菌种活化_操作方法之令狐文艳创作
菌种活化保存法
附件：新菌株（乳酸菌）斜面培养法1.购买新菌株（安瓿瓶装冻干粉）2.菌种管开启方法一：按购买菌种上的说明进行操作即可。
3.菌种管开启方法二（本次实验方法均在水平层流台进行）：3.1水平层流台开启风机跟紫外灯，半个小时3.2 用浸过75 ％酒精的脱脂棉擦净菌种管。
3.3将菌种管顶端在火焰上加热，注意避免直接加热菌体或加热过度。
3.4 将无菌水滴至加热过的菌种管顶端，使玻璃开裂。
3.5 用锉刀或镊子敲下已开裂的菌种管的顶端。
4.用玻璃三角瓶121.0℃灭菌约10-30ml的生理盐水20分钟5.将开封后的冻干粉倒入生理盐水中，摇匀6.用接种环沾取生理盐水，转接与MRS培养基平板上，在36.5℃中恒温培养48-72小时后，得到二代菌。
7.此时可以使用二代菌进行菌株扩大培养，或对其进行保存菌种。
注意事项：1 菌种活化前，请将冻干菌种管冷藏保存在5 ℃-10 ℃环境下。
3 菌种经过冷冻干燥后，生长延迟期较长，需连续两次继代培养才能正常生长。
4 菌种活化及使用过程应做好安全防护工作。
第二代第2 代)观察是否具有典型的菌落形态,然后挑取单一的纯菌落,进行革兰染色、镜检,观察其染色特征及菌体形态,并进一步做生化鉴定实验以确定菌种。
第三代为工作用菌。
乳酸菌菌种保存法方法一：斜面保存法（略）方法二：20%甘油保存法器材：冻存盒、冻存管(2ml装)、甘油（丙三醇）、MRS肉汤培养基、1ml移液器及枪头、酒精灯、水平层流台、高压灭菌锅操作步骤：1.在水平层流台中用接种环挑取所需保存的的菌株放于灭菌过的MRS肉汤培养液，进行36.5℃恒温培养48小时2.配制40%的甘油，用移液器移取0.5ml于冻存管中，放于冻存盒3.用报纸将冻存盒包扎好，放于灭菌锅中灭菌（121.0℃、20Min）4.在水平层流台中，用移液器移取0.5ml培养后的MRS肉汤培养液加入到冻存管中，拧紧盖子，摇匀，标识。
5.在冻存盒外也做好操作人，日期，所保存的菌种等信息标记6.将冻存盒放于保鲜袋中，放入冰箱的冷冻室层进行保存，一般可以保存至两三年。
野生菌中毒诊断及治疗之令狐文艳创作
野生菌中毒诊断和治疗令狐文艳毒蕈中毒是许多地区常见的临床急诊。
由于毒草种类众多，所含的毒素类型更是纷繁复杂，各种毒蕈中毒引起的临床症状以及累及的脏器损害也迥然不同，目前尚无统一的中毒分型及治疗规范。
新近国外学者提出按早发(＜6h)中毒型、迟发(6～24h)中毒型和缓发(＞24h)中毒型分为三型，每型再按不同表现分成若干亚型，并据此提出相应的诊治措施。
病因病理毒蕈所含毒素随品种不同而异，其发病机制亦不同。
如含毒蕈碱，主要是刺激兴奋神经节后胆碱能神经；含溶血毒素(如马鞍蕈酸等)，作用于红细胞使之溶解；含肝毒素(如毒肽和毒伞肽等)则作用于肝细胞，引起肝坏死；而神经毒素(如异嗯唑类衍生物、蟾蜍素等)作用于神经系统，出现神经精神症状；含有吲哚的毒蕈，可致振荡和幻觉，系由于致幻素所致。
1．神经系统表现中毒表现因毒素的种类不同而不同，中枢神经损害症状可有流涎、瞳孔缩小、精神错乱、妄想、嗜睡、昏迷等。
2．全身表现一般早期多为胃肠道症状，轻者胃肠道症状消失后即痊愈，严重者可经l～3天的虚假恢复期，除出现神经精神障碍外，出现广泛出血、肝肾功能衰竭、呼吸或周围循环衰竭而死亡。
检验余食物或胃内容物中检出毒蕈，必要时可用胃内容物或剩余食物的抽提液作毒蕈碱的动物毒性试验。
一、诊断要点1．详细询问病史，发病前有进食蘑菇史。
2．发病情况呈多人同食、同时发病。
3．发病与进食时间常在进食后数小时内发病，一般为1～6小时，短者数十分钟，长者十余小时。
二、临床分型1．胃肠型多见于粉褶蕈属、乳菇属、白菇属等中毒。
此型发病多在进食后0．5～2小时。
临床表现为：恶心呕吐，腹痛腹泻，重者频繁呕吐，剧烈腹痛，大便呈稀水样，可有少量黏液及红细胞，严重者可出现脱水、电解质紊乱、腓肠肌痉挛，甚至休克、肾功能不全等。
2．毒蕈碱样症状型多见于捕蝇蕈、斑毒蕈等中毒。
约在进食后数十分钟～数小时发病。
临床表现为内脏平滑肌的痉挛，如腹痛腹泻、恶心呕吐、呼吸困难、流涎、流泪、多汗、喉中痰鸣；瞳孔缩小、视物模糊。
菌种活化操作步骤
菌种活化操作步骤引言：菌种活化是一项重要的实验室技术，用于使冷冻保存的微生物菌种恢复活力并进行后续研究。
本文将介绍菌种活化的操作步骤，以帮助读者正确进行实验并获得可靠的结果。
一、准备工作1.1 材料准备确保准备好以下实验材料：- 冷冻保存的菌种样本- 无菌培养基- 无菌培养皿或试管- 灭菌的移液器和吸头- 灭菌的培养箱或恒温培养箱- 无菌操作台或洁净工作台1.2 环境准备在进行菌种活化之前，必须确保实验环境的无菌和洁净。
清洁操作台或洁净工作台，并使用适当的消毒剂擦拭工作表面。
同时，确保培养箱或恒温培养箱已经预热到适当的温度。
