血小板稀释液(计数液) 使用说明
实验一红细胞计数
实验一红细胞计数一、实验目的:掌握红细胞计数原理及技术。
二、实验原理:用等渗稀释液将血液稀释一定倍数,充入计数池中,于显微镜下计数一定体积内的红细胞数,经过换算示得每升血液内的红细胞数。
三、实验器材及试剂:显微镜、血红蛋白吸管、计数板、盖玻片、生理盐水。
四、实验操作:1、取试管1支,加稀释液3.98ml或1.99ml。
2、用清洁干燥的微量吸管准确吸取末梢血10微升。
3、擦去管尖外部余血、轻轻注入红细胞稀释液底部,再吸取上层稀释液清洗吸管2-3次,立即摇匀。
4、将计数池与盖玻片用软布料擦净,将盖玻片覆盖于计数池上。
5、用吸管吸取混匀的红细胞悬液,充入计数池中。
6、静止2-3分钟,待经红细胞下沉后,用高倍镜或低倍镜计数中央大方格内四角和正中五个中方格内的红细胞数。
五、计算N(五个中方格内RBC数)×5×10×106×200=N×1012个/升×5:表示5个中方格内RBC数换算为1个大方格内RBC数× 10:1个大方格容积、0.1ul、换算为1ul内RBC数× 106:1ul换算为1升内红细胞数× 200:稀释倍数六、正常参考值正常参考值:成年男性:4.00-5.50×1012/升成年女性:3.50-5.00×1012/升新生儿: 6.00-7.00×1012/升实验二血红蛋白测定一、实验目的:掌握氰化高铁血红蛋白比色法原理及技术。
二、实验原理:血液在血红蛋白转化液中溶血后,除SHb外各种血红蛋白可被高铁氰化钾氧化成高铁血红蛋白,再与CNˉ结合生成稳定的棕红色氰化高铁血红蛋(HicN)。
HicN最大吸收峰540nm,最小吸收波谷504nm,在特定的条件下,毫摩尔消光系数为44L.mmol-1 .cm-1 ,因此根据标本的吸光度,即求得血红蛋白浓度。
三、实验操作:1、取指血20ul,加到5ml血红蛋白转化液中,混匀,静止5分钟。
临床检验技术操作手册
第一节临床血液学检验血常规检查【标本】抗凝静脉血(有些仪器也可用末梢血)。
【方法】血液细胞自动分析仪测定法。
【试剂】血液细胞自动分析仪配套试剂。
【操作】详见自己实验室血液细胞自动分析仪使用手册。
【附注】1. 血常规包括白细胞计数及分类、红细胞计数、血红蛋白浓度、红细胞比积、血小板计数等项目。
这些项目亦有相应的手工方法,详见有关资料。
2. 半自动及全自动血液细胞分析仪从设计上均要求用抗凝静脉血。
其优点为:(1)静脉血能正确地反映病人实际情况,重复性好;(2)利于延长仪器的使用寿命;(3)解决了采血盘的交叉感染问题等。
3. 血细胞计数应用EDTA·K2:为抗凝剂(EDTA·K2·2H2O1.5~2.2mg可抗凝1ml血)。
4. 贮血容器应选用有盖塑料管。
抗凝血采集后在室温中贮存应不超过6h;如需制作血涂片应在2h内完成。
5. 测定前必须将EDTA·K2抗凝血充分混匀。
6. 血细胞分析仪测定最适温度为18~22℃,低于15℃或高于30℃,均可使细胞体积发生改变,影响各参数的结果。
7. 血细胞分析仪用于白细胞分类只能当作一种过筛手段,当白细胞、红细胞、血红蛋白和血小板的任何一项有明显升高或降低;白细胞分类出现异常结果(中间细胞群百分率≥8.0%);红细胞、白细胞和血小板的任何一个直方图出现异常图形等情况,须用显微镜检查及分类。
嗜酸性粒细胞直接计数【标本】末梢血或抗凝静脉血。
【方法】直接计数法。
【试剂】1. Hinkelmann液;2. 乙醇-伊红稀释液;3. 伊红-丙酮稀释液。
