药物分析 第04章分析样品前处理
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药物分析中新型样品前处理技术-PPT
23
Anal. Methods, 2013, 5, 718-721
Determination of sulfonamide residues in water samples by inline solid-phase extraction-capillary electrophoresis
Schematic diagrams of the packed bed and impregnated membrane analyte concentrators proposed in this paper for CE analysis of sulfonamides. 24
A new poly(phthalazine ether sulfone ketone)-coated fiber for SPME to determine
nitroaromatic explosives in aqueous samples, Wenna Guan et al. J. Chromatography
microextraction fiber, Gui-bin Jiang et al. analytica chimica acta 6 1
42
1 ( 2 0 0 8 ) 56–61
各种不同的Fiber SPME
SEM images showing the surfaces of CNT films prepared in ethanol.
30
SPME的特点
无需或仅需极少洗脱溶剂 装置简单、易操作 快速 所需样品体积少 易于自动化、易于和其他技术联用
31
SPME发展历程
1990 Pawliszyn Waterloo University, SPME-GC 1993 Supelco Commercial SPME-GC 1995 Pawliszyn SPME-HPLC 1996 Supelco Commercial SPME-HPLC 1997 Pawliszyn in-tube SPME-HPLC
Anal. Methods, 2013, 5, 718-721
Determination of sulfonamide residues in water samples by inline solid-phase extraction-capillary electrophoresis
Schematic diagrams of the packed bed and impregnated membrane analyte concentrators proposed in this paper for CE analysis of sulfonamides. 24
A new poly(phthalazine ether sulfone ketone)-coated fiber for SPME to determine
nitroaromatic explosives in aqueous samples, Wenna Guan et al. J. Chromatography
microextraction fiber, Gui-bin Jiang et al. analytica chimica acta 6 1
42
1 ( 2 0 0 8 ) 56–61
各种不同的Fiber SPME
SEM images showing the surfaces of CNT films prepared in ethanol.
30
SPME的特点
无需或仅需极少洗脱溶剂 装置简单、易操作 快速 所需样品体积少 易于自动化、易于和其他技术联用
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SPME发展历程
1990 Pawliszyn Waterloo University, SPME-GC 1993 Supelco Commercial SPME-GC 1995 Pawliszyn SPME-HPLC 1996 Supelco Commercial SPME-HPLC 1997 Pawliszyn in-tube SPME-HPLC
药物分析：样品前处理和药物提取技术
2018/12/10
碱性物质
药物 pKa ＞pKa 2～3单位
32
Henderson—Hasselbalch公式
水相最佳pH值可通过公式计算求出:
[A－] pH = pKa + Log [HA] 酸式 碱式
碱性药物 pH﹥pKa 2~3个单位 酸性药物 pH﹤pKa 2~3个单位 当水相 pH 在以上条件时， 99%~99.9% 的药 物以非电离形式存在，易被有机溶剂提取
枯草杆菌蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶、枯
草菌溶素
2018/12/10 23
缀合物（结合物）水解
含有羟基、氨基、羧基、巯基的药物或代谢物分子 与葡萄糖醛酸结合成苷，与硫酸形成酯。这些缀合 物的极性均较母体大，亲水性强，不易被有机溶剂 提取，需进行水解处理 酸水解——常用盐酸。酸的浓度、酸化时间、加热 与否，随药物而异 (简便、快速，但专一性差) 酶水解——β-葡萄糖醛酸苷酶、芳基硫酸酯酶（酶 解时一般pH4.5~7.0，37℃厌氧条件下温育16 h。 尿液酶解时需事先除去尿中能抑制酶的阳离子 ） 溶剂解——一些药物的硫酸酯，可随加入的萃取溶 剂在萃取过程中发生分解
常用预处理方法
1. 去除蛋白质
去除蛋白的目的意义 使结合型药物释放出来，以测定总浓度 得到较“干净”的提取液，减少乳化 消除对测定的干扰 去除蛋白的方法 蛋白质沉淀法 组织的酶消化法
2018/12/10 19
蛋白质沉淀法
生成不溶性盐
酸类（TCA、HClO4、钨酸、焦磷酸等）—— 在低于蛋白质等电点的 pH 值时，酸根与带正 电荷的蛋白质形成不溶性盐而沉淀
甲醇
饱和(NH4)2SO4
2018/12/10
碱性物质
药物 pKa ＞pKa 2～3单位
32
Henderson—Hasselbalch公式
水相最佳pH值可通过公式计算求出:
[A－] pH = pKa + Log [HA] 酸式 碱式
碱性药物 pH﹥pKa 2~3个单位 酸性药物 pH﹤pKa 2~3个单位 当水相 pH 在以上条件时， 99%~99.9% 的药 物以非电离形式存在，易被有机溶剂提取