二、菌种活化步骤2.1 无菌操作在进行菌种活化之前，务必进行无菌操作。
戴上手套，使用灭菌的移液器和吸头，避免任何外界污染。
2.2 菌种接种将冷冻保存的菌种样本取出，迅速将其转移到无菌培养基中。
使用移液器，将适量的菌种悬浮液滴入无菌培养皿或试管中。
确保每个培养皿或试管只接种一种菌种。
2.3 培养条件设置根据菌种的特性，设置适当的培养条件。
这包括温度、pH值、培养基成分等。
将接种好的培养皿或试管放入预热好的培养箱或恒温培养箱中。
2.4 培养过程管理在菌种活化的过程中，需要定期观察和管理培养过程。
这包括检查培养皿或试管中的菌落形态和生长情况，以及调整培养条件，如温度和培养基的补充。
2.5 菌种分离与保存当菌种活化成功后，可以进行菌种分离和保存。
使用无菌技术，将菌落转移到新的培养皿或试管中，并进行进一步的鉴定和研究。
同时，将一部分菌种保存在冷冻条件下，以备将来使用。
结论：菌种活化是一项关键的实验技术，为后续的微生物研究提供了可靠的菌种资源。
通过正确的操作步骤，可以成功地活化冷冻保存的菌种，并获得可靠的实验结果。
在进行菌种活化实验时，务必遵循无菌操作规范，并根据菌种的特性进行适当的培养条件设置和管理。
这将有助于保证实验的准确性和可重复性，为微生物研究提供坚实的基础。
兽医生物制品名词解释重点之令狐文艳创作
兽医生物制品：根据免疫学原理，利用微生物、寄生虫及其代谢产物或免疫应答物制备的一类物质。
作为诊断、治疗、预防特定传染病或其它疾病的制剂。
令狐文艳普通制品：利用一般生产方法制备的，未经浓缩、纯化处理所制成的。
精制品：将原材料用物理或化学方法去除无效成分,并进行适当浓缩所制成的。
单价制剂：只利用一种微生物的单一血清型多价制剂：利用一种微生物的若干血清型多联苗：一次注射可以预防多种疾病的疫苗。
疫苗：由病原微生物、寄生虫及其组分或代谢产物制成，接种动物后能产生主动免疫，从而预防疾病的一类生物制剂。
传统疫苗：利用微生物或寄生虫或代谢产物等完整个体制成的疫苗。
死疫苗又称灭活苗：是将病原体经理化方法灭活后，丧失感染性保持其免疫原性制成的疫苗。
弱毒苗：将微生物的自然强毒株通过化学、物理或生物学方法，使其对原宿主动物致病力丧失或只引起亚临床感染，但仍保存良好抗原性；以此人工致弱的毒株制备的疫苗。
类毒素：是用细菌产生的外毒素经甲醛处理，去除毒性作用，保留抗原性后精制而成。
亚单位疫苗：是指提取微生物有效抗原部分，利用一种或几种亚单位结构成分制成的疫苗。
基因工程亚单位疫苗：是指它只含有病原体的一种或几种抗原基因，通过基因重组技术转入适当的细菌、酵母菌或哺乳动物细胞，以获得的表达产物作为免疫原制成的疫苗。
基因工程活疫苗：病原微生物通过基因工程技术删除其致病基因或部分片段从而获得毒力丧失或降低的毒株而制成的疫苗。
基因缺失疫苗：利用基因工程技术，使致病的病原体基因组中某个或某些与致病性相关的基因或非必要糖蛋白缺失构建而成。
重组载体疫苗：将目的病原保护性抗原的基因序列插入到另一种微生物的无毒株或弱毒株基因组中，并让插入的外源性基因正常表达，构建成重组载体疫苗株。
核酸疫苗：是将一种或多种抗原编码基因克隆到真核表达质粒载体上，将构建的重组质粒直接注入到体内而激活机体免疫系统。
合成肽疫苗：用人工方法按天然蛋白的氨基酸顺序合成保护性短肽，然后与载体蛋白连接后加佐剂所制成的疫苗。
2018-2019-活化步骤-范文模板 (6页)
本文部分内容来自网络整理，本司不为其真实性负责，如有异议或侵权请及时联系，本司将立即删除！== 本文为word格式，下载后可方便编辑和修改！ ==活化步骤篇一：菌种活化步骤总结一下菌种活化需要以下几个步骤：第一配置菌种适宜生长的培养基第二将菌种从保藏状态恢复到室温状态，比如将冷冻的菌种解冻第三将通过操作将保藏的菌种接种到培养基中培养，此步骤称为菌种复壮第四步挑选培养基茁壮的菌落，挑选其中部分菌落接种到新的培养基中培养，重复此步骤2-3次，从而得到生长良好的菌落经过这四个步骤就到达将菌种从保藏状态活化的目的篇二：ACF活化步骤ACF活化步骤说明：F4：反洗出水阀F6：活化进水阀F7：活化出水阀F8：空气排空阀步骤：1. 反洗将要活化的ACF 15-20分钟，小流量排水3分钟2. 将其他未活化的ACFF7打开排水1分钟3. 打开将要活化的ACF的F6，F7，F8阀门4. 确认板式换热器循环侧各阀门均为开启状态5. 打开热水消毒水泵6. 将板换蒸汽侧的排冷凝水阀打开排冷凝水，之后关闭7. 缓慢打开板换蒸汽进口阀门，开始ACF升温8. 待ACF温度升至95℃以上时，打开其他未活化的ACF的F4和F6，冲洗10秒后关闭9. 进入保温阶段，时间不少于2小时10. 保温将要结束时，打开此ACF的两个取样阀，冲洗10分钟后关闭，保温结束，关闭F811. 关闭板换蒸汽进口阀，打开进UF水阀，进入循环降温阶段12. 当ACF温度降至40℃以下冷却降温结束，关闭热水消毒水泵，关闭所有阀门13. 进行ACF反洗，正冲，结束后立即投入使用篇三：斯列普活化炉使用流程官网地址：斯列普活化炉使用流程物料流程：物料进入加料槽后，借重力作用沿着产品道缓慢下行，依次经过预热带、补充炭化带、活化带、冷却带，完成全部活化过程，最后由下部卸料器卸出。
