叶绿素测定方法
叶绿素含量测定的简化
叶绿素含量测定的简化一、本文概述本文旨在探讨叶绿素含量测定的简化方法。
叶绿素是植物进行光合作用的关键色素,其含量直接反映了植物的生长状况和健康程度。
因此,准确、快速地测定叶绿素含量对于植物生理生态学、农业生产和环境保护等领域具有重要意义。
本文将介绍几种简便易行的叶绿素含量测定方法,包括比色法、光谱法以及便携式叶绿素计等,这些方法不仅操作简便,而且具有较高的准确性和灵敏度,能够满足不同场合下叶绿素含量测定的需求。
通过本文的阐述,读者可以了解叶绿素含量测定的基本原理和方法,掌握叶绿素含量测定的简化技术,为相关领域的研究和实践提供有益的参考。
二、叶绿素含量测定的简化方法叶绿素含量的测定是植物生理学研究中的一项基础实验,传统的测定方法虽然准确,但操作繁琐,耗时较长。
因此,科学家们一直在寻求更简便、快速的方法。
近年来,随着科技的发展,一些新的简化方法应运而生,为叶绿素含量的测定提供了更多的选择。
其中,最为常见的简化方法是利用叶绿素在特定波长下的吸收特性进行测定。
这种方法通常使用便携式叶绿素计或分光光度计,通过测量叶片在特定波长(如663nm和645nm)下的吸光度,再根据特定的公式计算出叶绿素含量。
这种方法操作简单,快速准确,适用于大规模的叶绿素含量测定。
还有一些基于化学提取的方法也被用于简化叶绿素含量的测定。
这些方法通常使用有机溶剂(如丙酮、乙醇等)将叶绿素从叶片中提取出来,然后通过比色法或荧光法等方法进行测定。
这些方法的优点是可以直接获取叶绿素的纯品,便于后续的分析和研究。
但需要注意的是,这些方法在操作过程中可能会受到一些干扰因素的影响,如温度、光照等,因此需要严格控制实验条件以保证结果的准确性。
叶绿素含量测定的简化方法在提高实验效率、降低成本方面发挥了重要作用。
在实际应用中,我们可以根据具体的研究需求和实验条件选择合适的方法进行测定。
我们也应该注意到这些简化方法可能存在的局限性和影响因素,并在实验过程中采取相应的措施加以控制。
叶绿素测定方法
实验三十三叶绿素含量的测定(分光光度法)根据朗伯-比尔(Lambert-Beer)定律,某有色溶液的吸光度A值与其中溶质浓度C以及光径L成正比,即A=aCL(a为该物质的吸光系数)。
各种有色物质溶液在不同波长下的吸光值可通过测定已知浓度的纯物质在不同波长下的吸光度而求得。
如果溶液中有数种吸光物质,则此混合液在某一波长下的总吸光度等于各组分在相应波长下的吸光度的总和,这就是吸光度的加和性。
今欲测定叶绿体色素提取液中叶绿素a、b含量,只需测定该提取液在2个特定波长下的吸光度度值,并根据叶绿素a与b在该波长下的吸光系数即可求出各自的浓度。
在测定叶绿素a、b含量时,为了排除类胡萝卜素的干扰,所用单色光的波长应选择叶绿素在红光区的最大吸收峰。
已知叶绿素a、b的80%丙酮提取液在红光区的最大吸收峰分别为663nm和645nm,又知在波长663nm下,叶绿素a、b在该溶液中的比吸收系数分别为82.04和9.27,在波长645nm 下分别为16.75和45.60,可根据加和性原则列出以下关系式:A663=82.04Ca+9.27Cb (1)A645=16.75Ca+45.6Cb (2)式中A663、A664分别为波长663nm和645nm处测定叶绿素溶液的吸光度值;Ca、Cb分别为叶绿素a、b的浓度(g/L)。
解联立方程(1)、(2)可得以下方程:Ca=0.0127A663-0.00269A645 (3)Cb=0.0229A645-0.00468A663 (4)如把叶绿素含量单位由g/L改为mg/L,(3)、(4)式则可改写为:Ca(mg/L)=12.7A663-2.69A645 (5)Cb(mg/L)=22.9A645-4.68A663 (6)叶绿素总量CT(mg/L)=Ca+Cb=20.2A645+8.02A663 (7)叶绿素总量也可根据下式求导A652=34.5×CT由于652nm为叶绿素a与b在红光区吸收光谱曲线的交叉点(等吸收点),两者有相同的比吸收系数(均为34.5),因此也可以在此波长下测定一次吸光度(A652)求出叶绿素总量:CT(g/L)=A652/34.5CT(mg/L)=A652×1000/34.5 (8)因此,可利用(5)、(6)式可分别计算叶绿素a与b含量,利用(7)式或(8)式可计算叶绿素总量。
叶绿素含量的测定方法
叶绿素含量的测定方法
以下是 8 条关于叶绿素含量测定方法:
1. 嘿,你知道吗,分光光度法就可以测定叶绿素含量哦!就像用魔法镜一样,能把叶绿素的秘密都照出来。
比如说,在实验室里,小明拿着样本放在分光光度计前,专注地操作着,那认真的样子,简直酷毙啦!