【操作】1.小试管中加稀释液0.38ml。
2.常法取末梢血20ul,加入管内混匀,待红细胞溶解后两侧充池。
3.静置3~5min,用低倍镜(必要时用高倍镜)镜下计数10个大方格内嗜酸性粒细胞数。
总数×20×106=嗜酸性粒细胞/L。
【附注】1. 血液稀释后应于1h内计数完毕。
血小板手工计数注意事项
血小板手工计数注意事项
嘿,你们知道吗?我觉得血小板手工计数就像在玩一个小小的游戏。
不过呢,这个游戏可不能随便玩哦,有很多要注意的地方呢。
首先呀,我们要用干净的吸管和试管,不能有脏东西在上面,不然会影响结果的。
然后呢,稀释液也要倒得刚刚好,不能太多也不能太少。
要是倒多了,数出来的血小板就会变少;倒少了呢,又会数不清楚。
接着呀,我们在滴血液和稀释液的时候要小心,不能滴到外面去。
滴完了要轻轻摇匀,就像摇果汁一样,但是不能太用力,不然会把血小板弄破的。
摇匀了之后呢,我们要把它放在一个平的地方,让它安静一会儿。
计数的时候呢,我们要用一个小小的显微镜。
眼睛要靠近显微镜,不能离得太远,不然看不清楚。
我们要慢慢地数血小板,不能着急。
数的时候要仔细,不能把别的东西当成血小板数进去了。
要是数错了,结果就不对啦。
还有哦,我们最好多数几次,然后把结果加起来平均一下,这样会更准确呢。
数完了之后,要把试管和吸管洗干净,下次还可以用。
嘿,你们知道吗?血小板手工计数虽然有点难,但是只要我们注意这些地方,就可以数得很准确哦。
血小板计数的实验实习报告
一、实验目的1. 掌握血小板计数的显微镜操作方法。
2. 了解血小板计数的原理和注意事项。
3. 学会使用计数板和显微镜进行血小板计数。
4. 熟悉血小板计数的正常参考值及其临床意义。
二、实验原理血小板计数是通过显微镜观察计数板上的血小板数量,根据计数板上的面积和体积换算出每升血液中血小板的数量。
实验前,血液样本需经过稀释和红细胞破坏处理,以消除红细胞对血小板计数的影响。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜血液样本、稀释液、血小板计数板、显微镜、吸管等。
2. 实验仪器:显微镜、计数板、离心机、移液器等。
四、实验步骤1. 血液样本制备:取新鲜血液样本,加入稀释液,混匀后离心去除红细胞。
2. 计数板准备:将计数板放置在显微镜载物台上,调整显微镜焦距,使计数板清晰可见。
3. 滴加血液:用移液器吸取少量处理后的血液,滴加在计数板的计数室中。
4. 观察计数:通过显微镜观察计数板,记录一定范围内的血小板数量。
5. 计算血小板计数:根据计数板面积、体积和观察到的血小板数量,计算出每升血液中血小板的数量。
五、实验结果与分析1. 实验结果:通过实验,我们得到了每升血液中血小板的数量,与正常参考值进行比较,发现实验结果在正常范围内。
2. 分析:实验过程中,我们严格按照操作步骤进行,注意了稀释比例和计数方法,保证了实验结果的准确性。
六、实验注意事项1. 操作过程中应保持计数板的清洁,避免污染。
2. 使用移液器吸取血液时,应避免气泡的产生。
3. 计数时,应选择视野中血小板分布均匀的区域进行观察。
4. 注意显微镜的焦距调整,确保计数板清晰可见。
七、实验结论通过本次血小板计数实验,我们掌握了血小板计数的操作方法和原理,了解了血小板计数的正常参考值及其临床意义。
在实验过程中,我们注意了操作细节,保证了实验结果的准确性。
八、实验心得本次实验让我深刻体会到实验操作的重要性。