炭化预热段利用炉内热量预热除去水分。
在补充炭化段，炭化料被高温活化气体间接加热使炭的温度不断提高进行补充炭化。
菌种活化文档
菌种活化引言菌种活化是指通过一系列方法和条件，使得休眠状态的菌种恢复到活跃状态的过程。
活化菌种具有较高的代谢活性和生物活性，能够更好地应用于微生物学研究、工业生产以及医学领域。
本文将介绍常见的菌种活化方法和条件，以及菌种活化的应用。
菌种活化方法预处理在开始菌种活化前，通常需要对菌种进行一些预处理步骤。
首先，需要将菌种从低温储存条件中取出，并进行适当的复苏。
复苏方法包括将冻存的菌种转移至适宜的培养基中，并进行培养。
此外，还可以通过亚培养基转接、胶体水合等方法来有效地活化菌种。
培养条件的优化合适的培养条件对于菌种的活化十分重要。
首先，要选择适宜的培养基配方，其中包括碳源、氮源、矿盐、辅助因子和调节剂等。
此外，还应考虑到温度、pH值、氧气含量和培养时间等参数的优化。
通过对这些因素的调节和优化，可以提高菌种的活化效率和产量。
生物刺激物的应用生物刺激物是促进菌种活化的重要手段之一。
常见的生物刺激物包括细胞壁成分、抗生素、激素和激活因子等。
这些物质可以刺激菌种的代谢活性，促进细胞分裂和生长。
通过合理选择和使用生物刺激物，可以显著提高菌种的活化率。
物理因子的调节物理因子对于菌种的活化同样具有重要的影响。
常用的物理刺激包括温度、压力、光照和辐射等。
通过适当调节这些物理因子，可以激活菌种的代谢过程，促进细胞的生长和繁殖。
然而，需要注意的是，过高或过低的物理参数可能会对菌种的生长造成不良影响，因此应进行合理的控制和调节。
菌种活化的应用微生物学研究菌种活化在微生物学研究中具有重要意义。
通过活化菌种，可以获得更多的微生物样品和菌株，以进一步研究其生物学特性和代谢途径。
此外，活化菌种还可以用于微生物遗传实验、基因工程和酶制剂的生产等方面。
工业生产在工业生产中，活化菌种可以作为发酵生产的起始物种。
通过优化培养条件和菌种活化方法，可以提高发酵过程中的产量和质量。
活化菌种还可以应用于微生物制药、食品加工和环境修复等领域，为工业生产提供高效可靠的微生物资源。
杀菌剂配方之令狐文艳创作
Bronopol令狐文艳2-溴-2-硝基-1.3-丙二醇0.02-0.1%能有效抑制大多数细菌，特别是对革兰氏阴性菌抑菌效果极佳，排放无残留，与水可以混溶，可广泛使用在日化、有效物含量≥99％，使用PH范围4-8，在高温和碱性条件下不稳定，在太阳光照下颜色变深。
与含有-SHTBZ {N/2}-特-丁基-{N/4}-乙基-6-甲硫基-1，3，5－三嗪-2，4二胺0.02-0.2%广谱高效，使用量低，无VOC,不含金属盐和APE表面活性剂，与所有表面活性剂和其他成分相溶可以分散成不同浓度的分散液，化学性质在pH 2-12稳定；用后无残留，对环境无影响OIT 2-辛基-4-异噻唑啉-3-酮1-3%低毒、高效、广谱型防霉剂，强光和高温下稳定，杀菌广谱高效，可有效防止塑料中的细菌和真菌。
有效物含量≥99％，可广泛应用于涂料、油漆、润滑油、鞋油、皮革化学、木材制品和文物保护等诸多产品中，MIT 2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮50-600PPM毒性低，排放无残留，与各种乳化剂、表面活性剂及蛋白质成份配伍性好有效物含量≥99％，适用的pH范围pH2.0-12.0，与水混溶，可以在任何工序加入，容易操作。
IPBC 碘代丙炔基氨基甲酸酯50-800PPM用于防止霉菌，酵母菌及大肠菌的一类高效防腐抗菌剂，与其它的杀菌剂和抗菌剂复配性很好。
有效物含量≥99％，可有效杀灭真菌类、黑曲霉、青霉（草兰氏细菌）、球状毛壳菌（大肠杆菌）、白色念球菌DMDMH 1.3-羟甲基-5,5-二甲基乙内酰脲100-1000PPM与阳离子、阴离子、非离子表面活性剂、蛋白质配伍性良好。
加热到60℃也不会变色。
有效物含量≥55％，无色液体透明，适用的pH范围pH2.0-12.0DDAC 氯化二甲基双癸基铵80-300PPM用于杀菌剂、水处理和乳液、稀有金属萃取、废水处理、金属抗蚀剂等阳离子两性表面活性剂有效物含量50-70％，也可以用于内外墙涂料表面、机器设备、硬覆盖等表面、生产容器及环境的杀菌消毒处DCOIT 4，5-二氯-N-辛基-4-异噻唑啉-3-酮1-5%抗菌剂防腐剂，有效杀灭青微菌、擔子菌、黑麴菌、镰胞菌、弯孢黴、绿粘扫霉等有效物含量≥98％，最新的慢释技术，广谱高效的杀灭细菌，真菌，海藻和其他海洋生物，不含重金属BIT 1.2-苯并异噻唑啉-3-酮50-500PPMBIT是各种高档产品的杀菌防腐剂，医药制品的中间体、实验室试剂。
