/L)为横坐标、绘制标准曲线。
常规检测操作
⑴ 取小试管1支，加入HiCN试剂5ml；
⑵ 用清洁干燥微量吸管准确吸取末梢静脉血20ul；擦去管外余血，将吸管插入小试管中稀释液底部，轻轻将血放出，并吸取上清液，清洗吸管2-3次，混匀；
⑶ 静置5分钟后，测定待测标本在540nm下的吸光度；
⑷ 查标准曲线求得血红蛋白含量。
131-172 g/L 113-151 g/L 180-190 g/L 110-120 g/L 120-140 g/L
警告值(危机值) Hb＜50 g/L 或＞ 250 g/L
贫血程度划分
轻度 Hb 正常下限 —91 g/L 症状轻微；中度 Hb 90-60 g/L 体力劳动时心慌气短；重度 Hb 60-31 g/L 休息时感觉心慌气短；极重度 Hb ≤ 30 g/L 常合并贫血性心脏病。
氰化高铁血红蛋白测定法方法学评价
是国际血液学标准化委员会推荐的参考方法，该法操作简单、显色快、结果稳定可靠、读取吸光度后可直接定值等优点。其致命的弱点是氰化钾试剂中剧毒，使用管理不当会造成公害。
试剂
氰化高铁血红蛋白测定法试剂

血红蛋白测定方法

6.1 血红蛋白测定（氰化高铁法）消光系数法和标准曲线法任选其一测定血红蛋白。

１.6.1.1 光系数法１.6.1.1.1 原理血红蛋白(haemoglobin，Hb)被铁氰化钾氧化后生成高铁血红蛋白，再生氰离子结合形成氰化高铁血红蛋白（红色），氰化高铁血红蛋白（红色）极为稳定，在540nm波长下，毫克分子消光系数为44，据此，用分光光度法测其光密度，运用消光系数作血红蛋白的定量测定。

１.6.1.1.2 仪器721型或其它型号的分光光度比色计。

10微升量吸管。

１.6.1.1.3 试剂称取碳酸氢纳（）140毫克\铁氰化钾200毫克、氰化钾50毫克，用水溶解并稀释到1000毫升。

贮存於棕色试剂瓶内，在暗处或冰箱（+4℃）保存，至少可稳定数月到一年。

１.6.1.1.4 实验步骤１.6.1.1.4.1 试剂2.5毫升於5毫升带盖试管中，加入10微升血液，混匀后，放置15分钟。

１.6.1.1.4.2 选用0.5厘米光径比色杯，于540nm波长下，以试剂调零点，将所得样品管之光密度乘以73.6，即为血红蛋白之浓度（克%）。

计算公式如下：Ct=待测的血红蛋白（克%）浓度。

D 540 = 氰化高铁血红蛋白在540nm波长下测出的光密度。

HICN251=测定时血液的稀释倍数（血10微升加入试剂2.5毫升中）44=氰化高铁血红蛋白的毫克分子消光系数0.5=比色杯的光径10000=将（毫克/升）换算成（克%）的数字１.6.1.1.5 注意事项１.6.1.1.5.1 试剂不要放在聚乙烯瓶内，以免因氰离子与其反应而使试剂作用降低。

１.6.1.1.5.2 仪器因mM消光系数法完全依靠仪器的吸光度来计算,故此法要求所用的仪器性能要符合要求(如仪器的波长准确与否,以及灵敏度及线性等),否则将直接影响测定的结果。

