动物细胞培养过程

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动物细胞培养的原理和产物

动物细胞培养的原理和产物动物细胞培养是一种将动物组织或细胞在体外培养并繁殖的技术。

其原理包括以下几个步骤：1. 细胞收获：从动物体内取得组织样本，例如皮肤、肌肉、肝脏等，并对其进行消化、分散以获得单个细胞。

2. 细胞培养基的制备：准备一种适宜的细胞培养基，里面包括营养物质、生长因子和其他必需配方，以提供细胞生长和繁殖所需的环境。

3. 细胞种植：将获得的单个细胞放入培养基中，利用罩装器、离心和培养瓶等设备将其均匀地分布在培养基表面，然后置于恒温培养箱中。

4. 培养条件的控制：维持适宜的生理条件对细胞的生长至关重要。

这包括控制培养基的pH值、温度、湿度和氧气浓度等。

5. 细胞增殖和维持：通过培养基提供的营养物质和生长因子，细胞会进行分裂和增殖，形成细胞团或细胞层。

同时，需要定期更换新鲜的培养基，以去除废弃物和保持细胞的健康状态。

动物细胞培养的产物主要有以下几个方面：1. 研究用途：动物细胞培养提供了一个研究细胞生物学、病毒学、基因工程和药物筛选等领域的理想模型。

它可以用于研究细胞生长、分化、凋亡等过程，以及药物和毒物对细胞的影响。

2. 细胞治疗：动物细胞培养可以用于制备生物材料，如细胞移植、组织工程和再生医学等领域。

例如，通过培养动物细胞，可以获取干细胞和多能性细胞，用于治疗某些疾病。

3. 生物药物的生产：动物细胞培养还可以作为生产生物药物的平台。

例如，通过培养动物细胞，可以大规模生产抗体、疫苗和蛋白质等生物制剂。

4. 细胞株的保存：将原始的动物细胞培养成细胞株，并进行冻存保存，以备将来的研究、应用和生产。

细胞株的保存和共享，可以有效促进科学研究和新药的开发。

2.2动物细胞工程

O2—有氧呼吸、细胞代谢有氧呼吸、有氧呼吸细胞代谢(95%) (3)气体环境气体环境 CO2—维持维持pH(5%) 维持
培养液和培养用具杀菌消毒 (4)无菌、无毒环境培养过程加抗生素杀菌无菌、无菌定期更换培养液，清除代谢产物定期更换培养液，
4．实践应用． (1)生产生物制品：病毒疫苗、干扰素、单克生产生物制品：生产生物制品病毒疫苗、干扰素、隆抗体等。隆抗体等。 (2)与基因工程相结合。与基因工程相结合。与基因工程相结合 (3)检测有毒物质，判断某种物质的毒性。检测有毒物质，检测有毒物质判断某种物质的毒性。 (4)科研方面：筛选抗癌药物、治疗和预防疾科研方面：科研方面筛选抗癌药物、病。
(2009年山东高考题人类在预防与诊疗年山东高考题)人类在预防与诊疗年山东高考题传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒，已知某传染性疾病的病原体为病毒病毒表面的A蛋白为主要抗原蛋白为主要抗原，病毒表面的蛋白为主要抗原，其疫苗生产和抗体制备的流程之一如下图。抗体制备的流程之一如下图。
三、动物细胞融合与单克隆抗体制备 1．原理：细胞膜的流动性。．原理：细胞膜的流动性。 2．诱导融合的因素：聚乙二醇．诱导融合的因素：聚乙二醇(PEG)、灭活、的病毒、电激等。的病毒、电激等。 3．意义：最重要的用途是制备单克隆抗体。．意义：最重要的用途是制备单克隆抗体。
4．单克隆抗体的制备． (1)过程：过程：过程
【答案】 (1)逆(反)转录 (2)限制性核酸内答案】逆反转录限制性核酸内切酶(限制性内切酶限制酶) 限制性内切酶、切酶限制性内切酶、限制酶 DNA连接酶连接酶 (注：两空顺序可颠倒 (3)细胞融合杂交瘤注两空顺序可颠倒) 细胞融合基因)序列细胞 (4)A蛋白核酸基因序列抗A蛋白蛋白核酸(基因蛋白的单克隆抗体