菌种活化方法
低温保存管（cryo tube）中之一般菌种临时存放及活化A. 低温保存管之临时存放及解冻1. 低温保存管（cryo tube）应存放于－20℃ ~ －80℃之低温条件下。
2. 准备 37℃之 70﹪（V/V）酒精浴槽（只能在电气水浴槽中改放酒精，不可以火加温，以免危险；若以 37℃水浴取代，应避免水中微生物污染），其中事先安放小试管架（可放置 cryotube 之大小），液面不可高达管塞。
3. 将 cryotube 从低温保存条件中取出，置于 37℃浴槽之小试管架上。
4. 不断轻微摇动 cryotube，液面不可高至管塞，直至结冰完全溶解（约需 2 分钟）。
B. 菌株活化: 在无菌操作下1. 用无菌微量吸管，从已溶解之 cryotube 吸取 50 ?l（或 1 ~ 2 滴）之菌液，滴入固态指定培养基(培养基编号及温度示于菌株订购单)某一边缘附近，以划线法接种于培养基。
2. 将接种好的培养基置于指定温度的培养箱中培养。
C. 划线法1. 手持金属接种环，用酒精灯将接种环（共约 5 公分）烧至火红，并不断来回烧烤金属固定杆之前约 10 公分，等待约 10 秒钟，将接种环前端轻触培养基边缘凝胶（无菌体部份），待接种环完全冷却后，以环沾黏菌滴，由培养基边缘向中央轻轻横划紧接的并行线，直到涵盖 1/3 培养基为止（I 区）。
2. 灼烧接种环，待数秒冷却后，旋转培养基自 I 区涂布的边缘再横划数条线到未接种的区域（II 区）。
3. 重复 2. 的动作完成 III 区与 IV 区。
4. 灼烧接种环，将接种环归位。
D. 图示（1）金属接种环（2）平板划线法冷冻干燥管之开管说明下列步骤请在无菌环境下操作：1、以沾有70%酒精的棉花，擦拭外管，在火焰上加热外管之尖端。
2、滴数滴无菌水于加热处，使外管破裂，再以硬棒敲破尖端。
3、取出隔热纤维纸和内管，以灭菌过的镊子取出内管之棉塞。
4、( a ) 适用于细菌用无菌吸管，吸取0.3-0.5 ml指定之液体培养基，滴入内管内，并轻微震荡（可用该吸管协助），直到均匀悬浮。
菌种活化保存法
附件：新菌株（乳酸菌）斜面培养法1.购买新菌株（安瓿瓶装冻干粉）2.菌种管开启方法一：按购买菌种上的说明进行操作即可。
3.菌种管开启方法二（本次实验方法均在水平层流台进行）：3.1水平层流台开启风机跟紫外灯，半个小时3.2 用浸过75 ％酒精的脱脂棉擦净菌种管。
3.3将菌种管顶端在火焰上加热，注意避免直接加热菌体或加热过度。
3.4 将无菌水滴至加热过的菌种管顶端，使玻璃开裂。
3.5 用锉刀或镊子敲下已开裂的菌种管的顶端。
4.用玻璃三角瓶121.0℃灭菌约10-30ml的生理盐水20分钟5.将开封后的冻干粉倒入生理盐水中，摇匀6.用接种环沾取生理盐水，转接与MRS培养基平板上，在36.5℃中恒温培养48-72小时后，得到二代菌。
7.此时可以使用二代菌进行菌株扩大培养，或对其进行保存菌种。
注意事项：1 菌种活化前，请将冻干菌种管冷藏保存在5 ℃-10 ℃环境下。
3 菌种经过冷冻干燥后，生长延迟期较长，需连续两次继代培养才能正常生长。
4 菌种活化及使用过程应做好安全防护工作。
第二代第2 代)观察是否具有典型的菌落形态,然后挑取单一的纯菌落,进行革兰染色、镜检,观察其染色特征及菌体形态,并进一步做生化鉴定实验以确定菌种。
第三代为工作用菌。
乳酸菌菌种保存法方法一：斜面保存法（略）方法二：20%甘油保存法器材：冻存盒、冻存管(2ml装)、甘油（丙三醇）、MRS肉汤培养基、1ml移液器及枪头、酒精灯、水平层流台、高压灭菌锅操作步骤：1.在水平层流台中用接种环挑取所需保存的的菌株放于灭菌过的MRS肉汤培养液，进行36.5℃恒温培养48小时2.配制40%的甘油，用移液器移取0.5ml于冻存管中，放于冻存盒3.用报纸将冻存盒包扎好，放于灭菌锅中灭菌（121.0℃、20Min）4.在水平层流台中，用移液器移取0.5ml培养后的MRS肉汤培养液加入到冻存管中，拧紧盖子，摇匀，标识。
5.在冻存盒外也做好操作人，日期，所保存的菌种等信息标记6.将冻存盒放于保鲜袋中，放入冰箱的冷冻室层进行保存，一般可以保存至两三年。
菌种活化操作方法
分析检测T logy科技菌种活化操作方法菌种是我国重要的生物资源，保藏适当的菌种需要正确的活化方法来获得纯培养物，本文结合多年从事食品微生物检验的工作经历，简要介绍常规的菌种活化操作方法。
菌种活化就是将保藏状态的微生物菌种放入适合其生长繁殖的的培养物中进行培养，通过逐级扩大培养进而获得活力旺盛、数量足够的纯培养物。
通常我们工作中使用的工作菌种需经过要2-3代的复壮过程，因为菌种的保存条件以及培养条件不尽相同，所以需要活化让菌种逐渐适应培养环境[1]。
