免疫血清学实验
免疫实验报告伤寒血清
免疫实验报告伤寒血清引言伤寒是一种由沙门氏菌引起的急性传染病，主要通过食物和饮水传播。
伤寒病的确诊主要依靠临床症状、体格检查和实验室检验，其中血清学试验是一种常用的方法。
本实验旨在通过免疫实验，检测患者血清对伤寒菌的抗体。
本报告将详细记录实验过程和结果，以期提供实验室诊断伤寒的参考依据。
材料与方法1. 受试者本实验使用的血清样本来自于伤寒患者和健康无感染者，其中伤寒患者血清标本由临床病例提供，健康无感染者血清作为对照组，以确保实验结果的准确性。
2. 实验试剂实验所需的主要试剂包括伤寒血清凝集反应试剂、伤寒培养基、洗涤缓冲液、稀释液等，这些试剂均来自于实验室常备品。
3. 免疫试验1）稀释血清样本：将受试者的血清样本与稀释液按1:10的比例混合，制备稀释后的血清。
2）制备伤寒菌溶液：将伤寒菌培养基经离心分离细菌细胞，用洗涤缓冲液洗涤，并制备成1:1000的伤寒菌溶液。
3）配制实验板：将96孔实验板中的第一列加入100μL的稀释后的血清，第二列至第十二列加入100μL的伤寒菌溶液，最后一列加入100μL的洗涤缓冲液作为空白对照。
4）进行凝集反应：轻轻摇晃实验板，使血清和细菌充分混合，放置于室温下，观察反应结果。
结果与讨论根据实验结果，我们观察到以下情况：1）阳性组：伤寒患者的血清与伤寒菌溶液发生凝集反应，形成疏松块状或网状凝集物。
2）阴性组：健康无感染者的血清与伤寒菌溶液无明显凝集现象，血清呈均匀状态。
3）空白对照组：空白对照组中的洗涤缓冲液与伤寒菌溶液无明显凝集现象，呈均匀状态。
通过上述实验结果可以得出以下结论：1）伤寒患者的血清中含有与伤寒菌抗原相结合的抗体，表明患者曾经感染过伤寒。
2）健康无感染者的血清中没有检测到与伤寒菌抗原相结合的抗体，表明该群体未感染伤寒。
结论本实验通过血清学试验的方法，对伤寒患者和健康无感染者的血清进行了检测与比较。
结果显示伤寒患者的血清中包含与伤寒菌抗原相结合的抗体，而健康无感染者的血清中则没有。
免疫血清学技术
荧光色素
是能够产生明显荧光，并能作为染料使用 的有机化学物称为荧光色素或荧光染料。
可用于标记的荧光素有异硫氰酸荧光素 (FITC)、四乙基罗丹明(RB 200)和四甲基 异硫氰酸罗丹明(TRITC)
染色原理及方法
FITC含有异硫氰基，能与IgG分子自由基 结合，形成FITC-IgG复合物，且不影响结 合抗原的能力和特异性，因此，当荧光抗 体与抗原结合后形成有荧光性的抗原抗体 复合物
高敏感性的标记分子
荧光素 酶分子 放射性同位素
荧光抗体技术 酶标抗体技术 同位素标记技术
（一）荧光抗体标记技术
fluorescent-labelled antibody technique
是指用荧光素对抗体或抗原进行标记，然 后用荧光显微镜观察所标记的荧光以分析 示踪相应的抗原或抗体的方法。
抗原可以是多糖、蛋白质、类脂等，抗原分 子较小，单位体积内所含的量多，与抗体结 合的总面积大，故在作定量试验时，为了不 使过剩，通常稀释抗原，并以抗原稀释度作 为沉淀试验效价。
参加沉淀试验的抗原称沉淀原，抗体称为沉 淀素。
环状沉淀试验
在小口径试管内先加入已知抗血清，然后小心沿管壁 加入待检抗原于血清表面，使之成为分界清晰的两层
SPA与IgG结合后，其Fab片暴露于外，并保持其抗体 活性。
当此被覆着特异性抗体的葡萄球菌与相应的抗原结合 时，就可互相连结引起协同凝集反应，简称COAG。
（二）沉淀试验
可溶性抗原(如细菌的外毒素、内毒素、菌 体裂解液，病毒的可溶性抗原、血清、组 织浸出液等)与相应抗体结合，在适量电解 质存在下，形成肉眼可见的白色沉淀，称 为沉淀试验(precipitation test)。
用于标记的酶
用于标记的酶有辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase，HRP)、葡萄糖氧化酶、碱性磷酸酶
血清学试验方法。