动物细胞工程(动物细胞培养)课件高二下学期生物人教版选择性必修3

气体环境 O2: 细胞代谢所必需的 CO2：维持培养液的pH
用培养皿或松盖培养瓶，在95%空气和 5%CO2的混合气体的CO2,培养箱中进行培养。
2 动物细胞培养的过程
动物组织块
机械法胰蛋白酶胶原蛋白酶处理
分散成单个细胞
思考1.常用胰蛋白酶分散细胞，这说明细胞间的物质主要是什么成分？
用胃蛋白酶行吗？说明细胞间的物质主要是蛋白质。胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，当pH大于6时，胃蛋白酶就失去活性，多数动物细胞培养的适宜pH为7.2~7.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性，所以用胃蛋白酶不行。
原代培养
将分瓶之前的细胞培养，即动物组织经过处理后的初次培养称为原代培养。
细胞悬液
放入培养瓶在适宜条件中
原代培养
在适宜条件中分瓶培养
传代培养
传代培养
将分瓶后的细胞培养称为传代培养。
2 动物细胞培养的过程
方法区分两种培养方式的方法
区分两种培养的关键是看用胰蛋白酶处理的对象和是否分瓶。 ①分瓶前，第一次用胰蛋白酶对动物组织进行处理后的培养是原代培养。 ②第二次用胰蛋白酶处理，使细胞从瓶壁上脱离下来，分瓶后的细胞培养为传代培养。
2 动物细胞培养的过程
动物组织块
机械法胰蛋白酶胶原蛋白酶处理
分散成单个细胞
思考3.实验过程中，胰蛋白酶处理时间过长，会出现什么结果？
细胞膜的成分中含有蛋白质，而胰蛋白酶能够水解蛋白质，因此，胰蛋白酶会把细胞消化掉。因此，胰蛋白酶处理的时间不能太长。
2 动物细胞培养的过程
动物组织块
机械法胰蛋白酶胶原蛋白酶处理
思考讨论
1.幼龄动物的细胞与老龄动物的细胞比较，分化程度低的细胞与分化程度高的细胞比较，哪些细胞更易于培养？为什么？

动物细胞培养

动物细胞培养
动物细胞培养是一种重要的生物技术手段，广泛应用于医药、生物学研究、食
品工业等领域。

通过细胞培养，可以获取大量同质的细胞群体，为疾病治疗、新药研发提供重要的支持。

动物细胞培养的原理
动物细胞培养是将动物组织或细胞在人工培养基中进行维持、增殖、传代等过程。

培养基通常包括营养物质、生长因子、激素等成分，提供细胞生长所需的营养和环境。

动物细胞培养的步骤
1.细胞来源：从动物体内收集组织样本，获得原代细胞。

2.细胞分离：通过消化酶等手段将组织分离成单个细胞。

3.传代培养：将分离的细胞在培养基中培养，定期传代以增殖细胞数
量。

4.检测与分析：对培养的细胞进行检测、分析，确保其健康状态。

动物细胞培养的应用
1.生物医学研究：细胞培养在癌症、遗传疾病等方面的研究中发挥重
要作用。

2.药物研发：通过细胞培养可以进行药物筛选、毒性测试等工作。

3.食品工业：利用细胞培养技术可以生产细胞培养肉等食品。

动物细胞培养的发展
随着生物技术的不断发展，动物细胞培养技术也在不断创新和提升。

新的培养
基配方、生长因子的发现以及工程技术的应用，使得动物细胞培养在医学和生物学领域有着广阔的应用前景。

动物细胞培养作为一种重要的生物技术手段，将继续在各个领域发挥重要作用，为人类健康和科学研究进步做出贡献。

动物细胞培养和核移植技术课件

过程
脱分化、再分化
原代培养、传代培养
项目
植物组织培养
动物细胞培养
结果获得新个体或细胞产物
大量产生细胞或细胞产物
用途
①快速繁殖名贵花卉和果树；②培养无病毒植株、转基因植物；③大规模生产细胞产物，如药物、食品添加剂、香料、色素等
①生产蛋白质制品，如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等；②检测有毒物质；
(3)温度和
温度：哺乳动物多以 pHpH： 7.2～7.4
36.5±0.5℃
为宜
(4)气体环境COO2 ：2：细维胞持代培谢养所液必的需p的H
4．应用[连线]
二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 1．动物核移植的概念和类型 (1)概念： ①供体：动物一个细胞的细胞核； ②受体：去掉细胞核的卵母细胞； ③结果：形成重组胚胎，发育成动物个体。 (2)类型：哺乳动物核移植可分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。
2.如图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此回答： (1)容器 A 中放置的是动物器官或组织，它一般取自________________。 (2)容器 A 中的动物器官或组织首先要进行的处理是________，然后用__________酶处理，这是为了使细胞分散开来，这样做的目的是 _________________________________________________。
胞质内的遗传物质来自受体卵母细胞，其次生物的性状还
受环境的影响，因此，克隆动物并不是对提供体细胞的动
物进行完全复制。
4.右图为哺乳动物(羊)的生殖过程，下列叙述
不．正确的是
(D )
A．个体 2 为克隆动物，c 为高度分化的
体细胞
B．个体 2 的遗传性状与提供 c 细胞的羊