在实验过程中,我们需要严格按照操作步骤进行,注意细节,以保证实验结果的准确性。
血小板检验及临床意义
血小板检验及临床意义血小板检测方法可归纳为出血、血栓和药物监测3大类。
虽则有些方法能应用于多种检测目的,但为特殊目的而创建的方法亦有重要价值。
故在检测时应合理地运用。
血小板的基本功能是黏附、聚集、分泌、促凝血、血块回缩。
通过这些功能维持着正常人体的初期止血作用。
由于这些功能异常而导致的出血疾病包括遗传性和获得性两类,在有些疾病同时会有血小板功能异常和数量减少。
1 血小板数量检查1.1目测计数法将血液用适当的稀释液作一定量稀释,混匀后充入计数池内,在显微镜下计数一定体积内的血小板数量,经过换算得出每升血液中血小板数。
1.2细胞分析仪计数法1.2.1电阻抗法血小板通过小孔引起电阻变化,产生的脉冲经数字化后,根据不同的阈值,计算机分别给出血小板数目。
1.2.2光散射法折射率与细胞内容物有关,血小板有别于红细胞等其它非血小板颗粒,其折射率较低,通过低角度光散射即可与红细胞区别。
2 血小板形态、结构检查瑞氏染色,显微镜观察;MPV检查,应用全自动血细胞计数仪检测。
3 血小板功能检查3.1血块收缩试验(CRT)血块收缩时有相应的血清析出,计算占原有血量的百分数。
3.2血小板粘附试验一定量血液与一定表面积的异物接触后,即有相当数目的血板粘附于异物表面上,测定接触面后血小板数之差,可求出占血小板总数的百分率。
3.3血小板聚集试验血小板聚集是血小板的主要功能之一,主要有比浊法、剪切诱导血小板聚集测定法、散射性粒子检测法、全血电阻抗法、血小板计数法、微量反应板法等。
3.3.1比浊法在特定的搅拦条件下,在富含血小板血浆中加入诱导剂后,由于血小板发生聚集,悬液的浊度随之下降,根据描记曲线可以计算血小板聚集程度及速度[1]。
3.3.2剪切诱导测定法不加诱聚剂,血小板在高剪切力环境下血小板聚集,根据比浊法的原理采用旋转式铁板流体测定仪,仪器绘制成聚集曲线,以观察体外血小板聚集变化。
4 注意事项4.1全部用具和稀释液要特别清洁,无污染。
血小板计数的参考方法
血小板计数的参考方法1、范围本标准规定了血小板计数参考方法的技术要求。
本标准适用于建立血小板计数参考方法的实验室。
2、规范性引用文件国际血液学标准化委员会(ICSH)-2001血小板计数的参考方法3、定义参考方法(Referencemethod)一种可清楚和准确描述的用于特定检测的技术,该技术要有依据,可提供足够准确和精密的实验数据以评价其他实验方法检测结果的有效性。
医学教|育网搜集整理若有决定性方法,参考方法的准确性必须与决定性方法进行比较。
参考方法应溯源至一级计量标准并且须标示不准确度和不精密度。
4、总则4.1本标准采用间接法计数血小板(Platelet,PLT)。
即用荧光标记PLT后,用流式细胞仪检测红细胞(Redbloodcell,RBC)和PLT的比值,同时用单通道阻抗原理的半自动细胞计数仪准确计数RBC,用RBC除以RBC和PLT的比值得出PLT的计数值。
4.2为了保证参考方法检测结果的精密度和准确性,建立参考方法的实验室必须进行比对。
5、血小板计数参考方法的原理首先将EDTA抗凝血标本用无菌缓冲液进行预稀释,再用特定的荧光抗体对PLT进行染色。
溶液中已染色的血小板被稀释成计数浓度,用流式细胞仪检测血小板和红细胞,根据荧光强度和散射光强度将阈值设在可从RBC中区分PLT的位置,以检测出RBC和PLT的比值。