1.6.1.1.5.3仪器在使用前最好以WHO规定的氰化高铁血红蛋白参考液校正后再使用。

参考液最好选用ICSH9国际血液学标准化委员会）确定的由RIV（莅国立公共卫生研究院）制定的氰化高铁血红蛋白参考液或上海医学化验所制血的氰化高铁血红蛋白标准液。

氰化高铁血红蛋白测定法

氰化高铁血红蛋白测定法氰化高铁血红蛋白测定法是一种常用的生物化学实验方法，用于测定血液中的血红蛋白含量。

本文将介绍这种测定方法的原理、步骤和应用。

一、原理氰化高铁血红蛋白测定法是基于血红蛋白与氰化高铁反应的原理。

血红蛋白是一种含有铁离子的蛋白质，与氰化高铁反应后形成氰合血红蛋白，其吸收波长为540 nm。

通过测定氰合血红蛋白的吸光度，可以间接测定血液中的血红蛋白含量。

二、步骤1. 血样处理：取适量的血液样品，离心分离出血浆，将血浆与氰化高铁试剂混合均匀。

2. 反应：将混合液放入分光光度计或分光比色计中，设定波长为540 nm，记录初始吸光度。

3. 添加还原剂：在反应过程中，加入适量的还原剂，如还原葡萄糖等，使氰合血红蛋白还原成血红蛋白。

4. 再次测定：记录还原后的吸光度。

5. 计算血红蛋白浓度：根据吸光度的变化，利用标准曲线或计算公式，计算出血液中的血红蛋白浓度。

三、应用氰化高铁血红蛋白测定法广泛应用于临床医学和生物研究中。

以下是该方法的几个常见应用：1. 临床诊断：血红蛋白是血液中的重要成分，其测定对于诊断贫血、血液病等疾病具有重要意义。

氰化高铁血红蛋白测定法可以快速、准确地测定血红蛋白含量，帮助医生进行诊断。

2. 药物研发：在药物研发过程中，需要评估药物对血红蛋白的影响。

氰化高铁血红蛋白测定法可以用于评估药物对血红蛋白的结合能力或解离能力，进而判断药物与血红蛋白的相互作用。

3. 营养评估：血红蛋白含量与身体的营养状况密切相关。

通过氰化高铁血红蛋白测定法，可以评估人体的血红蛋白含量，从而判断是否存在营养不良或缺铁性贫血等问题。

4. 动物实验：在动物实验中，血红蛋白的测定对于评估动物的健康状况和实验结果的可靠性至关重要。

氰化高铁血红蛋白测定法可以用于动物血液样品的血红蛋白浓度测定。

氰化高铁血红蛋白测定法是一种常用的测定血红蛋白含量的方法。

其原理简单，步骤明确，应用范围广泛。

在临床医学、药物研发、营养评估和动物实验等领域都有重要的应用价值。

生物材料溶血性标准化评价方法比较_溶血率法和氰化高铁血红蛋白法

生物材料溶血性标准化评价方法比较:溶血率法和氰化高铁血红蛋白法张伶俐　朱蔚精　谭言飞　屈树新　张兴栋△(四川大学分析测试中心生物学评价实验室,生物材料工程研究中心,成都　610064) 摘要　采用游离血红蛋白直接测定法即溶血率测定法(根据ISO TR7405)和氰化高铁血红蛋白法(根据ISO 1099324)测定了羟基磷灰石(陶瓷)和胶原(高分子材料)的溶血性能,结果提示这两种方法的结论是一致的,且氰化高铁血红蛋白法较血红蛋白直接测定法有灵敏、稳定、可比性好等优点,值得推广应用。

但它存在着一些标准中尚未明确规定的问题。

作者在大量试验和不违背标准原则的基础上提出了一些改进意见,使它更具有可操作性,以便于标准化评价生物材料的溶血性能。

关键词　生物学评价　血液相容性　溶血试验Com par ison between Hem olysis Percen tage M ea surem en t and Hem iglob i ncyan ide M ea surem en t for Standard iz i ng the Eva lua tion ofHem olytic Properties of B ioma ter i a lsZhang L i ngl i　Zhu W e ij i ng　Tan Yanfe i　Qu Shux i n　Zhang X i ngdong∃(B iolog ica l E va lua tion L aborota ry,A na ly sis and T esting Cen ter,E ng ineering R eseach Cen ter in B io m a teria ls,S ichuan U n iversity,Cheng d u　610064,Ch ina) Abstract　In th is study,tw o m ethods——the supernatant hemoglobin spectropho tom etry,i.e.hemo lysis percentage m easurem ent(acco rding to ISO TR7405)and the hem iglobincyanide m easurem ent(acco rding to ISO 1099324)——w ere used to assay the hemo lytic p roperties of hydroxyapatite(bi oceram ics)and co llagen(po lym er).T he results show ed that the conclusi ons draw n from using the tw o m ethods w ere basically consistent,and the lat2 ter w as mo re sensitive,stable and comparable.How ever,som e of the p rocedures in the hem iglobincyanide m ethod w ere no t defined in details.So based on our experi m ents w e have offered som e suggesti ons and i m p rovem ents, w h ich do no t deviate from ISO and A STM standards,fo r h iher p racticability of usig it in standardizing the evalua2 ti on of the hemo lytic p roperties of bi om aterials.H em iglobincyanide m easurem ent is w o rthy of w ider app licati on.Key words　B i o logical evaluati on H emocompatibility H emo lysis test1　引　言与血液直接或间接接触的生物材料必须评价它的血液相容性。

