动物试验基本知识和操作技术共51页文档

动物实验的基本知识和操作技术

动物实验的基本知识和操作技术第⼆章动物实验的基本知识和操作技术第⼀节实验动物药理学实验常⽤的动物有蛙、蟾蜍、⼩⽩⿏、⼤⽩⿏、豚⿏、家兔、猫和⽝等。

常根据实验⽬的和要求选⽤不同的实验动物。

由于不同的动物具有不同的特点，故所选⽤的动物应能较好地反映试验药物的选择性作⽤，并符合节约的原则。

（⼀）、实验动物的选择原则1、尽量选择与⼈体结构、机能、代谢及疾病特征相似的动物；2、选⽤的实验动物的解剖、⽣理特点应符合实验⽬的；3、根据⼈与实验动物对同⼀刺激的反应差异，选⽤具有明显反应的动物；4、根据⽣物医学研究必须达到的精确度，选⽤结构功能简单⼜能反映研究指标的动物；5、选⽤患有⼈类类似疾病的近交系或突变系动物；6、选⽤与实验设计、技术条件、实验⽅法等相适应的标准化动物；7、在不影响实验⽬的与结果的前提下，选择最易获得、最经济、便于操作管理的动物；8、供实验⽤的动物应具备质量合格证。

（⼆）、常⽤实验动物的特点1、蛙和蟾蜍离体⼼脏能较持久地有节律地搏动，常⽤于观察药物对⼼脏的作⽤；坐⾻神经和腓肠肌标本可⽤来观察药物对周围神经、神经肌⾁或横纹肌的作⽤；蛙的腹直肌还可以⽤于鉴定胆碱能药物的作⽤。