动物细胞培养的步骤及注意事项

动物细胞培养的步骤及注意事项
动物细胞培养的步骤主要包括取材、清洗、消化、分散、传代和冻存等步骤。

在实验前，需要做好充分的准备工作，包括制备操作卡片、收集和清点实验用品等。

取材时，需要记录所取动物组织的各种情况，并严格遵守无菌操作。

清洗和消化过程需要使用适宜的方法，以保证细胞损伤较小。

分散和传代过程中，需要注意细胞的贴壁和接触抑制现象。

冻存时，需要选择合适的冷冻保护剂，以保证细胞的存活率。

动物细胞培养的注意事项包括避免污染、保证无菌操作、选择适宜的培养基和添加剂、控制温度和pH值等。

此外，还需要注意细胞运输和交流中的问题，如使用特殊的运输容器等。

在实验过程中，需要严格遵守操作规范，避免交叉污染和意外事故的发生。

同时，需要注意实验后的废物处理，避免对环境和人体造成危害。

动物细胞培养的过程(课堂PPT)

英国科学家成功地利用骨髓干细胞培育出了人体心
脏瓣膜组织，估计在3到5年内能培育出人造心脏瓣膜用于
人体移植。
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更为重要的是，新的细胞培养法有助于人类灵活应对大规模暴发的流感。近年来，高致病性禽流感的爆发总让人担心届时疫苗够不够用。用鸡蛋培养病毒的话，生产多少疫苗必须提前做出精确计划，但一般来说流感暴发时，人们很难在短时间内购置生产疫苗所需的数百万只鸡蛋。而新方法可在很小的生产空间，很快地制造出大批纯净的疫苗。 15
WWW
什么是动物细胞培养?
从动物机体中取出相关组织，将它们分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。
如何进行细胞培养?
6
动物细胞培养的过程
放入二氧化碳培养箱中培养
思考：
每一步操作的理由或目的是什么？
在培养过程中，出现了哪些我们以前没有涉及过的现象或处理方法？
你觉得在了解细胞培养过程的知识中，应该抓住哪些关键词？
世界上第一个细胞培养生产的流感疫苗上市2007060916动物细胞培养与植物组织培养的区别1培养的起点2培养的结果3培养基的成分1718美国时代杂志评出2007年十大科学发现时代杂志说2007年11月美日科学家宣布他们利用皮肤细胞仿制出具备胚胎干细胞功能的干细胞从而避开了胚胎干细胞研究面临的伦理问题
某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题：（1）将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其它培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量___多_______。（2）在动物细胞培养时，通常在合成培养基中加入适量血清，其原因是__血__清_可__以__补_充__合__成_培__养__基_中_ 缺乏的物质。细胞培养应在含 5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是_ 维持__培__养__液__p_H__。（3）在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长将 ___停__止____。药物试验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞可以传代的次数更__多_____。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用___胰__蛋__白__酶__消化处理。（4）为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加14入适量的___抗__生__素______。

高中生物第章细胞工程.1动物细胞培养学案选择性3

动物细胞培养必备知识·素养奠基一、动物细胞培养概念从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。

二、动物细胞培养的条件1。

营养条件:(1)合成培养基：将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成。

（2)天然成分：血清等.（3）一般使用液体培养基,即培养液。

2。

无菌、无毒的环境：(1）培养液和培养用具灭菌处理。

(2）无菌环境下操作.（3）培养液定期更换的目的：清除代谢物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。

3。

温度、pH和渗透压:(1)适宜的温度：哺乳动物多以36。

5±0。

5℃为宜。

(2）适宜的pH:多数细胞生存的适宜pH为7.2～7.4。

(3)适宜的渗透压。

动物细胞培养能否体现动物体细胞的全能性？说明你的理由。

提示:不能。

动物细胞培养只是细胞的增殖，没有体现细胞的全能性。

4.气体环境：95％空气和5%CO2。

（1)O2作用：细胞代谢所必需的。

(2）CO2的主要作用：维持培养液的pH。

三、动物细胞培养的过程填一填：基于动物细胞培养的过程，完成下面的问题:（1)过程①处理方法有:机械法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理的方法.(2）过程②为原代培养,培养的动物细胞有两类:①悬浮在培养液中生长增殖;②贴附于某些基质表面生长增殖。