氰化高铁血红蛋白测定法

氰化高铁血红蛋白测定法氰化高铁血红蛋白测定法是一种常用的血红蛋白测定方法，通过测定血红蛋白在氰化高铁存在下的吸光度变化，可以定量测定血液中的血红蛋白含量。

本文将详细介绍氰化高铁血红蛋白测定法的原理、步骤、优缺点以及应用等方面内容。

一、原理：氰化高铁血红蛋白测定法是基于血红蛋白与氰化高铁形成氰化高铁血红蛋白（MetHbFe(CN)5）的特点进行测定的。

当血液中存在氰化高铁时，血红蛋白与氰化高铁发生反应，生成氰化高铁血红蛋白，其吸收峰位在630 nm处。

血红蛋白的浓度可以通过测定吸光度来推算。

二、步骤：1. 准备工作：配制所需试剂，包括含氰化高铁的溶液、去离子水等。

2. 标定溶液的制备：用血红蛋白标准溶液制备出不同浓度的标定溶液。

3. 测定样品的制备：取一定量的待测样品，加入适量的氰化高铁溶液进行反应。

4. 吸光度测定：使用分光光度计等仪器，测定标定溶液和待测样品的吸光度。

5. 数据处理：根据吸光度与血红蛋白浓度的关系，计算出待测样品中血红蛋白的浓度。

三、优缺点：1. 优点：（1）灵敏度高：氰化高铁血红蛋白测定法对血红蛋白的检测灵敏度较高，可以提供准确的浓度结果。

（2）操作简便：该方法的操作步骤相对简单，对实验条件的要求较低，适用于临床实验室快速测定血液样品中的血红蛋白含量。

（3）广泛应用：氰化高铁血红蛋白测定法被广泛应用于临床实验室、医疗机构以及科研领域，能够快速准确地测定血液中的血红蛋白含量。

2. 缺点：（1）有毒性：氰化高铁具有一定的毒性，需特别注意在实验过程中的安全操作，避免接触和摄入。

（2）受干扰较大：在应用过程中，有些物质如某些药物、代谢产物等可能会影响测定结果，造成测定误差。

四、应用：氰化高铁血红蛋白测定法广泛应用于临床和研究领域，主要用于以下方面：1. 临床检测：在医疗机构中，血红蛋白含量的测定对于诊断和治疗某些疾病至关重要。

通过氰化高铁血红蛋白测定法，可以快速准确地测定血液中的血红蛋白含量，以辅助疾病的诊断和治疗过程。

营养学实验指导知识资料3

Word -可编辑实验二血红蛋白的测定（氰化法）【原理】血红蛋白在铁氰化钾和氰化钾的作用下，生成极为稳定的氰化高铁血红蛋白（红色），其色彩深浅与血红蛋白的含量成正比。

氰化高铁血红蛋白在540nm 波长下，毫克分子消光系数为44，据此，用分光光度法测其光密度，运用消光系数作血红蛋白的定量测定。

其化学反应式如下：血红蛋白铁氰化钾高铁血红蛋白氰化钾氰化高铁血红蛋白【仪器】1．10μl 血色素吸管（或定量毛细管）。

2．5ml 或10ml 带盖试管。

3．721或72型分光光度计。

【试剂】称取碳酸氢钠140mg 、铁氰化钾200mg 、氰化钾50mg ，用蒸馏水溶解并稀释到1000ml 。

储藏于棕色试剂瓶内，在4℃冰箱保存，至少可稳定数月到一年。

【操作步骤】1．汲取2.5ml 试剂于5ml 带盖试管中，加10μl 入血液，混匀后放置15分钟。

2．选用0.5cm 光径比色杯，于540nm 波长下，以试剂调节仪器零点，测定各样品管之光密度，将所测得之光密度乘以73.6即为血红蛋白之含量（g/100ml ）。

计算公式如下：C t =待测之血红蛋白含量（g%）D 540HiC N =在540nm 波长下测得之氰化高铁血红蛋白之光密度251=测定时血液的稀释倍数（血10μl 参加试剂2.5ml 中）44=氰化高铁血红蛋白的毫克分子消光系数。

Ct = = D 540HiC N ×73.6 4410000×6D 540HiC N千里之行，始于足下0.5=比色杯光径64458=血红蛋白的分子量10000=将mg/L换算成g/100ml的数字【评价】【附】1．本法为国际血液学标准化委员会（ICSH）所推荐，具有操作简便、不需要标准、结果确切可靠等优点。

2．应用本法举行血红蛋白的测定，所用分光光度计的波长必须事先经过校正。

3．实验条件改变，如更换了光电池或灯炮、电压不稳、试剂换了批号等等均会引起光密度的改变。

【职称考试葵花宝典】：一名检验师的考试笔记（临检篇）

【职称考试葵花宝典】：一名检验师的考试笔记（临检篇）罗江彭虞城县人民医院检验科1．肝素多为肝素钾盐和钠盐，通过加强抗凝血酶III灭活丝氨酸蛋白酶的作用，阻止凝血酶的形成，进而阻止血小板的聚集。