血清学试验方法。
以血清学试验方法血清学试验是一种常用的诊断和研究疾病的方法，通过检测血液中的抗体或抗原来判断机体免疫状态以及感染情况。
本文将介绍血清学试验的基本原理、常用的血清学试验方法以及其在临床和科学研究中的应用。
一、血清学试验的基本原理血清学试验基于机体免疫系统的特性，通过检测血液中的抗体和抗原来判断机体的免疫状态。
抗体是机体对抗原产生的一种特异性免疫应答物质，可以与抗原结合形成可见的免疫复合物。
血清学试验利用这种抗原与抗体的特异性结合关系，通过不同的方法来检测和测定血液中的抗体或抗原，从而获得有关机体免疫状态和感染情况的信息。
二、常用的血清学试验方法1. 免疫沉淀法：该方法利用抗原与抗体结合后形成的可见免疫复合物在溶液中的沉淀性质，通过观察沉淀现象来判断抗体和抗原的存在与否。
常见的应用包括免疫沉淀反应和双向免疫沉淀反应。
2. 酶联免疫吸附试验（ELISA）：ELISA是一种高灵敏度、高特异性的血清学试验方法，常用于检测血液中的抗体或抗原。
该方法通过抗体与抗原结合形成复合物，再利用酶标记的二抗与复合物结合，最后通过底物的反应产生可见的颜色或荧光信号来定量检测。
3. 病毒中和试验：该试验主要用于检测抗体对病毒的中和作用。
通过将病毒与抗体混合后，观察病毒的感染和复制能力来判断抗体的中和效果。
病毒中和试验常用于病毒感染的诊断和疫苗效果的评估。
4. 血凝试验：该试验利用抗体与抗原结合后形成凝集反应，通过观察凝集现象来判断抗体和抗原的存在与否。
血凝试验常用于血型鉴定和某些感染性疾病的诊断。
三、血清学试验在临床应用中的意义血清学试验在临床应用中具有重要的意义。
首先，血清学试验可以用于疾病的早期诊断和筛查，如乙肝病毒感染的血清学检测可以早期发现感染者。
其次，血清学试验可以用于疾病的鉴别诊断，如通过检测自身抗体来判断自身免疫性疾病的类型。
此外，血清学试验还可以用于评估疫苗的效果、监测疾病的进展和判断治疗效果。
免疫学课件：免疫血清学技术
抗体的生物学功能
抗体具有中和毒素、调理吞噬、介导炎症反应等 多种生物学功能。
抗原抗体结合机制
锁钥学说
ห้องสมุดไป่ตู้01
抗原与抗体结合就像锁和钥匙一样，具有高度的特异性和互补
性。
诱导契合学说
02
抗原与抗体在结合过程中，会发生构象变化，使得两者更加紧
力。
抗原的特异性
抗原与相应抗体或致敏淋巴细胞发 生特异性结合的物质基础。
抗原的分类
根据抗原性质不同，可分为完全抗 原和不完全抗原。完全抗原具有免 疫原性和特异性，而不完全抗原仅 具有特异性。
抗体结构与功能
1 2 3
抗体的基本结构
由四条多肽链组成，包括两条重链和两条轻链， 通过二硫键连接。
抗体的功能区域
密地结合在一起。
多重识别机制
03
抗原抗体结合不仅依赖于锁钥关系或诱导契合，还涉及到电荷、
疏水作用等多重因素。
03 免疫血清制备技术
动物选择与免疫方案
动物选择
选用健康、适龄、免疫原性强的实验动物，如兔、马、羊等 。
免疫方案
根据实验需求和免疫原性质，制定合适的免疫程序，包括免 疫剂量、免疫途径、免疫次数和间隔时间等。
补体结合实验方法
补体结合试验（CFT）
在补体参与下，用已知抗原或抗体检测未知抗体或抗原的方法。该方法具有较高的敏感性和特异性。
间接补体结合试验
先用已知抗原致敏红细胞，再加入待检血清中的相应抗体，最后加入补体，观察红细胞是否溶解来判 断结果。该方法常用于检测某些病毒、立克次体等微生物的抗体。
检验科常见免疫血清学检测方法与解读
检验科常见免疫血清学检测方法与解读【检验科常见免疫血清学检测方法与解读】免疫血清学检测是一种通过检测血液中的抗体和抗原来诊断疾病的方法，广泛应用于临床实践中。
本文将针对检验科常见的免疫血清学检测方法进行介绍，并解读其结果。
一、酶联免疫吸附试验（ELISA）酶联免疫吸附试验（Enzyme-linked Immunosorbent Assay，ELISA）是目前应用最为广泛的免疫血清学检测方法之一。