2、⼩⽩⿏是实验室最常⽤的⼀种动物。

易于⼤量繁殖，且价廉，适⽤需要⼤量动物的实验，如药物筛选、半数致死量测定、药物效价⽐较、抗感染、抗肿瘤药物及避孕药物的研究等。

3、⼤⽩⿏与⼩⽩⿏相似。

⼀些在⼩⽩⿏⾝上不便进⾏的实验可选⽤⼤⽩⿏，如药物抗炎作⽤的实验常选⽤⼤⽩⿏踝关节制备关节炎的模型。

此外，也可⽤⼤⽩⿏直接记录⾎压、作胆管插管，或⽤⼤⽩⿏观察药物的亚急性或慢性毒性。

⼤⽩⿏的⾎压和⼈相近，且稳定，现常⽤于抗⾼⾎压药物实验。

4、豚⿏是实验室常⽤动物之⼀。

对组织胺很敏感，容易致敏，常⽤于平喘药和抗组胺药的实验。

对结核菌亦敏感，故也⽤于抗结核药的研究。

此外还⽤于离体⼼脏及平滑肌实验，其乳头肌和⼼房常⽤于电⽣理特性及⼼肌细胞动作电位实验，研究抗⼼律失常药物的机理。

实验动物基本知识及基本操作实验方法

实验动物基本知识及基本操作实验方法实验动物是指在实验室内用于科学研究目的的动物，为了保护人类和其他动物的生命、健康和安全，科学研究常常需要进行动物实验。

以下内容将介绍实验动物的基本知识以及实验中的基本操作和实验方法。

一、实验动物的基本知识1.实验动物种类常见的实验动物种类包括小鼠、大鼠、兔子、猴子、猪等。

其中，小鼠和大鼠是最常用的实验动物，因其生命周期短、繁殖能力强、易于养殖和管理，且与人类基因相似度较高。

2.实验动物的饲养环境实验动物需要有严格的饲养环境，包括适宜的温度、湿度、光照和通风条件。

饲养设施应具备合适的空间和设备，如饲养箱、自动饮水器、饲料箱等。

3.实验动物的繁殖和饲养实验动物的繁殖需要注意选配合理的配对，控制种群数量和质量，以确保实验结果的可靠性。

同时，对实验动物进行规范、科学的饲养，提供合适的饲料、清洁的饮用水、舒适的环境等。

二、实验中的基本操作1.动物体重测定动物体重是评估动物生长、健康状态的重要指标。

测定体重时，可以用电子天平称量，将动物置于天平上并记录体重。

2.手术操作一些研究需要进行手术操作，例如在动物体内植入微电极等。

手术操作前需进行充分的准备工作，如消毒手术器具、获取麻醉剂等。

手术操作过程中，需要保持操作区域清洁、注意操作技巧，保护动物的生命安全。

3.采集生物样本实验动物的生物样本如血液、尿液、组织样本等，是研究动物健康状况和药物效果的重要依据。

采集血液时，可以通过尾静脉抽血、眼眶静脉抽血等方法。

采集尿液时，通常采用代谢笼或尿液收集器。

1.长期观察法长期观察法是通过观察实验动物在不同条件下的生长发育、行为表现等来推断不同因素对动物的影响。

例如，用不同饲料供给量观察动物的生长速度，用不同光周期观察动物的行为改变。

2.剖析法剖析法是通过解剖实验动物，观察和记录各种器官的形态结构及组织病理变化，从而了解不同因素对动物生理功能和病理变化的影响。

例如，观察动物心脏、肝脏、肺等器官的大小、形状和病理损伤。

动物实验基本操作

实验动物的种类
常用的有青蛙（ frog）和蟾蜍（toad）常用的有青蛙（ frog）和蟾蜍（toad）鸟类（birds）鸟类（birds）小白鼠（mouse）小白鼠（mouse）大白鼠（rat）大白鼠（rat）豚鼠（ pig）豚鼠（guinea pig）家兔（rabbit）家兔（rabbit）猫（cat）和犬（dog），等。 cat）和犬（dog），等），
动物实验的基本操作和操作技术
刘承武
第一节常用的实验动物
实验动物？实验动物？
是指经人工饲育，对其携带的微生物、是指经人工饲育，对其携带的微生物、寄生虫实行控制，生虫实行控制，遗传背景明确或来源清楚的，用于科学研究、教学、鉴定及其他科用于科学研究、教学、学实验的动物。学实验的动物。
青蛙与蟾蜍（ Toad）青蛙与蟾蜍（Frog and Toad）
青蛙与蟾蜍属两栖动物，青蛙与蟾蜍属两栖动物，其一些基本生命活动与哺乳动物近似，哺乳动物近似，其离体组织和器官所需的生理环境比较简单 (无须供氧和恒温) 和恒温)。青蛙与蟾蜍常用于神经生理、肌肉生理、经生理、肌肉生理、心脏生理，微循环等实验。脏生理，微循环等实验。
无特殊病原体动物（ Specific pathogens free animal，SPF动物） SPF动物又称三级动物，除不带有普通动物、清洁动物应排除的病原体外，还应排除有潜在感染或条件性致病的病原体，以及对实验干扰大的病原。无菌动物（ Germfree animals，GF）和悉生动物（Gnotobiotic animals，GN）四级动物。无菌动物是指采用当前的技术手段无法在动物体表、体内检出一切其他生物体。

动物实验基本技术和方法PPT课件

动物实验基本技术和方法
第1页，共115页。
主要内容
一、实验前准备二、实验动物抓取与固定三、年龄的大致判断
四、性别、发情、与妊娠鉴定
五、编号和标记六、分组
七、去毛八、给药途径与方法
九、采血方法十、其他体液采集
十一、麻醉方法十二、处死方法十三、动物病理检查
第2页，共115页。
一、实验前准备
第34页，共115页。
Female
Male
第35页，共115页。
（三）大、小鼠发情鉴定
第36页，共115页。
小鼠性周期阴道分泌物涂片变化
阶段持续时涂片可见间（h）
卵巢变化
动情前期 9-18
大量有核上皮细胞卵泡加速生少量角化上皮细胞长
动情期 6-12
满视野角化上皮细卵泡成熟、胞，少量有核上皮排卵细胞
动情后期 30-48 角化上皮细胞及白黄体生成细胞
动情间期 36-42 大量白细胞及少量黄体退化粘液
第37页，共115页。
（四）妊娠鉴定
1、阴道栓法（大、小鼠、豚鼠） 2、外部检查法 3、摸胎法 4、阴道检查法 5、直肠检查法 6、超声波检查法 7、孕酮含量测定法
第38页，共115页。
阴道栓
日龄/d
体重/g 日龄/d 体重/g
初生 7
20
30
60
60～80 100～120 150～200 170～220 240～300
90
120
180
330～400 400～470 520～600
第29页，共115页。
（三）家兔
家兔的门齿和爪随年龄增长而增长，是年龄鉴别的重要标志。青年兔门齿洁白，短小，排列整齐；老年兔门齿暗黄，厚而长，排列不整齐，有时破损。白色家兔趾小基本呈红色，尖端呈白色。1岁家兔红色与白色