肝素是红细胞渗透脆性实验的理想抗凝剂，也是动脉血气分析常用的抗凝剂。

2．枸橼酸盐能与血液中钙离子结合形成螯合物，抗凝作用不如其他抗凝剂。

是输血保养液的成分。

3．瑞氏染液中的缓冲液是磷酸盐，目的是缓冲溶液PH值。

瑞氏染液的最适PH值是6.4-6.8。

4．造血干细胞到网织红细胞需要72小时。

网织红到成熟红细胞需要48小时。

离体血液中的网织红细胞仍然会继续成熟，所以网织红计数应及时测定。

衰老的红细胞主要在肝脾处破坏。

5．健康成年人周围血液中，除网织红细胞外，均为正常形态的成熟细胞。

6．泪滴形红细胞，骨髓纤维化时增多，常作为诊断指标之一。

7．镰形红细胞:红细胞所含的异常血红蛋白S（HbS），在缺氧环境中溶解度降低，形成长形或尖形的结晶体，使红细胞膜变形，形成镰形。

8．裂片型红细胞是红细胞通过管腔狭小的病变微血管或微血栓的纤维蛋白丝切割所致。

微血管病性溶血性贫血，DIC时增多。

9．嗜多色性红细胞呈淡灰蓝色和灰红色。

是因为胞质内残存的少量嗜碱性RNA与嗜酸性血红蛋白同时存在，因而呈现嗜多色性。

10．豪焦小体又称为染色质小体。

暗紫红色圆形小体，为核碎裂和溶解后所剩余的部分最常见于巨幼细胞性贫血。

11．中性粒细胞的胞质内颗粒分为嗜天青颗粒和特殊颗粒，嗜天青颗粒较少，约占20%属于溶酶体。

特殊颗粒数量较多，约占80%。

嗜酸性粒细胞中的嗜酸性颗粒属于溶酶体。

嗜碱性粒细胞中的嗜碱性颗粒属于肝素和组胺，肝素具有抗凝作用，组胺参与过敏反应。

12．严重感染及大面积烧伤等情况下，中性粒细胞的胞质中出现比平常中性颗粒大，大小不均，随机分布的紫黑色和深紫褐色颗粒称为中毒颗粒。

13.正常的中性分叶核粒细胞以2-3叶多见，杆状较少，两者比值约为13:1。

血红蛋白测定方法

6.1 血红蛋白测定（氰化高铁法）消光系数法和标准曲线法任选其一测定血红蛋白。

１.6.1.1 光系数法１.6.1.1.1 原理血红蛋白(haemoglobin，Hb)被铁氰化钾氧化后生成高铁血红蛋白，再生氰离子结合形成氰化高铁血红蛋白（红色），氰化高铁血红蛋白（红色）极为稳定，在540nm波长下，毫克分子消光系数为44，据此，用分光光度法测其光密度，运用消光系数作血红蛋白的定量测定。

１.6.1.1.2 仪器721型或其它型号的分光光度比色计。

10微升量吸管。

１.6.1.1.3 试剂称取碳酸氢纳（）140毫克\铁氰化钾200毫克、氰化钾50毫克，用水溶解并稀释到1000毫升。

贮存於棕色试剂瓶内，在暗处或冰箱（+4℃）保存，至少可稳定数月到一年。

１.6.1.1.4 实验步骤１.6.1.1.4.1 试剂2.5毫升於5毫升带盖试管中，加入10微升血液，混匀后，放置15分钟。

１.6.1.1.4.2 选用0.5厘米光径比色杯，于540nm波长下，以试剂调零点，将所得样品管之光密度乘以73.6，即为血红蛋白之浓度（克%）。

计算公式如下：Ct=待测的血红蛋白（克%）浓度。

D 540 = 氰化高铁血红蛋白在540nm波长下测出的光密度。

HICN251=测定时血液的稀释倍数（血10微升加入试剂2.5毫升中）44=氰化高铁血红蛋白的毫克分子消光系数0.5=比色杯的光径10000=将（毫克/升）换算成（克%）的数字１.6.1.1.5 注意事项１.6.1.1.5.1 试剂不要放在聚乙烯瓶内，以免因氰离子与其反应而使试剂作用降低。

１.6.1.1.5.2 仪器因mM消光系数法完全依靠仪器的吸光度来计算,故此法要求所用的仪器性能要符合要求(如仪器的波长准确与否,以及灵敏度及线性等),否则将直接影响测定的结果。