2. 还有一种方法叫荧光分析法呢!哇哦,这就像是给叶绿素装上了信号灯,一测就知道它的情况啦!想象一下,小红在那里调试着仪器,期待着结果,那心情肯定很激动呀!
3. 说起来,高效液相色谱法也是很厉害的哟!这不就是给叶绿素来个精准的“体检”嘛!记得有一次,小王看着色谱图出来,脸上露出了惊喜的表情,嘿,肯定是发现了什么有趣的结果!
4. 重量法也能行呀!这就像称一称叶绿素有多重一样。
就像那次和小李一起做实验,看着天平上的数字,我们都在猜叶绿素到底有多少呢!
5. 浸提法也不错呢!感觉就像是给叶绿素泡个舒服的“澡”,然后就能知道它在里面的情况。
那次和朋友们一起用这个方法,大家边做边讨论,可有意思了!
6. 哇塞,难道你不知道还有纸层析法呀!这简直就是给叶绿素来一次奇妙的“旅行”嘛!上次看到老师熟练地操作着,那技术,真牛!
7. 原子吸收光谱法也能测定哦!这是不是跟找宝藏一样神奇呀!就像我们有一次好奇地看着仪器,在想它怎么就能找到叶绿素的秘密呢。
8. 近红外光谱法也很管用呢!想想看,就像是给叶绿素照了个特别的“照片”。
我记得有一次和同学一起用这个方法,大家都觉得好新奇呀!
总之呀,这些方法都各有各的奇妙之处,都能帮助我们了解叶绿素含量呢!。
叶绿素A的测定
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❖2.水样处理;往水样中加入1%碳酸镁 悬浊液1ml,以预防酸化引起色素溶解。 水样应在低温弱光旳环境下保存。
❖3样品浓缩;采用抽滤方式对水样进行 抽滤,在抽滤器中装好乙酸纤维滤膜, 抽完水样再抽1-2min以降低滤膜上旳 水分, 但抽滤时绝不能抽至真空。
❖4.滤膜干燥;将滤膜放置于冰箱中干 燥3-4h,为样品提取做准备。
❖ 叶绿素不属于芳香族化合物,不溶于 水,但溶于有机溶剂(一般采用丙 酮),叶绿素A呈蓝绿色,叶绿素B呈 黄绿色,两者同步被提取出来。在可 见光旳范围,两者分别在663nm和 645nm处波长有最大吸收。
叶绿素A旳测定措施
❖利用分光光度法,将所得旳上清液在 分光光度计上,用1cm光程旳比色皿, 分别读取在 750nm,663nm,645nm,630n m波优点旳吸光度,并以90%旳丙 酮作空白吸光度测定,对样品吸光度 进行校正。
❖将所测旳相应波长旳吸光度,代入如 下公式计算:
❖ 叶绿素A=(1/V*L)*(11.64*(D663-
D750)-2.16*(D645-D750)+0.10*(D630D750)*V1
❖式中:D为所测旳吸光度
❖ V为水样体积
❖ V1为提取液定容后旳体积
❖ L为比色皿光程
叶绿素A旳测定环节
❖1.采集水样;必须要具有代表性。
叶绿素A旳测定
目录
1
叶绿素A旳测定原理
2
叶绿素A旳测定措施
3
叶绿素A旳测定环节
4
叶绿素A旳测定影响
叶绿素A旳测定原理
❖有机溶剂直接提取浮游生物浓缩样中 旳叶绿素,用分光光度计测定其吸光 度,根据叶绿素旳特定波长.吸收,用 有关公式计算其含量。
叶绿素的测定
叶绿素含量的测定(参考李合生)一、实验原理根据叶绿体色素提取液对可见光谱的吸收,利用分光光度计在某一特定波长下测定其吸光度,即可用公式计算出提取液中各色素的含量。
二、材料、仪器设备及试剂25ml容量瓶14个,分别标号0~6和0Y~6Y(标有Y的装子叶,带0的表示实验组);80%的丙酮;剪刀;手术刀;注射器;长方形硬纸盒三、试验方法与步骤1、叶绿素的提取取一个实验组,从每个培养皿中取出等量个数的材料,用手术刀将根茎叶分开,再单独取叶或茎剪碎,称取叶0.1g左右,茎段0.2g左右;记录各组的质量,然后分别放入对应的容量瓶中,等到所有实验组的叶和茎都装入容量瓶后,再用注射器吸取适量80%的丙酮,加入容量瓶中,并定容至刻度线,摇匀后立即放入预先准备的纸盒中(内用报纸垫着),依次逐个加入。
