药物分析第十二章 喹啉与青蒿素类抗疟药物的分析

青蒿素
双氢青蒿素

青蒿琥酯

蒿甲醚
2.化学性质 （1）氧化性 （2）旋光性 （3）水解性 （4）UV：末端吸收
青蒿素
二、鉴别试验 （一）呈色反应 1.过氧桥的氧化反应（KI-淀粉） 2.羟肟酸铁反应-内酯 3.香草醛-硫酸反应：萜类
青蒿素 （ 1 ) 取本品约5 mg , 加无水乙醇0.5 ml 溶解后,加碘化钾试 液0.4ml，稀硫酸2.5 ml 与淀粉指示液4 滴，立即显紫色。 ( 2 ) 取本品约5 mg , 加无水乙醇0.5 ml 溶解后， 加盐酸羟胺试 液0.5 ml 与氢氧化钠试液0.25 ml , 置水浴中微沸，放冷后，加 盐酸2滴和三氯化铁试液1滴，立即显深紫红色。 青蒿琥酯 取本品约50mg，加三氯甲烷l ml使溶解，取3~4 滴置白 瓷板上， 待三氯甲烷挥发后， 加2%香草醛硫酸溶液1滴，显红 色。
复习：吩噻嗪类药物的分析
基本 结构 基本 性质 鉴别 含量 测定
硫氮杂蒽母核 碱性; 生物碱沉淀剂 10-碱性侧链 易氧化; 氧化 2-卤素 与金属离子与鈀离子络合 络合； 卤素取代基 紫外吸收 氯化物
6 7 8 9
酸碱滴定法 UV 鈀离子比色 法 HPLC
S N R
BaSO4 ↓ AgCl ↓
三、有关物质检查 （一）硫酸奎宁中有关物质检查 1.酸度 控制药物中的酸性杂质 用pH计测定,pH为5.7～6.6。 2.氯仿－乙醇中的不溶物 控制药物在制备过程中引入的醇中不溶 性杂质或无机盐类 3.其他金鸡钠碱 控制其他的生物碱 TLC（ChP）：主成分自身对照法 HPLC（BP）：峰面积归一化法

分解后的紫外吸收图谱
HPLC法测定青蒿琥酯的含量


用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-磷酸盐缓冲液 （取磷酸二氢钾1.36g，加水1000 ml 使溶解， 用磷酸调pH 值至3.0 （ 42:58)为流动相；柱温30℃ ；检测波长为210nm。 取双氢青蒿素对照品4mg，置10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀 释至刻度，作为双氢青蒿素对照品溶液；另取本品40mg， 置10ml量瓶中，加双氢青蒿素对照品溶液l ml ,加甲醇适量 使溶解并稀释至刻度，取40 μ1注人液相色谱仪，双氢青蒿 素呈现两个色谱峰，青蒿琥酯峰与相邻的双氢青蒿素峰的分 离度应符合要求。 测定法 取本品约25 m g , 精密称定， 置25 m l 量瓶中， 加 甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取20μ1，注人液相色 谱仪， 记录色谱图。另取青蒿琥酯对照品同法测定。按外 标法以峰面积计算，即得。
（二）磷酸咯萘啶中有关物质的检查
1.酸度 2.水中不溶物 3.氯化物：生产工艺带入 4.甲醛 5.四氢吡咯
四、含量测定
（一）硫酸奎宁 • 非水滴定法测定硫酸奎宁的含量（ChP、USP） • HPLC测定硫酸奎宁片的含量（USP）
a.硫酸奎宁 奎宁为二元碱，其中喹核氮的碱性较强， 可与硫酸生成盐；而喹啉环的碱性极弱，不能 与硫酸成盐，而保持游离状态。 硫酸是二元酸，但在非水介质中，只显示 一元酸解离为HSO4-，即只供给一个H+，所以硫 酸盐类药物在冰醋酸中，只能滴定至硫酸氢盐， 因此可以用高氯酸滴定液直接滴定。 反应的摩尔比？
Cl
磷酸哌喹
Cl N
· 2H3PO4
HN CH3 N CH3 CH3
磷酸氯喹
2.主要化学性质 （1）碱性 奎宁碱性：脂环氮(pKa 8.8) >喹啉环系芳香 氮(pKa 4.2 ，不能与硫酸成盐)
（2）旋光性 硫酸奎宁（左旋体）硫酸奎尼丁（右 旋体）二盐酸奎宁（左旋体）
（3）紫外吸收光谱 喹啉环
酸碱滴定 1:3 1:4
· H2SO4 · 2H2O
第二节 青蒿素类药物的分析
2011年9月，中国女药学家屠呦呦因创制新型抗 疟药-青蒿素和双氢青蒿素的贡献，获得被誉为 诺贝尔奖“风向标”的拉斯克奖。这是中国生 物医学界迄今为止获得的世界级最高级大奖。
一、结构与理化性质
1.结构
含过氧基团的新型倍半萜内酯


青蒿素采用的鉴别方法是 A．碘化钾试液· 淀粉反应 B．硫酸乙醇反应 C．UV D．茚三酮反应 E．以上均不是 答案：A
•能在稀硫酸溶液中显蓝色荧光的喹啉类的药物有 A．硫酸奎宁 B．磷酸氯喹 C．磷酸哌喹 D．磷酸咯萘啶 E．二盐酸奎宁 答案：[AE]
硫酸奎宁的检查项目有 A．其他金鸡纳碱 B．三氯甲烷一乙醇中不溶物 C．乙醇中不溶物 D．酸度 E．酸中不溶物 答案：[ABD]