动物实验基础知识和技术

第三章医学机能实验学的基本知识和操作技术第一节实验动物的基本知识实验动物（1aboratory animal）是指经人工培育，对其携带微生物实行控制，遗传背景明确，来源清楚，可用于科学实验，药品、生物制品的生产和鉴定及其他科学研究的动物。

不同的实验研究目的要求选用不同的实验动物，因此在实验动物设计时要充分了解实验动物的生物学特性。

一、实验动物的种类医学机能实验常用的动物有：蟾蜍、小鼠、大鼠、家兔、豚鼠、狗等。

动物对药物的反应具有种属差异性，可根据实验目的和要求选用不同的实验动物。

现将常用动物简介如下：（一）蟾蜍与青蛙蟾蜍和青蛙两者均属于两栖纲、无尾目，是教学实验中常用的小动物。

其心脏在离体情况下仍可有节奏地搏动很久，可用于药物治疗心功能不全的实验。

其坐骨神经腓肠肌标本可用来观察药物对周围神经、神经肌肉接头或横纹肌的作用。

蛙舌与肠系膜是观察炎症和微循环变化的良好标本。

（二）小鼠小鼠属于哺乳纲、啮齿目、鼠科，目前世界上用量最大、用途最广、品种最多的实验动物。

具有繁殖周期短，产仔多，生长快，饲料消耗少，温顺易捉，操作方便等特点。

小鼠在医学实验中的应用有：1．适用于需用大量动物进行的实验，如胰岛素、促肾上腺皮质激素的生物效价测定，药物半数致死量的测定等。

2．由于其妊娠期短、繁殖力强，故也常用于避孕药和营养试验。

3．小鼠对多种疾病比较敏感，如流行性感冒、血吸虫病、疟疾、狂犬病和一些细菌性疾病，因此可用于这类疾病的实验治疗。

4．人工接种方法或化学致癌物在小鼠中易引起肿瘤，因此小鼠广泛用于肿瘤的研究等。

5．当研究指标主要为电镜观察组织学时，常选用小鼠。

因小鼠器官较小，可节约人力、物力。

小鼠不耐饥饿，不耐热，对外界环境适应性差，对疾病抵抗力低。

因此，做实验时要耐心细致，动作要轻，否则会干扰结果。

（三）大鼠大鼠亦属于哺乳纲、啮齿目、鼠科。

性情温顺，行动迟缓，但捕捉方法粗暴或缺乏维生素A 时常咬人。

大鼠在医学实验中的应用有：1．在营养学和代谢疾病的研究上，大鼠是首选的实验动物，主要用于维生素、氨基酸、蛋白质缺乏和营养代谢异常的研究。

实验动物基本知识基本操作实验方法

实验动物基本知识基本操作实验方法实验动物是用于科学研究和药物安全性评估的动物，其主要作用是代表人类进行实验，以便了解和解决人类的健康问题。

在科学研究中，实验动物的使用是不可或缺的。

下面将介绍实验动物的基本知识、基本操作和实验方法。

一、实验动物的基本知识1.实验动物的种类：常见的实验动物有小鼠、大鼠、兔子、猪、猴子等。

根据不同的实验目的和要求，选择适合的实验动物进行研究。

2.实验动物的特点：实验动物一般具有较短的生命周期、较快的繁殖速度、易于获取和饲养，并且在生理和生化方面与人类有较高的相似性。

3.实验动物的饲养条件：实验动物的饲养需要满足特定的环境要求，包括温度、湿度、光照、气流等。

此外，饲养动物还需要提供适宜的饮食、洁净的饮水和舒适的生活空间。

二、实验动物的基本操作1.动物的标识：为了对实验动物进行个体管理，在实验动物身上进行标记是必要的。

标记方式可以是耳标、尾标、皮肤刺纹等。

2.动物的饲养和管理：根据不同的实验需要，合理饲养和管理动物是确保实验结果准确性的重要环节。