枯草杆菌蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶、枯
草菌溶素
2018/12/10 23
缀合物（结合物）水解
含有羟基、氨基、羧基、巯基的药物或代谢物分子 与葡萄糖醛酸结合成苷，与硫酸形成酯。这些缀合 物的极性均较母体大，亲水性强，不易被有机溶剂 提取，需进行水解处理 酸水解——常用盐酸。酸的浓度、酸化时间、加热 与否，随药物而异 (简便、快速，但专一性差) 酶水解——β-葡萄糖醛酸苷酶、芳基硫酸酯酶（酶 解时一般pH4.5~7.0，37℃厌氧条件下温育16 h。 尿液酶解时需事先除去尿中能抑制酶的阳离子 ） 溶剂解——一些药物的硫酸酯，可随加入的萃取溶 剂在萃取过程中发生分解
常用预处理方法
1. 去除蛋白质
去除蛋白的目的意义 使结合型药物释放出来，以测定总浓度 得到较“干净”的提取液，减少乳化 消除对测定的干扰 去除蛋白的方法 蛋白质沉淀法 组织的酶消化法
2018/12/10 19
蛋白质沉淀法
生成不溶性盐
酸类（TCA、HClO4、钨酸、焦磷酸等）—— 在低于蛋白质等电点的 pH 值时，酸根与带正 电荷的蛋白质形成不溶性盐而沉淀
甲醇
饱和(NH4)2SO4
2018/12/10
第04章定量分析样品前处理
适用于含卤素、硫、氮、硒等 有机药物的分析
本法特点是简便、快速、破坏完 全，尤其适用于微量样品的分析
（ 2） 仪器与材料
①仪器装置 燃烧瓶为500、1000或
2000ml无色、磨口、厚壁、 硬质玻璃锥型瓶；瓶塞空 心，底部熔封铂丝一根， 下端呈螺旋状或网状
②称样用材料及称样 A. 固体样品 无灰滤纸 B. 液体样品 纸袋 C. 软膏类样品：将适量样品置不含 被测成分的蜡油纸中包裹严密，外层 再用无灰滤纸包裹
第四章 药物定量分析与分析方 法验证
第一节 定量分析样品的前处理方法
一、含卤素有机药物的分析
含卤素有机药物系指药物分子结 构中所含卤素直接与芳环或脂肪链相 连者，而不包括某些有机药物的卤酸 盐或氢卤酸盐
结构特点：C—X
（一）卤原子的活泼性
1. 卤原子与碳原子直接相连，卤原 子的活泼性和它直接相连的烃基的结 构有很大关系
1000ml
2000ml或特殊结 构的燃烧瓶
正确选用燃烧瓶的目的在于： 样品能在足够的氧气中燃烧分解完 全；有利于将燃烧分解产物较快地 吸收到吸收液中；防止爆炸的可能 性。
②测定含氟有机药物时，用石英制 燃烧瓶 ③铂丝燃烧时起催化作用 ④应同时做空白试验 ⑤燃烧时要注意防爆
⑥燃烧要完全 ⑦燃烧产生的烟雾完全被吸收
2. 碱性或酸性还原后测定法
本法是将含卤素有机药物在碱性或 酸性下，加还原剂（如锌粉）加热回 流，药物产生还原裂解反应，使有机 结合的卤素转变为无机的卤素离子， 然后采用银量法（Fajans法）测定。
本法适用于测定结构中碘与苯环直 接相连，且一个苯环上含多个碘原子 的含卤素有机药物。
（1） 碱性还原后测定法
（3）操作方法
①燃烧瓶燃烧前的准备 用洗液洗净后，按各药品项下的规定加
本法特点是简便、快速、破坏完 全，尤其适用于微量样品的分析
（ 2） 仪器与材料
①仪器装置 燃烧瓶为500、1000或
2000ml无色、磨口、厚壁、 硬质玻璃锥型瓶；瓶塞空 心，底部熔封铂丝一根， 下端呈螺旋状或网状
②称样用材料及称样 A. 固体样品 无灰滤纸 B. 液体样品 纸袋 C. 软膏类样品：将适量样品置不含 被测成分的蜡油纸中包裹严密，外层 再用无灰滤纸包裹
第四章 药物定量分析与分析方 法验证
第一节 定量分析样品的前处理方法
一、含卤素有机药物的分析
含卤素有机药物系指药物分子结 构中所含卤素直接与芳环或脂肪链相 连者，而不包括某些有机药物的卤酸 盐或氢卤酸盐
结构特点：C—X
（一）卤原子的活泼性
1. 卤原子与碳原子直接相连，卤原 子的活泼性和它直接相连的烃基的结 构有很大关系
1000ml
2000ml或特殊结 构的燃烧瓶
正确选用燃烧瓶的目的在于： 样品能在足够的氧气中燃烧分解完 全；有利于将燃烧分解产物较快地 吸收到吸收液中；防止爆炸的可能 性。
②测定含氟有机药物时，用石英制 燃烧瓶 ③铂丝燃烧时起催化作用 ④应同时做空白试验 ⑤燃烧时要注意防爆
⑥燃烧要完全 ⑦燃烧产生的烟雾完全被吸收
2. 碱性或酸性还原后测定法
本法是将含卤素有机药物在碱性或 酸性下，加还原剂（如锌粉）加热回 流，药物产生还原裂解反应，使有机 结合的卤素转变为无机的卤素离子， 然后采用银量法（Fajans法）测定。
本法适用于测定结构中碘与苯环直 接相连，且一个苯环上含多个碘原子 的含卤素有机药物。
（1） 碱性还原后测定法
（3）操作方法
①燃烧瓶燃烧前的准备 用洗液洗净后，按各药品项下的规定加
药物分析-第四章-前处理
重现性: 不同实验室，不同人测定的精密度
编辑版ppt
13
(3)专属性（specificity）
中国药科大学药物分析教研室
指有其他成分（杂质、降解物、辅料等）可能 存在情况下采用的方法能准确测定出被测物的 特性)。
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14
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(4) 检测限（limit of detection， LOD） ： 药物能被检出的最低浓度(µg/ml) 测定: 信噪比法(S:N=3:1)
线性程度：相关系数
Y
b
(7) 耐用性（robustness）:
a X
测定条件稍有变动时，对测定结果的影响程度
影响因素：被测溶液的稳定性，流动相的组成和pH， 商品柱的品牌，柱温等
编辑版ppt
16
检验项目和验证内容
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项目内容 鉴别
准确度
精密度
重复性
中间精密度
专属性②
＋
检测限
定量限
氧瓶燃烧法
样品
吸收液
测定方法
含氟有机药物 H2O
pH4.3 HAc-NaAc Buffer 茜素氟蓝
分光光度法
含氯有机药物 NaOH溶液 银量法 汞量法
分光法
含溴有机药物 或H2NOa2O-NHa液OH- 液 银量法 分光法
硫酸肼饱和液
含碘有机药物 NaOH液-Fra bibliotek银量法 碘量法
硫酸肼饱和液 汞量法 分光法
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第四章 药物定量分析与分析方法验 证
⊙定量分析样品前处理方法 ⊙ 定量分析方法特点 ⊙药品质量标准分析方法验证
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1