(3）进行过程③时,悬浮培养的细胞直接用离心法收集;贴壁细胞需要使用胰蛋白酶等处理，然后用离心法收集.（4)过程③为传代培养，进行过程③的原因主要有:细胞密度过大、有害代谢物积累、营养物质缺乏和接触抑制等。

四、干细胞培养及其应用1。

干细胞分布：早期胚胎、骨髓和脐带等。

2.种类：胚胎干细胞和成体干细胞。

3.判一判：基于干细胞的类型和应用,判断下列说法的正误。

(1)胚胎干细胞和成体干细胞都具有形成机体的所有组织和器官,甚至个体的潜能. (×)提示:成体干细胞具有组织特异性，只能分化成特定的细胞或组织，不具有发育成完整个体的能力。

动物细胞培养总结!!!!

动物细胞培养总结动物细胞培养的基本步骤包括细胞分离、种植、培养及维护。

首先需要从动物组织中获取细胞，可以通过机械或酶解的方式将组织细胞分离出来。

然后将细胞悬浮液转移到培养皿中，加入适当的培养基，并提供适宜的温度、湿度和气体环境。

细胞在培养皿中会逐渐形成单层或悬浮状态，可以进行细胞形态观察、增殖和鉴定等。

维护细胞的正常生长和增殖，需要定期更换培养基并进行细胞传代，以避免细胞的老化和死亡。

动物细胞培养的关键因素包括细胞种类的选择、培养基的配制、环境参数的控制等。

细胞种类的选择应根据研究需求和细胞特性进行，不同的细胞对培养条件的要求有所差异。

培养基是细胞培养的基础，需要提供充足的营养物质、生长因子和激素等，以满足细胞正常生长和增殖所需。

同时，培养基的pH值、温度和湿度等环境参数也需要严格控制，以维持细胞的健康状态。

细胞培养的应用非常广泛。

首先，动物细胞培养可用于细胞生物学研究，如细胞分化、增殖、凋亡等的机制研究。

通过观察细胞在不同条件下的变化，可以揭示细胞生物学过程中的分子机制。

其次，动物细胞培养在生物医学研究中也有重要应用。

例如，用于评估药物的毒性和疗效，开发新的药物或疫苗，以及研究疾病的发生机制等。

此外，动物细胞培养还可用于生产重组蛋白和细胞疫苗等生物制剂，具有重要的经济价值。

在动物细胞培养中，不可避免地会面临一些挑战和困难。

首先，细胞的质量和纯度是细胞培养成功的关键因素之一、细胞分离和培养的过程中，可能会产生细胞杂交和污染，对细胞的准确鉴定和纯度检测提出了要求。

其次，细胞培养需要严格控制环境参数，如温度、CO2浓度和湿度等，这对实验设备的要求较高。

此外，不同细胞株的生长速度和特性也有所差异，对培养者的经验和技术水平提出了要求。

综上所述，动物细胞培养是一项重要的实验技术，具有广泛的应用前景和经济价值。

通过细胞培养，可以获得大量的细胞材料，用于细胞生物学研究和新药的研发。

然而，动物细胞培养也面临着挑战和困难，需要进行严格的细胞鉴定和纯度检测，以及合理控制环境参数。

动物细胞培养实验报告

动物细胞培养实验报告实验目的本实验的目的是通过培养和观察动物细胞，了解细胞的结构和功能。

实验材料和设备•动物细胞培养基•细胞培养皿•细胞培养罩•无菌移液器•显微镜•离心机实验步骤步骤一：准备工作1.将工作台、实验室器材和手部清洗消毒，确保无菌环境。

2.准备所需的实验材料和设备。

步骤二：细胞培养基的制备1.将细胞培养基倒入细胞培养皿中，每个培养皿倒入适量的培养基。

2.用无菌移液器将细胞培养基均匀涂布在培养皿内表面。

3.将培养皿放入细胞培养罩中，用透明膜封闭。

步骤三：细胞的收获1.从实验动物体内提取所需的组织样本，保持组织样本的完整性和无菌状态。

2.将组织样本置于离心管中，加入少量的预先准备好的细胞培养基。

3.使用无菌移液器将组织样本与细胞培养基充分混合。

4.将混合液转移到培养皿中，确保液体均匀覆盖培养皿表面。

步骤四：细胞培养1.将培养皿放入孵化器中，设置合适的温度和湿度，提供细胞生长所需的最佳环境条件。

2.定期观察培养皿内细胞的生长情况，记录细胞的数量和形态变化。

步骤五：细胞观察1.从培养皿中取出一小部分细胞，放入显微镜载玻片上。

2.将载玻片放入显微镜下，使用适当的倍率观察细胞的形态特征和细胞器的结构。

3.记录细胞的形态特征、大小和细胞器的分布情况。

实验结果和讨论通过以上步骤，我们成功地进行了动物细胞的培养实验，并观察到了细胞的生长和形态变化。

在显微镜下观察到的细胞形态特征和细胞器的结构，可以帮助我们更好地理解细胞的组成和功能。

细胞培养是生物学研究中常用的技术手段，通过培养和观察细胞，我们可以深入了解细胞的生命活动和疾病发生机制。