饲养和管理包括动物饲料的配制、日常照料、观察动物行为以及健康状况等。

3.动物的采集：在进行实验前或实验过程中，需要采集动物的组织、细胞或体液样本。

采集方式可以是手术切除、穿刺、皮下或腹腔注射等。

三、实验动物的实验方法1.动物的体外实验：将动物的组织或细胞体外培养，通过加入试剂、观察细胞变化、测定生物活性等方式来研究其中一种生物学过程或药效。

2.动物的体内实验：将试验物质注射或服用给动物，观察动物的生理、生化或行为变化。

可以通过动物模型来模拟人类的疾病和药物反应。

3.动物实验设计：根据实验目的和要求，合理设计动物实验方案。

包括选择合适的实验动物、确定实验过程和方式，制定实验流程和时间表等。

总结：实验动物在科学研究和药物试验中起着重要的作用。

了解实验动物的基本知识、基本操作和实验方法，对开展科学研究、提高实验数据的可靠性具有重要意义。

动物实验基本操作

动物实验基本操作一、实验动物的抓取与固定。

（一）小鼠。

1. 抓取。

- 用右手拇指和食指捏住小鼠尾巴中部将其提起，放在鼠笼盖或其他粗糙表面上。

当小鼠向前挣扎时，用左手的拇指和食指迅速捏住小鼠两耳后颈背部皮肤，无名指和小指夹住小鼠尾巴根部，将小鼠固定成头部略向上的姿势。

- 原因：捏住尾巴提起小鼠可以避免小鼠咬伤操作人员，将其放在粗糙表面上是利用小鼠的本能反应（向前挣扎），便于后续准确抓取其颈背部皮肤。

而固定成头部略向上的姿势有利于进行诸如灌胃、注射等操作，并且能防止小鼠咬伤操作人员脸部等部位。

2. 固定。

- 如需进一步固定，可将小鼠放在特制的小鼠固定器内，将其身体和四肢固定好。

也可以将小鼠固定在泡沫板上，用大头针固定其四肢（这种方法常用于解剖实验）。

- 原因：使用固定器可以确保小鼠在实验过程中保持稳定，减少因挣扎而影响实验操作的准确性，同时也能保障操作人员的安全。

对于解剖实验，在泡沫板上用大头针固定四肢可以充分暴露小鼠的身体结构，便于进行精细的解剖操作。

（二）大鼠。

1. 抓取。

- 先用右手抓住大鼠尾巴中部，将大鼠提起，放在粗糙平面上。

然后用左手戴防护手套（大鼠体型较大且可能会激烈挣扎，容易咬伤操作人员），从大鼠背部绕到其胸前，拇指和食指捏住大鼠两耳后颈背部皮肤，其余手指握住大鼠身体，将其提起固定。

- 原因：与小鼠抓取类似，先抓住尾巴提起是为了初步控制大鼠，放在粗糙平面上利用其向前挣扎的本能便于后续抓取。

戴防护手套是因为大鼠的咬合力较强，为了防止操作人员受伤。

2. 固定。

- 可将大鼠放入大鼠固定器中固定。

对于需要进行手术等操作的大鼠，也可将其麻醉后固定在手术台上，用绑带固定其四肢。

- 原因：固定器和手术台固定都能保证大鼠在实验过程中保持稳定，使实验操作能够顺利进行，尤其是在进行需要精细操作的手术时，稳定的固定是确保手术成功的关键因素之一。

二、实验动物的给药操作。

（一）口服给药。

1. 灌胃法（以小鼠为例）- 准备好灌胃针（一般为特制的金属针具）和相应的药物溶液。

动物实验基本技术完整版

动物实验基本技术内容：实验动物抓取保定方法实验动物标记编号方法实验动物被毛去除方法实验动物给药途径和方法实验动物体液和采血方法实验动物麻醉方法实验动物处死方法实验动物抓取固定方法一、小鼠的抓取固定1、小鼠性情较温顺，挣扎力小，比较容易抓取和固定。