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(3)专属性（specificity）
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指有其他成分（杂质、降解物、辅料等）可能 存在情况下采用的方法能准确测定出被测物的 特性)。
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(4) 检测限（limit of detection， LOD） ： 药物能被检出的最低浓度(µg/ml) 测定: 信噪比法(S:N=3:1)
线性程度：相关系数
Y
b
(7) 耐用性（robustness）:
a X
测定条件稍有变动时，对测定结果的影响程度
影响因素：被测溶液的稳定性，流动相的组成和pH， 商品柱的品牌，柱温等
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检验项目和验证内容
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项目内容 鉴别
准确度
精密度
重复性
中间精密度
专属性②
＋
检测限
定量限
氧瓶燃烧法
样品
吸收液
测定方法
含氟有机药物 H2O
pH4.3 HAc-NaAc Buffer 茜素氟蓝
分光光度法
含氯有机药物 NaOH溶液 银量法 汞量法
分光法
含溴有机药物 或H2NOa2O-NHa液OH- 液 银量法 分光法
硫酸肼饱和液
含碘有机药物 NaOH液-Fra bibliotek银量法 碘量法
硫酸肼饱和液 汞量法 分光法
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第四章 药物定量分析与分析方法验 证
⊙定量分析样品前处理方法 ⊙ 定量分析方法特点 ⊙药品质量标准分析方法验证
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药物分析课件 第四章 药物定量分析与分析方法验证_OK
样品能在足够的氧气中燃烧分解完全样品能在足够的氧气中燃烧分解完全有利于将燃烧分解产物较快地吸收到吸有利于将燃烧分解产物较快地吸收到吸防止爆炸的可能性防止爆炸的可能性26燃烧瓶要洁净不能残留有机溶剂不能用有机润滑剂涂抹瓶塞要有防爆措施氧气要充足确保燃烧完全产物不能有黑色炭化物燃烧产生的烟雾要被完全吸收充分振摇和放置都是为了保证吸收完全例
③要有防爆措施 ④氧气要充足，确保燃烧完全，产物不能有黑色
炭化物 ⑤燃烧产生的烟雾要被完全吸收
充分振摇和放置都是为了保证吸收完全 例：碘产生紫色烟雾；氯、氟产生白色烟雾，烟
雾颜色完全消失后，即表示吸收完全 ⑥测定含氟有机化合物时要用石英燃烧瓶
26
4、应用
含卤素、硫、磷、氟及硒等有机药物的鉴别、杂 质的检查及含量测定
100%
注射剂：标示量％＝
V0
V T 标示量
100%
V VO
T F 标示量
100%
VO : 量取注射剂的体积， ml
36
(2)间接滴定法 1）生成物滴定法
供试品＋试剂 A 化合物 B
化合物 B＋滴定液 C 化合物 D
计量滴定液消耗的量，计算供试品的含量 计算同直接滴定法
37
2）回滴定法（剩余滴定法） 原理：先在待测样品溶液中加定量、过量的滴定
10
（一）湿法破坏
（1） 硝酸-高氯酸法 适用于血、尿、组织等生物样品的破坏，有
机金属药物经破坏后，得到的无机金属离子一 般呈高价态。
本法不能用于含氮杂环药物的破坏
干法灼烧法 11
（2） 硝酸-硫酸法 适用于大多数有机物质的破坏，破坏得到的
无机金属离子均为高价态。 不能用于含碱土金属有机药物的破坏
27
氧瓶燃烧
③要有防爆措施 ④氧气要充足，确保燃烧完全，产物不能有黑色
炭化物 ⑤燃烧产生的烟雾要被完全吸收
充分振摇和放置都是为了保证吸收完全 例：碘产生紫色烟雾；氯、氟产生白色烟雾，烟
雾颜色完全消失后，即表示吸收完全 ⑥测定含氟有机化合物时要用石英燃烧瓶
26
4、应用
含卤素、硫、磷、氟及硒等有机药物的鉴别、杂 质的检查及含量测定
100%
注射剂：标示量％＝
V0
V T 标示量
100%
V VO
T F 标示量
100%
VO : 量取注射剂的体积， ml
36
(2)间接滴定法 1）生成物滴定法
供试品＋试剂 A 化合物 B
化合物 B＋滴定液 C 化合物 D
计量滴定液消耗的量，计算供试品的含量 计算同直接滴定法
37
2）回滴定法（剩余滴定法） 原理：先在待测样品溶液中加定量、过量的滴定
10
（一）湿法破坏
（1） 硝酸-高氯酸法 适用于血、尿、组织等生物样品的破坏，有
机金属药物经破坏后，得到的无机金属离子一 般呈高价态。
本法不能用于含氮杂环药物的破坏
干法灼烧法 11
（2） 硝酸-硫酸法 适用于大多数有机物质的破坏，破坏得到的
无机金属离子均为高价态。 不能用于含碱土金属有机药物的破坏
27
氧瓶燃烧
药物分析第04章分析样品前处理
I 2 2 N 2 S 2 O a 3 2 N N a 2 S 4 I O a 6
20
三、经有机破坏的分析方法
有机卤素及金属的药物结构中的卤素或 金属离子与碳原子结合牢固者,用上述方法 难以成为无机的化合物,此时必须采用有机 破坏的方法,使之转变为无机化合物,方可进 行测定.
1 湿法破坏法 2 干法破坏法 3 氧瓶燃烧法
泛影酸（卤素原子与芳环相连,化学键牢固）
COOH
COONa
I I
回流
CH3COHN
+11NaOH +3Zn
NHCOCH3
加热
I
H 2N
NH 2
+3NaI+2CH3COONa+3Na2ZnO2+3H2O
NaI+AgNO3
AgI +NaNO3
曙红钠为吸附指示剂 黄色 玫瑰红色
18
（2）酸性还原后测定
在醋酸酸性条件下加还原剂锌粉,加热 回流,使碳-碘键断裂,形成无机碘化物后用 银量法测定. 如：碘番酸含量测定
CH3CONH I
碘他拉酸
I
CONHCH3
HO
ICHΒιβλιοθήκη CHCOOHH2NC2H5 I
碘番酸
Br
CO
CO
SO 3N a
OH SO 3N a
磺溴酞钠
6
O
F
COOH
N
N
诺氟沙星
HN
C2H5
醋酸氟轻松
HO CH3
CH2OCOCH3
C CH3
O
O
CH3 C
O CH3
H
FH
O
7
F
2. 常见的含金属元素的有机药物
20
三、经有机破坏的分析方法
有机卤素及金属的药物结构中的卤素或 金属离子与碳原子结合牢固者,用上述方法 难以成为无机的化合物,此时必须采用有机 破坏的方法,使之转变为无机化合物,方可进 行测定.