等所有的都加完后,把纸盒放在暗处,提取24小时以上,备用。
2、分光光度计测定其OD值打开分光光度计,设置470、663、646nm三个波段,测量次数设为3,间隔10s。
预热30min。
预热结束后,用80%的丙酮较零,取出遮光下的溶液,从容量瓶中直接倒到比色杯中开始测量,每组试剂测3次。
注:之前先测两个实验组,若值偏大,可适当用80%的丙酮稀释,并记录好稀释倍数四、结果计算叶绿素a Ca=12.21*A663-2.81*A646叶绿素b Cb=20.13*A646-5.03*A663类胡萝卜素Cx=(1000*A470-3.27*Ca-104*Cb)/229叶绿素色素含量=色素浓度*提取液体积*稀释倍数/样品鲜重(mg/g)注:A663、A646、A470分别指在663、646、470nm波长下的吸光度。
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光谱法叶绿素测定
光谱法叶绿素测定光谱法叶绿素测定是一种常用的科学实验方法,用于测定植物组织中的叶绿素含量。
该方法通过分析叶绿素在可见光谱范围内的吸收特性,实现对叶绿素含量的定量测量。
叶绿素是植物中的一种重要的光合色素,它能够吸收光能并转化为植物生长和光合作用所需的化学能。
因此,测定叶绿素含量对于了解植物的生长状况、光合作用效率以及环境胁迫情况具有重要意义。
光谱法叶绿素测定的基本原理是根据不同波长的光在叶绿素分子中的吸收情况,来推断叶绿素的含量。
从物理学的角度来看,各种物质对不同波长的光有不同的吸收和透射特性,而叶绿素对红光和蓝光的吸收最为显著,而对绿光的吸收较弱。
因此,我们可以通过测定植物组织在不同波长的光下的吸光度,来推测叶绿素的含量。
在光谱法叶绿素测定实验中,通常使用分光光度计或分光光度计等设备。
首先,需要将待测植物组织样品制备成提取液,一般使用丙酮、酒精等溶剂进行提取。
提取液中含有植物组织中的叶绿素,通过分光光度计测量提取液在不同波长下的吸光度。
测定时,首先需要调节分光光度计的波长到红光、蓝光、绿光等吸收峰出现的波长,然后将提取液倒入光瓶或试管中,将选择的波长所对应的吸光度读数记录下来。
然后,通过比较各个波长下的吸光度读数,可以推断出叶绿素的含量。
当然,为了准确测定叶绿素的含量,需要进行一些控制实验。
比如,需要进行空白对照实验,在没有叶绿素存在的情况下,测量提取液在各个波长下的吸光度,以消除提取液本身的吸光度。
此外,还需要制备标准曲线,通过测量不同浓度的标准叶绿素溶液的吸光度,构建出标准曲线,从而根据待测样品的吸光度来推断叶绿素的含量。
总之,光谱法叶绿素测定是一种准确、简便的实验方法,广泛应用于植物学、生态学以及农业科学等领域。
通过该方法,我们可以对植物的叶绿素含量进行定量测量,从而更好地了解植物的生长和光合效率,以及环境对植物生理功能的影响。
水果、蔬菜及其制品中叶绿素含量的测定 分光光度法
水果、蔬菜及其制品中叶绿素含量的测定分光光度法下载提示:该文档是本店铺精心编制而成的,希望大家下载后,能够帮助大家解决实际问题。
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叶绿素含量的测定