1.6.1.1.5.3仪器在使用前最好以WHO规定的氰化高铁血红蛋白参考液校正后再使用。

参考液最好选用ICSH9国际血液学标准化委员会）确定的由RIV（莅国立公共卫生研究院）制定的氰化高铁血红蛋白参考液或上海医学化验所制血的氰化高铁血红蛋白标准液。

氰化高铁血红蛋白测定法试剂

氰化高铁血红蛋白测定法试剂氰化高铁血红蛋白测定法是一种常用的生化实验方法，用于分析和测定血液中的血红蛋白含量。

本文将全面介绍该测定法的原理、操作步骤及实验结果的解读，以及实验中需要注意的事项。

氰化高铁血红蛋白测定法的原理是利用氰化高铁与血红蛋白形成氰合血红蛋白，通过测定其最大吸收波长处的吸光度来确定血红蛋白的浓度。

这个测定法在实验室应用广泛，特别适用于快速分析大量样本。

操作步骤如下：1. 准备试剂：将氰化高铁溶液定容至10ml，并使用洗瓶洗净可塑性吸光管。

2. 取1ml待测血清，加入两滴牛磺酸溶液，充分混合。

3. 加入2ml的氰化高铁溶液，尽量避免溶液溢出或产生气泡。

4. 轻轻倾斜吸光管，充分混合后，放置在室温下孵育5分钟。

5. 将孵育后的吸光管置于1cm光程比色皿中，切不可触摸吸光池。

6. 使用5% NaOH溶液分别置于两个比色皿中，作为空白对照。

7. 使用比色计在最大吸收波长（540nm）测定各组的吸光度值。

8. 计算血红蛋白浓度。

根据标定曲线和吸光度值的关系，描绘标定曲线并用所测吸光度值参照标定曲线，查得相应血红蛋白浓度。

实验结果的解读需要注意以下几个方面：1. 血红蛋白浓度的计算：在标定曲线上查找所测吸光度值对应的血红蛋白浓度，可得到最终结果。

2. 结果的参考范围：血红蛋白浓度的正常范围在男性为130～175g/L，女性为115～155g/L。

3. 实验误差的排除：实验过程中，应严格控制各实验条件的一致性，避免外界因素对实验结果的影响。

同时，在同一天内重复检测样本可以提高实验结果的可靠性。

需要注意的事项：1. 操作安全：氰化高铁溶液有毒，操作时应佩戴手套和护目镜，并避免接触皮肤和吸入气体。

2. 实验条件：实验室应具备较好的通风条件，同时实验过程中，避免光线、震动和干扰。

3. 校准和质控：每天开始实验前进行仪器校准，并使用已知浓度的标准品进行质控，以确保实验结果的准确性和可靠性。

综上所述，氰化高铁血红蛋白测定法是一种简便、快速、准确的血红蛋白测定方法。

氰化高铁血红蛋白测定法对血红蛋白测定方法及临床意义

氰化高铁血红蛋白测定法对血红蛋白测定方法及临床意义张亚男【摘要】目的探讨血红蛋白的测定方法及临床意义.方法选取60例住院患者标本,采取氰化高铁血红蛋白测定法对红蛋白测定分析方法进行分析.结果它操作简便,结果稳定可靠.结论适用于真性红细胞增多症,肺原性心脏病,脱水等.病理性减少各种贫血,白血病,大量失血后等.【期刊名称】《中国现代药物应用》【年(卷),期】2013(007)011【总页数】2页(P48-49)【关键词】氰化高铁血红蛋白测定法;血红蛋白;临床意义【作者】张亚男【作者单位】150000,黑龙江省医院【正文语种】中文血红蛋白是由珠蛋白和亚铁血红素组成的结合蛋白质。

血红蛋白主要存在于红细胞中，在正常生理状态下，人血浆中仅有微量的血红蛋白(20～40 mg/L)，与触珠蛋白形成Hb-Hp复合物，在单核巨噬细胞系统代谢，不能从尿中排出［1］。

氰化高铁血红蛋白(HiCN)法为国际血液标准化委员会(ICSH)推荐，其最大吸收峰在540nm。

现就氰化高铁血红蛋白(HiCN)法及临床意义分析如下。

1 资料与方法1.1 一般资料住院患者60份标本。

其中男30例，女30例，年龄19～65岁，平均41岁。

1.2 方法氰化高铁血红蛋白(HiCN)法。

2 操作及注意事项2.1 操作血红蛋白转化液WHO和我国卫生部临床检验中心推荐。

分类光度计移液管(5 ml)、微量吸管(20 ml)、试管等。

HiCN转化液：氰化钾(KCN)0.05 g；高铁氰化钾［K3Fe3，(CN)6］0.2 g；无水磷酸二氢钾(KH2PO4)0.14 g；TritoX-100或其他非离子表面活性剂1.0 ml蒸馏水加至1000 ml。

取静脉或手指血20μl 加入5 ml Hb转化液中，混匀，常温下放置5 min后，以转化液调零点，与人540nm(光径1 cm)测量吸光度A。

如果所用的分光光度计是经过校准的，则可利用HiCN的毫摩尔吸光系数和侧得的A值计算Hb浓度。

血红蛋白测定

（三）方法学评价
HiCN测定法是WHO和国际血液学标准化委员会ICSH推荐的参考方法，由于HiCN 试剂含有剧毒的氰化钾，各国均相继研发出不含氰化钾的血红蛋白测定方法，有的测定法已用于血液分析仪，但其标准应溯源到 HiCN量值。
血红蛋白测定的方法学评价
HiCN转化液的作用与评价
（四）质量保证
十二烷基硫酸钠血红蛋白（SDS-Hb）法： SDS
作为一种阴离子表面活性剂，具有轻度氧化作用。血液中除 SHb以外的所有血红蛋白均可与低浓度的SDS作用，亚铁血红素被氧化成稳定的棕红色高铁血红素样复合物（SDSHb），最大吸收峰在538nm。
（二）操作步骤
1、氰化高铁血红蛋白测定法（直接定量测定法）
在某些贫血时，特别是某些红细胞内血红蛋白浓度改变的贫血，红细胞和血红蛋白减少程度可不一致。如缺铁性贫血，红细胞与血红蛋白降低的程度常不平行，血红蛋白的降低比红细胞明显。因此，同时测定红细胞和血红蛋白，对诊断更有意义。
44000
浓度抗凝血分别用
HiCN 法及本法测定每份血液的血红蛋白浓度和吸光度，以 HiCN 法测得的血红蛋白浓度为横坐标，本法测得的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。 ü 测定：取应用液5ml于试管中，加入全血20μl充分混匀。5min后置538nm下以应用液调零，测定其吸光度，查标准曲线即可得出血红蛋白浓度。
ü 准备转化液：取一试管，加入5mlHiCN转化液。 ü 采血与转化：采集全血20μl，加到盛有转化液的
试管底部，与转化液充分混匀，静置5min。 ü 测定吸光度：用符合WHO标准的分光光度计，在
波长540nm处、光径为1.000cm、以HiCN试剂调零，测定标本的吸光度（A）。 ü 计算： Hb(g / L) A 64458 251 A 367.7

医院检验科面试

1.氰化高铁血红蛋白法测定血红蛋白的主要优点是什么?有什么缺点?【参考答案】氰化高铁血红蛋白法测定血红蛋白的主要优点是操作简便，结果稳定可靠，试剂容易保存，能测定除SHb以外的所有血红蛋白，并易于建立质量控制。

主要缺点是血红蛋白转化液中，KCN为剧毒试剂，使用时应严加防范，严禁用口吸转化液，比色废液应妥善处理。

2.简述血小板的病理性变化【参考答案】(1)血小板减少：①血小板生成减少，如急性白血病、再生障碍性贫血、某些药物影响等;②血小板破坏过多，如免疫性或继发性血小板减少性紫癜、脾功能亢进等;③血小板消耗过多，如弥散性血管内凝血、血栓性血小板减少性紫癜等。