ELISA通过将待检测的抗体或抗原与酶标记的二抗结合，通过酶的催化作用得到显色反应来分析样本中的抗体或抗原含量。
在进行ELISA检测时，首先需要将样本与特异性抗体或抗原进行反应，随后进行多个洗涤步骤来去除非特异性结合的物质。
然后，加入酶标记的二抗与待测样本中的特异性抗原或抗体进行结合。
最后，加入底物，通过酶的催化作用使底物发生显色反应。
二、免疫荧光分析（IFA）免疫荧光分析（ImmunoFluorescence Assay，IFA）是一种通过使用荧光标记的抗体或抗原来检测目标物质的方法。
根据检测物质的不同，可以分为直接免疫荧光分析和间接免疫荧光分析。
直接免疫荧光分析是将荧光标记的抗体直接与待检测样本中的抗原发生特异性结合，然后使用荧光显微镜观察是否有荧光信号产生。
而间接免疫荧光分析则是先使用未标记的特异性抗体与待测样本中的抗原结合，随后再加入荧光标记的二抗与第一抗体发生结合，从而观察是否有荧光信号产生。
三、免疫印迹分析（Western Blot）免疫印迹分析（Western Blot）是一种用于检测抗体和抗原之间的特异性结合的方法。
在进行免疫印迹分析时，首先将待检测样本中的蛋白质经过电泳分离，然后转移到膜上。
随后，将荧光标记的抗体与待测样本中的抗原进行特异性结合，通过荧光显影或其他检测方法观察是否有特异性的蛋白带出现，从而判断抗体和抗原的结合情况。
四、血凝试验（Coagulation Test）血凝试验是一种通过检测血液中凝血因子的活性来评估凝血功能的方法。
血清学试验名词解释
血清学试验名词解释血清学试验是一种重要的诊断工具，它可以帮助医生检测患者的身体健康状况。
包括血清学分析、免疫学检查、分子生物学检查和肿瘤学检查等。
下面介绍一些常见的血清学试验名词及其解释：1.酸：尿酸是血清中最常检查的物质之一，它主要用于诊断痛风和肾功能紊乱。
2.素时间：肝素时间是检测肝功能的重要指标之一，它可以检测患者血清中肝源性凝血因子。
3.素氮：尿素氮是血清中最常检查的物质之一，它主要用于诊断肾功能紊乱。
4.酐：肌酐是血清中的主要肌肉代谢产物，它可以指示患者的肾脏功能和肠道吸收功能。
5.胆红素和直接胆红素：总胆红素和直接胆红素是必须检查的血清指标，它可以检查患者的肝脏功能。
6.敏C反应蛋白：高敏C反应蛋白是一种专门检测感染的方法，它可以检测患者体内是否存在细菌和病毒感染。
7.敏肌酐：超敏肌酐是专门检测心肌损伤和肾脏损伤的血清指标。
8.性磷酸酶：碱性磷酸酶是血清中常见的酶指标之一，它可以供医生诊断心脏病和肝病。
9.清白蛋白：血清白蛋白是血清中的主要蛋白质指标之一，它可以用来评估患者的营养状况和肝脏功能。
10.红素：胆红素是血清中最常检查的物质之一，它可以指示患者是否存在胆囊炎、胆道梗阻或者肝炎等肝病。
血清学试验是当今医学诊断工具中重要的一环，它可以提供丰富的信息，有助于确定疾病的发展情况，从而为患者提供有效的治疗方案。
患者在检查前应该与医生详细沟通，以清楚的治疗目标为前提，合理选择检查类型和检查项目，及时准确的发现病情，缩短患者的病程，减轻患者的痛苦，达到最佳的疗效。
血清学检查对于侦测和诊断疾病是不可缺少的，它不仅能够检测疾病的进展状态，而且还可以指导疗效。
因此，为了提高患者就医体验，提升治疗效果，每一次就诊都要考虑申请血清学检查项目。
但是在检查项目上，患者也要有明确的目的，同时，血清学检查的结果也必须与其他相关检查结果和患者的病史症状结合起来，才能准确的诊断患者的疾病，并作出有效的治疗计划。
血清学试验
2、胶乳凝集试验
3、协同凝集反应
抗体致敏载体，载体为金黄色葡萄球 菌A蛋白（SPA） SPA具有与IgG的Fc段结合的特性。
第三节 沉淀反应 （precipitation reaction)
可溶性抗原（如细菌的外毒素、内毒素、菌体 裂解液、病毒的可溶性抗原、血清、组织浸出 液等）与相应的抗体结合，在适量电介质存在 下，形成肉眼可见的细微的白色沉淀。