用RBC的计数值除以RBC/PLT的比值计算出PLT计数值。
6、血标本6.1用合乎要求的塑料注射器或真空采血系统采集健康人的静脉血标本。
6.2标本的收集要求使用EDTA二钾为抗凝剂,抗凝剂的浓度为3.7至5.4umol/ml血(1.5~2.2mg/ml血)。
6.3盛有标本的试管应有足够的剩余空间以便于血标本的混匀操作。
6.4标本中不能有肉眼可见的溶血或小凝块。
6.5标本置于18℃~22℃室温条件下,取血后4小时之内完成检测。
6.6为了保证RBC和PLT分布的均一性,在预稀释和加标记抗体前动作轻柔地将采血管反复颠倒,充分混匀标本。
血液显微镜细胞计数的考题分析--中公卫生检验资料库
血液显微镜细胞计数的考题分析--中公卫生检验资料库中公卫生人才网今天带大家一起学习《血液显微镜细胞计数的考题分析》。
血液显微镜细胞计数中主要包括红细胞计数、白细胞计数及血小板计数,在事业单位考试过程中主要针对血细胞计数的稀释液、计数池以及结果计算这三点而出现相应的考题。
中公卫生人才网特对此进行知识点总结。
一、三种细胞的计数稀释液:1.红细胞稀释液为Hayem稀释液,含有氯化钠(主要作用为调节渗透浓度);硫酸钠(主要作用是可以提高比重防止红细胞黏连);氯化高汞(主要作用是作为防腐剂,但是有毒)。
需加2mL的稀释液与10μL的血液混合。
2.白细胞稀释液为稀乙酸,主要作用是破坏成熟红细胞,需要注意的是它不能破坏有核红细胞。
需加0.38mL的稀释液与20μL的血液混合。
3.血小板稀释液:草酸铵稀释液破坏红细胞能力强,血小板形态清晰易辨,为首选稀释液。
二、血细胞计数池:血细胞显微镜计数板均选用改良牛鲍计数板,充池后红细胞和血小板的计数区域位于牛鲍计数板中央大方格内四个角和中央的五个中方格。
白细胞的计数区域位于牛鲍计数板的四个角的大方格里。
三、结果计算:红细胞结果计算公式为N×25/5×10×200×106/L。
即N/100×1012/L。
白细胞结果计算公式为N/4×10×20×106/L。
即N/20×109/L。
血小板结果计算公式为N×109/L。
【例题】草酸铵溶血计数血小板,在规定的计数区域内共数得67个血小板,则血小板数应为:()A.120×109/LB.78×109/LC.67×109/LD.160×109/LE.230×109/L【参考答案】C。
中公解析:血小板数=P×109/L,P为中央大方格的四个角和中心共5个中方格的血小板总数。
血液显微镜细胞计数的考题分析今天就讲到这里啦,希望可以帮助到正在备考医疗卫生招聘考试的小伙伴们。
临床检验及细胞学综合训练细胞计数 实验8.1 细胞计数
×100%
评价:
白细胞≤ 4×109/L者,
RCS<30%
白细胞在(4.1-14.9)×109/L者 RCS<20%
白细胞≥15 ×109/L者
RCS<15%
超过上述标准者为不合格
二、白细胞计数质控
变异百分数评价法
适用于集体考核 计算公式:
V=|Xm-Xi∣/Xm × 100
V为变异百分率; Xi为被考核者测定值; Xm为靶值
R=∣X1-X2∣/(X1+X2)1/2 质量得分:
计分=100-(R × 20.1) 评价同前
三、脑脊液细胞计数
脑脊液标本
直接 或稀释后
低倍镜计数细胞 总数和红细胞数
脑脊液标本
冰乙酸 破坏成熟红细胞
低倍镜下 计数白细胞数
白细胞>30×106/L
分类计数
成年男性:
成人: (3.5~9.5) ×109/L
(4.0~5.5) ×1012/L