1 湿法破坏法 2 干法破坏法 3 氧瓶燃烧法
泛影酸（卤素原子与芳环相连,化学键牢固）
COOH
COONa
I I
回流
CH3COHN
+11NaOH +3Zn
NHCOCH3
加热
I
H 2N
NH 2
+3NaI+2CH3COONa+3Na2ZnO2+3H2O
NaI+AgNO3
AgI +NaNO3
曙红钠为吸附指示剂 黄色 玫瑰红色
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（2）酸性还原后测定
在醋酸酸性条件下加还原剂锌粉,加热 回流,使碳-碘键断裂,形成无机碘化物后用 银量法测定. 如：碘番酸含量测定
CH3CONH I
碘他拉酸
I
CONHCH3
HO
ICHΒιβλιοθήκη CHCOOHH2NC2H5 I
碘番酸
Br
CO
CO
SO 3N a
OH SO 3N a
磺溴酞钠
6
O
F
COOH
N
N
诺氟沙星
HN
C2H5
醋酸氟轻松
HO CH3
CH2OCOCH3
C CH3
O
O
CH3 C
O CH3
H
FH
O
7
F
2. 常见的含金属元素的有机药物
药物分析-体内样品分析的前处理
2. 固相萃取法
(1) 固相萃取法的原理 (2) 固相萃取法操作步骤 (3) 注意事项 (4) 固相萃取法的特点 (5) 自动化固相萃取
(1) 固相萃取法的原理
含药物体内样品通过小柱时, 受到 “吸附”,“分配”,“离子交换”或其它亲和力 作用, 药物及内源性物质同时被保留在固定相(填料)
洗脱方式有两种: ①冲洗溶剂洗去干扰物, 再用对药物 亲和力更强的溶剂洗脱药物; ②药物直接被洗脱, 干扰物保留
(1) 溶剂的选取原则
①对药物分子未电离形式可溶, 对电离形式不溶；
②沸点低,易挥发;
③与水不相混溶;
④无毒, 不易燃烧; ⑤具有化学稳定和惰性; ⑥不影响紫外检测
①辅助试剂的使用 乙醚(1.2%水): 氯化钠
②混合溶剂的使用 正己烷-异丙醇(95:5)
溶剂
紫外截止波长 (nm)
沸点(℃)
正己烷
210
69
环己烷
210
81
甲苯
285
111
↓ 异丙醚* 极 性 乙醚*
220
68
220
35
增 醋酸戊酯 加 ↓ 三氯甲烷
285
149
245
61
甲基异丁基酮
230
116
醋酸乙酯
260
77
正丁醇
215Βιβλιοθήκη 118*:含过氧化物；:肝脏毒性, 有致癌作用
(2) 溶剂的用量
有机相与水相(样品)体积比为1:1~5:1
对于单个样品处理, SPE操作省时 对于大量样品的处理
半自动SPE: 萃取过程机械化 全自动化仪器: 通过柱切换技术
实现固相萃取与HPLC联用
(5) 自动化固相萃取法 柱切换: 固相萃取-LC/MS/MS
药物分析第04章定量分析样品前处理与分析方法验证
第四章 药物定量分析与分析方法验证
1
本章主要内容：
第一节 定量分析样品的前处理方法 一、概述 二、不经有机破坏的分析方法 三、经有机破坏的分析方法
第二节 定量分析方法的特点 第三节 药品分析方法验证
2
本章主要学习目的： 1.熟悉不经有机破坏的分析方法； 2.熟悉经有机破坏的分析方法； 3.掌握氧瓶燃烧法； 4.掌握测定方法的效能指标。
39
（4）操作方法
在燃烧瓶内加入规定的吸收液，并将瓶口用水
湿润；小心急速通氧气约1分钟，立即用表面皿覆盖
瓶口，备用；点燃包有供试品的滤纸包或纸袋尾部，
迅速ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ入燃烧瓶中，按紧瓶塞，加水少量封闭瓶口，
俟燃烧完毕（应无黑色碎片），充分振摇，使生成的
烟雾完全吸入吸收液中，放置15min，用水少量冲洗
瓶塞及铂丝，合并洗液及吸收液，同法另做空白试验。
3
第一节 定量分析样品的前处理方法
目的:使待测药物或待测元素转化为适宜的测定方 式, 从而利于分析测定。 优点: 增加测定的专属性和灵敏度。
样品种类： 1. 含卤素元素（F、Cl、Br、I） 2. 含金属元素（Ca、Fe、Hg、Zn、Sn 、Bi) 3. 含N、P、S 等元素
4
第一节 定量分析样品的前处理方法
燃 烧 瓶 容 积 大 小 的 选 择 。 通 常 取 样 量 为 10 － 20mg，使用500ml燃烧瓶;加大样品取样量（200mg） 时可选用1000或2000ml的燃烧瓶。
35
图2 氧瓶燃烧装置与样品包装操作图
36
（ 2）吸收液的选择
A. 作用： 吸收液的作用是将样品经燃烧分解所产生的各 种价态的卤素、硫、氮、硒等，定量地吸收并转变 为一定的便于测定的价态。
1
本章主要内容：
第一节 定量分析样品的前处理方法 一、概述 二、不经有机破坏的分析方法 三、经有机破坏的分析方法
第二节 定量分析方法的特点 第三节 药品分析方法验证
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本章主要学习目的： 1.熟悉不经有机破坏的分析方法； 2.熟悉经有机破坏的分析方法； 3.掌握氧瓶燃烧法； 4.掌握测定方法的效能指标。
39
（4）操作方法
在燃烧瓶内加入规定的吸收液，并将瓶口用水
湿润；小心急速通氧气约1分钟，立即用表面皿覆盖
瓶口，备用；点燃包有供试品的滤纸包或纸袋尾部，
迅速ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ入燃烧瓶中，按紧瓶塞，加水少量封闭瓶口，
俟燃烧完毕（应无黑色碎片），充分振摇，使生成的
烟雾完全吸入吸收液中，放置15min，用水少量冲洗
瓶塞及铂丝，合并洗液及吸收液，同法另做空白试验。
3
第一节 定量分析样品的前处理方法
目的:使待测药物或待测元素转化为适宜的测定方 式, 从而利于分析测定。 优点: 增加测定的专属性和灵敏度。
样品种类： 1. 含卤素元素（F、Cl、Br、I） 2. 含金属元素（Ca、Fe、Hg、Zn、Sn 、Bi) 3. 含N、P、S 等元素
4
第一节 定量分析样品的前处理方法
燃 烧 瓶 容 积 大 小 的 选 择 。 通 常 取 样 量 为 10 － 20mg，使用500ml燃烧瓶;加大样品取样量（200mg） 时可选用1000或2000ml的燃烧瓶。
