大豆卵磷脂DNA的提取方法及应用
大豆磷脂的提取及分析.doc.deflate.doc.gzip
实训二大豆磷脂的提取、分析及卵磷脂咀嚼片的的制备与检验大豆磷脂的提取及含量测定一、试剂与仪器1、试剂⑴氯化锌溶液：精确称取氯化锌6.86g，定容于500ml容量瓶中。
⑵大豆市售⑶无水乙醇------10瓶⑷磁力搅拌器⑸对苯二酚溶液：取对苯二酚0.5g，加水适量使溶解，加硫酸1滴，加水稀释成100ml。
⑹钼酸铵硫酸试液：取钼酸铵2.5g，加硫酸15ml，加水使溶解成100ml，即得。
本液配制后两周即不适用。
⑺亚硫酸钠试液：取无水亚硫酸钠20g，加水100ml使溶解，即得。
本液应临用新制。
⑻磷酸二氢钾⑼浓硫酸⑽过氧化氢⑾石油醚、⑿氯仿、甲醇、冰乙酸⒀20％硫酸铵⒁羧甲基纤维素钠⒂硅胶GF254⒃载玻片2、仪器凯氏烧瓶，恒温水浴锅，滤纸；电热恒温鼓风干燥箱；电热套，天平，分光光度计，刻度比色管，硅胶G板，抽滤装置二、实验操作㈠、大豆磷脂的提取及含量测定1、5斤大豆用粉碎机粉碎得大豆粉2、卵磷脂的提取⑴称取一定质量的大豆粉末，加入一定体积95%的乙醇，置于不同温度的水浴锅内，一定时间后取出，减压过滤。
见下表料液比1:201:201:151:151:151:101:101:201:10提取时间2.51.52.521.52.51.522提取温度354040354545354540氯化锌101551510155510(2)试验步骤：将溶有卵磷脂的乙醇溶液置于磁力搅拌器下，一边搅拌一边加入一定量ZnCl2溶液，继续搅拌20min;取出，减压过滤，并将滤液置于蒸发皿上蒸干;取出产品进行定性检测。
㈡磷含量测定标准溶液的制备：取105℃干燥至恒重的磷酸二氢钾约0.13g，精密称定，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，精密量取10ml置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，每1ml中含磷（P)约为30ug。
样品溶液的制备：取本品约0.15g，精密称定，置凯氏烧瓶中,加硫酸20ml 与硝酸50ml，缓缓加热至溶液呈淡黄色，小心滴加过氧化氢溶液，使溶液褪色，继续加热30分钟，冷却后，转移至100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。
大豆软磷脂的实验原理是
大豆软磷脂的实验原理是大豆软磷脂是一种重要的磷脂，广泛存在于植物和动物细胞膜中。
它是由甘油、脂肪酸和磷酸酯化的酯类化合物组成。
大豆软磷脂可以通过萃取和分离纯化得到，并且具有多种生物活性和应用价值。
本文将探讨大豆软磷脂的实验原理。
首先，大豆软磷脂的实验原理可以从萃取方法着手。
常用的大豆软磷脂的萃取方法有溶剂萃取法和超临界流体萃取法。
其中，溶剂萃取法是将研磨后的大豆产物与合适的溶剂进行搅拌和浸泡，提取大豆软磷脂。
超临界流体萃取法则是利用高压和高温的超临界流体对大豆进行萃取。
这两种方法的原理都是利用合适的物质从大豆中分离出软磷脂。
其次，得到大豆软磷脂后，可以通过净化和分离来获得纯度较高的大豆软磷脂。
一种常用的方法是使用薄层色谱，根据大豆软磷脂的不同成分之间的分离度差异，通过将大豆软磷脂样品在特定的固定相和流动相条件下进行分离。
另外，也可以使用柱层析和逆向高效液相色谱等方法。
这些方法的原理都是根据大豆软磷脂样品的特性和分子结构进行选择合适的分离方法。
大豆软磷脂的分离纯化后，可以进行一系列的化学和生化分析，以研究和评价其生物活性和应用价值。
例如，可以使用质谱和核磁共振等技术对大豆软磷脂进行结构分析和成分鉴定。
同时，也可以测定大豆软磷脂的理化性质，如溶解度、表面活性和氧化稳定性等。
这些分析方法的原理都是利用大豆软磷脂样品的特性和性质来测定和验证其结构和功能。
此外，大豆软磷脂还可以通过酶解和改性等方法进行进一步的处理和利用。
酶解是指利用酶对大豆软磷脂进行水解，产生磷脂酰胆碱和磷脂酸等产物，以改善大豆软磷脂的适应性和功能性。
改性则是指通过化学反应，如酯化、酰化和磷酸化等方法，对大豆软磷脂的结构进行改变，以提高其稳定性和活性。
最后，值得注意的是，大豆软磷脂的实验原理需要结合具体的实验目的和方法来考量。
根据不同的实验需求，可以选择不同的实验原理和方法。
例如，如果研究大豆软磷脂的抗氧化性能，可以采用氧化反应和抗氧化指标等方法。
从大豆中提取卵磷脂
从大豆中提取卵磷脂通常有化学法“丙酮提取法”和物理法“低温超滤法”。
丙酮提取法：是指利用含有卵磷脂的大豆油能够溶于化学溶剂丙酮的原理，在卵磷脂原料中不断的加入丙酮，逐步将大豆油去掉，从而留下卵磷脂。
此方法卵磷脂的提取效率较高，工艺成熟，因此成本较低，是大部分卵磷脂产品采用的生产方法，但是因生产过程中使用有机溶剂，因此卵磷脂中会有化学溶剂丙酮的残留，并且大豆中天然的植物香味和色素也会被丙酮一同除去，所以产品颜色较白，气味较淡。
低温超滤法：是指利用卵磷脂分子体积大于大豆油的原理，在低温、高压状态下将大豆油用分子筛过滤，使得分子体积较小的大豆油通过滤网，而留下分子体积较大的卵磷脂。
此方法工艺要求高、产量较低，因此成本较高，但因使用物理方法生产，因此无化学溶剂残留，并且较好的保留了大豆中天然的香味和颜色，因此产品颜色较鲜艳、豆香味明显。
卵磷脂的提取实验报告
一、实验目的1. 了解卵磷脂的化学组成和生物学功能。
2. 掌握卵磷脂的提取方法和实验步骤。
3. 学会使用各种实验仪器，如离心机、紫外分光光度计等。
4. 鉴定提取的卵磷脂纯度。
二、实验原理卵磷脂是一种甘油磷脂，由甘油、脂肪酸、磷酸和胆碱等组成。
卵磷脂具有多种生物学功能，如降低血液胆固醇、改善记忆力、增强大脑活力等。
本实验采用乙醇-乙醚混合溶剂提取蛋黄中的卵磷脂，通过离心分离、乙醇洗涤和丙酮沉淀等步骤，得到高纯度的卵磷脂。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜鸡蛋、95%乙醇、乙醚、丙酮、氢氧化钠、钼酸铵、硫酸氢钾、溴的四氯化碳溶液、紫外分光光度计、离心机、烧杯、漏斗、蒸发皿、试管等。
2. 实验试剂：无水乙醇、乙醚、丙酮、氢氧化钠、钼酸铵、硫酸氢钾、溴的四氯化碳溶液等。
四、实验步骤1. 卵磷脂的提取（1）称取约10g新鲜鸡蛋蛋黄，加入30mL温热的95%乙醇，边加边搅拌均匀。
（2）将混合液冷却至室温，用漏斗过滤，收集滤液。
（3）将滤液置于蒸发皿中，水浴加热蒸干，得到卵磷脂粗制品。
2. 卵磷脂的纯化（1）将蒸干的卵磷脂加入适量乙醚，溶解后过滤。
（2）将滤液置于蒸发皿中，水浴加热蒸干，得到卵磷脂纯制品。
3. 卵磷脂的鉴定（1）三甲胺的检验：取少量卵磷脂，加入2～5mL氢氧化钠溶液，水浴加热15min，观察红色石蕊试纸是否变蓝，并嗅其气味。
（2）不饱和性检验：取少量卵磷脂，加入3%溴的四氯化碳溶液，振摇观察是否褪色。
（3）磷酸的检验：取少量卵磷脂，加入5～10滴95%乙醇溶液和5～10滴钼酸铵试剂，水浴加热5～10min，观察是否产生蓝色沉淀。
（4）甘油的检验：取少量卵磷脂，加入0.2g硫酸氢钾，小火加热，观察是否有水蒸气放出，嗅其气味。