(2)血小板增多：常见于慢性粒细胞性白血病、原发性血小板增多症、真性红细胞增多症、急性化脓性感染、急性出血后及脾切除手术后等。

简记为：血小板病理性变化分为减少与增多;减少有生成减少、破坏过多以及消耗过多;生成减少急性白血病再障，及药物影响;破坏过多继发性减少性紫癜和脾亢，MIC及血栓性减少性紫癜。

3.红细胞计数的临床意义?【参考答案】生理性增多：见于机体缺氧如新生儿、高原居民、剧烈劳动、恐惧、冷水浴等。

相对性增多见于连续剧烈呕吐、大面积烧伤、严重腹泻、大量出汗等;另见于慢性肾上腺皮质功能减退、尿崩症、甲状腺功能亢进等。

生理性减低：主要见于生理性贫血，造血功能衰退的老年人、血容量增加如孕妇、长期饮酒、生长发育造血原料相对不足如婴儿。

病理性增多：由于促红细胞生成素代偿性增多所致，见于严重的先天性及后天性心肺疾病和血管畸形，如法洛四联症、紫绀型先天性心脏病、阻塞性肺气肿、肺源性心脏病、肺动-静脉瘘以及携氧能力低的异常血红蛋白病等。

病理性减少：(1)红细胞生成减少所致的贫血：1)骨髓造血功能衰竭：再生障碍性贫血、骨髓纤维化等伴发的贫血。

2)因造血物质缺乏或利用障碍引起的贫血：如缺铁性贫血、铁粒幼细胞性贫血、叶酸及维生素B12缺乏所致的巨幼细胞性贫血。

(2)因红细胞膜、酶遗传性的缺陷或外来因素造成红细胞破坏过多导致的贫血，如遗传性球形红细胞增多症、地中海性贫血、阵发性睡眠性血红蛋白尿、异常血红蛋白病、免疫性溶血性贫血、心脏体外循环的大手术及一些化学、生物因素等引起的溶血性贫血。

氰化高铁血红蛋白测定法简介

氰化高铁血红蛋白测定法简介目录•1拼音•2英文参考•3概述•4氰化高铁血红蛋白测定法的别名•5分类•6取材•7氰化高铁血红蛋白测定法的原理•8试剂•9操作方法•10正常值•11化验结果临床意义•12附注•13相关疾病1拼音qíng huà gāo tiě xuè hóng dàn bái cè dìng fǎ2英文参考cyanmethemoglobin determination method3概述Hb测定大致分为：①根据Hb分子组成，测定总Hb法（全血铁法）；②根据血液物理特性测Hb（比重法、折射仪法）；③根据Hb 与O2可逆性结合的特性测Hb（血气分折法）；④根据Hb衍生物光谱特点进行的定量测定等4大类，其中有些方法简单易行，而得到长期广泛应用（如沙利法），但随着技术的进步和研究的深入，缺点日渐显著，逐渐被淘汰。

为统一Hb测定方法，1966年国际血液学标准化委员会推荐氰化高铁Hb测定法作为Hb测定标准法。

1978年国际临床化学联合会和世界病理学会联合发表的国际性文件中重申了HiCN 法。

4氰化高铁血红蛋白测定法的别名氰化高铁Hb测定法5分类临床血液检查 > 红细胞6取材血液7氰化高铁血红蛋白测定法的原理血液在Hb转化液中溶血后，除SHb外各种Hb均可被高铁氰化钾氧化为高铁Hb再与CN结合生成稳定的棕红色氰化高铁Hb。

HiCN 最*** 峰在540nm,最小吸收峰为504nm。

特定标准条件下，毫摩尔消光系数为44L·mmol－1·cm。

因此，根据标本的吸光度，即可测定Hb浓度。

在没有符合WHO标准的分光光度计的条件下，亦可用HiCN参考液制标准曲线，或计算出换算常数，间接计算Hb浓度（g/L）。

HiCN的消光系数是44mmol－1·cm－1，可根据下列公式进行计算Hb浓度：A/44×64458（mg）/1000×251＝A×367.7＝Hb（g/L）式中A是在540nm处HiCN吸光度，64458mg是Hb的毫克分子量，1000是将毫克转换为克，251是实验时血液的稀释倍数。

生物材料溶血性标准化评价方法比较_溶血率法和氰化高铁血红蛋白法

生物材料溶血性标准化评价方法比较:溶血率法和氰化高铁血红蛋白法张伶俐　朱蔚精　谭言飞　屈树新　张兴栋△(四川大学分析测试中心生物学评价实验室,生物材料工程研究中心,成都　610064) 摘要　采用游离血红蛋白直接测定法即溶血率测定法(根据ISO TR7405)和氰化高铁血红蛋白法(根据ISO 1099324)测定了羟基磷灰石(陶瓷)和胶原(高分子材料)的溶血性能,结果提示这两种方法的结论是一致的,且氰化高铁血红蛋白法较血红蛋白直接测定法有灵敏、稳定、可比性好等优点,值得推广应用。