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图2 氧瓶燃烧装置与样品包装操作图
36
（ 2）吸收液的选择
A. 作用： 吸收液的作用是将样品经燃烧分解所产生的各 种价态的卤素、硫、氮、硒等，定量地吸收并转变 为一定的便于测定的价态。
药物分析-样品的前处理
利用凝胶渗透色谱柱对样品中不 同成分的分子大小进行分离，大 分子物质先被洗脱出来，小分子 物质后被洗脱出来，从而实现样
品的净化。
浓缩方法与技巧
蒸发浓缩法
冷冻干燥法
将样品溶液加热至沸腾，使溶剂蒸发， 留下目标成分。适用于热稳定性好的 样品。
将样品溶液冷冻成固体，然后在真空 条件下使冰直接升华，留下目标成分。 适用于热敏性、易氧化样品。
富集目标物质
对于量较低的目标物质，通过前处理进行富集， 以提高检测灵敏度和分析效率。
改变样品性质
通过前处理改变样品的物理或化学性质，使其更适 合后续的分析方法或仪器要求。
样品前处理的流程
01
样品接收与登记
接收样品并进行详细登记，包括样品名称、来源、数 量、保存条件等信息。
02
样品制备
根据分析方法的要求，对样品进行适当的制备，如研 磨、均质、稀释等。
旋转蒸发法
在减压条件下，通过旋转样品瓶使溶 液形成薄膜，加快溶剂蒸发速度。适 用于易挥发、热稳定性差的样品。
净化与浓缩的注意事项
在进行样品净化时，应 根据目标成分的性质选 择合适的净化方法，避 免目标成分的损失。
在进行样品浓缩时，应 注意控制加热温度和真 空度，避免目标成分的 分解或挥发。
在操作过程中应注意防 止交叉污染和实验室污 染，保证结果的准确性 。
03
提取与分离
采用适当的提取方法将目标物质从样品中提取出来， 并进行必要的分离和纯化。
04
浓缩与富集
对提取液进行浓缩和富集，以提高目标物质的浓度和 检测灵敏度。
05
定容与保存
将处理后的样品定容至适当体积，并按要求保存以备 后续分析。
样品前处理的重要性
01
品的净化。
浓缩方法与技巧
蒸发浓缩法
冷冻干燥法
将样品溶液加热至沸腾，使溶剂蒸发， 留下目标成分。适用于热稳定性好的 样品。
将样品溶液冷冻成固体，然后在真空 条件下使冰直接升华，留下目标成分。 适用于热敏性、易氧化样品。
富集目标物质
对于量较低的目标物质，通过前处理进行富集， 以提高检测灵敏度和分析效率。
改变样品性质
通过前处理改变样品的物理或化学性质，使其更适 合后续的分析方法或仪器要求。
样品前处理的流程
01
样品接收与登记
接收样品并进行详细登记，包括样品名称、来源、数 量、保存条件等信息。
02
样品制备
根据分析方法的要求，对样品进行适当的制备，如研 磨、均质、稀释等。
旋转蒸发法
在减压条件下，通过旋转样品瓶使溶 液形成薄膜，加快溶剂蒸发速度。适 用于易挥发、热稳定性差的样品。
净化与浓缩的注意事项
在进行样品净化时，应 根据目标成分的性质选 择合适的净化方法，避 免目标成分的损失。
在进行样品浓缩时，应 注意控制加热温度和真 空度，避免目标成分的 分解或挥发。
在操作过程中应注意防 止交叉污染和实验室污 染，保证结果的准确性 。
03
提取与分离
采用适当的提取方法将目标物质从样品中提取出来， 并进行必要的分离和纯化。
04
浓缩与富集
对提取液进行浓缩和富集，以提高目标物质的浓度和 检测灵敏度。
05
定容与保存
将处理后的样品定容至适当体积，并按要求保存以备 后续分析。
样品前处理的重要性
01
药物分析：样品前处理和药物提取技术
EDTA盐、枸橼酸盐、草酸钠等。
（2）血清的制备 将采集的静脉血置试管中，放置30～
60 min。由于激活了一系列凝血因子，血
中的纤维蛋白原形成纤维蛋白，血液逐渐
凝固。以2500～3000 r／min离心5～10
min，上层澄清的淡黄色液体即为血清。
（3）全血的制备 将采集的血液置含有抗凝剂的试管中，
2018/12/10 16
样品处理与分析方法选择
血样/组织/尿
沉淀蛋白； 缀合物水解
上清液
调节水样pH， 有机溶剂提取 提取液
免疫分析
HPLC, LC/MS GC, GC/MS
衍生化
净化 残渣定容
酸碱回提
光谱法
17
生物样品的预处理技术-有机破坏
一些生物样品需通过有机破坏方式进行降解，使 被测物游离，如头发样品中微量元素的测定 干法破坏 高温电阻炉灰化法：适用于头发样品的破坏 氧瓶燃烧法：适用于头发样品和血样的破坏 湿法破坏 将样品置消解液中加热处理，常用消解液有： 硝酸-高氯酸（反应激烈，注意勿蒸干，以免 爆炸）、硝酸、盐酸、氢氧化钠等 加热方式一般采用电热板法
样品前处理和药物提取技术
目
1
录
第一节 生物样品的采集、制备、贮存
2
第二节 生物样品的预处理
3
第三节 提取分离及相关技术
4
第四节 化学衍生化
第一节
生物样品的采集、制备、贮存
生物样品的种类
血液：药物浓度与作用部位的药物浓度呈正相关，
可以较好地体现药物浓度和治疗作用之间的关系。
尿液：一般用于生物利用度、尿药排泄量及尿中药 物或其代谢物等的测定。 唾液：唾液中的药物浓度与血浆中的药物浓度比值 恒定时，其中的药物浓度可以代表血浆中游离药物浓度，
中国药科大学药物分析考点整理(适用于期末、研究生考试)
中国药科大学药物分析考点整理(适用于期末、研究生考试)第一章药典概况一、药典内容：凡例、正文、附录、索引1.凡例：解释和使用药典的基本原则，并规定共性咨询题标准品、对比品系指用于鉴不、检查、含量测定的标准物质，均由国务院药品监督治理部门指定的单位制备、标定和供应。
标准品系指用于生物检定、抗生素或生化药品中含量或效价测定的标准物质，按效价单位（或ug）计，以国际标准品举行标定；对比品除另有规定外，均按干燥品（或无水物质）举行计算后使用。
2.正文：药品或制剂的质量标准。
按笔画顺序罗列，单方制剂在其原料药后，药用辅料集中编排。
3.附录：制剂通则、通用检测办法、指导原则。
4.索引：中文按拼音排序，英文按字母排序。
二、药典发展与国外药典1.共8版药典：1953、1963、1977、1985、1990、1995、2000、200505版首次将《中国生物制品规程》纳入，列为三部2.美国USP(32)-NF(27)，英国BP，欧洲Ph-Eur，XXX药局方JP三、药品检验工作基本程序：取样、鉴不、检查、含量测定、写出检验报告。