五、实验结果与分析1. 卵磷脂的提取通过实验，成功从蛋黄中提取出卵磷脂，得到白色蜡状物质。
2. 卵磷脂的纯化经过乙醇洗涤和丙酮沉淀，得到高纯度的卵磷脂。
3. 卵磷脂的鉴定通过三甲胺、不饱和性、磷酸和甘油的检验，验证了提取的卵磷脂纯度较高。
卵磷脂的提取
过程
将原料与有机溶剂混合，经过加热、搅拌、静置等步骤，使卵磷脂在 溶剂中的溶解度大于在原料中的溶解度，从而实现分离。
优点
操作简单、成本低、适用范围广。
缺点
溶剂残留可能影响产品质量，且部分溶剂对人体有害。
记录每次离心分离的时间、转速、 重量等数据。
根据实验数据计算卵磷脂的提取 率、纯度等指标，分析实验结果。
比较不同实验条件下的提取率和 纯度，找出最佳的实验条件，为 后续的卵磷脂提取提供参考。
05
卵磷脂提取的注意事项与 安全防护
操作过程中的注意事项
严格控制温度
卵磷脂在高温下容易氧化变质，因此 提取过程中应严格控制温度，避免长 时间高温暴露。
设备成本高、操作复杂。
酶法提取
原理
过程
利用酶的专一性，将原料中的卵磷脂水解 成游离脂肪酸和甘油等小分子物质，再通 过离心、过滤等步骤实现分离。
将原料与酶混合，经过水解、离心、过滤 等步骤，使卵磷脂从原料中分离出来。
优点
缺点
条件温和、对原料的破坏小、产品纯度高 。
酶的成本高、提取效率较低。
03
卵磷脂提取的工艺流程
原料选择与预处理
原料选择
选择新鲜、无病虫害、无杂质的卵或 蛋黄作为提取卵磷脂的原料。
预处理
将原料清洗干净，去除杂质和血块， 然后进行破碎、搅拌等处理，以便后 续提取。
提取
溶剂提取
使用有机溶剂如乙醇、丙酮等，将卵磷脂从原料中提取出来。
非溶剂提取
利用物理方法如超声波、微波等辅助提取卵磷脂。
分离纯化
卵磷脂的提取
大豆精制油中磷脂的提取与纯化技术研究
大豆精制油中磷脂的提取与纯化技术研究磷脂是一种重要的生物活性物质，在食品、医药、化妆品等多个领域起着关键作用。
大豆油是一种重要的植物油，其中含有丰富的磷脂。
因此，研究大豆精制油中磷脂的提取与纯化技术对于提高油品质量、开发油品的功能性和增加经济效益具有重要意义。
一、磷脂的提取技术1. 溶剂提取法溶剂提取法是目前较常用的磷脂提取技术之一。
该方法利用有机溶剂与大豆油中的磷脂发生化学反应，将其从油中分离出来。
主要的有机溶剂包括乙醇、丙酮、正己烷等。
溶剂提取法的优点是操作简单、提取效率高。
但是，溶剂的选择和回收对环境造成一定的污染，并且溶剂回收成本较高。
2. 超临界流体萃取法超临界流体萃取法是一种环保的磷脂提取技术，它利用具有较高温度和较高压力的超临界流体作为萃取剂。
超临界流体萃取法可以在较温和的条件下实现对磷脂的高效提取，并且不会对环境造成污染。
然而，超临界流体萃取设备的成本较高，限制了该技术的应用。
二、磷脂的纯化技术1. 沉淀法沉淀法是一种常用的磷脂纯化技术，该方法通过控制油中磷脂的溶解度，使其在特定条件下沉淀出来。
常用的沉淀法包括酸化法、碱沉淀法等。
沉淀法操作简单，成本低廉。
但是，沉淀法的纯化效果较差，容易产生色泽变黑等问题。
2. 膜分离技术膜分离技术是一种在较低温度和不需要添加化学试剂的情况下实现磷脂纯化的方法。
常用的膜分离技术包括超滤、微滤和逆渗透等。
膜分离技术的优点是操作简单、无污染、无需添加化学试剂，纯化效果较好。
然而，膜分离技术对膜的选择和膜的阻垢等问题仍然存在挑战。
三、磷脂的应用前景随着人们对健康的关注度增加，磷脂在食品、医药、化妆品等领域的应用前景日益广泛。
在食品工业中，磷脂可以在面包、饼干、乳制品等食品的加工中作为乳化剂和稳定剂使用，能够改善食品的质感和延长保质期。
在医药领域，磷脂可以用于制备肝素钠、磷脂酰胆碱等药物，具有良好的药学性能。
此外，磷脂还可以用于生产高级化妆品，起到润肤、抗衰老等作用。
大豆卵磷脂DNA的提取方法及应用
取 1 粒软胶囊中的卵磷脂至一洁净 2. 0 mL 离心 管中，共 8 组（ 即取 8 粒软胶囊） ，分别加入 1 mL 无 菌水，室温条件下振荡混匀 1 h，16 000 g 10 min，取下 层水相 800 μL 至一洁净 2. 0 mL 离心管，加入 800 μL 2 × CTAB 裂解液，于 65 ℃ 烘箱中裂解 1 h，期间 混匀几次。加入 400 μL 氯仿，振荡混匀 30 s，16000 g 10 min，分别取上清液 650 μL 至 2 只洁净 2. 0 mL 离
大豆卵磷脂是一种重要的大豆深加工食品，随着 功能性食品越来越受到消费者关注，相关的质量安全 监管工作越来越重要。目前有关大豆卵磷脂转基因 检测的报道还不多，随着技术的发展，对检测方法的 指标提出更高要求，因此十分有必要对该类产品进行 转基因成分检测方法研究，而首要任务是建立有效的 DNA 提取方法。本文以大豆卵磷脂作为研究对象， 对 CTAB 法、磁珠试剂盒法以及硅胶膜试剂盒法等进 行比较和优化，建立了适用于大豆卵磷脂的 DNA 提 取方法。
取 8 粒软胶囊中的卵磷脂至一洁净的 50 mL 离 心管中，加入 4 mL A 液、2 mL B 液，于摇床（ XHZ-3 SHAKER） 300 r / min，20 min，加入 5 mL Precipitation Solution，剧烈振荡 30 s，8000 g 15 min，去除上层油 相，小心将下层水相约 5. 5 mL 转移至一洁净的 50 mL 离心管中，加入 200 μL 磁粉及 0. 9 倍体积（ 4. 95 mL） 异丙醇，室温静置 1 h，期间不断混匀，上磁力架， 去除水相后加入 1 mL 70% 乙醇，振荡混匀 30 s，上磁 力架，去除液相，加入 500 μL 70% 乙醇，振荡混匀 30 s，上磁 力 架，去 除 液 相，于 65 ℃ 烘 箱 中 烘 干，加 入 200 μL ddH2 O 溶解，65 ℃ 孵育 10 min，间期不断混 匀，上磁力架，转移水相至一洁净的 1. 5 mL 离心管 中，加入 50 μL 磁粉及 0. 8 倍体积异丙醇，静置 10 min，间期不断混匀，上磁力架，去除液相后加入 500 μL 70% 乙醇，振荡混匀 30s，上磁力架，去除液相，于 65 ℃ 烘箱中烘干，加入 120 μL ddH2 O 溶解，65 ℃ 孵 育 10 min，间期不断混匀，上磁力架，转移水相约 100
大豆种子DNA快速提取方法的改良及应用_朱振雷
大豆种子DNA 快速提取方法的改良及应用收稿日期：2009-03-17基金项目：国家“863”高新技术研究发展计划项目（2006AA100104和2007AA10Z193）；黑龙江省科技厅重大攻关项目（GA06B103）；东北农业大学创新团队项目（CXT004）作者简介：朱振雷（1984-），男，山东人，硕士研究生，研究方向为植物基因工程与分子生物学。
E-mail:zhuzhenlei390826@ *通讯作者：朱延明，教授，博士生导师，研究方向为植物基因工程与分子生物学。
E-mail:ymzhu2001@朱振雷，束永俊，李勇，柏锡，才华，纪巍，朱延明*（东北农业大学生命科学学院，哈尔滨150030）摘要：高质量的DNA 是进行基因克隆等分子生物学试验的前提条件。
因大豆种子中蛋白质和油脂含量丰富，利用传统方法提取DNA 质量很难达到试验要求。
