纳米流式应用手册 -NanoFCM

纳米流式检测仪-纳米生物单颗粒综合表征平台
High Sensitivity Flow Cytometry for Nanoparticle Analysis
侧向散射灵敏度 侧向散射分辨率
荧光灵敏度 荧光分辨率
颗粒尺寸 样品采样速率
< 30 nm 40/50 nm FITC <10 MESF 42/133 AF532 7-500 nm 10,000 events/min
仪器与试剂
纳米流式检测装置，选用波长为 532 nm 的激光器，检测通道分别为散射通道和 PE 荧光通道。
实验结果
图 1. 标准阿霉素脂质体的粒径和药物含量表征。
图 2. 包裹阿霉素的脂质体样品的多参数定量分析。
结果分析
1. 纳米流式检测装置的灵敏度高，可以同时测定粒径低至 30 nm 的阿霉素脂质体的散射光和荧光信号。 2. 以自行合成的阿霉素脂质体作为模型，用纳米流式检测装置首次对其颗粒粒径，药物包裹量，药物包封率以及颗粒浓度
细菌 ......................................................................................................................................................................................................... 11 1. 单个细菌自发荧光的检测与定量 ....................................................................................................................................... 11 2. 单细菌低拷贝蛋白的高通量测定 ....................................................................................................................................... 12 3. 基于β-内酰胺酶活性的耐药菌快速筛查 ............................................................................................................................ 13 4. 细菌感染及细菌耐药的临床诊断 ....................................................................................................................................... 14 5. 饮用水、茶饮中细菌总数的检测 ....................................................................................................................................... 15 6. 致病菌和总菌的绝对定量检测 ........................................................................................................................................... 16
纳米流式检测Βιβλιοθήκη Baidu应用手册
纳米颗粒的散射检测灵敏度达到前所未有的 24 nm 世界上首台纳米颗粒（<100 nm）多参数表征的流式表征设备 覆盖了传统流式细胞仪 200 nm 以下粒径检测的盲区 市场上唯一检测范围可以完全包容细胞外囊泡（30-200 nm）的流式检测仪
Your Research Revolutionized
进行绝对定量分析。
ACS Appl. Mater. Interfaces, 2017, 9, 13913-13919.
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2. 单颗粒水平对细胞外囊泡的多参数表征
细胞外囊泡（extracellular vesicles, EVs）是一种由细胞释放到细胞外基质的膜性小囊泡，其粒径分布范围为 30 nm~1 μm， 它们通过膜上的蛋白质、脂类等信号分子，以及膜内包裹的内容物（神经递质、酶、激素和核酸等）在细胞之间的通讯和机 体调控中发挥着至关重要的作用。根据分泌途径的不同，EVs 主要分为 exosomes（外泌体）和 microvesicles（微囊泡）两 大类。Exosomes 经由细胞内多泡体（multivesicular body, MVB）与细胞膜融合而释放，大小一般为 30~120 nm，而 microvesicles (100~1000 nm)则是通过细胞膜包裹信号分子而直接释放。研究发现 EVs 广泛存在于人体的血液、乳汁、尿液 以及唾液等体液中，其种类和数量与机体的生理状态息息相关。细胞外囊泡有望成为新型的疾病诊断标志物、纳米药物载体、 以及治疗试剂和药物作用靶标，从而在疾病的诊断和治疗领域具有巨大的应用前景。
荧光灵敏度
（212 nm 荧光二氧化硅微球混合样品）
散射光灵敏度
可媲美电镜的分辨率
（40, 50, 64, 78 and 90 nm 二氧化硅微球混合样品）
Unmatched Performance with Superior Sensitivity for Nanoparticles
目录
囊泡 ........................................................................................................................................................................................................... 2 1. 脂质体囊泡的单颗粒水平多参数定量分析 ......................................................................................................................... 2 2. 单颗粒水平对细胞外囊泡的多参数表征 ............................................................................................................................. 3
纳米材料 ................................................................................................................................................................................................. 20 1. 纳米金颗粒的粒径分辨和绝对定量分析 ........................................................................................................................... 20
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囊泡
1. 脂质体囊泡的单颗粒水平多参数定量分析
实验简介
脂质体是一种微小的囊泡，其组成成分与细胞膜相同。脂 质体纳米药物是目前临床上最受认可的载药系统。这里，纳米 流式检测装置用于快速、同时测定单个脂质体颗粒的散射光和 荧光信号。为了解决脂质体折射率的尺寸依赖性问题，我们合 成并表征了不同粒径的阿霉素脂质体作为粒径校准标准，同时 测量其颗粒粒径和药物包裹量。这个方法为脂质体囊泡的多参 数表征提供了一个高度实用的平台。
病毒 ........................................................................................................................................................................................................... 7 1. 病毒的单颗粒水平无标记检测 ............................................................................................................................................. 7 2. 颗粒材质对于散射光的影响 ................................................................................................................................................. 8 3. 病毒混合物的粒径分辨 ......................................................................................................................................................... 9 4. 病毒样品的纯度测定和质量控制 ....................................................................................................................................... 10
线粒体 ..................................................................................................................................................................................................... 17 1. 线粒体纯度和结构完整性的快速表征 ............................................................................................................................... 17 2. 膜电位检测与靶向线粒体抗癌药物的筛选 ....................................................................................................................... 18 3. 单线粒体水平蛋白拷贝数及其分布的测定 ....................................................................................................................... 19
纳米药物 ................................................................................................................................................................................................... 5 1. 临床抗肿瘤药物阿霉素脂质体的快速表征 ......................................................................................................................... 5 2. 临床 II 期核酸纳米药物的表征——用于基因沉默的携载 siRNA 的脂质纳米粒.............................................................6