抓取时，用左手拇指和食指捏住小鼠尾巴中部放在格板或铁笼上。

2、趁着小鼠试图挣脱的瞬间，迅速用另外三个手指压住小鼠的尾巴根部握入手掌。

3、放松拇指和食指，用另外三个手指控制小鼠，然后用食指和拇指捏住小鼠头部两边疏松的皮肤提起小鼠，完成抓取固定。

4、小鼠性情较温顺,一般不咬人,比较容易固定。

通常是用右手提起小鼠的尾部，将其放在鼠盖或其它粗糙表面上，在小鼠向前爬行时，迅速用左手拇指和食指捏住其双耳及颈后部皮肤，将小鼠置于左手掌心上，再以右手掌心、无名指和小指夹其背部皮肤和尾部，即可将小鼠完全固定。

注意事项：抓小鼠尾巴应抓住尾巴中部或根部，不能仅捏住小鼠尾巴的尾端，因为这时小鼠的重量全部集中到尾端，如果小鼠挣扎，有可能弄破尾端。

在进行解剖、手术、心脏采血、尾静脉注射时，可将小鼠用线绳捆绑在木版上，或固定在尾静脉注射架及粗试管中。

二、大鼠的抓取固定抓取大鼠前最好戴上防护手套，右手轻轻抓住大鼠尾巴的中部并提起，迅速放在笼盖上或其他粗糙面上，左手顺势按、卡在大鼠躯干背部，稍加压力向头颈部滑行，以左手拇指和食指捏住大鼠两耳后部的头颈皮肤，其余三指和手掌握住大鼠背部皮肤，完成抓取固定。

三、豚鼠的抓取固定捉拿时，实验人员可先用手轻轻扣、按住豚鼠背部，顺势抓紧其肩胛上方皮肤，拇指和食指环其颈部，用另一只手轻轻托住其臀部，即可将豚鼠抓取固定。

四、兔的抓取固定抓取固定方法是用右手把两耳拿在手心并抓住颈后部皮肤，提起家兔，然后用左手托住臀部。

另一种方法是使用家兔固定栏，打开固定栏的前盖，抓取家兔放进栏内，右手抓住家兔耳朵将头部拉过固定栏的开孔，迅速关上栏门。

五、犬的抓取固定犬性情凶猛、咬人，但通人性。

动物实验基本操作技术

兔
ｄ．颈静脉
狗、猫、兔
ｅ．心脏
豚鼠、大鼠、小鼠
ｆ．断头
大鼠、小鼠
ｇ．翼下静脉
鸡、鸭、鸽、鹅
ｈ．颈动脉
鸡、鸭、鸽、鹅
第44页/共85页
部位
动物种类
ａ．股动脉、颈动脉
狗、猴、猫、兔
ｂ．心脏
狗、猴、猫、兔
ｃ．颈静脉
马、牛、山羊、绵羊
ｄ．摘眼球
大鼠、小鼠
第45页/共85页
第34页/共85页
第六节常规采血方法
第35页/共85页
第36页/共85页
第37页/共85页
第38页/共85页
第39页方法的选择，决定于实验目的所需血量以及动物种类。凡用血量较少的检验如红、白细胞计数、血红蛋白的测定，血液涂片以及酶活性微量分析法等，可刺破组织取毛细血管的血。当需血量较多时可作静脉采血。静脉采血时，若需反复多次，应自远离心脏端开始，以免发生栓塞而影响整条静脉。而研究毒物对肺功能的影响、血液酸碱平衡、水盐代谢紊乱，需要比较动、静脉血氧分压、二氧化碳分压和血液pH值以及 K+、Na+、Cl-离子浓度，必须采取动脉血液。
ａ．尾静脉
大鼠、小鼠
ｂ．耳静脉
兔、狗、猫、猪、山羊、绵羊
ｃ．眼底静脉丛
兔、大鼠、小鼠
d．舌下静脉
兔
e．腹壁静脉
青蛙、蟾蜍
f．冠、脚蹼皮下静脉
鸡、鸭、鹅
第43页/共85页
部位
动物种类
ａ．后肢外侧皮下小隐静脉
狗、猴、猫
ｂ．前肢内侧皮下头静脉
狗、猴、猫
ｃ．耳中央动脉
体重/g
150～210 170～240 210～270 240～320
第18页/共85页