研究在SDS 提取液的基础上，通过添加表面活性剂NP-40和Tween-20，优化出一种适合于大豆种子DNA 快速提取的方法。
优化后的SDS 方法提取的DNA 质量较高，OD 260/OD 280在1.809～1.916之间，无蛋白质和RNA 污染。
对该方法提取的DNA 进行了基因克隆和分子标记的试验验证，结果表明，它们能够用于大豆基因克隆、分子标记。
关键词：大豆种子；DNA 提取；SDS ；基因克隆；分子标记中图分类号：S565.1文献标识码：A文章编号：1005-9369（2009）10－0060－04Improvement and application of the rapid DNA extraction method fromsoybean seeds/ZHU Zhenlei,SHU Yongjun,LI Yong,BAI Xi,CAI Hua,JI Wei,ZHU Yanming(College of Life Sciences,Northeast Agricultural University,Harbin 150030,China)Abstract:High-quality DNA is an important base of molecular biology manipulation,such as genecloning.There are lots of protein and fat in the soybean seeds,so the DNA extracted from them by using traditional methods is very difficult to achieve quality requirements of experiments.This study improved the SDS extraction buffer by adding NP-40and Tween-20,and established a rapid DNA extraction method that is suitable for soybean seeds.The DNA extraction by the optimized SDS extraction method has high-quality,and the values of OD 260/OD 280ranged from 1.809to 1.916,that means non-protein and RNA pollution.The DNA extraction method was validated by gene cloning and genotyping,and the results showed that it could be used for soybean gene cloning and molecular markers.Key words:soybean seeds;DNA extraction;SDS;gene cloning;molecular marker 大豆是世界上重要的经济与粮食作物，是人类食用油和植物蛋白的主要来源之一，全球对大豆的需求量持续增加。
大豆磷脂的应用及制取工艺
时再升温， 最终温度控制在 ６５～７０℃、真空度在 ９．２×１０４～
９．７×１０４Ｐａ， 干燥时间约 ４ｈ 即可获得高纯度粉末磷脂产品。
２．２．５ 溶 剂 蒸 馏 浸 洗 后 含 油 的 丙 酮 溶 剂 应 通 过 蒸 馏 将
油和丙酮分离开来并分别回收。
３ 大豆磷脂的发展前景
在各类大豆磷脂生产技术及应用开发研究中， 将重点
摘 要： 大豆磷脂是一种天然乳化剂， 有很高的营养价值， 广泛应用于食品、化妆品和医药等行业， 采用不同方法可以对不同
大豆磷脂成分进行提取。
关键词： 磷脂； 乳化剂； 营养价值； 提取
中图分类号：Ｑ５４５； Ｓ５６５．１
文献标识码：Ａ 文章编号：１００７－ ０９０７（２００８）０２－ ００８１－ ０２
收稿日期： ２００７－ １２－ ０９ 作者简介： 邱向梅（ １９６０－ ） ， 女， 副教授， 学士， 主要从事粮油及粮油食品加工的教学与研究工作。
８２
内蒙古农业科技
Ｎｏ．２
膏等制品。人长期使用含大豆磷脂的化妆品， 可改善皮肤 营养， 减少皮肤皱纹， 增加皮肤光泽， 使皮肤细嫩， 并能消 除皮肤色素沉着， 减少和去除老年斑， 延缓皮肤衰老， 此外 还可促进毛发生长和减少白发。 １．４ 大豆磷脂在医药工业中的应用
大豆磷脂是一种天然营养剂和乳化剂， 具有优良的乳 化 性 、抗 氧 化 性 、分 散 性 和 保 湿 性 ， 广 泛 用 于 食 品 、化 妆 品 和医药等行业。 １ 大豆磷脂的应用 １．１ 大豆磷脂的营养价值
大豆磷脂具有多种功能和营养价值， 对人体的健康与 疾病防治有特殊意义， 磷脂对人体的神经系统﹑心血管系统﹑ 免疫系统和体内贮存与输送脂类的器官起着重要作用。卵磷 脂是大豆磷脂中最具价值的组分， 卵磷脂能促进胆固醇和蛋 白质分子结合成复合体而存在于血液中， 能减轻血管壁的类 脂质浸润， 抑制动脉粥样硬化症的产生； 卵磷脂中的胆碱参 与脂肪的代谢， 可预防脂肪酸从肝脏排泄缓慢所引起的脂肪 肝病变； 胆碱还在体内参与必需氨基酸蛋氨酸和其它一些氨 基酸的生物合成， 促进脂溶性维生素在体内更好地吸收等。
大豆磷脂提取流程及方法
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大豆卵磷脂的提取与精制
郑州粮食学院学报 Journal of el 0Il Glain Eoll~ V01．20．No．3sep．1999大豆卵磷脂的提取与精制.. 513 000 郑州450052) (深圳市经济发展局。
，深圳；郑州粮食学院，郑州 i ’’ 0 了。
S工摘要以浓缩大豆磷脂为原料，用乙醇革取富集卵磷脂馏分，经分离去毒、真空浓缩高酮／脱油、吸附脱色、过滤、浓缩，得到大豆卵磷脂。
研究了影响产品产率与纯度的若干因素。
／意； 9J l大豆磷脂是毛豆油在精炼过程中得到的副产收等[ 。
物。
它是由磷脂、甘三酯、糖类、甾醇、生育酚和色磷脂是一种两性表面活性剂，作为乳化剂既素等构成的复杂混合物_l_。
主要的磷脂物包括卵可形成O／W型乳状液，也可形成W／O型乳状液，磷脂、脑磷脂、肌醇磷脂、丝氨酸磷脂和磷脂酸。
最终能形成何种类型的乳状液，还决定于其它的本文所称大豆卵磷脂是指大豆磷脂经醇分提条件[ 。
大豆磷脂总体上是油溶性的，通常是油后得到的卵磷脂为主要成分的产物。
目前散见于包水体系的乳化剂。
根据不同的磷脂在低级醇中报刊及广告宣传品中所谓的大豆卵磷脂，实际是的溶解性不同，可将磷脂分离为以卵磷脂为主的大豆磷脂。
醇溶性磷脂和以肌醇磷脂为主的醇不溶性磷脂。
大豆磷脂具有很高的营养价值和生理活性，前者可以促成O 型乳状液的形成，而后者则促同时又是优良的天然乳化剂。
但从营养功能与生成W／O型乳状液的形成。
因此卵磷脂的提取，作理活性两方面着眼，卵磷脂是大豆磷脂中最具价为乳化剂来说，拓宽了大豆磷脂的应用范围。
特值的组分。
别是医药上用的高纯度卵磷脂，更是高附加值产从营养学看，卵磷脂能促进胆固醇和蛋白质品。