叶绿素含量的测定(分光光度法)一、直接浸取法1.将新鲜的小麦叶片剪成0.2cm左右的细丝或小块混合均匀后,称取0.1—0.2g,放入25ml的容量瓶或具塞试管中。
2.在容量瓶或试管中加入0.5ml纯丙酮和10—15ml 80%的丙酮,并仔细将粘附在瓶壁边缘的叶子碎末洗到丙酮溶液中,盖上瓶塞,室温下置暗处浸提过夜,其间摇动3—4次3.次日取出容量瓶,观察叶组织已全部变白时,表示叶绿素已浸提干净,然后用80%丙酮定容至25ml,过滤或离心后,波长645nm,663nm,652nm 比色二、研磨法根据朗伯-比尔(Lambert-Beer)定律,某有色溶液的吸光度A值与其中溶质浓度C以及光径L成正比,即A=aCL(a为该物质的吸光系数)。
各种有色物质溶液在不同波长下的吸光值可通过测定已知浓度的纯物质在不同波长下的吸光度而求得。
如果溶液中有数种吸光物质,则此混合液在某一波长下的总吸光度等于各组分在相应波长下的吸光度的总和,这就是吸光度的加和性。
今欲测定叶绿体色素提取液中叶绿素a、b含量,只需测定该提取液在2 个特定波长下的吸光度度值,并根据叶绿素a与b在该波长下的吸光系数即可求出各自的浓度。
在测定叶绿素a、b含量时,为了排除类胡萝卜素的干扰,所用单色光的波长应选择叶绿素在红光区的最大吸收峰。
已知叶绿素a、b的80 %丙酮提取液在红光区的最大吸收峰分别为663nm 和645nm,又知在波长663nm下,叶绿素a、b在该溶液中的比吸收系数分别为82.04 和9.27,在波长645nm下分别为16.75和45.60,可根据加和性原则列出以下关系式:A663=82.04Ca +9.27Cb (1)A645=16.75Ca+45.6Cb (2)式中A663、A664分别为波长663nm和645nm处测定叶绿素溶液的吸光度值;Ca、Cb分别为叶绿素a、b的浓度(g/L)。
解联立方程(1)、(2)可得以下方程:Ca=0.0127A663-0.00269A645 (3)Cb=0.0229A645-0.00468A663 (4)如把叶绿素含量单位由g/L改为mg/L,(3)、(4)式则可改写为:Ca(mg/L)=12.7A663-2.69A645 (5)Cb(mg/L)=22.9A645-4.68A663 (6)叶绿素总量CT(mg/L)=Ca+Cb=20.2A645+8.02A663 (7)叶绿素总量也可根据下式求导A652=34.5×CT由于652nm为叶绿素a与b在红光区吸收光谱曲线的交叉点(等吸收点),两者有相同的比吸收系数(均为34.5 ),因此也可以在此波长下测定一次吸光度(A652)求出叶绿素总量:CT(g/L)=A652/34.5CT(mg/L)=A652×1000/34.5 (8)因此,可利用(5)、(6)式可分别计算叶绿素a与b含量,利用(7)式或(8)式可计算叶绿素总量。
叶绿素含量的测定分光光度法
叶绿素含量的测定分光光度法叶绿素是一种广泛存在于植物和一些浮游生物中的绿色色素,它在光合作用过程中起着至关重要的作用。
测定叶绿素含量是研究植物光合作用和生长发育的重要手段之一。
其中,分光光度法是一种常用的测定叶绿素含量的方法。
分光光度法是通过测量溶液对特定波长光的吸收程度来确定其中物质浓度的一种方法。
在测定叶绿素含量时,我们会选择特定波长的光,并测量通过溶液后的光线强度。
根据光线的吸收程度,可以计算出样品中叶绿素的浓度。
在进行叶绿素含量的分光光度法测定时,我们首先需要提取叶绿素。
通常采用乙醇、丙酮等溶剂来破坏叶绿素在叶片中的结构,并将其溶解出来。