第一节 血清学试验概述
二、特点
特异性与交叉性 敏感性 反应的可逆性 反应的二阶段性 最适比与带现象 用已知测未知
第一节 血清学试验概述
三、影响血清学试验的因素 电解质 温度 酸碱度 震荡 杂质和异物
第一节 血清学试验概述
四、应用及发展趋向
血清学试验在医学和兽医学领域已广泛应用，可 直接或间接从传染病、寄生虫病检出相应的抗原 或抗体。 血清学试验还广泛应用于生物活性物质的超微定 量、物种及微生物鉴定和分型等方面。 血清学试验也用于基因分离，克隆筛选，表达产 物的定性、定量分析和纯化等，已经成为现代分 子生物学研究的重要手段。
酶联免疫吸附试验（简称ELISA ）
将抗原或抗体吸附于固相载体的表面，酶标 记物与相应的抗体或抗原反应后，形成酶标 记抗原抗体复合物，在遇到相应底物时，结 合物上的酶催化底物产生水解、氧化或还原 等反应，从而生成可溶性或不溶性的有色物 质，可用肉眼或酶标测定仪判定结果。颜色 的深浅与相应的抗体或抗原量成正比，因此， 可根据颜色的深浅来定量抗体或抗原。
第三节 沉淀反应 （precipitation reaction)
可溶性抗原+相应抗体 肉眼可见的沉淀
第三节 沉淀反应 沉淀反应 （precipitation reaction)
血清学试验流程
血清学试验流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor. I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!血清学试验流程血清学试验是一种常用的医学检测方法，用于检测血清中的各种生物标志物，如抗体、抗原等，以帮助诊断疾病、评估免疫状态等。
免疫血清学实验室设置标准
免疫血清学实验室设置标准免疫血清学实验室，应按照《临床实验室管理办法》基本要求设置，并符合《病原微生物实验室生物安全管理条例》、《临床实验室生物安全通用要求》。
鉴于基层医疗机构检测条件的局限性，原则上不建议一级医院设置免疫血清学实验室，若条件达到《临床实验室管理办法》的基本要求，具备相应的检测能力和质量保证，可在上级卫生主管部门医学检验质量控制中心督导下开展相应的工作（梅毒血清学检查、HIV血清学检查以及病原体核酸检查实验室另有相关标准）。
一、设置基本要求。
按照《临床实验室管理办法》第十条医疗机构应当保证临床实验室具备与其临床检验工作相适应的专业技术人员、场所、设施、设备等条件。
1、人员：《临床实验室管理办法》第十二条医疗机构临床实验室专业技术人员应当具有相应的专业学历，并取得相应专业技术职务任职资格。
（免疫血清学实验室工作人员一般除上述要求外应当具有至少两年以上相关专业工作经验，这个要求虽没有明确的规定，但在设有免疫血清学实验室的单位都是这样执行的。
）2、场所：《临床实验室管理办法》第三十七条医疗机构临床实验室的建筑设计应当符合有关标准，并与其生物安全防护级别相适应。
（1）通风；（2）非手触式的洗手洗眼装置；（3）合理的分区等。
3、设备：《临床实验室管理办法》第三十八条医疗机构临床实验室应当按照生物防护级别配备必要的安全设备和个人防护用品，保证实验室工作人员能够正确使用。
（1）酶标仪；（2）洗板机；（3）生物安全柜；（4）护眼镜等其他相关设备。
二、质量保证。
按照《临床实验室管理办法》第十一条医疗机构临床实验室应当建立健全并严格执行各项规章制度，严格遵守相关技术规范和标准，保证临床检验质量。
第二十七条医疗机构临床实验室定量测定项目的室内质量控制标准按照《临床实验室定量测定室内质量控制指南》（GB/20032302-T-361）执行。
第二十八条医疗机构临床实验室应当参加经卫生部认定的室间质量评价机构组织的临床检验室间质量评价。
免疫血清学检验
免疫血清学检验一、血清C-反应蛋白检验1．英文或缩写：C-Reactive Protein，C-RP。
2．标本采集：空腹静脉血2.0ml，立即送检。