分子结合成复合体而存在于血液中，能减轻血管壁的类脂质浸润，抑制动脉粥样硬化症的产生；卵 1 大豆卵磷脂提取及精制工艺路线磷脂中的胆碱参与脂肪的代谢，可预防脂肪酸从肝脏排泄缓慢所引起的脂肪肝病变；胆碱还在体大豆卵磷脂的提取与精制可以有两条工艺路内参与必需氨基酸蛋氨酸和其它一些氨基酸的生线。
大豆DNA提取基本原理的探讨
第35卷第2期2004年4月东 北 农 业 大 学 学 报Journal of Northeast Agricultural University35(2):129～134April2004文章编号 1005-9369(2004)02-0254-03大豆DNA提取基本原理的探讨陈庆山,刘春燕,吕 东,何建勋(东北农业大学大豆研究所 黑龙江 哈尔滨 150030)摘要:大豆D NA提取是进行大豆分子生物学研究的基础。
大量、高质量的DN A提取一直是大豆科学研究者探讨的问题。
根据实验经验和查阅有关文献总结了大豆DN A提取各个步骤的基本原理。
关 键 词:大豆;DN A;提取中图分类号:S565.1;S5/59 03 ;S5/59 01 文献标识码A 分子生物学的发展迅速,生物技术的研究领域逐渐拓宽到生物科学的各个方面。
大豆作为我国乃至世界的重要作物,国内外已经开展了大量的基础生物学研究和分子辅助育种,但进行生物技术研究的基础是高质量的大豆DNA提取。
大豆的DNA提取相对较容易,但也常常有蛋白质、糖类和其它物质的污染,对实验结果时常造成影响。
本文根据实验经验和查阅有关文献,对大豆DNA提取的基本原理进行了总结。
1 DN A提取方法的命名 大豆DNA提取的方法很多,如提取质量高,得率较低的CT AB(溴化十六烷三甲基铵)法;提取得率高,质量较好的SDS(十二烷基磺酸钠)法;用于少量提取的Sarcosyl CT AB,SDS,Sarcosyl都是洗涤剂性质的化学药品,主要的破膜成份,可将细胞内的物质释放出来。
2 DN A提取所用材料 大豆DNA提取所用的材料可以是种子、幼苗或叶片、根系、茎等各部分组织。
在分子生物学上常用的材料是叶片,转基因检测或进口大豆检测时常用到子粒。
利用叶片作为提取材料时,若在田间种植材料,并做其它特性特性鉴定的情况下,多是在长出3～5片三片复叶时,取上部嫩叶,选用较嫩的叶片材料才可能显著提高提取的DNA浓度〔7〕。
大豆卵磷脂的提取工艺及发展研究
大豆卵磷脂的提取工艺及发展研究大豆卵磷脂的提取称取约10g蛋黄于小烧杯中，加入温热的95%乙醇30mL，边加边搅拌均匀，冷却后过滤。
如滤液仍然混浊，可重新过滤直至完全透明。
将滤液置于蒸发皿内，水浴锅中蒸干，所得干物即为卵磷脂。
大豆卵磷脂的鉴定新提取的卵磷脂为白色，当与空气接触后，其所含不饱和脂肪酸会被氧化而使卵磷脂呈黄褐色。
卵磷脂被碱水解后可分解为脂肪酸盐、甘油、胆碱和磷酸盐。
甘油与硫酸氢钾共热，可生成具有特殊臭味的丙烯醛；磷酸盐在酸性条件下与钼酸铵作用，生成黄色的磷钼酸沉淀；胆碱在碱的进一步作用下生成无色且具有氨和鱼腥气味的三甲胺。
这样通过对分解产物的检验可以对卵磷脂进行鉴定。
1、三甲胺的检验：取干燥试管一支，加入少量提取的卵磷脂以及2～5mL 氢氧化钠溶液，放入水浴中加热15min，在管口放一片红色石蕊试纸，观察颜色有无变化，并嗅其气味。
将加热过的溶液过滤，滤液供下面检验。
2、不饱和性检验：取干净试管一支，加入10滴上述滤液，再加入1～2滴3% 溴的四氯化碳溶液，振摇试管，观察有何现象产生。
3、磷酸的检验：取干净试管一支，加入10滴上述滤液和5～10滴95%乙醇溶液，然后再加入5~10滴钼酸铵试剂，观察现象；最后将试管放入热水浴中加热5～10min，观察有何变化。
4、甘油的检验：取干净试管一支，加入少许卵磷脂和0.2g 硫酸氢钾，用试管夹夹住并先在小火上略微加热，使卵磷脂和硫酸氢钾混熔，然后再集中加热，待有水蒸气放出时，嗅有何气味产生。
大豆卵磷脂的开发应用1 在食品中的应用卵磷脂被用于糖果、巧克力中以降低粘度，用于人造黄油的乳化。
其次，它还用于制作许多粉末状食品以使产品迅速溶解和润湿。
含有卵磷脂的速溶蛋白粉能与肉类迅速彻底地混合。
某些分解胶体也能较容易地被迅连掺入食品中。
卵磷脂还具有抗氧化、催长及包埋等作用。
因此，其技术价值愈来愈被人们重视，2 在饲料工业中的应用卵磷脂是动物脑神经组织、骨髓、心、肝和脾不可缺少的组成部分，是生物膜的重要组分，对幼龄动物的生长发育非常重要，添加卵磷脂能促进鱼类和肉猪的脑、神经组织、内脏、骨髓的发育健全。
大豆卵磷脂的功效及提取方法
大豆卵磷脂的功效及提取方法摘要卵磷脂是重要的生理活性物质，也是一类天然的表面活性剂，广泛应用于食品、医药、化妆品等行业。
随着磷脂的广泛应用，磷脂分提尤其是生产高纯度的的卵磷脂迫在眉睫。
我国大豆资源十分丰富，其中大豆磷脂中卵磷脂含量达到20％以上，因此利用大豆生产卵磷脂可以大大降低生产成本。
关键词：卵磷脂；大豆；液相色谱；前言大豆卵磷脂（Lecithin High Potency 又称大豆蛋黄素），是精制大豆油过程中的副产品。
市面上粒状的大豆卵磷脂﹐是大豆油在脱胶过程中沉淀出来的磷脂质，再经加工、干燥之后的产品。
纯品的大豆卵磷脂为棕黄色蜡状固体，易吸水变成棕黑色胶状物。
在空气中极易氧化，颜色从棕黄色逐步变成褐色及至棕黑色，且不耐高温，80℃以上便逐步氧化酸败分解。
大豆卵磷脂中含有卵磷脂、脑磷脂、心磷脂、磷脂酸（PA）、磷脂酰甘油（PG）、缩醛磷脂、溶血磷脂等。
具有延缓衰老、预防心脑血管疾病等作用。
1.总论1.1卵磷脂的组成我们首先明确一个概念：现在商业上的“卵磷脂”就是各种磷脂的混合物质，而不是提纯后的“卵磷脂”，为了区别二者，我们把前者成为“Phospholipid”，中文名称为“磷脂”；后者，称为“phosphatidylcholine”，中文名称“卵磷脂”。
“化学名称：“磷脂酰胆碱”。
一般上商业上都习惯磷脂类的产品都称谓“lecithin"。
也就是我们经常叫的“卵磷脂”。
这个只是历史的误会，现在暂时无法去改变，就像有些地方把餐桌上的“饭”也称为“米”一样。
商业上，磷脂按照原料的不同分为：大豆磷脂，菜籽磷脂，蛋黄磷脂等。
他们的组成有很大区别，由于产地不同，品种不同，同类品种也有很大区别。
1.2卵磷脂的功效大豆卵磷脂是从大豆中提取的精华物质。
也是人体需要的脂类成分之一，工业上主要作为乳化剂、保湿剂、增稠剂等使用。
同时，还有营养补充剂作用。
最重要的是还有其他一些生理调节作用。
而且主要作用依靠的还是磷脂酰胆碱，就是说，这个部分作用的核心是真正的卵磷脂部分。
实验三卵磷脂的提取和鉴定
目 录
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 实验结果与分析 • 结论与展望
01 实验目的
掌握卵磷脂的提取和鉴定方法
卵磷脂的提取
利用有机溶剂从动植物组织中提 取卵磷脂，可以采用低温、高压 、超声波等辅助手段提高提取效 率。
卵磷脂的鉴定
通过观察卵磷脂的外观、溶解性 、颜色反应等特征，结合薄层色 谱法、气相色谱法等方法对卵磷 脂进行定性鉴定。
了解卵磷脂的生理功能和用途
生理功能