成年女性: (3.5~5.0)
×1012/L
20 四角 四个大方格 N/4×10× 20×106/L
(125~350) ×109/L
二、白细胞计数质控
显微镜计数误差
技术误差:由于操作不正规或器材不精确造成
的误差;这类误差通过主观努力可以避免或显著
在不染色标本中血小板在高倍镜下观察为: 有折光性的扁圆形小体,正常时呈双面微凸的 圆盘状,激活后可有伪足伸出
一、血小板计数(显微镜计数法)
定义:测定单位体积外周血液中血小板的数量
原理: 用血小板稀释液,将血液稀释一定倍数并破
坏成熟红细胞后,混匀滴入血细胞计数板,在 显微镜下计数一定范围内的血小板数,经换算 求得每升血液中血小板的数量
血小板检查方法以及临床意义
血小板检查方法以及临床意义发表时间:2010-08-10T13:14:20.200Z 来源:《中外健康文摘》10年第21期供稿作者:刘北航 (黑龙江省宝清县八五二农场疾病控制中心15562[导读] 红骨髓中的造血干细胞分化成巨核细胞后,其胞质断离脱落即形成血小板。
血小板检查方法以及临床意义刘北航 (黑龙江省宝清县八五二农场疾病控制中心 155620)【中图分类号】R466.11 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085 (2010)21-0166-02【摘要】目的探讨血小板功能检测对于临床相关疾病的诊断和抗血小板药物的筛选及相关研究有着重要的意义。
目前,血小板功能检测的实验与方法日益增多,但所有这些检测方法均有不足之处,因而有必要研究和发展一种操作简便、检测灵敏度高的方法。
对近年来血小板功能检测方法诸如血小板的一般功能检测、血小板黏附功能测定、血小板聚集功能测定、血小板释放功能测定、血小板凝血活性检测和流式细胞术在血小板功能检测中的应用等研究进展进行了综述,并对研究前景作了简单的展望。
【关键词】血小板检查方法临床意义红骨髓中的造血干细胞分化成巨核细胞后,其胞质断离脱落即形成血小板。
初生成的血小板体积较大,黏着力强,易于聚集和发生释放反应,有很强的止血和凝血功能,在循环血液中只有初生成的血小板具有止血功能,且只能维持2天。
老化的血小板75%被脾、肝和骨髓的网状内皮细胞吞噬和破坏,其余老化的血小板在循环过程中破坏。
正常人的血小板为圆形或椭圆形小体,直径2~3μm。
血小板离体后极易聚集、变性、破坏,而且不易与其他小颗粒区别,所以计数较难。
因此,血小板计数必须严格按操作规程操作,仔细观察辨认,才可获得较准确的结果。
(一)试剂血小板稀释液有两类。
一类是不破坏红细胞,以柠檬酸钠甲醛液为代表,其优点是当血液被稀释100~200倍时,可同时做红细胞计数,缺点是血小板混杂在大量红细胞之间,计数时容易遗漏。
试验一红细胞计数试验目的掌握红细胞计数原理及技术二
试验一红细胞计数试验目的掌握红细胞计数原理及技术二-标准化文件发布号:(9456-EUATWK-MWUB-WUNN-INNUL-DDQTY-KII实验一红细胞计数一、实验目的:掌握红细胞计数原理及技术。
二、实验原理:用等渗稀释液将血液稀释一定倍数,充入计数池中,于显微镜下计数一定体积内的红细胞数,经过换算示得每升血液内的红细胞数。
三、实验器材及试剂:显微镜、血红蛋白吸管、计数板、盖玻片、生理盐水。
四、实验操作:1、取试管1支,加稀释液3.98ml或1.99ml。
2、用清洁干燥的微量吸管准确吸取末梢血10微升。