然后,将提取液置于离心管中进行离心,以去除悬浮的杂质。
离心后,我们可以得到含有叶绿素的溶液。
接下来,我们需要使用分光光度计来测量叶绿素溶液的吸光度。
分光光度计通过选择特定波长的光源,将光线通过样品后,再通过光电二极管接收光信号,最后转化为电信号。
根据吸光度的定义,可以通过测量进射光和透射光的光强来计算吸光度,并由此得到叶绿素的浓度。
为了准确测定叶绿素含量,我们需要在测量前进行一些预处理。
首先,需要校准分光光度计,以确保测量的准确性。
其次,应该选择适当的波长进行测量。
常用的波长为663纳米和645纳米,这两个波长对叶绿素的吸光度较高。
最后,要注意样品的稀释,以确保其吸光度在仪器检测范围内。
在实际测定中,我们可以根据测量结果计算出叶绿素的浓度,并进行统计分析。
通过比较不同处理组的叶绿素含量,可以了解不同因素对植物生长和光合作用的影响。
此外,还可以将分光光度法与其他方法相结合,来对叶绿素含量进行验证和比对,以提高测定结果的可靠性。
分光光度法是一种常用的测定叶绿素含量的方法。
通过测量溶液对特定波长光的吸收程度,可以计算出叶绿素的浓度。
在实际应用中,我们需要注意校准仪器、选择适当的波长、稀释样品等步骤,以确保测定结果的准确性。
分光光度法的应用为我们研究植物生长和光合作用提供了重要的手段。
叶绿素含量的测定具体方法
一、叶绿素的测定:乙醇提取比色法,参考陈建勋、王晓峰等方法,有改动。
将实验材料去除大主脉,在0.0001的天平上称取0.5g左右的叶片至于50ml离心管中,依次加入25ml95%的乙醇密封,在黑暗条件下室温提取24-36h,将提取液稀释一定的倍数(根据具体情况而定),随后在UV754N紫外可见分光光度计,波长665、649、470nm下分别进行比色。
根据各波长的OD 值按照李合生的方法计算叶绿素a、b 和类胡萝卜素的浓度(mg·L-1),根据求得的浓度计算出各色素含量(mg·g-1鲜重表示)。
C a=13.95D665-6.88D649
C b=24.96D649-7.32D665
C x.c=(1000D470-2.05Ca-114.8Cb)/245
色素在叶片中的含量(mg /g)=色素浓度(mg /L)×提取液总体积(m l)×稀释倍数/样品质量(g)。
叶绿素含量测定方法
叶绿素含量测定方法叶绿素是植物叶片中最为重要的生物色素之一,它在光合作用过程中起到捕获光能、促进电子传递和产生化学能的关键作用。
因此,叶绿素含量测定是研究植物光合效率和生长状态的重要指标之一。
下面将介绍常用的几种叶绿素含量测定方法。
1. 色谱法:色谱法是常用的测定叶绿素含量的方法之一。
它基于叶绿素的吸光特性,通过将叶绿素从植物样品中提取出来,然后用色谱仪测定其在特定波长下的吸光度来确定叶绿素的含量。
常用的色谱法有高效液相色谱法和薄层色谱法。
2. 分光光度法:分光光度法是测定叶绿素含量的经典方法之一。
它利用叶绿素具有吸收光的特性,在特定波长下测量吸光度,并根据一定公式计算叶绿素的含量。
常用的分光光度法有嗜光法、比爱伯特法和叶绿素荧光测定法等。
3. 滴定法:滴定法是一种经典的测定叶绿素含量的方法。
它通过将酸性溶液加入植物样品中,使得叶绿素从植物细胞中溶解出来,然后用碱溶液滴定至颜色转变为粉红色为止,计算出叶绿素含量。
这种方法操作简便、成本低廉,在一些初步研究中仍有应用。
4. 激光诱导荧光法:激光诱导荧光法是一种测定叶绿素含量的新兴方法。
它利用激光激发样品中的叶绿素发出的荧光信号来测定叶绿素的含量。