卵磷脂是细胞膜的重要成分，具有保 护细胞、维持细胞正常功能的作用； 同时，卵磷脂还具有降低血脂、预防 心血管疾病等功效。
用途
卵磷脂在食品、药品、化妆品等领域 广泛应用，可作为添加剂、药物成分 或保湿剂等。
探究不同提取条件对卵磷脂提取率的影响
提取条件
研究不同有机溶剂、温度、时间、料 液比等因素对卵磷脂提取率的影响， 通过单因素和正交试验等方法优化提 取工艺。
结果分析
通过对比不同提取条件下卵磷脂的提 取率，分析提取条件对卵磷脂提取效 果的影响，为实际生产提供理论依据。
02 实验原理
卵磷脂的化学组成和性质
卵磷脂是磷脂类的一种，由甘 油、脂肪酸、磷酸和胆碱组成。
卵磷脂具有亲水性和亲油性， 是细胞膜的重要成分，对维持 细胞结构和功能具有重要作用。
卵磷脂在自然界中广泛存在于 动植物组织中，尤其是脑、肝、 卵黄等组织中含量较高。
实验结果的分析与讨论
总结词
实际应用取方法和鉴定手段具有实 际应用价值，能够为卵磷脂的生产和开发提 供技术支持。同时，本实验结果可为相关领 域的研究提供参考和借鉴。
05 结论与展望
实验结论
卵磷脂提取成功
卵磷脂的提纯的实验报告
一、实验目的1. 掌握卵磷脂的提取方法；2. 学习卵磷脂的提纯技术；3. 了解卵磷脂在生物体内的作用和应用。
二、实验原理卵磷脂是一种重要的生物活性物质，广泛存在于动植物细胞膜、脑、神经组织等部位。
其化学结构为甘油、胆碱、磷酸和脂肪酸组成的磷脂类物质。
卵磷脂具有多种生物活性，如延缓衰老、促进神经传导、提高大脑活动、增强记忆力、促进脂肪代谢、防止脂肪肝、降低血清胆固醇等。
本实验采用乙醇提取卵磷脂，利用乙醚进行提纯。
实验过程中，通过离心分离、沉淀、洗涤等步骤，使卵磷脂与其他杂质分离，提高卵磷脂的纯度。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：蛋黄、95%乙醇、乙醚、蒸馏水、氯化钠、无水硫酸钠、石油醚、硫酸铜、硫酸钠、盐酸等。
2. 实验仪器：离心机、恒温水浴锅、磁力搅拌器、锥形瓶、漏斗、烧杯、试管、滴定管、移液管等。
四、实验步骤1. 提取卵磷脂（1）取一定量的蛋黄，加入适量的95%乙醇，充分搅拌，使蛋黄溶解；（2）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的氯化钠，充分搅拌，使蛋白质沉淀；（3）将溶液静置一段时间，待蛋白质沉淀后，取上层清液；（4）将上层清液转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（5）将洗涤后的沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（6）将溶液过滤，收集滤液。
2. 卵磷脂的提纯（1）将收集到的滤液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（2）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（3）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的石油醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（4）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（5）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（6）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（7）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（8）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（9）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（10）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（11）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（12）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（13）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（14）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（15）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（16）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（17）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（18）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（19）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（20）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（21）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（22）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（23）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（24）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（25）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（26）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（27）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（28）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（29）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（30）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（31）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（32）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（33）