应避免脂血、溶血和污染。
3．正常参考值：0-8g/L。
4．临床意义：CRP 是一种能与肺炎链球菌C 多糖体反应的急性时相反应蛋白，能激活补体，促进吞噬和其他免疫调控作用。
CRP 是一种急性期蛋白，在各种急性和慢性感染、组织损伤、恶性肿瘤、心肌梗塞、手术创伤、放射线损伤数小时迅速升高，病情好转时又迅速降至正常。
此反应不受放疗、化疗、皮质激素治疗影响。
细菌感染较病毒感染含量高，急性风湿病较慢性高。
5．注意事项：RF 可干扰本试验，产生假阳性结果，故类风湿关节炎患者欲用本试验判断其疾病是否活动，应先对其血清样品进行处理，以破坏RF，方法为：取待测血清125ul，加3mmol/L 二硫苏糖醇100ul，37ºC30 分钟后加0.25%H2O2(新鲜配置)150ul，再按操作。
(3mmol/L 二硫苏糖醇4ºC 可保存1 周)。
血清样品要用蒸馏水稀释，不可用生理盐水稀释。
胶乳试剂不可冻存，应保存于2-8ºC，用前摇匀；室温如低于20ºC，加胶乳试剂后应延长摇动时间2 分钟。
二、血清转铁蛋白检验1．英文或缩写：Transferrin，TRF。
2．标本采集：空腹静脉血2.0ml。
应避免脂血、溶血和污染。
3．正常参考值：(2.72±0.81)g/L。
4．临床意义：TRF 为β球蛋白中能和铁结合的一种糖蛋白。
利用转铁蛋白换算血清总结合力，比生化检验血清铁结合力方法简单、灵敏而准确，是诊断贫血的重要指标之一。
主要功能是运转微量元素铁，调节铁的吸收，防止机体吸收过多的铁，引起铁中毒。
升高：妊娠末期、缺铁性贫血、急性肝炎。
降低：急慢性感染、慢性肝炎、肝硬化、恶性肿瘤。
5．注意事项：及时送检，若不能及时送检，分离血清-20ºC 保存。
简述血清学实验的特点
简述血清学实验的特点血清学实验是研究免疫应答的重要实验方法之一，通过检测和分析血清中的抗体水平和抗体效价，可以评估机体的免疫状态、抗体产生的程度和质量，为疾病的诊断、预防和治疗提供重要依据。
血清学实验具有以下几个特点。
1. 高度特异性：血清学实验能够对特定抗原与抗体的相互作用进行检测，具有高度的特异性。
使用特定的抗原作为检测物质，可以针对特定疾病或病原体进行检测，避免了对其他无关因素的干扰。
2. 高灵敏度：血清学实验能够检测到非常低浓度的抗体，具有高灵敏度。
通过采用特定的抗原和检测方法，可以在血清中检测到非常微量的抗体，即使是在感染初期或抗体水平较低的情况下，也能够准确地检测到。
3. 多样性：血清学实验可以根据需要选择不同的检测方法和指标。
根据研究目的和实验要求，可以选择不同的检测方法，如酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫荧光试验（IFA）、中和试验、凝集试验等。
同时，还可以根据需要检测不同的指标，如总抗体水平、特异性抗体水平、中和抗体效价等。
4. 可靠性：血清学实验具有较高的可靠性和重复性。
通过严格的实验操作和标准化的检测方法，可以保证实验结果的准确性和可靠性。
同时，血清学实验还可以进行质控，通过与已知阳性和阴性样本进行对照，确保实验结果的正确性。
5. 应用广泛：血清学实验在临床医学、流行病学调查和基础研究等领域都有广泛的应用。
在临床医学中，血清学实验可以用于疾病的诊断和鉴定，如病毒感染、细菌感染、寄生虫感染等；在流行病学调查中，血清学实验可以用于疫情监测和疫苗评价；在基础研究中，血清学实验可以用于研究机体的免疫应答机制、抗体的产生和功能等。
总结起来，血清学实验具有高度特异性、高灵敏度、多样性、可靠性和广泛应用等特点。
它是研究免疫应答的重要实验方法，可以提供重要的免疫学信息，为疾病的诊断、预防和治疗提供依据。
通过不断改进和创新，血清学实验将在免疫学领域发挥越来越重要的作用。
项目一 免疫血清的制备与提纯
项目一免疫血清的制备与提纯一、免疫血清的制备(Preparation of antiserum)【实验原理】将适当的免疫原物质注入动物体内，经一段时间动物血清中可出现大量特异性抗体，这种含抗体的血清称为抗血清(或免疫血清)。
