实验九糖酵解中间产物的鉴定
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生化实验室(11)——糖酵解中间产物的鉴定
实验的原理:利用碘乙酸对糖酵解过程中3-磷酸甘油醛脱氢酶的抑制作用,使3-磷激甘油醛不再向前变化而积累。硫酸肼作为稳定剂,用来保护3-磷酸甘油醛使不自发分解。然后用2,4-二硝基苯肼与3-磷酸甘油醛在碱性条件下形成2,4-二硝基苯肼-丙糖的棕色复合物,其棕色程度与3-磷酸甘油醛含量成正比。
产生糖酵解,当然需要生物了,我们用了酵母。
三支试管,1号管:加入了三氯醋酸,破坏了全部的酶,所以不可进行糖酵解;2号管,放进碘乙酸,对糖酵解过程中3-磷酸甘油醛脱氢酶的起抑制作用,3号管,什么都不加。放进37℃中,然后就可以看到,3号管发酵得最爽。泡泡是CO
。
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然后为了验证“3-磷酸甘油醛不再向前变化而积累”,所以我们再对2、3号管进行处理。步骤不说了,看最后的结果,说明了2号管的3-磷酸甘油醛最多,也就是证明了碘乙酸的抑制剂作用。
做这些实验不是为了实验,而是为了学到东西;通过这个实验,我们得到了两个很爽的想法:
1.碘乙酸的抑制剂作用;
2.原来在糖酵解的分解循环中,中间产物有3-磷酸甘油醛;
这对于我们学习与研究糖酵解很有益处!