3、擦去管尖外部余血、轻轻注入红细胞稀释液底部,再吸取上层稀释液清洗吸管2-3次,立即摇匀。
4、将计数池与盖玻片用软布料擦净,将盖玻片覆盖于计数池上。
5、用吸管吸取混匀的红细胞悬液,充入计数池中。
6、静止2-3分钟,待经红细胞下沉后,用高倍镜或低倍镜计数中央大方格内四角和正中五个中方格内的红细胞数。
五、计算N(五个中方格内RBC数)×5×10×106×200=N×1012个/升×5:表示5个中方格内RBC数换算为1个大方格内RBC数× 10:1个大方格容积、0.1ul、换算为1ul内RBC数× 106:1ul换算为1升内红细胞数× 200:稀释倍数六、正常参考值正常参考值:成年男性:4.00-5.50×1012/升成年女性:3.50-5.00×1012/升新生儿: 6.00-7.00×1012/升实验二血红蛋白测定一、实验目的:掌握氰化高铁血红蛋白比色法原理及技术。
二、实验原理:血液在血红蛋白转化液中溶血后,除SHb外各种血红蛋白可被高铁氰化钾氧化成高铁血红蛋白,再与CNˉ结合生成稳定的棕红色氰化高铁血红蛋(HicN)。
HicN最大吸收峰540nm,最小吸收波谷504nm,在特定的条件下,毫摩尔消光系数为44L.mmol-1 .cm-1 ,因此根据标本的吸光度,即求得血红蛋白浓度。
血小板计数
方格内的血小板数量。 (6)计算:每升血小板数=5个中方格内血小板数×109/L。
血小板计数的方法学评价
(三)质量保证
血小板计数不同检测阶段的质量保证
(一)酸铵法)
(1)加稀释液:取1支小试管,加入10g/L草酸铵稀释液0.38ml。 (2)采血和加血:采集毛细血管血或吸取EDTA抗凝新鲜全血
20μl ,加至上述稀释液中,立即混匀。 (3)稀释静置:待完全溶血后再充分混匀1分钟,室温放置10
分钟。 (4)充液:取混匀血小板悬液1滴充入计数池,静置10~15分
血小板检查
主要内容
一、血小板计数 二、血小板形态学检查
一、血小板计数
Ø血小板(platelet,PLT)是有骨髓造血组织中 的巨核细胞产生,具有维持血管内皮完整性以及 黏附、聚集、释放、促凝和血块收缩等功能。 Ø血小板计数(platelet count)是测定单位容积 的血液中的血小板的数量,血小板计数是止血、 凝血检查的常用筛选试验之一。
血栓与止血的检验操作规程
血栓与止血的检验操作规程血管壁与内皮细胞检验出血时间(BT)出血时间检测是指皮肤受特定条件的外伤后,出血自行停止所需的时间。
此过程反映皮肤毛细血管与血小板相互作用,包括血小板粘附,血小板活化和释放以及血小板聚集等反应。
1. 出血时间“测定器法”自肘前窝凹下二横指处,经常规消毒后,使刀片由“测定器”内刺入皮肤,启动秒表,每隔半分钟用干净滤纸吸干流出的血液,直至出血自然停止,按停秒表,记录出血时间。
2. Duke法,自耳垂或指尖取血。
【方法与操作】见《全国临床检验操作规程》(第二版)【注意事项】测定器法:1. 采取部位应保暖,血液应自动流出。
2. 由于刺入皮肤的刀片长度和深度均固定,故“测定器法”的结果较为准确。
3. 滤纸吸干流出血液时,应避免与伤口接触。
4. 试验前1周内不能服用抗血小板药物,如阿司匹林等,以免影响结果。
血小板数量和功能检验血小板计数和平均血小板体积测定血小板计数:目视计数法。
【标本】末梢血或抗凝静脉血。
【方法与操作】见《全国临床检验操作规程》(第二版)。
【试剂】1. 草酸铵法稀释液。
2. 许汝和稀释液。
【附注】1. 血小板稀释液要清洁。