它在血清学检测中有广泛应用。
理想的抗血清的产生主要取决于抗原的纯度和免疫原性，以及动物的应签性。
同时免疫接种时的免疫途径、抗原剂量、有无佐剂、注射次数及间隔时间等因素均可影响抗血清的质量。
制备的抗血清可直接用于某些实验，也可从中提取特异性抗体或某一组分。
下面介绍几种常用的免疫血清制备方法，免疫动物均选用家兔，这是因为：(1)其产生的血清量足够实验应用并容易驯养；(2)为采血、注射用耳血管很容易找到；(3)用兔子作免疫接种的资料较多，可方便利用；(4)能产生高效价抗体，并且可用常用的沉淀反应、凝集反应或溶血、溶菌反应等试验方法进行鉴定。
【试剂和器材】1．免疫动物2～3kg健康雄性家兔。
2．免疫原绵羊红细胞(SRBC)、OX19变形杆菌、人IgG(SPA菌体吸附)、正常人混合血清、牛血清白蛋白(BSA)、聚丙烯酰胺凝胶分离的蛋白质抗原。
3．佐剂完全和不完全福氏(Freund)佐剂。
4．其它试剂生理盐水、70%酒精等。
5．器材注射器及针头、棉球、三角烧瓶、玻璃珠、试管、吸管、柯氏瓶(扁瓶)、Luer-lock(双联)注射器、止血钳、手术剪、手术刀等，以上器材均应高压灭菌或消毒后使用；离心机、液体旋转混合器、温箱、水浴箱、冰箱等。
【步骤和方法】(一)溶血素的制备1．制备抗原取脱纤维羊血或用阿氏(Alsever)液保存的绵羊红细胞(采血方法见附录常用实验动物采血方法)，用生理盐水洗３次，每次加2～3倍生理盐水，离心2000r/min 10min，弃上清。
最后一次按压积用生理盐水配成10%SRBC悬液，放４℃保存备用。
2．免疫动物家兔耳缘静脉注射10%SRBC悬液1ml，间隔3天，连续7次，末次免疫后2周，由耳静脉取血1ml(取血方法见附录常用实验动物采血方法)，分离血清，测定溶血素效价(见补体结合试验)，当效价≥1:2000则可放血收集血清，此法效价可达1:6000~1:10000。
临床免疫血清学专业检验项目
临床免疫血清学专业检验项目
临床免疫血清学专业是临床检验医学的重要分支，其检验项目包括以下内容：
1. 免疫球蛋白检测：包括IgA、IgG、IgM等免疫球蛋白的定量测定，可用于诊断免疫性疾病、感染等。
2. 自身抗体检测：通过检测患者血液中的自身抗体水平，可诊断自身免疫性疾病。
3. 微量抗体检测：通过检测血液中微量抗体的水平，可对感染性疾病进行早期诊断。
4. 免疫功能检测：包括淋巴细胞亚群、NK细胞等免疫功能指标的检测，可评估患者免疫系统的功能状态。
5. 细胞因子检测：检测各种细胞因子水平的变化，可用于诊断免疫性疾病、炎症反应等。
6. 肿瘤标志物检测：通过检测血液中的肿瘤标志物水平，可进行肿瘤诊断和疗效监测。
以上是临床免疫血清学专业的一些常见检验项目，其检测结果对于临床诊断和治疗具有重要意义。
- 1 -。
12 经典血清学试验
十二章经典血清学实验一、名词解释凝结性实验：按照是否产生凝结现象，用已知抗体或抗本来判定相应（未知）抗原或抗体的免疫反应。
凝集反应：细菌，红细胞等颗粒性抗原，或吸附在颗粒性载体表面的可溶性抗原，与相应抗体发生特异性反应，在适当电解质存在下，经过一段时光形成肉眼可见的凝集现象。
反应中的抗原称为凝集原，反应中的抗体称为凝集素。
直接凝集反应：颗粒性抗原与相应抗体直接发生特异性结合并浮上肉眼可见的凝集现象称为直接凝集反应。
间接凝集反应：将可溶性抗原（或抗体）吸附在一种与免疫无关的惰性载体颗粒表面，使其成为致敏载体，然后与相应抗体（或抗原）结合，在电解质存在的条件下发生凝集的现象。
葡萄球菌A蛋白（SPA）：是金黄色葡萄球菌的特异性表面抗原，能与IgG分子的Fc片段结合，当SPA-Ab与相应抗原结合时，就可产生协同凝集反应。
HA：有些病毒具有能凝集某种哺乳动物和禽类红细胞的特性，依此特性建立的检测主意称为病毒血凝实验。