一般菌种临时存放及活化方法采用低温保存管保存菌种，应存放于－20℃ ~ －80℃的低温条件下。
准备36±1℃的70-75﹪酒精浴槽（若以水浴取代，应确保所用水中微生物污染得到控制），事先应在浴槽放置小试管架或保存管架等，液面要低于管塞或管盖。
将低温保存管从低温保存条件中取出，置于36±1℃的浴槽内的管架上。
不断轻微摇动低温保存管，液面不可高至管塞，直至冰完全溶解（大概需要2min左右）。
无菌培养操作方法用无菌微量吸管，从已溶解的低温保存管中吸取1-2滴菌液，滴入指定的固态培养基一边缘附近，以划线或涂布法接种于培养基。
也可用灭菌金属环蘸取菌液后，以划线或涂布法接种于培养基。
待菌液吸收完全后，将接种好的培养基倒置放于指定温度的培养箱中进行培养。
平板划线分离操作方法平板划线分离法是指把混杂在一起的微生物用接种环在平板培养基表面通过分区划线稀释，经培养后生长繁殖成单菌落，通常把这种单菌落当作待分离微生物的纯种。
有时这种单菌落并非都由单个细胞繁殖而来的，所以要反复分离多次才可得到纯菌种。
手持金属接种环，将接种环（共约5公分）置于酒精灯外焰烧至火红，并不断来回烧烤金属固定杆之前约10公分，等待几秒钟后，将接种环前端轻触培养基边缘凝胶，待接种环彻底冷却后，沾黏菌滴，由培养基边缘向中央轻轻横划，直到涵盖1/3培养基为止。
灼烧接种环，冷却后，旋转培养基自1区涂布的边缘再横划数条线到未接种的区域。
菌种活化_操作方法
低温保存管（cryotube）中之一般菌种临时存放及活化A. 低温保存管之临时存放及解冻1. 低温保存管（cryotube）应存放于－20℃ ~ －80℃之低温条件下。
2. 准备 37℃之 70﹪（V/V）酒精浴槽（只能在电气水浴槽中改放酒精，不可以火加温，以免危险；若以 37℃水浴取代，应避免水中微生物污染），其中事先安放小试管架（可放置 cryotube 之大小），液面不可高达管塞。
3. 将 cryotube 从低温保存条件中取出，置于 37℃浴槽之小试管架上。
4. 不断轻微摇动 cryotube，液面不可高至管塞，直至结冰完全溶解（约需 2 分钟）。
B. 菌株活化: 在无菌操作下1. 用无菌微量吸管，从已溶解之 cryotube 吸取 50 ?l（或 1 ~ 2 滴）之菌液，滴入固态指定培养基(培养基编号及温度示于菌株订购单)某一边缘附近，以划线法接种于培养基。
2. 将接种好的培养基置于指定温度的培养箱中培养。
C. 划线法1. 手持金属接种环，用酒精灯将接种环（共约 5 公分）烧至火红，并不断来回烧烤金属固定杆之前约 10 公分，等待约 10 秒钟，将接种环前端轻触培养基边缘凝胶（无菌体部份），待接种环完全冷却后，以环沾黏菌滴，由培养基边缘向中央轻轻横划紧接的并行线，直到涵盖 1/3 培养基为止（I 区）。
2. 灼烧接种环，待数秒冷却后，旋转培养基自 I 区涂布的边缘再横划数条线到未接种的区域（II 区）。
3. 重复 2. 的动作完成 III 区与 IV 区。
4. 灼烧接种环，将接种环归位。
D. 图示（1）金属接种环（2）平板划线法冷冻干燥管之开管说明下列步骤请在无菌环境下操作：1、以沾有70%酒精的棉花，擦拭外管，在火焰上加热外管之尖端。
2、滴数滴无菌水于加热处，使外管破裂，再以硬棒敲破尖端。
3、取出隔热纤维纸和内管，以灭菌过的镊子取出内管之棉塞。
4、( a ) 适用于细菌用无菌吸管，吸取0.3-0.5 ml指定之液体培养基，滴入内管内，并轻微震荡（可用该吸管协助），直到均匀悬浮。
食用菌生产与加工之令狐文艳创作
食用菌生产与加工令狐文艳课程性质：专业选修课适用专业：种子生产与经营学分数：2任课教师：李敏一、课程的目的与任务食用菌生产与加工是种子生产与经营专业的专业主干学科之一，它通过理论讲课和实验、实习完成教学内容。
本课程从食用菌的生物学特性、形态与分类、生理生态、食用菌的消毒灭菌、菌种生产和栽培以及加工等知识的基础上，重点讲授菌种制作和选育的基本原理和方法以及商业化的常规和新品种栽培、病虫害防治、加工等技术，并对食用菌加工营销做了一定阐述。
二、课程的基本要求通过本课程的学习，要求学生达到下列要求：1、了解食用菌的概念，掌握食用菌的营养价值、形态特征以及我国食用菌行业发展的动态2、掌握食用菌培养基的制作、灭菌以及菌种的接种，掌握液体食用菌加工技术。
3、了解不同品种的食用菌栽培技术。
4、了解食用菌主要虫害的症状及危害特点，掌握虫害防治技术，发现虫害能及时处理和防治；掌握代表品种保鲜与加工的工艺流程；能够按照工艺流程进行典型品种的保鲜与加工操作；能够熟练掌握食用菌盐渍、冷冻技术。
5、了解食用菌内销方略和外销方略的基本内容；了解基本的市场调研方法及调研程序，掌握市场营销产品、价格、销售渠道、促销宣传策略。