这种方法具有快速、无损伤、高灵敏度等优点,尤其适用于大规模的野外样本测定。
总之,测定叶绿素含量是研究植物光合效率和生长状态的重要手段之一。
不同的测定方法具有各自的优缺点,可以根据实际需要选择合适的方法进行测定。
需要注意的是,在进行叶绿素含量测定时,样品的采集、准备和测量条件等因素都会对结果产生影响,因此需要严格控制实验条件以确保测定结果的准确性和可靠性。
测定植物叶绿素含量的方法
测定植物叶绿素含量的方法
植物叶绿素是一种广泛存在于植物、藻类和一些细菌中的绿色色素,能够在吸收光子的过程中将光能转化为化学能。
因此,测定植物叶绿素含量是衡量植物光合作用效率的重要指标之一。
1. 乙醇提取法
将待测叶片粉碎后加入适量的95%乙醇中,放置于暗处浸泡数小时或过夜,然后离心收集上清液。
测定上清液吸光度,通过比较不同波长下的吸光度值,可计算出叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素的含量。
将待测叶片粉碎后加入1.5mL 80%乙醇和0.5mL 1mol/L HCl的混合液中,振荡10分钟后加入玻璃珠摇匀,含有叶绿素的乙醇溶液将变为红褐色。
用0.22µm微孔滤纸过滤,取上清液,用分光光度计测定吸光度值后计算叶绿素含量。
3. 醋酸铜法
将待测叶片加入0.05%醋酸铜溶液中,用滚轴摇匀10分钟后过滤,取上清液后测定吸光度并计算叶绿素含量。
4. 液相色谱法
将待测叶片加入甲醇或乙腈中,使用高效液相色谱仪分析样品中的叶绿素和类胡萝卜素含量。
这种方法需要更为精确的仪器和技术,但可以同时测定多种色素。
无论使用哪种方法测定植物叶绿素含量,都需要注意以下几点:
1. 样品采集应在相同的时间、地点和光照条件下进行,以保证结果可比性。
2. 需要控制乙醇、醋酸铜等试剂用量、摇匀时间和过滤条件等因素,以获得准确的结果。
3. 对于不同种类和部位的植物,可能需要针对性地选择不同的测定方法,并对结果进行修正和比较。
植物叶绿素测定仪测定叶绿素的方法
植物叶绿素测定仪测定叶绿素的方法叶绿素,顾名思义,就是植物让自己“绿”的秘密武器。
它不光是植物吸收阳光的“魔法棒”,还是植物健康的“晴雨表”。
如果你想了解一片叶子到底“有多绿”,那么叶绿素测定仪就成了你的好朋友。
这玩意儿的名字听起来挺高大上的,实际上操作起来简单得很。
你想象一下吧,拿着它,就像是给植物做了一次小小的健康体检,看看它们到底是不是吃得好,睡得香,长得茁壮。
今天就带大家了解一下,如何通过叶绿素测定仪,来测量植物的叶绿素含量,搞清楚这些“小家伙”到底怎么保持这么一片“绿油油”的样子。
你看啊,叶绿素测定仪其实长得很简单,就像一个小小的便携式电子设备。
大部分时候,它的外观像个小巧的测量仪器,差不多手掌那么大,可以轻松放进包里,方便随时随地进行测量。
用它的时候,你只需要把它的探头轻轻接触到叶子的表面,按下按钮,就能得到结果。
说得这么简单,不代表它的原理不复杂。
叶绿素测定仪的核心工作原理是利用光学原理。
简单来说,它会发射一定波长的光线到叶子上,然后通过接收反射回来的光线,来分析叶绿素的含量。
不同的叶绿素吸收和反射的光线波长是不同的,所以它能精准地测量出叶子里绿意的浓淡。
说到这里,很多人可能会好奇,为什么要测定叶绿素呢?其实这个问题问得好!叶绿素含量的多寡,直接关系到植物的生长和健康。
如果你家的盆栽叶子越来越黄,或者说你种的农作物长势不佳,可能就是叶绿素不足的信号。