在实验过程中，我们需要保持无菌操作，以确保细胞的纯度和生长条件的良好。

细胞培养实验的结果和观察对于生物医学研究和药物开发具有重要意义。

通过改变培养条件和添加适当的药物，我们可以研究细胞的响应和代谢途径，为新药物的筛选和评估提供重要依据。

结论通过本次实验，我们成功地培养和观察了动物细胞。

简述动物细胞培养过程中细胞复苏,传代,冷冻的操作方法

简述动物细胞培养过程中细胞复苏,传代,冷
冻的操作方法
动物细胞培养过程中的细胞复苏、传代和冷冻是常见的操作步骤。

具体方法如下：
1. 细胞复苏：
a. 将冷冻保存的细胞样品快速解冻，可以将冰冻管置于37°C的水浴中缓慢解冻。

b. 解冻后，将细胞迅速转移到含有预暖的培养基的离心管中。

c. 用培养基轻轻洗涤细胞，并将其移至培养皿中，使细胞附着于培养器皿表面。

d. 增加足够的预热培养基，将细胞放回合适的培养条件中进行复苏。

2. 细胞传代：
a. 当细胞达到适当的密度或已达到培养器皿的最大生长容量时，需要进行细胞传代。

b. 首先，先用无菌PBS缓冲液轻轻洗涤细胞，以去除残留的培养基和细胞碎片。

c. 使用无菌酶消化液（如胰蛋白酶）轻轻润湿细胞，然后加入等量的无菌培养基来停止消化。

d. 耐心地将细胞悬浮液吸取并转移到新的培养皿中，保持适当的稀释比例，并加入新的预热培养基。

e. 将新的培养皿放入培养箱中，提供适当的温度、湿度和氧气供应。

3. 细胞冷冻：
a. 将细胞按照细胞传代的方法进行收获和洗涤。

b. 用细胞冻存试剂（如DMSO）缓慢添加到细胞悬浮液中，最终细胞密度通常为1-2×10^6个细胞/mL。

c. 将细胞悬浮液转移至预冷的冻存管中。

d. 快速将冷冻管放入冷冻等温器中，以确保细胞迅速冷冻。

e. 细胞冷冻后，将冷冻管转移到液氮罐中进行长期储存。

请注意，动物细胞培养的具体操作方法可能因细胞类型和研究需要而有所不同。

在进行这些操作之前，应仔细阅读并遵守相应的实验室指南和安全操作规程。

2-2-1动物细胞培养(课件)——高中生物人教版(2019)选择性必修三

B
练习
3.有研究表明“渐冻症”是由突变的基因导致运动神经元合成了某种毒蛋白，从而阻碍了轴突内营养物质的流动。也有最新研究结果表明，利用诱移功能干细胞(iPS细胞) 制作前驱细胞，然后移植给渐冻症实验鼠，能延长其寿命。下列相关描述错误的是( )iPS细胞分化成的多种细胞中所有核酸相同，蛋白质却不完全相同B. iPS细胞分化的实质是基因的选择性表达，细胞种类增多C.若控制运动神经元合成毒蛋白的基因替换,则可以起到良好的治疗作用D.植入神经干细胞，恢复受损的运动功能，也许会在一定程度上使渐冻症病情改善
ES细胞
成体干细胞
成体组织或器官内
造血干细胞（骨髓、外周血和脐带血中）神经干细胞（神经系统中）精原干细胞（睾丸中）
具有组织特异性，只能分化成特定的细胞或组织，不具有发育成完整个体的能力
治疗神经组织损伤和神经系统退行性疾病（如帕金森病、阿尔茨海默病等）
治疗白血病及一些恶性肿瘤放疗或化疗后引起的造血系统、免疫系统功能障碍等疾病
A.使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分B.通常置于含有和的混合气体的培养箱中进行培养C.渗透压也是动物细胞培养过程中需要考虑的一个重要环境参数D.需要对培养液和所有培养用具进行灭菌处理以及在无菌环境下进行操作
B
练习
例2 下列关于动物细胞培养过程的叙述，正确的是( )。
动物细胞培养的条件
保证无菌、无毒的环境
无菌
①对培养液和所有培养用具进行灭菌处理
②在无菌环境下进行操作
定期更换培养液。
无毒
③添加一定量的抗生素
目的：方便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成伤害。
动物细胞培养的条件
温度、PH和渗透压
(1)适宜的温度：哺乳动物多以__________ ℃为宜。(2)适宜的pH：多数细胞生存的适宜pH为_________。(3)适宜的渗透压。

新教材高中生物第2章第2节动物细胞工程一动物细胞培养pptx课件新人教版选择性必修3

及应用(生命观念、科学思维、社会责任)
知识导图
课前·新知导学
动物细胞培养的条件
1．动物细胞培养的概念从动物体中取出相关的组织，将它分散成___单__个__细__胞___，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞___生__长___和___增__殖___的技术。