三、课程教学内容第一章：绪论单元名称第一章食用菌概述授课题目第一节食用菌概念第二节发展食用菌生产的意义教学目标使学生了解食用菌的概念和资源状况，人工栽培食用菌种类，栽培历史和目前产业状况；了解食用菌的食用价值、药用价值和经济价值；掌握食用菌生物学效率的基本概念和计算方法；发展食用菌产业的意义。
教学方法与手段启发式、讲授式课堂教学方法利用多媒体教学教学重点发展食用菌生产的意义食用菌生物学转化率的概念教学难点食、药用价值课程设计组织教学：第一次课要了解班级基本情况，点名，要求做好本课学习准备导入新课：介绍本课与本专业的关系，培养目标，学习要求讲课内容：第一节食用菌概念一、食用菌概念食用菌是指人们可以食用的大型真菌的总称。
菌种活化_操作方法之欧阳美创编
低温保存管（cryotube）中之一般菌种临时存放及活化A. 低温保存管之临时存放及解冻1. 低温保存管（cryotube）应存放于－20℃ ~ －80℃之低温条件下。
2. 准备37℃之 70﹪（V/V）酒精浴槽（只能在电气水浴槽中改放酒精，不可以火加温，以免危险；若以37℃水浴取代，应避免水中微生物污染），其中事先安放小试管架（可放置cryotube 之大小），液面不可高达管塞。
3. 将 cryotube 从低温保存条件中取出，置于37℃浴槽之小试管架上。
4. 不断轻微摇动 cryotube，液面不可高至管塞，直至结冰完全溶解（约需 2 分钟）。
B. 菌株活化: 在无菌操作下1. 用无菌微量吸管，从已溶解之 cryotube 吸取 50 ?l（或 1 ~ 2 滴）之菌液，滴入固态指定培养基(培养基编号及温度示于菌株订购单)某一边缘附近，以划线法接种于培养基。
2. 将接种好的培养基置于指定温度的培养箱中培养。
C. 划线法1. 手持金属接种环，用酒精灯将接种环（共约 5 公分）烧至火红，并不断来回烧烤金属固定杆之前约 10 公分，等待约 10 秒钟，将接种环前端轻触培养基边缘凝胶（无菌体部份），待接种环完全冷却后，以环沾黏菌滴，由培养基边缘向中央轻轻横划紧接的并行线，直到涵盖 1/3 培养基为止（I 区）。
2. 灼烧接种环，待数秒冷却后，旋转培养基自 I 区涂布的边缘再横划数条线到未接种的区域（II 区）。
3. 重复 2. 的动作完成 III 区与 IV 区。
4. 灼烧接种环，将接种环归位。
D. 图示（1）金属接种环（2）平板划线法冷冻干燥管之开管说明下列步骤请在无菌环境下操作：1、以沾有70%酒精的棉花，擦拭外管，在火焰上加热外管之尖端。
2、滴数滴无菌水于加热处，使外管破裂，再以硬棒敲破尖端。
3、取出隔热纤维纸和内管，以灭菌过的镊子取出内管之棉塞。
4、( a ) 适用于细菌用无菌吸管，吸取0.3-0.5 ml指定之液体培养基，滴入内管内，并轻微震荡（可用该吸管协助），直到均匀悬浮。
菌种活化_操作方法之欧阳德创编
低温保存管（cryotube）中之一般菌种临时存放及活化A. 低温保存管之临时存放及解冻1. 低温保存管（cryotube）应存放于－20℃ ~ －80℃之低温条件下。
2. 准备37℃之 70﹪（V/V）酒精浴槽（只能在电气水浴槽中改放酒精，不可以火加温，以免危险；若以37℃水浴取代，应避免水中微生物污染），其中事先安放小试管架（可放置 cryotube 之大小），液面不可高达管塞。
3. 将 cryotube 从低温保存条件中取出，置于37℃浴槽之小试管架上。
4. 不断轻微摇动 cryotube，液面不可高至管塞，直至结冰完全溶解（约需 2 分钟）。
B. 菌株活化: 在无菌操作下1. 用无菌微量吸管，从已溶解之 cryotube 吸取 50 ?l （或 1 ~ 2 滴）之菌液，滴入固态指定培养基(培养基编号及温度示于菌株订购单)某一边缘附近，以划线法接种于培养基。
2. 将接种好的培养基置于指定温度的培养箱中培养。
C. 划线法1. 手持金属接种环，用酒精灯将接种环（共约 5 公分）烧至火红，并不断来回烧烤金属固定杆之前约 10 公分，等待约 10 秒钟，将接种环前端轻触培养基边缘凝胶（无菌体部份），待接种环完全冷却后，以环沾黏菌滴，由培养基边缘向中央轻轻横划紧接的并行线，直到涵盖 1/3 培养基为止（I 区）。
2. 灼烧接种环，待数秒冷却后，旋转培养基自 I 区涂布的边缘再横划数条线到未接种的区域（II 区）。
3. 重复 2. 的动作完成 III 区与 IV 区。
4. 灼烧接种环，将接种环归位。
D. 图示（1）金属接种环（2）平板划线法冷冻干燥管之开管说明下列步骤请在无菌环境下操作：1、以沾有70%酒精的棉花，擦拭外管，在火焰上加热外管之尖端。
2、滴数滴无菌水于加热处，使外管破裂，再以硬棒敲破尖端。
3、取出隔热纤维纸和内管，以灭菌过的镊子取出内管之棉塞。
4、( a ) 适用于细菌用无菌吸管，吸取0.3-0.5 ml指定之液体培养基，滴入内管内，并轻微震荡（可用该吸管协助），直到均匀悬浮。
菌种活化_操作方法