这个时候,测定仪就像是一个“健康预警器”,告诉你叶子到底是不是“缺铁”了,或者说,光合作用有没有问题。
想象一下,叶子就像是植物的“太阳能板”,只有叶绿素足够,植物才能高效地进行光合作用,吸收阳光转化为能量,才能长得又高又壮。
没了叶绿素,植物就只能“低头”认命了。
拿叶绿素测定仪测量其实也很方便。
你只要把仪器的探头对准叶子,按下按钮,几秒钟之后,仪器就会显示出结果。
数值越高,说明叶绿素越多,植物就越健康。
相反,如果数值偏低,就得注意了,可能植物的“营养”有点跟不上,得想办法给它补补了。
叶片叶绿素含量测定方法
叶片叶绿素含量测定方法
嘿,你问叶片叶绿素含量测定方法啊?那咱就来好好说说。
这叶片叶绿素含量的测定呢,办法有好几种。
一种常见的方法是分光光度法。
首先呢,得把叶片弄碎,弄成小碎片或者粉末状。
就像把饼干掰碎一样,这样才能让后面的操作更容易。
然后呢,用一些溶剂把叶片里的叶绿素提取出来。
一般用丙酮或者乙醇啥的。
这些溶剂就像小魔法师,能把叶绿素从叶片里“变”出来。
接着,把提取出来的叶绿素溶液倒进一个小瓶子里,放到分光光度计里面去测量。
分光光度计就像一个很厉害的眼睛,能看出叶绿素溶液的各种特点。
它会根据叶绿素对不同波长的光的吸收情况,来算出叶绿素的含量。
还有一种方法是叶绿素仪测定法。
这个就比较简单快捷啦。
拿着叶绿素仪,对着叶片一按,就像给叶片拍个照一样,仪器就能显示出叶绿素的相对含量。
不过呢,这个方法不是特别准确,只能大概知道个范围。
打个比方吧,测定叶片叶绿素含量就像找宝藏。
不同的方法就是不同的寻宝路线。
分光光度法就像是仔细地挖
掘,能找到比较准确的宝藏;叶绿素仪测定法就像随便找一找,能知道个大概的位置。
我给你讲个例子哈。
我有个朋友是学植物学的,他要测定一些植物叶片的叶绿素含量。
他先用分光光度法做了一遍,发现好麻烦啊,要准备好多东西,还得等好久。
后来他又用叶绿素仪试了试,很快就得到了结果,虽然不是很准确,但是也能给他一个参考。
从那以后,他就根据不同的情况选择不同的方法来测定叶片叶绿素含量。
所以啊,叶片叶绿素含量的测定方法有很多,要根据自己的需求来选择哦。
叶绿素的测定
实验六富营养化湖中藻量的测定(叶绿素a法)一、实验目的富营养化湖由于水体受到污染,尤以氮磷为甚,致使其中的藻类旺盛生长。
此类水体中代表藻类的叶绿素a浓度常大于10微克/升。
本实验通过测定不同水体中藻类叶绿素a浓度,以考查其富营养化情况。
二、器材与用品1、分光光度计(波长选择大于750nm,精度为0.5-2nm)。
2、比色杯(1cm;4cm)。
3、台式离心机(3500r/min)4、离心管(15ml具刻度和塞子);冰箱5、匀浆器或小研钵。
6、蔡氏滤器;滤膜(0.45微克,直径47mm)。
7、真空泵(最大压力不超过300kpa)。
8、MgCO3悬液:lg MgCO3细粉悬于100ml蒸馏水中。
9、90%的丙酮溶液:90份丙酮+10份蒸馏水。
10、水样:两种不同污染程度的湖水水样各2L.三、方法和步骤1、按浮游植物采样方法,湖泊、水库采样500ml,池塘300ml。
采样点及采水时间同“浮游植物”。
2、清洗玻璃仪器:整个实验中所使用的玻璃仪器应全部用洗涤剂清洗干净,尤其应避免酸性条件下而引起的叶绿素a分解。
3、过滤水样;在蔡氏滤器上装好滤膜,每种测定水样取50-500ml 减压过滤。
待水样剩余若干毫升之前加入0.2ml MgCO3悬液、摇匀直至抽干水样。
加入MgCO3可增进藻细胞滞留在滤膜上,同时还可防止提取过程中叶绿素a被分解。