但它存在着一些标准中尚未明确规定的问题。

作者在大量试验和不违背标准原则的基础上提出了一些改进意见,使它更具有可操作性,以便于标准化评价生物材料的溶血性能。

关键词　生物学评价　血液相容性　溶血试验Com par ison between Hem olysis Percen tage M ea surem en t and Hem iglob i ncyan ide M ea surem en t for Standard iz i ng the Eva lua tion ofHem olytic Properties of B ioma ter i a lsZhang L i ngl i　Zhu W e ij i ng　Tan Yanfe i　Qu Shux i n　Zhang X i ngdong∃(B iolog ica l E va lua tion L aborota ry,A na ly sis and T esting Cen ter,E ng ineering R eseach Cen ter in B io m a teria ls,S ichuan U n iversity,Cheng d u　610064,Ch ina) Abstract　In th is study,tw o m ethods——the supernatant hemoglobin spectropho tom etry,i.e.hemo lysis percentage m easurem ent(acco rding to ISO TR7405)and the hem iglobincyanide m easurem ent(acco rding to ISO 1099324)——w ere used to assay the hemo lytic p roperties of hydroxyapatite(bi oceram ics)and co llagen(po lym er).T he results show ed that the conclusi ons draw n from using the tw o m ethods w ere basically consistent,and the lat2 ter w as mo re sensitive,stable and comparable.How ever,som e of the p rocedures in the hem iglobincyanide m ethod w ere no t defined in details.So based on our experi m ents w e have offered som e suggesti ons and i m p rovem ents, w h ich do no t deviate from ISO and A STM standards,fo r h iher p racticability of usig it in standardizing the evalua2 ti on of the hemo lytic p roperties of bi om aterials.H em iglobincyanide m easurem ent is w o rthy of w ider app licati on.Key words　B i o logical evaluati on H emocompatibility H emo lysis test1　引　言与血液直接或间接接触的生物材料必须评价它的血液相容性。

氰化高铁血红蛋白测定法

氰化高铁血红蛋白测定法氰化高铁血红蛋白测定法是一种常用的生物化学分析方法，用于测定样品中的血红蛋白含量。

血红蛋白是人和动物体内的重要蛋白质，它负责将氧气从肺部输送到全身各个组织。

血红蛋白含量的测定对于诊断贫血、血液病等疾病具有重要意义。

下面将详细介绍氰化高铁血红蛋白测定法的原理、步骤和应用。

一、原理氰化高铁血红蛋白测定法通过将血红蛋白与氰化高铁反应生成氰化高铁血红蛋白，利用其在特定波长下的吸光度来测定血红蛋白的含量。

具体原理如下：1. 血红蛋白与氰化高铁反应生成氰化高铁血红蛋白：血红蛋白中的亚铁离子与氰化高铁反应生成氰化高铁血红蛋白，反应方程式如下：Hb + [Fe(CN)6]3- → Hb[Fe(CN)6]2- + CN-2. 氰化高铁血红蛋白在特定波长下有较大的吸光度：氰化高铁血红蛋白在540nm波长处具有极大吸光度，利用分光光度计可以测定其吸光度值。

二、步骤氰化高铁血红蛋白测定法的具体步骤如下：1. 样品制备：将待测样品（例如血液、血浆等）取适量加入离心管中。

2. 氰化高铁处理：向样品中加入适量的氰化高铁试剂，充分混匀后，置于室温下反应一定时间。

3. 反应停止：加入适量的醋酸溶液，使反应停止。

4. 分光光度计测定：将反应后的样品溶液转移至分光光度计比色皿中，设置波长为540nm，测定吸光度值。

5. 血红蛋白含量计算：根据标准曲线，将吸光度值转换为血红蛋白的含量。

三、应用氰化高铁血红蛋白测定法广泛应用于医学、生物化学等领域。

其主要应用包括以下几个方面：1. 临床诊断：通过测定血红蛋白的含量，可以判断患者是否存在贫血等疾病。

贫血是指血液中红细胞或血红蛋白含量低于正常范围的一类疾病，通过测定血红蛋白含量可以帮助医生进行贫血的早期诊断和治疗。

2. 药物研究：氰化高铁血红蛋白测定法可以用于评估药物对血红蛋白的影响。

一些药物可能会影响血红蛋白的合成或稳定性，通过测定血红蛋白含量可以评估药物的毒副作用和治疗效果。

氰化高铁法

氰化高铁法第一篇：氰化高铁法原理:血红蛋白在高铁氰化钾和氰化钾的作用下,生成极为稳定的氰化高铁血红蛋白(红色),其颜色深浅与血红蛋白的含量成正比。

氰化高铁血红蛋白在540 nm 波长下,毫克分子消光系数为44 ,据此,用分光光度法测其吸光度,运用消光系数作血红蛋白的定量测定,其化学反应式如下: 血红蛋白——铁氰化钾——高铁血红蛋白——氰化钾——氰化高铁血红蛋白(红色)试剂: 碳酸氢钠(NaHCO3)140 mg ,铁氰化钾[ K3 Fe(CN)6 ]200 mg ,氰化钾(KCN)50 mg ,均为分析纯。