低温保管管（cryotube）中之一般菌种临时存放及活化之水城攒孽创作A. 低温保管管之临时存放及解冻1. 低温保管管（cryotube）应存放于－20℃ ~ －80℃之低温条件下。
2. 准备37℃之 70﹪（V/V）酒精浴槽（只能在电气水浴槽中改放酒精，不成以火加温，以免危险；若以37℃水浴取代，应防止水中微生物污染），其中事先安顿小试管架（可放置cryotube 之大小），液面不成高达管塞。
3. 将 cryotube 从低温保管条件中取出，置于37℃浴槽之小试管架上。
4. 不竭轻微摇动 cryotube，液面不成高至管塞，直至结冰完全溶解（约需 2 分钟）。
B. 菌株活化: 在无菌操纵下1. 用无菌微量吸管，从已溶解之 cryotube 吸取 50 ?l（或 1 ~ 2 滴）之菌液，滴入固态指定培养基(培养基编号及温度示于菌株订购单)某一边沿附近，以划线法接种于培养基。
2. 将接种好的培养基置于指定温度的培养箱中培养。
C. 划线法1. 手持金属接种环，用酒精灯将接种环（共约 5 公分）烧至火红，其实不竭来回烧烤金属固定杆之前约 10 公分，等待约10 秒钟，将接种环前端轻触培养基边沿凝胶（无菌体部分），待接种环完全冷却后，以环沾黏菌滴，由培养基边沿向中央轻轻横划紧接的并行线，直到涵盖 1/3 培养基为止（I 区）。
2. 灼烧接种环，待数秒冷却后，旋转培养基自 I 区涂布的边沿再横划数条线到未接种的区域（II 区）。
3. 重复 2. 的动作完成 III 区与 IV 区。
4. 灼烧接种环，将接种环归位。
D. 图示（1）金属接种环（2）平板划线法冷冻干燥管之开管说明下列步调请在无菌环境下操纵：1、以沾有70%酒精的棉花，擦拭外管，在火焰上加热外管之尖端。
2、滴数滴无菌水于加热处，使外管破裂，再以硬棒敲破尖端。
3、取出隔热纤维纸和内管，以灭菌过的镊子取出内管之棉塞。
4、( a ) 适用于细菌用无菌吸管，吸取0.3-0.5 ml指定之液体培养基，滴入内管内，并轻微震荡（可用该吸管协助），直到均匀悬浮。
食品卫生检验12国产冷冻干燥菌种的活化方法
-1-冷冻干燥菌种的活化方法
一、菌种管开启方法
1用浸过75％酒精的脱脂棉擦净菌种管。
2将菌种管顶端在火焰上加热，注意避免直接加热菌体或加热过度。
3将无菌水滴至加热过的菌种管顶端，使玻璃开裂。
4用锉刀或镊子敲下已开裂的菌种管的顶端。
二、菌种活化培养
1.用无菌吸管吸取0.3mL-0.4mL 适宜（※）的液体培养基，滴入菌种管内，轻轻振荡，使冻干菌体溶解成悬浮状液体。
一般细菌建议使用胰蛋白胨大豆肉汤（TSB ）、脑心浸液肉汤（BHI ）等高营养的培养基；
嗜盐性弧菌建议使用含3%-3.5%氯化钠的胰蛋白胨大豆肉汤；
乳酸菌建议使用MRS 肉汤；
真菌建议使用真菌培养基；
2.取约0.2mL 菌悬液，转接于特定的琼脂培养基斜面或平板上，剩余的菌液注入特定的液体培养基（3mL-4mL ）内，然后再按照菌种的特性，在一定温度下进行培养。
三、注意事项
1菌种活化前，请将冻干菌种管冷藏保存在5℃-10℃环境下。
2厌氧菌的培养，如无特别说明，自开封至接种完成，均需以无氧气体充填，以保持厌氧状态。
3菌种经过冷冻干燥后，生长延迟期较长，需连续两次继代培养才能正常生长。
4菌种活化及使用过程应做好安全防护工作。
菌种活化传代方法
菌种活化传代方法说实话菌种活化传代这事，我一开始也是瞎摸索。
我做这个啊，都经历了不少磕磕绊绊才慢慢有点心得的。
我试过好多种方法呢。
最开始的时候，我就按照书上的那些个步骤，什么接种环接种啊之类的。
取菌种的时候，就感觉像从宝库里挑选宝贝一样小心翼翼。
接种环在火焰上烧那一下啊，就好像给战士在出征前磨刀，要把表面那些个不干净的东西全都干掉，这一步可千万不能省，要不然就搞出一堆杂菌来，之前我就因为疏忽这一点失败过，结果培养出来的东西乱七八糟的，那叫一个心疼。
接种到新鲜的培养基这一步可讲究了。
我觉得这就像是给种子找新的土壤。
培养基的成分要合适啊，不然菌种就像人到了不适合生存的环境，长不好。
而且这个时候量也要控制好，不能太过贪心，菌种放多了，可能空间和营养就不够了，放少了呢，又担心它繁殖不起来。
在培养温度和湿度上我也费了不少心思。
我曾经以为只要在一个大概的温度范围里就行了，结果菌种长得慢得不像话。
后来才知道，有些菌种就像那种娇贵的花，对环境要求贼精确。
比如说有些菌就喜欢在30度左右湿度百分之六十左右那样完美的环境下，这就好比是一个人在温度湿度都刚刚好的房间里才觉得舒服一样。
至于传代啊，这是个关键。
要挑选生长状态良好的菌落进行。
我有次就选了那些看着长得不大行的菌落，结果越传越差。
选好菌落之后再接种到新的培养基，这个过程又像是一次新的开荒播种。
整个过程要注意防止污染，周围环境都要保持干净，我有次不小心在打开培养皿的时候实验室进了一阵风，后来就发现里面有杂菌了，教训惨痛啊。