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（34）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（35）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（36）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（37）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（38）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（39）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（40）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（41）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（42）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（43）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（44）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（45）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（46）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（47）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（48）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（49）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（50）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（51）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（52）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（53）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（54）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（55）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（56）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（57）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（58）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（59）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（60）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（61）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（62）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（63）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（64）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（65）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（66）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（67）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（68）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（69）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（70）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（71）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（72）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（73）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（74）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（75）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（76）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（77）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（78）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（79）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（80）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（81）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（82）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（83）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（84）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（85）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（86）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（87）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（88）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（89）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（90）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（91）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（92）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（93）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（94）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（95）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（96）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（97）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（98）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（99）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（100）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（101）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（102）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（103）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（104）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（105）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（106）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（107）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（108）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（109）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（110）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（111）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（112）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（113）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（114）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（115）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（116）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（117）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（118）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（119）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（120）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（121）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（122）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（123）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（124）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（125）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（126）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（127）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（128）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（129）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（130）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（131）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（132）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（133）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（134）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（135）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（136）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（137）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（138）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（139）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（140）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（141）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（142）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（143）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（144）将洗涤后的沉淀转移到烧杯中，加入适量的盐酸，充分搅拌，使卵磷脂溶解；（145）将溶液转移到锥形瓶中，加入适量的无水硫酸钠，充分搅拌，使水分被吸收；（146）将溶液静置一段时间，待水分被吸收后，取上层清液；（147）将上层清液转移到烧杯中，加入适量的乙醚，充分搅拌，使卵磷脂沉淀；（148）将沉淀转移到锥形瓶中，加入适量的硫酸铜和硫酸钠，充分搅拌，使卵磷脂进一步沉淀；（149）将沉淀转移到漏斗中，用蒸馏水洗涤沉淀，直至洗涤液无色；（150）。
实验九卵磷脂的提取和鉴定
5、点样：样点距玻璃板一端下缘1cm ，相互间隔 1～1.2 cm ；每位点重复点五次，每次用冷风吹干 后再点，每次点样直径不超过2mm 。 6、展层：在层析缸中加入展层剂0.5cm深，加盖平 衡30分钟，将点样端浸入，密闭展层10-30min。后 取出薄层板，标出展层剂前沿位置，用电吹风热风 将薄层板吹干。 7、显色：用喷雾器向薄层板上均匀喷洒1%碘液溶 液，热风吹干至色斑显现。
表1 抽提物、温度、时间和料液比4因素3水平
水平
1 2 3
[乙醇]∶ [乙醚] 5∶1 4∶1 3∶1
影响因素
温度 时间（min）
4℃
10
25℃
20
60℃
30
料液比 1∶4 1∶5 1∶6
表3 L9 表
按一般方法，如对4个因素3个水平的各种搭配都要考虑，共 需做3*3*3*3=81次试验，而用正交表只需做9次试验，即选用 L9表(L是正交表的代号，下标数字表示试验次数)。
胆碱 HO
二、实验原理
（一）卵磷脂的提取和纯化
▪ 磷脂易溶于乙醚、苯、氯仿，部分溶于乙醇，极难溶于丙酮； 卵磷脂溶于乙醇、甲醇、氯仿等有机溶剂，但不溶于丙酮； 丙酮能够溶解油脂和游离脂肪酸、甘油三酯等。
▪ 因此，本实验用乙醇、乙醚为溶剂，丙酮为沉淀剂，干燥后 获得卵磷脂。新提取得到的卵磷脂为白色蜡状物，与空气接 触后因所含不饱和脂酸被氧化而呈黄褐色。卵磷脂中的胆碱， 在碱性溶液中可分解为三甲胺，而具有特异的鱼腥味，可用 于鉴定。
正交法实验设计
物质提取、纯化受到多种因素的影响，如抽提物 的种类及其配比、抽提条件（温度、时间等）都能影 响提取的结果。这种多因素的试验可以通过正交法， 即用一特制的表格—正交表来安排试验，计算和分析 试验结果。这样就能通过少量试验取得较好的效果。
一种从大豆中提取大豆卵磷脂的方法[发明专利]
![一种从大豆中提取大豆卵磷脂的方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/75daa11cb5daa58da0116c175f0e7cd18525187c.png)
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201710715716.3(22)申请日 2017.08.20(71)申请人 合肥信达膜科技有限公司地址 230000 安徽省合肥市瑶海工业区大店工业园(72)发明人 陈传云 梁远争 李胜明 (51)Int.Cl.A23J 7/00(2006.01)(54)发明名称一种从大豆中提取大豆卵磷脂的方法(57)摘要本发明公开了一种从大豆中提取大豆卵磷脂的方法，其提取步骤如下：步骤一，将含有大豆放入烘箱在50-70℃温度下烘干，然后用机器搅拌碎；步骤二、将步骤一得到的粉末加入纤维素酶溶液，在45-60℃温度下保温1-2小时；步骤三、加入水，加热煮沸，用纱布过滤，滤渣用水洗涤两次；步骤四，超滤膜提取；步骤五，纳滤膜浓缩；步骤六，低温干燥成品。
本发明通过膜法生产，实现常温下大分子和小分子物质的分离、纯化，取代传统的萃取、脱色等工艺，一方面提高了膜设备的使用效率，另一方面超滤系统能够连续进料和连续浓缩出料，提高了产品的质量和收率。
权利要求书1页 说明书2页CN 107319100 A 2017.11.07C N 107319100A1.一种从大豆中提取大豆卵磷脂的方法，包括以下步骤：步骤一，将含有大豆放入烘箱在50-70℃温度下烘干，然后用机器搅拌碎；步骤二、将步骤一得到的粉末加入纤维素酶溶液，在45-60℃温度下保温1-2小时；步骤三、将步骤二得到的溶液加入水，加热煮沸，用纱布过滤，滤渣用水洗涤两次，除去大颗粒杂质，留下溶液；步骤四，超滤膜提取；将步骤三的溶液讲过超滤膜处理，收集超滤透过液；步骤五，纳滤膜浓缩；将步骤四得到的超滤透过液进行纳滤处理，收集纳滤浓缩液；步骤六，纳滤浓缩液低温干燥成品。
2.根据权利要求1所述的一种从大豆中提取大豆卵磷脂的方法，其特征在于，步骤五中的纳滤膜截留分子量为 200 ～ 800 的纳滤膜。
卵磷脂的提取、鉴定和应用 实验指导书
卵磷脂的提取、鉴定和应用实验指导书一、实验目的通过实验，进一步加深对卵磷脂特性和用途等相关知识的理解，掌握卵磷脂的提取和鉴定方法。
二、实验原理卵磷脂是甘油磷脂中的一种，由磷酸、脂肪酸、甘油及胆碱组成：其中，R1为硬脂酸或软脂酸；R2为油酸、亚油酸、亚麻酸或花生四烯酸等不饱和脂肪酸。
卵磷脂广泛分布于动植物中，在植物种籽和动物的脑、神经组织、肝、肾上腺以及红细胞中含量较多；蛋黄中含量最丰富，高达8~10%，因而得名。
卵磷脂可溶于乙醚、乙醇等，因而可以利用这些溶剂进行提取。
本实验以乙醚作为溶剂提取生蛋黄中的卵磷脂。
通常粗提取液中含有中性脂肪和卵磷脂，两者浓缩后通过离心进行分离，下层为卵磷脂。
新提取的卵磷脂为白色蜡状物，遇空气即氧化变成黄褐色，这是由于其中不饱和脂肪酸被氧化所致。
卵磷脂的胆碱基在碱性溶液中可以分解为三甲胺，三甲胺有特异的鱼腥臭味，可以此鉴别之。
卵磷脂在食品工业中广泛用作乳化剂，抗氧化剂和营养添加剂。
三、实验材料、试剂和仪器鸡蛋；花生油；乙醚；10%NaOH；磁力搅拌器；离心机等。
四、实验内容1、卵磷脂的提取取15g生鸡蛋黄（通常含水50%，脂类32%，蛋白质16%，灰分2%），于150mL三角锥瓶中加入40mL乙醚，放入磁力搅拌器，室温下搅拌提取15分钟，然后静置30分钟，上层清液于带棉花塞到50mL烧杯中过滤，往残渣中再加入15mL乙醚，搅拌提取5分钟。
第二次提取液过滤后，与第一次提取液合并，于60o C热水浴蒸去乙醚，将残留物倒入烧杯中，约可得5g粗提取物。
粗提取物进行离心（4000转/分）10分钟，下层为卵磷脂，约得2.5~2.8g。
卵磷脂可以通过冷冻干燥得无水的产物。
2、卵磷脂的鉴定取以上提取物约0.1g，分为两份于试管内加入10% 氢氧化钠溶液2mL，水浴加热数分钟，嗅之是否有鱼腥味，以确定是否为卵磷脂。
3、乳化作用在两支试管中各加入3~5mL水，一支加卵磷脂少许，溶解后滴加5滴花生油；另一支也滴入5滴花生油，加塞极力振摇试管，使花生油分散。