HI：按照病毒的特异性抗体可以抑制血凝现象建立的检测主意称为血凝抑制实验。
沉淀反应：可溶性抗原与相应抗体结合，在适量电解质存在的条件下，形成肉眼可见的白色沉淀。
参加沉淀反应的可溶性抗原称为沉淀原，抗体称为沉淀素。
琼脂免疫蔓延：抗原，抗体在琼脂凝胶中蔓延，当二者在比例适当处相遇，即发生沉淀反应。
反应的沉淀物因颗粒较大，故在凝胶中不再蔓延，而形成沉淀带。
电泳：带电质点在电场中向着带异向电荷的电场移动。
免疫电泳：由琼脂双蔓延与琼脂电泳技术结合的实验。
凝集价/滴度/抗体效价：浮上50%以上凝集的血清最大稀释度为该血清的凝集价。
沉淀价：环状沉淀实验时，以浮上白色沉淀环的最高抗原稀释倍数作为沉淀素的效价，即沉淀价。
中和指数：在尽头法中和实验中，使病毒感染力减少至50%的血清中和效价称为中和指数。
中和效价：中和实验中，被检血清中抗体中和病毒的能力。
病毒的毒价：引起半数感染动物死亡的病毒最小量。
第1页/共5页二、简答题1.凝集反应和沉淀反应的基本类型有哪些？有何用途？2.凝集反应和沉淀反应的区别？（凝集反应和沉淀反应各有什么特点？）3.琼脂凝胶免疫蔓延实验有哪些不同的主意？举例说明它们的用途？抗原，抗体在琼脂凝胶中蔓延，当二者在比例适当处相遇，即发生沉淀反应。
血清学鉴定实验-PPT
O抗原、H抗原和Vi抗原
❖ O抗原:是一种沙门氏菌细胞壁表 面的耐热多糖抗原 ，100 ℃，2.5 h不 被破坏，它的特异性依赖于细胞壁脂多
糖侧链多糖的组成。
❖
H抗原:是一种蛋白质性鞭毛抗
原，共有63种，60 ℃加热30～60 min
及酒精作用均可破坏其抗原性，但能抵
抗甲醛。
❖ Vi抗原: 是一种N-乙酰-D-半乳糖 胺糖醛酸聚合物，60 ℃加热1 h即破坏
❖血清型以数字和字母表源自.例如:查考夫曼-怀特沙门氏菌属抗原表.
鼠伤寒沙门氏菌: O抗（1，4，[5]，12），
第Ⅰ相H抗原（i）
第Ⅱ相H抗原(1,2)。
它的血清型应表示为:鼠伤寒沙门氏菌（ 1，4，[5]，12：i：1，
2）
❖ [ ]内的O抗原可能存在或不存在。
❖ [ ]内的H抗原可能是罕见的，正常情况下一般不存在。
18
❖
用O、H 和Vi因子血清与待检的菌株作玻片凝聚试验。
1.先用O因子血清确定菌株所属的 O群及O抗原的各种成分。
2.再用H因子血清检查其第1相和第2相的H抗原以确 定血清型 。
3.必要时还要用Vi血清检查(目前有3种)。
沙门氏菌的血清鉴定的方法
19
沙门氏菌的血清型鉴定步骤
1. 先用A~F多价O血清检查，确定菌株是否在A~F六个O群的范围内。 2. 再用代表六个O群的O因子血清检查，即O2（A）、O4（B）、O7（C1）、 O8（C2）、O9（D）、O3，10（E）、O11（F）。 3. 确定O群之后，分别用HA(a、b、c、d、i、z10、z29）HB、HC、HD四种多 价H血清检查。 4. 用3.所确定的多价H血清所包括的所有H因子血清逐一检查定为第1相或第 2相H抗原。 5. 检出第1相H抗原而未检出第2相H抗原，或检出第2相H抗原而未检出第1相 H抗原的，要用位相变异的方法再检查其另一个相。单相菌不必作位相变异 检查。 6. 综合O和H因子血清以及Vi因子血清的检查结果，按照考夫曼-怀特沙门氏 菌属抗原表解判定沙门氏菌的菌型。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
沉淀反应一、沉淀反应-双向免疫扩散试验
原理 用半固体琼脂凝胶作为介质，可溶性抗原、抗体在其中能 用半固体琼脂凝胶作为介质，可溶性抗原、 自由扩散。 自由扩散。将可溶性抗原和抗体分别加入琼脂板上相对应 的孔中，两者各自向四周扩散，如果抗原和抗体相对应， 的孔中，两者各自向四周扩散，如果抗原和抗体相对应， 则在两者比例适当处形成白色沉淀线。 则在两者比例适当处形成白色沉淀线。
实验步骤