防微粒和细菌污染。
试管和吸管也应清洁、干净。
2. 针刺应稍深,使血流通畅。
拭去第一滴血后,首先采血作血小板检测,动作要快,防止血小板聚集和破坏。
采取标本后尽快计数。
3. 血液稀释液充分混匀后,滴入计数池内后,要静置10~15min。
室温高时注意保持计数池周围的湿度,以免水分蒸发。
4. 计数时光线要适中,注意有折光性的血小板与杂质灰尘相区别,附在血细胞旁边的血小板也要注意,不要漏掉。
血小板计数仪计数【标本】末梢血。
【方法与操作】使用血小板计数仪及与其相匹配的稀释液。
操作详见仪器使用说明书。
平均血小板体积(MPV)测定【标本】根据仪器的要求用末稍血或静脉取血注入抗凝管(EDTA.Na2或肝素)【方法与操作】自动化血细胞计数仪均可检测血小板功能检验血小板粘附试验【标本】自静脉取血1.0~1.5ml。
血常规复检标准操作程序
血常规复检标准操作程序1.检验目的核对标本并观察血细胞形态,校正自动化血液分析仪检测中由于各种原因可能出现的结果偏差,确保检测结果的准确、可靠。
2.检验原理和方法2.1原理:瑞姬氏染色2.2方法:2.2.1人工对仪器报告进行审核(观察警示标志、直方图、散点图等);鉴定、仪器运行状态是否正常;核对标本标示;对触犯血常规复检规则的血样采用机器重测、稀释后上机重测、适当处理(加温、置换血浆等)后上机重测,配合血液细胞形态学检测标准操作程序进行复检,校正自动化血液分析仪检测中出现的结果偏差,确保检测结果的准确性,从而为临床提供准确可靠的检测结果。
2.2.2显微镜检:制作血涂片,经瑞姬氏染色后油镜检查与机测结果比较,调整或标注后出具结果。
2.2.2.1首先在低倍镜下(10倍~40倍)进行浏览,观察有无异常细胞和细胞分布情况。
2.2.2.2检查从约50%的红细胞互相重叠区域开始,向红细胞完全散开的区域推移。
血涂片较薄的区域,呈羽毛状,为“血片边缘”。
2.2.2.3采用“城垛式”方法检查血涂片,检查内容包括:1)血小板:检查PLT大小和形态;评估PLT数量是否与检测结果相符。
2)红细胞:观察检查RBC大小和形态。
3)白细胞:WBC分类计数及检查形态;评估WBC数量是否与检测结果相符。
4)其他:检查其它异常如中毒颗粒、Dohle小体、空泡、寄生虫、原始幼稚细胞和异常细胞等。
2.2.3结果登记并录入电脑,标注后出具报告单,必要时电话联系临床。
3.性能特征血细胞形态学具有直观、简便、经济、细胞学诊断金标准的优势。
4.标本EDTA-K2抗凝血。
5.仪器和试剂5.1仪器和用具:OLYMPUS 厂生产的OLYMPUS CX31显微镜、载玻片、推片、一次性微量吸管、擦镜纸5.2试剂:5.2.1 BASO瑞吉氏染液5.2.2试剂品牌:珠海BASO公司;规格:250ml5.2.3储存条件:15℃~30℃,避光保存。
有效期内使用。
血细胞计数板的具体流程
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1. 准备材料,血细胞计数板、血样、稀释液、吸管、载玻片。
血小板计数的标准操作程序
血小板计数的标准操作程序【目的】指导血小板计数。
【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报请专业组长及科主任签字后生效。
【方法原理】将血液用适当的稀释液作一定量稀释后,混匀后,注入计数池内计数充入计数池后,在显微镜下计数一定体积内的血小板,经换算得出每升血液血小板数。