非水溶液滴定法测定硫酸奎宁原料药的含量 时，Imol的硫酸奎宁可消耗高氯酸的摩尔数 是 A. 1/2mol B.1mol C.2mol D.3mol E.4mol 答案：[D]

具有绿奎宁反应的药物是 A．硫酸奎宁 B．盐酸吗啡 C．磷酸可待因 D．盐酸麻黄碱 E．硫酸阿托品 答案：[A]

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喹啉类药物的主要理化性质有 A．弱碱性 B．不能与硫酸成盐 C．旋光性 D．弱酸性 E．紫外吸收特性 答案：[ACE]

青蒿素类药物共有的化学性质有 A．氧化性 B．还原性 C．能发生水解 D．母核中有共轭体系 E．旋光性 答案：[AE]

重点内容
基本 结构 基本 性质 鉴别 含量 测定
倍半萜 过氧桥 内酯
氧化性; 碘化钾-淀粉 水解后UV法 易水解 羟肟酸铁反应 HPLC 旋光性； 香草醛-硫酸 CH3 无共轭 H
H3C O
O O O H H CH3
习 题
用溶剂提取后非水溶液滴定法测定硫酸奎宁 片的含量时，Imol的硫酸奎宁可消耗高氯酸 的摩尔数是 A. l/2mol B.1mol C.2mol D.3mol E.4mol 答案：[E]
（二）光谱法 IR （三）色谱法 TLC HPLC：210nm
三、杂质检查
青蒿素有关物质检查（TLC，ChP2010）
取出，晾干，喷以含2%香草醛的20%硫酸乙醇溶 液，在85℃加热10～20 分钟至斑点清晰， 要求： •对照品溶液应显青蒿素与双氢青蒿素各自的清晰 斑点。 •供试品溶液如显杂质斑点，与对照溶液（1）主斑 点比较，不得更深；与对照溶液（2）的主斑点比 较，深于对照溶液（2）主斑点的斑点不得多于1个。
Cl Cl N
N
二醌亚胺盐 绿/翠绿色产物
（二）光谱特征 1.紫外吸收光谱 磷酸氯喹盐酸溶液（0.01mol/L） λ max：222nm、257nm、329nm、343nm 2.荧光光谱特征 硫酸奎宁和二盐酸奎宁在稀硫酸中显蓝色荧光
3.红外吸收光谱特征
（三）无机酸盐 SO42-+Ba2Cl-+Ag硫酸奎宁
H+
SO42H+
+3HClO4
H+ HSO4H + H+ ClO4-
H+ ClO4+ H H+ ClO4-
(C20H24N2O2· H+)2SO4 + 3HClO4 →
(C20H24N2O2· 2H+)· 2ClO4- + (C20H24N2O2· 2H+)· HSO4-· ClO4-
牢记：lmol的硫酸奎宁消耗3mol的高氯酸
5
4 3
10
2 1
R'
第十二章 喹啉与 青蒿素类抗疟药物 的分析
第一节 喹啉类药物的分析
一、基本结构与主要化学性质 1.结构：本类药物均有吡啶与苯稠合而成的喹啉 杂环
N H H HC CH2
HO H H3CO N
· H2SO4 · 2H2O
硫酸奎宁
2
难溶于水
HO H H3CO N
N H
H HC CH2
（4）荧光特性 硫酸奎宁和二盐酸奎宁在稀硫酸中显蓝 色荧光
二、鉴别试验 （一）绿奎宁反应 奎宁为6位含氧喹啉衍生物，可以发生 绿奎宁反应。 6－含氧喹啉＋氯水＋氨水 二醌基亚 胺的铵盐 （溴水）
ChP采用此法鉴别硫酸奎宁和二盐酸奎宁
Cl HO CH3O — N Cl2 HO N NH3 ONH4 N N Cl2 O
片剂分析的滴定度与原料药分析的滴定度不同。
五、体内药物分析-自学 HPLC法测定人体血液中的氯喹 P322
重点内容
基本 结构 基本 性质 鉴别 含量 测定
喹啉环 碱性侧链
HO H H3CO N
N H
碱性; 荧光特性 旋光性； 共轭
H HC CH2
绿奎宁反应 紫外 荧光 无机酸盐
四、含量测定
双氢青蒿素片的含量测定
—分解后的UV法

测定法 精密量取对照品溶液与供试品溶液各 1ml， 分别置10ml量瓶中，各精密加入乙醇1ml，摇匀， 加2%氢氧化钠溶液至刻度，摇匀，置60℃恒温水 浴中反应30分钟，取出冷至室温，以2%氢氧化钠 溶液-乙醇（4:1）为空白，照分光光度法（附录Ⅳ A），在238nm的波长处分别测定吸收度，计算， 即得。
· 2HCl
二盐酸奎宁—易溶于水
HO H3CO H
N H
H CH=CH2 ,H2SO4,2H2O H3CO
2
H HO
H
N
H CH=CH2 ,H2SO4,2H2O
N
N
2
硫酸奎宁
硫酸奎尼丁
奎宁和奎尼丁的分子式相同，但立体结构不同， 因此旋光性、碱性、溶解度也不同。
N N N Cl N N
N
· 4H3PO4 · 4H2O
ChP和USP都采用此法测定硫酸奎宁的含量。
b.硫酸奎宁片 硫酸奎宁片剂碱化处理，生成奎宁游离 碱，然后再用高氯酸标准溶液直接滴定。
H ClO4-
+
ClO4-
H
+
2分子游离奎宁
H H ClO4+
ClO4-
1mol硫酸奎宁生成2mol奎宁 1mol奎宁消耗2mol高氯酸
1mol的硫酸奎宁消耗4mol的高氯酸