第二章药物的鉴不试验一、概述：判不真伪，检验是否为标示药物，别能赖以鉴不未知物。
二、鉴不试验项目1.性状：外观、溶解度、物理常数（熔点、比旋度、汲取系数）2.普通鉴不试验：依靠阴阳离子及官能团，证实是某一类，别能证实是哪一种。
3.专属鉴不反应：证实某一种药物的依据，选用特有的灵敏定性反应，鉴不真伪。
三、鉴不办法1.化学法：呈群反应、沉淀生成反应、荧光反应、气体生成反应、使试剂褪XXX、测定生成物熔点2.光谱法：紫外（专属性别如红外）、红外、近红外、原子汲取、核磁共振3.X射线粉末衍射4.群谱法：薄层群谱、高效液相、质谱5.生物学法第三章药物的杂质检查一、概述1.来源（1）在生产过程中引入：在合成药物的生产过程中，原料别纯或未反应彻底、反应的中间体与反应副产物在精制时未能彻底除去而引入杂质。
药物分析-第四章_药物的含量测定方法
被测 滴定 药物 液
W W 被测药物反应的质量 A
B 滴定液反应的质量
aM 被测药物的摩尔质量 A
bM B 滴定液的摩尔质量
精品课件
（二）容量分析法的有关计算
• 滴定度的计算 用B滴定A
WA
滴定液
WB bMB
MA
a待测液
nB
a b
MA
浓度乘
mB
浓度
VB
b
M
A
体积=nB
mB
等于 1mL
计算有一个从质量到物质的量， 再到浓度再到滴定度的转变过程
供试液（X）： AX CX
—CCRA—XX ＝——CARR CX＝—C—RA·R——AX
要求：进样量准确、操作条件稳定
精品课件
3. HPLC测定法
• 示例一 炔诺酮的含量测定
• 照高效液相色谱法（附录VD测定）
精品课件
（二）容量分析法的有关计算
T(mg/mL)maM b
• 示例一 计算Vc的滴定度T
• 碘量法测定Vc含量[M（C6H6O6）=176.13]，C（I2） =0.05mol/L
C 6H 8O 6I2 C 6H 6O 62H I
Tm
精品课件
精品课件
（二）容量分析法的有关计算
• 习题二 非那西丁含量测定
精密称取本品0.3630g加稀盐酸回流1小时后，放冷，用亚硝 酸钠液（0.1010mol/L)滴定，用去20.00mL。每1mL亚硝酸 钠液（0.1mol/L)相当于17.92mg的C10H13O2N，请计算非那 西丁的含量。
精品课件
二、光谱分析法
mg转化单位
• 溶液 • 片剂
标 示 量 （ % ） =E A 1 1c % mD 1 0 V 0 V 10 00 B100% 标 示 量 （ % ） =E A 1 1 c % mD 1 0 W 0 W 10 00 B100%
W W 被测药物反应的质量 A
B 滴定液反应的质量
aM 被测药物的摩尔质量 A
bM B 滴定液的摩尔质量
精品课件
（二）容量分析法的有关计算
• 滴定度的计算 用B滴定A
WA
滴定液
WB bMB
MA
a待测液
nB
a b
MA
浓度乘
mB
浓度
VB
b
M
A
体积=nB
mB
等于 1mL
计算有一个从质量到物质的量， 再到浓度再到滴定度的转变过程
供试液（X）： AX CX
—CCRA—XX ＝——CARR CX＝—C—RA·R——AX
要求：进样量准确、操作条件稳定
精品课件
3. HPLC测定法
• 示例一 炔诺酮的含量测定
• 照高效液相色谱法（附录VD测定）
精品课件
（二）容量分析法的有关计算
T(mg/mL)maM b
• 示例一 计算Vc的滴定度T
• 碘量法测定Vc含量[M（C6H6O6）=176.13]，C（I2） =0.05mol/L
C 6H 8O 6I2 C 6H 6O 62H I
Tm
精品课件
精品课件
（二）容量分析法的有关计算
• 习题二 非那西丁含量测定
精密称取本品0.3630g加稀盐酸回流1小时后，放冷，用亚硝 酸钠液（0.1010mol/L)滴定，用去20.00mL。每1mL亚硝酸 钠液（0.1mol/L)相当于17.92mg的C10H13O2N，请计算非那 西丁的含量。
精品课件
二、光谱分析法
mg转化单位
• 溶液 • 片剂
标 示 量 （ % ） =E A 1 1c % mD 1 0 V 0 V 10 00 B100% 标 示 量 （ % ） =E A 1 1 c % mD 1 0 W 0 W 10 00 B100%
(完整)《药物分析》课程
高职药学专业《药物分析》课程标准一、概述（一）课程性质《药物分析》课程是一门研究和发展药品全面质量控制的“方法学科”。
它主要运用化学、物理化学或生物化学的方法和技术研究化学结构已经明确的合成药物或天然药物及其制剂的质量控制方法，也研究中药制剂和生化药物及其制剂有代表性的质量控制方法。
药物分析课程主要强调理论联系实际，突出其知识性，强化实践性和实用性，培养学生树立药品质量第一的观念,使其能按照药品质量标准对药品进行全面的质量分析,从而使学生掌握药学专业所必需的药物分析基本知识和基本技能，以培养具有在医院、药厂、医药公司、药品检验等部门从事药品分析检验工作的实用型人才。
《药物分析》课程是五年制高职药学专业和高职药品经营与管理专业重要的专业课程。
（二）课程基本理念1．《药物分析》是我国药学专业规定设置的一门主要专业课程，是整个药学科学领域中一个重要的组成部分。
药品，是用于预防、治疗、诊断人的疾病，有目的地调节人的生理功能并规定有适应症或者功能主治、用法和用量的物质，是一种关系人民生命健康的特殊商品。
因此，保证广大人民能使用高质、安全和有效的药品是药学工作者的神圣职责。
2．《药物分析》课程培养学生建立起药品质量第一的观念和严谨的科学作风，始终围绕药品质量问题,研究控制药品质量的规律与方法，掌握药物分析处理问题的基本思路和方法,加强基本实验技能的训练，培养学生运用药物分析的知识解决新药研发中和商品药物使用中的药品质量控制的能力，培养学生进一步获取知识的能力和创新思维的习惯。
3．《药物分析》课程内容设置强调紧贴药物分析工作的实际需要，在“必需、够用”的前提下，突出“精简、新颖、科学、合理、可操作性强”的特点，使学生通过学习具备强烈的药品全面质量控制的观念，使学生能够胜任药品研究、生产、供应和临床使用过程中的分析检验工作，并能具有探索解决药品质量问题的基本思路和基本能力.4．《药物分析》课程强调学生自主学习能力、实践能力、科学精神、协作精神的培养.主张以研究性学习、基于问题的学习等方法开展自主学习，使学生不仅学到必备的专业知识,更要学会学习的方法,为终身学习打下坚实的基础。