配制1%琼脂：用生理盐水配制， 配制1%琼脂：用生理盐水配制，加热溶解 1%琼脂 制板：趁热将3.5ml 3.5ml融化琼脂水平铺在玻 制板：趁热将3.5ml融化琼脂水平铺在玻 片上， 片上，室温下冷却凝固 6 打孔： 打孔：用打孔器按图示打孔 control 稀释抗体： EP管 稀释抗体：取5支EP管，将抗体倍比稀释 加样：周围孔加入不同稀释度的抗体， 加样：周围孔加入不同稀释度的抗体，中 5 间孔加入抗原 琼脂板放入湿盒内， 4℃，24-48小时后 琼脂板放入湿盒内，置4℃，24-48小时后 观察结果。 观察结果。
存在三种不同的抗原
两个样品为同一抗原
两个样品部分相同
二、凝集反应 原理
颗粒性抗原(完整的病原微生物或红细胞等) 颗粒性抗原(完整的病原微生物或红细胞等)与相应 抗体特异性结合，在有电解质存在的条件下，形成肉眼可 抗体特异性结合，在有电解质存在的条件下， 见的凝集团块。 见的凝集团块。
基本类型
直接凝集反应、间接凝集反应、凝集抑制反应等。 直接凝集反应、间接凝集反应、凝集抑制反应等。
1 2 Ag 3 4
倍比稀释法
样 品 管 100µL 管 一 第 100µL 管 二 第 100µL 管 四 第
100µL
100µL
100µL
100µL
1:4
1:8
1:16
1:64
结果判断
1 6 2
5 4
3
应用
测定抗体的效价 用特异性抗体检测抗原 检查抗原和免疫血清的特异性、纯度或浓度， 检查抗原和免疫血清的特异性、纯度或浓度，比较抗 原之间的异同点
主要材料
器材：载玻片、EP管 微量加样器、枪头、打孔器、 器材：载玻片、EP管、微量加样器、枪头、打孔器、 注射器针头 试剂：生理盐水、琼脂粉、 试剂：生理盐水、琼脂粉、 抗原（正常小鼠IgG IgG）、 抗原（正常小鼠IgG）、 抗体（兔抗小鼠IgG血清） IgG血清 抗体（兔抗小鼠IgG血清）
双向免疫扩散试验 直接凝集试验
抗原（ 抗原（antigen, Ag）: ） 能够刺激机体产生抗体和致敏淋巴细胞 并能与之特异 能够 刺激机体产生抗体和致敏淋巴细胞， 并能与之 特异 刺激机体产生 抗体和致敏淋巴细胞， 性结合的物质 的物质。 性结合的物质。
抗体( 抗体(antibody, Ab)： ) 细胞识别抗原后增殖分化为浆细胞所产生的可特异 B细胞识别抗原后增殖分化为浆细胞所产生的可特异 性结合抗原的一组糖蛋白 的一组糖蛋白。 性结合抗原的一组糖蛋白。
直接凝集实验（ABO血型鉴定） 直接凝集实验（ABO血型鉴定） 血型鉴定
主要材料
器材：酒精棉球、灭菌干棉球、微量加样器、 器材：酒精棉球、灭菌干棉球、微量加样器、 灭菌枪头、玻片、 灭菌枪头、玻片、一次性采血针 试剂 试剂（蓝色） 试剂（黄色） 抗A试剂（蓝色）、抗B试剂（黄色）
实验步骤
干净玻片上分别滴加抗A、抗B试剂各一滴 干净玻片上分别滴加抗A 酒精棉球消毒无名指， 酒精棉球消毒无名指，采血针采血 用加样器加末梢血各1 用加样器加末梢血各1滴 不断转动玻片，使血液与试剂充分混匀，静止1 不断转动玻片，使血液与试剂充分混匀，静止1-2min 左右， 左右，观察结果 A
抗原抗原-抗体反应的基本检测方法
凝集反应(agglutination):颗粒性抗原与抗体的反应。 凝集反应(agglutination):颗粒性抗原与抗体的反应。 (agglutination):颗粒性抗原与抗体的反应 沉淀反应(precipitation):可溶性抗原与抗体的反应。 沉淀反应(precipitation):可溶性抗原与抗体的反应。 (precipitation):可溶性抗原与抗体的反应 补体参与的反应 免疫标记技术（ technique） 免疫标记技术（immunolabelling technique）:用示踪物质标记 抗原或抗体，进行抗原-抗体反应的检测。 抗原或抗体，进行抗原-抗体反应的检测。
抗 A
B
抗 B
结果判断
血型 A B 0 AB
抗A试剂 + +
抗B试剂 + +
注意事项 注意无菌操作 滴加血液时，不要使枪头尖触及试剂 滴加血液时，