用水溶解并稀释到1 000 mg ,贮存于棕色试剂瓶内,在暗处或冰箱(4 ℃)保存,至少可稳定数月到1 年。

操作步骤: ①取试剂2.5 mL 于5 mL 带盖试管中加入10μL 血液,混匀后,放置15 min。

②选用0.5 cm 光径比色杯,于540 mm 波长下,以试剂调零点,将所得样品管之吸光度乘以73.6 ,即为血红蛋白之浓度。

计算公式如下: Ct =(D540HiCN ×251/ 44 ×0.5)×64 458/ 10 000 = 73.6 ×吸光度。

Ct 为待测的血红蛋白浓度。

D540HiCN为氰化高铁血红蛋白在540 mm 波长下测出的吸光度。

251 为测定时血液的稀释倍数(10μL 血加入215 mL 试剂中)。

44 为氰化高铁血红蛋白的毫克分子消光系数。

0.5 为比色杯的光径。

64 458 为血红蛋白的相对分子质量。

第二篇：氰化技术主管竞聘稿做氰化技术的排头兵尊敬的各位领导、各位评委老师您们好：我叫XXX，我竞聘的岗位是青海山金氰冶技术主管。

我将从个人简介、任职优势、工作思路几方面进行竞聘演讲，希望能得到大家的支持。

一、个人简介1．工作经历二、我的任职优势1、经验使我对氰化技术工作得心应手对于氰化、氧化系统，我做过每个工段操作工。

二十多年一路干过来，我掌握的技术都是实打实的，流程哪个环节出现问题、哪个设备出现异常会带来什么后果，我都能在第一时间找出原因和解决办法，也由于这个原因，来此之前任莱州市治炼厂氰化厂副帮长。

酶标仪干试剂氰化高铁法测定血红蛋白的探讨

酶标仪干试剂氰化高铁法测定血红蛋白的探讨
王华忠;张新;刘琳琳;蒲晓允
【期刊名称】《重庆医学》
【年(卷),期】2007(036)004
【摘要】目的建立一种在酶标仪上用干试剂测定血液血红蛋白的检测方法.方法将氰化高铁血红蛋白法的试剂干燥在酶标板的微孔内,封存备用.测定时将水溶血后的样品加入微孔,混匀,10min后测定OD值.结果血红蛋白在25～175g/L内有良好的线性关系(r=0.998 3),结果与全自动血液分析仪SE-9000具有较好的一致性,显色后的吸光度值2h内无明显变化.结论酶标仪干试剂法测定血红蛋白结果准确可靠,测定过程简便,是一种快速测定血红蛋白的好方法.
【总页数】2页(P338,340)
【作者】王华忠;张新;刘琳琳;蒲晓允
【作者单位】第三军医大学新桥医院检验科,重庆,400037;第三军医大学新桥医院检验科,重庆,400037;第三军医大学新桥医院检验科,重庆,400037;第三军医大学新桥医院检验科,重庆,400037
【正文语种】中文
【中图分类】R446.1
【相关文献】
1.酶标仪干试剂法测定钾离子的探讨 [J], 傅灵媛;李强;吴杰红;蒲晓允
2.全自动加样仪和酶标仪氰化高铁血红蛋白比色法测定的探讨 [J], 叶贤林;马兰;王
薇;邹红岩
3.氰化高铁血红蛋白试剂废液处理的探讨 [J], 张建中
4.BS622型血红蛋白计与氰化高铁标准法测定血红蛋白的比较 [J], 毛江洪;王荣如;罗桂英
5.氰化高铁法测定血红蛋白应注意的几个问题 [J], 葛荣正;李洪东;李秀兰;尹爱侠因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

测定血红蛋白含量的两种方法比较

测定血红蛋白含量的两种方法比较
赵显峰;荫士安
【期刊名称】《卫生研究》
【年(卷),期】2003(32)5
【摘要】为了解氰化高铁法和HemoCue法测定血红蛋白含量的可比性 ,应用两
种方法测定了 2 80名 3～ 5岁儿童的末稍血和 71名 12～ 13岁儿童的静脉血血红蛋白含量 ,并测定了质控血样的血红蛋白含量。

结果显示 ,两种方法测定末稍血
和静脉血血红蛋白含量结果具有较好的相关关系 ,HemoCue法较氰化高铁法结果偏高 ,末稍血高(18 4± 6 1)g L ,静脉血高(3 4± 4 4 )g L。

结果提示在研究人群血红蛋白含量时,氰化高铁法较为可靠;由于HemoCue法具有操作简便、易于携带、不需复杂的培训等优点 ,在应用氰化高铁法有困难时可以使用。

【总页数】3页(P495-497)
【关键词】血红蛋白;氰化高铁法;HemoCue法;含量测定
【作者】赵显峰;荫士安
【作者单位】中国疾病预防控制中心营养与食品安全所
【正文语种】中文
【中图分类】R556.3;R446.11
【相关文献】
1.糖化血红蛋白两种测定方法的比较 [J], 曾文;曾丽;郝彦强;陈柳青;连炬飞
2.两种糖化血红蛋白测定方法的比较 [J], 石秀芳;昝丽娜;孙峰
3.两种不同方法测定糖化血红蛋白的比较 [J], 邱升强
4.两种检测仪器测定血红蛋白含量比较 [J], 李琼珍;钟国仁;郑义凤
5.测定血红蛋白A_2的两种方法的比较 [J], 刘小娟;王泓;张霞
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。