药物分析中的样品前处理技术研究
药物分析中的样品前处理技术研究在药物研发和应用过程中，药物分析是至关重要的环节之一。
而样品前处理技术在药物分析中扮演着重要的角色。
本文将从样品前处理技术的定义、分类、常用方法及其优势等方面进行探讨。
一、样品前处理技术的定义样品前处理技术是指在药物分析中，对药物样品进行预处理以消除干扰物质、提高药物测定的准确性和灵敏度的一系列操作。
样品前处理的目的是将复杂的实际样品转换为适于仪器检测和定量分析的形式。
二、样品前处理技术的分类根据样品的性质和分析目的的不同，样品前处理技术可以分为以下几类：1. 洗脱技术：通过洗涤样品来去除杂质，常用的洗脱技术包括溶剂萃取、水相萃取和固相萃取等。
2. 浓缩技术：将样品中的分析物浓缩到较小的容量中，常用的浓缩技术包括蒸发浓缩、气相浓缩和液相浓缩等。
3. 分离技术：将样品中的目标物与干扰物质进行分离，常用的分离技术包括萃取、析出、萃淋和分液等。
4. 净化技术：去除样品中的杂质或干扰物质，常用的净化技术包括沉淀净化、离子交换净化和凝胶渗透层析净化等。
三、常用的样品前处理方法根据样品的特性和分析目的，药物分析中常用的样品前处理方法包括以下几种：1. 固相萃取（Solid Phase Extraction，SPE）：通过吸附柱将样品中的目标物吸附，同时去除干扰物质，然后用溶剂洗脱目标物。
SPE具有简单、高效、高选择性和灵敏度高等优势。
2. 液-液萃取（Liquid-Liquid Extraction，LLE）：利用两相不溶的溶剂，将样品中的目标物从样品液相中转移到另一溶剂中，以实现分离和浓缩。
LLE具有选择性好、适用范围广等优点。
3. 直接注射（Direct Injection）：适用于目标物浓度较高、样品不含干扰物质或对干扰物质不敏感的情况。
直接注射省去了前处理步骤，简化了分析流程。
4. 溶剂萃取（Solvent Extraction）：利用溶剂与目标物之间的相溶性差异，将目标物提取到有机相中，以实现分离和浓缩。
药物分析—生物样品分析的前处理
（二）去除蛋白质
测定血样时，首先应去除蛋白质
1. 加入与水相混溶的有机溶剂 常用的水溶性有机溶剂有：乙腈、
甲醇、乙醇、丙酮、丙醇、四氢呋 喃等
2. 加入中性盐
常用的中性盐： 饱和硫酸铵、硫酸 钠、镁盐、磷酸盐及枸橼酸盐等
盐析方法与有机溶剂提取法并用时， 可提高药物的回收率
3. 加入强酸
常用的强酸：10%三氯醋酸、6% 高氯酸、硫酸-钨酸混合液及5%偏磷 酸等
缀合物——药物经代谢后， 极性增强，与内源性物质结合， 发生缀合反应，共价键结合， 不可逆。与葡萄糖醛酸结合— 葡萄糖醛酸苷，与硫酸形成硫 酸酯缀合物。
（三）生物药物分析的特点 1. 样品成分复杂，干扰物质多，
大多需要经过分离、浓集后才能进 行测定——预处理
2. 样品的药物浓度低，对分析方 法的灵敏度有较高的要求——灵敏 度高
体液、器官、组织及排泄 物等
生物样品的介质组成比 较复杂：高分子蛋白质和低 分子糖、脂肪、尿素等有机 物，Na+、K+、X-等无机物
体内药物存在形式： 游离型——原型药物、代谢物； 药物与蛋白质的结合物——主要 与白蛋白、糖蛋白、脂蛋白结合， 通过范德华力、氢键、静电力结合， 非特异性结合，可逆过程，动态过 程；
多数药物为亲脂性化合物，而 大多数内源性杂质是强极性的水溶 性物质，因此用有机溶剂提取一次 即可除去大部分杂质。
（1）常用萃取溶剂及萃取方法 ①溶剂的选择
最常用乙醚和氯仿 ②溶剂的用量
有机相：水相=1︰1 或2︰1
③提取的pH 多数生物样品在碱性 下提取；当一些碱性药物在碱性条 件下不稳定时，则在近中性pH用氯 仿和异丙醇提取；中性药物在pH7 附近提取。
④提取次数 一般只提取一次
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泛影酸（卤素原子与芳环相连,化学键牢固）
COOH I I CH3COHN I NHCOCH3
COONa
回流 +11NaOH +3Zn 加热
H 2N
NH2
+3NaI+2CH3COONa+3Na2ZnO2+3H2O NaI+AgNO3 AgI +NaNO3
曙红钠为吸附指示剂 黄色
玫瑰红色
18
（2）酸性还原后测定
（一）样品采集
生物样本： 生物体的任何脏器、组织、体液均可作为生物样本. 常用样本: 血液（血浆、血清或全血）、尿液、唾液、毛发 样品处理方法： （１）去蛋白质 （３）仪器分析 （２）分离纯化浓集 （ 4 ）缀合物水解
1 血浆或血清样品处理
适用：有机药物药动学研究、生物利用度测定、治疗 34 药物检测等
Br
Br Br
Br C O
C O
碘他拉酸
I I H2N I
HO SO3Na
OH SO3Na
CH2CHCOOH C2H5
磺溴酞钠
碘番酸
6
O F N HN N C2H5
CH2OCOCH3 C O CH3 CH3 O C CH3 O H H
7
COOH
诺氟沙星
HO
醋酸氟轻松
O
CH3 F F
2. 常见的含金属元素的有机药物
12
原理
HC O C C O CH Oˉ
+
Fe2+
Oˉ
Fe2+ + Ce4+
Hale Waihona Puke Ce3+ +
Fe3+
Fe2+ + e
N N 3 N N 3
Fe3+
红色
浅蓝色
13
2 经水解后测定法 （1）直接回流后测定法
将含卤素的有机药物溶于适当溶剂（如 乙醇）中,加氢氧化钠溶液或硝酸银溶液后, 加热回流使其水解,将有机结合的卤素,经 水解作用转变为无机的卤素离子,然后选用 间接银量法进行测定.
氧瓶燃烧法是将有机药物放入充满氧气的 密闭烧瓶中进行燃烧,并将燃烧所产生的欲测物 质（气态）吸收于适当吸收液中,然后根据欲测 物质的性质,采用适当分析方法进行鉴别、检查 或含量测定.
特点
① 快速分解有机药物的简单方法.
② 不需复杂设备,能使有机结合中的待测元素定量地 分解成无机离子状态. ③ 适用于含卤素及硫、磷、硒等药物的鉴别、检查 25 和含量测定,特别适用于微量样品的测定.