2．动物细胞培养的条件 (1) 营养：动物细胞培养所需的营养有 ___糖__类____ 、氨基酸、无机盐、维生素等，将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基，称为__合__成__培__养__基__。通常需要在培养基中加入__血__清____等一些天然成分。 (2)无菌、无毒的环境：对_培__养__液___和所有_培__养__用__具___进行无菌处理以及在_无__菌__环__境___下进行操作。培养液需要__定__期__更__换__，以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。
5．应用 (1)将正常的__造__血__干__细__胞____移植到病人体内，恢复病人的_造__血___和免疫功能，用来治疗白血病等疾病。 (2)__神__经__干__细__胞____在治疗神经组织损伤和神经系统退行性疾病方面 (如帕金森病、阿尔茨海默病等)有重要的应用价值。 (3)用___i_P_S_细__胞____治疗阿尔茨海默病、心血管疾病等领域的研究也取得了新进展。
(3)温度、pH和渗透压 ①适宜的温度条件：_3_6_._5_℃___±0.5 ℃。 ②适宜的pH条件：__7_.2_～__7_._4__。 ③CO2的主要作用是维持__培__养__液__的__p_H___。
动物细胞培养液中为什么要加动物血清？ _____________________________________。【答案】血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等物质，而且还含有多种未知的促生长因子，能促进细胞的生长、增殖

动物细胞工程

动物细胞工程动物细胞工程常用的技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等，其中动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。

动物细胞培养和核移植技术动物细胞培养动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。

动物细胞培养的过程：（1）将组织分散成许多单个细胞（方法：从健康动物体内取出组织块，剪碎，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间，这样组织就会分散成单个细胞）（2）用培养液将分散的细胞稀释制成细胞悬液（3）将细胞悬液放入培养瓶内，置于适当环境中培养（悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。

培养贴附性细胞时，细胞要能够贴附于底物上才能生长增殖，这就要求培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒，易于贴附。

以后，细胞进行有丝分裂。

数量不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。

人们通常将底物组织消化后的初次培养称为原代培养。

）（4）贴壁细胞用胰蛋白酶处理分散成单个细胞，制成细胞悬液，分瓶继续培养，让细胞继续增殖。

（传代培养。

传代培养的细胞一般传至10代后就不易传下去了。

一般来说，细胞在传至10~50代左右时，增殖会逐渐缓慢，这时部分细胞的细胞核型可能会发生变化。

当继续传代培养时，少部分细胞虎克服细胞寿命的自然极限，获得不死性，这些细胞已经发生了突变，正在朝着等同于癌细胞的方向发展。

目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为十代以内，以保持细胞正常的二倍体核型。

）动物细胞培养的条件（1）无菌、无毒的环境：即对培养液和所有培养用具进行无菌处理。

通常还要在细胞培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。

此外，应定期更换培养液，以便清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害（2）营养：细胞体外培养所需营养物质与体内基本相同，例如，需要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。