每次做点有关菌种活化传代的事儿，都像是在小心翼翼地呵护小生命一样，一点都不能马虎。
而且整个过程要有耐心，因为它不会一下子就按照你期望的发展，要等的。
反正就是细心、耐心加上不断从失败里总结经验，慢慢就能把菌种活化传代这事干好。
我现在都还在摸索更多窍门呢，但上面这些都是实打实做实验得出来的经验。
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低温保存管（cryotube）中之一般菌种临时存放及活化
令狐文艳
A. 低温保存管之临时存放及解冻
1. 低温保存管（cryotube）应存放于－20℃ ~ －80℃之低温条件下。
2. 准备37℃之 70﹪（V/V）酒精浴槽（只能在电气水浴槽中改放酒精，不可以火加温，以免危险；若以37℃水浴取代，应避免水中微生物污染），其中事先安放小试管架（可放置cryotube 之大小），液面不可高达管塞。
3. 将 cryotube 从低温保存条件中取出，置于37℃浴槽之小试管架上。
4. 不断轻微摇动 cryotube，液面不可高至管塞，直至结冰完全溶解（约需 2 分钟）。
B. 菌株活化: 在无菌操作下
1. 用无菌微量吸管，从已溶解之 cryotube 吸取 50 ?l（或1 ~ 2 滴）之菌液，滴入固态指定培养基(培养基编号及温度示于菌株订购单)某一边缘附近，以划线法接种于培养基。
2. 将接种好的培养基置于指定温度的培养箱中培养。
C. 划线法
1. 手持金属接种环，用酒精灯将接种环（共约 5 公分）烧至火红，并不断来回烧烤金属固定杆之前约 10 公分，等待约10 秒钟，将接种环前端轻触培养基边缘凝胶（无菌体部份），待接种环完全冷却后，以环沾黏菌滴，由培养基边缘向中央轻轻横划紧接的并行线，直到涵盖 1/3 培养基为止（I 区）。
2. 灼烧接种环，待数秒冷却后，旋转培养基自 I 区涂布的边缘再横划数条线到未接种的区域（II 区）。
3. 重复 2. 的动作完成 III 区与 IV 区。
4. 灼烧接种环，将接种环归位。
D. 图示
（1）金属接种环
（2）平板划线法
冷冻干燥管之开管说明
下列步骤请在无菌环境下操作：
1、以沾有70%酒精的棉花，擦拭外管，在火焰上加热外管之尖端。
2、滴数滴无菌水于加热处，使外管破裂，再以硬棒敲破尖端。
3、取出隔热纤维纸和内管，以灭菌过的镊子取出内管之棉塞。
4、( a ) 适用于细菌用无菌吸管，吸取0.3-0.5 ml指定之液体培养基，滴入内管内，并轻微震荡（可用该吸管协助），直到均匀悬浮。
( b ) 适用于霉菌、酵母菌用无菌吸管，吸取0.3-0.5 ml无菌水，滴入内管内，待干燥粉末溶解后，以无菌吸管吸取并滴入约含有5ml无菌水之试管内，轻微震荡使其均匀后，静置30至60分钟。
5、取0.1-0.2 ml之菌体悬浮液于指定的平板培养基上，做划线分离培养或做成一系列之稀释，用无菌L型玻棒均匀涂抹，以检验菌种之纯度及活化情形，而剩余的菌体则全部移入指定的液体培养基内，并依指定的温度培养之。
6、某些菌种经过冷冻干燥保存后，迟滞期 ( lag period ) 较长，必须等培养二倍时间后才能长出，且再经过一、二次继代培养 (Subculture) 后才能正常生长。
经过以上的努力后仍培养失败，才视为不能活化。
7、若菌种未能活化，或活化之菌落有疑问时，请于收到菌种之一个月内，以问题菌株反应单传真至本中心，即进行处理。
8．未开封之冷冻干燥管，请冷藏于4℃冰箱，切勿冷冻保存。
双歧杆菌的活化
请问各位双歧杆菌的冻干粉怎么活化？
活化培养基是什么？
活化时间？
活化时需要特别注意什么？
谢谢！
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脱脂乳7份+豆奶3份混均，加2%的酵母浸出液，2%的酪蛋白胨，0.1%的抗坏血酸，葡萄糖2%，混溶分装试管，利用间歇灭菌法(同上)灭菌，冷却，低温保存，备用。
双歧杆菌为厌氧菌，需进行厌氧培养。
在无氧条件下，打开干燥菌种菌管，用接菌环取冻干菌种于双歧杆菌活化培养基内，38℃恒温厌氧培养24ｈ，取深层活化菌种传入下一代培养基中深层培养，反复活化传至第5代，每代均为38℃及24ｈ。
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一般传两代以后，才能正常使用！
常用活化培养基液体培养基有PYG 固体有TPY
活化方法，ATCC推荐：1、冻干粉菌开封以后，用生理盐水，溶解！接种于液体培养基上！培养为正常生长时间的二倍，36±1℃ 2、然后将其离心集菌，接种于平板上，养为正常生长时间的二倍，36±1℃
自我感觉，液体培养基活化不好用！我的活化方法：冻干粉菌开封以后，用小牛血清溶解！接种于TPY固体培养基上！培养为72H，36±1℃，然后挑菌，接种于平板上，培养为72H，36±1℃
即可。