0.012克,合并后加【试剂】血小板稀释液:分别溶解草酸铵1.0克及EDTA-Na2蒸馏水至100ml,混匀,过滤后备用。
【标本要求】静脉抗凝血(EDTA-K2)或毛细血管血。
【操作程序】1、于清洁试管中加血小板稀释液0.38 mL。
2、准确吸取取末梢血或静脉抗凝血20微升,擦去管尖外附着血液,置于血小板稀释液内,吸取上清液洗三次,立即充分混匀。
待完全溶血后再次混匀1min。
3、取上述混匀的血小板悬液1滴注入计数池内,静置10-15min,使血小板下沉。
4、用高倍镜计数中央1个大方格内四角和中央共五个中方格内血小板数,×109即为每升内血小板数。
【参考区间】(100-300)×109/L【质量控制】1、血小板稀释液要清洁,配成后应过滤。
防止微粒和细菌污染。
试管及吸管也应清洁、干净。
2、针刺应稍深,使血流通畅。
拭去第一滴血后,首先采血作血小板测定,操作应迅速,防止血小板聚集和破坏。
采取标本后尽快计数,以免影响结果。
3、血液加入稀释液内要充分混匀,滴入记数池后一定要静置10-15min。
室温高时注意保持计数池周围的温度,以免水分蒸发而影响计数结果。
4、计数时光线要适中,不可太强,应注意有折光性的血小板和杂质、灰尘相区别。
附在血细胞旁边的血小板也要注意,不要漏数。
5、如在位相显微镜或暗视野显微镜或暗视野显微镜下计数,效果更佳,计数更准确。
【临床意义】1、血小板减少(<100×109/L)见于:血小板生成障碍:再生障碍性贫血,急性白血病,急性放射病等。
血小板坏增多:原发性血小板减少性紫癜,脾功能亢进。
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血小板稀释液(计数液)使用说明
货号:G3590
规格:100mL
保存:室温保存,6个月有效。
产品说明:
血小板(Blood platelet)是哺乳动物血液中的有形成分之一,是从骨髓成熟的巨核细胞胞质裂解脱落下来的具有生物活性的小块胞质。
血小板稀释液作用原理是血液经适量的稀释液稀释,混匀后充入计数池内,在显微镜下计数一定体积内血小板数量,换算求出每升血液中血小板的数量。
该血小板稀释液仅用于科研领域,不用于临床诊断。
自备材料:
1、新鲜全血
2、微量吸管
3、细胞计数板
4、显微镜
操作步骤(仅供参考):
1、取小号试管,加入血小板稀释液0.38ml。
2、用洁净干燥微量吸管取毛细血管血20μl,擦去管外余血后加至血小板稀释液中,轻吸上层清液3次,立即充分混匀。
3、待完全溶血后再次混匀1min,取混匀的血小板悬液1滴,充入计数池内,注意产生气泡或外溢,室温静置10~15min,待血小板沉淀。
4、置于显微镜高倍镜下依次计数中央大方格内四角和中央共五个中方格内血小板数。
计算:
血小板数/L=5个中方格内血小板数×109/L
注意事项:
1、针刺深度应稍深,拭去第一滴血后,首先采血做血小板计数。
操作应迅速,防止血小板聚集。
2、采血标本后,应在1h内计数完毕,以免影响结果。
3、小试管、计数板均应清洁,以免误认细胞。
4、血液加入血小板稀释液内要充分混匀,充入计数池后一定要静置10~15min。
室温过高时应注意保持计数池周围的湿度,防止水分蒸发。
5、计数时光线应适中,应注意有折光性的血小板和杂质相区别。
6、用相位显微镜计数,效果更佳,更准确。
7、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。