如过滤后的载藻滤膜不能马上进行提取处理,应将其置于干燥器内,放冷(4℃)暗处保存,放置时间最多不能超过48小时。
4、提取;将滤膜放于匀浆器或小研钵内,加2-3ml90%的丙酮溶液,匀浆,以破碎藻细胞。
然后用移液管将匀浆液移入刻度离心管中,用5ml90%丙酮冲洗2次,最后向离心管中补加90%丙酮,使管内总体积为10ml。
塞紧塞子并在管子外部罩上遮光物,充分振荡,放冰箱避光提取18-24小时。
5、离心:提取完毕后,置离心管于台式离心机上3500r/min,离心10min,取出离心管,用移液管将上清液移入刻度离心管中,塞上塞子,3500r/min在离心10min。
光谱法叶绿素测定
光谱法叶绿素测定
光谱法测定叶绿素含量是一种常见的方法,其工作原理是通过测量叶片在两种波长范围内的透光系数来确定叶片当前叶绿素的相对数量。
使用光谱法测定叶绿素时,通常会选择使用叶绿素测定仪,这种仪器采用两种不同的发光管照射叶片,通过测量透过叶片的光的强度计算出叶片内的叶绿素相对含量。
这种方法的优点是可以在不影响作物正常生长的情况下,对特定的叶片进行监测,从而进行科学分析研究。
同时,叶绿素测定仪具有数据测量、分组、存储、浏览、导出等功能,测量精度和重复性高,可根据已知叶绿素含量的叶片或标准试样进行自动校准。
总结来说,光谱法叶绿素测定主要利用光谱吸收规律,通过测量叶片的透光系数来计算叶绿素的相对含量。
这种方法具有非破坏性,且可以进行连续监测,适用于各种植物叶片叶绿素含量的测定。
叶绿素测定方法
叶绿素测定方法一、实验原理叶绿素广泛存在于果蔬等绿色植物组织中,并在植物细胞中与蛋白质结合成叶绿体。
当植物细胞死亡后,叶绿素即游离出来,游离叶绿素很不稳定,对光、热较敏感;在酸性条件下叶绿素生成绿褐色的脱镁叶绿素,在稀碱液中可水解成鲜绿色的叶绿酸盐以及叶绿醇和甲醇。
高等植物中叶绿素有两种:叶绿素 a 和 b,两者均易溶于乙醇、乙醚、丙酮和氯仿。
叶绿素 a 和叶绿素 b 在 645nm 和 663nm 处有最大吸收,且两吸收曲线相交于652nm 处。
因此测定提取液在 645nm、 663nm、652nm 波长下的吸光值,并根据经验公式可分别计算出叶绿素 a、叶绿素 b 和总叶绿素的含量。
二、仪器、和试剂仪器:分光光度计、电子天平(0 . 01g) 、研钵、棕色容量瓶(容量瓶包锡纸代替)、小漏斗、定量滤纸、吸水纸、擦境纸、滴管。
试剂:丙酮;石英砂;碳酸钙粉三、操作步骤取新鲜蔬菜1g,洗净吸干水分,放入研钵中,加少量石英砂和碳酸钙粉及3mL80%丙酮,研成均浆,再加丙酮10mL,继续研磨至组织变白。
暗处静置3~ 5min。
取滤纸 1 张置于漏斗中,用丙酮湿润,沿玻棒把提取液倒入漏斗,滤液流至50mL容量瓶中(外包锡纸);冲洗研钵、研棒及残渣数次,最后连同残渣一起倒入漏斗中。
用滴管吸取丙酮,将滤纸上的叶绿体色素全部洗入容量瓶中。
直至滤纸和残渣中无绿色为止。
最后用丙酮定容至100mL,摇匀。
取叶绿体色素提取液在波长665nm、 645nm下测定吸光度,以丙酮为空白对照。
四、计算按照实验原理中提供的经验公式,分别计算植物材料中叶绿素a、 b 和总叶绿素的含量。
ρa =12.72A663-2.59A 645ρb =22.88A663-4.67A 645ρ=ρa +ρb =20.29A645+8.05A663叶绿素含量 =ρ*V /(m*1000)(mg/g)ρ:叶绿素质量浓度,mg/lV:提取液体积,mlm:样品质量,gPS:若处理干燥样品,则用80%丙酮(体积分数)。