CH CH C O O O O Sb Sb 2K+ 3H2O O O O O O C CH CH C O O C O
酒石酸锑钾
Mg(C17H35COO)2
C C CH O Fe O
硬脂酸镁
O
C O
富马酸亚铁
8
CH2OH HOCH2 CHOH HOCH CHO OH O OCH 9H CHO Sb O Sb OCH Na3· CHO OCH COO OOC
1 湿法破坏法 2 干法破坏法 3 氧瓶燃烧法
21
1 湿法破坏法
根据所用试剂的不同，湿法破坏可分为以下 几种： ① ② ③ 硝酸-高氯酸法 －破坏力强,不适于含氮杂环 硫酸-硫酸盐法 －常用于含砷、锑有机药物 硝酸-硫酸法 －适于大多数有机物质破坏
22
湿法破坏法注意事项：
1 取样量 含金属元素在10 ~ 100g范围内,取样10 g 生物样品—血样10 ~15ml；尿样50ml 2 所用仪器凯氏烧瓶 3 空白试验 4 通风橱中进行
（1）仪器装置
26
（2）操作
①取样10-20mg
②加吸收液﹑通氧 ③燃烧
④吸收 ⑤测定
O2 /Pt 吸收于 样品 燃烧产物 吸收液 适宜方法测定 燃烧
27
（3）注意事项
①. 充氧气要充分
使样品燃烧完全,一般急速通氧气1~2分钟,通气 管应接近液面，使瓶内空气排尽，燃烧完全时没有黑 色炭化物. ②. 吸收完全
在醋酸酸性条件下加还原剂锌粉,加热 回流,使碳-碘键断裂,形成无机碘化物后用 银量法测定. 如：碘番酸含量测定
I I H2N I CH2CHCOOH C2H5
用四溴酚酞乙酯作指示剂， AgNO3滴定。 黄色沉淀→绿色
19
（3）利用药物中可游离的金属离子的 氧化性测定含量
含锑药物Sb5+具有氧化性,在酸性下氧化 KI定量析出I2，可用Na2S2O3 滴定. 例如：葡萄糖锑钠
2．选择氧瓶燃烧法所必备的实验物品(
A. 磨口硬质玻璃锥形瓶 D. 氢气 B. 铂丝 E. 无灰滤纸
)
C. 普通滤纸
3. 氧瓶燃烧法可用于(
)
A. 含卤素有机药物的含量测定 B. 醚类药物的含量测定 C. 检查甾体激素类药物中的氟 D. 检查甾体激素类药物中的硒
33
E. 芳酸类药物的含量测定
第二节 体内样品分析预处理方法
应充分振摇,燃烧瓶看不到烟雾. Cl－、F－白色烟雾 Br－棕色 I－紫色 放置15min，用少量水冲洗瓶塞及铂丝。
28
③. 吸收液的选择
氟 氯 水 NaOH溶液
溴 H2O2-NaOH NaOH-硫酸肼饱和溶液 碘 NaOH－硫酸肼饱和溶液 硫 NaOH或H2O2 硒 硝酸溶液
④. 防爆 样品燃烧时,温度很高,燃烧瓶内压力很大,有爆炸 的可能性,必须采取防护措施. 戴防护眼镜 防护措施 29 瓶外包湿毛巾
（4）卤素化合物的燃烧产物
①氟化物、氯化物
O2 / Pt R X X CO2 H 2O
氟或氯以离子状态存在，吸收后可直接测定.
②溴化物
O 2 / Pt R Br Br2 Br CO 2 H 2 O
量大 量少
③碘化物
O 2 / Pt R I I 2 I IO3 CO 2 H 2 O
14
① 三氯叔丁醇
CCl3C(CH3)2OH + 4NaOH 回流 △
(CH3)2CO + 3NaCl + HCOONa + 2H2O
NaCl + AgNO3
AgNO3 + NH4SCN
AgCl↓ + NaNO3
AgSCN ↓ + NH4NO3
15
② 六氯对二甲苯（Hexachloro-p-xylene）
OH Ca2+
[ HC
3
O
-
] 2·5H O
2
乳酸钙
O
例1：乳酸钙含量测定
0.3g+水100ml 放冷+NaOH 15ml EDTA滴定 钙紫红素指示剂
11
(2)金属离子直接与碳原子以共价键相连
O H OH O O Fe
富马酸亚铁
例2：富马酸亚铁含量测定 富马酸亚铁溶于热硫酸,同时分解释放 出亚铁离子,可选用铈量法进行测定.邻 二氮菲为指示剂.
Mg(C17 H35COO)2 + H2SO4 △
2NaOH + H2SO4
MgSO4 + 2 C17 H35COOH
Na2SO4 + 2H2O
17
3 经氧化还原后测定法
（1）碱性还原后测定 卤素结合于芳环上,由于分子碘的结合较牢固,需 在碱性溶液中加还原剂（如锌粉）,加热回流,使碳碘键断裂,形成无机碘化物后测定.
2O
葡萄糖酸锑钠
9
根据卤素或金属在分子中结合牢固程 度不同处理方法而异.
前 不经有机破坏的分析方法 处 理 方 经有机破坏的分析方法 法 直接测定法 经水解后测定法 经氧化还原后测定法 湿法破坏法 干法破坏法 氧瓶燃烧法
10
二、不经有机破坏的分析方法
1 直接测定法
（1 ）金属离子不直接与碳原子相连
回流
Cl3C
CCl3
+6AgNO3+6H2O 加热
(HO)3C
C(OH)3
6AgCl↓ + 6NO3 - +6 H+
加入AgNO3加热回流完全后,可用硫 氰酸铵标准溶液直接滴定剩余的硝酸银, 以求得含量.
16
（2） 用硫酸水解后测定法 也适用于金属原子与脂肪链的碳原子相连,结 合不牢固药物. 例：硬脂酸镁与定量硫酸共沸、水解生成 硬脂酸和硫酸镁，剩余的酸以氢氧化钠滴定. 原理：
量大 量极少 量少
溴化物或碘化物,燃烧后以多种价态存在, 30 吸收后应转化为统一价态再测定.
（5）实例-碘苯酯的含量测定
I CH3 C
NaOH-H2O 吸收 KI 0.02mol/L Na2S2O3 淀粉作指示剂 终点：蓝色消失
(CH2)8
COOC2H5
甲酸 空气
样品
O2/Pt 燃烧
Br2-HAc
Sb
5
2KI Sb
H
3
I 2 2K
I 2 2Na 2 S 2 O 3 2NaI Na 2 S 4 O 6
20
三、经有机破坏的分析方法
有机卤素及金属的药物结构中的卤素或 金属离子与碳原子结合牢固者,用上述方法 难以成为无机的化合物,此时必须采用有机 破坏的方法,使之转变为无机化合物,方可进 行测定.
燃烧吸收加溴醋酸溶液加甲酸、加KI 滴定
31
1 燃烧吸收
O R-І CO2+H2O+Na І+ І2+Na ІO3+NaCl
2 溴-醋酸氧化剂： 将І - 、 І 2 氧化为І O3 2Na І +Br2 = 2NaBr+ І 2 І 2+5Br2+6H2O = 2H І O3 +10HBr 3 加甲酸：除去过量的溴