动物实验基本操作图文

1、2、3均为不正确的抓取方法（1．可损伤两肾， 2．可造成皮下出血，3．可伤两耳），4、5为正确的抓取方法。颈后部的皮厚可以抓，并用手托兔体。
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2．固定：一般采用台式和马蹄形。四肢用粗棉绳活结绑住，拉直四肢，将绳绑在兔台四周的固定木块上，头以固定夹固定或用一根粗棉绳挑过兔门齿绑在兔台铁柱上；
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二、实验动物的抓取固定方法
正确的抓取固定动物，是为了不损害动物健康，不影响观察指标，并防止被动物咬伤，保证实验顺利进行。抓取固定动物的方法依实验内容和动物种类而定。抓取固定动物前，必须对各种动物的一般习性有所了解，抓取固定时既要小心仔细，不能粗暴，又要大胆敏捷，确实达到正确抓取固定动物的目的。
编号的原则是：先左后右，从上到下。一般把涂在左前腿上的计为1号，左侧腹部计为2号，左后腿为3号，头顶部计为4号，腰背部为5号，尾基部为6号，右前腿为7号，右侧腰部为8号，右后腿计为9号。
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若动物编号超过10或更大数字时，可使用上述两种不同颜色的溶液，即把一种颜色作为个倍数，另一种颜色作为十位数，这种交互使用可编到99号，假使把红的记为十位数，黄色记为个位数，那么右后腿黄斑，头顶红斑，则表示是49号鼠，其余类推。
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实验动物中心
4
动物实验的方法很多，如有生理学的动物实验方法；病理生理学的动物实验方法；药理学的动物实验方法；病理解剖学、组织学的动物实验方法；微生物学和免疫学的动物实验方法等等。下面举一些动物实验的常用方法：
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实验动物中心

动物实验基本操作技术

动物实验中的化学安全防护
化学试剂的储存：分类存放远离火源和热源
化学试剂的使用：严格按照操作规程使用避免直接接触皮肤和眼睛
化学废液的处理：分类收集妥善处理避免污染环境化学防护设备的使用：佩戴防护眼镜、手套、口罩等避免吸入或接触有害物质
动物实验中的放射性安全防护
放射性物质的分类和特性
放射性防护的基本原则和方法
提供适当的活动空间：确保动物有足够的活动空间避免过度限制活动
记录动物状态：记录动物的行为、食欲、排便等情况以便及时发现问题并采取措施
实验动物的组织取材与处理
组织取材：选择合适的组织进行取材如心脏、肝脏、肾脏等固定：使用固定液对组织进行固定如福尔马林、乙醇等切片：将固定后的组织切成薄片便于显微镜观察染色：使用染色液对切片进行染色如苏木精、伊红等观察：使用显微镜对染色后的切片进行观察记录组织形态和结构保存：将组织切片保存在适当的环境中如冰箱、干燥器等
科学性：实验设计必须科学合理符合伦理要求
尊重动物生命：尊重动物的生命权避免不必要的伤害和痛苦
知情同意：实验人员必须了解实验的目的、方法和可能
的风险并同意参与实验
监管与监督：实验必须遵守相关法律法规接受监管和监
督
教育与培训：实验人员必须接受相关伦理教育和培训提
高伦理意识
动物实验的法律法规与标准
采血与注射的常用工具：注射器、采血针、止血带等
采血与注射的常见问题及解决方法：出血、感染、动物应激反应等
实验动物的观察指标与数据记录
数据记录：记录观察指标的变化包括时间、地点、观察人员等信息
数据分析：对观察数据进行统计分析得出结论
观察指标：体重、体温、呼吸、心跳、行为、饮食、排泄等