野生食用菌菌种分离与鉴定技术规范.

DB

福建省地方标准

DB/×××—2007

野生食用菌菌种分离与鉴定技术规范

（报批稿）

200×-××-××发布200×-××-××实施发布福建省质量技术监督局

DB/×××—2007

前言

本标准由福建省科技厅和福建省农业厅提出。

本标准起草单位：福建省三明真菌研究所、福建农林大学菌物研究中心、福建省科技厅星火办。

本标准主要起草人：黄年来、上官舟建、林汝楷、谢宝贵、林津添、张运茂、郭美英、朱坚、陈晓、吴小平、邓优锦、刘新锐。

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DB/×××—2007

野生食用菌菌种分离与鉴定技术规范

1范围

本标准规定了野生食用菌菌种采集、采集前准备、标本采集与保存、菌种分离与鉴别等。本标准仅适用于野生食用菌,不适用于有毒真菌。

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单位（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究可以使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB/T12728-2006食用菌术语

3术语和定义

下列术语和定义适用于本标准。

3.1

食用菌ediblemushroom

可食用的大型真菌，常包括食药兼用和药用大型真菌，多数为担子菌，如双孢蘑菇、香菇、草菇、牛肝菌等，少数为子囊菌，如羊肚菌、块菌等。

[GB/T12728-2006，定义2.1.4]

3.2

药用菌medicinalmushroom

有药用价值的高等(大型)真菌。

〔GBT12728-2006，定义2.1.5〕

3.3

木腐菌woodrottingmushroom

自然生长在木本植物上可引起木材腐烂的大型真菌。人工栽培的食用菌多数是木腐菌，如香菇、金针菇等。

[GB/T12728-2006，定义2.3.10]

3.4

草腐菌strawrottingmushroom

自然生长在草本植物残体上的大型真菌，如草菇、双孢蘑菇。

[GB/T12728-2006，定义2.3.11]

3.5

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土生菌geophilousmushroom

自然生长在富含有机质的土壤中的各类大型真菌。如羊肚菌。

[GB/T12728-2006，定义2.3.14]

3.6

粪生菌coprophilousmushroom

以腐熟动物粪便为营养源的腐生大型真菌。如粪污鬼伞。

[GB/T12728-2006，定义2.3.15]

3.7

菌根真菌mycorrhizalfungus

能与植物根系发生互惠共生关系形成菌根的真菌。如松口蘑与赤松。由于真菌菌丝深入植物根部程度的不同又有外生菌根和内生菌根之分。

[GB/T12728-2006，定义2.3.19]

3.8

分离isolation

从基物、子实体、菌丝培养物中取得纯菌种的过程。

[GB/T12728-2006，定义2.4.34]

3.9

核糖体转录间隔区NuclearRibosomalDNAInternalTranscribedSpacers

在真菌中，18S、5.8S、28S核糖体RNA的基因串联在一起，同时被转录，这三个基因之间被一段DNA序列隔开（ITS），18S和5.8S、5.8S和28S的基因之间的间隔区分别称为ITS1和ITS2，ITS序列具有较高的保守性，种内不同菌株之间的ITS序列同源性很高，但种间的差异较大，它可用于种的鉴别。

4.采集

4.1采集前的准备

4.1.1工具

采集前应备齐工具。采集工具包括小铲子或小锄子、锯子、高枝剪、柴刀、小篮子、采集袋、小瓶子、接种针、酒精灯、试管培养基、小型烘干设备、照相机、闪光灯、三脚架、海拔表或卫星定位仪、铅笔、油膏笔、标本记录表、尺子、放大镜、当地交通图、指南针及其它需要物品等。

4.1.2着装要求

应穿长袖衣服、长筒裤，扎紧裤脚，以防止被杂草割伤或被蚊虫、蚂蟥等叮咬。

4.1.3防护用品

应带上草帽、雨伞、雨衣等遮阳防雨用具，以及防蚊虫叮咬的清凉油、风油精、蛇药、防中暑药和解渴充饥的开水和干粮等。

4.1.4其它

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应预先计划安排交通工具。应根据行动计划安排人员，并根据调查范围划分小组，原则上每个小组必须为2人以上。应制定联络方式。最好有适当的向导。4.2标本采集与记录

4.2.1野生食用菌采摘

用于菌种分离的材料主要是子实体，在采摘时应尽可能保持子实体完整，包括菌环、菌柄基部、菌托等。

4.2.2标本存放

每一种标本应单独存放，防止互相干扰影响鉴定。应使用采集袋或样品盒等，以防止标本互相挤压。

4.2.3拍照

标本采集前应进行拍照。应拍摄子实体整体（包括菌环、菌柄基部、菌托等）、菌褶或菌管部分的照片，以及子实体周边的生态照片。

4.2.4记录

采集标本时应及时详细记录标本信息。记录标本信息用铅笔或油笔较好。标本记录表见附录A。

5菌种分离

5.1培养基

分离菌种常用的培养基见附录B。

5.2菌种分离方法

根据采集菌株的营养类型和标本的完好程度决定是否分离菌种，所有木腐菌、草腐菌、粪生菌和部分土生菌应尽可能进行菌种分离，菌根真菌如红菇、乳菇、牛肝菌等不用分离。常用的分离方法包括：